采用d301g陰離子樹脂精制樺褐孔菌粗多糖的方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種采用D301G陰離子樹脂精制樺褐孔菌粗多糖的方法，其特征是，包括如下步驟：A．原料的脫脂預(yù)處理；B．熱水浸提制備粗多糖；C．粗多糖酶解；D．大孔吸附樹脂D301G處理；E．超濾去除小分子；F．真空冷凍干燥；制備樺褐孔菌多糖。使用該工藝最終得到脫色的并去除大部分蛋白和小分子雜質(zhì)的樺褐孔菌精制多糖，多糖保留率為58.2%以上，脫色率為87.7%，蛋白脫除率高達(dá)73.7%。本方法適合產(chǎn)業(yè)化規(guī)模化生產(chǎn)樺褐孔菌精制多糖。
【專利說明】采用D301G陰離子樹脂精制樺褐孔菌粗多糖的方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于生物【技術(shù)領(lǐng)域】，具體是涉及一種采用D301G陰離子樹脂精制樺褐孔菌 粗多糖的方法。

【背景技術(shù)】
[0002] 樺褐孔菌(Fr. )Pilat]是一著名的民間野生藥用真菌。研究 表明，樺褐孔菌多糖是重要的活性成分之一，具有增強(qiáng)免疫調(diào)節(jié)、抗腫瘤、抗氧化、降血糖及 抗病毒等多種藥理活性，已成為國內(nèi)外研究的熱點(diǎn)領(lǐng)域之一。但目前對樺褐孔菌多糖的分 離純化的研究報(bào)道相對較少。
[0003] 由于多糖的組成復(fù)雜性，多糖粗提物的分子量分布較廣，多糖種類也很多，而且前 期實(shí)驗(yàn)表明，提取后的樺褐孔菌粗多糖中含有一定量的蛋白、色素和小分子物質(zhì)，影響多 糖的生物活性的發(fā)揮和化學(xué)結(jié)構(gòu)的進(jìn)一步研究，因此有必要對粗多糖進(jìn)一步分離純化，但 去除粗多糖中的蛋白和色素等雜質(zhì)，一直是多糖分離純化中的一大難題，傳統(tǒng)的去蛋白以 Sevage法為主，方法操作繁瑣，效率低，采用的有機(jī)溶劑有毒性因而影響多糖的生物活性； 活性炭法去除色素效果較好，但后期的活性炭粉末不易去除，過氧化氫法因?yàn)檩^強(qiáng)的抗氧 化活性去除色素效果很好，但對多糖的活性影響較大，因此急需探索一種新的精制方法。
[0004] 大孔樹脂具有大孔立體三維網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)和較大的比表面積，因此具有良好的交換吸 附活性，近年來廣泛用于天然產(chǎn)物的活性成分的精制，有些大孔樹脂已經(jīng)用以去除植物和 真菌多糖中的蛋白和色素，并取得了很好的效果。采用大孔樹脂去除樺褐孔菌粗多糖中色 素和蛋白的研究尚未見有文獻(xiàn)報(bào)道。
[0005] 申請公布號CN102603906A (申請?zhí)?01110461635. 8)的中國專利文獻(xiàn)公開了一種 樺褐孔菌多糖水溶液的制備方法：一種樺褐孔菌多糖水溶液的制備方法，包括以下步驟： 三氯乙酸脫蛋白：向樺褐孔菌提取物中加入三氯乙酸，靜置，然后固液分離，取分離得到的 固體物質(zhì)；活性炭脫色：向步驟：所得固體物質(zhì)按體積加入50?100倍的水，然后加入活性 炭脫色，然后固液分離，取所得上清液；用天然澄清劑澄清：所得上清液加入天然澄清劑澄 清。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 本發(fā)明的目是提供一種精制樺褐孔菌粗多糖的工藝，本發(fā)明的核心技術(shù)是：應(yīng)用 生物酶和陰離子交換吸附樹脂替代傳統(tǒng)的Sevage法、活性炭法和過氧化氫法去除蛋白和 色素，克服了現(xiàn)有技術(shù)的缺陷，提供了一種新型的適合規(guī)?；苽錁搴挚拙贫嗵堑姆?法。
