專利名稱：：二環(huán)稠合吡啶的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及二環(huán)稠合吡啶、其制備方法及其作為藥物的用途。美國專利US5169857A2公開用于治療動脈硬化、脂蛋白血癥和高脂蛋白血癥的7-(多取代吡啶基)-6-庚烯酸酯。另外，在歐洲專利EP325130A2中公開了7-(4-芳基-3-吡啶基)-3，5-二羥基-6-庚烯酸酯的制備過程。此外，在J.Chem.Soc.1949年，第2134頁和2137頁中，公開了化合物3-苯甲酰基-2-甲基-4-苯基-茚并[1，2-b]吡啶-5-酮。本發(fā)明涉及通式(I)二環(huán)稠合吡啶及其鹽和氮氧化物，但化合物3-苯甲酰基-2-甲基-4-苯基-茚并[1，2-b]吡啶-5-酮除外。A代表6-10個(gè)碳原子的芳基，該芳基可選地由下列取代基以相同或不同方式取代至多5次鹵素、羥基、三氟甲基、三氟甲氧基、硝基或各含至多7個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基、?；⒘u基烷基或烷氧基，或式-NR3R4基，其中，R3和R4是相同或不同的，代表氫、苯基或具有至多6個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基；D代表下式基團(tuán)R5-T-或其中，R5和R6相互獨(dú)立地代表具有3-8個(gè)碳原子的環(huán)烷基或6-10個(gè)碳原子的芳基或5-7元芳族的、含至多3個(gè)包括S、N和/或O的雜原相同或不同的方式取代至多5次三氟甲基、三氟甲氧基、鹵素、羥基、羧基，各含至多6個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基、酰基、烷氧基或烷氧基羰基，或其本身可被鹵素、三氟甲基或三氟甲氧基取代的苯基、苯氧基或苯硫基，或代表被式-NR9R10基取代的環(huán)，其中，R9和R10是相同或不同的，與上述R3和R4的定義相同。T代表各含至多10個(gè)碳原子的直鏈或支鏈亞烷基或亞鏈烯基，每個(gè)基團(tuán)可選地被羥基取代至多2次。R7代表氫或鹵素，和R8代表氫、鹵素、疊氮基、三氟甲基、羥基、三氟甲氧基、含至多5個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷氧基或式-NR11R12基團(tuán)，其中，R11和R12是相同或不同，與前述R3和R4的定義相同，或者R7和R8與C原子一起形成羰基；E代表3-8個(gè)碳原子的環(huán)烷基或代表可選地被3-8個(gè)碳原子的環(huán)烷基取代或被羥基取代的含至多8個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基；其中，a代表數(shù)字1，2或3，和R13代表氫、各含至多6個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基、?；蛲檠趸驶蚴?SiR14R15R16基團(tuán)，其中，R14、R15和R16相同或不同，代表至多6個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基，或代表苯基，其中，兩個(gè)環(huán)體系可選地被下列取代基以相同或不同方式取代至多3次鹵素、羧基或各含至多6個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基、烷氧基或烷氧基羰基。根據(jù)本發(fā)明的二環(huán)取代吡啶也可以以其鹽的形式存在。一般來說，可提及的是有機(jī)或無機(jī)堿式酸的鹽。在本發(fā)明范圍內(nèi)，優(yōu)選生理上可接受的鹽。根據(jù)本發(fā)明化合物的生理可接受的鹽可以是根據(jù)本發(fā)明的物質(zhì)與無機(jī)酸、羧酸或磺酸所成的鹽。特別優(yōu)選的鹽是例如與鹽酸、氫溴酸、硫酸、磷酸、甲磺酸、乙磺酸、甲苯磺酸、苯磺酸、萘二磺酸、乙酸、丙酸、乳酸、酒石酸、檸檬酸、富馬酸、馬來酸或苯甲酸所成的鹽。生理上可接受的鹽也可以是根據(jù)本發(fā)明的含游離羧基化合物的金屬鹽或銨鹽。特別優(yōu)選的鹽是例如鈉、鉀、鎂或鈣鹽，也包括銨鹽，該銨鹽來自氨或有機(jī)胺例如如乙胺、二或三乙胺、二或三乙醇胺、二環(huán)己基胺、二甲基乙醇胺、精氨酸、賴氨酸、1，2-乙二胺或2-苯基乙胺。根據(jù)本發(fā)明的化合物可以以立體異構(gòu)形式存在，它們表現(xiàn)為像和鏡像(對映體)關(guān)系或不表現(xiàn)為像和鏡像(非對映體)關(guān)系。本發(fā)明既涉及對映體或非對映體也涉及它們相應(yīng)的混合物?？刹捎靡阎椒▽⒃搶τ丑w和非對映體混合物分離成為立體異構(gòu)均一的成分。在本發(fā)明范圍內(nèi)，雜環(huán)可以是苯并稠合雜環(huán)，代表飽和或不飽和5-7元雜環(huán)，優(yōu)選5-6元雜環(huán)，它可以含直到3個(gè)包括S、N和/或O的雜原子。可提及實(shí)例包括吲哚基、異喹啉基、喹啉基。苯并[b]苯硫基。苯并[b]呋喃基、吡啶基、噻吩基、呋喃基、吡咯基、噻唑基、噁唑基、咪唑基、嗎啉基或哌啶基。優(yōu)選喹啉基、呋喃基、吡啶基和噻吩基。