專利名稱：通過與聚吡咯甲酰氨基萘衍生物連接提高生物活性化合物的生物藥效性的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及改善生物活性化合物的系統(tǒng)生物藥效的方法，聚吡咯甲酰氨基萘酸衍生物及它們的制備方法，含有它們的藥物組合物，以及它們在治療中的應(yīng)用。
所有藥物的治療效果受到影響它們生物藥效的不同參數(shù)的強烈影響。例如，對于一些非常有希望的細胞毒劑如Paclitaxel，也被認為是紫杉酚和喜樹堿類似物，在水中極低的溶解性迫使臨床醫(yī)生使用賦形劑如乙醇和帶有顯著毒性的Cremofor，并采用很長的輸液時間。因此，在治療中需要能夠?qū)⑦@類分子溶解于水性介質(zhì)，特別是在生理條件下和/或以活性形式緩慢釋放藥物，而不是迅速達到峰值及通常的毒性濃度的體系。而且，強蛋白結(jié)合也能夠防止活性物質(zhì)代謝失效和很快排泄。
因此，作為第一個目的，本發(fā)明涉及改善生物活性化合物X系統(tǒng)生物藥效的方法，該方法包括提供與下式(I)載體基團結(jié)合的活性化合物X或其藥物上可接受的鹽 其中R是酸性基團；m是整數(shù)1-3；n是0或整數(shù)1-3；A是可酶催化水解的間隔基。
本發(fā)明的另一個目的是提供式(II)所示的新化合物及其藥物上可接受的鹽， 其中R，X，m，n，和A如上定義。
本發(fā)明的再一個目的是提供含有至少一種作為治療活性劑的式(II)化合物或其藥物上可接受的鹽(定義如上)，和藥物上可接受的載體和/或稀釋劑的藥物組合物。
式(I)或(II)化合物中的生物活性化合物X，例如，可以是taxane化合物，喜樹堿化合物，表鬼臼毒素化合物，蒽環(huán)類化合物，偏端霉素化合物，神經(jīng)酰胺化合物，苯甲?；状?，四氫S和氫化可的松；或它們藥物上可接受的鹽。如果在化合物(I)或(II)中，在萘部分有兩個或多個酸性基團存在，則它們可以相同或不同，優(yōu)選的是相同的，例如，從下列基團選取磺酸，羧酸和膦酸。R取代基可以在萘環(huán)的每一個或同時兩個芳基部分上。
式(I)或(II)化合物中的可酶催化水解的間隔基A可以是，例如a)-Y-CO-，其中Y是C1-C6亞烷基或C2-C6亞鏈烯基，二價C3-C5環(huán)烷基或亞苯基；或b)氨基酸殘基或肽間隔基，優(yōu)選的是選自βAla，Gly，Phe-Gly，Phe-Phe-，Leu-Gly，Val-Ala，Phe-Ala，Leu-Phe，Leu-Ala，Phe-Leu-Gly，Phe-Phe-Leu，Leu-Leu-Gly，Phe-Tyr-Ala，Phe-Gly-Phe，Phe-Phe-Gly，Phe-Leu-Gly-Phe，Gly-Phe-Leu-Gly-Phe，Gly-βAla，Phe-Gly-βAla，Phe-Phe-βAla，Leu-Gly-βAla，Val-Ala-βAla，Phe-Ala-βAla，Leu-Phe-βAla，Leu-Gly-βAla，Phe-Leu-Gly-βAla，Phe-Phe-Leu-βAla，Leu-Leu-Gly-βAla，Phe-Tyr-Ala-βAla，Phe-Gly-Phe，Phe-Phe-Gly-βAla，Phe-Leu-Gly-Phe-βAla，Gly-Phe-Leu-Gly-Phe-βAla和氨基己?；?br> 例如，對于βAla，間隔基是-HN-CH2-CH2-CO-，而對于甘油，間隔基是-HN-CH2-CO-。
根據(jù)上面對化合物X的定義，顯然，在所說化合物中至少存在一個能夠被間隔基A的?；；陌被蛄u基；因此，能夠給這里定義的式(II)化合物提供-HN-CO-A-X基團。
taxane化合物是，例如，紫杉酚，7-表紫杉酚，taxotere，或7-epitaxotere。
喜樹堿化合物是，例如，喜樹堿或9-氨基-喜樹堿。
表鬼臼毒素化合物是，例如，鬼臼亞乙苷。
蒽環(huán)類化合物是，例如，阿霉素，表紅霉素(epirubicin)，去甲氧柔紅霉素，4’-碘阿霉素，甲氧基嗎啉代-阿霉素和柔紅霉素。
偏端霉素化合物是，例如，tallimustine-偕胺肟，即3-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(1-甲基-4-(4-N，N-二(2-氯乙基)氨基苯-1-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)吡咯-2-甲酰氨基)丙酰(propion)偕胺肟。
神經(jīng)酰胺化合物是，例如，C2-C30神經(jīng)酰胺化合物，即N-(C2-C30)-酰基-D-鞘氨醇，特別是C14-神經(jīng)酰胺，即(2S-3R-4E)-1，3-二羥基-2-十四烷?；?酰氨基-4-十八烯。
亞烷基或亞鏈烯基可以是直鏈或支鏈。
C1-C6亞烷基優(yōu)選C1-C4烷基，典型地為-CH2-，-CH2-CH2-和-CH2-CH2-CH2-，特別優(yōu)選-CH2-CH2-。
C2-C6亞鏈烯基鏈優(yōu)選C2-C6亞鏈烯基鏈，典型地為-CH＝CH-或-CH＝CH2-CH2-，特別優(yōu)選順-或反-CH＝CH-。
典型的二價C3-C5環(huán)烷基是環(huán)丙基。
典型的二價亞苯基是1，2-亞苯基。
本發(fā)明還包括式(II)化合物的藥物上可接受的鹽。
本發(fā)明式(I)或(II)化合物的藥物上可接受的鹽的實例包括它們與無機堿，如氫氧化鈉，鉀，鈣和銨形成的鹽，或它們與有機堿，如賴氨酸，精氨酸，N-甲基-葡糖胺，三乙胺，三乙醇胺，二芐胺，甲基芐胺，二-(2-乙基-己基)-胺，哌啶，N-乙基哌啶，N，N-二乙氨基乙胺，N-乙基嗎啉，β-苯乙胺，N-芐基-β-苯乙胺，N-芐基-N，N-二甲基-胺和其它可接受的有機胺形成的鹽。
上述本發(fā)明式(II)化合物包括所有可能的異構(gòu)體，特別是立體異構(gòu)體，典型地為非對映異構(gòu)體，以及它們的混合物。
本發(fā)明還包括式(II)化合物的代謝物和代謝前體或生物前體(也就是藥物前體)。
即，本發(fā)明包括與上述式(II)化合物結(jié)構(gòu)式不同但用于人體后在體內(nèi)被直接或間接地轉(zhuǎn)化成式(II)化合物的化合物。
本發(fā)明的優(yōu)選化合物是下列式(II)化合物，其中R是磺酸基；m是2或3；n是1或2；A是-Y’-CO-，其中Y’選自-CH2-CH2-，-CH＝CH-和環(huán)丙基或1，2-亞苯基；或是氨基酸殘基，或是選自β-Ala，Gly，Leu-Gly和Phe-Leu-Gly的肽間隔基；X是選自紫杉酚，7-表紫杉酚，表紅霉素，taxotere，tallimustine-偕胺肟，N-(C2-C30)-?；?D-鞘氨醇，喜樹堿，9-氨基-喜樹堿，鬼臼亞乙苷，阿霉素，甲氧基-嗎啉代-阿霉素，苯甲?；状迹臍銼和氫化可的松，及其藥物上可接受的鹽。
本發(fā)明式(II)的優(yōu)選化合物的具體實例有N-(4-羰基亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(4-亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(4-亞氨基-1，7-萘二磺酸)))-β-丙氨酰-2’-紫杉酚；N-(4-羰基亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(4-亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(7-亞氨基-1，3，5-萘三磺酸)))-β-丙氨酰-2’-紫杉酚；N-(4-羰基亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(4-亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(8-亞氨基-1，3，5-萘三磺酸)))-β-丙氨酰-2’-紫杉酚；N-(4-羰基亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(4-亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(4-亞氨基-1，7-萘二磺酸)))-β-丙氨酰-2’(7-表)紫杉酚；N-(4-羰基亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(4-亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(8-亞氨基-1，3，5-萘三磺酸)))-β-丙氨酰-2’(7-表)紫杉酚；N-(4-羰基亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(4-亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(4-亞氨基-1，7-萘二磺酸)))-β-丙氨酰-2’-taxotere；N-(4-羰基亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