本發(fā)明屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明涉及一系列含有取代喹啉或異喹啉環(huán)的高抗菌活性的紅霉素a酮內(nèi)酯類抗生素衍生物以及它們的合成方法、相關(guān)中間體合成方法，和此類化合物的生物活性以及作為廣譜性抗生素在抑制革蘭氏陽性菌和陰性菌、抗病毒方面的用途。
與現(xiàn)有技術(shù)比較
細(xì)菌耐藥性已成為世界抗感染治療領(lǐng)域面臨的嚴(yán)峻問題。細(xì)菌耐藥性和耐藥菌感染是21世紀(jì)抗感染領(lǐng)域面臨的巨大挑戰(zhàn)。隨著抗生素應(yīng)用的日益增多，耐藥性問題日趨嚴(yán)重，使抗感染治療失敗，導(dǎo)致發(fā)病率和病死率上升及醫(yī)療費(fèi)用增加。以及近年來有報(bào)道指出，泰利霉素具有肝毒性的現(xiàn)象，限制了其臨床應(yīng)用范圍。
因此，有必要加快具有廣譜抗菌活性的新型抗生素研究，尤其是增強(qiáng)大環(huán)酮內(nèi)酯抗生素藥物對于革蘭氏陰性菌的作用，并降低藥物的肝毒性等毒副作用。設(shè)計(jì)并篩選化學(xué)結(jié)構(gòu)新穎的化合物，提高對大環(huán)內(nèi)酯類耐藥菌抑制活性，減少及避免藥物對菌株的誘導(dǎo)耐藥，解決多重耐藥問題，為臨床提供更加安全有效的藥物。
目前對于大環(huán)酮內(nèi)酯的結(jié)構(gòu)改造研究工作很多，本課題組陳肖卓等人設(shè)計(jì)并合成了一系列11,12-位含硫芳基烷基側(cè)鏈的大環(huán)酮內(nèi)酯衍生物，并進(jìn)行了體外活性試驗(yàn)，其中有些化合物對大環(huán)內(nèi)酯耐藥和敏感菌表現(xiàn)出了很好的活性。在對紅霉素敏感和耐藥性的化膿性鏈球菌，紅霉素敏感的肺炎鏈球菌，紅霉素敏感的流感嗜血桿菌方面，9n和9k的活性優(yōu)于泰利霉素，并且9a，9e，9k和9n(如下式)抗菌譜與泰利霉素類似。
11,12-位含硫芳基烷基側(cè)鏈的大環(huán)酮內(nèi)酯衍生物
abbott實(shí)驗(yàn)室在成功開發(fā)喹紅霉素的基礎(chǔ)上，繼續(xù)對大環(huán)內(nèi)酯的6-位進(jìn)行了深入的結(jié)構(gòu)改造。他們合成了一系列6-炔丙基芳雜環(huán)側(cè)鏈的大環(huán)酮內(nèi)酯衍生物9。研究發(fā)現(xiàn)，當(dāng)芳雜環(huán)部分為聯(lián)芳環(huán)時(shí)，化合物的活性最好。以泰利霉素作為對照品，化合物9d和9e(如下式)對erm和mef基因誘導(dǎo)的紅霉素耐藥菌活性有很大程度的提高。對含erm基因的肺炎鏈球菌5979，化合物9d和9e的抑菌活性較泰利霉素提高100倍。此類化合物為抗耐藥的大環(huán)內(nèi)酯抗生素提供了新的候選物。
6-炔丙基芳雜環(huán)側(cè)鏈的大環(huán)酮內(nèi)酯衍生物
本課題組陳肖卓等人合成了一系列5-二甲胺糖4’-o衍生物，研究表明在5-二甲胺糖的4’位置引入羥基有利于提高對青霉素敏感菌和耐藥菌的抗菌活性。與泰利霉素相比，其保持了對所有青霉素敏感菌和其他耐藥菌的抗菌活性，在對紅霉素敏感的essp菌和esspy菌方面保持了與泰利霉素相同的活性。
構(gòu)效關(guān)系表明，二甲胺糖通過氫鍵與v區(qū)的23srrna結(jié)合發(fā)揮藥效作用。二甲胺糖4’-oh提供了另一個(gè)氫鍵供體與結(jié)合區(qū)的氨基酸殘基結(jié)合發(fā)揮作用，因此化合物26(如下式)抗菌活性優(yōu)于紅霉素和克拉霉素。而在4’位置引入疏水基團(tuán)如烷基、芳基，由于不能增強(qiáng)大環(huán)內(nèi)酯與核糖體亞基的作用而不能提高抗菌活性(如25和29)。
5-二甲胺糖4’-oh修飾的大環(huán)酮內(nèi)酯衍生物
本專利申請的化合物為11,12-位含特殊側(cè)鏈鏈接方式的有取代的喹啉或異喹啉基的大環(huán)酮內(nèi)酯衍生物，并進(jìn)行了體外抗菌活性測試。其優(yōu)勢為合成簡單高效，以商業(yè)化喹啉或異喹啉取代物為起始原料，經(jīng)過簡單反應(yīng)高收率的得到目標(biāo)產(chǎn)物。同時(shí)抗菌活性突出，有些化合物對大環(huán)內(nèi)敏感菌和酯耐藥表現(xiàn)出了很好的活性，整體抗菌活性與泰利霉素活性水平相當(dāng)，甚至對某些菌株的抗菌水平已經(jīng)超過了泰利霉素；有些化合物對耐藥菌表現(xiàn)出了突出的抗菌活性，抗菌水平超過泰利霉素一到兩個(gè)數(shù)量級，有望解決耐藥菌問題。
11,12-位含雙鍵側(cè)鏈取代喹啉的大環(huán)酮內(nèi)酯衍生物
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
本發(fā)明解決的技術(shù)問題是提供一類具有廣譜抑菌活性的大環(huán)酮內(nèi)酯類化合物，即新結(jié)構(gòu)紅霉素a大環(huán)酮內(nèi)酯類抗生素衍生物及其藥學(xué)上可接受的鹽，并提供該類化合物的制備方法、藥物組合物、及其在制備抗細(xì)菌或病毒藥物中的應(yīng)用。
為解決本發(fā)明的技術(shù)問題，本發(fā)明提供如下技術(shù)方案：
本發(fā)明技術(shù)方案的第一方面是提供一類如式i所示的大環(huán)酮內(nèi)酯類抗生素化合物及其藥學(xué)上可接受的鹽，具有以下的結(jié)構(gòu)式：
其中，x-y選自ch＝ch或o-ch2，
q選自取代或未取代的喹啉或異喹啉，其中取代基選自h、c1-6烷基、c1-6烷氧基、c6-10芳基、芐氧基，
r為h原子或者氟原子。
優(yōu)選的化合物如式ia所示，其特征在于，
其中，x-y選自ch＝ch或o-ch2，
r1選自c1-6烷基、c1-6烷氧基、c6-10芳基、芐氧基；
r選自氟原子或h。
在式ia中，優(yōu)選的r1位置在喹啉環(huán)的6位或7位。
優(yōu)選的化合物如式ib所示，其特征在于，
其中，x-y選自ch＝ch或o-ch2，
r2選自h、c1-6烷基、c1-6烷氧基、c6-10芳基、芐氧基；
r2選自氟原子或h。
優(yōu)選的化合物如式ic所示，其特征在于，
其中，x-y選自ch＝ch或o-ch2，
r3選自h、c1-6烷基、c1-6烷氧基、c6-10芳基、芐氧基；r3選自氟原子或h。
c1-6烷基、c1-6烷氧基、c6-10芳基、
本發(fā)明的c1-6烷基可以是c1-6直鏈或支鏈烷基，c1-6烷氧基是c1-6直鏈或支鏈烷基再鏈接上一個(gè)氧原子。c1-6直鏈或支鏈烷基中，優(yōu)選的是c1-5直鏈或支鏈烷基或c2-6直鏈或支鏈烷基；再優(yōu)選的是c1-4直鏈或支鏈烷基、c2-5直鏈或支鏈烷基或c3-6直鏈或支鏈烷基；更優(yōu)選的是c1-3直鏈或支鏈烷基、c2-4直鏈或支鏈烷基、c3-5直鏈或支鏈烷基、或c4-6直鏈或支鏈烷基；進(jìn)一步優(yōu)選的是c1-2直鏈或支鏈烷基，c2-3直鏈或支鏈烷基，c3-4直鏈或支鏈烷基，c4-5直鏈或支鏈烷基，c5-6直鏈或支鏈烷基。更優(yōu)選的c1-6直鏈或支鏈烷基選自甲基、乙基、丙基、異丙基、環(huán)丙基、丁基、戊基、異戊基。更優(yōu)選的c1-4直鏈或支鏈烷基選自甲基、乙基、丙基、異丙基、環(huán)丙基、丁基。
優(yōu)選的c6-10芳基選自
優(yōu)選的化合物具體列出如下：
(s1)11,12-二脫氧-3-o-脫克拉定糖-6-o-甲基-3-氧代-12,11-(氧羰基(4-異喹啉基-3(e)-丁烯基)亞氨基)紅霉素
