本發(fā)明涉及萬(wàn)古霉素的制備方法技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種通過(guò)嗎啉-正丙醛制備萬(wàn)古霉素的制備方法。

背景技術(shù)：

萬(wàn)古霉素是抗生素的一種，其分子式為C66H74Cl2N9O24。其半衰期：4～8小時(shí)，腎衰竭9天，對(duì)厭氧菌和革蘭氏陰性細(xì)菌無(wú)效，血液透析不會(huì)移除。在印度等南亞國(guó)家出現(xiàn)的“超級(jí)病菌”NDM-1，已經(jīng)蔓延到英國(guó)、美國(guó)、加拿大、澳大利亞、荷蘭等國(guó)家，國(guó)內(nèi)專(zhuān)家稱(chēng)南亞超級(jí)病菌不會(huì)大流行，萬(wàn)古霉素能見(jiàn)效。

萬(wàn)古霉素屬于糖肽類(lèi)大分子抗生素，萬(wàn)古霉素的藥力較強(qiáng)，在其他抗生素對(duì)病菌無(wú)效時(shí)會(huì)被使用。主要用于葡萄球菌(包括耐青霉素和耐新青霉素株)、難辨梭狀芽胞桿菌等所致的系統(tǒng)感染和腸道感染，如心內(nèi)膜炎、敗血癥、偽膜性腸炎等。

為制得萬(wàn)古霉素，需要通過(guò)離子交換、脫色、色譜分離、超濾、納濾、結(jié)晶、溶解、冷凍干燥等多種提取精制手段。其中結(jié)晶過(guò)程可以提高萬(wàn)古霉素純度，去除部分色素等雜質(zhì)，但因萬(wàn)古霉素鹽酸鹽晶體生長(zhǎng)緩慢，結(jié)晶過(guò)程易受雜質(zhì)干擾，結(jié)晶難度較大，僅僅通過(guò)離子交換和脫色的粗提取液很難結(jié)晶出來(lái)。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的是克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種通過(guò)嗎啉-正丙醛制備萬(wàn)古霉素的制備方法。

本發(fā)明的技術(shù)方案如下：本發(fā)明提供一種通過(guò)嗎啉-正丙醛制備萬(wàn)古霉素的制備方法，包括以下步驟：

a、取一定量的萬(wàn)古霉素濾液加入配制好2％的破乳劑中攪拌均勻，在攪拌狀態(tài)下加入1/3的嗎啉-正丙醛，混合均勻，輸送至POD機(jī)的前混合器中，緩緩加稀硫酸，調(diào)節(jié)pH1.9-2.1，再次加入余下2/3嗎啉-正丙醛，開(kāi)機(jī)混合，觀察水相與溶媒相分層時(shí)間，測(cè)萃取相酸水pH，分離出含凈抗生素活性洗脫液；

b、在沉淀容器中沉淀步驟a中所得的含凈抗生素活性洗脫液，得到晶體漿料，并且攪拌該晶體漿料，將PH值連續(xù)調(diào)節(jié)至所需程度，直至完全沉淀，得到晶體沉淀物；

c、將步驟b得到的晶體沉淀物溶解為水溶液，然后通過(guò)陰離子交換樹(shù)脂將其轉(zhuǎn)為萬(wàn)古霉素。

本發(fā)明優(yōu)選的，根據(jù)步驟a中，所述稀硫酸的pH范圍為1.0～3.0。

本發(fā)明優(yōu)選的，根據(jù)步驟b中，通過(guò)在含凈抗生素活性洗脫液中加入與水互溶的有機(jī)溶劑來(lái)結(jié)晶，結(jié)晶前溶液中萬(wàn)古霉素含量為5.0％～30.0％。

本發(fā)明優(yōu)選的，所述機(jī)溶劑為甲醇、乙醇、異丙醇或丙酮。

本發(fā)明優(yōu)選的，所述機(jī)溶劑加入量為：甲醇為2～6倍結(jié)晶液體積；乙醇為1.5～5.5倍結(jié)晶液體積；異丙醇為1.2～5倍結(jié)晶液體積；丙酮為1.0～4.5倍結(jié)晶液體積。

本發(fā)明優(yōu)選的，根據(jù)步驟b中，結(jié)晶過(guò)程起始溫度為25～60℃；結(jié)晶過(guò)程終點(diǎn)溫度為0～30℃；結(jié)晶過(guò)程降溫速度為0.5～5℃/分鐘。

