1.重組FSH制備物,其中制備物中的重組FSH具有的糖基化形式包含一種或多種以下特征:
(i)攜帶平分型N-乙酰葡萄糖胺(bisGlcNAc)的聚糖的相對(duì)量為至少20%;和/或
(ii)攜帶果糖的聚糖的相對(duì)量為至少30%;和/或
(iii)2,6-偶聯(lián)唾液酸的相對(duì)量為至少30%;和/或
(iv)其為多樣的糖基化形式。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的重組FSH制備物,其中糖基化形式包括特征(i)、(ii)和(iii)中至少兩項(xiàng),優(yōu)選地包括全部特征(i)、(ii)和(iii)。
3.重組FSH制備物,其可通過在人細(xì)胞系GT-5s或來源于其的細(xì)胞系或同源于其的細(xì)胞系中生產(chǎn)而獲得。
4.根據(jù)權(quán)利要求1-3中任何一項(xiàng)的重組FSH制備物,其包含一種或多種以下特征:
(a)糖基化形式包含攜帶一種或多種唾液酸殘基的聚糖的相對(duì)量為至少85%;
(b)糖基化形式包含至少四天線型聚糖的相對(duì)量為至少18%;
(c)Z數(shù)為至少200;
(d)其為人重組FSH;和/或
(e)其由人細(xì)胞系或人類細(xì)胞產(chǎn)生。
5.根據(jù)權(quán)利要求1-4中任何一項(xiàng)的重組FSH制備物,其中糖基化形式包含一種或多種以下特征:
(i)攜帶平分型N-乙酰葡萄糖胺(bisGlcNAc)的聚糖的相對(duì)量范圍為大約25%-大約50%;
(ii)至少四天線型聚糖的相對(duì)量為至少16%;
(iii)攜帶果糖的聚糖的相對(duì)量為至少35%;
(iv)2,6-偶聯(lián)唾液酸相對(duì)量為至少53%;
(v)攜帶一種或多種唾液酸殘基的聚糖的相對(duì)量為至少88%;
(vi)Z數(shù)為至少220;
(vii)攜帶半乳糖的聚糖的相對(duì)量為至少95%;
(viii)攜帶任選地由唾液酸殘基修飾的末端半乳糖單位的聚糖分支的相對(duì)量為至少60%;
(ix)攜帶硫酸基團(tuán)的聚糖的相對(duì)量為至少3%;
(x)其包含至少45種不同的聚糖結(jié)構(gòu),其中每種不同的聚糖結(jié)構(gòu)具有的相對(duì)量為制備物中FSH的聚糖結(jié)構(gòu)總量的至少0.05%;
(xi)其包含至少35種不同的聚糖結(jié)構(gòu),其中每種不同的聚糖結(jié)構(gòu)具有的相對(duì)量為制備物中FSH的聚糖結(jié)構(gòu)總量的至少0.1%;
(xiii)其包含至少20種不同的聚糖結(jié)構(gòu),其中每種不同的聚糖結(jié)構(gòu)具有的相對(duì)量為制備物中FSH的聚糖結(jié)構(gòu)總量的至少0.5%;和/或
(xiv)其包含相比于對(duì)應(yīng)制備物中獲自CHO細(xì)胞的FSH多出至少40%的不同聚糖結(jié)構(gòu),其中每種不同的聚糖結(jié)構(gòu)具有的相對(duì)量為相應(yīng)制備物中FSH的聚糖結(jié)構(gòu)總量的至少0.05%。
6.根據(jù)權(quán)利要求1-5中任何一項(xiàng)的重組FSH制備物,其中糖基化形式包含以下特征:
(i)攜帶平分型N-乙酰葡萄糖胺(bisGlcNAc)的聚糖的相對(duì)量范圍為大約25%-大約50%;
(ii)至少四天線型聚糖的相對(duì)量為至少16%;
(iii)攜帶果糖的聚糖的相對(duì)量為至少35%;
(iv)2,6-偶聯(lián)唾液酸的相對(duì)量范圍為大約53%-大約99%;且
(v)攜帶一種或多種唾液酸殘基的聚糖的相對(duì)量為至少88%。
7.根據(jù)權(quán)利要求1-6中任何一項(xiàng)的重組FSH制備物,其中制備物中的重組FSH具有根據(jù)表1中列出的任何一個(gè)實(shí)施方式的糖基化形式。
8.根據(jù)權(quán)利要求1-7中任何一項(xiàng)的重組FSH制備物,其中所述FSH能夠
(a)以不釋放顯著量的cAMP的濃度;及/或
(b)通過誘導(dǎo)不依賴于cAMP信號(hào)傳導(dǎo)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路
刺激粒層細(xì)胞中黃體酮的釋放。
9.根據(jù)權(quán)利要求1-8中任何一項(xiàng)的重組FSH制備物,其中所述FSH能夠通過不依賴cAMP信號(hào)傳導(dǎo)的生物學(xué)過程刺激或共刺激生殖細(xì)胞成熟。