優(yōu)選的本發(fā)明通式(I)化合物是具下列結(jié)構(gòu)特征的那樣一些化合物及其鹽和氮氧化物，但化合物3-苯甲?；?2-甲基-4-苯基茚[1，2-b]吡啶-5-酮除外其中，A代表萘基或苯基，其中每一個(gè)可選地由下列取代基以相同或不同方式取代至多3次氟、氯、溴、羥基、三氟甲基、三氟甲氧基、硝基或各含至多6個(gè)碳原子直鏈或支鏈烷基或烷氧基；D代表下式基團(tuán)R5-T-或其中，R5和R6相互獨(dú)立地代表環(huán)丙基、環(huán)戊基或環(huán)己基或代表萘基、苯基、吡啶基、喹啉基、吲哚基、苯并噻唑基或四氫化萘基，其中每一個(gè)可選地由下列取代基以相同或不同的方式取代至多3次三氟甲基、三氟甲氧基、氟、氯、溴、羥基、羧基，各含至多5個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基、?；⑼檠趸蛲檠趸驶蚱浔旧砜梢员环?、氯、溴、三氟甲基或三氟甲氧基取代的苯基、苯氧基或苯硫基，T代表各含至多6個(gè)碳原子的直鏈或支鏈亞烷基或亞鏈烯基，其中每一個(gè)可選地被羥基取代至多2次，R7代表氫、氟、氯或溴，和R8代表氫、氟、氯、溴、疊氮、三氟甲基、羥基、三氟甲氧基、含至多4個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷氧基，或者R7和R8與C原子一起形成羰基；E代表環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基或環(huán)庚基或代表可選地被環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)己基或環(huán)庚基取代或被羥基取代的含至多6個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基；R1和R2一起形成含至多6個(gè)碳原子的直鏈或支鏈亞烷基，苯環(huán)與該亞烷基稠合，該亞烷基必須被羰基或下式基團(tuán)取代或-OR13，其中，a代表數(shù)字1，2或3，和R13代表氫、各含至多5個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基、酰基或烷氧基羰基或式-SiR14R15R16基團(tuán)，其中，R14、R15和R16相同或不同，代表至多5個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基，或代表苯基，其中，兩個(gè)環(huán)體系可選地被下列取代基以相同或不同方式取代至多3次氟、氯、溴或各含至多5個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基、烷氧基或烷氧基羰基。特別優(yōu)選的式(I)化合物是具下列結(jié)構(gòu)特征的化合物及其鹽和N-氧化物，但3-苯甲?；?2-甲基-4-苯基-茚并[1，2-b]吡啶-5-酮除外。其中，A代表可選地被氟、氯、甲基、甲氧基、硝基或三氟甲基取代的苯基，D代表下式基團(tuán)R5-T-或其中，R5和R6相互獨(dú)立地代表環(huán)丙基、苯基、吡啶基、喹啉基、吲哚基、苯并噻唑基或四氫化萘基，其中每一個(gè)可選地被下列取代基以相同或不同的方式取代至多2次三氟甲基、硝基、三氟甲氧基、氟、氯、溴、羥基、羧基，各含至多4個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基、酰基、烷氧基或烷氧基羰基，或其本身可以被氟、氯、溴、三氟甲基或三氟甲氧基取代的苯基、苯氧基或苯硫基，T代表各含至多4個(gè)碳原子的直鏈或支鏈亞烷基或亞鏈烯基，其中每一個(gè)可選地被羥基取代至多2次，R7代表氫或氟，和R8代表氫、氟、氯、溴、疊氮基、三氟甲基、羥基、三氟甲氧基或甲氧基，或R7和R8與C原子一起形成羰基；E代表環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基或環(huán)庚基或代表可選地被環(huán)戊基或環(huán)己基取代的含至多5個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基；R1和R2一起形成含至多5個(gè)碳原子的直鏈或支鏈亞烷基，苯環(huán)與該亞烷基稠合，該亞烷基必須被羰基或下式基團(tuán)取代或-OR13，其中，a代表數(shù)字1，2或3，和R13代表氫、各含至多4個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基、?；蛲檠趸驶蚴?SiR14R15R16基團(tuán)，其中，R14、R15和R16相同或不同，代表至多4個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基，或代表苯基，其中，兩個(gè)環(huán)體系可選地被下列取代基以相同或不同方式取代至多3次氟、氯各含至多4個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基、烷氧基或烷氧基羰基。最特別優(yōu)選的本發(fā)明通式(I)化合物是具有下列結(jié)構(gòu)特征的化合物其中A代表可選地被氟或氯取代的苯基，E代表異丙基或環(huán)戊基。