本發(fā)明優(yōu)選的，根據(jù)步驟c中，晶體用水溶解后的萬(wàn)古霉素濃度為1.0％～20.0％。

本發(fā)明優(yōu)選的，根據(jù)步驟c中，所述陰離子交換樹(shù)脂為717樹(shù)脂、D293樹(shù)脂或D301FD樹(shù)脂。

本發(fā)明優(yōu)選的，所述陰離子交換樹(shù)脂用量按制備1克萬(wàn)古霉素需要用2～10mL的陰離子交換樹(shù)脂計(jì)。

本發(fā)明的有益效果如下：

采用上述方案，本發(fā)明制備所得萬(wàn)古霉素有效組份大大得到提高，其它雜質(zhì)大大降低，純度很高，色譜純度可達(dá)到95％以上，同時(shí)產(chǎn)品外觀顏色得到明顯改觀，適于口服或注射給藥；本發(fā)明具有制作方法簡(jiǎn)便和工藝流程適用于大批量生產(chǎn)的優(yōu)點(diǎn)。

附圖說(shuō)明

圖1為本發(fā)明所述一種通過(guò)嗎啉-正丙醛制備萬(wàn)古霉素的制備方法的流程圖。

具體實(shí)施方式

以下結(jié)合附圖和具體實(shí)施例，對(duì)本發(fā)明進(jìn)行詳細(xì)說(shuō)明。

請(qǐng)參閱圖1，本發(fā)明提供一種通過(guò)嗎啉-正丙醛制備萬(wàn)古霉素的制備方法，包括以下步驟：

a、取一定量的萬(wàn)古霉素濾液加入配制好2％的破乳劑中攪拌均勻，在攪拌狀態(tài)下加入1/3的嗎啉-正丙醛，混合均勻，輸送至POD機(jī)的前混合器中，緩緩加稀硫酸，調(diào)節(jié)pH1.9-2.1，再次加入余下2/3嗎啉-正丙醛，開(kāi)機(jī)混合，觀察水相與溶媒相分層時(shí)間，測(cè)萃取相酸水pH，分離出含凈抗生素活性洗脫液；

b、在沉淀容器中沉淀步驟a中所得的含凈抗生素活性洗脫液，得到晶體漿料，并且攪拌該晶體漿料，將PH值連續(xù)調(diào)節(jié)至所需程度，直至完全沉 淀，得到晶體沉淀物；

c、將步驟b得到的晶體沉淀物溶解為水溶液，然后通過(guò)陰離子交換樹(shù)脂將其轉(zhuǎn)為萬(wàn)古霉素。

根據(jù)步驟a中，所述稀硫酸的pH范圍為1.0～3.0。

根據(jù)步驟b中，通過(guò)在含凈抗生素活性洗脫液中加入與水互溶的有機(jī)溶劑來(lái)結(jié)晶，結(jié)晶前溶液中萬(wàn)古霉素含量為5.0％～30.0％。

所述機(jī)溶劑為甲醇、乙醇、異丙醇或丙酮。

所述機(jī)溶劑加入量為：甲醇為2～6倍結(jié)晶液體積；乙醇為1.5～5.5倍結(jié)晶液體積；異丙醇為1.2～5倍結(jié)晶液體積；丙酮為1.0～4.5倍結(jié)晶液體積。

根據(jù)步驟b中，結(jié)晶過(guò)程起始溫度為25～60℃；結(jié)晶過(guò)程終點(diǎn)溫度為0～30℃；結(jié)晶過(guò)程降溫速度為0.5～5℃/分鐘。

根據(jù)步驟c中，晶體用水溶解后的萬(wàn)古霉素濃度為1.0％～20.0％。

根據(jù)步驟c中，所述陰離子交換樹(shù)脂為717樹(shù)脂、D293樹(shù)脂或D301FD樹(shù)脂。

所述陰離子交換樹(shù)脂用量按制備1克萬(wàn)古霉素需要用2～10mL的陰離子交換樹(shù)脂計(jì)。

實(shí)施例一：

本發(fā)明包括以下步驟：

a、取一定量的萬(wàn)古霉素濾液加入配制好2％的破乳劑中攪拌均勻，在攪拌狀態(tài)下加入1/3的嗎啉-正丙醛，混合均勻，輸送至POD機(jī)的前混合器中，緩緩加稀硫酸，調(diào)節(jié)pH1.9，再次加入余下2/3嗎啉-正丙醛，開(kāi)機(jī)混合，觀察水相與溶媒相分層時(shí)間，測(cè)萃取相酸水pH，分離出含凈抗生素活性洗 脫液，所述稀硫酸的pH范圍為1.0；

