本發(fā)明涉及微藻生物領(lǐng)域，具體地，涉及一種微藻采收方法及其應(yīng)用。
背景技術(shù)：
：微藻是一種分布廣、生長(zhǎng)速度快、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單的單細(xì)胞生物。通過(guò)自身特有的代謝過(guò)程，可以生成多種結(jié)構(gòu)獨(dú)特的有價(jià)值化合物，包括多糖、蛋白質(zhì)、維生素、脂肪酸及脂肪酸脂，是很有前景的經(jīng)濟(jì)作物。在微藻生長(zhǎng)的同時(shí)，還可以固定大量的二氧化碳，對(duì)減排大氣中的二氧化碳意義重大。由于微藻體積較小，在水中的濃度低，通常濃度不超過(guò)百分之一，使得在微藻養(yǎng)殖過(guò)程中，收集困難，成本也十分巨大。目前，現(xiàn)有常用的微藻收集的方法包括離心過(guò)濾法、絮凝劑沉淀法和pH調(diào)節(jié)法等。離心過(guò)濾法雖然能達(dá)到收集微藻的目的，但需要除去大量水分，運(yùn)行能耗大，成本高，操作繁瑣，勞動(dòng)強(qiáng)度大。絮凝劑沉淀法操作簡(jiǎn)便、易行，不需要專(zhuān)門(mén)的設(shè)備，采收過(guò)程能耗低。但需要加入各種不同的無(wú)機(jī)或有機(jī)絮凝劑。無(wú)機(jī)絮凝劑如硫酸鋁、硫酸鐵等，會(huì)造成大量的廢水排放，造成環(huán)境污染。有機(jī)絮凝劑則往往用量較大，成本較高。CN103484371A公開(kāi)了一種加入陽(yáng)離子淀粉絮凝劑的收集方法，但加入量較大，為微藻干重的1-20％，影響微藻的質(zhì)量。CN103881922A公開(kāi)了以巨大芽孢桿菌發(fā)酵產(chǎn)物為絮凝劑，對(duì)海洋微藻具有明顯的絮凝作用，絮凝劑添加濃度為每毫升藻液0.3-3.0毫克，與微藻干重相比，用量較大。而且不能忽略的是，絮凝劑沉淀法由于在培養(yǎng)液中引入了其他的物質(zhì)，不利于培養(yǎng)液的重復(fù)利用。pH調(diào)節(jié)法是通過(guò)改變培養(yǎng)液的pH值范圍，誘導(dǎo)微藻原位絮凝，實(shí)現(xiàn)沉 降分離，但往往需要將pH回復(fù)到養(yǎng)殖需要的pH范圍，操作較為繁瑣且由于引入了其他離子不利于培養(yǎng)液的重復(fù)利用。pH調(diào)節(jié)包括酸性調(diào)節(jié)和堿性調(diào)節(jié)。CN103266063A公開(kāi)了通過(guò)向培養(yǎng)液中加入酸液，調(diào)節(jié)培養(yǎng)液pH至3.7-4.3的范圍使微藻自絮凝沉降，沉降后的清液再加堿使其回復(fù)到養(yǎng)殖需要的pH范圍。CN102492624A公開(kāi)了通過(guò)氨調(diào)節(jié)培養(yǎng)液pH，待微藻沉降后，通過(guò)加熱和二氧化碳回復(fù)培養(yǎng)液pH值到正常范圍。在微藻培養(yǎng)研究中，如何在保證培養(yǎng)液(包括培養(yǎng)液中的藻種)能夠重復(fù)利用且不會(huì)產(chǎn)生廢液排放的前提下，使得微藻收集簡(jiǎn)單并降低微藻收集的成本，是當(dāng)前致力于微藻培養(yǎng)的研究人員關(guān)注的熱門(mén)課題，但是，至今仍未獲得一種能夠有效實(shí)現(xiàn)上述目的的微藻采收方法。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：本發(fā)明的目的是為了克服現(xiàn)有技術(shù)中的上述缺陷，提供一種微藻采收方法及其應(yīng)用，該方法對(duì)培養(yǎng)液性質(zhì)不會(huì)產(chǎn)生影響，使得培養(yǎng)液(包括培養(yǎng)液中的藻種)能夠重復(fù)利用而不會(huì)產(chǎn)生廢液排放，而且有利于微藻的聚集、采收，使得微藻收集簡(jiǎn)單且能夠降低微藻收集成本。