(s2)11,12-二脫氧-3-o-脫克拉定糖-6-o-甲基-3-氧代-12,11-(氧羰基(喹啉-7-羥基取代丙基)亞氨基)紅霉素
(s3)11,12-二脫氧-3-o-脫克拉定糖-6-o-甲基-3-氧代-12,11-(氧羰基(3-(6-甲基-喹啉基)-3(e)-丁烯基)亞氨基)紅霉素
(s4)11,12-二脫氧-3-o-脫克拉定糖-6-o-甲基-3-氧代-12,11-(氧羰基(3-(6-甲氧基-喹啉基)-3(e)-丁烯基)亞氨基)紅霉素
(s5)11,12-二脫氧-3-o-脫克拉定糖-6-o-甲基-3-氧代-12,11-(氧羰基(3-(6-芐氧基-喹啉基)-3(e)-丁烯基)亞氨基)紅霉素
(s6)11,12-二脫氧-3-o-脫克拉定糖-6-o-甲基-3-氧代-12,11-(氧羰基(3-(6-苯基-喹啉基)-3(e)-丁烯基)亞氨基)紅霉素
(s7)11,12-二脫氧-3-o-脫克拉定糖-6-o-甲基-3-氧代-12,11-(氧羰基(3-(7-甲基-喹啉基)-3(e)-丁烯基)亞氨基)紅霉素
(s8)11,12-二脫氧-3-o-脫克拉定糖-6-o-甲基-3-氧代-12,11-(氧羰基(3-(7-甲氧基-喹啉基)-3(e)-丁烯基)亞氨基)紅霉素
(s9)11,12-二脫氧-3-o-脫克拉定糖-6-o-甲基-3-氧代-12,11-(氧羰基(3-(7-芐氧基-喹啉基)-3(e)-丁烯基)亞氨基)紅霉素
(s10)11,12-二脫氧-2-氟-3-o-脫克拉定糖-6-o-甲基-3-氧代-12,11-(氧羰基(3-喹啉基-3(e)-丁烯基)亞氨基)紅霉素
(s11)11,12-二脫氧-2-氟-3-o-脫克拉定糖-6-o-甲基-3-氧代-12,11-(氧羰基(喹啉-3-羥基取代丙基)亞氨基)紅霉素
本發(fā)明技術(shù)方案的第二方面是提供第一方面所述新結(jié)構(gòu)大環(huán)酮內(nèi)酯類抗生素衍生物的制備方法。其中起始原料為克拉霉素，采用文獻(xiàn)報(bào)道或合成化學(xué)上可行的反應(yīng)方法，得到適當(dāng)?shù)闹虚g體作為發(fā)明的原料，其結(jié)構(gòu)式如下：
其中，ac為乙?；?。
本發(fā)明中原料6的方法的反應(yīng)式如下：
其中，所述(ch3co)2為乙酸酐，clco2ccl3為氯甲酸三氯甲酯，(cocl)2為草酰氯，dbu為1,8-二氮雜二環(huán)十一碳-7-烯，dmso為二甲基亞砜，cdi為羰基二咪唑，dmf為n,n-二甲基甲酰胺，ac為乙?；?。
本發(fā)明化合物合成方法包括將適當(dāng)保護(hù)的大環(huán)內(nèi)酯中間體化合物6與預(yù)先選擇的含喹啉或者異喹啉環(huán)的一級胺側(cè)鏈的加成反應(yīng)；或?qū)?′-羥基進(jìn)行保護(hù)后，在大環(huán)2-位進(jìn)行取代后再脫除2′-羥基保護(hù)基的反應(yīng)。
上述的方法，包括下列步驟：
1，在上述原料6的11,12-位引入有取代的喹啉或異喹啉環(huán)取代的氨基甲酸酯官能團(tuán)，得到了相應(yīng)取代的紅霉素a含喹啉或異喹啉環(huán)側(cè)鏈酮內(nèi)酯衍生物；
2，對酮內(nèi)酯衍生物的2′-位進(jìn)行保護(hù)，然后對2-位進(jìn)行取代再脫保護(hù)，得到了相應(yīng)的2-位取代紅霉素a含喹啉或異喹啉環(huán)環(huán)側(cè)鏈酮內(nèi)酯衍生物。
其中所述的x、y、q、r的定義與本發(fā)明技術(shù)方案第一方面的定義相同。
本發(fā)明的新結(jié)構(gòu)大環(huán)酮內(nèi)酯類化合物即從克拉霉素出發(fā)，采用已知的文獻(xiàn)報(bào)道或合成化學(xué)上公眾可知的可行反應(yīng)方法，得到適當(dāng)?shù)难苌镒鳛楸景l(fā)明的原料，如原料化合物6，可以采用文獻(xiàn)j.med.chem,41,4080-4100,1998報(bào)道的方法制備。
本發(fā)明技術(shù)方案的第三方面還提供了一種藥物組合物，該組合物含有第一方面所述的喹啉或異喹啉取代基的紅霉素a酮內(nèi)酯類抗生素衍生物的至少一個(gè)化合物和藥學(xué)上可利用的載體。該藥物組合物可根據(jù)本領(lǐng)域公知的方法制備?？赏ㄟ^將本發(fā)明化合物與一種或多種藥學(xué)上可接受的固體或液體賦形劑和/或輔劑結(jié)合，制成適于人或動(dòng)物使用的任何劑型。本發(fā)明化合物在其藥物組合物中的含量通常為0.1-95重量％。
本發(fā)明化合物或含有它的藥物組合物可以單位劑量形式給藥，給藥途徑可為腸道或非腸道，如口服、靜脈注射、肌肉注射、皮下注射、鼻腔、口腔粘膜、眼、肺和呼吸道、皮膚、陰道、直腸等。
給藥劑型可以是液體劑型、固體劑型或半固體劑型。液體劑型可以是溶液劑(包括真溶液和膠體溶液)、乳劑(包括o/w型、w/o型和復(fù)乳)、混懸劑、注射劑(包括水針劑、粉針劑和輸液)、滴眼劑、滴鼻劑、洗劑和搽劑等；固體劑型可以是片劑(包括普通片、腸溶片、含片、分散片、咀嚼片、泡騰片、口腔崩解片)、膠囊劑(包括硬膠囊、軟膠囊、腸溶膠囊)、顆粒劑、散劑、微丸、滴丸、栓劑、膜劑、貼片、氣(粉)霧劑、噴霧劑等；半固體劑型可以是軟膏劑、凝膠劑、糊劑等。
本發(fā)明化合物可以制成普通制劑、也制成是緩釋制劑、控釋制劑、靶向制劑及各種微粒給藥系統(tǒng)。
為了將本發(fā)明化合物制成片劑，可以廣泛使用本領(lǐng)域公知的各種賦形劑，包括稀釋劑、黏合劑、潤濕劑、崩解劑、潤滑劑、助流劑。稀釋劑可以是淀粉、糊精、蔗糖、葡萄糖、乳糖、甘露醇、山梨醇、木糖醇、微晶纖維素、硫酸鈣、磷酸氫鈣、碳酸鈣等；濕潤劑可以是水、乙醇、異丙醇等；粘合劑可以是淀粉漿、糊精、糖漿、蜂蜜、葡萄糖溶液、微晶纖維素、阿拉伯膠漿、明膠漿、羧甲基纖維素鈉、甲基纖維素、羥丙基甲基纖維素、乙基纖維素、丙烯酸樹脂、卡波姆、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙二醇等；崩解劑可以是干淀粉、微晶纖維素、低取代羥丙基纖維素、交聯(lián)聚乙烯吡咯烷酮、交聯(lián)羧甲基纖維素鈉、羧甲基淀粉鈉、碳酸氫鈉與枸櫞酸、聚氧乙烯山梨糖醇脂肪酸酯、十二烷基磺酸鈉等；潤滑劑和助流劑可以是滑石粉、二氧化硅、硬脂酸鹽、酒石酸、液體石蠟、聚乙二醇等。
還可以將片劑進(jìn)一步制成包衣片，例如糖包衣片、薄膜包衣片、腸溶包衣片，或雙層片和多層片。
為了將給藥單元制成膠囊劑，可以將有效成分本發(fā)明化合物與稀釋劑、助流劑混合，將混合物直接置于硬膠囊或軟膠囊中。也可將有效成分本發(fā)明化合物先與稀釋劑、黏合劑、崩解劑制成顆?；蛭⑼?，再置于硬膠囊或軟膠囊中。用于制備本發(fā)明化合物片劑的各稀釋劑、黏合劑、潤濕劑、崩解劑、助流劑品種也可用于制備本發(fā)明化合物的膠囊劑。
為將本發(fā)明化合物制成注射劑，可以用水、乙醇、異丙醇、丙二醇或它們的混合物作溶劑并加入適量本領(lǐng)域常用的增溶劑、助溶劑、ph調(diào)劑劑、滲透壓調(diào)節(jié)劑。增溶劑或助溶劑可以是泊洛沙姆、卵磷脂、羥丙基-β-環(huán)糊精等；ph調(diào)劑劑可以是磷酸鹽、醋酸鹽、鹽酸、氫氧化鈉等；滲透壓調(diào)節(jié)劑可以是氯化鈉、甘露醇、葡萄糖、磷酸鹽、醋酸鹽等。如制備凍干粉針劑，還可加入甘露醇、葡萄糖等作為支撐劑。
此外，如需要，也可以向藥物制劑中添加著色劑、防腐劑、香料、矯味劑或其它添加劑。
為達(dá)到用藥目的，增強(qiáng)治療效果，本發(fā)明的藥物或藥物組合物可用任何公知的給藥方法給藥。