(4-亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(8-亞氨基-1，3，5-萘三磺酸)))-β-丙氨酰-2’-taxotere；N-(4-羰基亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(4-亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(4-亞氨基-1，7-萘二磺酸)))-β-丙氨酰-3’-鬼臼亞乙苷；N-(4-羰基亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(4-亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(8-亞氨基-1，3，5-萘三磺酸)))-β-丙氨酰-3’-鬼臼亞乙苷；N-(4-羰基亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(4-亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(4-亞氨基-1，7-萘二磺酸)))-β-丙氨酰-3’-阿霉素；N-(4-羰基亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(4-亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(8-亞氨基-1，3，5-萘三磺酸)))-β-丙氨酰-3’-阿霉素；N-(4-羰基亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(4-亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(4-亞氨基-1，7-萘二磺酸)))-6-丙氨酰-21-四氫S；N-(4-羰基亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(4-亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(8-亞氨基-1，3，5-萘三磺酸)))-β-丙氨酰-21-氫化可的松；β-(4-羰基亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(4-亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(4-亞氨基-1，7-萘二磺酸)))-丙酰基-2’-紫杉酚；β-(4-羰基亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(4-亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(7-亞氨基-1，3，5-萘三磺酸)))-丙?；?2’-紫杉酚；β-(4-羰基亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(4-亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(8-亞氨基-1，3，5-萘三磺酸)))-丙?；?2’-紫杉酚；β-(4-羰基亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(4-亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(4-亞氨基-1，7-萘二磺酸)))-丙?；?2’-(7-表)紫杉酚；β-(4-羰基亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(4-亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(8-亞氨基-1，3，5-萘三磺酸)))-丙?；?2’-(7-表)紫杉酚；β-(4-羰基亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(4-亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(4-亞氨基-1，7-萘二磺酸)))-丙?；?2’-taxotere；β-(4-羰基亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(4-亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(8-亞氨基-1，3，5-萘三磺酸)))-丙?；?2’-taxotere；β-(4-羰基亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(4-亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(4-亞氨基-1，7-萘二磺酸)))-丙?；?20-喜樹堿；6-(4-羰基亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(4-亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(8-亞氨基-1，3，5-萘三磺酸)))-丙?；?20-(9-氨基)喜樹堿；β-(4-羰基亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(4-亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(4-亞氨基-1，7-萘二磺酸)))-丙?；?3’-鬼臼亞乙苷；β-(4-羰基亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(4-亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(8-亞氨基-1，3，5-萘三磺酸)))-丙?；?14-(3’-甲氧基嗎啉代)-阿霉素；β-(4-羰基亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(4-亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(4-亞氨基-1，7-萘二磺酸)))-丙酰基-1-苯甲?；状?；β-(4-羰基亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(4-亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(8-亞氨基-1，3，5-萘三磺酸)))-丙?；?21-氫化可的松；N-(4-羰基亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(4-亞氨基-1，7-萘二磺酸))-β-丙氨酰-2’-紫杉酚；N-(4-羰基亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(7-亞氨基-1，3，5-萘三磺酸))-β-丙氨酰-2’-紫杉酚；N-(4-羰基亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(8-亞氨基-1，3，5-萘三磺酸))-β-丙氨酰-2’-紫杉酚；N-(4-羰基亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(8-亞氨基-1，3，5-萘三磺酸))-苯基丙氨酰-亮氨酰-甘氨酰-2’-紫杉酚；3-(4-羰基亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(4-亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(7-亞氨基-1，3-萘二磺酸)))-丙?；?3’-N-柔紅霉素；N-(4-羰基亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(4-亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(4-亞氨基-1，7-萘二磺酸)))-β-丙氨酰-20-O-喜樹堿；N-(4-羰基亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(4-亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(4-亞氨基-1，7-萘二磺酸)))-苯基丙氨酰-亮氨酰-甘氨酰-20-O-喜樹堿；N-(4-羰基亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(8-亞氨基-1，3，5-萘三磺酸))-苯基丙氨酰-亮氨酰-甘氨酰-O-苯甲?