本發(fā)明的發(fā)明人在研究中發(fā)現(xiàn)，當(dāng)培養(yǎng)微藻至培養(yǎng)液的OD680值為1-10、pH值為7.5-14時(shí)，向培養(yǎng)液中補(bǔ)加作為微藻培養(yǎng)營(yíng)養(yǎng)成分的三價(jià)鐵離子化合物，待培養(yǎng)液中的微藻分層沉降后分離微藻，能夠使培養(yǎng)液中的微藻自然分層沉降，不僅對(duì)培養(yǎng)液的性質(zhì)不會(huì)產(chǎn)生影響，使得培養(yǎng)液(包括培養(yǎng)液中的藻種)能夠重復(fù)利用而不會(huì)產(chǎn)生廢液排放，而且有利于微藻的聚集、采收，使得微藻收集簡(jiǎn)單且能夠降低微藻收集成本。因此，為了實(shí)現(xiàn)上述目的，第一方面，本發(fā)明提供了一種微藻采收方法，所述方法包括：當(dāng)培養(yǎng)微藻至培養(yǎng)液的OD680值為1-10、pH值為7.5-14時(shí)，向培養(yǎng)液中補(bǔ)加作為微藻培養(yǎng)營(yíng)養(yǎng)成分的三價(jià)鐵離子化合物，待培養(yǎng)液中的 微藻分層沉降后分離微藻。第二方面，本發(fā)明提供了一種上述方法在微藻培養(yǎng)中的應(yīng)用。本發(fā)明的微藻采收方法，對(duì)培養(yǎng)液性質(zhì)不會(huì)產(chǎn)生影響，使得培養(yǎng)液(包括培養(yǎng)液中的藻種)能夠重復(fù)利用而不會(huì)產(chǎn)生廢液排放，而且有利于微藻的聚集、采收，使得微藻收集簡(jiǎn)單(只需過(guò)濾分離或分液分離即可，而無(wú)需進(jìn)行離心分離)且能夠降低微藻收集成本，采用本發(fā)明的方法采收微藻，培養(yǎng)液中的微藻自然分層沉降1h后沉降率高達(dá)83％，自然分層沉降12h后沉降率高達(dá)97％。根據(jù)本發(fā)明的一種優(yōu)選的實(shí)施方式，當(dāng)三價(jià)鐵離子化合物為檸檬酸鐵銨和EDTA鐵的混合物，且檸檬酸鐵銨和EDTA鐵的摩爾比為2-1：1時(shí)，能夠進(jìn)一步提高微藻的沉降率，更有利于微藻的聚集、采收。本發(fā)明的其它特征和優(yōu)點(diǎn)將在隨后的具體實(shí)施方式部分予以詳細(xì)說(shuō)明。附圖說(shuō)明圖1是本發(fā)明實(shí)施例1中單針藻聚集前分散在培養(yǎng)液中的狀態(tài)圖。圖2是本發(fā)明實(shí)施例1中分層沉降12h后的培養(yǎng)液中的單針藻的狀態(tài)圖。具體實(shí)施方式以下對(duì)本發(fā)明的具體實(shí)施方式進(jìn)行詳細(xì)說(shuō)明。應(yīng)當(dāng)理解的是，此處所描述的具體實(shí)施方式僅用于說(shuō)明和解釋本發(fā)明，并不用于限制本發(fā)明。第一方面，本發(fā)明提供了一種微藻采收方法，該方法包括：當(dāng)培養(yǎng)微藻至培養(yǎng)液的OD680值為1-10、pH值為7.5-14時(shí)，向培養(yǎng)液中補(bǔ)加作為微藻培養(yǎng)營(yíng)養(yǎng)成分的三價(jià)鐵離子化合物，待培養(yǎng)液中的微藻分層沉降后分離微藻。本發(fā)明方法中，為了進(jìn)一步提高微藻聚集的效果，優(yōu)選情況下，向培養(yǎng)液中補(bǔ)加三價(jià)鐵離子化合物時(shí)培養(yǎng)液的pH值為8-11。本發(fā)明方法中，對(duì)于微藻的種類(lèi)沒(méi)有特別的限定，可以為本領(lǐng)域常規(guī)的培養(yǎng)體系為堿性的各種微藻，優(yōu)選情況下，微藻為單針藻和/或小球藻。本發(fā)明方法中，對(duì)培養(yǎng)時(shí)采用的培養(yǎng)基、培養(yǎng)條件及光生物反應(yīng)器等沒(méi)有特別的限定，可以分別為本領(lǐng)域常規(guī)使用的各種培養(yǎng)基、培養(yǎng)條件及光生物反應(yīng)器等，其中，單針藻和小球藻的培養(yǎng)條件可以包括：溫度為15-35℃、光照強(qiáng)度為1000-5000Lux、pH值為7.5-13。