本發(fā)明涉及生物酶改性加工處理技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種提高β-甘露聚糖酶活性的低溫等離子體處理方法。

背景技術(shù)：

β-甘露聚糖酶是水解以β-1,4-D-吡喃甘露糖為主鏈的甘露寡糖、甘露多糖(甘露聚糖、葡萄甘露聚糖、半乳甘露聚糖)的內(nèi)切水解酶。β-甘露聚糖酶的來(lái)源較廣泛，包括細(xì)菌、真菌、放線菌、植物及軟體動(dòng)物等。其中，微生物是產(chǎn)生β-甘露聚糖酶的主要來(lái)源。細(xì)菌中的芽孢桿菌、假單胞菌、弧菌，真菌的曲霉、木霉、酵母、青霉、多孔菌、核盤(pán)菌和放線菌中的鏈霉菌都是產(chǎn)生β-甘露聚糖酶的常見(jiàn)類(lèi)群。

β-甘露聚糖酶作為一種生物催化劑，具有高效專(zhuān)一性、反應(yīng)條件溫和、對(duì)環(huán)境無(wú)污染等顯著優(yōu)點(diǎn)，被運(yùn)用于多個(gè)領(lǐng)域。如在飼料工業(yè)中，β-甘露聚糖酶作為一種綠色飼料添加劑，用于提高飼料的消化和吸收，降低成本，促進(jìn)動(dòng)物生長(zhǎng)等。在紡織工業(yè)中作為一種前處理生物酶，對(duì)棉織物進(jìn)行精煉，對(duì)麻類(lèi)織物進(jìn)行脫膠處理等，有效地避免了傳統(tǒng)化學(xué)脫膠所帶來(lái)的化學(xué)藥品用量大，能耗水耗高，環(huán)境污染嚴(yán)重等問(wèn)題。然而，作為生物酶制劑，β-甘露聚糖酶在使用中也存在催化活性受外界pH值、溫度等工藝條件影響大，活性及穩(wěn)定性不夠高，對(duì)底物降解速率低等問(wèn)題。因而，如何進(jìn)一步提高、改善β-甘露聚糖酶的催化活性及穩(wěn)定性，對(duì)增強(qiáng)其催化效率，擴(kuò)大其應(yīng)用范圍和使用條件，具有重要意義。

低溫等離子體是繼固態(tài)、液態(tài)、氣態(tài)之后的物質(zhì)第四態(tài)，當(dāng)外加電壓達(dá)到氣體的著火電壓時(shí)，氣體分子被擊穿，產(chǎn)生包括電子、離子、原子和自由基等混合體。低溫等離子體屬于激發(fā)、電離的高能狀態(tài)，其電子的負(fù)電荷和離子的正電荷總數(shù)相等，宏觀上對(duì)外不顯電性，呈中性。低溫等離子體放電過(guò)程雖然電子溫度很高，但重粒子溫度很低，整個(gè)體系呈現(xiàn)低溫狀態(tài)，所以稱(chēng)為低溫等離子體，也叫非平衡狀態(tài)等離子體。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

為解決上述技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明的目的是提供一種提高β-甘露聚糖酶活性的低溫等離子體處理方法，本發(fā)明提供的方法可以有效地提高β-甘露聚糖酶的活性，改善處理效果，且處理效率高，且低溫等離子體處理過(guò)程屬于干態(tài)處理法，不使用化學(xué)藥品，綠色環(huán)保，節(jié)能減排，具有非常廣闊的市場(chǎng)前景。

本發(fā)明的一種提高β-甘露聚糖酶活性的低溫等離子體處理方法，包括以下步驟：

(1)在低溫等離子體處理裝置的處理腔室中設(shè)置一上下通透的水平支架臺(tái)，支架臺(tái)上設(shè)有呈薄型平面狀的多孔材料，將β-甘露聚糖酶放在多孔材料上；