[0007] 本發(fā)明的技術(shù)方案如下： 采用D301G陰離子樹脂精制樺褐孔菌粗多糖的方法，其包括如下步驟：A.原料的脫脂 預(yù)處理；B.熱水浸提制備粗多糖；C.粗多糖酶解；D.大孔樹脂D301G處理；E.超濾去除 小分子；F.真空冷凍干燥；制備得到樺褐孔菌精制多糖。
[0008] 前面所述的方法，優(yōu)選的方案是，步驟A.原料的脫脂預(yù)處理是指，取干燥的樺褐孔 菌菌核，粉碎，置于4-8倍體積的60-95%乙醇溶液中浸泡16-24 h (優(yōu)選的，置于6_7倍體 積的70-90%乙醇溶液中浸泡18-20 h，更加優(yōu)選的，置于6. 5倍體積的80%乙醇溶液中浸泡 20 h)，以除去脂肪、部分單(寡）糖及脂溶性色素，殘?jiān)帥鎏庯L(fēng)干。
[0009] 前面所述的方法，優(yōu)選的方案是，步驟B.熱水浸提制備粗多糖是指，預(yù)處理后的殘 渣風(fēng)干后，加 10-20倍蒸餾水（v/w)，沸水提取1-3 h，80-120目紗布過濾(優(yōu)選的，加 13-18 倍蒸餾水（v/w)，沸水提取1. 5-2. 5 h，85-100目紗布過濾，更加優(yōu)選的，加 15倍蒸餾水（ν/ w)，沸水提取2 h，100目紗布過濾)，濾渣重復(fù)提取1-3次，合并濾液，濃縮，離心，噴霧干燥得 粗多糖。
[0010] 前面所述的方法，優(yōu)選的方案是，步驟C.粗多糖酶解是指，將粗多糖加水溶解，加 入木瓜蛋白酶，35-45°C反應(yīng)20-40 min (優(yōu)選的，36-42°C反應(yīng)25-35 min，更加優(yōu)選的，40°C 反應(yīng)30 min)，得粗多糖的酶解液。更加優(yōu)選的，粗多糖加水溶解后配制為0.5-2.0% (w/w) 的水溶液(優(yōu)選的，配制為0. 6-1. 8% (w/w)的水溶液,更加優(yōu)選的,配制為1.5% (w/w)的水 溶液)。更加優(yōu)選的，木瓜蛋白酶加入量為粗多糖水溶液的3-5% (w/w)(優(yōu)選的，加入量為 粗多糖水溶液的3. 5-4. 5% (w/w)，更加優(yōu)選的，加入量為粗多糖水溶液的4. 0% (w/w))。
[0011] 前面所述的方法，優(yōu)選的方案是，步驟D.大孔吸附樹脂D301G處理是指，粗多糖的 酶解液加入經(jīng)預(yù)處理的D301G樹脂層析柱中，按照D301G樹脂：粗多糖酶解液=1. 2-2. 0 ： 1 (w/v),流速控制在1-3 ml/min(優(yōu)選的，按照D301G樹脂：粗多糖酶解液=1. 5-1. 8 : 1 (w/ ν),流速控制在1. 5-2 ml/min,更加優(yōu)選的，按照D301G樹脂：粗多糖酶解液=1. 6 ： 1 (w/ v)，流速控制在1.8 ml/min)，收集流出液。更加優(yōu)選的，所述的預(yù)處理是指，大孔吸附樹脂 D301G先用水浸泡24 h，用水洗至水液澄清，傾去水后加 1 M HC1溶液浸泡24 h，水洗至中性， 加 1 M NaOH溶液浸泡24 h，用水洗至中性。
[0012] 前面所述的方法，優(yōu)選的方案是，步驟E.超濾去除小分子是指，采用超濾膜分子量 為1萬的中空纖維素膜進(jìn)行超濾，去除1萬以下的小分子物質(zhì)。
[0013] 前面所述的方法，優(yōu)選的方案是，步驟F.真空冷凍干燥是指，先將樺褐孔菌多糖 樣品放置于_20°C下3 h，然后轉(zhuǎn)入-80°C下冷凍6 h以上，然后轉(zhuǎn)入真空冷凍干燥機(jī)干燥， 得精制的樺褐孔菌多糖。