；状?；N-(4-羰基亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(8-亞氨基-1，3，5-萘三磺酸))-苯基丙氨酰-亮氨酰-甘氨酰-β-丙氨酰-O-苯甲酰基甲醇；21-(N-(4-羰基亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(8-亞氨基-1，3，5-萘三磺酸))-苯基丙氨酰-亮氨酰-甘氨酰)-氫化可的松；N-(4-羰基亞氨基，N-甲基-2-吡咯羰基-(8-亞氨基-1，3，5-萘三磺酸))-苯基丙氨酰-亮氨酰-甘氨酰)-O-tallimustine-偕胺肟；1-O-(N-(4-羰基亞氨基，N-甲基-2-吡咯羰基-(7-亞氨基-1，3-萘二磺酸))-苯基丙氨酰-亮氨酰-甘氨酰)-(2S，3R，4E)-1，3-二羥基-2-十四烷酰氨基-4-十八烯；1-O-(N-(4-羰基亞氨基，N-甲基-2-吡咯羰基-(7-亞氨基-1，3-萘二磺酸))-苯基丙氨酰-亮氨酰-甘氨酰)-(2S，3R，4E)-1，3-二羥基-2-乙酰氨基-4-十八烯；1-O-(N-(4-羰基亞氨基，N-甲基-2-吡咯羰基-(7-亞氨基-1，3-萘二磺酸))-苯基丙氨酰-亮氨酰-甘氨酰)-(2S，3R，4E)-1，3-二羥基-2-exanoyl氨基-4-十八烯；1-O-(N-(4-羰基亞氨基，N-甲基-2-吡咯羰基-(7-亞氨基-1，3-萘二磺酸))-苯基丙氨酰-亮氨酰-甘氨酰)-(2S，3R，4E)-1，3-二羥基-2-十八烷酰氨基-4-十八烯；1-O-(N-(4-羰基亞氨基，N-甲基-2-吡咯羰基-(7-亞氨基-1，3-萘二磺酸))-β-丙氨酰)-(2S，3R，4E)-1，3-二羥基-2-十四烷酰氨基-4-十八烯；1-O-(N-(4-羰基亞氨基，N-甲基-2-吡咯羰基-(7-亞氨基-1，3-萘二磺酸))-β-丙氨酰)-(2S，3R，4E)-1，3-二羥基-2-乙酰氨基-4-十八烯；1-O-(N-(4-羰基亞氨基，N-甲基-2-吡咯羰基-(7-亞氨基-1，3-萘二磺酸))-β-丙氨酰)-(2S，3R，4E)-1，3-二羥基-2-exanoyl氨基-4-十八烯；1-O-(N-(4-羰基亞氨基，N-甲基-2-吡咯羰基-(7-亞氨基-1，3-萘二磺酸))-β-丙氨酰)-(2S，3R，4E)-1，3-二羥基-2-十八烷酰氨基-4-十八烯；1-O-(N-(4-羰基亞氨基，N-甲基-2-吡咯羰基-(8-亞氨基-1，3，5-萘三磺酸))-苯基丙氨酰-亮氨酰-甘氨酰)-(2S，3R，4E)-1，3-二羥基-2-十四烷酰氨基-4-十八烯；1-O-(N-(4-羰基亞氨基，N-甲基-2-吡咯羰基-(8-亞氨基-1，3，5-萘三磺酸))-苯基丙氨酰-亮氨酰-甘氨酰)-(2S，3R，4E)-1，3-二羥基-2-十八烷酰氨基-4-十八烯；及其藥物上可接受的鹽，特別是鈉鹽。
上面定義的式(I)的載體基團與上面定義的生物活性化合物X即式(II)化合物結(jié)合，例如，可以通過下面敘述的制備本發(fā)明式(II)化合物的任何一種方法得到。
本發(fā)明式(II)化合物及其鹽，例如，可以通過下列方法得到a) 將式(III)化合物 其中，R，m和n定義如上，與式(IV)化合物或其衍生物反應(yīng)，X-CO-Y-COOH(IV)其中，X定義如上，Y是C1-C6亞烷基或C2-C6亞鏈烯基鏈，二價C3-C5環(huán)烷基或亞苯基，得到式(II)化合物，其中A是-Y-CO-，Y定義同前；或b)將式(V)化合物或其反應(yīng)性衍生物 其中，R，Y，m和n定義如上，與式(VI)化合物反應(yīng)，X(VI)其中，X定義如上，得到式(II)化合物，其中A是-Y-CO-，Y定義同前；或c)將式(VII)化合物 其中，R，m和n定義如上，Z是離去基團，與式(VIII)化合物反應(yīng)，X-A’H (VIII)其中，X定義如上，A’為A的氨基酸殘基或肽間隔基，得到式(II)化合物，其中A是氨基酸殘基或肽間隔基；或d)將式(IX)化合物或其活性衍生物， 其中，R，m和n定義如上，A’為A的氨基酸殘基或肽間隔基，與式(VI)化合物反應(yīng)，X (VI)其中，X定義如上，得到式(II)化合物，其中A是氨基酸殘基或肽間隔基；而且，如果需要，可將式(II)化合物鹽化；和/或，如果需要，將式(II)化合物從其鹽中游離出來；和/或，如果需要，從它們的混合物中分離出式(II)化合物的異構(gòu)體。
式(IV)，(V)和(IX)化合物的反應(yīng)性衍生物例如可以是，例如，與二環(huán)己基碳化二亞胺就地反應(yīng)得到的酰基異脲；或根據(jù)已知方法，例如，與適當(dāng)?shù)牡图壨榛?，典型的是C1-C4烷基，甲酰鹵反應(yīng)得到的混合酐；或通過與羰基二咪唑反應(yīng)得到的咪唑烷衍生物。
式(VII)化合物中的離去基團Z例如可以是1-N-咪唑基。
方法a)，b)，c)和d)都涉及?；磻?yīng)，它們是可以用本領(lǐng)域熟知方法實施的類似方法。類似地，可根據(jù)已知方法從式(II)的鹽制備其游離化合物，從式(II)的混合物分離其異構(gòu)體。
方法a)和c)是氨基化合物的?；磻?yīng)，而方法b)和d)是羥基化合物和氨基化合物的?；磻?yīng)。
典型地，根據(jù)方法a)，b)，c)和d)，氨基的?；磻?yīng)可以在約10到約100℃溫度范圍內(nèi)，在有機，非質(zhì)子傳遞溶劑如二甲基甲酰胺，二甲亞砜或二甲基乙酰胺中，如果需要，在有機堿如4-二甲氨基吡啶，三乙胺，二甲基苯胺或吡啶存在下進行。
典型地，根據(jù)方法b)和d)，羥基的酰化反應(yīng)可以在約5到約110℃溫度范圍內(nèi)，在有機溶劑如二甲基甲酰胺，二甲亞砜或二甲基乙酰胺中，如果需要，在有機堿如三乙胺，4-二甲氨基吡啶，吡啶或二甲基苯胺存在下進行。
如果式(IV)，(VI)，(VIII)，(IX)和(X)化合物中存在可能干擾反應(yīng)進行的基團，則可以在反應(yīng)前將其保護，反應(yīng)結(jié)束后將其脫保護。例如，可以用肽化學(xué)中已知的常規(guī)技術(shù)將羥基，氨基和/或羧基保護和然后脫保護。
對于其中n是1，2或3的式(III)化合物，可以從WO91/10649了解到，也可以根據(jù)那里所述的方法得到。其中n是0的式(III)化合物既可以是本領(lǐng)域已知的，也可以用已知方法得到。總之，它們都是商品化產(chǎn)品。
式(IV)化合物可以通過這里定義的式(VI)化合物與適當(dāng)?；瘎┤玺?，典型的有琥珀酸酐，鄰苯二甲酸酐，或只有一個羧基被活化的適當(dāng)二羧酸如丙二酸或馬來酸反應(yīng)得到。
式(V)化合物可以通過這里定義的式(III)化合物與適當(dāng)?；瘎┓磻?yīng)得到，例如，上述制備式(IV)化合物時提到的?；?VI)化合物的那些?；瘎?br> 其中Z例如是1-N-咪唑基的式(V)化合物，可以根據(jù)已知方法，通過式(III)化合物與羰基咪唑反應(yīng)得到。
式(VIII)或(IX)化合物可以根據(jù)肽化學(xué)中已知的方法，分別通過式(VI)或(III)化合物與適當(dāng)?shù)幕罨被峄螂姆磻?yīng)得到?；罨被峄螂目梢酝ㄟ^肽化學(xué)中已知的方法得到。
式(VI)化合物是現(xiàn)有技術(shù)中已知的(例如，taxane化合物)并公開于JACS 93,2325(1971)和Proc.Am.Assoc.Cancer.Res.，31，p.417(1990)。
7-表-紫杉酚是從Tetrahedron Letters 34,6845(1993)中得知的。Taxotere公開于US4,814,470。
7-表-taxotere是taxotere衍生物，即苯丙酸，β-[[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]-α-羥基-，12β-(乙酸基)-12-(苯甲酸基)-2a，3，4，4a，5，6，9，10，11，12，12a，12β-十二氫-4，6，11-三羥基-4a，8，13，13-四甲基-5-氧-7，11-亞甲 基-1H-環(huán)十[3，4]苯[12-b]oxet-9-基酯，[2aR-[2aα，4α，4aβ，6β，9α(αR*，βS*)，11α，12α，12aα，12bα]]-化合物，具有下面化學(xué)式 其中t.Bu指叔丁基；Ac.指?；?；Ph指苯基。
式(X)化合物可以通過將taxotere在有機非質(zhì)子傳遞溶劑如甲苯，苯或二甲苯中，在堿性試劑如二氮雜雙環(huán)十一烯或Na2CO3存在下，回流約6-9小時得到。
喜樹堿可以從J.A.C.S.88，3888-3890(1967)中得知。9-氨基喜樹堿公開于J.Med.Chem.36，2689-2700(1993)。
鬼臼亞乙苷，例如，公開于US4,564,675。
阿霉素，例如，公開于Tetrahedron Letters，1007(1969)。
柔紅霉素，例如，公開于Nature 201,706(1964)。