另外，已經(jīng)得到用于制備本發(fā)明通式(I)化合物的方法，其特征在于按照格利雅或維悌希反應(yīng)(GrignardorWittigreaction)，首先，在惰性溶劑中，利用有機(jī)金屬試劑，在通式(II)化合物中導(dǎo)入取代基D，并且，如合適，可以按照常用方法變換或?qū)肷鲜鯝、E和/或R1和R2代表的取代基。其中，A、E、R1和R2與上述定義相同。例如借助下列反應(yīng)路線可以說明本發(fā)明的方法適合的溶劑是醚類化合物例如乙醚、二氧六環(huán)、四氫呋喃、乙二醇二甲醚，或烴類化合物例如苯、甲苯、二甲苯、己烷、環(huán)己烷或石油餾份，或鹵代烴類化合物例如二氯甲烷、三氯甲烷、四氯化碳、二氯乙烷、三氯乙烷或氯苯，或乙酸乙酯，或三乙胺、吡啶、二甲亞砜、二甲基甲酰胺、六甲基磷酰胺、乙腈、丙酮或硝基甲烷。也可以使用上述溶液的混合物。優(yōu)選二氯甲烷?？赡苡糜趥€(gè)別步驟的堿是普通強(qiáng)堿性化合物。優(yōu)選的堿包括有機(jī)鋰化合物例如如正丁基鋰、仲丁基鋰、叔丁基鋰或苯基鋰，或胺類化合物例如如二-異丙基氨基化鋰、氨基化鈉或氨基化鉀，或六甲基甲硅烷基氨基化鋰，或堿金屬氫化物例如氫化鈉或氫化鉀。特別優(yōu)選使用正丁基鋰或氫化鈉。合適的有機(jī)金屬試劑是例如如Mg/溴代三氟甲苯和對-三氟甲基苯基鋰系列。合適的維悌希試劑是常用試劑。優(yōu)選3-三氟甲基芐基三苯基溴化鏻。一般來講，合適的堿是上述堿之一，優(yōu)選雙-(三乙基丁基)氨基化鋰。相對于1mol反應(yīng)物，所述堿的用量為0.1mol-5mol，優(yōu)選0.5mol-2mol。使用維悌希試劑的反應(yīng)一般在0℃-150℃溫度下進(jìn)行，優(yōu)選在25℃-40℃進(jìn)行。維悌希反應(yīng)一般在常壓下進(jìn)行。但是，該反應(yīng)也可能在減壓或升壓條件下(例如，0.5-5巴壓力)進(jìn)行。一般使用還原劑來完成還原反應(yīng)，優(yōu)選使用適合于將酮還原成羥基化合物的還原劑。尤其適合本發(fā)明范圍的是采用在惰性溶劑中金屬氫化物或復(fù)合金屬氫化物的還原，如合適時(shí)，在三烷基硼存在下還原。優(yōu)選使用復(fù)合金屬氫化物例如如硼氫化鋰、硼氫化鈉、硼氫化鉀、硼氫化鋅、三烷基硼氫化鋰、二異丁基氫化鋁或氫化鋁鋰。最優(yōu)選使用二異丁基氫化鋁和硼氫化鈉的還原反應(yīng)。相對于1mol的待還原化合物，一般所述還原劑的用量為1mol-10mol，優(yōu)選1mol-3mol。就二異丁基氫化鋁而言，所述還原反應(yīng)一般在-78℃～+50℃進(jìn)行，優(yōu)選-78℃～0℃，特別優(yōu)選在-78℃下進(jìn)行，就每種情況而言，這取決于所選擇的還原劑和溶劑。一般所述還原反應(yīng)在常壓下進(jìn)行，但也可在升壓或減壓下進(jìn)行。舉例來說，可以提及的衍生化作用是下列類型反應(yīng)氧化反應(yīng)、還原反應(yīng)、氫化反應(yīng)、鹵化反應(yīng)、維悌希/格利雅反應(yīng)和酰胺化/磺酰胺化反應(yīng)?？赡苡糜趥€(gè)別步驟的堿是普通強(qiáng)堿化合物。它們優(yōu)選包括有機(jī)鋰化合物例如如正丁基鋰、仲丁基鋰、叔丁基鋰或苯基鋰，或胺類化合物例如如二-異丙基氨基化鋰、氨基化鈉或氨基化鉀，或六甲基甲硅烷基氨基化鋰，或堿金屬氫化物例如氫化鈉或氫化鉀。特別優(yōu)選使用正丁基鋰或氫化鈉。另外，合適的堿是常用無機(jī)堿。這些堿優(yōu)選包括堿金屬氫氧化物或堿土金屬氫氧化物例如，如氫氧化鈉、氫氧化鉀或氫氧化鋇，或堿金屬碳酸鹽例如碳酸鈉或碳酸鉀或碳酸氫鈉。特別優(yōu)選使用氫氧化鈉或氫氧化鉀。用于個(gè)別反應(yīng)步驟的合適溶劑是醇類化合物例如甲醇、乙醇。丙醇、丁醇或叔丁醇。優(yōu)選叔丁醇?？赡鼙仨氃诒Ｗo(hù)性氣體下完成某些反應(yīng)步驟。一般在上述氯代烴之一或甲苯中完成鹵化反應(yīng)，優(yōu)選二氯甲烷和甲苯。合適的鹵化試劑是例如二乙胺基硫三氟化物(DAST)或SOCl2。所述鹵化反應(yīng)一般在-78℃～+50℃溫度下進(jìn)行，優(yōu)選-78℃～0℃，就每種情況而言，這決定于所選擇的鹵化劑和溶劑。一般所述鹵化反應(yīng)在常壓下進(jìn)行，但是也可能在升壓或減壓下進(jìn)行。通式(II)化合物是新化合物并可通過下列過程制備使通式(III)化合物與通式(IV)醛類和通式(V)化合物反應(yīng)，制備通式(VI)化合物，并且在最后一步中，通過還原/氧化步驟，將烷氧基羰基(R17)轉(zhuǎn)變成醛基，通式(III)為其中，E與前述定義相同，R17代表C1-C4烷氧基羰基，A-CHO(IV)其中，A與前述定義相同，其中，R18和R19(包括羰基)包括前述R1和R2定義的范圍，其中，A、E、R17、R18和R19與上述定義相同。氧化反應(yīng)適合的溶劑是醚類化合物例如乙醚、二氧六環(huán)、四氫呋喃、乙二醇二甲醚，或烴類化合物例如苯、甲苯、二甲苯、己烷、環(huán)己烷或石油餾份，或鹵代烴類化合物例如二氯甲烷、三氯甲烷、四氯化碳、二氯乙烷、三氯乙烷或氯苯，或乙酸乙酯，或三乙胺、吡啶、二甲亞砜、二甲基甲酰胺、六甲基磷酰胺、乙腈、丙酮或硝基甲烷。也可以使用上述溶液的混合物。優(yōu)選二氯甲烷。