本發(fā)明化合物藥物組合物的給藥劑量依照所要預(yù)防或治療疾病的性質(zhì)和嚴(yán)重程度，患者或動(dòng)物的個(gè)體情況，給藥途徑和劑型等可以有大范圍的變化。一般來講，本發(fā)明化合物的每天的合適劑量范圍為0.001-150mg/kg體重，優(yōu)選為0.1-100mg/kg體重，更優(yōu)選為1-60mg/kg體重，最優(yōu)選為2-30mg/kg體重。上述劑量可以一個(gè)劑量單位或分成幾個(gè)劑量單位給藥，這取決于醫(yī)生的臨床經(jīng)驗(yàn)以及包括運(yùn)用其它治療手段的給藥方案。
本發(fā)明的化合物或組合物可單獨(dú)服用，或與其他治療藥物或?qū)ΠY藥物合并使用。當(dāng)本發(fā)明的化合物與其它治療藥物存在協(xié)同作用時(shí)，應(yīng)根據(jù)實(shí)際情況調(diào)整它的劑量。
本發(fā)明技術(shù)方案的第四方面提供了本發(fā)明第一方面所述化合物在制備抑制細(xì)菌藥物中的應(yīng)用。
所述的細(xì)菌菌株包括革蘭氏陽性細(xì)菌、革蘭氏陰性細(xì)菌。其中，革蘭氏陽性細(xì)菌包括葡萄球菌，鏈球菌，肺炎鏈球菌，化膿性球菌，表皮葡萄球菌；革蘭氏陰性細(xì)菌包括卡他莫拉菌，流感嗜血桿菌；以及其他病原體如立克次氏菌，肺炎支原體，衣原體，羅馬病原體，鳥血漿體，弓形體，分支桿菌，單核細(xì)胞增多性李斯特氏菌，腦膜炎球菌。
有益技術(shù)效果
本發(fā)明中絕大部分含有取代的喹啉環(huán)衍生物或異喹啉環(huán)取代的側(cè)鏈的大環(huán)內(nèi)酯化合物紅霉素a抗生素類衍生物體外抗菌活性達(dá)到與泰利霉素相當(dāng)?shù)乃剑瑢τ诓糠志赀€優(yōu)于泰利霉素，并且本發(fā)明設(shè)計(jì)合成的樣品化合物回避了可能引起肝毒性的側(cè)鏈結(jié)構(gòu)；與泰利霉素合成相比，本發(fā)明涉及的樣品化合物的合成路線短，操作簡單，總收率高，成本低。從而提供了一類結(jié)構(gòu)新穎、活性強(qiáng)、合成簡單的藥物候選物，可作為廣譜性抗生素在抑制革蘭氏陽性菌和陰性菌、抗病毒方面的用途。
具體實(shí)施方式
通過下面的實(shí)施例可以對本發(fā)明進(jìn)行進(jìn)一步的描述，然而，本發(fā)明的范圍并不限于下述實(shí)施例。本領(lǐng)域的專業(yè)人員能夠理解，在不背離本發(fā)明的精神和范圍的前提下，可以對本發(fā)明進(jìn)行各種變化和修飾。本發(fā)明對試驗(yàn)中所使用到的材料以及試驗(yàn)方法進(jìn)行一般性和/或具體的描述。雖然為實(shí)現(xiàn)本發(fā)明目的所使用的許多材料和操作方法是本領(lǐng)域公知的，但是本發(fā)明仍然在此作盡可能詳細(xì)描述。
對于以下全部實(shí)施例，可以使用本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的標(biāo)準(zhǔn)操作和純化方法。除非另有說明，所有溫度以℃(攝氏度)表示。化合物的結(jié)構(gòu)是通過核磁共振譜(nmr)和/或質(zhì)譜(ms)來確定的。
制備例部分
化合物的結(jié)構(gòu)是通過核磁共振氫譜(1hnmr)、核磁共振碳譜(13cnmr)及質(zhì)譜(ms)來確定的。核磁共振氫譜及碳譜位移(δ)以百萬分之一(ppm)的單位給出。核磁共振氫譜用mercury-300、mercury-400、bruke-400或mercury-600型核磁共振儀測定，氘代氯仿(cdcl3)或重水(d2o)或氘代二甲基亞砜(dmso-d6)作溶劑，四甲基硅烷(tms)為內(nèi)標(biāo)。
高分辨質(zhì)譜采用agilent1100serieslc/msdtrapmassspectrometer液質(zhì)聯(lián)用儀或theromoexactiveorbitrappluslc/msdmassspectrometer液質(zhì)聯(lián)用儀測定。
柱層析一般使用160～200目硅膠為載體。
無水溶劑均通過標(biāo)準(zhǔn)方法處理。其它試劑均為市售分析純。
其中，
制備例1
scheme1中間體側(cè)鏈a2的合成路線
scheme1試劑和反應(yīng)條件:a.2-(but-3-en-1-yl)isoindoline-1,3-dione,pd(dba)2,pph3,na2co3,dmf,120℃；b.nh2nh2.h2o,etoh,reflux,80℃。
將4-溴異喹啉(0.21g,1.0mmol)、4-鄰苯二甲酰亞胺基-1-丁烯(0.20g,1.0mmol)、三苯基膦(21mg,8％)和碳酸鈉(0.21g,2.0mmol)分散在4毫升的dmf中，在氬氣保護(hù)條件下，加入pd(dba)2(23mg,4％)。將反應(yīng)液加熱到120℃，攪拌過夜。反應(yīng)液冷卻到室溫，加入50毫升乙酸乙酯稀釋后，飽和食鹽水洗5次，每次50毫升，無水硫酸鈉干燥，旋干。殘留物經(jīng)過柱層析分離(石油醚/乙酸乙酯＝1/4，得到中間體a1(0.38g)。
將上步制備的中間體a1分散在5毫升的乙醇中，加入水合肼(2eq)，加熱回流4個(gè)小時(shí)，大量固體洗出。過濾，濾液旋干，殘余物溶解分散在30毫升的二氯甲烷中，過掉不容物，旋干得到中間體a2，直接用于下一步。
制備例2
scheme2中間體b2的合成路線
scheme2試劑和反應(yīng)條件:a.n-(3-bromopropyl)phthalimide，k2co3,dmf,90℃；b.nh2nh2.h2o,etoh,reflux,80℃。
將7-羥基喹啉(2.0g，13.8mmol)、n-(3-溴丙基)鄰苯二甲酰亞胺(3.7g，13.8mmol)、碳酸鉀(2.1g，15.2mmol)分別加入至n,n-二甲基甲酰胺中(40ml)，加熱至90℃，反應(yīng)10h。tlc(乙酸乙酯/石油醚1:3)顯示反應(yīng)完全。停止反應(yīng)，將反應(yīng)液冷至室溫，過濾除去固體，濾液濃縮，二氯甲烷溶解剩余物，水洗，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉干燥，過濾，硅膠柱層析(乙酸乙酯/石油醚1:15)得淡黃色化合物1b(4.186g，收率91.6％)。
將化合物2b(1.5g,4.5mmol)分散于30ml無水乙醇中，向反應(yīng)液中滴加85％水合肼(2eq)，加熱至80℃，回流反應(yīng)5h，tlc(甲醇/氯仿1:10)顯示反應(yīng)完全。將反應(yīng)液減壓濃縮得淺黃色固體，氯仿萃取，有機(jī)相用2mol/l的氫氧化鈉溶液洗，水洗，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉干燥，過濾，濃縮有機(jī)相得淡黃色油狀化合物0.728g，未經(jīng)分離，直接用于下步反應(yīng)。
制備例3-9
scheme3中間體c3-i3的合成路線
scheme1試劑和反應(yīng)條件:a.br2，py,ccl4,reflux,4h；b.
2-(but-3-en-1-yl)isoindoline-1,3-dione,pd(dba)2,pph3,naoac,dmf,120℃,16h；c.nh2nh2.h2o,etoh,reflux,4h。
將對應(yīng)的喹啉衍生物(1eq)溶解在四氯化碳中(1g/10ml),室溫條件下加入溴素(1.1eq)。反應(yīng)液加熱回流后，滴加吡啶(1.2eq)，繼續(xù)加熱回流4個(gè)小時(shí)。將反應(yīng)液降至室溫，加入二氯甲烷稀釋反應(yīng)液，飽和食鹽水洗3次，無水硫酸鈉干燥，過濾，旋干。殘余物經(jīng)柱層析分離，得到對應(yīng)的中間體c1-i1.