表紅霉素，例如，公開于J.Med.Chem.18,703(1975)。
去甲氧柔紅霉素，例如，公開于Investigational New Drugs 4,85(1986)。
4’-碘阿霉素，例如，公開于Cancer Research 47，4001(1987)。
甲氧基嗎啉代-阿霉素從US4,672,057得知。
苯甲?；状紡腄E4,203,116得知。
四氫S是商品化合物，3α，5β-四氫-醛甾酮，也被認為是四氫氫化可的松。
氫化可的松，例如，公開于J.A.C.S.72，5793(1950)。
式(II)化合物及其藥物上可接受的鹽在這里被定義為“本發(fā)明化合物”和本發(fā)明的“活性成分”。藥理學(xué)本發(fā)明式(II)聚-吡咯甲酰氨基萘酸衍生物比上面定義的相關(guān)化合物X具有更有價值的生物學(xué)性質(zhì)。的確，本發(fā)明化合物一般比在其化學(xué)結(jié)構(gòu)中存在的相關(guān)化合物X具有更高的系統(tǒng)生物學(xué)活性。而且，本發(fā)明化合物中存在的酸性聚-吡咯甲酰氨基萘酸結(jié)構(gòu)提供了在生理上可接受的溶劑如無菌水或Cremophor EL中比相關(guān)化合物X具有更好溶解性的新化合物。
的確，已知化合物X如紫杉酚和喜樹堿實際上不溶于水。相反，例如，本發(fā)明含紫杉酚或含喜樹堿化合物如FCE29142，F(xiàn)CE28284和FCE28855則溶于水。
因此，在生理條件下，本發(fā)明化合物具有比相關(guān)化合物X提供更好治療工具的優(yōu)點。
式(II)新化合物及其鹽可以用作抗增殖劑，特別是用作抗腫瘤和抗血管生成劑，以及用作消炎劑。
因此，它們可以用于改善癌癥的治療。特別是可將它們用于改善患有白血病如成髓細胞白血病，淋巴瘤，肉瘤，成神經(jīng)細胞瘤，維爾姆斯瘤，或膀胱，乳腺，肺，甲狀腺，結(jié)腸，前列腺，皮膚，腦，肝或卵巢的惡性腫瘤的病人的病情。
下列實施例A，B，C和D給出本發(fā)明一些有代表性的化合物的生物學(xué)活性試驗數(shù)據(jù)，并與參照化合物的活性數(shù)據(jù)加以比較。
下列表中所有FCE化合物的化學(xué)命名將在本說明書的化學(xué)實驗部分給出。實施例A體外藥物細胞毒性測定將指數(shù)增長的2×104/mlB16-F10鼠黑素瘤細胞和1×105/ml L1210鼠白血病細胞在24孔平板(Costar)中接種于補充有10％加熱滅活的胎牛血清和2mM谷氨酰胺的RPMI1640介質(zhì)中。接種后立即加入標量濃度的試驗化合物，即紫杉酚或FCE化合物。培養(yǎng)72小時后用coulter計數(shù)器記錄細胞數(shù)量，以此來估計抑制細胞生長的情況。對于每種試驗化合物濃度使用一式三份的培養(yǎng)物。試驗化合物的抗增殖活性由劑量響應(yīng)曲線計算，并用IC50(處理過的培養(yǎng)物與未處理的對照物抑制細胞生長之比為50％的劑量)表示。結(jié)果列于下面表I。
表I
*帶有R＝SO3H的所有化合物**1)B16-F10鼠黑素瘤細胞72小時處理2)L1210鼠白血病細胞72小時處理實施例B紫杉酚，F(xiàn)CE29142，F(xiàn)CE28721和FCE28746體內(nèi)活性這些實驗的目的是比較紫杉酚，F(xiàn)CE29142，F(xiàn)CE28721和FCE28746在生物學(xué)上可接受的溶劑中的溶解性和活性。為此，選用鼠肺癌M109，因為以前的臨床前數(shù)據(jù)已表明紫杉酚對這種模型有良好的活性。材料和方法小鼠從Charles River Italy得到的BALB/c雌鼠。實驗前這些鼠為8-10周齡。藥物由于紫杉酚有限的水溶性，因此將其溶解于含有50％聚氧乙基化蓖麻油(Cremophor EL)和50％乙醇的載體中，然后用5％葡萄糖溶液稀釋成所需的濃度。溶液有點渾濁，短時間后觀察到沉淀形成。
相反，F(xiàn)CE29142，F(xiàn)CE28721和FCE28746很容易溶解于Cremophor+乙醇中，而且，所得溶液可以長時間(超過2小時)保持清澈。腫瘤通過肌內(nèi)(i.m.)系列移植使M109鼠癌保持在體內(nèi)。在實驗中，5×105個細胞被肌肉注射到BALB/c小鼠體內(nèi)。
計算小鼠的存活時間，活性用T/C％表示。
T.I.％＝相對于對照組腫瘤生長的抑制百分比(％)。
TOX＝死于毒性的小鼠數(shù)。
小鼠死于對照組之前時，或當(dāng)體重明顯減少和/或觀察到脾和/或肝尺寸減小時測定TOX。給藥針對M109，紫杉酚，F(xiàn)CE29142，F(xiàn)CE28721和FCE28746是每1、5、9日靜脈注射(i.v.)。所得結(jié)果列于表II。
表II體內(nèi)活性
表II表明FCE化合物比紫杉酚在不增加毒性的情況下由于存活時間增長而活性增加。實施例C?；拾贝佳苌镌趦?nèi)皮細胞中的活性增生能力測定將牛主動脈內(nèi)皮細胞(BAEC)在加有10％FCS的DMEM中培養(yǎng)，然后在第20次體外傳代之前進行測定。接種細胞24小時后，將細胞用試驗化合物處理48小時。實驗結(jié)束時用MTT測定法測定細胞存活率。細胞游動性測定根據(jù)Mc Carthy等人所述(J.Cell Biol 1986，102179-188)，用帶8μm孔徑聚碳酸化過濾器并用明膠(100μg/ml于0.1％乙酸)覆蓋的改進的Boyden藥室測定趨化性。將指數(shù)生長的細胞分隔開，并在測定前在37℃含血清介質(zhì)中保持1小時。在頂部藥室裝入含有5×104個細胞的加有1％FCS的DMEM。將24小時濃縮10倍的適合于A375/M人類黑素瘤細胞系的培養(yǎng)基加到有或沒有試驗化合物的下部藥室中下部。在37℃培養(yǎng)4小時后過濾器用Diff Quick染色，并用圖像分析儀記錄遷移細胞的數(shù)量。細胞粘著力測定指數(shù)生長細胞被胰蛋白酶化，并在37℃含血清介質(zhì)中保持1小時，以便進行趨化性測定。然后將它們重新懸浮在含有1％FCS的介質(zhì)中，并以30,000細胞/孔的密度接種在包被有明膠的24孔平板中。將試驗化合物加到各孔中，細胞在37℃的5％CO2中處理4小時。培養(yǎng)結(jié)束時，用DMEM+10％FCS洗滌該平板兩次。回收48小時后用coulter計數(shù)器記錄細胞數(shù)，所得結(jié)果列于表III。
表III
實施例D苯甲酰基甲醇衍生物的抗血管生成活性CAM測定在發(fā)育的第3天將雞胚從它們的殼中移出，放在彈性佩特里細菌培養(yǎng)皿中并保持在37℃3％CO2。第5天將試驗化合物在甲基纖維素培養(yǎng)皿中混合，然后放到生長的CAMs頂部。在48小時內(nèi)用立體顯微鏡檢測代表毛細血管退化面積的無血管區(qū)(直徑4mm)。bFGF-凝膠泡沫植入物將凝膠泡沫(Upjohn，USA)切成條(約7×10×10mm)，并吸入飽和量的于0.1％PBS/BSA的bFGF溶液(20μg/ml)。對照海綿以相同的方法制作并用0.1％PBS/BSA浸漬。麻醉之后，在切開1cm長背中線皮膚切口尾部到枕骨嵴3-4cm。海綿被插到皮下陷凹中，然后用stample gun縫合皮膚。第1天靜脈注射治療。15天后，將小鼠處死并手術(shù)取出海綿，并制成樣品用于組織學(xué)檢查。所得結(jié)果列于表IV。
表IV
表IV表明對于CAM測定，與苯甲酰基甲醇相比FCE29378表現(xiàn)出在不增加毒性的情況下增加了活性。但是，在bFGF-凝膠泡沫測定中，只有FCE29378表現(xiàn)出相當(dāng)?shù)幕钚?，而苯甲?；状茧m以較高的劑量試驗但也完全沒有活性。
由于不同的臨床癥狀，對哺乳動物采用的治療方案必須適合病理學(xué)類型，通常還要考慮給藥途徑，化合物，施用化合物的形式和患者的年齡，體重和身體情況。
本發(fā)明化合物如FCE28284，F(xiàn)CE28403和FCE29142適用于成年人給藥的劑量水平可以從每劑約50mg到約1000mg，每天1-3次，優(yōu)選每劑約100-500mg，每天1-3次。當(dāng)然，這些給藥方案可以調(diào)節(jié)以達到最佳治療效果。
如上所述，本發(fā)明還包括含有至少一種式(II)化合物及其藥物上可接受的載體或稀釋劑的藥物組合物。當(dāng)然，該組合物的性質(zhì)將由所要求的給藥途徑?jīng)Q定。
這些組合物可用常規(guī)方式與常用成分一起制成制劑。例如，本發(fā)明化合物可以水性或油性溶液，或懸浮液，片劑，丸劑，膠囊，糖漿，滴劑或栓劑形式給藥。
因此，對于口服給藥，含本發(fā)明化合物的藥物組合物優(yōu)選糖衣或膜衣片劑，丸劑或明膠膠囊，含有活性物質(zhì)及稀釋劑如乳糖，葡萄糖，蔗糖，甘露糖醇，山梨糖醇，纖維素；潤滑劑如二氧化硅，滑石，硬脂酸，硬脂酸鎂或硬脂酸鈣，和/或聚乙二醇的；或者，它們也可以含有粘合劑如淀粉，明膠，甲基纖維素，羧甲基纖維素，阿拉伯樹膠，黃著膠，聚丙烯吡咯烷酮；解聚劑如淀粉，藻酸，藻酸鹽，淀粉甘油酸鈉；泡騰混合物；染色劑；甜味劑；潤濕劑如卵磷脂，聚山梨酸酯，月桂基硫酸酯；總之，無毒和無藥物活性的物質(zhì)都可以用于藥物制劑。
