本發(fā)明屬于醫(yī)藥領(lǐng)域，具體而言，涉及一種提取物新橙皮苷二氫查爾酮，特別是一種從豆科棘豆屬植物中提取得到的新橙皮苷二氫查爾酮。

背景技術(shù)：

豆科(leguminosae)蝶形花亞科棘豆屬植物，多為草本、半灌木或矮灌木，全世界約300余種，主要分布在北半球溫帶、寒帶及其干旱和高山地區(qū)。在我國棘豆屬植物約有150余種，主要包括多葉棘豆（oxytropismyriophylla）、多枝棘豆（oxytropisramosissima）、砂珍棘豆（oxytropispsammocharis）、小花棘豆（oxytropisglabra）、鐮形棘豆（oxytropisfalcatabunge）、甘肅棘豆（oxytropiskansuensisbunge）等，大致分布在西北、華北、東北、西南等地。其味苦，性寒，有毒，具有清熱解毒，生肌愈瘡，澀脈止血、通便的功效，且其具有鎮(zhèn)痛抗炎、抗腫瘤、抑菌、抗病毒、清除自由基、殺蟲、祛痰平喘的藥理作用。臨床上主要用于治療疫癘，中毒病，黃水病，便秘，炭疽及瘡癤腫痛等。

新橙皮苷二氫查爾酮(neohesperidindihydrochalcone，nhdc)為一種黃酮苷，是從天然柑、橘等蕓香科植物中提取經(jīng)氧化而成的二氫查爾酮類衍生物，是迄今為止研究人員所發(fā)現(xiàn)的一種最佳藥用甜味劑和屏味劑，廣泛應(yīng)用于食品工業(yè)、醫(yī)藥工業(yè)以及飼料工業(yè)中。近年來研究表明，新橙皮苷二氫查爾酮具有抗氧化、降血糖、抗肝纖維化、抑制腫瘤細(xì)胞上皮間質(zhì)化、抑制胃酸分泌等多種藥理活性，且其無明顯的毒副作用，與其他甜味劑相比，其熱量較低，因此對人體血糖和血脂水平?jīng)]有不良影響，而且對治療糖尿病有一定的療效，可用于解決糖尿病人及肥胖型中老年人的用糖矛盾。新橙皮苷二氫查爾酮對于高溫和酸性、堿性條件都表現(xiàn)出很好的穩(wěn)定性，因此可用在貨架期長的食品中。這些優(yōu)異的性能特點使得新橙皮苷二氫查爾酮獲得包括美國、日本和比利時在內(nèi)的30多個國家的認(rèn)可，批準(zhǔn)其作為食品添加劑使用，我國衛(wèi)生部也早在1997年就將新橙皮苷二氫查爾酮列入“食品添加劑使用衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)”品種。

目前市場上銷售的nhdc大部分是通過天然提取的新橙皮苷氫化而制得，價格昂貴，售價在1600元/kg。統(tǒng)計數(shù)據(jù)顯示，新橙皮苷二氫查爾酮僅在歐洲飼料業(yè)的年需求量就達(dá)上百噸，廣州漢方公司的新橙皮苷二氫查爾酮產(chǎn)品銷量已達(dá)一年幾十噸。新橙皮苷二氫查爾酮甜度大，口感清爽，余味持久，副作用小，然而新橙皮苷二氫查爾酮的原藥材供不應(yīng)求，因此有必要尋找制備新橙皮苷二氫查爾酮的新原料。

目前對棘豆屬植物化學(xué)成分的研究，主要集中在小花棘豆等少數(shù)幾種植物上，對其他幾種民間多用的一些植物研究較少。且對多葉棘豆等棘豆屬植物的黃酮類成分的研究多集中于黃酮、黃酮醇成分及其藥理活性研究，但是其二氫查爾酮成分及其生物活性研究基本處于空白。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

本發(fā)明提供了一種以豆科棘豆屬植物為原料制備得到的新橙皮苷二氫查爾酮及其相關(guān)制備方法。

本發(fā)明還提供了一種產(chǎn)品，即含新橙皮苷二氫查爾酮的提取物，該提取物是以豆科棘豆屬植物為原料，尤其是以多葉棘豆（oxytropismyriophylla）、多枝棘豆（oxytropisramosissima）、砂珍棘豆（oxytropispsammocharis）、小花棘豆（oxytropisglabra）、鐮形棘豆（oxytropisfalcatabunge）、甘肅棘豆（oxytropiskansuensisbunge）為原料制備得到，并且新橙皮苷二氫查爾酮含量較高。

另外，本發(fā)明還提供了一種產(chǎn)品，即新橙皮苷二氫查爾酮，新橙皮苷二氫查爾酮是由棘豆屬植物如多葉棘豆，多枝棘豆，砂珍棘豆，小花棘豆，鐮形棘豆，甘肅棘豆植物通過溶劑提取、大孔樹脂純化或酸堿法純化、重結(jié)晶制備得到；

本發(fā)明還包括一種制備含新橙皮苷二氫查爾酮提取物的方法，步驟如下：

(1)將豆科棘豆屬植物，如多葉棘豆，多枝棘豆，砂珍棘豆，小花棘豆，鐮形棘豆，甘肅棘豆藥材，用溶劑提取，得提取液；

(2)將提取液濾過，減壓回收溶劑，得新橙皮苷二氫查爾酮粗提物浸膏。

其中，第(1)步所述溶劑可以是乙醇、甲醇、水，乙醇或甲醇的濃度為50~90%，優(yōu)選濃度為60~80%，可采用回流、超聲、浸漬、滲漉、煎煮、微波提取、酶輔助提取、超臨界流體萃取、半仿生提取、雙水相萃取技術(shù)、高速逆流色譜提取等方法提取。其中，回流、超聲、浸漬、煎煮法提取溶劑用量是藥材質(zhì)量的10~30倍，提取2~4次，優(yōu)選3次，每次0.5~1.5小時，優(yōu)選0.5~1小時；

其中，新橙皮苷二氫查爾酮粗提物浸膏中新橙皮苷二氫查爾酮含量在3%以上，優(yōu)選5~20%，更進(jìn)一步優(yōu)選10~15%，更進(jìn)一步優(yōu)選為15~20%。

本發(fā)明從棘豆屬植物中提取純化新橙皮苷二氫查爾酮的方法包括以下步驟：

(1)將豆科棘豆屬植物，如多葉棘豆，多枝棘豆，砂珍棘豆，小花棘豆，鐮形棘豆，甘肅棘豆藥材，用溶劑提取，得提取液；

其中，第(1)步所述溶劑可以是乙醇、甲醇、水，乙醇或甲醇的濃度為50~90%，優(yōu)選濃度為60~80%，可采用回流、超聲、浸漬、滲漉、煎煮、微波提取、酶輔助提取、超臨界流體萃取、半仿生提取、雙水相萃取技術(shù)、高速逆流色譜提取等方法提取。其中，回流、超聲、浸漬、煎煮法提取溶劑用量是藥材質(zhì)量的10~30倍，提取2~4次，優(yōu)選3次，每次0.5~1.5小時，優(yōu)選0.5~1小時；