本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)該理解的是，在實(shí)際的微藻培養(yǎng)過(guò)程中，培養(yǎng)溫度、光照強(qiáng)度和培養(yǎng)液的pH值往往無(wú)法控制在一個(gè)精確的點(diǎn)值，而是在一個(gè)范圍內(nèi)進(jìn)行波動(dòng)。本發(fā)明方法中，當(dāng)培養(yǎng)微藻至培養(yǎng)液的OD680值為1-10時(shí)，微藻培養(yǎng)進(jìn)入培養(yǎng)周期的后期，即進(jìn)入平臺(tái)期，然后聚集進(jìn)入平臺(tái)期的微藻并進(jìn)行分離采收。本發(fā)明方法中，三價(jià)鐵離子化合物的補(bǔ)加量的可選擇范圍較寬，綜合考慮微藻聚集的效果、重復(fù)利用的方便性和成本，優(yōu)選情況下，以三價(jià)鐵離子計(jì)，對(duì)于每升培養(yǎng)液，三價(jià)鐵離子化合物的補(bǔ)加量為0.001-0.1mmol。為了進(jìn)一步提高微藻聚集的效果，進(jìn)一步優(yōu)選地，以三價(jià)鐵離子計(jì)，對(duì)于每升培養(yǎng)液，所述三價(jià)鐵離子化合物的補(bǔ)加量為0.01-0.05mmol。本發(fā)明方法中，對(duì)于三價(jià)鐵離子化合物的種類(lèi)沒(méi)有特別的限定，可以為本領(lǐng)域常用的作為微藻培養(yǎng)營(yíng)養(yǎng)成分的各種三價(jià)鐵離子化合物，為了進(jìn)一步提高微藻聚集的效果，優(yōu)選情況下，三價(jià)鐵離子化合物為檸檬酸鐵銨和EDTA鐵(又稱(chēng)乙二胺四乙酸鐵)中的一種或兩種，本發(fā)明的發(fā)明人在研究中發(fā)現(xiàn)，當(dāng)三價(jià)鐵離子化合物為檸檬酸鐵銨和EDTA鐵的混合物時(shí)，能夠進(jìn)一步提高微藻聚集的效果，且當(dāng)檸檬酸鐵銨和EDTA鐵的摩爾比為2-1：1時(shí)，能夠更進(jìn)一步提高微藻聚集的效果，因此，三價(jià)鐵離子化合物進(jìn)一步優(yōu)選為檸檬酸鐵銨和EDTA鐵的混合物，更優(yōu)選地，檸檬酸鐵銨和EDTA鐵的摩爾比為2-1：1。本發(fā)明方法中，本發(fā)明的發(fā)明人在研究中進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)，在補(bǔ)加三價(jià)鐵離子化合物后，降低培養(yǎng)液的混合強(qiáng)度，能夠促進(jìn)微藻聚集體進(jìn)一步互相聚集，形成更大體積的聚集體，更有利于培養(yǎng)液中微藻的快速分層沉降。因此，優(yōu)選情況下，在補(bǔ)加三價(jià)鐵離子化合物后，降低培養(yǎng)液的混合強(qiáng)度。本發(fā)明方法中，為了進(jìn)一步提高微藻聚集的效果，優(yōu)選情況下，降低后的混合強(qiáng)度為降低前混合強(qiáng)度的0％-99％，進(jìn)一步優(yōu)選為0％-80％，更優(yōu)選為0％-50％。本發(fā)明方法中，優(yōu)選情況下，降低混合強(qiáng)度后，混合1-10天，進(jìn)一步優(yōu)選1-5天，然后停止混合。本發(fā)明方法中，對(duì)于培養(yǎng)液的混合方式?jīng)]有特別的限定，可以為本領(lǐng)域常用的各種方式，優(yōu)選情況下，培養(yǎng)液的混合方式包括磁力攪拌、機(jī)械攪拌和氣體鼓泡流化。本發(fā)明方法中，將沉降后的微藻培養(yǎng)液進(jìn)行微藻分離時(shí)，可以通過(guò)過(guò)濾分離或者分液分離的方式進(jìn)行分離而無(wú)需進(jìn)行離心分離。