(2)對(duì)處理腔室進(jìn)行排空，通入工作氣體，并放電處理2-12min，其中氣體壓強(qiáng)為20-95Pa，放電功率為50-300W。

進(jìn)一步地，在步驟(1)中，多孔材料為多孔網(wǎng)狀物或多孔薄膜。

進(jìn)一步地，在步驟(1)中，多孔材料的材質(zhì)為高分子纖維或金屬纖維。高分子纖維為有機(jī)高分子纖維或無(wú)機(jī)高分子纖維。

進(jìn)一步地，在步驟(1)中，β-甘露聚糖酶為固態(tài)β-甘露聚糖酶。

進(jìn)一步地，在步驟(1)中，將甘露聚糖薄薄地、均勻地鋪放在多孔材料上。

進(jìn)一步地，在步驟(1)中，在步驟(2)中，放電形式為輝光放電。

進(jìn)一步地，在步驟(2)中，使用工作氣體先洗氣2-3次。洗氣結(jié)束后，開(kāi)啟進(jìn)氣閥，待氣流穩(wěn)定后，打開(kāi)放電裝置。

進(jìn)一步地，在步驟(2)中，工作氣體為氧氣、氮?dú)夂蜌鍤庵械囊环N或幾種。

進(jìn)一步地，在步驟(2)中，工作氣體為氧氣時(shí)，氣體壓強(qiáng)為65-95Pa，放電功率為50-100W，放電處理時(shí)間為2-10min。

進(jìn)一步地，在步驟(2)中，工作氣體為氮?dú)鈺r(shí)，氣體壓強(qiáng)為65-80Pa，放電功率為50-250W，放電處理時(shí)間為8-10min。

進(jìn)一步地，在步驟(2)中，工作氣體為氬氣時(shí)，氣體壓強(qiáng)為20-65Pa，放電功率為50-300W，放電處理時(shí)間為8-12min。

進(jìn)一步地，在步驟(2)之后，還包括以下步驟：

收集步驟(2)處理后的β-甘露聚糖酶，將其在2-8℃下密封保存。

本發(fā)明采用不同實(shí)驗(yàn)氣氛、氣體壓強(qiáng)、處理時(shí)間和放電功率等條件，對(duì)β-甘露聚糖酶進(jìn)行低溫等離子體干態(tài)處理，采用低溫等離子體中系列高能離子、電子等活性物質(zhì)與β-甘露聚糖酶作用，可實(shí)現(xiàn)對(duì)β-甘露聚糖酶的大分子及其鏈上官能團(tuán)進(jìn)行修飾，甚至可起空間構(gòu)象等發(fā)生改變，從可導(dǎo)致其活性和穩(wěn)定性發(fā)生明顯改善，有利于進(jìn)一步開(kāi)發(fā)β-甘露聚糖酶在紡織等領(lǐng)域的應(yīng)用潛力。

借由上述方案，本發(fā)明至少具有以下優(yōu)點(diǎn)：

1、本發(fā)明提供了一種提高β-甘露聚糖酶活性及穩(wěn)定性的低溫等離子體處理方法，通過(guò)對(duì)比低溫等離子體的處理前后β-甘露聚糖酶酶活性，發(fā)現(xiàn)低溫等離子體處理后β-甘露聚糖酶活性及穩(wěn)定性明顯提高；

2、本發(fā)明方法是對(duì)常規(guī)生物酶的改性加工處理，等離子體處理周期短、操作簡(jiǎn)單、方便快捷，處理成本低；

3、本發(fā)明方法屬于干態(tài)處理，沒(méi)用使用化學(xué)藥品，對(duì)環(huán)境無(wú)污染，有效地避免了傳統(tǒng)化學(xué)脫膠所帶來(lái)的化學(xué)藥品用量大，能耗水耗高，環(huán)境污染嚴(yán)重等問(wèn)題。

上述說(shuō)明僅是本發(fā)明技術(shù)方案的概述，為了能夠更清楚了解本發(fā)明的技術(shù)手段，并可依照說(shuō)明書(shū)的內(nèi)容予以實(shí)施，以下以本發(fā)明的較佳實(shí)施例并配合附圖詳細(xì)說(shuō)明如后。

