本發(fā)明公開了一種液體酶制劑及制備方法，具體涉及到一種可常溫存儲、性狀穩(wěn)定、酶活保存率超過80%的谷氨酰胺轉(zhuǎn)氨酶（EC.2.3.2.13）液體制劑及制備方法，屬于酶制劑領(lǐng)域和食品添加劑領(lǐng)域。

背景技術(shù)：
谷氨酰胺轉(zhuǎn)氨酶（EC.2.3.2.13，英文全稱Amineγ-glutamyl-transferase，英文簡稱Transglutaminase，縮寫名為TG）是一種蛋白交聯(lián)酶，能以蛋白質(zhì)肽鏈中賴氨酸的ε-氨基為?；荏w，催化蛋白質(zhì)分子內(nèi)和分子間形成ε-(γ-谷氨?；?賴氨酸的異型肽鍵，改善蛋白質(zhì)的乳化性、流變性、溶解性、起泡性等多種性質(zhì)，賦予蛋白質(zhì)特有的質(zhì)構(gòu)特性和粘合性，提高產(chǎn)品的色香味，具有很大的市場價值。谷氨酰胺轉(zhuǎn)氨酶最早是由Clarke等人從豚鼠肝臟中分離得到。1989年由日本Amano公司的Ando等人發(fā)明了微生物發(fā)酵法生產(chǎn)谷氨酰胺轉(zhuǎn)氨酶，1997年由日本味之素公司實現(xiàn)了商業(yè)規(guī)模化生產(chǎn)，2001年我國將谷氨酰胺轉(zhuǎn)氨酶正式列為食品添加劑。目前全球范圍內(nèi)主要發(fā)酵生產(chǎn)廠家為日本味之素公司，谷氨酰胺轉(zhuǎn)氨酶產(chǎn)品品牌為Acvita，國內(nèi)主要生產(chǎn)企業(yè)有上海青瑞食品科技有限公司，濟南青瑞生物科技有限公司、泰興市東圣食品科技有限公司、泰興市一鳴生物制品有限公司、河南仰韶生化工程有限公司等企業(yè)，產(chǎn)品為固體粉末型酶制劑，并由上海青瑞食品科技有限公司率先使用立體真空包裝，日本味之素公司至今采用粉末充氮包裝。目前谷氨酰胺轉(zhuǎn)氨酶粉末制劑雖然已經(jīng)實現(xiàn)規(guī)?；a(chǎn)，并在食品加工行業(yè)獲得廣泛應(yīng)用。但在生產(chǎn)、運輸、貯存、應(yīng)用中還存在很多問題：1）生產(chǎn)成本：由于在谷氨酰胺轉(zhuǎn)氨酶生產(chǎn)過程過程中，首先獲得的發(fā)酵液體，酶液精制過程中，需要沉淀，干燥，粉碎等加工步驟，工序繁雜，導致生產(chǎn)成本上升；2）安全防護：在生產(chǎn)和使用過程中谷氨酰胺轉(zhuǎn)氨酶粉末制劑，容易擴散，導致車間環(huán)境變惡劣，設(shè)備難以清洗；操作空間充斥粉塵，防護困難，酶粉末被人體吸入后，引發(fā)強烈過敏性反應(yīng)，嚴重損害操作人員的呼吸道器官，出現(xiàn)高燒、肺炎、休克等癥狀，對操作人員健康產(chǎn)生很大危害，目前為止，工廠里已經(jīng)多次發(fā)生谷氨酰胺轉(zhuǎn)氨酶引起咳嗽、發(fā)燒等過敏變態(tài)反應(yīng)癥狀的事件；3）包裝問題：谷氨酰胺轉(zhuǎn)氨酶粉末酶制劑采用真空包裝，在抽真空時粉末容易吸入設(shè)備，造成一定損失；如果酶制劑包裝封口不嚴，產(chǎn)生漏氣現(xiàn)象，則容易發(fā)生吸潮、結(jié)塊、酶活降低等現(xiàn)象，若采用充氮包裝，由于充氮操作繁瑣并導致大量揚塵，且生產(chǎn)成本大幅增加；4）應(yīng)用方面：眾所周知，谷氨酰胺轉(zhuǎn)氨酶只有在水中溶解狀態(tài)才能發(fā)揮作用。