過(guò)濾分離可以為常壓過(guò)濾分離、加壓過(guò)濾分離或真空過(guò)濾分離，優(yōu)選為常壓過(guò)濾分離；分液分離可以為通過(guò)分液漏斗的方式進(jìn)行分離。對(duì)于過(guò)濾分離(包括常壓過(guò)濾分離、加壓過(guò)濾分離和真空過(guò)濾分離)和分液分離(如通過(guò)分液漏斗的方式進(jìn)行分離)的方法和條件沒(méi)有特別的限定，可以為本領(lǐng)域公知的各種方法和條件，此為本領(lǐng)域技術(shù)人員所公知，在此不再贅述。第二方面，本發(fā)明提供了上述方法在微藻培養(yǎng)中的應(yīng)用。實(shí)施例以下將通過(guò)實(shí)施例和對(duì)比例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行詳細(xì)描述。以下實(shí)施例和對(duì)比例中，微藻培養(yǎng)液的光密度值(OD值)測(cè)定：光密度值用分光光度計(jì)測(cè)定，以蒸餾水作對(duì)照，測(cè)定微藻培養(yǎng)液在波長(zhǎng)680nm處的吸光值，作為微藻濃度 的指標(biāo)。微藻培養(yǎng)液自然分層沉降T小時(shí)后的微藻沉降率的測(cè)定方法包括：測(cè)量680nm波長(zhǎng)下停止混合時(shí)微藻培養(yǎng)液的OD值OD0，將微藻培養(yǎng)液自然分層沉降T小時(shí)后，測(cè)量680nm波長(zhǎng)下上清液的OD值ODT。則微藻培養(yǎng)液自然分層沉降T小時(shí)后的微藻沉降率的計(jì)算公式為：(OD0-ODT)/OD0×100％。微藻聚集狀態(tài)通過(guò)光學(xué)顯微鏡觀察，光學(xué)顯微鏡的型號(hào)為44X-9，購(gòu)自上海永亨光學(xué)儀器制造有限公司。單針藻購(gòu)自中科院武漢水生生物研究所，小球藻購(gòu)自中科院武漢植物園。煉廠制氫尾氣為中國(guó)石化公司石家莊煉化分公司的煉廠制氫尾氣，二氧化碳的含量為15-20重量％，使用前進(jìn)行凈化除去固體顆粒物并進(jìn)行冷卻。微藻培養(yǎng)時(shí)使用的培養(yǎng)基A：培養(yǎng)基成份見(jiàn)表1-2，在培養(yǎng)基A中NaNO3為氮源。表1培養(yǎng)基A組分含量，mg/LK2HPO4·3H2O40NaNO31500Na2CO320MgSO4·7H2O75CaCl2·2H2O36檸檬酸6檸檬酸鐵銨6EDTA鐵3EDTA-2Na1微量元素A51表2微量元素A5組分組成，mg/LH3BO32860MnCl2·4H2O1810ZnSO4·7H2O222CuSO4·5H2O79NaMoO4·5H2O390Co(NO3)2·6H2O50微藻培養(yǎng)時(shí)使用的BG11培養(yǎng)基：培養(yǎng)基成份見(jiàn)表3-4，在BG11培養(yǎng)基中NaNO3為氮源。表3BG11培養(yǎng)基組分含量，mg/LK2HPO4·3H2O40NaNO31500Na2CO320MgSO4·7H2O75CaCl2·2H2O36檸檬酸6檸檬酸鐵銨6EDTA-2Na1微量元素A51表4微量元素A5組分組成，mg/LH3BO32860MnCl2·4H2O1810ZnSO4·7H2O222CuSO4·5H2O79NaMoO4·5H2O390Co(NO3)2·6H2O50實(shí)施例1本實(shí)施例用于說(shuō)明本發(fā)明的微藻采收方法。將單針藻藻種接種到裝有1000mL培養(yǎng)液的2000mL三角瓶中，接種單針藻藻種后培養(yǎng)液的OD680值為0.02。培養(yǎng)液由硝酸鈉、碳酸氫鈉和培養(yǎng)基A復(fù)合組成，每升培養(yǎng)液中硝酸鈉的含量為0.018mol，碳酸氫鈉的含量為1mol，檸檬酸鐵銨的含量為0.013mmol，EDTA鐵的含量為0.0065mmol。在20-30℃、光照強(qiáng)度1800-2200Lux、pH值7.5-12下培養(yǎng)，pH值由高純二氧化碳調(diào)節(jié)，并進(jìn)行磁力攪拌，攪拌轉(zhuǎn)速為300rpm。