(2)將提取液濾過，減壓回收溶劑，得新橙皮苷二氫查爾酮粗提物浸膏；

(3)取步驟(2)的浸膏用水溶解、過濾，得備用液；

(4)取步驟(3)的備用液，通過大孔吸附樹脂柱，用低濃度乙醇或甲醇洗滌后，棄洗脫液，再使用一定濃度的乙醇或甲醇進(jìn)行洗脫，收集洗脫液，濃縮，得新橙皮苷二氫查爾酮提取物a；

其中，洗滌步驟中低濃度乙醇或甲醇的含量為10~30％，優(yōu)選20~25%，洗脫速度為1~3bv/hr；洗脫步驟中所述乙醇或甲醇的含量為35~65%，優(yōu)選40~50%；流速為：0.5~3.5bv/hr，優(yōu)選0.5~1.5bv/hr。所述的大孔樹脂為d101、d101b、d138、d140、d152、d201、d280、d301、ab-8、hpd-100、hpd-200a、hpd-300、hpd-400、hpd-417、hpd-500、hpd-700、hpd-722、hpd-826、x-5、h103、dm130、lsa-8、lsa-10、xda-8、da-201、nka-9或s-8大孔樹脂中任意一種，并且大孔樹脂的用量與浸膏的重量比為20~30:1；

(5)或取步驟(3)的備用液，加入氫氧化鈉溶液，將ph調(diào)節(jié)至堿性，過濾，取濾液，向濾液中加入硫酸溶液，調(diào)節(jié)ph至酸性，室溫下靜置后離心，收集沉淀，真空干燥，得浸膏，將浸膏用乙醇或甲醇溶解，得新橙皮苷二氫查爾酮提取物b；

其中，所述的堿性ph為7~10，優(yōu)選8~9，酸性ph為2~5，優(yōu)選2~3；

(6)用高效液相色譜法對步驟(4)洗脫液或步驟(5)浸膏溶解液中新橙皮苷二氫查爾酮的富集率和純度進(jìn)行檢測；

其中，步驟(4)與步驟(5)可任選其一進(jìn)行，由第(4)步所得到的新橙皮苷二氫查爾酮提取物a或第(5)步所得到的新橙皮苷二氫查爾酮提取物b中，新橙皮苷二氫查爾酮含量為40%以上，優(yōu)選為45~70%，更進(jìn)一步優(yōu)選為55~60%。

本發(fā)明從棘豆屬植物中提取精制新橙皮苷二氫查爾酮的方法包括以下步驟：

(1)將豆科棘豆屬植物，如多葉棘豆，多枝棘豆，砂珍棘豆，小花棘豆，鐮形棘豆，甘肅棘豆藥材，用溶劑提取，得提取液；

其中，第(1)步所述溶劑可以是乙醇、甲醇、水，乙醇或甲醇的濃度為50~90%，優(yōu)選濃度為60~80%，可采用回流、超聲、浸漬、滲漉、煎煮、微波提取、酶輔助提取、超臨界流體萃取、半仿生提取、雙水相萃取技術(shù)、高速逆流色譜提取等方法提取。其中，回流、超聲、浸漬、煎煮法提取溶劑用量是藥材質(zhì)量的10~30倍，提取2~4次，優(yōu)選3次，每次0.5~1.5小時，優(yōu)選0.5~1小時；

(2)將提取液濾過，減壓回收溶劑，得新橙皮苷二氫查爾酮粗提物浸膏；

(3)取步驟(2)的浸膏用水溶解、過濾，得備用液；

(4)取步驟(3)的備用液，通過大孔吸附樹脂柱，用低濃度乙醇或甲醇洗滌后，棄洗脫液，再使用一定濃度的乙醇或甲醇進(jìn)行洗脫，收集洗脫液，濃縮，得新橙皮苷二氫查爾酮提取物a；

其中，洗滌步驟中低濃度乙醇或甲醇的含量為10~30％，優(yōu)選20~25%，洗脫速度為1~3bv/hr；洗脫步驟中所述乙醇或甲醇的含量為35~65%，優(yōu)選40~50%；流速為：0.5~3.5bv/hr，優(yōu)選0.5~1.5bv/hr。所述的大孔樹脂為d101、d101b、d138、d140、d152、d201、d280、d301、ab-8、hpd-100、hpd-200a、hpd-300、hpd-400、hpd-417、hpd-500、hpd-700、hpd-722、hpd-826、x-5、h103、dm130、lsa-8、lsa-10、xda-8、da-201、nka-9或s-8大孔樹脂中任意一種。并且大孔樹脂的用量與浸膏的重量比為20~30:1；

(5)或取步驟(3)的備用液，加入氫氧化鈉溶液，將ph調(diào)節(jié)至堿性，過濾，取濾液，向濾液中加入硫酸溶液，調(diào)節(jié)ph至酸性，室溫下靜置后離心，收集沉淀，真空干燥，得浸膏，將浸膏用乙醇或甲醇溶解，得新橙皮苷二氫查爾酮提取物b；

其中，所述的堿性ph為7~10，優(yōu)選8~9，酸性ph為2~5，優(yōu)選2~3；

(6)用高效液相色譜法對步驟(4)洗脫液或步驟(5)浸膏溶解液中新橙皮苷二氫查爾酮的富集率和純度進(jìn)行檢測；

(7)將上述第(4)步得到的新橙皮苷二氫查爾酮提取物a或第(5)步得到的新橙皮苷二氫查爾酮提取物b中加入適當(dāng)溶劑進(jìn)行反復(fù)重結(jié)晶，得到純度大于85%，優(yōu)選純度大于90%的新橙皮苷二氫查爾酮；

其中，所述的溶劑為水、甲醇、乙醇、異丙醇、乙腈、二甲基亞砜、二甲基甲酰胺、丙酮、乙酸乙酯、氯仿、冰醋酸、乙醚、苯、四氯化碳、環(huán)己烷、石油醚等，優(yōu)選丙酮；

其中，用5~10倍量的丙酮進(jìn)行重結(jié)晶4~6次，即得純度高于90%的新橙皮苷二氫查爾酮。

本發(fā)明所述多葉棘豆(oxytropismyriophylla)可取自不同地方，例如可以是取自東北、西北及內(nèi)蒙古等地，且可在夏、秋采挖。

本發(fā)明所述提取物的提取方法，可以采用不同溶劑（乙醇、甲醇、水）用不同的提取方法（回流、超聲、浸漬、滲漉、煎煮、微波提取、酶輔助提取、超臨界流體萃取、半仿生提取、雙水相萃取技術(shù)、高速逆流色譜提取等）提取，經(jīng)處理得到一含新橙皮苷二氫查爾酮的粗提物，然后可采用大孔樹脂分離純化或酸堿法純化和重結(jié)晶處理等方法進(jìn)一步純化得到一純度較高的新橙皮苷二氫查爾酮。

