技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明涉及皺紋盤鮑基因組DNA的提取方法,步驟如下:(1)取皺紋盤鮑肌肉組織粉碎后加入到含500μL?STE及50μL?10%?SDS裂解緩沖液的離心管中,并加入5μL濃度為20mg/mL的蛋白酶K,55-57℃水浴10-60min;(2)加入250μL飽和酚、250μL氯仿/異戊醇(24:1),輕柔晃動5-15min,室溫10000-12000rpm離心8-15min;(3)吸取上清液至新離心管中,重復(fù)步驟(2);(4)吸取上清液至新離心管中,加入500μL氯仿/異戊醇,輕柔晃動5-15min,室溫10000-12000rpm離心8-15min;(5)吸取上清液,加入50μL?3M?NaAc,添加1mL在-20℃預(yù)冷的無水乙醇,-20℃放置20-50min,10000-15000rpm離心8-15min,得到DNA沉淀;(6)70%乙醇洗滌沉淀1-3次;(7)沉淀干燥溶解去RNA;本發(fā)明的方法特別適于皺紋盤鮑DNA的提取,提取的DNA濃度、純度非常高,適于文庫構(gòu)建、PCR等后續(xù)研究。
技術(shù)研發(fā)人員:焦秀花
受保護的技術(shù)使用者:焦秀花
文檔號碼:201510956358
技術(shù)研發(fā)日:2015.12.21
技術(shù)公布日:2017.06.27