所說藥物制劑可用已知方法如混合，粒化，壓片，包糖衣或包膜衣制備。
口服用液體分散劑可以是，例如，糖漿，乳液和懸浮液。
糖漿可以含有載體，例如，蔗糖或混有甘油和/或甘露糖醇和/或山梨糖醇的蔗糖。
懸浮液和乳液可以含有載體，例如，天然樹膠，瓊脂，藻酸鈉，果膠，甲基纖維素，羧甲基纖維素，或聚乙烯醇。
用于肌內(nèi)注射的懸浮液或溶液在含有活性化合物的同時可以含有藥物上可接受的載體，如無菌水，橄欖油，油酸乙酯，Cremophor EL，二元醇如丙二醇，以及，如果需要，適量的鹽酸利多卡因。
用于靜脈注射或輸液的溶液可以含有載體，例如，Cremophor EL，無菌水或優(yōu)選地，它們可以是無菌水等滲鹽水溶液。栓劑在含有活性化合物的同時還可含有藥物上可接受的載體，如可可油，聚乙二醇，聚氧乙烯脫水山梨醇脂肪酸酯表面活性劑或卵磷脂。
下面實施例用以說明而非限制本發(fā)明。實施例1N-(4-羰基亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(4-亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(4-亞氨基-1，7-萘二磺酸二鈉鹽)))-β-丙氨酰-2’-紫杉酚[FCE28284]向2’(β-丙氨酰)紫杉酚甲酸鹽(291mg＝0.3mmol)(按J.Nat.Prod.51，298(1988)所述制備)的二甲基甲酰胺(20ml)溶液中加入4-二甲氨基吡啶(36mg＝0.3mmol)和4-(咪唑基-羰基亞氨基-N-甲基-4，2-吡咯羰基-亞氨基(N-甲基-4，2-吡咯羰基-亞氨基))-1，7-萘二磺酸二鈉鹽(246mg＝0.3mmol)，然后整個在室溫下攪拌7小時。真空蒸發(fā)溶劑至干，剩余物在硅膠柱上進行色譜純化，用二氯甲烷∶甲醇為3∶1的混合物作洗脫劑，得到362mg標題化合物。1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ0.98(s，3H，17)，1.01(s，3H，16)，1.48(s，3H，19)，1.4-1.9(m，3H，CH2-14+6β)，1.79(s，3H，18)，2.09，2.21(二-s，6H，CH3CO-4+CH3CO-10)，2.30(m，1H，6α)，2.60(m，2H，OCOCH2CH2NH)，3.30(m，2H，OCOCH2CH2NH)，3.57(d，J＝7.3Hz，1H，3)，3.81，3.84(二-s，6H，2-NCH3)，3.9-4.2(m，3H，CH2-20+7)，4.63(s，1H，OH-1)，4.90(m，2H，5+OH-7)，5.33(d，J＝8.5Hz，1H，2′)，5.40(d，J＝7.3Hz，1H，2)，5.53(t，J＝8.5Hz，1H，3′)，5.82(m，1H，13)，6.07(t，J＝6.0Hz，1H，CONHCH2CH2)，6.28(s，1H，10)，6.77(d，J＝1.7Hz，1H，吡咯)，6.94(d，J＝1.7Hz，1H，吡咯)，7.1-8.0(m，21H，3- +2H
吡咯+2″+3″+6″+5″)，8.22(s，1H，NHCONHCH2CH2)，9.17(d，J＝1.8Hz，1H，8″)，9.25(d，J＝8.5Hz，1H，NH-4′)，9.86，10.01(二-s，2H，2-吡咯CONH)。
用類似方法可以得到下列化合物β-(4-羰基亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(4-亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(7-亞氨基-1，3，5-萘三磺酸三鈉鹽)))-丙氨酰-2’-紫杉酚[FCE28721]；β-(4-羰基亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(4-亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(8-亞氨基-1，3，5-萘三磺酸三鈉鹽)))-丙氨酰-2’-紫杉酚；β-(4-羰基亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(4-亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(4-亞氨基-1，7-萘二磺酸二鈉鹽)))-丙氨酰-2’-(7-表)紫杉酚；β-(4-羰基亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(4-亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(8-亞氨基-1，3，5-萘三磺酸三鈉鹽)))-丙氨酰-2’(7-表)紫杉酚；β-(4-羰基亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(4-亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(4-亞氨基-1，7-萘二磺酸二鈉鹽)))-丙氨酰-2’-taxotere；β-(4-羰基亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(4-亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(8-亞氨基-1，3，5-萘三磺酸三鈉鹽)))-丙氨酰-2’-taxotere；β-(4-羰基亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(4-亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(4-亞氨基-1，7-萘二磺酸二鈉鹽)))-丙氨酰-3’-鬼臼亞乙苷；β-(4-羰基亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(4-亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(8-亞氨基-1，3，5-萘二磺酸二鈉鹽)))-丙氨酰-3’-鬼臼亞乙苷；β-(4-羰基亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(4-亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(4-亞氨基-1，7-萘二磺酸二鈉鹽)))-丙氨酰-3’-阿霉素；β-(4-羰基亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(4-亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(8-亞氨基-1，3，5-萘三磺酸三鈉鹽)))-丙氨酰-3’-阿霉素；β-(4-羰基亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(4-亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(4-亞氨基-1，7-萘二磺酸二鈉鹽)))-丙氨酰-21-四氫S；及β-(4-羰基亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(4-亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(8-亞氨基-1，3，5-萘三磺酸三鈉鹽)))-丙氨酰-21-氫化可的松。實施例24-(咪唑基-羰基-亞氨基-N-甲基-4，2-吡咯羰基亞氨基(N-甲基-4，2-吡咯羰基亞氨基))-1，7-萘二磺酸二鈉鹽將化合物4-(氨基-N-甲基-4，2-吡咯羰基-亞氨基(N-甲基-4，2-吡咯羰基亞氨基)-1，7-萘二磺酸二鈉鹽鹽酸鹽(628mg＝1mmol)溶解于二甲基甲酰胺(70ml)和三乙胺(0.14ml＝1mmol)中。將上述溶液在3小時內(nèi)滴加到N，N’-羰基二咪唑(648mg＝4mmol)的二甲基甲酰胺(40ml)溶液中，并整個在室溫下攪拌2小時。真空蒸發(fā)溶劑至干，剩余物用丙酮(200ml)處理，再攪拌1小時并過濾，得到標題化合物(740mg)。1H-NMR(200MHz；DMSO-d6)δ3.86，3.90(two-s，6H，2-NCH3)，7.0-7.4(m，5H，4H吡咯 )，7.50(d，J＝7.9Hz，1H，3)，7.6-8.1(m，4H，6+5+2+ )，8.36(s，1H， )，9.20(s，1H，8)，10.05，10.09，10.3 8(-三-s，3H，3-CONH).F.A.BMSm/z 662，M-Na；594.實施例3β-(4-羰基亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(4-亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(4-亞氨基-1，7-萘二磺酸二鈉鹽)))-丙?