10.根據(jù)權(quán)利要求1-9中任何一項(xiàng)的重組FSH制備物,其中FSH具有一種或多種以下可在粒層細(xì)胞測(cè)定中確定的特征:
(a)其能夠以低于誘導(dǎo)粒層細(xì)胞釋放cAMP所需的最小濃度的濃度刺激粒層細(xì)胞中黃體酮的釋放;
(b)其能夠以不誘導(dǎo)cAMP釋放或誘導(dǎo)cAMP的釋放低于10pmol/ml的FSH濃度刺激大約5*104-大約1*105粒層細(xì)胞/ml中釋放至少200ng/ml的黃體酮;
(c)其能夠以低于人尿液FSH或產(chǎn)生于CHO細(xì)胞中的重組FSH(Gonal F)所需濃度的濃度刺激大約5*104-大約1*105粒層細(xì)胞/ml中釋放至少100ng/ml的黃體酮;及/或
(d)其能夠以人尿液FSH或產(chǎn)生于CHO細(xì)胞中的重組FSH(Gonal F)不產(chǎn)生相應(yīng)的黃體酮釋放的濃度刺激大約5*104-大約1*105粒層細(xì)胞/ml中釋放至少100ng/ml的黃體酮。
11.根據(jù)權(quán)利要求1-9中任何一項(xiàng)的重組FSH制備物,其中FSH能夠在單次劑量施用后誘導(dǎo)雌性人類中的卵泡生長,其中所述單次劑量優(yōu)選地包含25-500IU FSH且優(yōu)選地是腸道外施用的,特別是通過皮下注射而施用。
12.藥用組合物,其包含根據(jù)權(quán)利要求1-11的重組FSH制備物。
13.根據(jù)權(quán)利要求1-11中任何一項(xiàng)的重組FSH制備物或根據(jù)權(quán)利要求12的藥用組合物用于不育癥治療。
14.根據(jù)權(quán)利要求13的重組FSH制備物或藥用組合物,其中要施用于患者的劑量使得患者循環(huán)系統(tǒng)中FSH濃度范圍為大約0.05-大約2IU/L,優(yōu)選地為大約0.1-大約1IU/L。
15.根據(jù)權(quán)利要求1-11中任何一項(xiàng)的重組FSH制備物或根據(jù)權(quán)利要求12的藥用組合物用于也不依賴cAMP而誘導(dǎo)和/或刺激性類固醇的分泌。
16.根據(jù)權(quán)利要求1-11中任何一項(xiàng)的重組FSH制備物或根據(jù)權(quán)利要求12的藥用組合物用于通過不依賴cAMP信號(hào)傳導(dǎo)的生物學(xué)過程刺激或共刺激生殖細(xì)胞成熟。
17.根據(jù)權(quán)利要求1-11的重組FSH制備物或根據(jù)權(quán)利要求12的藥用組合物用于以不誘導(dǎo)顯著cAMP釋放的FSH濃度誘導(dǎo)和/或刺激性類固醇的分泌。
18.根據(jù)權(quán)利要求13-16中任何一項(xiàng)的重組FSH制備物或藥用組合物用于不育癥治療,其中不育癥的治療包括輔助生殖技術(shù)、排卵誘導(dǎo)、體外受精例如通過胞漿內(nèi)單精子注射的體外受精、配子輸卵管內(nèi)轉(zhuǎn)移、宮腔內(nèi)人工受精,對(duì)女性無卵障礙的治療、對(duì)女性卵子成熟的嚴(yán)重激素缺陷障礙的治療、對(duì)男性精子產(chǎn)生缺陷的治療和/或?qū)ι臣?xì)胞成熟如卵泡發(fā)生或精子發(fā)生的實(shí)現(xiàn)或改進(jìn),尤其是例如在體外受精刺激操作流程中和/或進(jìn)行無卵障礙治療時(shí)實(shí)現(xiàn)或改進(jìn)女性卵泡成熟。
19.根據(jù)權(quán)利要求13-18中任何一項(xiàng)的重組FSH制備物或藥用組合物,其中重組FSH制備物或藥用組合物具有一種或多種以下特征:
(i)其能夠在僅施用單次劑量后誘導(dǎo)卵泡生長和/或卵子成熟;及/或
(ii)其在人、食蟹猴、大鼠和/或小鼠中的一種或多種中比獲自人尿液及/或表達(dá)于CHO細(xì)胞中的FSH制備物具有更低的循環(huán)半衰期;及/或
(iii)其在人、食蟹猴、大鼠和/或小鼠中的一種或多種中比獲自人尿液及/或表達(dá)于CHO細(xì)胞中的FSH制備物具有更低的生物利用率;及/或
(iv)其在人、食蟹猴、大鼠和/或小鼠中的一種或多種中具有的治療效力與獲自人尿液及/或表達(dá)于CHO細(xì)胞中的FSH制備物類似或比其更高。
20.根據(jù)權(quán)利要求1-11中任何一項(xiàng)的重組FSH制備物或根據(jù)權(quán)利要求12的藥用組合物用于誘導(dǎo)卵泡生長和/或卵子成熟的用途,及/或如權(quán)利要求13-19中任何一項(xiàng)限定的用途。