將中間體c1-i1(1eq)、4-鄰苯二甲酰亞胺基-1-丁烯(1eq)、三苯基膦(8％)和醋酸鈉(2eq)分散在dmf中，在氬氣保護(hù)條件下，加入pd(dba)2(4％)。將反應(yīng)液加熱到120℃，攪拌過夜。反應(yīng)液冷卻到室溫，加入乙酸乙酯稀釋后，飽和食鹽水洗5次，無水硫酸鈉干燥，旋干。殘留物經(jīng)過柱層析分離，得到中間體c2-i2。
將上步制備的中間體c2-i2分散在乙醇中，加入水合肼(2eq)，加熱回流4個(gè)小時(shí)，大量固體洗出。過濾，濾液旋干，殘余物溶解分散在30毫升的二氯甲烷中，過掉不容物，旋干得到中間體c3-i3，直接用于下一步。
制備例10原料化合物6的制備
本發(fā)明的新結(jié)構(gòu)大環(huán)酮內(nèi)酯類化合物即從克拉霉素出發(fā)，采用已知的文獻(xiàn)報(bào)道或合成化學(xué)上公眾可知的可行反應(yīng)方法，得到適當(dāng)?shù)难苌镒鳛楸景l(fā)明的原料，如原料化合物6，可以采用文獻(xiàn)j.med.chem,41,4080-4100,1998報(bào)道的方法制備。
將克拉霉素(50g，66.9mmol)分散在350ml水中，向其中加入1mol/l的鹽酸(350ml)，室溫?cái)嚢?，反?yīng)液逐漸變粘稠。繼續(xù)反應(yīng)3h，反應(yīng)液逐漸變?yōu)槌吻逡?，tlc(氯仿/甲醇10：1)檢測顯示反應(yīng)完全。用2mol/l的氫氧化鈉溶液調(diào)ph至9-10，有大量白色固體產(chǎn)生，產(chǎn)品經(jīng)二氯甲烷多次萃取，合并有機(jī)相，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉干燥。減壓濃縮，二氯甲烷/甲醇50:1)減壓柱層析得到純品(1)37.9g，產(chǎn)率96％。
1hnmr(300mhz,cdcl3):δ5.172(dd,1h,j＝2.1hz,j＝10.8hz),4.386(d,1h,j＝7.2hz),3.917(s,1h),3.851(s,1h),3.681(s,1h),2.965(s,3h),2.262(s,6h),2.114(q,1h,j＝7.5hz),1.362(s,3h),1.178(s,3h),0.831(t,3h,j＝7.2hz).
13cnmr(75mhz,cdcl3):221.116,175.416,107.026,88.749,79.391,78.450,74.604,71.065,70.685,70.184,66.087,49.978,45.936,44.976,40.666,39.153,37.932,36.281,28.452,21.842,21.676,19.178,18.152,16.606,15.606,13.051,10.839,8.644.
hr-ms(esi)(m+h)+m/z590.3885,計(jì)算值：c30h56no10590.3898.
化合物1(24.32g,41.29mmol)經(jīng)甲苯帶水后溶于300ml干燥的二氯甲烷，氬氣保護(hù)，冰水浴冷卻，待溶解完全，于0℃依次逐滴加入三乙胺(6.9ml,49.55mmol)和乙酸酐(4.67ml,49.55mmol)。室溫?cái)嚢?0h，tcl(氯仿/甲醇10/1)檢測顯示反應(yīng)完全，向反應(yīng)液中加入100ml冰水終止反應(yīng)，靜置分液，有機(jī)相用飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉干燥，濃縮得淡黃色泡沫狀粗品27.38g，減壓硅膠柱層析分離純化(二氯甲烷/甲醇/三乙胺30:1:2％)得到白色泡沫狀固體2(21.9g，84％)。
1hnmr(300mhz,cdcl3):δ5.158(dd,1h,j＝2.1hz,j＝10.8hz),4.742(dd,1h,j＝7.8hz,j＝10.5hz),4.592(d,1h,j＝7.5hz),3.945(s,1h),3.807(s,1h),3.705(d,1h,j＝2.4hz),3.459(m,2h),3.250(s,1h),2.930(s,3h),2.245(s,6h),2.031(s,3h),0.927(d,3h,j＝7.8hz),0.819(t,3h,j＝7.2hz).
13cnmr(75mhz,cdcl3):221.376,175.066,170.355,100.024,81.446,78.379,78.187,77.192,74.561,71.914,70.021,69.222,63.544,50.126,45.877,44.418,41.013,38.880,41.013,38.880,37.688,36.086,31.455,21.795,21.532,19.658,18.329,17.767,16.585,15.714,13.002,10.852,8.233.
hr-ms(esi)(m+h)+m/z632.4018,計(jì)算值：c32h58no11632.4010.
化合物2(1.94g,3.07mmol)經(jīng)甲苯充分帶水后溶于20ml干燥的二氯甲烷溶液中，加入吡啶(3.97ml,49.07mmol)，氬氣保護(hù)，冰水浴冷卻下充分混合0.5h。向體系中滴加氯甲酸三氯甲酯(0.96ml,7.973mmol)的二氯甲烷溶液(3ml)溶液。反應(yīng)液馬上變?yōu)榈S色，繼續(xù)室溫反應(yīng)，反應(yīng)液逐漸渾濁且顏色加深，24h后tlc(丙酮/石油醚/三乙胺1.5:1:1％)顯示反應(yīng)完全。向體系中加少量碎冰終止反應(yīng)，加入大量二氯甲烷使體系中的固體完全溶解。小心加入飽和碳酸氫鈉溶液，常溫?cái)嚢?，待不再有氣泡產(chǎn)生后分液，有機(jī)相分別用半飽和的氯化鈉洗，飽和氯化鈉洗，無水硫酸鈉干燥，減壓濃縮，(石油醚/丙酮/三乙胺2.5:1:0.5％)減壓柱層析，得淡黃色產(chǎn)品3(1.51g，75％)。
1hnmr(300mhz,cdcl3):δ5.122(d,1h,j＝9.0hz),4.714～4.774(m,2h),4.578(d,1h,j＝7.5hz),3.690(s,1h),3.452～3.507(m,2h),2.914(s,3h),2.640～2.746(m,2h),2.549～2.604(m,1h),2.250(s,6h),2.057(s,3h),1.489(s,3h),1.180(d,3h,j＝6.6hz),1.139(d,3h,j＝7.5hz),0.937(d,3h,j＝7.2hz),0.861(t,3h,j＝7.5hz).
13cnmr(75mhz,cdcl3):212.527,175.288,170.271,154.452,100.302,85.252,81.591,81.284,78.523,78.158,75.655,71.920,69.315,63.592,50.009,45.650,44.540,41.079,38.969,37.824,36.304,31.359,22.513,21.862,21.524,19.676,18.702,15.630,14.513,13.436,10.520,8.153.
hr-ms(esi)(m+h)+m/z658.3815,計(jì)算值：c33h56no12658.3797.
將草酰氯(0.82g,6.48mmol)溶于干燥的二氯甲烷(15ml)中，氬氣保護(hù)，丙酮-干冰浴冷卻至-78℃，穩(wěn)定后向其中滴加dmso(1.01g,12.96mmol)的二氯甲烷(2ml)溶液，穩(wěn)定后再滴加充分干燥的化合物3(2.84g,4.32mmol)的二氯甲烷溶液(25ml)，保持在-78℃反應(yīng)4h。滴加三乙胺(2.62g,25.93mmol)的二氯甲烷溶液(2ml)，并逐漸使反應(yīng)液升溫至室溫，tlc(氯仿/甲醇10:1)顯示反應(yīng)基本完全。二氯甲烷稀釋后分別用1n的鹽酸，飽和碳酸氫鈉，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉干燥，減壓濃縮得淡黃色泡沫狀固體，減壓柱層析(丙酮/石油醚3:1)得白色泡沫狀純品4(1.98g，70％)。
1hnmr(300mhz,cdcl3):δ5.054(dd,1h,j＝2.7hz,j＝9.9hz),4.732(dd,1h,j＝10.2hz,j＝8.1hz),4.623(s,1h),4.377(d,1h,j＝7.8hz),4.160(d,1h,j＝7.5hz),3.781(q,1h,j＝6.9hz),3.543(m,1h),2.941～3.026(m,2h),2.645(s,3h),2.241(s,6h),2.044(s,3h),1.942(s,1h),1.813～1.866(m,1h),1.705～1.736(m,1h),1.540(s,3h),1.472(s,3h),1.401～1.424(m,3h),1.344～1.361(m,3h),1.315(s,3h),1.229～1.265(m,3h),1.129～1.154(m,6h),0.894(t,3h,j＝7.5hz).