合適的氧化劑是例如三氧化硫-吡啶復(fù)合物、硝酸鈰(IV)銨、2，3-二氯-5，6-二氰基-苯醌、氯鉻酸吡啶鎓(PCC)、四氧化鋨和二氧化錳。優(yōu)選三氧化硫-吡啶復(fù)合物。相對1mol通式(IV)化合物，氧化劑用量為1mol-10mol，優(yōu)選2mol-5mol。一般氧化反應(yīng)在-50℃～+100℃溫度下進(jìn)行，優(yōu)選0℃到室溫。一般氧化反應(yīng)在常壓下進(jìn)行。但是，也可能在升壓或減壓下完成氧化反應(yīng)。通式(III)、(IV)和(V)化合物本身是已知的或可以用常規(guī)方法制備。通式(VI)化合物是新的并可按上述方法制備。根據(jù)本發(fā)明的通式(I)化合物具有不可預(yù)見的藥理作用范圍。根據(jù)本發(fā)明的通式(I)化合物具有優(yōu)于現(xiàn)有技術(shù)有用的藥理性質(zhì)，尤其它們是膽固醇酯轉(zhuǎn)移蛋白(CETP)的高度有效抑制劑并促進(jìn)逆膽固醇轉(zhuǎn)運(yùn)。根據(jù)本發(fā)明的活性化合物可使血液中LDL膽固醇水平降低，同時(shí)升高HDL膽固醇水平。所以，首選使用該化合物治療高脂蛋白血癥、低脂蛋白血癥、dislipidaemia、高甘油三酯血癥、混合性高脂血癥或動脈硬化。在下列試驗(yàn)中，測定根據(jù)本發(fā)明化合物的藥理作用。CETP抑制試驗(yàn)CETP的獲得CETP是經(jīng)差速離心和柱層析，以部分純化的形式從人血漿中獲得并用在本試驗(yàn)中。為此，用NaBr將人血漿密度調(diào)整到1.21g/ml，并在4℃，以50000rpm離心18個(gè)小時(shí)。將其底層加到Sephadex苯-交聯(lián)葡聚糖凝膠4B(Pharmacia)柱上，用0.15MNaCl/0.001Mtris液HCl(pH7.4)洗滌，然后用蒸餾水洗脫。收集活性CETP部分，向50mM醋酸鈉(pH4.5)中滲析并加到CM-Sepharose(Pharmacia)柱上。然后，使用線性梯度(0-1MNaCl)洗脫該柱。使收集的CETP部分向10mMtris液HCl(pH7.4)中滲析，然后經(jīng)MonoQ柱(Pharmacia)層析，進(jìn)一步純化。放射性標(biāo)記HDL的獲得使用NaBr將50ml新鮮人EDTA血漿密度調(diào)整到1.12，并在4℃，以50000rpm在Ty65旋轉(zhuǎn)器上離心18個(gè)小時(shí)。其上層用來獲取無放射性的LDL。其下層向3×4LPDB緩沖液(10mMtris液/HCl(pH7.4)，0.15mMNaCl，1mMEDTA，0.02％NaN3)中透析。然后，每10ml滯留物中，加入20μl的3H-膽固醇(DupontNET-725；1μC/μl(溶在乙醇中！))，并將該混合物在N2中，37℃保溫72小時(shí)。然后，用NaBr將該混合物密度調(diào)整到1.21，并在20℃，以50000rpm在Ty65旋轉(zhuǎn)器上離心18個(gè)小時(shí)?；厥掌渖蠈?，并用梯度離心純化其脂蛋白部分。為此，用NaBr將該分離、標(biāo)記的脂蛋白部分密度調(diào)整到1.26。在離心試管(SW40旋轉(zhuǎn)器)中，每4ml該溶液用4ml密度為1.21溶液和4.5ml密度為1.063溶液(不同密度溶液來自PDB緩沖液和NaBr)覆蓋一層，然后在20℃，以38000rpm，在SW40旋轉(zhuǎn)器上離心24個(gè)小時(shí)。使位于密度1.063和1.21溶液之間，含標(biāo)記HDL的中間層在4℃下，向3×100體積的PDB緩沖液中透析。其滯留物含放射性標(biāo)記3H-CE-HDL，將其調(diào)整到約5×106cpm/ml，用于本試驗(yàn)中。CETP試驗(yàn)為檢測CETP活性，測定從人HD脂蛋白轉(zhuǎn)移到生物素(bioinylated)LD脂蛋白的3H-膽固醇酯。通過加入抗生蛋白鏈菌素-SPA串珠(Amersham)使所述反應(yīng)終止，并經(jīng)液體閃爍計(jì)數(shù)器，直接測定轉(zhuǎn)移的放射性活性。在所述檢測混合物中，10μlHDL-3H膽固醇酯(～50000cpm)與10μl生物素-LDL(Amersham)在包括10μlCETP(1mg/ml)和3μl待檢測物質(zhì)溶液(溶在10％DMSO/1％RSA中)的50mMHepes/0.15MNaCl/0.1％牛血清白蛋白/0.05％NaN3(pH7.4)中在37℃保溫18個(gè)小時(shí)。然后加入200μlSPA-抗生蛋白鏈菌素串珠溶液(TRKQ7005)，將該混合物振搖，再保溫1小時(shí)，然后在閃爍計(jì)數(shù)器上測試。作為對照組，相應(yīng)地用10μl緩沖液、在4℃下10μlCETP和在37℃下10μlCETP保溫。將在37℃下轉(zhuǎn)移到含CETP的對照混合物的活性定為100％轉(zhuǎn)移。當(dāng)該轉(zhuǎn)移下降一半時(shí)，所述物質(zhì)濃度表示為IC50值。在下表A中，表示CETP抑制劑的IC50值(mol/l)。表A</tables>根據(jù)本發(fā)明化合物的離體活性室內(nèi)喂養(yǎng)的Syrian金倉鼠在禁食24小時(shí)后被麻醉(皮下注射0.8mg/kg的阿托品、0.8mg/kg的ketavet，30分鐘后，腹膜內(nèi)注射50mg/kg的戊巴比妥)。