附圖說(shuō)明

圖1是本發(fā)明β-甘露聚糖酶活性測(cè)試的標(biāo)準(zhǔn)曲線；

圖2是本發(fā)明實(shí)施例1、2、3中β-甘露聚糖酶處理結(jié)果圖；

圖3是本發(fā)明實(shí)施例4、5、6中β-甘露聚糖酶處理結(jié)果圖；

圖4是本發(fā)明實(shí)施例7、8、9中β-甘露聚糖酶處理結(jié)果圖。

具體實(shí)施方式

下面結(jié)合附圖和實(shí)施例，對(duì)本發(fā)明的具體實(shí)施方式作進(jìn)一步詳細(xì)描述。以下實(shí)施例用于說(shuō)明本發(fā)明，但不用來(lái)限制本發(fā)明的范圍。

本發(fā)明使用的試劑及其配制方法如下：

DNS試劑：稱(chēng)取3,5-二硝基水楊酸3.15g溶于500mL水，攪拌5s后置于45℃的水浴中。然后逐步加入100mL 0.2g/mL的氫氧化鈉溶液，同時(shí)不斷攪拌，保證溫度不高于48℃，直到溶液清澈透明。再逐步加入四水酒石酸鉀鈉91.0g、苯酚2.50g和無(wú)水亞硫酸鈉2.50g。繼續(xù)45℃水浴加熱，同時(shí)補(bǔ)加水300mL，不斷攪拌，直到加入的物質(zhì)完全溶解。停止加熱，冷卻至室溫后，加水定容1000mL。用燒結(jié)玻璃過(guò)濾器過(guò)濾。取濾液，儲(chǔ)存在棕色瓶中，避光保存。室溫下存放7天后可以使用，有效期為6個(gè)月。

緩沖液(pH＝4.8，0.1mol/L)：取0.1mol/L檸檬酸溶液460mL與0.1mol/L檸檬酸鈉溶液540mL混合均勻，調(diào)pH值至4.8備用。

D-甘露糖溶液(5mg/mL)：稱(chēng)取105℃下干燥直至恒重的甘露糖0.25000g，精確至0.0001g，用pH＝4.8的檸檬酸-檸檬酸三鈉緩沖液溶解，在50mL容量瓶中定容。

魔芋膠溶液(2mg/mL)：稱(chēng)取魔芋膠0.2000g，精確至0.0001g，用pH＝4.8的檸檬酸-檸檬酸三鈉緩沖液溶解，定容至100mL。

圖1是本發(fā)明β-甘露聚糖酶活性測(cè)試的標(biāo)準(zhǔn)曲線，其制作方法如下：

分別吸取5mg/mlD-甘露糖溶液0ml、1.0ml、1.5ml、2.0ml、2.5ml、3.0ml和3.5ml，分別用pH＝4.8的檸檬酸-檸檬酸三鈉緩沖溶液定容至50ml，配制出濃度為0、0.10mg/ml、0.15mg/ml、0.20mg/ml、0.25mg/ml、0.30mg/ml和0.35mg/mlD-甘露糖標(biāo)準(zhǔn)溶液。

取7支25ml具塞比色管編號(hào)1～7，吸取上述濃度系列的D-甘露糖標(biāo)準(zhǔn)溶液各2.0ml，分別依次加入到比色管，再分別加入3.0mlDNS試劑，搖勻，沸水浴中加熱5min。然后取出比色管冷卻到室溫，再加水定容至25ml，搖勻后靜置。以1號(hào)管溶液為空白對(duì)照樣，在TU-1810型紫外-可見(jiàn)分光光度儀上于400～700nm范圍內(nèi)依次測(cè)定和記錄各樣品的吸光度值。然后以D-甘露糖濃度C為縱坐標(biāo)，其對(duì)應(yīng)最大特征波長(zhǎng)處(λmax/485nm)的吸光度值A(chǔ)為橫坐標(biāo)，建立標(biāo)準(zhǔn)工作曲線。