在生產(chǎn)應(yīng)用中，粉末制劑存在二次溶解過程，大大減少了酶發(fā)揮作用的時間。并且經(jīng)常出現(xiàn)加水沒完全溶解的現(xiàn)象或者直接添加粉末容易出現(xiàn)分布不均勻，同時使用設(shè)備進行滾揉操作時，容易黏連到設(shè)備上，導致粉末制劑利用率降低、應(yīng)用效果差，從而不得不增加谷氨酰胺轉(zhuǎn)氨酶粉末制劑用量；5）酶制劑發(fā)展趨勢：在生物酶制劑及各工業(yè)領(lǐng)域，已經(jīng)有很多類型酶制劑采用了液體劑型，并解決了保存、運輸以及應(yīng)用過程中存在問題，實現(xiàn)了經(jīng)濟化綠色化生產(chǎn)和使用，如液體纖維素酶（專利公開號：CN103981168A、CN101381716）、液體植酸酶（專利公開號：CN101617740）、液體果膠酶（專利公開號：CN104531653A）、液體脂肪酶（專利公開號：CN103525797A）等，但目前在全球范圍內(nèi)尚未有商業(yè)化的常溫長期穩(wěn)定儲存的谷氨酰胺轉(zhuǎn)氨酶的液體制劑。專利公開號CN104024406A提供了一種谷氨酰轉(zhuǎn)氨酶的液體酶制劑的制造方法，鑒于該方法為低溫下最長保存期180天，且需要在冷凍的條件下儲運，限制了該方法商業(yè)化使用，至今未見應(yīng)用此方法制造的成品。開發(fā)一種可在常溫條件（25℃，下同）下穩(wěn)定的液體谷氨酰胺轉(zhuǎn)氨酶穩(wěn)定酶制劑成為當前食品工業(yè)急需解決的課題。

技術(shù)實現(xiàn)要素：
本發(fā)明的目的之一是提供一種谷氨酰胺轉(zhuǎn)氨酶（EC2.3.2.13）的液體制劑，其可以在常溫下保存6個月，酶活保存率80%以上。本發(fā)明的目的之二是提供一種谷氨酰胺轉(zhuǎn)氨酶（EC2.3.2.13）的液體制劑的制備方法，該法制備得到的谷氨酰胺轉(zhuǎn)氨酶液體制劑具有良好穩(wěn)定性，可以在常溫下保存6個月，酶活保存率80%以上。本發(fā)明主要解決谷氨酰胺轉(zhuǎn)氨酶液體制劑在常溫下難保存的技術(shù)問題，可滿足商業(yè)化生產(chǎn)和使用要求。為了實現(xiàn)上述目的，需要先用實驗和理論闡述發(fā)明技術(shù)方案，隨后總結(jié)并給出本發(fā)明的技術(shù)方案，具體如下：首先，通過考察pH、水分活度、氧化還原電位等理化因素對影響谷氨酰轉(zhuǎn)氨酶液體在常溫條件下酶活保存率（穩(wěn)定性）的影響，確定谷氨酰胺轉(zhuǎn)氨酶在常溫下能夠穩(wěn)定保持的最佳pH范圍，水分活度，氧化還原電位范圍。1、不同pH值下谷氨酰胺轉(zhuǎn)氨酶酶液穩(wěn)定性取濃縮酶液，添加鹽酸以及氫氧化鈉，制成不同pH值谷氨酰胺轉(zhuǎn)氨酶溶液，無菌過濾后置常溫下2天考察酶活穩(wěn)定性，具體結(jié)果如表1，表1.