然后，暴露頸靜脈并插套管。將所述待檢測物質(zhì)溶解在合適溶劑中(通常為Adalat對照劑溶液60g甘油、100ml水，加PEG-400到1000ml)，并經(jīng)插在頸靜脈中的PE導(dǎo)管給與動物。對照組動物接受同體積溶劑，不含待檢測物質(zhì)。然后避免該靜脈，閉合傷口。也可以口服給與待檢測物質(zhì)，借助于胃管，口服給與溶解在DMSO中和懸浮在0.5％纖基乙酸鈉中的待檢測物質(zhì)。對照組動物接受同樣體積的不含待檢測物質(zhì)的溶劑。在給藥后直到24個(gè)小時(shí)的不同時(shí)間間隔內(nèi)，經(jīng)對該動物眼眶后靜脈叢穿刺，抽取血樣(約250μl)。在4℃下保溫過夜防止血液凝固，然后，以6000×9離心10分鐘。通過改進(jìn)的CETP試驗(yàn)測定由此得到的血清中CETP的活性。與上述CETP試驗(yàn)相同，測定由HD脂蛋白轉(zhuǎn)移到生物素LD脂蛋白的3H-膽固醇酯。加入抗生蛋白鏈菌素-SPA串珠(Amersham)使所述反應(yīng)終止，并在液體閃爍計(jì)數(shù)器中直接測定轉(zhuǎn)移的放射性活性。按“CETP試驗(yàn)”題目下介紹的方法處理上述檢測混合物。為檢測其中血清，只是用10μl相應(yīng)血清樣品代替10μlCETP。作為對照組，相應(yīng)保溫未處理動物的血清。在含對照血清的對照組混合物中轉(zhuǎn)移的活性定為100％轉(zhuǎn)移。當(dāng)該轉(zhuǎn)移下降一半時(shí)所述物質(zhì)濃度表示為ED50值。表B代表離體活性的ED50值<</tables>根據(jù)本發(fā)明化合物的體內(nèi)活性在確定口服給藥對脂蛋白和三甘油酯的影響實(shí)驗(yàn)中，經(jīng)胃管口服給與室內(nèi)飼養(yǎng)的Syrian金倉鼠溶解在DMSO和懸浮在0.5％纖基乙酸鈉中的待檢測物質(zhì)。為測定CETP活性，在該實(shí)驗(yàn)開始前，經(jīng)眼眶后穿刺取血(約250μl)。然后，經(jīng)胃管口服給與所述待檢測物質(zhì)。對照組動物接受同樣體積量不含待檢測物質(zhì)的溶劑。然后停止給動物喂食，在給藥后直到24小時(shí)的不同時(shí)間間隔內(nèi)，經(jīng)眼眶后靜脈叢穿刺取血。在4℃保溫過夜以防止血液凝固，然后以6000xg離心10分鐘。利用改進(jìn)的市售酶的試驗(yàn)(膽固醇酶14366Merk，三甘油酯14364Merck)測定由此得到血清中的膽固醇和三甘油酯含量。血清用生理鹽水適當(dāng)稀釋。將100μl血清稀釋液與100μl待檢測物質(zhì)在96穴培養(yǎng)皿中混合并在室溫下保溫10分鐘。然后使用自動平板掃描儀(automaticplate-readingapparatus)在492nm波長處測定其光密度。利用同時(shí)測得的標(biāo)準(zhǔn)曲線，測定上述樣品中所含三甘油酯或膽固醇的濃度。使用試劑混合物(Sigma352-4HDL膽固醇試劑)在沉淀含ApoB的脂蛋白后，按照廠家的說明測定HDL膽固醇含量。表C</tables>在transgenichCETP鼠體內(nèi)活性室內(nèi)飼養(yǎng)的Transglnic鼠(Dinchuck，Hart，Gonzalez，Karmann，Schmidt，Wirak，BBA(1995)，1295，301)在進(jìn)食中給與待檢測物質(zhì)。在該實(shí)驗(yàn)開始前，從鼠眼眶后采血，以便測定血清中膽固醇和三甘油酯。按照上述處理倉鼠的方法，經(jīng)在4℃下保溫過夜和接著以6000×g離心，得到所述血清。一周后，再次從該鼠采血，以便測定脂蛋白和三甘油酯。測定的參數(shù)上的變化表示為與初始數(shù)值相比變化百分率。表D</tables>另外，本發(fā)明涉及將通式(I)二環(huán)稠合吡啶與葡糖苷酶和/或淀粉酶抑制結(jié)合用于治療家族性高脂血癥、肥胖(肥胖癥)和糖尿病。在本發(fā)明范圍內(nèi)的葡糖苷酶和/或淀粉酶抑制劑是例如阿卡糖、脂解素、Voglibose、miglitol、emiglitate、MDL-25637、camiglibose(MDL-73945)、tendamistate、AI-3688、trestatin、pradimicin-Q和salbostatin。優(yōu)選將阿卡糖、miglitol、emiglitate或roglibose與上述通式(I)化合物之一結(jié)合使用。此外，根據(jù)本發(fā)明的化合物可以與降膽固醇的vastatins或降A(chǔ)poB的成分結(jié)合使用，以便治療異常脂血癥(dyslipidaemias)、混合性高脂血癥、高膽固醇血癥或高三甘油酯血癥。也可以使用上述組合作為冠心病的一級或二級防治。本發(fā)明范圍內(nèi)的vastatins是例如洛伐他汀、simvastatin、pravastatin、fluvastatin、atorvastatin和cerivastatin。降A(chǔ)poB劑是例如MTP抑制劑。優(yōu)選cerivastatin或ApoB抑制劑與上述根據(jù)本發(fā)明的通式(I)化合物之一的組合。