實(shí)施例1

稱(chēng)取β-甘露聚糖酶0.200g，在低溫等離子腔體中設(shè)置一上下通透的水平支架臺(tái)，在該支架臺(tái)上設(shè)置一展開(kāi)的薄型平面多孔網(wǎng)狀物，再將β-甘露聚糖酶薄薄地、均勻地進(jìn)行分散布置，然后關(guān)閉低溫等離子體處理裝置的腔體門(mén)。

采用系統(tǒng)配置的真空泵對(duì)上述腔體進(jìn)行排空，并采用氬氣對(duì)反應(yīng)腔體進(jìn)行洗氣或氣體置換2-3次。本實(shí)施選用氬氣作為工作氣體，工作條件為：氣體壓強(qiáng)20Pa，放電功率100W，處理時(shí)間4min。洗氣過(guò)程結(jié)束后，開(kāi)啟進(jìn)氣閥，待處理氣氛壓強(qiáng)和氣流穩(wěn)定后，開(kāi)啟放電開(kāi)關(guān)進(jìn)行輝光放電，開(kāi)啟放電功率的同時(shí)開(kāi)始倒計(jì)時(shí)。處理完成后，關(guān)閉放電開(kāi)關(guān)、真空閥，然后關(guān)閉進(jìn)氣閥，待反應(yīng)腔體氣壓恢復(fù)到大氣壓后，開(kāi)啟腔體門(mén)，并收集處理后的β-甘露聚糖酶，在2-8℃下密封保存。

采用以下方法進(jìn)行酶活性和酶活性保留率測(cè)試：

β-甘露聚糖酶溶液(1.0mg/mL)：稱(chēng)取上述方法處理后的β-甘露聚糖酶0.05000g，精確到0.0001g，用pH＝4.8的檸檬酸-檸檬酸三鈉緩沖液溶解，定容至50mL。

在具塞比色管中加入2mg/mL魔芋膠溶液1mL，放入45℃恒溫水浴鍋中平衡10min，再加入同樣在45℃水浴鍋中平衡過(guò)的1.0mg/mLβ-甘露聚糖酶溶液1mL，搖勻，同時(shí)秒表立刻開(kāi)始計(jì)時(shí)。精確反應(yīng)10min后取出比色管，快速加入3mLDNS試劑，搖勻后立刻放入沸水中沸煮5min。取出后用冷水冷卻，加去離子水定容25mL，搖勻。將上述過(guò)程中的β-甘露聚糖酶替代為緩沖液，采用同樣的方法制備空白樣。將2mL緩沖液與3mL DNS沸煮5min定容25mL后的溶液為基線，測(cè)定485nm處實(shí)驗(yàn)樣和空白樣的吸光度值。

酶活性計(jì)算如下：

酶活性定義：在45℃、pH為4.8條件下，1gβ-甘露聚糖酶1min水解魔芋膠生成1ug D-甘露糖為1個(gè)催化活力單位，以U/g表示。同時(shí)依據(jù)上述實(shí)驗(yàn)所得標(biāo)準(zhǔn)工作曲線的擬合方程，其催化活性的計(jì)算公式如下：

式中，X表示樣品中的β-甘露聚糖酶催化活力，單位為U/g；A_E為試驗(yàn)樣品經(jīng)β-甘露聚糖酶催化水解反應(yīng)液的吸光度；A_B為對(duì)應(yīng)空白樣的吸光度；k和b分別是標(biāo)準(zhǔn)曲線的斜率和截距；V為酶解反應(yīng)液的體積，單位ml；t是β-甘露聚糖酶催化水解反應(yīng)時(shí)間，單位為min；m為反應(yīng)中加入的β-甘露聚糖酶質(zhì)量，單位g。