不同pH值下的純化濃縮酶液的酶活變化由表1數(shù)據(jù)說明，谷氨酰胺轉(zhuǎn)氨酶在pH值為5.0-9.0時，純化酶液的酶活保存率達到80%以上，當pH高于9.0或低于4.0時，酶活降低很快，酶液的保存可選擇pH值為5.0-9.0，其中優(yōu)選pH為5.0-7.5。2、不同水分活度下谷氨酰胺轉(zhuǎn)氨酶液穩(wěn)定性取純化酶液，先用pH調(diào)節(jié)劑調(diào)節(jié)pH到6.0，并用調(diào)節(jié)緩沖液稀釋到1000u/ml，取10ml酶液，加入不同質(zhì)量丙三醇（表2），用緩沖液稀釋到100ml，無菌過濾后，獲得不同水分活度的液體酶制劑，常溫放置10天后考察液體酶液穩(wěn)定性，結(jié)果如表2，表2.不同水分活度下的純化濃縮酶液的酶活穩(wěn)定性由表2數(shù)據(jù)說明，添加水分活度調(diào)節(jié)劑，能夠延長谷氨酰胺轉(zhuǎn)氨酶液體制劑的常溫穩(wěn)定性，當水分活度低于0.89時，10天酶活保存率達到85%以上，水分活度低于0.85時，酶活保存率到達92%；水分活度繼續(xù)降低，對酶活的保存率影響不大。因此，水分活度低于0.89就能達到較好的保存率，但從原料添加成本考慮，故優(yōu)選水分活度值區(qū)間為0.60-0.85。3、不同氧化還原電位條件下谷氨酰轉(zhuǎn)氨酶酶液常溫穩(wěn)定性取純化濃液酶液，添加pH調(diào)節(jié)劑，調(diào)節(jié)pH到6.0，然后用氧化還原電位調(diào)節(jié)劑硼氫化鈉以及雙氧水進行調(diào)節(jié)酶液的氧化還原電位到不同值，無菌過濾后，置常溫下放置30、60、90天，檢測樣品酶液的酶活保存率，結(jié)果見表3，表3.谷氨酰轉(zhuǎn)氨酶液體制劑不同氧化還原電位酶活保存率由表3數(shù)據(jù)說明，氧化還原電位對谷氨酰轉(zhuǎn)氨酶液體制劑的穩(wěn)定性影響非常大，氧化還原電位在（-400mv）-50mv時，常溫下30天的保存率均超過80%，當液體酶制劑額的氧化還原電位低于50mv時，酶活保存率大大提升，電位值在-400mv到0mv之間，90天保存率會達到80%以上。優(yōu)選液體酶制劑的電位區(qū)間為-400mv到0mv。其次，考察各pH調(diào)節(jié)劑，水分活度調(diào)節(jié)劑，氧化還原電位調(diào)節(jié)劑對液體谷氨酰胺轉(zhuǎn)氨酶穩(wěn)定性的影響，篩選出合適的pH調(diào)節(jié)劑，水分活度調(diào)節(jié)劑，氧化還原調(diào)劑。4、不同pH調(diào)節(jié)劑對谷氨酰胺轉(zhuǎn)氨酶酶液穩(wěn)定性影響選擇鹽酸、硫酸、醋酸、乳酸、檸檬酸、蘋果酸、植酸、磷酸、硝酸、草酸、氫氧化鈉、氫氧化鉀、碳酸鈉、碳酸氫鈉、碳酸鉀、碳酸氫鉀、檸檬酸三鈉、檸檬酸三鉀、醋酸鈉、醋酸鉀、乳酸鈉、乳酸鉀、磷酸氫二鈉、磷酸氫二鉀、磷酸鈉、磷酸鉀以及自來水，純凈水，礦泉水中的一種，或者多種pH調(diào)節(jié)劑組成的緩沖液體系來調(diào)節(jié)純化的谷氨酰胺轉(zhuǎn)氨酶液體的pH到表1的范圍內(nèi)，考察不同pH調(diào)節(jié)劑和隨機不同組合pH調(diào)節(jié)劑對液體谷氨酰胺轉(zhuǎn)氨酶在常溫下的穩(wěn)定性，結(jié)果見表4-1、4-2、4-3，表4-1.