所述新的活性化合物按照已知方法使用惰性、非毒性藥學(xué)上適合的賦形劑或溶劑可以制成常規(guī)制劑，例如片劑、包衣片、丸劑、顆粒劑、氣霧劑、糖漿劑、乳化劑、混懸劑或溶液劑。假使這樣的話，在每種情況下治療活性化合物的濃度應(yīng)該約占總混合物的0.5-90％(重量)即足以達(dá)到所示劑量范圍所需要用量。例如通過用溶劑和/或賦形劑分散所述活性化合物來制備上述制劑，如合適時(shí)使用乳化劑和/或分散劑，例如，當(dāng)用水作為稀釋劑時(shí)，可選地使用有機(jī)溶劑作為輔助劑。按常規(guī)方式包括靜脈注射、非腸道、經(jīng)舌或口服給藥，優(yōu)選口服給藥。如采用非腸道給藥的話，可以使用含合適液體賦形物質(zhì)的活性化合物的溶液劑。一般，已證明如采用靜脈注射給藥的話，給藥量約為0.001-1mg/kg體重，優(yōu)選約0.01-0.5mg/kg體重有利于達(dá)到藥效，如采用口服給藥，給藥劑量約為0.01-20mg/kg體重，優(yōu)選0.1-10mg/kg體重。盡管這樣，如合適時(shí)，需要改變上述給藥劑量，主要取決于體重或給藥途徑，取決于個(gè)體對藥物反應(yīng)、劑型和服藥時(shí)間或間隔。所以，在某些情況下使況用低于上述最低劑量的藥物就足夠了，而在另一些情況下不得不超過上述較高的限量。當(dāng)給與較大劑量時(shí)，建議將其分成小劑量，在全天中分次使用?？s寫C表示環(huán)己烷EA表示乙酸乙酯PE表示石油醚THF表示四氫呋喃原料化合物實(shí)施例I7，8-二氯-4-(4-氟苯基)-2-異丙基-5-氧代-5H-茚并[1，2-b]吡啶-3-羧酸甲酯將44g的5，6-二氯-2，3-二氫-1，3-茚二酮(204mmol)、29.2g的3-氨基-4-甲基-2-戊烯酸甲酯(204mmol)和25.3g的對-氟苯甲醛(204mmol)溶解在300ml甲苯中，將該混合物在脫水器中加熱到回流溫度達(dá)18小時(shí)。冷卻后，過濾，將濾液濃縮。該粗制品在1.2kg硅膠(0.04-0.063mm)柱上用環(huán)己烷乙酸乙酯9∶1洗脫。產(chǎn)量14.5g(理論值的16％)Rf＝0.37(C/EA9∶1)實(shí)施例II7，8-二氯-4-(4-氟苯基)-3-羥甲基-2-異丙基-5H-茚并[1，2-b]吡啶-5-醇將7.4g實(shí)施例I化合物(16.7mmol)在氬氣下溶于155ml無水甲苯中，在-70℃下滴加66.6ml1M二異丁基氫化鋁的甲苯(66.6mmol)溶液。在-70℃攪拌30分鐘后，在-60℃攪拌30分鐘，緩慢滴加15.6ml甲醇，撤去冷浴。接著用100ml甲苯稀釋該混合物，并加入900ml20％濃度的酒石酸鈉鉀溶液，攪拌該混合物1小時(shí)。在分離有機(jī)相和水相后，用甲苯再萃取水相，合并后的有機(jī)相用飽和氯化鈉溶液洗，然后經(jīng)硫酸鈉干燥。濃縮有機(jī)相而得的粗制品在600g硅膠(0.04-0.063mm)柱上，用C/EA8∶2洗脫。產(chǎn)量4.47g(理論值的64％)Rf＝0.12(C/EA8∶2)實(shí)施例III7，8-二氯-4-(-4-氟苯基)-2-異丙基-5-氧代-5H-茚并[1，2-b]吡啶-3-甲醛在室溫下，將6.8g的氯鉻酸吡啶鎓(30mol)和3.2g氧化鋁(30mol)的混合物加到2.1g實(shí)施例II化合物(5mmol)的二氯甲烷(140ml)溶液中。1.5小時(shí)后，加入一些硅膠，使該混合物經(jīng)280g硅膠過濾，用約2000ml二氯甲烷洗該固體。濃縮合并的濾液并經(jīng)高真空干燥。產(chǎn)量1.8g(理論值的87％)Rf＝0.45(C/EA8∶2)制備實(shí)施例實(shí)施例17，8-二氯-4-(4-氟苯基)-3-[羥基-(4-三氟甲基-苯基)-甲基]-2-異丙基-茚并[1，2-b]吡啶-5-酮a)制備格利雅試劑在氬氣下，將100mlTHF加到537mg鎂(22.4mmol)中，加入幾滴二溴甲烷，加熱該混合物至回流。將溶在20mlTHF中的3.47g對溴三氟甲苯(15.6mmol)緩慢滴加到回流的懸浮液中。2小時(shí)后，將其冷卻到室溫。b)將格利雅試劑加成到實(shí)施例III化合物上在-20℃下，將在a)合成的格利雅溶液滴加到2.18g實(shí)施例III化合物(5.2mmol)的THF(50ml)溶液中。30分鐘后，加入50ml飽和氯化銨溶液，并攪拌該混合物10分鐘。將其用水和甲苯稀釋，將兩相分離，用甲苯再萃取水相，合并后的有機(jī)相用飽和氯化鈉溶液洗滌，最后用硫酸鈉干燥有機(jī)相并濃縮之。粗制品經(jīng)600g硅膠(0.04-0.063mm)柱；用C/EA9∶1洗脫。將洗脫液結(jié)晶。產(chǎn)量2.6g(理論值的89％)Rf＝0.32(C/EA8∶2)實(shí)施例27，8-二氯-4-(4-氟苯基)-3-[氟-(4-三氟甲基-苯基)-甲基]-2-異丙基-茚并[1，2-b]吡啶-5-酮在氬氣下，將260mg實(shí)施例I化合物(0.46mmol)溶在10ml二氯甲烷中，在-70℃下，滴加0.06ml二乙胺基硫三氟化物在1ml氯甲烷中的溶液。在該溫度下10分鐘后，加入6ml飽和碳酸氫鈉溶液，并將該混合物加熱到室溫。分離兩相，用水洗有機(jī)相，經(jīng)硫酸鈉干燥，過濾并濃縮。將其在20g硅膠(0.04-0.063mm)柱上用C/EA95∶5洗脫。