培養(yǎng)15天后，培養(yǎng)液的OD680值為3.1，pH值為8，對(duì)于每升培養(yǎng)液，向培養(yǎng)液中補(bǔ)加0.013mmol檸檬酸鐵氨和0.0065mmolEDTA鐵的混合物，并將攪拌轉(zhuǎn)速降為150rpm。5天(5天內(nèi)溫度為20-30℃、光照強(qiáng)度為1800-2200Lux、pH值為8-10)后停止攪拌，測(cè)得培養(yǎng)液的OD680值為3.3，培養(yǎng)液中的單針藻快速分層沉降，1小時(shí)后，測(cè)得上清液的OD680值為0.56，即自然分層沉降1小時(shí)后的單針藻的沉降率為83％。12小時(shí)后，測(cè)得上清液的OD680值為0.1，即自然分層沉降12小時(shí)后的單針藻的沉降率為97％。不同階段單針藻的形態(tài)如圖1和圖2所示。將分層沉降12小時(shí)后的培養(yǎng)液用320目濾布過(guò)濾，得到30g單針藻藻泥。實(shí)施例2本實(shí)施例用于說(shuō)明本發(fā)明的微藻采收方法。將小球藻藻種接種到消毒后并裝有28L培養(yǎng)液的封閉式光生物反應(yīng)器中，接種小球藻藻種后培養(yǎng)液的OD680值為0.08。封閉式光生物反應(yīng)器為聚氯乙烯薄膜袋，直徑為220mm、高為1500mm，無(wú)內(nèi)導(dǎo)流筒。培養(yǎng)液由硝酸鈉、碳酸氫鈉和培養(yǎng)基A復(fù)合組成，每升培養(yǎng)液中硝酸鈉的含量為0.018mol，碳酸氫鈉的含量為1mol，檸檬酸鐵銨的含量為0.013mmol，EDTA鐵的含量為0.0065mmol。煉廠制氫尾氣經(jīng)凈化并冷卻至25℃后從光生物反應(yīng)器底部通過(guò)氣石分散以鼓泡形式進(jìn)入，并產(chǎn)生流化攪動(dòng)、混合，煉廠制氫尾氣的進(jìn)氣流量為200L/h。在20-24℃、光照強(qiáng)度1800-5000Lux、pH值7.5-10.5下培養(yǎng)，pH值通過(guò)煉廠制氫尾氣的進(jìn)氣流量和進(jìn)氣時(shí)間控制。培養(yǎng)15天后，培養(yǎng)液的OD680值為3.7，pH值為9，對(duì)于每升培養(yǎng)液，向培養(yǎng)液中補(bǔ)加0.005mmol檸檬酸鐵氨和0.005mmolEDTA鐵的混合物，并將進(jìn)氣流量降為40L/h。5天(5天內(nèi)溫度為20-24℃、光照強(qiáng)度為1800-5000Lux、pH值為9-11)后停止進(jìn)氣，測(cè)得培養(yǎng)液的OD680值為3.9，培養(yǎng)液中的小球藻快速分層沉降，1小時(shí)后，測(cè)得上清液的OD680值為0.74，即自然分層沉降1小時(shí)后的小球藻的沉降率為81％。12小時(shí)后，測(cè)得上清液的OD680值為0.19，即自然分層沉降12小時(shí)后的小球藻的沉降率為95.1％。將分層沉降12小時(shí)后的培養(yǎng)液用G3玻砂過(guò)濾，得到370g小球藻藻泥。實(shí)施例3本實(shí)施例用于說(shuō)明本發(fā)明的微藻采收方法。將單針藻藻種接種到裝有10,000L培養(yǎng)液的開(kāi)放式跑道池光生物反應(yīng)器中，接種單針藻藻種后培養(yǎng)液的OD680值為0.078。開(kāi)放式跑道池光生物反應(yīng)器的跑道池面積為50m2。培養(yǎng)液由硝酸鈉、碳酸氫鈉和培養(yǎng)基A復(fù)合組成，每升培養(yǎng)液中硝酸鈉的含量為0.018mol，碳酸氫鈉的含量為1mol，檸 檬酸鐵銨的含量為0.013mmol，EDTA鐵的含量為0.0065mmol。煉廠制氫尾氣經(jīng)凈化并冷卻至25℃后從跑道池表面通過(guò)分散器鼓泡形式進(jìn)入培養(yǎng)液中，煉廠制氫尾氣的進(jìn)氣流量為2000L/h。