[0014] 本發(fā)明公開了一種樺褐孔菌精制多糖及其制備工藝，制備工藝如下：1、原料的預(yù) 處理；2、樺褐孔菌粗多糖的溶出；3、蛋白酶水解；4、陰離子樹脂處理；5、超濾，然后干燥。使 用該工藝最終得到脫色的并去除大部分蛋白和小分子雜質(zhì)的樺褐孔菌精制多糖，多糖保留 率為58. 2%以上，脫色率為87. 7%，蛋白脫除率高達(dá)73. 7%。本方法適合產(chǎn)業(yè)化規(guī)模化生產(chǎn) 樺褐孔菌精制多糖。
[0015] 除此在外，本發(fā)明的技術(shù)優(yōu)勢還體現(xiàn)在：1、采用木瓜蛋白酶處理粗多糖，提高了蛋 白雜質(zhì)的去除率(去除率高達(dá)到73. 7%)，提高了多糖的純度；2、采用大孔樹脂處理制備的 精制多糖，無毒副作用，操作更加簡便，純化效果好，多糖保留率和得率高(分別高達(dá)58. 2% 和62. 4%)。而Sevage法，所用氯仿有毒性，且回收不便，得率僅為48. 9% ;活性炭吸附法和 過氧化氫法去除色素，均存在一定的缺陷，活性炭吸附法脫色時(shí)間長且多糖損失率較大(得 率僅為48. 6%)，而且活性炭難以除去，過氧化氫脫色，對多糖的化學(xué)結(jié)構(gòu)和生物活性破壞性 極大。

【具體實(shí)施方式】
[0016] 下面結(jié)合實(shí)施例對本發(fā)明技術(shù)方案詳加描述，但保護(hù)范圍不被此限制。實(shí)施 例中所用的材料為樺褐孔菌野生菌核，購自黑龍江微生物研究所；采用的大孔樹脂為弱 堿性苯乙烯系陰離子交換樹脂，型號為D301G，購自光復(fù)精細(xì)化工研究所，粒度直徑為 0. 60-1. 60mm,奶白色；本發(fā)明所用的蛋白酶為木瓜蛋白酶，購自北京鼎國生物技術(shù)有限公 司。
[0017] 實(shí)施例1采用D301G陰離子樹脂精制樺褐孔菌粗多糖的方法，包括如下步驟： A.原料的脫脂預(yù)處理：取干燥的樺褐孔菌菌核，粉碎，置于4倍體積的60%乙醇溶液中 浸泡16 h，以除去脂肪、部分單(寡）糖及脂溶性色素，殘?jiān)帥鎏庯L(fēng)干。
[0018] B.熱水浸提制備粗多糖：預(yù)處理后的殘?jiān)L(fēng)干后，加 10倍蒸餾水（v/w)，沸水提取 1 h,80目紗布過濾，濾液濃縮，離心，噴霧干燥得粗多糖。
[0019] C.粗多糖酶解：將粗多糖加水溶解，配制為0. 5% (w/w)的水溶液，加入木瓜蛋白 酶，木瓜蛋白酶加入量為粗多糖水溶液的3% (w/w)，35°C反應(yīng)20 min，得粗多糖的酶解液。
[0020] D.大孔樹脂D301G處理：粗多糖的酶解液加入經(jīng)預(yù)處理（大孔吸附樹脂D301G先 用水浸泡24 h,用水洗至水液澄清，傾去水后加 1 M HC1溶液浸泡24 h,水洗至中性，加 1 Μ NaOH溶液浸泡24 h，用水洗至中性)的D301G樹脂層析柱中，按照D301G樹脂：粗多糖酶解 液=1.2 : 1 (w/v),流速控制在1 ml/min,收集流出液。
[0021] E.超濾去除小分子：采用超濾膜分子量為1萬的中空纖維素膜進(jìn)行超濾，去除1 萬以下的小分子物質(zhì)，得樺褐孔菌多糖樣品。
[0022] F.真空冷凍干燥：先將樺褐孔菌多糖樣品放置于_20°C下3 h，然后轉(zhuǎn)入_80°C下 冷凍6 h以上，然后轉(zhuǎn)入真空冷凍干燥機(jī)干燥，得精制的樺褐孔菌多糖。
[0023] 實(shí)施例2采用D301G陰離子樹脂精制樺褐孔菌粗多糖的方法，包括如下步驟： A.原料的脫脂預(yù)處理：取干燥的樺褐孔菌菌核，粉碎，置于8倍體積的95%乙醇溶液中 浸泡24 h，以除去脂肪、部分單(寡）糖及脂溶性色素，殘?jiān)帥鎏庯L(fēng)干。