棘豆屬植物成分復(fù)雜，除黃酮類成分，還含有生物堿、三萜皂苷、木脂素、有機脂肪酸、氨基酸等成分，其中黃酮類成分還包括黃酮、黃酮醇、異黃酮、二氫黃酮、查耳酮、二氫查耳酮等，其分子結(jié)構(gòu)與極性都非常相近。由于棘豆屬植物成分的復(fù)雜性及同類成分結(jié)構(gòu)的相似性，使得棘豆屬植物中新橙皮苷二氫查爾酮提取較困難，很難用常規(guī)的手段將其分離，提取物中新橙皮苷二氫查爾酮含量增加不易。因此，本發(fā)明采用不同的提取及純化方法并對提取及純化條件進(jìn)行優(yōu)化，且采用重結(jié)晶法對含新橙皮苷二氫查爾酮提取物進(jìn)行純化精制，通過丙酮、乙醇、甲醇等溶劑重結(jié)晶的方法可得到較多高純度的新橙皮苷二氫查爾酮，其純度可達(dá)到90%以上。

本發(fā)明的優(yōu)點：豆科棘豆屬植物，特別是多葉棘豆、多枝棘豆、砂珍棘豆三種植物中均含有新橙皮苷二氫查爾酮，但棘豆屬植物中的黃酮類成分的開發(fā)多集中于黃酮、黃酮醇成分，而很少涉及其二氫查爾酮成分的研究與開發(fā)，其開發(fā)利用程度低，造成資源浪費。因此本發(fā)明首次將棘豆屬植物用作提取新橙皮苷二氫查爾酮的原料，不僅提供了一種新橙皮苷二氫查爾酮的藥材來源，而且還可以充分利用棘豆屬植物資源，提高其綜合利用度。

新橙皮苷二氫查爾酮作為一種重要的甜味劑和屏味劑，目前新橙皮苷二氫查爾酮的臨床應(yīng)用和生產(chǎn)制備缺乏。本申請人通過長期研究發(fā)現(xiàn)豆科棘豆屬植物，特別是多葉棘豆（oxytropismyriophylla）、多枝棘豆（oxytropisramosissima）、砂珍棘豆（oxytropispsammocharis）植物中含有新橙皮苷二氫查爾酮，并通過高效液相色譜法(hplc)測定了該植物中新橙皮苷二氫查爾酮的含量。通過與新橙皮苷二氫查爾酮的指紋圖譜比較發(fā)現(xiàn)，其相似度非常高。

附圖說明

圖1為多葉棘豆提取物的制備流程圖。

圖2為新橙皮苷二氫查爾酮標(biāo)準(zhǔn)品的hplc圖譜。

圖3為多葉棘豆的hplc圖譜。

具體實施方式

以下由本發(fā)明的優(yōu)選實施例，進(jìn)一步闡述本發(fā)明為達(dá)成預(yù)定發(fā)明目的所采取的技術(shù)手段。

實施例1：多葉棘豆中新橙皮苷二氫查爾酮的制備

取多葉棘豆藥材1.0kg，用20倍量的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為70%的乙醇超聲提取3次，每次1小時。將上一步的提取液濾過，減壓至0.07mpa，回收乙醇，得到浸膏187g。浸膏中新橙皮苷二氫查爾酮含量在4.3%。取浸膏20g用水溶解配制成重量分?jǐn)?shù)為15%的溶液、過濾，得上柱液；此上柱液通過ab-8大孔吸附樹脂(400g)柱，2bv20%的乙醇洗滌后，棄洗脫液；用50%的乙醇，以1bv/hr的流速洗脫，收集洗脫液；用高效液相對洗脫液中新橙皮苷二氫查爾酮的富集率和純度進(jìn)行檢測；富集后新橙皮苷二氫查爾酮含量為52.7%。在上述新橙皮苷二氫查爾酮的粗提物中加入10倍量的丙酮進(jìn)行反復(fù)重結(jié)晶5次，得到純度為92.1%的新橙皮苷二氫查爾酮。

實施例2：多葉棘豆中新橙皮苷二氫查爾酮的制備

取多葉棘豆藥材1.0kg，用10倍量的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為60%的乙醇溫浸提取3次，每次1小時。將上一步的提取液濾過，減壓至0.08mpa，回收乙醇，得到浸膏約172g。浸膏中新橙皮苷二氫查爾酮含量在4.1%。取浸膏用水溶解，加入氫氧化鈉溶液，將ph調(diào)節(jié)至8。過濾，取濾液，向濾液中加入硫酸溶液，調(diào)節(jié)ph至3，室溫下靜置后離心，收集沉淀，真空干燥，得浸膏119g。將浸膏用60%的乙醇溶解后，用高效液相色譜法對溶解液中新橙皮苷二氫查爾酮的富集率和純度進(jìn)行檢測；富集后新橙皮苷二氫查爾酮為51.5%，在上述新橙皮苷二氫查爾酮的粗提物中加入10倍量的乙醇進(jìn)行反復(fù)重結(jié)晶5次，得到純度為91.9%的新橙皮苷二氫查爾酮。

實施例3：多葉棘豆中新橙皮苷二氫查爾酮的制備

取多葉棘豆藥材1.0kg，用20倍量的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為80%的甲醇回流提取3次，每次1.5小時。將上一步的提取液濾過，減壓至0.09mpa，回收甲醇，得到浸膏約181g。浸膏中新橙皮苷二氫查爾酮含量在3.9%。取浸膏20g用水溶解配制成重量分?jǐn)?shù)為15%的溶液、過濾，得上柱液；此上柱液通過hpd-722大孔吸附樹脂(600g)柱，2bv25%的甲醇洗滌后，棄洗脫液；用40%的甲醇，以1bv/hr的流速洗脫，收集洗脫液；用高效液相對洗脫液中新橙皮苷二氫查爾酮的富集率和純度進(jìn)行檢測；富集后新橙皮苷二氫查爾酮含量為50.2%，在上述新橙皮苷二氫查爾酮的粗提物中加入10倍量的甲醇進(jìn)行反復(fù)重結(jié)晶4次，得到純度大于90.8%的新橙皮苷二氫查爾酮。

實施例4：多葉棘豆中新橙皮苷二氫查爾酮的制備

取多葉棘豆藥材1.0kg，用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為70%的乙醇滲漉提取。將上一步的提取液濾過，減壓至0.08mpa，回收乙醇，得到浸膏180g。浸膏中新橙皮苷二氫查爾酮含量在4.1%。取浸膏用水溶解，加入氫氧化鈉溶液，將ph調(diào)節(jié)至8.5。過濾，取濾液，向濾液中加入硫酸溶液，調(diào)節(jié)ph至2.5，室溫下靜置后離心，收集沉淀，真空干燥，得浸膏128g。將浸膏用70%的乙醇溶解后，用高效液相對溶解液中新橙皮苷二氫查爾酮的富集率和純度進(jìn)行檢測；富集后新橙皮苷二氫查爾酮含量為51.7%。在上述新橙皮苷二氫查爾酮的粗提物中加入10倍量的氯仿進(jìn)行反復(fù)重結(jié)晶5次，得到純度為89.3%的新橙皮苷二氫查爾酮。

