1.一種治理黑臭河道的微生物菌液制備方法,其特征在于,包括以下步驟 :
(1) 采集河道底泥,通過高通量測(cè)序?qū)嶒?yàn)進(jìn)行底泥微生物群落多樣性分析,高通量測(cè)序流程包括對(duì)底泥DNA提取、PCR擴(kuò)增和產(chǎn)物純化、Miseq上機(jī)測(cè)序;
(2) 初期篩選,取河道底泥5~10g,接種于無菌脫氮菌富集培養(yǎng)液中,置于30℃培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng),培養(yǎng)3~4d,接入新鮮的富集培養(yǎng)液中,擴(kuò)大培養(yǎng)三次,獲得優(yōu)勢(shì)菌群初步篩選,檢測(cè)培養(yǎng)基中氨氮、硝酸鹽氮含量,取氮類積累少的混合菌液作為初篩的具有脫氮作用的菌群;
(3) 優(yōu)化富集篩選,向新鮮的優(yōu)化富集培養(yǎng)基接入初期篩選的優(yōu)勢(shì)脫氮菌液,置于30~35℃生化培養(yǎng)箱中培養(yǎng),如此反復(fù)富集培養(yǎng),直到獲得優(yōu)勢(shì)混合脫氮菌液,
(4) 在混合菌液中加入微量元素溶液,所述微量元素溶液包括ZnSO4·7H2O濃度3.93g/L、CaCl2濃度為5.5g/L、MnSO4·H2O濃度為4.32g/L、FeSO4·7H2O濃度5.0g/L、(NH4)6Mo7O2·4H2O濃度1.1g/L、CuSO4·5H2O濃度1.57g/L;CoCl2·6H2O濃度1.61g/L;
(5) 將加入微量元素的混合菌液接種于碳酸鈣和檸檬酸鈉為碳源的液體培養(yǎng)基中,碳源濃度為3g/L,設(shè)置溫度為30~35℃,進(jìn)行培養(yǎng),得到混合菌液;
(6) 混合菌液制成均勻的繁殖稀釋液,并接種到牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基,使其均勻分布于平板中,進(jìn)行培養(yǎng)。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種治理黑臭河道的微生物菌液制備方法,其特征在于:所述脫氮菌富集培養(yǎng)基為(NH4)2SO4(132)1g,KNO3(101)2g,檸檬酸鈉6g,K2HPO4 1g,七水硫酸鎂 0.2g,蒸餾水 1000ml,121℃,滅菌 20min。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種治理黑臭河道的微生物菌液制備方法,其特征在于:所述微量元素溶液的pH值為8。