專利名稱：一種利用腸衣提取肝素鈉的工藝的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種肝素鈉工藝，特別涉及一種利用腸衣提取肝素鈉的工藝。
背景技術(shù)：
肝素鈉是粘多糖硫酸酯類抗凝血藥。肝素鈉是由豬或牛的腸粘膜中提取的硫酸氨基葡聚糖的鈉鹽，屬粘多糖類物質(zhì)。肝素鈉粗品是制造肝素鈉藥物的重要原料，其制備過(guò)程是動(dòng)物的小腸粘膜經(jīng)酶解、吸附、脫附、沉淀后，再進(jìn)行最后的烘干即可得到粗品肝素鈉。現(xiàn)有技術(shù)中的動(dòng)物腸衣肝素鈉的提取工藝有以下兩種鹽解法提取、酶解法提取和酶解加鹽解法提取。該工藝的缺點(diǎn)在于分解不完全，殘留量比較大。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明要解決的技術(shù)問(wèn)題是提供一種利用腸衣提取肝素鈉的工藝，能夠利用雙作用機(jī)械振動(dòng)作用，加速肝素與蛋白的結(jié)合部位切斷，有利于肝素在溶劑中的溶解和下一步的分離純化。為解決上述技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明的技術(shù)方案為一種利用腸衣提取肝素鈉的工藝，步驟主要包括原料處理、酶解提取、吸附、脫附、沉淀和烘干，其創(chuàng)新點(diǎn)在于所述酶解提取工序中，將小腸粘膜和料液混合后的混合液首先置于振動(dòng)酶解機(jī)中加入蛋白酶進(jìn)行振動(dòng)酶解，振動(dòng)酶解機(jī)振動(dòng)頻率為250HZ，振動(dòng)時(shí)間為20-35min ;然后再將該混合液置于超聲機(jī)中繼續(xù)酶解，超聲機(jī)的超聲波發(fā)射功率為240— 270W，超聲波發(fā)射總持續(xù)時(shí)間7-9min，單次超聲波發(fā)射持續(xù)時(shí)間10-12S。本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)在于在酶解時(shí)，利用振動(dòng)酶解機(jī)進(jìn)行振動(dòng)，通過(guò)其機(jī)械振動(dòng)來(lái)初步加速切斷肝素與蛋白的連接，然后再由超聲機(jī)的超聲波對(duì)混合液作用，使得混合液中每個(gè)氣泡的破裂時(shí)產(chǎn)生能量極大的沖擊波，相當(dāng)于瞬間產(chǎn)生幾百度的高溫和高達(dá)上千個(gè)大氣壓，利用該空化作用來(lái)進(jìn)一步加速切斷肝素與蛋白的連接，有利于肝素在溶劑中的溶解和下一步的分離純化。采用該提取工藝提取肝素鈉，比單獨(dú)的酶法提取量提高18-23 %，比單獨(dú)的超聲波法提取量提高13-16%，提取時(shí)間節(jié)省了 30-72min。提取率提高，生產(chǎn)周期減少。
具體實(shí)施例方式步驟主要包括原料處理、酶解提取、吸附、脫附、沉淀和烘干。上述步驟具體為
一、原料處理將新鮮的豬鮮腸(或冷凍豬鮮腸自然解凍之后)用清水仔細(xì)清洗去除內(nèi)外污物和外部皮膚脂肪后，絞碎成糜狀，并在充分?jǐn)嚢柘拢尤氲攘康乃旌暇鶆颉?