b、在沉淀容器中沉淀步驟a中所得的含凈抗生素活性洗脫液，得到晶體漿料，并且攪拌該晶體漿料，將PH值連續(xù)調(diào)節(jié)至所需程度，直至完全沉淀，得到晶體沉淀物，通過(guò)在含凈抗生素活性洗脫液中加入與水互溶的有機(jī)溶劑來(lái)結(jié)晶，結(jié)晶前溶液中萬(wàn)古霉素含量為5.0％，所述機(jī)溶劑為甲醇，所述機(jī)溶劑加入量為：甲醇為2～6倍結(jié)晶液體積；結(jié)晶過(guò)程起始溫度為25℃；結(jié)晶過(guò)程終點(diǎn)溫度為0℃；結(jié)晶過(guò)程降溫速度為0.5℃/分鐘；

c、將步驟b得到的晶體沉淀物溶解為水溶液，然后通過(guò)陰離子交換樹(shù)脂將其轉(zhuǎn)為萬(wàn)古霉素，晶體用水溶解后的萬(wàn)古霉素濃度為1.0％，所述陰離子交換樹(shù)脂為717樹(shù)脂，所述陰離子交換樹(shù)脂用量按制備1克萬(wàn)古霉素需要用2mL的陰離子交換樹(shù)脂計(jì)。

實(shí)施例一：

本發(fā)明包括以下步驟：

a、取一定量的萬(wàn)古霉素濾液加入配制好2％的破乳劑中攪拌均勻，在攪拌狀態(tài)下加入1/3的嗎啉-正丙醛，混合均勻，輸送至POD機(jī)的前混合器中，緩緩加稀硫酸，調(diào)節(jié)pH2.1，再次加入余下2/3嗎啉-正丙醛，開(kāi)機(jī)混合，觀察水相與溶媒相分層時(shí)間，測(cè)萃取相酸水pH，分離出含凈抗生素活性洗脫液，所述稀硫酸的pH范圍為3.0；

b、在沉淀容器中沉淀步驟a中所得的含凈抗生素活性洗脫液，得到晶體漿料，并且攪拌該晶體漿料，將PH值連續(xù)調(diào)節(jié)至所需程度，直至完全沉淀，得到晶體沉淀物，通過(guò)在含凈抗生素活性洗脫液中加入與水互溶的有 機(jī)溶劑來(lái)結(jié)晶，結(jié)晶前溶液中萬(wàn)古霉素含量為30.0％，所述機(jī)溶劑為丙酮，所述機(jī)溶劑加入量為：丙酮為1.0～4.5倍結(jié)晶液體積，結(jié)晶過(guò)程起始溫度為60℃；結(jié)晶過(guò)程終點(diǎn)溫度為30℃；結(jié)晶過(guò)程降溫速度為5℃/分鐘；

c、將步驟b得到的晶體沉淀物溶解為水溶液，然后通過(guò)陰離子交換樹(shù)脂將其轉(zhuǎn)為萬(wàn)古霉素，晶體用水溶解后的萬(wàn)古霉素濃度為20.0％，所述陰離子交換樹(shù)脂為D293樹(shù)脂，所述陰離子交換樹(shù)脂用量按制備1克萬(wàn)古霉素需要用10mL的陰離子交換樹(shù)脂計(jì)。

綜上所述，采用上述方案，本發(fā)明制備所得萬(wàn)古霉素有效組份大大得到提高，其它雜質(zhì)大大降低，純度很高，色譜純度可達(dá)到95％以上，同時(shí)產(chǎn)品外觀顏色得到明顯改觀，適于口服或注射給藥；本發(fā)明具有制作方法簡(jiǎn)便和工藝流程適用于大批量生產(chǎn)的優(yōu)點(diǎn)。

以上僅為本發(fā)明的較佳實(shí)施例而已，并不用于限制本發(fā)明，凡在本發(fā)明的精神和原則之內(nèi)所作的任何修改、等同替換和改進(jìn)等，均應(yīng)包含在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。