13cnmr(75mhz,cdcl3):213.277,204.412,170.193,169.492,154.295,101.870,84.890,81.311,78.767,78.571,77.126,72.009,69.600,63.847,51.529,49.963,47.979,44.222,41.082,39.674,38.523,30.859,22.780,21.834,21.421,20.105,18.312,16.612,14.526,13.971,12.904,10.774.
hr-ms(esi)(m+h)+m/z656.3627,calcdforc33h54no12656.3641.
充分干燥的化合物4(11.48g,17.5mmol)溶于150ml干燥的丙酮中，氬氣保護(hù)，逐滴加入dbu(3.92ml,26.25mmol)，加熱回流4h，tlc(氯仿/甲醇10:1)顯示反應(yīng)完全。逐滴加入5％的磷酸二氫鉀溶液調(diào)ph至中性。減壓蒸掉部分丙酮后用大量二氯甲烷溶液稀釋，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉干燥，減壓濃縮，粗品經(jīng)乙酸乙酯重結(jié)晶，得白色固體純品5(8.0g,75％)。
1hnmr(300mhz,cdcl3):δ6.597(s,1h),4.987(d,1h,j＝9.6hz),4.719(t,j＝8.0hz1h),4.348(d,1h,j＝8.0hz),4.130(d,1h,j＝8.0hz),3.724(q,1h,j＝6.8hz),3.504～3.544(m,1h),3.165(q,1h,j＝6.0hz),3.032～3.070(m,1h),2.861(s,3h),2.637(t,1h,j＝8.8hz),2.237(s,6h),2.015(s,3h),2.034(s,3h),1.942(s,1h),1.813～1.866(m,1h),1.705～1.736(m,1h),1.544～1.595(m,3h),1.472(s,3h),1.344～1.361(m,3h),1.325(s,3h),1.229～1.265(m,3h),1.113～1.159(m,6h),0.929(t,3h,j＝7.2hz).
13cnmr(100mhz,cdcl3):207.404,170.143,170.109,142.441,139.167,102.170,81.691,81.326,78.676,73.741,71.914,69.478,63.926,51.583,50.770,47.503,41.027,40.522,38.811,30.759,22.791,22.354,21.759,21.380,19.287,15.166,14.396,13.940,11.313.
hr-ms(esi)(m+h)+m/z612.3755,計(jì)算值：c32h54no10612.3742.
將70％的nah(0.66g,19.31mmol)分散在60ml干燥的dmf中，低溫槽冷卻至-15℃，氬氣保護(hù)。分批加入化合物5(5.90g,9.66mmol)，充分混合后滴加cdi(4.69g,28.967mmol)的dmf溶液(40ml)。繼續(xù)低溫反應(yīng)2h，tlc(丙酮/石油醚1.5:1)顯示反應(yīng)完全。將反應(yīng)液倒在150ml冰上，放置后有大量泡沫狀白色固體析出，抽濾，水洗得白色固體。此固體用二氯甲烷溶液溶解后，水洗，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉干燥，石油醚/丙酮(3:1)減壓柱層析的白色泡沫狀固體6(5.4g，80％)。
1hnmr(400mhz,cdcl3):δ8.076(s,1h),7.358(s,1h),7.056(s,1h),6.783(s,1h),5.675(dd,1h,j＝9.6hz,j＝2.4hz),4.702(t,1h,j＝8.0hz),4.332(d,1h,j＝7.6hz),4.109(d,1h,j＝8.8hz),3.730(q,1h,j＝6.8hz),3.457～3.497(m,1h),3.142(d,1h,j＝6.4hz),3.018(t,3h,j＝6.0hz),2.769(s,3h),2.624(t,1h,j＝8.8hz),2.244(s,6h),2.024(s,3h),1.817～1.849(m,6h),1.605～1.726(m,3h),1.412～1.430(m,3h),1.340～1.357(m,3h),1.390(s,3h),1.198～1.229(m,3h),0.934(t,3h,j＝7.2hz).
13cnmr(100mhz,cdcl3):205.259,169.983,169.129,146.225,138.421,137.323,131.193,117.380,102.226,84.815,81.232,78.826,71.815,69.425,63.355,53.707,51.309,50.542,47.683,40.912,40.565,39.220,30.550,22.926,21.656,21.218,20.974,20.444,19.190,15.331,14.294,13.540,10.745.
hr-ms(esi)(m+h)+m/z706.3895,計(jì)算值：c33h58n2o14706.3883.
實(shí)施例部分
實(shí)施例1
(s1)11,12-二脫氧-3-o-脫克拉定糖-6-o-甲基-3-氧代-12,11-(氧羰基(4-異喹啉基-3(e)-丁烯基)亞氨基)紅霉素的制備
化合物s1的合成路線：
將中間體6(0.71g，1eq)和中間體(a2，4eq)溶解在10ml的乙腈/水(9:1)混合體系中，加熱回流過夜。反應(yīng)液冷卻到室溫，加入二氯甲烷稀釋反應(yīng)液，然后用飽和食鹽水洗3次。有機(jī)相用無水硫酸鈉干燥，過濾，旋干。殘留物經(jīng)柱層析分離得到目標(biāo)化合物s1。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ9.10(s,1h),8.57(s,1h),8.11(d,j＝8.4hz,1h),8.01–7.85(m,2h),7.68(dd,j＝17.3,9.7hz,2h),7.56(dd,j＝17.9,10.5hz,1h),7.15(d,j＝15.7hz,1h),6.33(tt,j＝15.2,7.6hz,1h),4.99(d,j＝9.4hz,1h),4.97–4.81(m,1h),4.35(d,j＝7.1hz,2h),4.24(d,j＝8.5hz,1h),4.23–4.05(m,3h),3.91(dd,j＝16.1,10.7hz,2h),3.88–3.76(m,3h),3.74–3.62(m,2h),3.62–3.51(m,2h),3.45–3.29(m,2h),3.23–3.01(m,4h),2.94(dd,j＝12.3,7.8hz,2h),2.74(s,4h),2.73–2.46(m,16h),2.38(d,j＝22.4hz,1h),1.88(d,j＝11.4hz,2h),1.84–1.68(m,3h),1.60(dd,j＝27.8,14.4hz,2h),1.52–1.41(m,6h),1.40–1.33(m,8h),1.26(dd,j＝12.3,6.6hz,17h),1.16(d,j＝6.8hz,5h),1.14–1.09(m,2h),1.03(d,j＝6.8hz,3h),0.96(d,j＝6.6hz,3h),0.92–0.71(m,6h),0.54(dt,j＝14.6,7.3hz,3h).13cnmr(101mhz,cdcl3)δ216.18,203.91,169.64,157.21,151.26,140.28,133.57,132.25,130.29,127.82,126.99,125.84,123.32,103.12,82.22,79.36,78.08,77.50,69.84,68.61,66.19,60.30,51.16,49.76,47.49,44.86,42.50,40.25,39.38,39.05,31.39,29.75,29.63,22.06,20.94,19.70,18.29,15.84,14.63,14.34,13.94,9.94.hr-ms(esi)(m+h)+m/z794.4536,calcdforc44h63n3o10793.4513.
實(shí)施例2
(s2)11,12-二脫氧-3-o-脫克拉定糖-6-o-甲基-3-氧代-12,11-(氧羰基(喹啉-7-羥基取代丙基)亞氨基)紅霉素的制備
化合物s2的合成路線：
將中間體6(0.71g，1eq)和中間體(b2，4eq)溶解在10ml的乙腈/水(9:1)混合體系中，加熱回流過夜。反應(yīng)液冷卻到室溫，加入二氯甲烷稀釋反應(yīng)液，然后用飽和食鹽水洗3次。有機(jī)相用無水硫酸鈉干燥，過濾，旋干。殘留物經(jīng)柱層析分離得到目標(biāo)化合物s2。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.80(s,1h),8.06(t,j＝9.3hz,1h),7.77–7.62(m,2h),7.56–7.33(m,1h),7.27–7.21(m,2h),7.16(dt,j＝15.0,7.5hz,2h),4.98(dd,j＝19.3,10.2hz,1h),4.36(t,j＝10.8hz,1h),4.29(d,j＝6.7hz,1h),4.27–4.20(m,2h),4.21–4.11(m,4h),4.07(d,j＝6.7hz,1h),3.95–3.78(m,5h),3.70–3.52(m,4h),3.36(dd,j＝19.2,11.7hz,1h),3.19–3.03(m,3h),2.94(dt,j＝29.6,19.6hz,2h),2.81–2.68(m,4h),2.64(s,2h),2.54(d,j＝27.2hz,9h),2.23(ddd,j＝19.4,17.5,8.9hz,4h),2.08–1.82(m,5h),1.78(d,j＝13.2hz,2h),1.74–1.52(m,6h),1.49(d,j＝18.6hz,5h),1.42–1.32(m,10h),1.26(dd,j＝12.3,6.9hz,3h),1.16(d,j＝6.8hz,6h),1.03(d,j＝6.8hz,6h),1.00–0.92(m,3h),0.91–0.72(m,3h).13cnmr(101mhz,cdcl3)δ215.94,203.84,169.66,160.07,157.08,150.28,135.72,130.87,128.77,128.62,123.47,120.12,118.77,107.78,103.05,82.24,79.28,78.03,77.20,71.74,69.80,68.57,66.23,65.76,65.51,60.52,51.14,49.75,47.36,44.84,41.27,40.24,39.29,38.97,31.86,30.50,29.74,29.63,29.25,27.65,26.90,22.62,22.16,20.94,19.69,19.10,18.24,15.70,14.52,14.39,14.06,13.84,13.67,10.35.hr-ms(esi)(m+h)+m/z798.4502,calcdforc43h63n3o10797.4463.