；?2’紫杉酚[FCE28403]向2’琥珀?；仙挤?165mg＝0.173mmol)(按J.Med.Chem.32，788-792(1989)所述制備)的二甲基甲酰胺(15ml)溶液中加入N，N’二環(huán)己基碳化二亞胺(71mg＝0.345mmol)，并將混合物攪拌1小時。再加入化合物4-(氨基-N-甲基-4，2-吡咯羰基-亞氨基(N-甲基-4，2-吡咯羰基亞氨基)-1，7-萘二磺酸二鈉鹽鹽酸鹽(155mg＝0.247mmol)和4-二甲氨基吡啶(30mg＝0.247mmol)，并整個在室溫下攪拌20小時。真空蒸發(fā)溶劑至干，剩余物在硅膠柱上進行色譜純化，用二氯甲烷∶甲醇為3∶1的混合物作洗脫劑，得到180mg標題化合物。1H-NMR(400MHz，DMSO，-d6)δ0.98(S，3H，17)，1.01(S，3H，16)，1.47(S，3H，19)，1.4-1.9(m，3H，CH2-14+6β)，1.76(S，3H，18)，2.08，2.23(二-s，6H，CH3CO-4+CH3CO-10)，2.30(m，1H，6α)，2.5-2.8(m，4H，OCOCH2CH2CO)，3.56(d，J＝7.0Hz，1H，3)，3.82，3.84(三-s，6H，2-NCH3)，3.9-4.2(m，3H，CH2-20+7)，4.61(s，1H，OH-1)，4.9(m，1H，OH-7+5)，5.35(d，J＝9.0Hz，1H，2′)，5.39(d，J＝7.0Hz，1H，2)，5.53(t，J＝9.0Hz，1H，3′)，5.81(m，1H，13)，6.27(s，1H，10)，6.85(d，J＝1.7Hz，1H，吡咯)，7.1-8.0(m，22H，3H-吡咯+3- +2″+3″+5″+6″)，9.18(d，J＝1.5Hz，8″)，9.23(d，J＝9.0Hz，1H，NH-4′)，9.92，9.96，10.02(三-s，3H，3-CONH)．用類似方法可以得到下列化合物β-(4-羰基亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(4-亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(7-亞氨基-1，3，5-萘三磺酸三鈉鹽)))-丙?；?2’-紫杉酚[FCE28722]；β-(4-羰基亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(4-亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(8-亞氨基-1，3，5-萘三磺酸三鈉鹽)))-丙酰基-2’-紫杉酚；β-(4-羰基亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(4-亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(4-亞氨基-1，7-萘二磺酸二鈉鹽)))-丙?；?2’-(7-表)紫杉酚；β-(4-羰基亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(4-亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(8-亞氨基-1，3，5-萘三磺酸三鈉鹽)))-丙酰基-2’(7-表)紫杉酚；β-(4-羰基亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(4-亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(4-亞氨基-1，7-萘二磺酸二鈉鹽)))-丙?；?2’-taxotere；β-(4-羰基亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(4-亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(8-亞氨基-1，3，5-萘三磺酸三鈉鹽)))-丙酰基-2’-taxotere；β-(4-羰基亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(4-亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(4-亞氨基-1，7-萘二磺酸二鈉鹽)))-丙酰基-20-喜樹堿；β-(4-羰基亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(4-亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(8-亞氨基-1，3，5-萘三磺酸三鈉鹽)))-丙?；?20-(9-氨基)喜樹堿；β-(4-羰基亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(4-亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(4-亞氨基-1，7-萘二磺酸二鈉鹽)))-丙?；?3’-鬼臼亞乙苷；β-(4-羰基亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(4-亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(8-亞氨基-1，3，5-萘三磺酸三鈉鹽)))-丙?；?14-(3’-甲氧基嗎啉代)-阿霉素；β-(4-羰基亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(4-亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(4-亞氨基-1，7-萘二磺酸二鈉鹽)))-丙?；?1-苯甲酰基甲醇；及β-(4-羰基亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(4-亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(8-亞氨基-1，3，5-萘三磺酸三鈉鹽)))-丙?；?21-氫化可的松。實施例47-(4-(咪唑基-羰基-亞氨基)-N-甲基-2-吡咯-羰基(N-甲基-4，2-吡咯羰基亞氨基))-1，3，5-萘三磺酸三鈉鹽將化合物7-(4-氨基-N-甲基-2-吡咯羰基-亞氨基(N-甲基-4，2-吡咯羰基亞氨基)-1，3，5-萘三磺酸三鈉鹽鹽酸鹽(800mg＝1.096mmol)溶解于二甲基甲酰胺(80ml)和三乙胺(0.15ml＝1.096mmol)。在3小時內(nèi)將該溶液滴加到N，N’-羰基二咪唑(736mg＝4,384mmol)的二甲基甲酰胺(60ml)溶液中，然后整個在室溫下攪拌4小時。真空蒸發(fā)溶劑至干，剩余物用丙酮(250ml)處理，再攪拌1小時并過濾，得到標題化合物(830mg)。1H-NMR(200MHz；DMSOd6)δ3.88，3.89(二單峰，6H，2-NCH3)；7.0-7.4(m，5H，2-吡咯+1H咪唑)；7.79(s，1H，咪唑)；8.2-8.4(m，3H，6+2+1H咪唑)；8.9-9.2(m，2H，8+4)；10.04，10.22，10.38(三單峰，3H，3-CONH).
用類似方法得到下列化合物4-(4-(咪唑基-羰基-亞氨基)-N-甲基-2-吡咯羰基-亞氨基)-1，7-萘二磺酸二鈉鹽。1H-NMR(200MHz，DMSO-d6)δ3.88(s，3H，NCH3)；7.07(m，1H，咪唑)；7.23，7.29(二雙重峰，J＝1.9Hz，2H，吡咯)；7.48(d，J＝7.7Hz，1H，3)；7.71(dd，J＝7.8Hz，J＝1.8Hz，1H，6)；7.80(t，J＝1.3Hz，1H，咪唑)；7.89(d，J＝7.8Hz，1H，5)；7.97(d，J＝7.7Hz，1H，2)；8.36(m，1H，咪唑)；9.19(d，J＝l.8Hz，1H，8)；10.06，10.41(二單峰，2H，2-CONH).7-(4-(咪唑基-羰基-亞氨基)-N-甲基-2-吡咯羰基-亞氨基)-1，3，5-萘三磺酸三鈉鹽。1H-NMR(200MHz，DMSO-d6)δ3.91(s，3H，NCH3)；7.06(m，1H，咪唑)；7.23，7.26(二雙重峰，J＝1.9Hz，2H，吡咯)；7.80(t，J＝1.5Hz，1H，咪唑)；8.2-8.4(m，3H，6+2+1H咪唑)；9.0，9.11(二多重峰，2H，8+4)；10.23，10.37(二單峰，2H，2-CONH).8-(4-(咪唑基-羰基-亞氨基)-N-甲基-2-吡咯羰基-亞氨基)-1，3，5-萘三磺酸三鈉鹽。