在22-25℃、光照1800-5000Lux、pH值8-12、攪拌轉(zhuǎn)速200rpm下培養(yǎng)，pH值通過(guò)煉廠制氫尾氣的進(jìn)氣流量和進(jìn)氣時(shí)間控制。培養(yǎng)15天后，培養(yǎng)液的OD680值為1.8，pH值為9，對(duì)于每升培養(yǎng)液，向培養(yǎng)液中補(bǔ)加0.03mmol檸檬酸鐵氨和0.02mmol的EDTA鐵，并將進(jìn)氣流量降為1600L/h，將攪拌轉(zhuǎn)速降為160rpm。5天(5天內(nèi)溫度為22-25℃、光照強(qiáng)度為1800-5000Lux、pH值為9-11)后停止攪拌和進(jìn)氣，測(cè)得培養(yǎng)液的OD680值為1.9，培養(yǎng)液中的單針藻快速分層沉降，1小時(shí)后，測(cè)得上清液的OD680值為0.34，即自然分層沉降1小時(shí)后的單針藻的沉降率為82.1％。12小時(shí)后，測(cè)得上清液的OD680值為0.076，即自然分層沉降12小時(shí)后的單針藻的沉降率為96％。將分層沉降12小時(shí)后的培養(yǎng)液通過(guò)分液漏斗進(jìn)行分離，得到22Kg單針藻藻泥。實(shí)施例4按照實(shí)施例1的方法，不同的是，向培養(yǎng)液中補(bǔ)加的三價(jià)鐵離子化合物為0.005mmol檸檬酸鐵銨和0.015mmol的EDTA鐵。5天后停止攪拌，測(cè)得培養(yǎng)液的OD680值為3.24，培養(yǎng)液中的單針藻快速分層沉降，1小時(shí)后，測(cè)得上清液的OD680值為0.64，即自然分層沉降1小時(shí)后的單針藻的沉降率為80.2％。12小時(shí)后，測(cè)得上清液的OD680值為0.26，即自然分層沉降12小時(shí)后的單針藻的沉降率為92％。將分層沉降12小時(shí)后的培養(yǎng)液用320目濾布過(guò)濾，得到28.4g單針藻藻泥。實(shí)施例5按照實(shí)施例1的方法，不同的是，向培養(yǎng)液中補(bǔ)加的三價(jià)鐵離子化合物 為0.02mmol檸檬酸鐵氨。5天后停止攪拌，測(cè)得培養(yǎng)液的OD680值為3.2，培養(yǎng)液中的單針藻快速分層沉降，1小時(shí)后，測(cè)得上清液的OD680值為0.65，即自然分層沉降1小時(shí)后的單針藻的沉降率為79.7％。12小時(shí)后，測(cè)得上清液的OD680值為0.31，即自然分層沉降12小時(shí)后的單針藻的沉降率為90.3％。將分層沉降12小時(shí)后的培養(yǎng)液用320目濾布過(guò)濾，得到28g單針藻藻泥。實(shí)施例6按照實(shí)施例1的方法，不同的是，向培養(yǎng)液中補(bǔ)加的三價(jià)鐵離子化合物為0.02mmol的EDTA鐵。5天后停止攪拌，測(cè)得培養(yǎng)液的OD680值為3.21，培養(yǎng)液中的單針藻快速分層沉降，1小時(shí)后，測(cè)得上清液的OD680值為0.85，即自然分層沉降1小時(shí)后的單針藻的沉降率為73.5％。12小時(shí)后，測(cè)得上清液的OD680值為0.47，即自然分層沉降12小時(shí)后的單針藻的沉降率為85.4％。將分層沉降12小時(shí)后的培養(yǎng)液用320目濾布過(guò)濾，得到26.4g單針藻藻泥。實(shí)施例7按照實(shí)施例1的方法，不同的是，向培養(yǎng)液中補(bǔ)加的三價(jià)鐵離子化合物為0.002mmol檸檬酸鐵氨和0.001mmol的EDTA鐵。5天后停止攪拌，測(cè)得培養(yǎng)液的OD680值為3.19，培養(yǎng)液中的單針藻快速分層沉降，1小時(shí)后，測(cè)得上清液的OD680值為0.80，即自然分層沉降1小時(shí)后的單針藻的沉降率為74.9％。12小時(shí)后，測(cè)得上清液的OD680值為0.34，即自然分層沉降12小時(shí)后的單針藻的沉降率為89.3％。