經(jīng)低溫等離子體處理后，β-甘露聚糖酶催化活性保留率R可依據(jù)如下公式計(jì)算得到：

式中，R為酶活性保留率，X₀和X₁分別指低溫等離子體處理前后β-甘露聚糖酶的活性，單位U/g。

采用上述方法測(cè)得低溫等離子體處理前β-甘露聚糖酶活性為33451.52U/g，而本實(shí)施例處理過(guò)的β-甘露聚糖酶活性為35224.25U/g，酶活性保留率為105.30％。結(jié)果如圖2中a所示?？梢钥闯鲈趯?shí)施例1處理?xiàng)l件下酶活性保留率大于100％，說(shuō)明β-甘露聚糖酶的酶活性?xún)?yōu)于處理前酶活性，酶活性得到了提高。

實(shí)施例2

稱(chēng)取β-甘露聚糖酶0.200g，在低溫等離子腔體中設(shè)置一上下通透的水平支架臺(tái)，在該支架臺(tái)上設(shè)置一展開(kāi)的薄型平面多孔網(wǎng)狀物，再將β-甘露聚糖酶薄薄地、均勻地進(jìn)行分散布置，然后關(guān)閉低溫等離子體處理裝置的腔體門(mén)。

采用系統(tǒng)配置的真空泵對(duì)上述腔體進(jìn)行排空，并采用氮?dú)鈱?duì)反應(yīng)腔體進(jìn)行洗氣或氣體置換2-3次。本實(shí)施選用氮?dú)庾鳛楣ぷ鳉怏w，工作條件為：氣體壓強(qiáng)65Pa，放電功率100W，處理時(shí)間4min。洗氣過(guò)程結(jié)束后，開(kāi)啟進(jìn)氣閥，待處理氣氛壓強(qiáng)和氣流穩(wěn)定后，開(kāi)啟放電開(kāi)關(guān)進(jìn)行輝光放電，開(kāi)啟放電功率的同時(shí)開(kāi)始倒計(jì)時(shí)。處理完成后，關(guān)閉放電開(kāi)關(guān)、真空閥，然后關(guān)閉進(jìn)氣閥，待反應(yīng)腔體氣壓恢復(fù)到大氣壓后，開(kāi)啟腔體門(mén)，并收集處理后的β-甘露聚糖酶，在2-8℃下密封保存。

采用實(shí)施例1中的方法測(cè)試處理前后的酶活性及酶活性保留率測(cè)試，結(jié)果如圖2中b所示。結(jié)果表明，低溫等離子體處理后本實(shí)施例β-甘露聚糖酶活性為34530.57U/g，酶活性保留率為103.23％。可以看出，在本實(shí)施例的處理?xiàng)l件下β-甘露聚糖酶的酶活性和酶活性保留率都得到了顯著提高。

實(shí)施例3

稱(chēng)取β-甘露聚糖酶0.200g，在低溫等離子腔體中設(shè)置一上下通透的水平支架臺(tái)，在該支架臺(tái)上設(shè)置一展開(kāi)的薄型平面多孔網(wǎng)狀物，再將β-甘露聚糖酶薄薄地、均勻地進(jìn)行分散布置，然后關(guān)閉低溫等離子體處理裝置的腔體門(mén)。

采用系統(tǒng)配置的真空泵對(duì)上述腔體進(jìn)行排空，并采用氧氣對(duì)反應(yīng)腔體進(jìn)行洗氣或氣體置換2-3次。本實(shí)施選用氧氣作為工作氣體，工作條件為：氣體壓強(qiáng)95Pa，放電功率100W，處理時(shí)間4min。洗氣過(guò)程結(jié)束后，開(kāi)啟進(jìn)氣閥，待處理氣氛壓強(qiáng)和氣流穩(wěn)定后，開(kāi)啟放電開(kāi)關(guān)進(jìn)行輝光放電，開(kāi)啟放電功率的同時(shí)開(kāi)始倒計(jì)時(shí)。處理完成后，關(guān)閉放電開(kāi)關(guān)、真空閥，然后關(guān)閉進(jìn)氣閥，待反應(yīng)腔體氣壓恢復(fù)到大氣壓后，開(kāi)啟腔體門(mén)，并收集處理后的β-甘露聚糖酶，在2-8℃下密封保存。