實(shí)施例3
(s3)11,12-二脫氧-3-o-脫克拉定糖-6-o-甲基-3-氧代-12,11-(氧羰基(3-(6-甲基-喹啉基)-3(e)-丁烯基)亞氨基)紅霉素的制備
化合物s3的合成路線：
將中間體6(0.71g，1eq)和中間體(c3，4eq)溶解在10ml的乙腈/水(9:1)混合體系中，加熱回流過夜。反應(yīng)液冷卻到室溫，加入二氯甲烷稀釋反應(yīng)液，然后用飽和食鹽水洗3次。有機(jī)相用無水硫酸鈉干燥，過濾，旋干。殘留物經(jīng)柱層析分離得到目標(biāo)化合物s3。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.84(s,1h),7.97(s,1h),7.96–7.84(m,2h),7.60–7.50(m,2h),7.46(t,j＝10.8hz,2h),6.71(d,j＝16.0hz,1h),6.40(dt,j＝28.4,10.0hz,1h),5.09–4.87(m,2h),4.40–4.13(m,5h),3.93–3.74(m,6h),3.62(dd,j＝16.2,7.3hz,2h),3.59–3.42(m,4h),3.32–3.19(m,2h),3.18–2.98(m,5h),2.93(dd,j＝17.1,8.0hz,1h),2.73(s,3h),2.62(dd,j＝26.6,8.7hz,7h),2.50(d,j＝3.5hz,7h),2.48–2.41(m,2h),2.38(s,10h),2.25(d,j＝10.3hz,1h),2.07–1.87(m,2h),1.78(dd,j＝26.6,12.3hz,6h),1.68–1.50(m,4h),1.49–1.41(m,7h),1.41–1.33(m,9h),1.33–1.20(m,23h),1.14(dd,j＝18.9,11.3hz,7h),1.10–1.04(m,2h),1.01(t,j＝5.9hz,6h),0.95–0.75(m,6h),0.57(t,j＝7.3hz,3h).13cnmr(101mhz,cdcl3)δ216.26,203.94,169.61,157.17,148.80,145.78,136.43,131.17,131.08,130.33,129.75,128.94,128.63,128.08,126.89,126.62,103.55,82.26,82.17,79.40,78.12,77.60,77.21,70.09,69.16,66.00,60.46,51.22,49.83,47.62,47.44,44.88,42.57,40.20,39.50,39.09,31.32,29.63,28.78,22.12,21.53,21.05,19.69,18.32,15.94,15.74,14.68,14.29,14.08,13.95,10.32,10.04.hr-ms(esi)(m+h)+m/z808.4702,calcdforc45h65n3o10807.4670.
實(shí)施例4
(s4)11,12-二脫氧-3-o-脫克拉定糖-6-o-甲基-3-氧代-12,11-(氧羰基(3-(6-甲氧基-喹啉基)-3(e)-丁烯基)亞氨基)紅霉素的制備
化合物s4的合成路線：
將中間體6(0.71g，1eq)和中間體(d3,4eq)溶解在10ml的乙腈/水(9:1)混合體系中，加熱回流過夜。反應(yīng)液冷卻到室溫，加入二氯甲烷稀釋反應(yīng)液，然后用飽和食鹽水洗3次。有機(jī)相用無水硫酸鈉干燥，過濾，旋干。殘留物經(jīng)柱層析分離得到目標(biāo)化合物s4。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.74(s,1h),7.99(s,1h),7.91(d,j＝9.1hz,1h),7.03(d,j＝2.2hz,1h),6.70(d,j＝15.9hz,1h),6.49–6.36(m,1h),4.98(d,j＝10.3hz,1h),4.33(d,j＝7.2hz,1h),4.26(t,j＝11.5hz,1h),3.91(d,j＝6.3hz,5h),3.83(dd,j＝12.1,5.3hz,5h),3.68–3.51(m,3h),3.34(dd,j＝9.7,7.5hz,1h),3.19–3.02(m,2h),2.87(dd,j＝17.6,8.4hz,1h),2.74(d,j＝14.5hz,3h),2.60(t,j＝17.0hz,4h),2.55–2.41(m,7h),1.77(dt,j＝14.8,9.4hz,3h),1.60(dd,j＝28.2,15.2hz,1h),1.51–1.40(m,4h),1.40–1.31(m,7h),1.26(dd,j＝14.0,7.7hz,10h),1.15(t,j＝7.6hz,4h),1.01(d,j＝6.8hz,3h),0.56(t,j＝7.3hz,3h).13cnmr(101mhz,cdcl3)δ216.25,203.96,169.61,157.80,157.20,147.27,143.25,130.63,130.27,130.01,129.11,128.88,121.59,105.14,103.23,82.19,79.34,78.09,77.63,77.20,69.90,68.76,66.13,60.49,55.46,51.21,49.81,47.56,44.86,42.55,40.20,39.44,39.10,31.34,29.62,29.44,22.11,20.97,19.68,18.29,15.95,14.68,14.31,13.95,10.00.hr-ms(esi)(m+h)+m/z824.4630,calcdforc45h65n3o11823.4619.
實(shí)施例5
(s5)11,12-二脫氧-3-o-脫克拉定糖-6-o-甲基-3-氧代-12,11-(氧羰基(3-(6-芐氧基-喹啉基)-3(e)-丁烯基)亞氨基)紅霉素的制備
化合物s5的合成路線：
將中間體6(0.71g，1eq)和中間體(e3,4eq)溶解在10ml的乙腈/水(9:1)混合體系中，加熱回流過夜。反應(yīng)液冷卻到室溫，加入二氯甲烷稀釋反應(yīng)液，然后用飽和食鹽水洗3次。有機(jī)相用無水硫酸鈉干燥，過濾，旋干。殘留物經(jīng)柱層析分離得到目標(biāo)化合物s5。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.76(s,1h),8.02–7.89(m,2h),7.55–7.44(m,3h),7.40(t,j＝7.4hz,3h),7.35(dt,j＝14.5,5.4hz,3h),7.12(d,j＝2.5hz,1h),6.75–6.66(m,1h),6.41(dt,j＝13.3,7.0hz,1h),5.22–5.12(m,3h),4.98(d,j＝8.8hz,1h),4.38(t,j＝10.0hz,1h),4.26(t,j＝10.2hz,2h),3.92–3.76(m,5h),3.68–3.50(m,3h),3.41(dd,j＝9.8,7.4hz,1h),3.19–2.96(m,4h),2.76(d,j＝20.3hz,3h),2.60(d,j＝11.4hz,11h),2.03(d,j＝6.2hz,1h),1.90(d,j＝10.6hz,1h),1.85–1.72(m,2h),1.61(dd,j＝26.8,13.1hz,2h),1.51–1.43(m,5h),1.35(dd,j＝17.0,8.5hz,8h),1.30–1.22(m,12h),1.16(t,j＝7.7hz,5h),1.08(d,j＝6.8hz,1h),1.02(d,j＝6.8hz,4h),0.91–0.77(m,2h),0.57(t,j＝7.3hz,3h).13cnmr(101mhz,cdcl3)δ216.26,203.99,169.62,157.21,156.96,147.37,143.29,136.48,130.74,130.65,130.36,130.05,129.08,128.87,128.62,128.09,127.70,127.53,121.96,106.52,102.98,82.20,79.29,78.08,77.68,77.20,70.20,69.74,68.44,66.30,60.50,51.22,49.82,47.51,44.87,42.55,40.21,39.40,39.12,31.35,29.94,29.64,22.13,20.92,19.69,18.30,15.94,14.72,14.35,13.97,10.40,10.03.hr-ms(esi)(m+h)+m/z900.4957,calcdforc51h69n3o11899.4932.