將分層沉降12小時(shí)后的培養(yǎng)液用320目濾布過(guò)濾，得到27.6g單針藻藻泥。實(shí)施例8按照實(shí)施例1的方法，不同的是，用BG11培養(yǎng)基代替培養(yǎng)基A，且每升培養(yǎng)液中檸檬酸鐵銨的含量為0.02mmol；培養(yǎng)15天后，對(duì)于每升培養(yǎng)液，向培養(yǎng)液中補(bǔ)加0.02mmol檸檬酸鐵銨。5天后停止攪拌，測(cè)得培養(yǎng)液的OD680值為3.27，培養(yǎng)液中的單針藻快速分層沉降，1小時(shí)后，測(cè)得上清液的OD680值為0.75，即自然分層沉降1小時(shí)后的單針藻的沉降率為77.1％。12小時(shí)后，測(cè)得上清液的OD680值為0.33，即自然分層沉降12小時(shí)后的單針藻的沉降率為89.9％。將分層沉降12小時(shí)后的培養(yǎng)液用320目濾布過(guò)濾，得到27.8g單針藻藻泥。實(shí)施例9按照實(shí)施例1的方法，不同的是，培養(yǎng)15天后，向培養(yǎng)液中補(bǔ)加檸檬酸鐵銨和EDTA鐵后，保持?jǐn)嚢柁D(zhuǎn)速不變。5天后停止攪拌，測(cè)得培養(yǎng)液的OD680值為3.28，培養(yǎng)液中的單針藻快速分層沉降，1小時(shí)后，測(cè)得上清液的OD680值為0.61，即自然分層沉降1小時(shí)后的單針藻的沉降率為81.4％。12小時(shí)后，測(cè)得上清液的OD680值為0.29，即自然分層沉降12小時(shí)后的單針藻的沉降率為91.2％。將分層沉降12小時(shí)后的培養(yǎng)液用320目濾布過(guò)濾，得到28.2g單針藻藻泥。實(shí)施例10按照實(shí)施例1的方法，不同的是，在20-30℃、光照強(qiáng)度1800-2200Lux、pH值11-13.5下培養(yǎng)，培養(yǎng)15天后，培養(yǎng)液的OD680值為2.7，pH值為13。5天后停止攪拌，測(cè)得培養(yǎng)液的OD680值為2.8，培養(yǎng)液中的單針藻快速分層沉降，1小時(shí)后，測(cè)得上清液的OD680值為0.72，即自然分層沉降1小時(shí)后的單針藻的沉降率為74.3％。12小時(shí)后，測(cè)得上清液的OD680值為0.38， 即自然分層沉降12小時(shí)后的單針藻的沉降率為86.4％。將分層沉降12小時(shí)后的培養(yǎng)液用320目濾布過(guò)濾，得到26.7g單針藻藻泥。對(duì)比例1按照實(shí)施例1的方法，不同的是，培養(yǎng)15天后，并不向培養(yǎng)液中補(bǔ)加檸檬酸鐵銨和EDTA鐵，且保持?jǐn)嚢柁D(zhuǎn)速不變(300rpm)。5天后停止攪拌，測(cè)得培養(yǎng)液的OD680值為3.17，培養(yǎng)液中的單針藻快速分層沉降，1小時(shí)后，測(cè)得上清液的OD680值為1.32，即自然分層沉降1小時(shí)后的單針藻的沉降率為58.4％。12小時(shí)后，測(cè)得上清液的OD680值為0.98，即自然分層沉降12小時(shí)后的單針藻的沉降率為69.1％。將分層沉降12小時(shí)后的培養(yǎng)液用320目濾布過(guò)濾，得到21.4g單針藻藻泥。對(duì)比例2按照實(shí)施例1的方法，不同的是，培養(yǎng)15天后，將攪拌轉(zhuǎn)速降為150rpm，但并不向培養(yǎng)液中補(bǔ)加檸檬酸鐵銨和EDTA鐵。5天后停止攪拌，測(cè)得培養(yǎng)液的OD680值為3.18，培養(yǎng)液中的單針藻快速分層沉降，1小時(shí)后，測(cè)得上清液的OD680值為1.28，即自然分層沉降1小時(shí)后的單針藻的沉降率為59.7％。12小時(shí)后，測(cè)得上清液的OD680值為0.88，即自然分層沉降12小時(shí)后的單針藻的沉降率為72.3％。將分層沉降12小時(shí)后的培養(yǎng)液用320目濾布過(guò)濾，得到22.4g單針藻藻泥。