采用實(shí)施例1中的方法測(cè)試處理前后的酶活性及酶活性保留率測(cè)試，結(jié)果如圖2中c所示。結(jié)果表明，低溫等離子體處理后本實(shí)施例β-甘露聚糖酶活性為34453.50U/g，酶活性保留率為103.00％?？梢钥闯鲈诒緦?shí)施例的處理?xiàng)l件下β-甘露聚糖酶的酶活性和酶活性保留率都得到了提高。

實(shí)施例4

稱(chēng)取β-甘露聚糖酶0.200g，在低溫等離子腔體中設(shè)置一上下通透的水平支架臺(tái)，在該支架臺(tái)上設(shè)置一展開(kāi)的薄型平面多孔網(wǎng)狀物，再將β-甘露聚糖酶薄薄地、均勻地進(jìn)行分散布置，然后關(guān)閉低溫等離子體處理裝置的腔體門(mén)。

采用系統(tǒng)配置的真空泵對(duì)上述腔體進(jìn)行排空，并采用氧氣對(duì)反應(yīng)腔體進(jìn)行洗氣或氣體置換2-3次。本實(shí)施選用氧氣作為工作氣體，工作條件為：氣體壓強(qiáng)65Pa，放電功率50W，處理時(shí)間4min。洗氣過(guò)程結(jié)束后，開(kāi)啟進(jìn)氣閥，待處理氣氛壓強(qiáng)和氣流穩(wěn)定后，開(kāi)啟放電開(kāi)關(guān)進(jìn)行輝光放電，開(kāi)啟放電功率的同時(shí)開(kāi)始倒計(jì)時(shí)。處理完成后，關(guān)閉放電開(kāi)關(guān)、真空閥，然后關(guān)閉進(jìn)氣閥，待反應(yīng)腔體氣壓恢復(fù)到大氣壓后，開(kāi)啟腔體門(mén)，并收集處理后的β-甘露聚糖酶，在2-8℃下密封保存。

采用實(shí)施例1中的方法測(cè)試處理前后的酶活性及酶活性保留率測(cè)試，結(jié)果如圖3中a所示。結(jié)果表明，低溫等離子體處理后本實(shí)施例β-甘露聚糖酶活性為38384.34U/g，酶活性保留率為114.75％?？梢钥闯?，在本實(shí)施例的處理?xiàng)l件下β-甘露聚糖酶的酶活性和酶活性保留率都得到提高。

實(shí)施例5

稱(chēng)取β-甘露聚糖酶0.200g，在低溫等離子腔體中設(shè)置一上下通透的水平支架臺(tái)，在該支架臺(tái)上設(shè)置一展開(kāi)的薄型平面多孔網(wǎng)狀物，再將β-甘露聚糖酶薄薄地、均勻地進(jìn)行分散布置，然后關(guān)閉低溫等離子體處理裝置的腔體門(mén)。

采用系統(tǒng)配置的真空泵對(duì)上述腔體進(jìn)行排空，并采用氮?dú)鈱?duì)反應(yīng)腔體進(jìn)行洗氣或氣體置換2-3次。本實(shí)施選用氮?dú)庾鳛楣ぷ鳉怏w，工作條件為：氣體壓強(qiáng)65Pa，放電功率250W，處理時(shí)間4min。洗氣過(guò)程結(jié)束后，開(kāi)啟進(jìn)氣閥，待處理氣氛壓強(qiáng)和氣流穩(wěn)定后，開(kāi)啟放電開(kāi)關(guān)進(jìn)行輝光放電，開(kāi)啟放電功率的同時(shí)開(kāi)始倒計(jì)時(shí)。處理完成后，關(guān)閉放電開(kāi)關(guān)、真空閥，然后關(guān)閉進(jìn)氣閥，待反應(yīng)腔體氣壓恢復(fù)到大氣壓后，開(kāi)啟腔體門(mén)，并收集處理后的β-甘露聚糖酶，在2-8℃下密封保存。