實(shí)施例6
(s6)11,12-二脫氧-3-o-脫克拉定糖-6-o-甲基-3-氧代-12,11-(氧羰基(3-(6-苯基-喹啉基)-3(e)-丁烯基)亞氨基)紅霉素的制備
化合物s6的合成路線：
將中間體6(0.71g，1eq)和中間體(f3,4eq)溶解在10ml的乙腈/水(9:1)混合體系中，加熱回流過夜。反應(yīng)液冷卻到室溫，加入二氯甲烷稀釋反應(yīng)液，然后用飽和食鹽水洗3次。有機(jī)相用無水硫酸鈉干燥，過濾，旋干。殘留物經(jīng)柱層析分離得到目標(biāo)化合物s6。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.92(s,1h),8.16–8.05(m,3h),8.03–7.94(m,2h),7.89(d,j＝8.6hz,1h),7.71(d,j＝7.6hz,3h),7.60(d,j＝7.5hz,1h),7.47(dd,j＝15.5,8.1hz,3h),7.38(t,j＝6.9hz,2h),6.75(d,j＝15.9hz,1h),6.57–6.40(m,1h),5.00(d,j＝10.2hz,1h),4.31(d,j＝7.1hz,1h),4.24(t,j＝11.2hz,1h),3.98–3.81(m,3h),3.62(s,1h),3.61–3.50(m,2h),3.33–3.18(m,2h),3.19–3.01(m,3h),2.97–2.85(m,2h),2.75(s,3h),2.61(d,j＝4.2hz,5h),2.39(d,j＝17.0hz,7h),1.89–1.69(m,4h),1.62(dd,j＝27.2,11.9hz,2h),1.45(s,5h),1.38(d,j＝8.8hz,6h),1.30(d,j＝7.2hz,7h),1.25(d,j＝5.3hz,7h),1.17(d,j＝6.8hz,4h),1.04(t,j＝8.6hz,4h),0.59(t,j＝7.2hz,3h).13cnmr(101mhz,cdcl3)δ216.28,203.93,169.65,157.20,149.70,146.56,140.37,139.35,131.94,130.76,130.25,129.42,128.88,128.80,128.54,128.27,127.61,127.37,125.49,103.60,82.18,79.46,78.14,77.63,70.12,69.20,66.02,60.48,51.24,49.86,47.66,44.89,42.57,40.20,39.53,39.11,31.37,29.64,28.71,22.14,21.07,19.70,18.33,16.00,14.69,14.30,13.97,10.09.hr-ms(esi)(m+h)+m/z860.4933,calcdforc50h67n3o10859.4826.
實(shí)施例7(s7)11,12-二脫氧-3-o-脫克拉定糖-6-o-甲基-3-氧代-12,11-(氧羰基(3-(7-甲基-喹啉基)-3(e)-丁烯基)亞氨基)紅霉素的制備
化合物s7的合成路線：
將中間體6(0.71g，1eq)和中間體(f3，4eq)溶解在10ml的乙腈/水(9:1)混合體系中，加熱回流過夜。反應(yīng)液冷卻到室溫，加入二氯甲烷稀釋反應(yīng)液，然后用飽和食鹽水洗3次。有機(jī)相用無水硫酸鈉干燥，過濾，旋干。殘留物經(jīng)柱層析分離得到目標(biāo)化合物s7。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.87(s,1h),8.02(s,1h),7.78(dd,j＝14.7,7.0hz,2h),7.72–7.61(m,2h),7.31(d,j＝8.0hz,2h),6.70(d,j＝16.0hz,1h),6.48–6.33(m,1h),4.95(dd,j＝21.4,9.7hz,2h),4.31(t,j＝6.2hz,1h),4.22(dt,j＝16.4,7.0hz,3h),3.92–3.79(m,5h),3.64–3.44(m,6h),3.34–3.22(m,2h),3.17–3.01(m,4h),2.71(d,j＝13.8hz,5h),2.58(d,j＝9.4hz,5h),2.51(dd,j＝15.4,6.5hz,8h),2.43(s,11h),1.78(dd,j＝19.9,12.1hz,5h),1.64–1.52(m,3h),1.44(d,j＝4.7hz,6h),1.35(dd,j＝11.5,7.2hz,9h),1.26(dd,j＝13.8,6.9hz,21h),1.15(t,j＝7.6hz,6h),1.01(d,j＝6.8hz,5h),0.84(dtd,j＝21.1,13.9,7.2hz,4h),0.57(t,j＝7.3hz,3h).13cnmr(101mhz,cdcl3)δ216.24,203.95,169.59,157.18,149.63,147.36,139.06,131.74,131.54,129.60,129.41,128.90,127.99,127.88,127.43,127.16,126.06,103.40,82.16,79.36,78.10,77.62,70.02,68.99,66.06,60.78,60.45,51.21,49.83,47.58,47.42,44.86,42.58,40.22,39.47,39.09,31.29,29.62,29.07,22.12,21.81,21.01,19.68,18.31,15.94,15.73,14.69,14.30,14.07,13.95,10.34,10.02.hr-ms(esi)(m+h)+m/z808.4695,calcdforc45h65n3o10807.4670.
實(shí)施例8
(s8)11,12-二脫氧-3-o-脫克拉定糖-6-o-甲基-3-氧代-12,11-(氧羰基(3-(7-甲氧基-喹啉基)-3(e)-丁烯基)亞氨基)紅霉素的制備
化合物s8的合成路線：
將中間體6(0.71g，1eq)和中間體(h3，4eq)溶解在10ml的乙腈/水(9:1)混合體系中，加熱回流過夜。反應(yīng)液冷卻到室溫，加入二氯甲烷稀釋反應(yīng)液，然后用飽和食鹽水洗3次。有機(jī)相用無水硫酸鈉干燥，過濾，旋干。殘留物經(jīng)柱層析分離得到目標(biāo)化合物s8。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.84(s,1h),8.02(s,1h),7.64(t,j＝7.9hz,2h),7.37(d,j＝7.3hz,3h),7.21–7.11(m,3h),6.70(d,j＝16.0hz,1h),6.44–6.30(m,1h),5.03–4.90(m,2h),4.35–4.17(m,4h),3.93(d,j＝3.8hz,8h),3.90–3.79(m,5h),3.66–3.45(m,6h),3.29–3.17(m,3h),3.09(ddd,j＝20.5,13.3,5.4hz,6h),2.76(d,j＝13.3hz,3h),2.66–2.54(m,7h),2.48(d,j＝23.2hz,2h),2.34(d,j＝12.8hz,12h),1.88–1.54(m,11h),1.47(dd,j＝13.4,8.2hz,7h),1.41–1.33(m,10h),1.29(ddd,j＝17.4,14.5,7.3hz,31h),1.16(t,j＝7.6hz,8h),1.11–1.06(m,2h),1.02(t,j＝6.1hz,6h),0.93–0.77(m,8h),0.58(t,j＝7.3hz,3h).13cnmr(101mhz,cdcl3)δ216.27,203.96,169.61,160.27,157.20,149.89,148.81,131.59,128.88,128.83,128.77,128.52,123.25,119.80,107.13,103.72,82.34,82.16,79.47,78.14,77.65,70.21,69.37,65.96,60.48,55.44,51.25,49.87,47.68,47.51,44.90,42.64,40.21,39.56,39.13,31.30,29.66,29.28,28.46,22.65,22.15,21.11,19.71,18.36,15.98,15.78,14.72,14.29,14.09,13.98,10.04.hr-ms(esi)(m+h)+m/z900.4963,calcdforc51h69n3o11899.4932.
實(shí)施例9
(s9)11,12-二脫氧-3-o-脫克拉定糖-6-o-甲基-3-氧代-12,11-(氧羰基(3-(7-芐氧基-喹啉基)-3(e)-丁烯基)亞氨基)紅霉素的制備
化合物s9的合成路線：
將中間體6(0.71g，1eq)和中間體(i3，4eq)溶解在10ml的乙腈/水(9:1)混合體系中，加熱回流過夜。反應(yīng)液冷卻到室溫，加入二氯甲烷稀釋反應(yīng)液，然后用飽和食鹽水洗3次。有機(jī)相用無水硫酸鈉干燥，過濾，旋干。殘留物經(jīng)柱層析分離得到目標(biāo)化合物s9。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.84(s,1h),8.02(s,1h),7.66(t,j＝7.4hz,2h),7.47(t,j＝6.9hz,6h),7.39(t,j＝7.3hz,3h),7.36–7.29(m,2h),7.23(d,j＝8.8hz,1h),6.69(d,j＝15.9hz,1h),6.44–6.30(m,1h),5.18(s,3h),4.99(d,j＝9.8hz,2h),4.39–4.32(m,1h),4.29–4.17(m,3h),3.92–3.80(m,4h),3.66–3.54(m,4h),3.40–3.28(m,1h),3.22(d,j＝5.8hz,1h),3.18–2.99(m,4h),2.90(d,j＝12.1hz,2h),2.79–2.67(m,4h),2.59(dd,j＝15.4,6.4hz,5h),2.54(d,j＝12.2hz,9h),1.81(dt,j＝18.0,11.3hz,4h),1.65–1.55(m,3h),1.45(s,6h),1.41–1.33(m,9h),1.27(dd,j＝13.2,6.9hz,24h),1.15(dd,j＝16.9,9.1hz,8h),1.02(d,j＝6.6hz,6h),0.93–0.75(m,8h),0.58(t,j＝7.1hz,4h).13cnmr(101mhz,cdcl3)δ216.25,203.99,169.60,159.38,157.19,149.83,148.64,136.39,131.63,128.90,128.59,128.09,127.69,123.38,120.16,108.27,103.18,82.17,79.31,78.09,77.67,70.13,69.86,68.72,66.18,60.49,51.22,49.83,47.54,44.88,42.62,40.20,39.43,39.12,31.28,29.64,29.46,29.26,22.63,22.14,20.97,19.69,18.31,15.94,14.72,14.33,14.07,13.96,10.35,10.05.hr-ms(esi)(m+h)+m/z836.4722,calcdforc46h65n3o11835.4619.