不同堿性pH調(diào)節(jié)劑對液體谷氨酰胺轉(zhuǎn)氨酶穩(wěn)定性影響表4-2.不同酸性pH調(diào)節(jié)劑對液體谷氨酰胺轉(zhuǎn)氨酶穩(wěn)定性影響表4-3.不同組合型pH調(diào)節(jié)劑對液體谷氨酰胺轉(zhuǎn)氨酶穩(wěn)定性影響由表4-1、4-2、4-3數(shù)據(jù)說明，所選的酸性pH調(diào)節(jié)劑、堿性pH調(diào)節(jié)劑等溶液等對酶液的常溫保存無明顯區(qū)別和變化，因此可以任意選擇鹽酸、硫酸、醋酸、乳酸、檸檬酸、蘋果酸、植酸、磷酸、硝酸、草酸、氫氧化鈉、氫氧化鉀、碳酸鈉、碳酸氫鈉、碳酸鉀、碳酸氫鉀、檸檬酸三鈉、檸檬酸三鉀、醋酸鈉、醋酸鉀、乳酸鈉、乳酸鉀、磷酸氫二鈉、磷酸氫二鉀、磷酸鈉、磷酸鉀、自來水、純凈水、礦泉水中的一種，或者多種pH調(diào)節(jié)劑組成的緩沖液體系來調(diào)節(jié)谷氨酰胺轉(zhuǎn)氨酶液體的pH調(diào)節(jié)劑，考慮到生產(chǎn)操作上安全性以及在調(diào)節(jié)的操作中強酸強堿瞬間極端pH對谷氨酰胺轉(zhuǎn)氨酶活的影響，優(yōu)選含磷酸、醋酸、乳酸或檸檬酸中的一種或其鹽的緩沖液等具有pH緩沖能力的調(diào)節(jié)劑；5、不同水分活度調(diào)節(jié)劑及其用量對液體谷氨酰胺轉(zhuǎn)氨酶常溫穩(wěn)定性影響考察了常溫無菌條件下，在谷氨酰胺轉(zhuǎn)氨酶酶液中加入山梨糖醇、麥芽糖醇、丙二醇、丙三醇、木糖醇、聚乙二醇400、聚乙二醇600、聚乙二醇800、聚乙二醇20000、葡萄糖、海藻糖、蔗糖、麥芽糖、異麥芽糖、麥芽糊精、木糖醇一種或幾種組合，調(diào)節(jié)液體酶制劑水分活度到0.75，無菌條件下放置10天，驗證不同水分活度調(diào)節(jié)劑對谷氨酰胺轉(zhuǎn)氨酶酶液穩(wěn)定性的影響，具體結(jié)果表5-1，表5-1.不同水分活度調(diào)節(jié)劑對谷氨酰胺轉(zhuǎn)氨酶的酶活影響由表5-1數(shù)據(jù)說明，山梨糖醇、麥芽糖醇、丙二醇、丙三醇、木糖醇、聚乙二醇400、聚乙二醇600、聚乙二醇800、聚乙二醇20000、海藻糖、蔗糖、麥芽糖、異麥芽糖、麥芽糊精、木糖醇一種或幾種組合作為液體谷氨酰胺轉(zhuǎn)氨酶水分活度調(diào)節(jié)劑在0.75的水分活度情況下，對常溫液體酶制劑的穩(wěn)定性均有較好的保護作用，從結(jié)果來看，優(yōu)選含有山梨糖醇、麥芽糖醇、丙三醇的一種或者多元復配。用量為30-80%（w/v），優(yōu)選30-70%（w/v）；選取表5-1中的幾種水分活度調(diào)節(jié)劑，進一步考察其用量于常溫下酶活保存率的關(guān)系，并放置于無菌條件和pH6.0保存，測定常溫下10天后酶活保存率(%)，獲得結(jié)果如表5-2。表5-2.