實施例5：多葉棘豆中新橙皮苷二氫查爾酮的制備

取多葉棘豆藥材1.0kg，用20倍量的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為80%的乙醇超聲提取3次，每次1小時。將上一步的提取液濾過，減壓至0.07mpa，回收乙醇，得到浸膏182g。浸膏中新橙皮苷二氫查爾酮含量在4.3%。取浸膏20g用水溶解配制成重量分?jǐn)?shù)為15%的溶液、過濾，得上柱液；此上柱液通過d138大孔吸附樹脂(400g)柱，2bv10%的乙醇洗滌后，棄洗脫液；用55%的乙醇，以2bv/hr的流速洗脫，收集洗脫液；用高效液相對洗脫液中新橙皮苷二氫查爾酮的富集率和純度進(jìn)行檢測；富集后新橙皮苷二氫查爾酮含量為53.1%。在上述新橙皮苷二氫查爾酮的粗提物中加入10倍量的乙醚進(jìn)行反復(fù)重結(jié)晶5次，得到純度為91.1%的新橙皮苷二氫查爾酮。

實施例6：多葉棘豆中新橙皮苷二氫查爾酮的制備

取多葉棘豆藥材1.0kg，采用酶輔助提取法，以80%乙醇為提取液，用纖維素酶在50℃條件下處理1.5小時后升溫至90℃，回流提取3次，每次2小時。將上一步的提取液濾過，減壓至0.08mpa，回收乙醇，得到浸膏187g。浸膏中新橙皮苷二氫查爾酮含量在4.8%。取浸膏20g用水溶解配制成重量分?jǐn)?shù)為15%的溶液、過濾，得上柱液；此上柱液通過d152大孔吸附樹脂(400g)柱，2bv25%的乙醇洗滌后，棄洗脫液；用60%的乙醇，以1.5bv/hr的流速洗脫，收集洗脫液；用高效液相對洗脫液中新橙皮苷二氫查爾酮的富集率和純度進(jìn)行檢測；富集后新橙皮苷二氫查爾酮含量為53.7%。在上述新橙皮苷二氫查爾酮的粗提物中加入10倍量的乙腈進(jìn)行反復(fù)重結(jié)晶5次，得到純度為88.6%的新橙皮苷二氫查爾酮。

實施例7：多枝棘豆中新橙皮苷二氫查爾酮的制備

首先，取多枝棘豆藥材1.0kg，用20倍量的水煎煮提取3次，每次1.5小時。將上一步的提取液濾過，濃縮，得到浸膏約175g。浸膏中新橙皮苷二氫查爾酮含量在4.1%。取浸膏20g用水溶解配制成重量分?jǐn)?shù)為15%的溶液、過濾，得上柱液；此上柱液通過d101大孔吸附樹脂(400g)柱，2bv25%的乙醇洗滌后，棄洗脫液；用50%的乙醇，以1bv/hr的流速洗脫，收集洗脫液；用高效液相對洗脫液中新橙皮苷二氫查爾酮的富集率和純度進(jìn)行檢測；富集后新橙皮苷二氫查爾酮的含量為47.8%，在上述新橙皮苷二氫查爾酮的粗提物中加入10倍量的環(huán)己烷進(jìn)行反復(fù)重結(jié)晶5次，得到純度為86.7%的新橙皮苷二氫查爾酮。

實施例8：多枝棘豆中新橙皮苷二氫查爾酮的制備

首先，取多枝棘豆藥材1.0kg，采用超臨界流體萃取法，以30倍量的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為85%的乙醇為夾帶劑，在萃取溫度50℃條件下萃取2小時。將上一步的提取液濾過，減壓至0.07mpa，回收乙醇，得到浸膏約179g。浸膏中新橙皮苷二氫查爾酮含量在3.8%。取浸膏用水溶解，加入氫氧化鈉溶液，將ph調(diào)節(jié)至8.5。過濾，取濾液，向濾液中加入硫酸溶液，調(diào)節(jié)ph至3，室溫下靜置后離心，收集沉淀，真空干燥，得浸膏116g。將浸膏用85%的乙醇溶解后，用高效液相色譜法對溶解液中新橙皮苷二氫查爾酮的富集率和純度進(jìn)行檢測；富集后新橙皮苷二氫查爾酮的含量為51.9%，在上述新橙皮苷二氫查爾酮的粗提物中加入10倍量的丙酮進(jìn)行反復(fù)重結(jié)晶4次，得到純度為93.4%的新橙皮苷二氫查爾酮。

實施例9：多枝棘豆中新橙皮苷二氫查爾酮的制備

取多枝棘豆藥材1.0kg，用20倍量的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為60%的乙醇微波輔助提取30min。將上一步的提取液濾過，減壓至0.09mpa，回收乙醇，得到浸膏約173g。浸膏中新橙皮苷二氫查爾酮含量在4.5%。取浸膏20g用水溶解配制成重量分?jǐn)?shù)為15%的溶液、過濾，得上柱液；此上柱液通過hpd-700大孔吸附樹脂(600g)柱，2bv20%的乙醇洗滌后，棄洗脫液；用50%的乙醇，以1bv/hr的流速洗脫，收集洗脫液；用高效液相對洗脫液中新橙皮苷二氫查爾酮的富集率和純度進(jìn)行檢測；富集后新橙皮苷二氫查爾酮的含量為52.5%，在上述新橙皮苷二氫查爾酮的粗提物中加入10倍量的甲醇進(jìn)行反復(fù)重結(jié)晶5次，得到純度為90.3%的新橙皮苷二氫查爾酮。

實施例10：多枝棘豆中新橙皮苷二氫查爾酮的制備

首先，取多枝棘豆藥材1.0kg，用20倍量的水煎煮提取3次，每次1小時。將上一步的提取液濾過，濃縮，得到浸膏約179g。浸膏中新橙皮苷二氫查爾酮含量在4.6%。取浸膏用水溶解，加入氫氧化鈉溶液，將ph調(diào)節(jié)至8.5。過濾，取濾液，向濾液中加入硫酸溶液，調(diào)節(jié)ph至2，室溫下靜置后離心，收集沉淀，真空干燥，得浸膏128g。將浸膏用70%的乙醇溶解后，用高效液相對溶解液中新橙皮苷二氫查爾酮的富集率和純度進(jìn)行檢測；富集后新橙皮苷二氫查爾酮的含量為50.8%，在上述新橙皮苷二氫查爾酮的粗提物中加入10倍量的冰醋酸進(jìn)行反復(fù)重結(jié)晶5次，得到純度為88.9%的新橙皮苷二氫查爾酮。

實施例11：多枝棘豆中新橙皮苷二氫查爾酮的制備

首先，取多枝棘豆藥材1.0kg，采用半仿生提取法，調(diào)節(jié)ph至人體胃、小腸、大腸的體液酸度最佳ph2.0、7.5、8.3，用20倍量的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為80%的乙醇回流提取3次，每次1小時。將上一步的提取液濾過，減壓至0.07mpa，回收乙醇，得到浸膏約177g。浸膏中新橙皮苷二氫查爾酮含量在4.1%。取浸膏20g用水溶解配制成重量分?jǐn)?shù)為15%的溶液、過濾，得上柱液；此上柱液通過lsa-8大孔吸附樹脂(400g)柱，2bv15%的乙醇洗滌后，棄洗脫液；用55%的乙醇，以2.5bv/hr的流速洗脫，收集洗脫液；用高效液相對洗脫液中新橙皮苷二氫查爾酮的富集率和純度進(jìn)行檢測；富集后新橙皮苷二氫查爾酮的含量為46.6%，在上述新橙皮苷二氫查爾酮的粗提物中加入10倍量的苯進(jìn)行反復(fù)重結(jié)晶5次，得到純度為87.2%的新橙皮苷二氫查爾酮。