采用實(shí)施例1中的方法測(cè)試處理前后的酶活性及酶活性保留率測(cè)試，結(jié)果如圖3中b所示。結(jié)果表明，低溫等離子體處理后本實(shí)施例β-甘露聚糖酶活性為35147.18U/g，酶活性保留率為105.07％。

實(shí)施例6

稱(chēng)取β-甘露聚糖酶0.200g，在低溫等離子腔體中設(shè)置一上下通透的水平支架臺(tái)，在該支架臺(tái)上設(shè)置一展開(kāi)的薄型平面多孔網(wǎng)狀物，再將β-甘露聚糖酶薄薄地、均勻地進(jìn)行分散布置，然后關(guān)閉低溫等離子體處理裝置的腔體門(mén)。

采用系統(tǒng)配置的真空泵對(duì)上述腔體進(jìn)行排空，并采用氬氣對(duì)反應(yīng)腔體進(jìn)行洗氣或氣體置換2-3次。本實(shí)施選用氬氣作為工作氣體，工作條件為：氣體壓強(qiáng)35Pa，放電功率300W，處理時(shí)間4min。洗氣過(guò)程結(jié)束后，開(kāi)啟進(jìn)氣閥，待處理氣氛壓強(qiáng)和氣流穩(wěn)定后，開(kāi)啟放電開(kāi)關(guān)進(jìn)行輝光放電，開(kāi)啟放電功率的同時(shí)開(kāi)始倒計(jì)時(shí)。處理完成后，關(guān)閉放電開(kāi)關(guān)、真空閥，然后關(guān)閉進(jìn)氣閥，待反應(yīng)腔體氣壓恢復(fù)到大氣壓后，開(kāi)啟腔體門(mén)，并收集處理后的β-甘露聚糖酶，在2-8℃下密封保存。

采用實(shí)施例1中的方法測(cè)試處理前后的酶活性及酶活性保留率測(cè)試，結(jié)果如圖3中c所示。結(jié)果表明，低溫等離子體處理后本實(shí)施例β-甘露聚糖酶活性為36226.23U/g，酶活性保留率為108.29％。

實(shí)施例7

稱(chēng)取β-甘露聚糖酶0.200g，在低溫等離子腔體中設(shè)置一上下通透的水平支架臺(tái)，在該支架臺(tái)上設(shè)置一展開(kāi)的薄型平面多孔網(wǎng)狀物，再將β-甘露聚糖酶薄薄地、均勻地進(jìn)行分散布置，然后關(guān)閉低溫等離子體處理裝置的腔體門(mén)。

采用系統(tǒng)配置的真空泵對(duì)上述腔體進(jìn)行排空，并采用氧氣對(duì)反應(yīng)腔體進(jìn)行洗氣或氣體置換2-3次。本實(shí)施選用氧氣作為工作氣體，工作條件為：氣體壓強(qiáng)65Pa，放電功率50W，處理時(shí)間2min。洗氣過(guò)程結(jié)束后，開(kāi)啟進(jìn)氣閥，待處理氣氛壓強(qiáng)和氣流穩(wěn)定后，開(kāi)啟放電開(kāi)關(guān)進(jìn)行輝光放電，開(kāi)啟放電功率的同時(shí)開(kāi)始倒計(jì)時(shí)。處理完成后，關(guān)閉放電開(kāi)關(guān)、真空閥，然后關(guān)閉進(jìn)氣閥，待反應(yīng)腔體氣壓恢復(fù)到大氣壓后，開(kāi)啟腔體門(mén)，并收集處理后的β-甘露聚糖酶，在2-8℃下密封保存。

采用實(shí)施例1中的方法測(cè)試處理前后的酶活性及酶活性保留率測(cè)試，結(jié)果如圖4中a所示。結(jié)果表明，低溫等離子體處理后本實(shí)施例β-甘露聚糖酶活性為36149.16U/g，酶活性保留率為108.06％。