產(chǎn)量184mg(理論值約71％)Rf＝0.43(C/EA9∶1)實(shí)施例37，8-二氯-4-(4-氟苯基)-3-[羥基-(4-三氟甲基-苯基)-甲基]-2-異丙基-5H-茚并[1，2-b]吡啶-5-醇在0℃下，將16mg硼氫化鈉(0.4mmol)加到122mg的實(shí)施例2化合物(0.2mmol)的甲醇(10ml)溶液中，并在室溫下攪拌該混合物達(dá)2小時(shí)。用飽和氯化銨處理該混合物，并用甲苯萃取三次。合并后的有機(jī)相經(jīng)硫酸鈉干燥，過濾和濃縮。粗制品經(jīng)硅膠(0.04-0.063mm)柱，用C/EA97∶3洗脫。產(chǎn)量119mg(理論值的97％)Rf＝0.17(C/EA9∶1)分離非對映體使用制備HPLC(250×25mm，RP18，7μm，用乙腈/水8∶2洗脫，流速6ml/min)。使用上述RP18柱，進(jìn)樣2次，分離得到實(shí)施例VI化合物110mg。產(chǎn)量56mg的非對映體A，41mg非對映體BRf＝0.17(C/EA9∶1)按類似于實(shí)施例1-3的方法制備表1中所示化合物表1按照類似上述方法制備表2中所示化合物表權(quán)利要求1.通式(I)二環(huán)稠合吡啶及其鹽和氮氧化物，其中，A代表6-10個(gè)碳原子的芳基，該芳基可選地由下列取代基以相同或不同方式取代至多5次鹵素、羥基、三氟甲基、三氟甲氧基、硝基或各含至多7個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基、?；⒘u基烷基或烷氧基，或式-NR3R4基，其中，R3和R4是相同或不同的，代表氫、苯基或具有至多6個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基；D代表下式基團(tuán)R5-T-或其中，R5和R6相互獨(dú)立地代表具有3-8個(gè)碳原子的環(huán)烷基或6-10個(gè)碳原子的芳基或5-7元芳族的、含至多3個(gè)包括S、N和/或O的雜原子的可選地苯并稠合雜環(huán)基，其中每個(gè)取代基可選地由下列取代基以相同或不同的方式取代至多5次三氟甲基、三氟甲氧基、鹵素、羥基、羧基，各含至多6個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基、?；⑼檠趸蛲檠趸驶?，或其本身可被鹵素、三氟甲基或三氟甲氧基取代的苯基、苯氧基或苯硫基，或代表被式-NR9R10基取代的環(huán)，其中，R9和R10是相同或不同的，與上述R3和R4的定義相同。T代表各含至多10個(gè)碳原子的直鏈或支鏈亞烷基或亞鏈烯基，每個(gè)基團(tuán)可選地被羥基取代至多2次。R7代表氫或鹵素，和R8代表氫、鹵素、疊氮基、三氟甲基、羥基、三氟甲氧基、含至多5個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷氧基或式-NR11R12基團(tuán)，其中，R11和R12是相同或不同，與前述R3和R4的定義相同，或者R7和R8與C原子一起形成羰基；E代表3-8個(gè)碳原子的環(huán)烷基或代表可選地被3-8個(gè)碳原子的環(huán)烷基取代或被羥基取代的含至多8個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基；R1和R2一起形成含至多8個(gè)碳原子的直鏈或支鏈亞烷基，苯環(huán)與該亞烷基稠合，該亞烷基必須被羰基或下式基團(tuán)取代或-OR13，其中，a代表數(shù)字1，2或3，和R13代表氫、各含至多6個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基、?；蛲檠趸驶蚴?SiR14R15R16基團(tuán)，其中，R14、R15和R16相同或不同，代表至多6個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基，或代表苯基，其中，兩個(gè)環(huán)體系可選地被下列取代基以相同或不同方式取代至多3次鹵素、羧基或各含至多6個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基、烷氧基或烷氧基羰基。2.按照權(quán)利要求1通式的二環(huán)稠合吡啶及其鹽和氮氧化物，其中，A代表萘基或苯基，其中每一個(gè)可選地由下列取代基以相同或不同方式取代至多3次氟、氯、溴、羥基、三氟甲基、三氟甲氧基、硝基或各含至多6個(gè)碳原子直鏈或支鏈烷基或烷氧基；D代表下式基團(tuán)R5-T-或其中，R5和R6相互獨(dú)立地代表環(huán)丙基、環(huán)戊基或環(huán)己基或代表萘基、苯基、吡啶基、喹啉基、吲哚基、苯并噻唑基或四氫化萘基，其中每一個(gè)可選地由下列取代基以相同或不同的方式取代至多3次三氟甲基、三氟甲氧基、氟、氯、溴、羥基、羧基，各含至多5個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基、酰基、烷氧基或烷氧基羰基，或其本身可以被氟、氯、溴、三氟甲基或三氟甲氧基取代的苯基、苯氧基或苯硫基，T代表各含至多6個(gè)碳原子的直鏈或支鏈亞烷基或亞鏈烯基，其中每一個(gè)可選地被羥基取代至多2次，R7代表氫、氟、氯或溴，和R8代表氫、氟、氯、溴、疊氮、三