實施例12：多枝棘豆中新橙皮苷二氫查爾酮的制備

首先，取多枝棘豆藥材1.0kg，用20倍量的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為70%的乙醇超聲提取3次，每次30min。將上一步的提取液濾過，減壓至0.07mpa，回收乙醇，得到浸膏約170g。浸膏中新橙皮苷二氫查爾酮含量在4.1%。取浸膏20g用水溶解配制成重量分?jǐn)?shù)為15%的溶液、過濾，得上柱液；此上柱液通過s-8大孔吸附樹脂(400g)柱，2bv20%的乙醇洗滌后，棄洗脫液；用60%的乙醇，以1bv/hr的流速洗脫，收集洗脫液；用高效液相對洗脫液中新橙皮苷二氫查爾酮的富集率和純度進(jìn)行檢測；富集后新橙皮苷二氫查爾酮的含量為53.8%，在上述新橙皮苷二氫查爾酮的粗提物中加入10倍量的乙醇進(jìn)行反復(fù)重結(jié)晶5次，得到純度為91.4%的新橙皮苷二氫查爾酮。

實施例13：砂珍棘豆中新橙皮苷二氫查爾酮的制備

取砂珍棘豆藥材1.0kg，用20倍量的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為70%的乙醇回流提取3次，每次1小時。將上一步的提取液濾過，減壓至0.07mpa，回收乙醇，得到浸膏約187g。浸膏中新橙皮苷二氫查爾酮含量在4.3%。取浸膏用水溶解，加入氫氧化鈉溶液，將ph調(diào)節(jié)至8。過濾，取濾液，向濾液中加入硫酸溶液，調(diào)節(jié)ph至2.5，室溫下靜置后離心，收集沉淀，真空干燥，得浸膏120g。將浸膏用70%的乙醇溶解后，用高效液相對溶解液中新橙皮苷二氫查爾酮的富集率和純度進(jìn)行檢測；富集后新橙皮苷二氫查爾酮的含量為51.8%，在上述新橙皮苷二氫查爾酮的粗提物中加入10倍量的二甲基亞砜進(jìn)行反復(fù)重結(jié)晶4次，得到純度為93.3%的新橙皮苷二氫查爾酮。

實施例14：砂珍棘豆中新橙皮苷二氫查爾酮的制備

取砂珍棘豆藥材1.0kg，用30倍量的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為60%的甲醇溫浸提取3次，每次1.5小時。將上一步的提取液濾過，減壓至0.08mpa，回收甲醇，得到浸膏約182g。浸膏中新橙皮苷二氫查爾酮含量在3.9%。取浸膏20g用水溶解配制成重量分?jǐn)?shù)為20%的溶液、過濾，得上柱液；此上柱液通過hpd-400大孔吸附樹脂(600g)柱，3bv25%的甲醇洗滌后，棄洗脫液；用50%的甲醇，以1.5bv/hr的流速洗脫，收集洗脫液；用高效液相對洗脫液中新橙皮苷二氫查爾酮的富集率和純度進(jìn)行檢測；富集后新橙皮苷二氫查爾酮的含量為53.4%，在上述新橙皮苷二氫查爾酮的粗提物中加入10倍量的異丙醇進(jìn)行反復(fù)重結(jié)晶5次，得到純度為91.5%的新橙皮苷二氫查爾酮。

實施例15：砂珍棘豆中新橙皮苷二氫查爾酮的制備

取砂珍棘豆藥材1.0kg，用30倍量的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為70%的乙醇微波輔助提取3次，每次1小時。將上一步的提取液濾過，減壓至0.09mpa，回收乙醇，得到浸膏約173g。浸膏中新橙皮苷二氫查爾酮含量在4.2%。取浸膏用水溶解，加入氫氧化鈉溶液，將ph調(diào)節(jié)至8.5。過濾，取濾液，向濾液中加入硫酸溶液，調(diào)節(jié)ph至2，室溫下靜置后離心，收集沉淀，真空干燥，得浸膏124g。將浸膏用70%的乙醇溶解后，用高效液相對溶解液中新橙皮苷二氫查爾酮的富集率和純度進(jìn)行檢測；富集后新橙皮苷二氫查爾酮的含量為50.9%，在上述新橙皮苷二氫查爾酮的粗提物中加入10倍量的丙酮進(jìn)行反復(fù)重結(jié)晶5次，得到純度為92.0%的新橙皮苷二氫查爾酮。

實施例16：砂珍棘豆中新橙皮苷二氫查爾酮的制備

取砂珍棘豆藥材1.0kg，采用超臨界流體萃取法，以30倍量的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為90%的乙醇為夾帶劑，在萃取溫度50℃條件下萃取2.5小時。將上一步的提取液濾過，減壓至0.07mpa，回收乙醇，得到浸膏約187g。取浸膏20g用水溶解配制成重量分?jǐn)?shù)為15%的溶液、過濾，得上柱液；此上柱液通過d201大孔吸附樹脂(600g)柱，3bv20%的乙醇洗滌后，棄洗脫液；用45%的乙醇，以2bv/hr的流速洗脫，收集洗脫液；用高效液相對洗脫液中新橙皮苷二氫查爾酮的富集率和純度進(jìn)行檢測；富集后新橙皮苷二氫查爾酮的含量為49.8%，在上述新橙皮苷二氫查爾酮的粗提物中加入10倍量的氯仿進(jìn)行反復(fù)重結(jié)晶4次，得到純度為89.3%的新橙皮苷二氫查爾酮。

實施例17：砂珍棘豆中新橙皮苷二氫查爾酮的制備

取砂珍棘豆藥材1.0kg，用20倍量的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為70%的乙醇回流提取2次，每次1小時。將上一步的提取液濾過，減壓至0.07mpa，回收乙醇，得到浸膏約181g。取浸膏20g用水溶解配制成重量分?jǐn)?shù)為15%的溶液、過濾，得上柱液；此上柱液通過hpd-100大孔吸附樹脂(600g)柱，3bv15%的乙醇洗滌后，棄洗脫液；用45%的乙醇，以1bv/hr的流速洗脫，收集洗脫液；用高效液相對洗脫液中新橙皮苷二氫查爾酮的富集率和純度進(jìn)行檢測；富集后新橙皮苷二氫查爾酮的含量為51.4%，在上述新橙皮苷二氫查爾酮的粗提物中加入9倍量的乙醇進(jìn)行反復(fù)重結(jié)晶4次，得到純度為91.7%的新橙皮苷二氫查爾酮。