[0024] B.熱水浸提制備粗多糖：預(yù)處理后的殘?jiān)L(fēng)干后，加 20倍蒸餾水（v/w)，沸水提取 3 h，120目紗布過濾，濾渣重復(fù)提取2次，合并濾液，濃縮，離心，噴霧干燥得粗多糖。
[0025] C.粗多糖酶解：將粗多糖加水溶解，配制為2. 0% (w/w)的水溶液，加入木瓜蛋白 酶，木瓜蛋白酶加入量為粗多糖水溶液的5% (w/w)，45°C反應(yīng)40min，得粗多糖的酶解液。
[0026] D.大孔樹脂D301G處理： 大孔吸附樹脂D301G預(yù)處理，先用水浸泡24 h，用水洗至水液澄清，傾去水后加 1 M HC1 溶液浸泡24 h，水洗至中性，加 1 M NaOH溶液浸泡24 h，用水洗至中性。
[0027] 粗多糖的酶解液加入經(jīng)預(yù)處理的D301G樹脂層析柱中，按照D301G樹脂：粗多糖 酶解液=2. 0 ： 1 (w/v),流速控制在3 ml/min,收集流出液。
[0028] E.超濾去除小分子：采用超濾膜分子量為1萬的中空纖維素膜進(jìn)行超濾，去除1 萬以下的小分子物質(zhì)。
[0029] F.真空冷凍干燥：先將樺褐孔菌多糖樣品放置于_20°C下3 h，然后轉(zhuǎn)入_80°C下 冷凍6 h以上，然后轉(zhuǎn)入真空冷凍干燥機(jī)干燥，得精制的樺褐孔菌多糖。
[0030] 實(shí)施例3采用D301G陰離子樹脂精制樺褐孔菌粗多糖的方法，其包括如下步驟： A.原料的脫脂預(yù)處理：取干燥的樺褐孔菌菌核，粉碎，置于7倍體積的90%乙醇溶液中 浸泡20 h，以除去脂肪、部分單(寡）糖及脂溶性色素，殘?jiān)帥鎏庯L(fēng)干。
[0031] B.熱水浸提制備粗多糖：預(yù)處理后的殘?jiān)L(fēng)干后，加 18倍蒸餾水（v/w)，沸水提取 2. 5h，100目紗布過濾，濾渣重復(fù)提取3次，合并濾液，濃縮，離心，噴霧干燥得粗多糖。
[0032] C.粗多糖酶解：將粗多糖加水溶解，配制為1. 8% (w/w)的水溶液，加入木瓜蛋白 酶，木瓜蛋白酶加入量為粗多糖水溶液的4. 5% (w/w)，42°C反應(yīng)35min，得粗多糖的酶解液。
[0033] D.大孔樹脂D301G處理：粗多糖的酶解液加入經(jīng)預(yù)處理(預(yù)處理方式與是實(shí)施例 1-3相同)的D301G樹脂層析柱中，按照D301G樹脂：粗多糖酶解液=1.8 ： l(w/v)，流速控 制在2 ml/min,收集流出液。
[0034] E.超濾去除小分子：采用超濾膜分子量為1萬的中空纖維素膜進(jìn)行超濾，去除1 萬以下的小分子物質(zhì)。
[0035] F.真空冷凍干燥：先將樺褐孔菌多糖樣品放置于_20°C下3 h，然后轉(zhuǎn)入_80°C下 冷凍6 h以上，然后轉(zhuǎn)入真空冷凍干燥機(jī)干燥，得精制的樺褐孔菌多糖。
[0036] 實(shí)施例4采用D301G陰離子樹脂精制樺褐孔菌粗多糖的方法，包括如下步驟： A.原料的脫脂預(yù)處理：取干燥的樺褐孔菌菌核，粉碎，置于6倍體積的70%乙醇溶液中 浸泡18 h，以除去脂肪、部分單(寡）糖及脂溶性色素，殘?jiān)帥鎏庯L(fēng)干。
[0037] B.熱水浸提制備粗多糖：預(yù)處理后的殘?jiān)L(fēng)干后，加 13倍蒸餾水（v/w)，沸水提取 1. 5h，85目紗布過濾，提取1次，濾液濃縮，離心，噴霧干燥得粗多糖。
[0038] C.粗多糖酶解：將粗多糖加水溶解，配制為0. 5% (w/w)的水溶液，加入木瓜蛋白 酶，木瓜蛋白酶加入量為粗多糖水溶液的3. 5%(w/w), 36°C反應(yīng)25min，得粗多糖的酶解液。