氟甲基、羥基、三氟甲氧基、含至多4個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷氧基，或者R7和R8與C原子一起形成羰基；E代表環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基或環(huán)庚基或代表可選地被環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)己基或環(huán)庚基取代或被羥基取代的含至多6個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基；R1和R2一起形成含至多6個(gè)碳原子的直鏈或支鏈亞烷基，苯環(huán)與該亞烷基稠合，該亞烷基必須被羰基或下式基團(tuán)取代或-OR13，其中，a代表數(shù)字1，2或3，和R13代表氫、各含至多5個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基、?；蛲檠趸驶蚴?SiR14R15R16基團(tuán)，其中，R14、R15和R16相同或不同，代表至多5個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基，或代表苯基，其中，兩個(gè)環(huán)體系可選地被下列取代基以相同或不同方式取代至多3次氟、氯、溴或各含至多5個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基、烷氧基或烷氧基羰基。3.按照權(quán)利要求1通式的二環(huán)稠合吡啶及其鹽和氮氧化物，其中，A代表可選地被氟、氯、甲基、甲氧基、硝基或三氟甲基取代的苯基，D代表下式基團(tuán)R5-T-或其中，R5和R6相互獨(dú)立地代表環(huán)丙基、苯基、吡啶基、喹啉基、吲哚基、苯并噻唑基或四氫化萘基，其中每一個(gè)可選地被下列取代基以相同或不同的方式取代至多2次三氟甲基、硝基、三氟甲氧基、氟、氯、溴、羥基、羧基，各含至多4個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基、?；?、烷氧基或烷氧基羰基，或其本身可以被氟、氯、溴、三氟甲基或三氟甲氧基取代的苯基、苯氧基或苯硫基，T代表各含至多4個(gè)碳原子的直鏈或支鏈亞烷基或亞鏈烯基，其中每一個(gè)可選地被羥基取代至多2次，R7代表氫或氟，和R8代表氫、氟、氯、溴、疊氮基、三氟甲基、羥基、三氟甲氧基或甲氧基，或R7和R8與C原子一起形成羰基；E代表環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基或環(huán)庚基或代表可選地被環(huán)戊基或環(huán)己基取代的含至多5個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基；R1和R2一起形成含至多5個(gè)碳原子的直鏈或支鏈亞烷基，苯環(huán)與該亞烷基稠合，該亞烷基必須被羰基或下式基團(tuán)取代或-OR13，其中，a代表數(shù)字1，2或3，和R13代表氫、各含至多4個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基、酰基或烷氧基羰基或式-SiR14R15R16基團(tuán)，其中，R14、R15和R16相同或不同，代表至多4個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基，或代表苯基，其中，兩個(gè)環(huán)體系可選地被下列取代基以相同或不同方式取代至多3次氟、氯各含至多4個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基、烷氧基或烷氧基羰基。4.按照權(quán)利要求1-3的二環(huán)稠合吡啶用作藥物。5.按照權(quán)利要求1-3的二環(huán)稠合吡啶的方法，其特征在于首先按照格利雅或維梯希反應(yīng)，在惰性溶劑中使用有機(jī)金屬試劑在通式(II)化合物中導(dǎo)入取代基D和如果合適，按照常規(guī)方法變換或?qū)肷鲜鯝、E和/或R1和R2所代表的取代基，其中，A、E、R1和R2與上述定義相同。6.含至少一種按照權(quán)利要求1-3的二環(huán)稠合吡啶的藥物。7.按照權(quán)利要求6的藥物用于治療動脈硬化。8.按照權(quán)利要求7的藥物用于治療動脈硬化。9.按照權(quán)利要求1-3的二環(huán)稠合吡啶在生產(chǎn)藥物中的用途。10.按照權(quán)利要求9的用途，用來生產(chǎn)動脈硬化的藥物。全文摘要通過使所述相應(yīng)的醛與維梯希或格利雅試劑反應(yīng),以便導(dǎo)入合適的側(cè)鏈來制備二環(huán)稠合吡啶類化合物。該二環(huán)稠合吡啶適合作為藥物中的活性化合物,尤其作為治療動脈硬化藥物中的活性化合物。文檔編號C07D221/04GK1172803SQ97114558公開日1998年2月11日申請日期1997年7月8日優(yōu)先權(quán)日1996年7月8日發(fā)明者A·布蘭迪斯,M·洛格斯,G·舒密特,R·安格布爾,C·施梅克,K·D·布倫姆,H·比肖夫,D·舒密特,J·舒馬赫爾申請人:拜爾公司