不同水分活度調(diào)節(jié)劑對谷氨酰胺轉(zhuǎn)氨酶的酶活影響注：表中A為麥芽糖醇；B為丙三醇；C為海藻糖；D為聚乙二醇600；E為丙三醇：山梨糖醇（9：1）；F為丙三醇：麥芽糖醇（7：3）；G為麥芽糖醇：山梨糖醇（9：1）；H為丙二醇：丙三醇：麥芽糖醇（1：5：4）；由表5-2數(shù)據(jù)說明，在最佳pH條件下，當水分調(diào)節(jié)劑用量超過30%時，以上單體或者組合的水分活度調(diào)節(jié)劑獲得常溫下10天后液體酶活保存率均超過80%，當水分活度調(diào)節(jié)劑超過40%用量時，酶活保存率均超過86%；隨著水分活度調(diào)節(jié)劑用量提高，酶活保存率均有所提高，但幅度不是很大。從成本角度出發(fā)，優(yōu)選水分活度調(diào)節(jié)劑含量在30-70%（w/v）之間。6、不同氧化還原電位調(diào)節(jié)劑對液體谷氨酰胺轉(zhuǎn)氨酶常溫穩(wěn)定性影響在優(yōu)選的氧化還原電位范圍內(nèi)，我們考察了不同氧化還原電位調(diào)節(jié)劑對液體谷氨酰胺轉(zhuǎn)氨酶穩(wěn)定性的影響，氧化還原電位調(diào)節(jié)劑用根據(jù)GB2760-2014標準規(guī)定最大用量。實驗將谷氨酰胺酶酶液用pH6.0檸檬酸緩沖液調(diào)節(jié)pH到6.0，丙三醇調(diào)節(jié)水分活度到0.73-0.75。由表6和表7數(shù)據(jù)說明，通過不同氧化還原電位調(diào)節(jié)劑對液體谷氨酰轉(zhuǎn)氨酶的氧化還原電位進行調(diào)節(jié)，在50mv到-150mv之間，在加有氧化還原電位調(diào)節(jié)劑的配方中，常溫下90天酶活保存率都達到80%以上，已經(jīng)具備一定的商業(yè)應(yīng)用價值。除乳酸鈉，乳酸鈣等氧化還原電位調(diào)節(jié)劑外，其他所有氧化還原電位調(diào)節(jié)劑配方180天常溫酶活保存率均在80%以上。表6不同氧化還原電位調(diào)節(jié)劑對液體谷氨酰胺轉(zhuǎn)氨酶液體制劑穩(wěn)定性影響表7中一種或多種（包括兩種）氧化還原電位調(diào)節(jié)劑組合使用時，液體谷氨酰胺轉(zhuǎn)氨酶酶活保存率在常溫180天后都能獲得80%以上，完全達到工業(yè)上生產(chǎn)應(yīng)用的要求?？紤]到成本以及人們對綠色天然的食品追求，我們優(yōu)選天然來源的L-抗壞血酸及其鹽，L-絲氨酸及其鹽，L-半胱氨酸及其鹽，還原型谷胱甘肽，茶多酚，大豆蛋白水解物，小麥蛋白水解物，酪蛋白水解物，殼聚糖水解物，竹葉抗氧化物，迷迭香提取物，甘草抗氧化提取物等天然電位調(diào)節(jié)劑；或低成本的超氧基歧化酶，葡萄糖氧化酶，亞硫酸氫鈉，焦亞硫酸鈉，焦亞硫酸鉀，亞硫酸鈉，低亞硫酸鈉，植酸等，依據(jù)表6和表7所列的添加量，氧化還原電位調(diào)節(jié)劑的添加量設(shè)定為0.0075-1%。表7多種氧化還原電位調(diào)節(jié)劑對對液體谷氨酰胺轉(zhuǎn)氨酶液體制劑穩(wěn)定性影響通過添加pH調(diào)節(jié)劑，水分活度調(diào)節(jié)劑，以及氧化還原電位調(diào)節(jié)劑，我們將液體谷氨酰胺轉(zhuǎn)氨酶調(diào)節(jié)到（pH5.0-9.0，水分活度<0.89，氧化還原電位在-400mv到+50mv）范圍內(nèi)，液體酶制劑在無菌條件下實現(xiàn)了常溫180天80%以上的保存率，基本達到了可商業(yè)上應(yīng)用的穩(wěn)定型液體谷氨酰胺轉(zhuǎn)氨酶制劑。