實施例5N-(4-羰基亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(4-亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(7-亞氨基-1，3，5-萘三磺酸三鈉鹽))-β-丙氨酰-2’-紫杉酚[FCE28721]向2’(β-丙氨酰)紫杉酚甲酸鹽(97mg＝0.1mmol)的二甲基甲酰胺(8ml)溶液中加入4-二甲氨基吡啶(12mg＝0.1mmol)和7-(4-(咪唑基-羰基-亞氨基)-N-甲基-2-吡咯羰基(N-甲基-4，2-吡咯羰基亞氨基))-1，3，5-萘三磺酸三鈉鹽(95mg＝0.12mmol)，然后整個在室溫下攪拌12小時。真空蒸發(fā)溶劑至干，剩余物在硅膠柱上進行色譜純化，用二氯甲烷∶甲醇為1∶1的混合物作洗脫劑，得到90mg標題化合物。1H-NMR(400 MHz，DMSO-d6)δ0.99(s，3H，17)；1.01(s，3H，16)；1.49(s，3H，19)；1.80s，3H，18)；1.5-1.9(m，3H，CH2-14+61Hβ)；2.09，2.22(二單峰，6H，CH3CO-4+CH3CO-10)；2.30(m，1H，6α)；2.60(m，2H，NHCH2CH2CO)；3.30(m，2H，NHCH2CH2CO)；3.58(d，J＝7.3Hz，1H，3)；3.81，3.88(二單峰，6H，2-NCH3)；3.98，4.01(二雙重峰，J＝8.5Hz，2H，CH2-20)；4.11(m，1H，7)；4.62(s，1H，OH-1)；4.89(m，2H，5+OH-7)；5.34(d，J＝8.5Hz，1H，2′)；5.41(d，J＝7.3Hz，1H，2)；5.5(dd，J＝8.5Hz，J＝8.5Hz，lH，3′)；5.83(m，1H，13)；6.06(m，1H，NHCONHCH2)；6.29(s，1H，10)；6.72，6.94(二雙重峰，J＝1.8Hz，2H，吡咯)；7.19，7.33(二雙重峰，J＝1.5Hz，2H，吡咯)；7.1，8.0(m，15H，3-Ph)；8.20(s，1H，NHCONHCH2)；8.30(d，J＝1.8Hz，1H，2″)；8.37(d，J＝2.4Hz，1H，6″)；9.00，9.15(二多重峰，2H，8″+4″)；9.22(d，J＝8.5Hz，1H，NH-4′)；9.77，10.17(二單峰，2H，2-CONH).實施例6β-(4-羰基亞氨酰，N-甲基，2-吡咯羰基-(4-亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(7-亞氨基-1，3，5-萘三磺酸三鈉鹽)))丙?；?2’-紫杉酚[FCE28722]向2’-琥珀酰-紫杉酚(95mg＝0.1mmol)的二甲基甲酰胺(10ml)溶液中加入N，N’二環(huán)己基碳化二亞胺(41mg＝0.2mmol)，然后將整個混合物攪拌1小時。再加入化合物7-(4-氨基，N-甲基-2-吡咯羰基-(4-亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基亞氨基)-1，3，5-萘三磺酸三鈉鹽鹽酸鹽(80mg＝0.11mmol)和4-二甲氨基吡啶(18mg＝0.15mmol)，并在室溫攪拌20小時。真空蒸發(fā)溶劑至干，剩余物在硅膠柱上進行色譜純化，用二氯甲烷∶甲醇為1∶1的混合物作洗脫劑，得到120mg標題化合物。1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ0.98(s，3H，17)；1.00(s，3H，16)；1.47(s，3H，19)；1.76(s，3H，18)；2.08，2.23(二單峰，6H，CH3CO-4+CH3CO-10)；1.4-2.4(m，4H，CH2-14+CH2-6)；2.5-2.8(m，4H，COCH2CH2CO)；3.56(d，J＝7.0Hz，1H，3)；3.82，3.87(二單峰，6H，2-NCH3)；3.9-4.2(m，3H，7+CH2-20)；4.61(s，1H，OH-1)；4.90(m，2H，OH-7+5)；5.35(d，J＝8.5Hz，1H，2′)；5.39(d，J＝7.0Hz，1H，2)；5.53(dd，J＝8.5Hz，J＝8.5Hz，1H，3′)；5.81(m，1H，13)；6.27(s，1H，10)；6.81，7.34 (二雙重峰，J＝1.5Hz，2H，吡咯)；7.15，7.18(二雙重峰，J＝1.7Hz，2H，吡咯)；7.1-8.0(m，15H，3Ph)；8.29(d，J＝1.7Hz，1H，6″)；8.37(d，J＝2.0Hz，1H，2″)；8.97，9.13(二多重峰，2H，8″+4″)；9.23(d，J＝8.5Hz，1H，4′)；9.92，9.93，10.21(三單峰，3H，3-CONH).實施例7N-(4-羰基亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(4-亞氨基-1，7-萘二磺酸二鈉鹽))-β-丙氨酰-2’-紫杉酚[FCE28745]向2’(β-丙氨酰)紫杉酚甲酸鹽(291mg＝0.3mmol)的二甲基甲酰胺(25ml)溶液中加入4-(4-(咪唑基-羰基-亞氨基)-N-甲基-2-吡咯羰基亞氨基)-1，7-萘二磺酸二鈉鹽(286mg＝0.5mmol)，然后整個在室溫攪拌20小時。真空蒸發(fā)溶劑至干，剩余物在硅膠柱上進行色譜純化，用二氯甲烷∶甲醇為2∶1的混合物作洗脫劑，得到250mg標題化合物。1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ0.99(s，3H，17)；1.01(s，3H，16)；1.48(s，3H，19)；1.4-1.9(m，3H，CH2-14+6β)；1.80(s，3H，18)；2.09，2.23(二單峰，6H，CH3CO-4+CH3CO-10)；2.31(m，1H，6α)；2.60(m，2H，OCOCH2CH2NH)；3.2-3.5(m，2H，OCOCH2CH2NH)；3.58(d，J＝7.3Hz，1H，3)；3.79(s，1H，NCH3)；3.9-4.2(m，3H，CH2-20+7)；4.64(s，1H，OH-1)；4.91(m，2H，5+OH-7)；5.34(d，J＝8.5Hz，1H，2′)；5.40(d，J＝7.3Hz，1H，2)；5.54(dd，J＝8.5Hz，J＝8.5Hz，1H，3′)；5.82(m，1H，13)；6.09(t，J＝6.0Hz，1H，OCOCH2CH2NH)；6.29(s，1H，10)；6.93-7.02(二雙重峰，J＝1.9Hz，2H，吡咯)；7.1-8.0(m，19H，3-ph+3″+6″+5″+2″)；8.26(s，1H，NHCONHCH2)；9.18(d，J＝1.8Hz，1H，8″)；9.25(d，J＝8.5Hz，1H，NH-4′)；9.88(s，1H，吡咯-CONH).
用類似方法可以得到下列化合物N-(4-羰基亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(7-亞氨基-1，3，5-萘三磺酸三鈉鹽))-β-丙氨酰-2’-紫杉酚[FCE28746]。1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ0.99(s，3H，17)；1.01(s，3H，16)；1.48(s，3H，19)；1.80(s，3H，18)；1.4-1.9(m，3H，CH2-14+6β)；2.09，2.23(二單峰，6H，CH3CO-4+CH3CO-10)；2.30(m，1H，6α)；2.60(m，2H，OCOCH2CH2NH)；3.2-3.5(m，2H，OCOCH2CH2NH)；3.58(d，J＝7.0Hz，1H，3)；3.83(s，3H，NCH3)；3.9-4.2(m，3H，CH2-20+7)；4.64(s，1H，OH-1)；4.90(m，2H，5+OH-7)；5.34(d，J＝8.5Hz，1H，2′)；5.40(d，J＝7.0Hz，1H，2)；5.54(dd，J＝8.5Hz，J＝8.5Hz，1H，3′)；5.82(m，1H，13)；6.12(m，1H，OCOCH2CH2NH)；6.29(s，1H，10)；6.91，7.01(二雙重峰，J＝1.8Hz，2H，吡咯)；7.1-8.0(m，15H，3-Ph)；8.22(s，1H，NHCONHCH2)；8.26(d，J＝1.8Hz，1H，2″)；8.34(d，J＝2.3Hz，1H，6″)；8.94，9.10(二多重峰，2H，8″+4″)；9.27(d，J＝8.5Hz，1H，NH-4′)；10.02(s，1H，吡咯-CONH).N-(4-羰基亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(8-亞氨基-1，3，5-萘三磺酸三鈉鹽))-β-丙氨酰-2’-紫杉酚[FCE28842]。