實施例18：砂珍棘豆中新橙皮苷二氫查爾酮的制備

取砂珍棘豆藥材1.0kg，用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為80%的乙醇滲漉提取。將上一步的提取液濾過，減壓至0.07mpa，回收乙醇，得到浸膏約189g。浸膏中新橙皮苷二氫查爾酮含量在4.4%。取浸膏用水溶解，加入氫氧化鈉溶液，將ph調(diào)節(jié)至8.5。過濾，取濾液，向濾液中加入硫酸溶液，調(diào)節(jié)ph至2.5，室溫下靜置后離心，收集沉淀，真空干燥，得浸膏120g。將浸膏用80%的乙醇溶解后，用高效液相對溶解液中新橙皮苷二氫查爾酮的富集率和純度進(jìn)行檢測；富集后新橙皮苷二氫查爾酮的含量為50.8%，在上述新橙皮苷二氫查爾酮的粗提物中加入8倍量的甲醇進(jìn)行反復(fù)重結(jié)晶4次，得到純度為93.7%的新橙皮苷二氫查爾酮。

實施例19：小花棘豆中新橙皮苷二氫查爾酮的制備

取小花棘豆藥材1.0kg，用20倍量的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為80%的甲醇回流提取3次，每次1小時。將上一步的提取液濾過，減壓至0.08mpa，回收甲醇，得到浸膏約185g。浸膏中新橙皮苷二氫查爾酮含量在3.3%。取浸膏20g用水溶解配制成重量分?jǐn)?shù)為15%的溶液、過濾，得上柱液；此上柱液通過nka-9大孔吸附樹脂(600g)柱，2bv20%的甲醇洗滌后，棄洗脫液；用40%的甲醇，以1bv/hr的流速洗脫，收集洗脫液；用高效液相對洗脫液中新橙皮苷二氫查爾酮的富集率和純度進(jìn)行檢測；富集后新橙皮苷二氫查爾酮含量為51.2%，在上述新橙皮苷二氫查爾酮的粗提物中加入10倍量的丙酮進(jìn)行反復(fù)重結(jié)晶5次，得到純度大于90.3%的新橙皮苷二氫查爾酮。

實施例20：小花棘豆中新橙皮苷二氫查爾酮的制備

首先，取小花棘豆藥材1.0kg，采用半仿生提取法，調(diào)節(jié)ph至人體胃、小腸、大腸的體液酸度最佳ph2.0、7.5、8.3，用15倍量的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為85%的乙醇回流提取3次，每次1小時。將上一步的提取液濾過，減壓至0.07mpa，回收乙醇，得到浸膏約173g。浸膏中新橙皮苷二氫查爾酮含量在4.1%。取浸膏20g用水溶解配制成重量分?jǐn)?shù)為15%的溶液、過濾，得上柱液；此上柱液通過hpd-400大孔吸附樹脂(400g)柱，2bv25%的乙醇洗滌后，棄洗脫液；用55%的乙醇，以1bv/hr的流速洗脫，收集洗脫液；用高效液相對洗脫液中新橙皮苷二氫查爾酮的富集率和純度進(jìn)行檢測；富集后新橙皮苷二氫查爾酮的含量為48.6%，在上述新橙皮苷二氫查爾酮的粗提物中加入10倍量的石油醚進(jìn)行反復(fù)重結(jié)晶3次，得到純度為87.4%的新橙皮苷二氫查爾酮。

實施例21：小花棘豆中新橙皮苷二氫查爾酮的制備

首先，取小花棘豆藥材1.0kg，用30倍量的水煎煮提取3次，每次1小時。將上一步的提取液濾過，濃縮，得到浸膏約180g。浸膏中新橙皮苷二氫查爾酮含量在4.4%。取浸膏用水溶解，加入氫氧化鈉溶液，將ph調(diào)節(jié)至9。過濾，取濾液，向濾液中加入硫酸溶液，調(diào)節(jié)ph至2，室溫下靜置后離心，收集沉淀，真空干燥，得浸膏113g。將浸膏用60%的乙醇溶解后，用高效液相對溶解液中新橙皮苷二氫查爾酮的富集率和純度進(jìn)行檢測；富集后新橙皮苷二氫查爾酮的含量為50.3%，在上述新橙皮苷二氫查爾酮的粗提物中加入8倍量的甲醇進(jìn)行反復(fù)重結(jié)晶5次，得到純度為91.9%的新橙皮苷二氫查爾酮。

實施例22：小花棘豆中新橙皮苷二氫查爾酮的制備

首先，取小花棘豆藥材1.0kg，采用超臨界流體萃取法，以20倍量的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為80%的乙醇為夾帶劑，在萃取溫度50℃條件下萃取2小時。將上一步的提取液濾過，減壓至0.07mpa，回收乙醇，得到浸膏約171g。浸膏中新橙皮苷二氫查爾酮含量在4.8%。取浸膏用水溶解，加入氫氧化鈉溶液，將ph調(diào)節(jié)至8.5。過濾，取濾液，向濾液中加入硫酸溶液，調(diào)節(jié)ph至2，室溫下靜置后離心，收集沉淀，真空干燥，得浸膏106g。將浸膏用80%的乙醇溶解后，用高效液相色譜法對溶解液中新橙皮苷二氫查爾酮的富集率和純度進(jìn)行檢測；富集后新橙皮苷二氫查爾酮的含量為47.9%，在上述新橙皮苷二氫查爾酮的粗提物中加入10倍量的乙醚進(jìn)行反復(fù)重結(jié)晶4次，得到純度為90.7%的新橙皮苷二氫查爾酮。

實施例23：小花棘豆中新橙皮苷二氫查爾酮的制備

首先，取小花棘豆藥材1.0kg，用30倍量的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為80%的乙醇超聲提取3次，每次1.5小時。將上一步的提取液濾過，減壓至0.09mpa，回收乙醇，得到浸膏約182g。浸膏中新橙皮苷二氫查爾酮含量在4.0%。取浸膏20g用水溶解配制成重量分?jǐn)?shù)為15%的溶液、過濾，得上柱液；此上柱液通過h103大孔吸附樹脂(400g)柱，2bv25%的乙醇洗滌后，棄洗脫液；用50%的乙醇，以1.5bv/hr的流速洗脫，收集洗脫液；用高效液相對洗脫液中新橙皮苷二氫查爾酮的富集率和純度進(jìn)行檢測；富集后新橙皮苷二氫查爾酮的含量為49.3%，在上述新橙皮苷二氫查爾酮的粗提物中加入10倍量的氯仿進(jìn)行反復(fù)重結(jié)晶5次，得到純度為89.9%的新橙皮苷二氫查爾酮。

實施例24：小花棘豆中新橙皮苷二氫查爾酮的制備

取小花棘豆藥材1.0kg，用20倍量的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為80%的乙醇微波輔助提取40min。將上一步的提取液濾過，減壓至0.08mpa，回收乙醇，得到浸膏約177g。浸膏中新橙皮苷二氫查爾酮含量在4.3%。取浸膏20g用水溶解配制成重量分?jǐn)?shù)為15%的溶液、過濾，得上柱液；此上柱液通過da-201大孔吸附樹脂(600g)柱，2bv20%的乙醇洗滌后，棄洗脫液；用55%的乙醇，以0.5bv/hr的流速洗脫，收集洗脫液；用高效液相對洗脫液中新橙皮苷二氫查爾酮的富集率和純度進(jìn)行檢測；富集后新橙皮苷二氫查爾酮的含量為51.5%，在上述新橙皮苷二氫查爾酮的粗提物中加入10倍量的乙酸乙酯進(jìn)行反復(fù)重結(jié)晶4次，得到純度為90.7%的新橙皮苷二氫查爾酮。