對(duì)比例3按照實(shí)施例1的方法，不同的是，培養(yǎng)15天后，向培養(yǎng)液中補(bǔ)加0.02mmol的三氯化鐵，替代0.013mmol檸檬酸鐵銨和0.0065mmol的EDTA鐵，并將攪拌轉(zhuǎn)速降為150rpm。5天后停止攪拌，測(cè)得培養(yǎng)液的OD680值為3.28，培養(yǎng)液中的單針藻快速分層沉降，1小時(shí)后，測(cè)得上清液的OD680值為0.98，即自然分層沉降1小時(shí)后的單針藻的沉降率為70.1％。12小時(shí)后，測(cè)得上清液的OD680值為0.58，即自然分層沉降12小時(shí)后的單針藻的沉降率為82.3％。將分層沉降12小時(shí)后的培養(yǎng)液用320目濾布過(guò)濾，得到25.4g單針藻藻泥。將實(shí)施例1與實(shí)施例4-8比較可知，以三價(jià)鐵離子計(jì)，對(duì)于每升培養(yǎng)液，三價(jià)鐵離子化合物的補(bǔ)加量為0.01-0.05mmol時(shí)，能夠進(jìn)一步提高微藻的沉降率，更有利于微藻的聚集、采收；而且當(dāng)向培養(yǎng)液中補(bǔ)加三價(jià)鐵離子化合物為檸檬酸鐵銨和EDTA鐵的混合物，且檸檬酸鐵銨和EDTA鐵的摩爾比為2-1：1時(shí)，能夠更進(jìn)一步提高微藻的沉降率，更有利于微藻的聚集、采收。將實(shí)施例1與實(shí)施例9比較可知，在向培養(yǎng)液中補(bǔ)加三價(jià)鐵離子化合物后，降低培養(yǎng)液的混合強(qiáng)度，能夠進(jìn)一步提高微藻的沉降率，更有利于微藻的聚集、采收。將實(shí)施例1與實(shí)施例10比較可知，向培養(yǎng)液中補(bǔ)加三價(jià)鐵離子化合物時(shí)培養(yǎng)液的pH值為8-11時(shí)，能夠進(jìn)一步提高微藻的沉降率，更有利于微藻的聚集、采收。將實(shí)施例1與對(duì)比例1-3比較可知，培養(yǎng)15天后，向培養(yǎng)液中補(bǔ)加作為微藻培養(yǎng)營(yíng)養(yǎng)成分的三價(jià)鐵離子化合物，能夠明顯提高微藻的沉降率，更有利于微藻的聚集、采收。而且本領(lǐng)域技術(shù)人員可以理解的是，當(dāng)向培養(yǎng)液中補(bǔ)加的三價(jià)鐵離子化合物不是作為微藻培養(yǎng)營(yíng)養(yǎng)成分的三價(jià)鐵離子化合物時(shí)(本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)公知三氯化鐵不能作為微藻培養(yǎng)的營(yíng)養(yǎng)成分)，在不利于微藻聚集(即不利于微藻沉降率的提高)、采收的同時(shí)，因引入了新的離子也不利于培養(yǎng)液的重復(fù)利用。以上詳細(xì)描述了本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方式，但是，本發(fā)明并不限于上述實(shí)施方式中的具體細(xì)節(jié)，在本發(fā)明的技術(shù)構(gòu)思范圍內(nèi)，可以對(duì)本發(fā)明的技術(shù)方案進(jìn)行多種簡(jiǎn)單變型，這些簡(jiǎn)單變型均屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍。另外需要說(shuō)明的是，在上述具體實(shí)施方式中所描述的各個(gè)具體技術(shù)特征，在不矛盾的情況下，可以通過(guò)任何合適的方式進(jìn)行組合，為了避免不必要的重復(fù)，本發(fā)明對(duì)各種可能的組合方式不再另行說(shuō)明。此外，本發(fā)明的各種不同的實(shí)施方式之間也可以進(jìn)行任意組合，只要其不違背本發(fā)明的思想，其同樣應(yīng)當(dāng)視為本發(fā)明所公開(kāi)的內(nèi)容。當(dāng)前第1頁(yè)1 2 3