實(shí)施例8

稱(chēng)取β-甘露聚糖酶0.200g，在低溫等離子腔體中設(shè)置一上下通透的水平支架臺(tái)，在該支架臺(tái)上設(shè)置一展開(kāi)的薄型平面多孔網(wǎng)狀物，再將β-甘露聚糖酶薄薄地、均勻地進(jìn)行分散布置，然后關(guān)閉低溫等離子體處理裝置的腔體門(mén)。

采用系統(tǒng)配置的真空泵對(duì)上述腔體進(jìn)行排空，并采用氮?dú)鈱?duì)反應(yīng)腔體進(jìn)行洗氣或氣體置換2-3次。本實(shí)施選用氮?dú)庾鳛楣ぷ鳉怏w，工作條件為：氣體壓強(qiáng)65Pa，放電功率50W，處理時(shí)間10min。洗氣過(guò)程結(jié)束后，開(kāi)啟進(jìn)氣閥，待處理氣氛壓強(qiáng)和氣流穩(wěn)定后，開(kāi)啟放電開(kāi)關(guān)進(jìn)行輝光放電，開(kāi)啟放電功率的同時(shí)開(kāi)始倒計(jì)時(shí)。處理完成后，關(guān)閉放電開(kāi)關(guān)、真空閥，然后關(guān)閉進(jìn)氣閥，待反應(yīng)腔體氣壓恢復(fù)到大氣壓后，開(kāi)啟腔體門(mén)，并收集處理后的β-甘露聚糖酶，在2-8℃下密封保存。

采用實(shí)施例1中的方法測(cè)試處理前后的酶活性及酶活性保留率測(cè)試，結(jié)果如圖4中a所示。結(jié)果表明，低溫等離子體處理后本實(shí)施例β-甘露聚糖酶活性為34145.19U/g，酶活性保留率為102.07％。可以看出在本實(shí)施例處理?xiàng)l件下β-甘露聚糖酶的酶活性和酶活性保留率都得到了提高。

實(shí)施例9

稱(chēng)取β-甘露聚糖酶0.200g，在低溫等離子腔體中設(shè)置一上下通透的水平支架臺(tái)，在該支架臺(tái)上設(shè)置一展開(kāi)的薄型平面多孔網(wǎng)狀物，再將β-甘露聚糖酶薄薄地、均勻地進(jìn)行分散布置，然后關(guān)閉低溫等離子體處理裝置的腔體門(mén)。

采用系統(tǒng)配置的真空泵對(duì)上述腔體進(jìn)行排空，并采用氬氣對(duì)反應(yīng)腔體進(jìn)行洗氣或氣體置換2-3次。本實(shí)施選用氬氣作為工作氣體，工作條件為：氣體壓強(qiáng)35Pa，放電功率200W，處理時(shí)間12min。洗氣過(guò)程結(jié)束后，開(kāi)啟進(jìn)氣閥，待處理氣氛壓強(qiáng)和氣流穩(wěn)定后，開(kāi)啟放電開(kāi)關(guān)進(jìn)行輝光放電，開(kāi)啟放電功率的同時(shí)開(kāi)始倒計(jì)時(shí)。處理完成后，關(guān)閉放電開(kāi)關(guān)、真空閥，然后關(guān)閉進(jìn)氣閥，待反應(yīng)腔體氣壓恢復(fù)到大氣壓后，開(kāi)啟腔體門(mén)，并收集處理后的β-甘露聚糖酶，在2-8℃下密封保存。

采用實(shí)施例1中的方法測(cè)試處理前后的酶活性及酶活性保留率測(cè)試，結(jié)果如圖4中a所示。結(jié)果表明，低溫等離子體處理后本實(shí)施例β-甘露聚糖酶活性為34684.72U/g，酶活性保留率為103.69％。

以上所述僅是本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方式，并不用于限制本發(fā)明，應(yīng)當(dāng)指出，對(duì)于本技術(shù)領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來(lái)說(shuō)，在不脫離本發(fā)明技術(shù)原理的前提下，還可以做出若干改進(jìn)和變型，這些改進(jìn)和變型也應(yīng)視為本發(fā)明的保護(hù)范圍。