二、酶解提取先將上述原料在充分?jǐn)嚢柘?，將小腸粘膜溶液和料液進(jìn)行配比，將單根小腸與料液按體積比作單根小腸加水2. 4L的比例進(jìn)行混合，選其混合后的ph值為8—9。再加入事先已經(jīng)絞碎的新鮮胰漿作為酶解劑(所加入的豬胰漿按照原料液實(shí)際重量的1%-1. 5%為宜)進(jìn)行酶解。
特別之處酶解 提取工序中，采用雙作用振動(dòng)酶解。將小腸粘膜溶液和料液混合后的混合液首先置于振動(dòng)酶解機(jī)中加入蛋白酶進(jìn)行振動(dòng)酶解，振動(dòng)酶解機(jī)為市面上常見(jiàn)的由振動(dòng)電機(jī)驅(qū)動(dòng)的振動(dòng)機(jī)械。振動(dòng)酶解機(jī)振動(dòng)頻率為250HZ，振動(dòng)時(shí)間為20-35min ;然后再將該混合液置于超聲機(jī)中繼續(xù)酶解，超聲機(jī)的超聲波發(fā)射功率為240—270W，超聲波發(fā)射總持續(xù)時(shí)間7-9min，單次超聲波發(fā)射持續(xù)時(shí)間10-12S。實(shí)施例I :
振動(dòng)酶解機(jī)振動(dòng)時(shí)間20min，超聲機(jī)的發(fā)射功率240W，總持續(xù)時(shí)間7min，單次超生波發(fā)射持續(xù)時(shí)間10S。單根小腸肝素鈉產(chǎn)量為0. 61mg0實(shí)施例2:
振動(dòng)酶解機(jī)振動(dòng)時(shí)間29min，超聲機(jī)的發(fā)射功率255W，總持續(xù)時(shí)間8min，單次超生波發(fā)射持續(xù)時(shí)間HS。單根小腸肝素鈉產(chǎn)量為0. 63mg0實(shí)施例3:
振動(dòng)酶解機(jī)振動(dòng)時(shí)間35min，超聲機(jī)的發(fā)射功率270W，總持續(xù)時(shí)間9min，單次超生波發(fā)射持續(xù)時(shí)間12S。單根小腸肝素鈉產(chǎn)量為0. 67mg0三、離子交換吸附；先將上述酶解提取液冷卻至室溫，仔細(xì)撈除浮于液面的油脂薄片層，控制升溫至45度，停止加熱，在攪拌下加入事先預(yù)處理好的D-254型樹(shù)脂已有效的吸附料液中的肝素鈉成分，新樹(shù)脂的用量一般為料液的2. 55-3%，用過(guò)后的再生熟知應(yīng)酌情加大其用量，攪拌、吸附處理3個(gè)小時(shí)后靜置過(guò)濾，濾液可作為生產(chǎn)治療冠心病的新藥冠心舒的原料。將上述已經(jīng)吸附有肝素成分的D-254樹(shù)脂先用清水充分漂洗，干凈后，再用大約一倍的I. 2mol/L氯化鈉溶液對(duì)洗滌好的D-254樹(shù)脂進(jìn)行肝素鈉操作第一次洗脫液為樹(shù)脂體積的I. 5倍左右，大約洗脫4小時(shí)，第二次洗脫為樹(shù)脂體積的0. 5倍左右，洗脫時(shí)間為I小時(shí)。濾干樹(shù)脂，將洗脫液予以合并。將上述所得的洗脫液調(diào)節(jié)到PH=IO-Il,攪拌30分鐘后，靜置6小時(shí)，然后仔細(xì)的析出上層清液，下部沉淀物盡量的抽濾至干。合并清液和濾液，精細(xì)調(diào)節(jié)PH=6. 0-6. 5，加入I. 5倍量的95%乙醇沉淀過(guò)夜，翌日，仔細(xì)地烘吸出上層清液，收集下部沉淀物，抽濾至干(母液可套用于調(diào)PH值前的洗脫液中)。經(jīng)真空烘干，即得肝素鈉粗品。
權(quán)利要求
1.一種利用腸衣提取肝素鈉的工藝，步驟主要包括原料處理、酶解提取、吸附、脫附、沉淀和烘干，其特征在于所述酶解提取工序中，將小腸粘膜和料液混合后的混合液首先置于振動(dòng)酶解機(jī)中加入蛋白酶進(jìn)行振動(dòng)酶解，振動(dòng)酶解機(jī)振動(dòng)頻率為250HZ，振動(dòng)時(shí)間為20-35min ;然后再將該混合液置于超聲機(jī)中繼續(xù)酶解，超聲機(jī)的超聲波發(fā)射功率為240—270W，超聲波發(fā)射總持續(xù)時(shí)間7-9min，單次超聲波發(fā)射持續(xù)時(shí)間10-12S。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種利用腸衣提取肝素鈉的工藝，步驟主要包括原料處理、酶解提取、吸附、脫附、沉淀和烘干，其創(chuàng)新點(diǎn)在于所述酶解提取工序中，將小腸粘膜和料液混合后的混合液首先置于振動(dòng)酶解機(jī)中加入蛋白酶進(jìn)行振動(dòng)酶解，振動(dòng)酶解機(jī)振動(dòng)頻率為250HZ，振動(dòng)時(shí)間為20-35min；然后再將該混合液置于超聲機(jī)中繼續(xù)酶解，超聲機(jī)的超聲波發(fā)射功率為240—270W，超聲波發(fā)射總持續(xù)時(shí)間7-9min，單次超聲波發(fā)射持續(xù)時(shí)間10-12S。采用該提取工藝提取肝素鈉，比單獨(dú)的酶法提取量提高18-23%，比單獨(dú)的超聲波法提取量提高13-16%，提取時(shí)間節(jié)省了30-72min。提取率提高，生產(chǎn)周期減少。
文檔編號(hào)C08B37/10GK102633907SQ201210131368
公開(kāi)日2012年8月15日 申請(qǐng)日期2012年5月2日 優(yōu)先權(quán)日2012年5月2日
發(fā)明者費(fèi)正明, 費(fèi)正海, 費(fèi)蘋(píng), 陳明全, 陳躍建, 陳銀芳 申請(qǐng)人:如皋市永興腸衣有限公司