實(shí)施例10
(s10)11,12-二脫氧-2-氟-3-o-脫克拉定糖-6-o-甲基-3-氧代-12,11-(氧羰基(3-喹啉基-3(e)-丁烯基)亞氨基)紅霉素的制備
化合物s10的合成路線：
將原料(1.0mmol)溶解在10ml的吡啶中，冰水浴冷卻條件下滴加醋酸酐(2.0mmol)，滴畢，反應(yīng)液逐漸恢復(fù)到室溫，攪拌過夜。減壓條件下，蒸除吡啶，殘留物經(jīng)柱層析分離得到中間體j1。
將中間體j1(1.0mmol)溶解在四氫呋喃中，冰水浴條件下加入氫化鈉(1.5mmol)，攪拌0.5小時(shí)以后，再加入nisf(1.2mmol)，低溫?cái)嚢?小時(shí)后，加入飽和食鹽水淬滅反應(yīng)，用乙酸乙酯萃取反應(yīng)液三次，合并有機(jī)相，無水硫酸鈉干燥，過濾，旋干，殘留物經(jīng)柱層析分離得到中間體j2。
將j2(1.0mmol)溶解在10ml的甲醇中，加熱回流過夜，點(diǎn)板監(jiān)控反應(yīng)完畢。把反應(yīng)體系降到室溫，旋干，得到目標(biāo)產(chǎn)物s10。
1hnmr(400mhz,cdcl3):δ8.94(s,1h),8.03～8.08(m,2h),7.78(d,1h,j＝8.0hz),7.63(t,1h,j＝8.0hz),7.51(t,1h,j＝8.0hz),6.75(d,1h,j＝16.0hz),6.48(m,1h),5.00(d,1h,j＝10.0hz),4.31(d,1h,j＝7.2hz),4.26(d,1h,j＝8.0hz),3.86(m,3h),3.72(s,1h),3.63(s,1h),3.54(m,2h),3.22(m,2h),3.63(s,1h),3.14(m,3h),2.75(s,3h),2.61(m,3h),2.47(m,2h),2.32(s,6h),1.87(s,1h),1.79(d,1h,j＝21.0)1.82～1.77(m,2h),1.68～1.62(m,2h),1.46(s,3h),1.38(s,3h),1.26～1.25(m,6h),1.21(m,6h),1.18(d,3h,j＝7.2hz),1.04(d,3h,j＝6.8hz),0.94(m,3h),0.59(d,3h,j＝7.2hz).13cnmr(101mhz,cdcl3)δ216.57,202.67,166.17,157.00,151.81,134.65,131.65,128.92,128.57,127.75,127.50,126.90,126.61,126.37,104.04,82.10,80.62,78.40,78.33,70.23,69.42,65.72,60.97,49.35,48.99,44.56,44.51,40.69,40.14,39.56,39.16,35.68,31.30,29.55,28.22,22.06,21.05,21.01,19.59,17.82,14.62,13.91,10.33.hr-ms(esi)(m+h)+m/z812.4506,calcdforc44h62fn3o10811.4419.
實(shí)施例11
(s11)11,12-二脫氧-2-氟-3-o-脫克拉定糖-6-o-甲基-3-氧代-12,11-(氧羰基(喹啉-3-羥基取代丙基)亞氨基)紅霉素的制備
化合物s11的合成路線：
將原料(1.0mmol)溶解在10ml的吡啶中，冰水浴冷卻條件下滴加醋酸酐(2.0mmol)，滴畢，反應(yīng)液逐漸恢復(fù)到室溫，攪拌過夜。減壓條件下，蒸除吡啶，殘留物經(jīng)柱層析分離得到中間體k1。
將中間體k1(1.0mmol)溶解在四氫呋喃中，冰水浴條件下加入氫化鈉(1.5mmol)，攪拌0.5小時(shí)以后，再加入nisf(1.2mmol)，低溫?cái)嚢?小時(shí)后，加入飽和食鹽水淬滅反應(yīng)，用乙酸乙酯萃取反應(yīng)液三次，合并有機(jī)相，無水硫酸鈉干燥，過濾，旋干，殘留物經(jīng)柱層析分離得到中間體k2。
將k2(1.0mmol)溶解在10ml的甲醇中，加熱回流過夜，點(diǎn)板監(jiān)控反應(yīng)完畢。把反應(yīng)體系降到室溫，旋干，得到目標(biāo)產(chǎn)物s11。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.64(d,j＝2.7hz,1h),8.02(d,j＝8.1hz,1h),7.72(d,j＝7.6hz,1h),7.51(dt,j＝14.7,6.9hz,2h),7.38(d,j＝2.5hz,1h),4.93(d,j＝9.3hz,1h),4.31(d,j＝7.2hz,1h),4.10(dd,j＝26.1,7.9hz,3h),3.91(dd,j＝17.0,11.3hz,1h),3.86–3.73(m,1h),3.63–3.46(m,3h),3.21(dd,j＝10.0,7.4hz,1h),3.20–3.08(m,1h),2.62(s,4h),2.58–2.43(m,2h),2.31(s,5h),2.27–2.13(m,2h),2.12–1.94(m,2h),1.88(d,j＝12.1hz,1h),1.78(d,j＝21.4hz,2h),1.75–1.58(m,3h),1.58–1.46(m,3h),1.35(s,3h),1.30(d,j＝7.0hz,3h),1.24(t,j＝6.7hz,6h),1.18(d,j＝6.8hz,3h),1.04(d,j＝6.9hz,3h),0.86(t,j＝7.3hz,3h).13cnmr(101mhz,cdcl3)δ216.46,202.93,202.73,166.51,166.30,157.15,152.36,144.85,143.45,129.04,128.87,126.91,126.72,126.51,112.92,104.07,82.17,80.61,78.55,78.36,77.20,70.28,69.48,66.00,65.88,61.14,49.25,44.62,41.36,40.80,40.22,39.55,39.19,29.66,28.39,26.92,25.12,22.10,21.14,19.71,17.86,15.02,14.61,13.75,10.39.hr-ms(esi)(m+h)+m/z816.4533,calcdforc43h62fn3o11815.4368.
實(shí)驗(yàn)例部分
實(shí)驗(yàn)例1藥理實(shí)驗(yàn)：體外抗菌活性實(shí)驗(yàn)
本發(fā)明利用下述體外抗菌活性實(shí)驗(yàn)提供了上述化合物在抗菌方面的用途。
(1)試驗(yàn)方法：培養(yǎng)基與孵育條件
葡萄球菌和卡他莫拉菌在camhb培養(yǎng)基,35℃孵育16-20h；鏈球菌屬在加入5％馬血清的camhb培養(yǎng)基,35℃孵育20-24h；嗜血桿菌屬在htm肉湯培養(yǎng)基，35℃孵育20-24h。
最低抑菌濃度(mic)測定
采用標(biāo)準(zhǔn)微量肉湯二倍稀釋法?？咕幬餃y定濃度范圍64-0.004mg/l。被試菌液終濃度約為1×105cfu/ml。
(2)對照藥：克拉霉素(cla)，泰利霉素(teli)
臨床分離菌11株：
甲氧西林敏感、紅霉素敏感金黃色葡萄球菌-atcc29213
甲氧西林耐藥、紅霉素耐藥金黃色葡萄球菌-atcc33591
甲氧西林敏感、紅霉素敏感表皮葡萄球菌-atcc12228
甲氧西林耐藥、紅霉素耐藥表皮葡萄球菌-13-3
紅霉素敏感化膿性鏈球菌-11-8
紅霉素耐藥化膿性鏈球菌-12-1
克拉霉素敏感卡他莫拉菌-12-1
克拉霉素耐藥卡他莫拉菌-12-2
大腸埃希菌-atcc25922
肺炎克雷伯桿菌-atcc700603
銅綠假單胞菌-atcc27835
表1.化合物s1-s11及對照藥對11株菌的mic結(jié)果(mg/l)
實(shí)驗(yàn)證明，上述方法制備的本發(fā)明所述的結(jié)構(gòu)式為s1-s11的化合物樣品，具有廣譜性同時(shí)抑制革蘭氏陽性菌與革蘭氏陰性菌的突出的抗菌活性和抗耐藥菌活性。
以上所敘僅是本發(fā)明的較佳實(shí)施例，故凡依本發(fā)明申請專利范圍所敘的特征及方法，均包括于本發(fā)明專利范圍內(nèi)。