實施例25：鐮形棘豆中新橙皮苷二氫查爾酮的制備

取鐮形棘豆藥材1.0kg，用10倍量的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為70%的乙醇溫浸提取3次，每次1小時。將上一步的提取液濾過，減壓至0.07mpa，回收乙醇，得到浸膏約170g。浸膏中新橙皮苷二氫查爾酮含量在4.1%。取浸膏用水溶解，加入氫氧化鈉溶液，將ph調(diào)節(jié)至8.5。過濾，取濾液，向濾液中加入硫酸溶液，調(diào)節(jié)ph至3，室溫下靜置后離心，收集沉淀，真空干燥，得浸膏109g。將浸膏用70%的乙醇溶解后，用高效液相色譜法對溶解液中新橙皮苷二氫查爾酮的富集率和純度進(jìn)行檢測；富集后新橙皮苷二氫查爾酮為52.5%，在上述新橙皮苷二氫查爾酮的粗提物中加入10倍量的乙醇進(jìn)行反復(fù)重結(jié)晶5次，得到純度為91.6%的新橙皮苷二氫查爾酮。

實施例26：鐮形棘豆中新橙皮苷二氫查爾酮的制備

首先，取鐮形棘豆藥材1.0kg，用10倍量的水煎煮提取3次，每次1.5小時。將上一步的提取液濾過，濃縮，得到浸膏約169g。浸膏中新橙皮苷二氫查爾酮含量在3.6%。取浸膏用水溶解，加入氫氧化鈉溶液，將ph調(diào)節(jié)至8。過濾，取濾液，向濾液中加入硫酸溶液，調(diào)節(jié)ph至2，室溫下靜置后離心，收集沉淀，真空干燥，得浸膏104g。將浸膏用70%的乙醇溶解后，用高效液相對溶解液中新橙皮苷二氫查爾酮的富集率和純度進(jìn)行檢測；富集后新橙皮苷二氫查爾酮的含量為50.3%，在上述新橙皮苷二氫查爾酮的粗提物中加入10倍量的丙酮進(jìn)行反復(fù)重結(jié)晶5次，得到純度為90.1%的新橙皮苷二氫查爾酮。

實施例27：鐮形棘豆中新橙皮苷二氫查爾酮的制備

首先，取鐮形棘豆藥材1.0kg，采用半仿生提取法，調(diào)節(jié)ph至人體胃、小腸、大腸的體液酸度最佳ph2.0、7.5、8.3，用25倍量的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為85%的乙醇回流提取3次，每次1.5小時。將上一步的提取液濾過，減壓至0.08mpa，回收乙醇，得到浸膏約173g。浸膏中新橙皮苷二氫查爾酮含量在4.5%。取浸膏20g用水溶解配制成重量分?jǐn)?shù)為15%的溶液、過濾，得上柱液；此上柱液通過d301大孔吸附樹脂(400g)柱，2bv25%的乙醇洗滌后，棄洗脫液；用60%的乙醇，以1bv/hr的流速洗脫，收集洗脫液；用高效液相對洗脫液中新橙皮苷二氫查爾酮的富集率和純度進(jìn)行檢測；富集后新橙皮苷二氫查爾酮的含量為48.3%，在上述新橙皮苷二氫查爾酮的粗提物中加入10倍量的苯進(jìn)行反復(fù)重結(jié)晶4次，得到純度為88.4%的新橙皮苷二氫查爾酮。

實施例28：鐮形棘豆中新橙皮苷二氫查爾酮的制備

首先，取鐮形棘豆藥材1.0kg，用20倍量的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為60%的乙醇超聲提取3次，每次1小時。將上一步的提取液濾過，減壓至0.09mpa，回收乙醇，得到浸膏約183g。浸膏中新橙皮苷二氫查爾酮含量在4.1%。取浸膏20g用水溶解配制成重量分?jǐn)?shù)為15%的溶液、過濾，得上柱液；此上柱液通過xda-8大孔吸附樹脂(400g)柱，2bv15%的乙醇洗滌后，棄洗脫液；用45%的乙醇，以1bv/hr的流速洗脫，收集洗脫液；用高效液相對洗脫液中新橙皮苷二氫查爾酮的富集率和純度進(jìn)行檢測；富集后新橙皮苷二氫查爾酮的含量為51.3%，在上述新橙皮苷二氫查爾酮的粗提物中加入10倍量的丙酮進(jìn)行反復(fù)重結(jié)晶5次，得到純度為91.0%的新橙皮苷二氫查爾酮。

實施例29：鐮形棘豆中新橙皮苷二氫查爾酮的制備

取鐮形棘豆藥材1.0kg，用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為60%的乙醇滲漉提取。將上一步的提取液濾過，減壓至0.07mpa，回收乙醇，得到浸膏約179g。浸膏中新橙皮苷二氫查爾酮含量在4.2%。取浸膏用水溶解，加入氫氧化鈉溶液，將ph調(diào)節(jié)至9。過濾，取濾液，向濾液中加入硫酸溶液，調(diào)節(jié)ph至2.5，室溫下靜置后離心，收集沉淀，真空干燥，得浸膏113g。將浸膏用60%的乙醇溶解后，用高效液相對溶解液中新橙皮苷二氫查爾酮的富集率和純度進(jìn)行檢測；富集后新橙皮苷二氫查爾酮的含量為50.3%，在上述新橙皮苷二氫查爾酮的粗提物中加入9倍量的四氯化碳進(jìn)行反復(fù)重結(jié)晶4次，得到純度為88.7%的新橙皮苷二氫查爾酮。

實施例30：鐮形棘豆中新橙皮苷二氫查爾酮的制備

取鐮形棘豆藥材1.0kg，用20倍量的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為70%的甲醇回流提取3次，每次1.5小時。將上一步的提取液濾過，減壓至0.07mpa，回收甲醇，得到浸膏約180g。浸膏中新橙皮苷二氫查爾酮含量在3.9%。取浸膏20g用水溶解配制成重量分?jǐn)?shù)為15%的溶液、過濾，得上柱液；此上柱液通過dm130大孔吸附樹脂(600g)柱，2bv20%的甲醇洗滌后，棄洗脫液；用45%的甲醇，以1bv/hr的流速洗脫，收集洗脫液；用高效液相對洗脫液中新橙皮苷二氫查爾酮的富集率和純度進(jìn)行檢測；富集后新橙皮苷二氫查爾酮含量為51.3%，在上述新橙皮苷二氫查爾酮的粗提物中加入10倍量的二甲基甲酰胺進(jìn)行反復(fù)重結(jié)晶5次，得到純度大于92.4%的新橙皮苷二氫查爾酮。