[0039] D.大孔樹脂D301G處理：粗多糖的酶解液加入經(jīng)預(yù)處理(大孔吸附樹脂D301G先 用水浸泡24 h,用水洗至水液澄清，傾去水后加 1 M HC1溶液浸泡24 h,水洗至中性，加 1 Μ NaOH溶液浸泡24 h，用水洗至中性)的D301G樹脂層析柱中，按照D301G樹脂：粗多糖酶解 液=1.5 : 1 (w/v),流速控制在1. 5ml/min,收集流出液。
[0040] E.超濾去除小分子：采用超濾膜分子量為1萬的中空纖維素膜進(jìn)行超濾，去除1 萬以下的小分子物質(zhì)。
[0041] F.真空冷凍干燥：先將樺褐孔菌多糖樣品放置于_20°C下3 h，然后轉(zhuǎn)入_80°C下 冷凍6 h以上，然后轉(zhuǎn)入真空冷凍干燥機(jī)干燥，得精制的樺褐孔菌多糖。
[0042] 實(shí)施例5采用D301G陰離子樹脂精制樺褐孔菌粗多糖的方法，其包括如下步驟： A.原料的脫脂預(yù)處理：取干燥的樺褐孔菌菌核，粉碎，置于6. 5倍體積的80%乙醇(質(zhì) 量濃度）溶液中浸泡20 h，以除去脂肪、部分寡糖及脂溶性色素，殘?jiān)帥鎏庯L(fēng)干。
[0043] B.熱水浸提制備粗多糖：預(yù)處理后的殘?jiān)L(fēng)干后，加 15倍蒸餾水（v/w)，沸水提取 2 h，100目紗布過濾，濾渣重復(fù)提取2次，合并濾液，濃縮，離心，噴霧干燥得粗多糖。
[0044] C.粗多糖酶解：將粗多糖加水溶解，配制為1. 5% (w/w)的水溶液，加入木瓜蛋 白酶，木瓜蛋白酶加入量為粗多糖水溶液的4. 0%(w/w), 40°C反應(yīng)30 min，得粗多糖的酶解 液。
[0045] D.大孔樹脂D301G處理：粗多糖的酶解液加入經(jīng)預(yù)處理(所述的預(yù)處理是指，大孔 吸附樹脂D301G先用水浸泡24 h，用水洗至水液澄清，傾去水后加 1 M HC1溶液浸泡24 h，水 洗至中性，加 1 M NaOH溶液浸泡24 h，用水洗至中性)的D301G樹脂層析柱中，按照D301G樹 脂：粗多糖酶解液=1. 6 : 1 (w/v)，流速控制在1. 8 ml/min,收集流出液。
[0046] E.超濾去除小分子：采用超濾膜分子量為1萬的中空纖維素膜進(jìn)行超濾，去除1 萬以下的小分子物質(zhì)。
[0047] F.真空冷凍干燥：先將樺褐孔菌多糖樣品放置于_20°C下3 h，然后轉(zhuǎn)入_80°C下 冷凍6 h以上，然后轉(zhuǎn)入真空冷凍干燥機(jī)干燥，得精制的樺褐孔菌多糖。
[0048] 試驗(yàn)例實(shí)施例5所得樺褐孔菌多糖多糖含量和蛋白含量的測定，以及蛋白脫除 率、色素脫除率和多糖保留率的計(jì)算。其中多糖含量（%)=總糖的含量（%)_還原糖的含量 (%)。
[0049] 總糖含量測定采用苯酚-硫酸法；還原糖含量測定采用DNS法；蛋白含量測定采 用 Bradford 法。

【權(quán)利要求】
1.采用D301G陰離子樹脂精制樺褐孔菌粗多糖的方法，其特征是，包括如下步驟：A.原 料的脫脂預(yù)處理；B.熱水浸提制備粗多糖；C.粗多糖酶解；D.大孔吸附樹脂D301G處理； E.超濾去除小分子；F.真空冷凍干燥；制備樺褐孔菌多糖。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征是，步驟A.原料的脫脂預(yù)處理是指，取干燥的 樺褐孔菌菌核，粉碎，置于4-8倍體積的60-95%乙醇溶液中浸泡16-24 h(優(yōu)選的，置于6_7 倍體積的70-90%乙醇溶液中浸泡18-20 h，更加優(yōu)選的，置于6. 5倍體積的80%乙醇溶液中 浸泡20 h)，以除去脂肪、部分單(寡）糖及脂溶性色素，殘?jiān)帥鎏庯L(fēng)干。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征是，步驟B.