然后，根據(jù)GB25594-2010要求，作為食品工業(yè)用酶制劑還需要達相應(yīng)的微生物指標等衛(wèi)生學標準。進一步地考察水分活度、食品防腐劑，無菌過濾灌裝等方法對液體谷氨酰胺轉(zhuǎn)氨酶制劑菌落總數(shù)以及有害微生物指標的影響。7、不同濃度水分活度調(diào)節(jié)劑對液體谷氨酰胺轉(zhuǎn)氨酶常溫保存菌落總數(shù)影響谷氨酰胺轉(zhuǎn)氨酶濃縮酶液調(diào)節(jié)pH到6.0，加入1%小麥水解蛋白（w/v）調(diào)節(jié)氧化還原電位，加入不同質(zhì)量的丙三醇%（w/v）并添加pH調(diào)節(jié)劑補齊體積，獲得液體酶制劑不同水分活度，在開放條件下分裝，考察常溫儲存過程中酶制劑的菌落總數(shù)的變化，結(jié)果如表8，表8.不同濃度水分活度調(diào)節(jié)劑對液體酶制劑中菌落總數(shù)的影響由表8數(shù)據(jù)說明，當水分活度高于0.85時，甘油含量低于40%，谷氨酰胺轉(zhuǎn)氨酶液體酶制劑在沒有防腐劑的情況下，微生物會大量繁殖，在180天常溫保存期內(nèi)，其菌落總數(shù)超過有關(guān)法規(guī)要求。當水分活度調(diào)節(jié)劑大于40%的時候，由于本身的水分活度較低，基本能夠抑制微生物的生長繁殖。考慮到食品工業(yè)用酶制劑的衛(wèi)生指標要求，我們優(yōu)選水分活度調(diào)節(jié)劑大于40%-80%的配方組成。8、不同食品防腐劑對酶液中微生物的影響取谷氨酰胺轉(zhuǎn)氨酶酶液，加0.02MpH6.0檸檬酸鈉緩沖溶液稀釋到1000u/ml，取稀釋后的酶液100ml，加入丙三醇300g，添加10g小麥蛋白水解物電位調(diào)節(jié)劑，加入0.02MpH6.0檸檬酸鈉緩沖溶液定容到1000ml。按表9中加入GB2760-2014所列明的食品防腐劑，對照分別為A：未加任何防腐劑，B：未加防腐劑但采用0.1-0.22微米膜過濾無菌灌裝；實驗樣品酶液開放條件下裝入PET不透明的瓶子，置常溫下放置180天，參照GB4789.2-2010食品安全國家標準《食品微生物學檢驗菌落總數(shù)測定》、GB4789.3食品安全國家標準《食品微生物學檢驗大腸菌群計數(shù)》、GB/T4789.38食品安全國家標準《食品微生物學檢驗大腸埃希氏菌計數(shù)》、GB4789.4-2010食品安全國家標準《食品微生物學檢驗沙門氏菌檢驗》進行微生物檢測，具體結(jié)果見表9，表9.不同食品防腐劑對液體酶制劑中微生物的影響由表9數(shù)據(jù)說明，在水分活度調(diào)節(jié)劑濃度低至30%（w/v）時，各食品防腐劑在法規(guī)允許添加量的條件下，均可以有效抑制微生物繁殖，從而保證谷氨酰胺轉(zhuǎn)氨酶酶液的衛(wèi)生安全?？