實施例31：甘肅棘豆中新橙皮苷二氫查爾酮的制備

首先，取甘肅棘豆藥材1.0kg，采用超臨界流體萃取法，以20倍量的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為80%的乙醇為夾帶劑，在萃取溫度50℃條件下萃取2.5小時。將上一步的提取液濾過，減壓至0.09mpa，回收乙醇，得到浸膏約173g。浸膏中新橙皮苷二氫查爾酮含量在4.3%。取浸膏用水溶解，加入氫氧化鈉溶液，將ph調(diào)節(jié)至8.5。過濾，取濾液，向濾液中加入硫酸溶液，調(diào)節(jié)ph至2.5，室溫下靜置后離心，收集沉淀，真空干燥，得浸膏106g。將浸膏用80%的乙醇溶解后，用高效液相色譜法對溶解液中新橙皮苷二氫查爾酮的富集率和純度進(jìn)行檢測；富集后新橙皮苷二氫查爾酮的含量為48.6%，在上述新橙皮苷二氫查爾酮的粗提物中加入10倍量的異丙醇進(jìn)行反復(fù)重結(jié)晶4次，得到純度為89.2%的新橙皮苷二氫查爾酮。

實施例32：甘肅棘豆中新橙皮苷二氫查爾酮的制備

首先，取甘肅棘豆藥材1.0kg，用20倍量的水煎煮提取3次，每次1.5小時。將上一步的提取液濾過，濃縮，得到浸膏約162g。浸膏中新橙皮苷二氫查爾酮含量在3.7%。取浸膏用水溶解，加入氫氧化鈉溶液，將ph調(diào)節(jié)至8。過濾，取濾液，向濾液中加入硫酸溶液，調(diào)節(jié)ph至2，室溫下靜置后離心，收集沉淀，真空干燥，得浸膏101g。將浸膏用80%的乙醇溶解后，用高效液相對溶解液中新橙皮苷二氫查爾酮的富集率和純度進(jìn)行檢測；富集后新橙皮苷二氫查爾酮的含量為50.5%，在上述新橙皮苷二氫查爾酮的粗提物中加入10倍量的丙酮進(jìn)行反復(fù)重結(jié)晶5次，得到純度為90.7%的新橙皮苷二氫查爾酮。

實施例33：甘肅棘豆中新橙皮苷二氫查爾酮的制備

首先，取甘肅棘豆藥材1.0kg，用20倍量的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為80%的乙醇超聲提取3次，每次1小時。將上一步的提取液濾過，減壓至0.09mpa，回收乙醇，得到浸膏約182g。浸膏中新橙皮苷二氫查爾酮含量在4.7%。取浸膏20g用水溶解配制成重量分?jǐn)?shù)為15%的溶液、過濾，得上柱液；此上柱液通過d140大孔吸附樹脂(400g)柱，2bv15%的乙醇洗滌后，棄洗脫液；用50%的乙醇，以1bv/hr的流速洗脫，收集洗脫液；用高效液相對洗脫液中新橙皮苷二氫查爾酮的富集率和純度進(jìn)行檢測；富集后新橙皮苷二氫查爾酮的含量為51.8%，在上述新橙皮苷二氫查爾酮的粗提物中加入10倍量的二甲基亞砜進(jìn)行反復(fù)重結(jié)晶5次，得到純度為91.3%的新橙皮苷二氫查爾酮。

實施例34：甘肅棘豆中新橙皮苷二氫查爾酮的制備

首先，取甘肅棘豆藥材1.0kg，采用半仿生提取法，調(diào)節(jié)ph至人體胃、小腸、大腸的體液酸度最佳ph2.0、7.5、8.3，用20倍量的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為80%的乙醇回流提取3次，每次1.5小時。將上一步的提取液濾過，減壓至0.07mpa，回收乙醇，得到浸膏約178g。浸膏中新橙皮苷二氫查爾酮含量在4.6%。取浸膏20g用水溶解配制成重量分?jǐn)?shù)為15%的溶液、過濾，得上柱液；此上柱液通過hpd-200a大孔吸附樹脂(400g)柱，2bv20%的乙醇洗滌后，棄洗脫液；用55%的乙醇，以1bv/hr的流速洗脫，收集洗脫液；用高效液相對洗脫液中新橙皮苷二氫查爾酮的富集率和純度進(jìn)行檢測；富集后新橙皮苷二氫查爾酮的含量為51.1%，在上述新橙皮苷二氫查爾酮的粗提物中加入10倍量的乙醚進(jìn)行反復(fù)重結(jié)晶4次，得到純度為87.7%的新橙皮苷二氫查爾酮。

實施例35：甘肅棘豆中新橙皮苷二氫查爾酮的制備

取甘肅棘豆藥材1.0kg，用30倍量的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為85%的乙醇微波輔助提取1小時。將上一步的提取液濾過，減壓至0.09mpa，回收乙醇，得到浸膏約179g。浸膏中新橙皮苷二氫查爾酮含量在4.3%。取浸膏用水溶解，加入氫氧化鈉溶液，將ph調(diào)節(jié)至9。過濾，取濾液，向濾液中加入硫酸溶液，調(diào)節(jié)ph至3，室溫下靜置后離心，收集沉淀，真空干燥，得浸膏107g。將浸膏用85%的乙醇溶解后，用高效液相對溶解液中新橙皮苷二氫查爾酮的富集率和純度進(jìn)行檢測；富集后新橙皮苷二氫查爾酮的含量為52.2%，在上述新橙皮苷二氫查爾酮的粗提物中加入10倍量的乙醇進(jìn)行反復(fù)重結(jié)晶4次，得到純度為92.7%的新橙皮苷二氫查爾酮。

實施例36：甘肅棘豆中新橙皮苷二氫查爾酮的制備

取甘肅棘豆藥材1.0kg，用20倍量的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為80%的甲醇回流提取3次，每次1小時。將上一步的提取液濾過，減壓至0.08mpa，回收甲醇，得到浸膏約181g。浸膏中新橙皮苷二氫查爾酮含量在3.7%。取浸膏20g用水溶解配制成重量分?jǐn)?shù)為15%的溶液、過濾，得上柱液；此上柱液通過hpd-400大孔吸附樹脂(600g)柱，2bv20%的甲醇洗滌后，棄洗脫液；用50%的甲醇，以1bv/hr的流速洗脫，收集洗脫液；用高效液相對洗脫液中新橙皮苷二氫查爾酮的富集率和純度進(jìn)行檢測；富集后新橙皮苷二氫查爾酮含量為51.8%，在上述新橙皮苷二氫查爾酮的粗提物中加入10倍量的乙醇進(jìn)行反復(fù)重結(jié)晶5次，得到純度大于91.4%的新橙皮苷二氫查爾酮。

以上所述僅是本發(fā)明的優(yōu)選實施方式，應(yīng)當(dāng)指出，對于本技術(shù)領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來說，在不脫離本發(fā)明原理的前提下，可以做出若干改進(jìn)和潤飾，這些改進(jìn)和潤飾也應(yīng)視為本發(fā)明的保護(hù)范圍。