熱水浸提制備粗多糖是指，預(yù)處理 后的殘?jiān)L(fēng)干后，加 10-20倍蒸餾水（v/w)，沸水提取1-3 h，80-120目紗布過濾(優(yōu)選的，力口 13-18倍蒸餾水（v/w)，沸水提取1. 5-2. 5 h，85-100目紗布過濾，更加優(yōu)選的，加 15倍蒸餾 水（v/w)，沸水提取2h，100目紗布過濾)，濾渣重復(fù)提取1-3次，合并濾液，濃縮，離心，噴霧 干燥得粗多糖。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征是，步驟C.粗多糖酶解是指，將粗多糖加水溶 解，加入木瓜蛋白酶，35-45°C反應(yīng)20-40 min(優(yōu)選的，36-42°C反應(yīng)25-35 min,更加優(yōu)選的， 40°C反應(yīng)30 min)，得粗多糖的酶解液。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的方法，其特征是，粗多糖加水溶解后配制為0.5-2.0% (w/w) 的水溶液(優(yōu)選的，配制為0. 6-1. 8% (w/w)的水溶液,更加優(yōu)選的,配制為1.5% (w/w)的水 溶液)。
6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的方法，其特征是，木瓜蛋白酶加入量為粗多糖水溶液的3-5% (w/w)(優(yōu)選的，加入量為粗多糖水溶液的3. 5-4. 5% (w/w)，更加優(yōu)選的，加入量為粗多糖水 溶液的 4.0% (w/w))0
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征是，步驟D.大孔吸附樹脂D301G處理是指， 粗多糖的酶解液加入經(jīng)預(yù)處理的D301G樹脂層析柱中，按照D301G樹脂：粗多糖酶解液 =1. 2-2. 0 ： 1 (w/v)，流速控制在1-3 ml/min (優(yōu)選的，按照D301G樹脂：粗多糖酶解液 =1. 5-1. 8 ： 1 (w/v)，流速控制在1. 5-2 ml/min，更加優(yōu)選的，按照D301G樹脂：粗多糖酶 解液=1.6 : 1 (w/v),流速控制在1. 8 ml/min),收集流出液。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的方法，其特征是，所述的預(yù)處理是指，大孔吸附樹脂D301G先 用水浸泡24 h,用水洗至水液澄清，傾去水后加 1 M HC1溶液浸泡24 h,水洗至中性，加 1 Μ NaOH溶液浸泡24 h，用水洗至中性。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征是，步驟E.超濾去除小分子是指，采用超濾膜分 子量為1萬的中空纖維素膜進(jìn)行超濾，去除1萬以下的小分子物質(zhì)，得樺褐孔菌多糖樣品。
10.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征是，步驟F.真空冷凍干燥是指，先將樺褐孔菌 多糖樣品放置于_20°C下3 h，然后轉(zhuǎn)入-80°C下冷凍6 h以上，然后轉(zhuǎn)入真空冷凍干燥機(jī)干 燥，得精制的樺褐孔菌多糖。
【文檔編號】C08B37/00GK104045725SQ201410287909
【公開日】2014年9月17日 申請日期:2014年6月25日 優(yōu)先權(quán)日:2014年6月25日
【發(fā)明者】杜秀菊, 張揚(yáng), 劉珊 申請人:聊城大學(xué)