紤]到客戶偏好和各種食品防腐劑的應(yīng)用范圍，生產(chǎn)中可以選擇一種或者幾種復配用于液體谷氨酰胺轉(zhuǎn)氨酶的生產(chǎn)，優(yōu)選天然食品防腐劑ε-聚賴氨酸，納他霉素，溶菌酶，乳酸鏈球菌素等或者在工藝上采用0.1微米膜過濾除菌后無菌灌裝，從應(yīng)用成本考慮也可以選擇添加山梨酸及山梨酸鉀、雙乙酸鈉、脫氫乙酸鈉、對羥基苯甲酸甲酯、焦亞硫酸鉀、焦亞硫酸鈉中的一種或多種?；蛘咴诠に嚿喜捎?.1微米膜過濾除菌后無菌灌裝。9、不同酶活力的液體制劑在常溫下的穩(wěn)定性影響取不同量的純化濃縮酶液，加入50%（w/v）丙三醇，0.1%（w/v）亞硫酸氫鈉，并添加pH調(diào)節(jié)劑補齊體積至1000ml，無菌過濾后置常溫下放置180天后測定酶活比較酶活保存率%。表10.不同酶活的酶液對液體谷氨酰胺轉(zhuǎn)氨酶的穩(wěn)定性由表10可以看出不同酶活的酶液對液體谷氨酰胺轉(zhuǎn)氨酶的穩(wěn)定性影響不是很明顯，但從實際使用情況看，液體制劑的酶活應(yīng)控制在10-1000酶活為最合適。通過上述各種理化因素對谷氨酰胺轉(zhuǎn)氨酶酶液在常溫條件下酶活保存率（穩(wěn)定性）的影響的考察，我們確定谷氨酰胺轉(zhuǎn)氨酶液體制劑的在常溫下能夠穩(wěn)定保持的最佳pH范圍以及pH調(diào)節(jié)劑的種類，水分活度范圍以及水分調(diào)劑用量，氧化還原電位范圍以及可以應(yīng)用于谷氨酰胺轉(zhuǎn)氨酶液體制劑的氧化還原電位調(diào)節(jié)劑的種類。進一步地，確定了生產(chǎn)上可以采用無菌過濾灌裝或添加防腐劑的方法實現(xiàn)液體酶制劑常溫穩(wěn)定保存的方法。本發(fā)明以多方法聯(lián)合使用提高酶穩(wěn)定性、達到協(xié)同增強酶穩(wěn)定性為原則，并通過對生產(chǎn)過程中的中間指標參數(shù)控制，成功解決了谷氨酰胺轉(zhuǎn)氨酶液體制劑在常溫下保存問題，并研究出一種常溫下穩(wěn)定性良好、可長期保存、可商業(yè)規(guī)模化生產(chǎn)的谷氨酰胺轉(zhuǎn)氨酶液體制劑，對于谷氨酰胺轉(zhuǎn)氨酶的生產(chǎn)成本降低、節(jié)能環(huán)保、健康使用、市場推廣具有重要意義。綜上所述，本發(fā)明的技術(shù)方案具體內(nèi)容如下：一種液體酶制劑，其特征在于該液體酶制劑為一種含10-1000u/ml酶活力的谷氨酰胺轉(zhuǎn)氨酶EC2.3.2.13液體酶制劑；一種液體酶制劑，其特征在于各組分含量為：谷氨酰胺轉(zhuǎn)氨酶液體制劑的酶活為10-1000u/ml、水分活度調(diào)節(jié)劑重量體積百分含量30-80%、氧化還原電位調(diào)節(jié)劑重量體積百分含量0.0075-1%、食品防腐劑重量體積百分含量0-0.1%、pH調(diào)節(jié)劑補齊到100%體積。該液體酶制劑的理化性質(zhì)有如下特點：（1）液體酶制劑的pH5.0-9.0；優(yōu)選pH5.0-7.5；（2）水分活度Aw≤0.89；優(yōu)選水分活度0.60-0.85；（3）氧化還原電位為(-400mv)-50mv；優(yōu)選氧化還原電位為（-400mv）-0mv；所述的pH調(diào)節(jié)劑為鹽酸、硫...