1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ1.00(s，3H，17)；1.02(s，3H，16)；1.49(s，3H，19)；1.81(s，3H，18)；1.4-1.9(m，3H，CH2-14+6β)；2.10，2.24(二單峰，6H，CH3CO-4+CH3CO-10)；2.2-2.4(m，1H，6α)；2.60(m，2H，OCOCH2CH2NH)；3.1-3.3(m，2H，OCOCH2CH2NH)；3.59(d，J＝7.2Hz，1H，3)；3.82(s，3H，NCH3)；3.9-4.2(m，3H，CH2-20+7)；4.65(s，1H，OH-1)；4.93(m，2H，5+OH-7)；5.34(d，J＝8.5Hz，1H，2′)；5.41(d，J＝7.2Hz，1H，2)；5.54(dd，J＝8.5Hz，J＝8.5Hz，1H，3′)；5.83(m，1H，13)；6.02(t，J＝6.0Hz，1H，OCOCH2CH2NH)；6.30(s，1H，10)；6.95，7.03(二雙重峰，J＝1.7Hz，2H，吡咯)；7.1-8.1(m，17H，3-Ph+7″+ 6″)；8.34(s，1H，NHCONHCH2)；8.61(d，J＝2Hz，1H，2″)；9.27(d，J＝8.5Hz，1H，NH-4′)；9.37(d，J＝2.0Hz，1H，4″)；12.20(s，1H，吡咯-CONH).實施例8N-(4-羰基亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(8-亞氨基-1，3，5-萘三磺酸三鈉鹽))苯基丙氨酰-亮氨酰-甘氨酰-2’-紫杉酚[FCE29142]向2’(苯基丙氨酰-亮氨酰-甘氨酰)紫杉酚(351mg＝0.3mmol)(WO94/00156)的二甲基甲酰胺(20ml)溶液中加入4-二甲氨基吡啶(36mg＝0.3mmol)和8-(4-(咪唑基-羰基-亞氨基)-N-甲基-2-吡咯羰基亞氨基)-1，3，5-萘三磺酸三鈉鹽(333mg＝0.5mmol)，然后整個在室溫攪拌20小時。真空蒸發(fā)溶劑至干，剩余物在硅膠柱上進行色譜純化，用二氯甲烷∶甲醇為2∶1的混合物作洗脫劑，得到331mg標題化合物。1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ0.81(d，J＝6.5Hz，3H，δ-Leu)；0.84(d，J＝6.5Hz，3H，δ′-Leu)；0.99(s，3H，17)；1.01(s，3H，16)；1.48(s，3H，19)；1.79 (s，3H，18)；1.4-1.9(m，6H，CH2-14+6β+γLeu+β，β′Leu)；2.09，2.21(二單峰，6H，CH3CO-4+CH3CO-10)；2.32(m，1H，6α)；2.81(dd，J＝7.9Hz，J＝13.7Hz，1H，βPhe)；2.99(dd，J＝4.1Hz，J＝13.7Hz，1H，β′Phe)；3.57(d，J＝8.2Hz，1H，3)；3.78(s，3H，NCH3)；3.8-4.2(m，5H，α，α′Gly+CH2-20+7)；4.38(m，1H，αLeu)；4.48(m，1H，αPhe)；4.61(s，1H，OH-1)；4.90(m，2H，OH-7+5)；5.40(m，2H，2′+2)；5.51(dd，J＝8.5Hz，J＝8.5Hz，1H，3′)；5.84(m，1H，13)；6.03(d，J＝7.9Hz，1H，NH-Phe)；6.29(s，1H，10)；6.91-7.00(二雙重峰，J＝1.9Hz，2H，3+5)；7.1-8.1(m，22H，4ph+6″+7″)；8.15(d，J＝8.5Hz，1H，NH-Leu)；8.39(t，J＝6.0Hz，1H，NH-Gly)；8.50(s，1H，NH-4)；8.60(d，J＝2.0Hz，1H，7″)；9.26(d，J＝8.2Hz，1H，NH-4，)；9.36(d，J＝2.0Hz，1H，4″)；12.18(s，1H，NH-8″).實施例93’-N-琥珀酰柔紅霉素將柔紅霉素(100mg，0.177mmol)和琥珀酸酐(21.2mg，0.212mmol)溶解于無水二氯甲烷(20ml)中，然后加入三乙胺(123μl，0.885mmol)，并整個在室溫和氮氣下攪拌2.5小時。真空蒸發(fā)溶劑至干，剩余物在硅膠柱上進行色譜純化，用二氯甲烷∶甲醇為7∶3的混合物作洗脫劑，得到120mg標題化合物。實施例103-(4-羰基亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(4-亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(7-亞氨基-1，3-萘二磺酸二鈉鹽)))丙?；?3’-N-柔紅霉素[FCE28854]將化合物3’-N-琥珀酰柔紅霉素(87mg，0.139mmol)和1，1-羰基二咪唑(22.5mg，0.139mmol)溶解于二甲基甲酰胺(10ml)中，并整個在室溫和氮氣下攪拌8小時。再加入化合物7-(氨基-N-甲基-4，2-吡咯羰基亞氨基-(N-甲基-4，2-吡咯羰基亞氨基))-1，3-萘二磺酸二鈉鹽鹽酸鹽(109mg，0.139mmol)和4-二甲氨基吡啶(18.3mg，0.15mmol)，并將整個混合物攪拌過夜。真空蒸發(fā)溶劑至干，剩余物在LiChroprep RP-8柱上進行色譜純化，用水∶乙腈為4∶1的混合物作洗脫劑，得到57mg標題化合物。1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ1.12(d，J＝6.6Hz，3H，CH3-6′)；1.42(dd，J＝4.5Hz，J＝12.1Hz，1H，2′eq)；1.84(m，1H，2′ax)；2.1-2.3(m，2H，CH2-8)；2.25(s，1H，COCH3)；2.3-2.5(m，4H，COCH2CH2CO)；2.92，2.98(二雙重峰，J＝18.2Hz，2H，CH2-10)；3.40(m，1H，4′)；3.86，3.80(二單峰，6H，2-NCH3)；3.97(s，3H，OCH3)；3.95(m，1H，3，)；4.17(q，J＝6.6Hz，1H，5′)；4.73(d，J＝5.9Hz，1H，OH-4′)；4.93(m，1H，7)；5.22(d，J＝3.1Hz，1H，1′)；5.54(s，1H，OH-9)；6.81，7.12，7.14，7.31(四雙重峰，J＝1.7Hz，4H，吡咯)；7.60(d，J＝8.0Hz，1H，NH-3′)；7.64(m，1H，3)；7.90(m，4H，1+2+5″+6″)；8.00(d，J＝1.8Hz，1H，4″)；8.22(d，J＝1.8Hz，1H，2″)；8.90(d，J＝1.8Hz，1H，8″)；9.81，9.90，10.21(三單峰，3H，3-CONH)；13.29，14.04(二單峰，2H，OH-6+OH-11).F.A.B MSm/z1178，M--Na實施例1120-O-(芐氧羰基-β-丙氨酰)喜樹堿將芐氧羰基-β-丙氨酸(3.2g，14.34mmol)和4-二甲氨基吡啶(3.5g，28.68mmol)溶解于無水氯仿(30ml)中，在氮氣中和攪拌的同時滴加草酰氯(1.24ml，14.34mmol)。45分鐘后，在不接觸空氣的情況下將上述粗反應(yīng)混合物加到喜樹堿(2.5g，7.17mmol)和4-二甲氨基吡啶(875mg，7.17mmol)的1，2-二氯乙烷(100ml)懸浮液中，然后整個在氮氣下攪拌2小時。反應(yīng)溶液用二氯甲烷(100ml)稀釋，并用水(200ml)洗滌。分離有機相，干燥，減壓除去溶劑。剩余物從乙醇(150ml)重結(jié)晶，得到3.47g標題化合物。1H-NMR(200MHz；DMSO d6)δ0.95(t，3H，CH3CH2)；2.15(q，2H，CH3CH2)；2.75(m，2H，NHCH2CH2COO)；3.3(m，2H，NHCH2CH2COO)；5.0(s，2H，PhCH2)； 5.25(s，2H，CH2-5)；5.5(s，2H，CH2-17)；7.1(s，1H，14)；7.2-7.4(m，6H，Ph+NH)；7.7(m，1H，10)；7.85(m，1H，11)；8.15(m，2H，12+9)；8.65(s，1H，7).實施例1220-O-(β-丙氨酰)喜樹堿甲酸鹽向20-O-(芐氧羰基-β-丙氨酰)喜樹堿(3.0g，5.42mmol)的甲醇(170ml)和甲酸(100ml)溶液中加入5％Pd/C(1.0g)，然后整個在40℃攪拌4小時。過濾反應(yīng)混合物，真空蒸發(fā)溶劑至干，得到2.5g標題化合物。1H-NMR(200MHz；DMSO d6)δ0.95(t，3H，CH3CH2)；2.15(q，2H，CH3CH2)；2.7-3.1(m，4H，NHCH2CH2COO)；5.3(s，2H，CH2-5)；5.5(s，2H，CH2-17)；7.15(s，1H，14)；7.7(m，1H，10)；7.85(m，1H，11)；8.15(m，2H，12+9)；8.3(bs，1H，HCO2H)；8.7(s，1H，7).實施例13N-(4-羰基亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(4-亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(4-亞氨基-1，7-萘二磺酸二鈉鹽)))-β-丙氨酰-20-O-喜樹堿[FCE28855]將化合物20-O-(β-丙氨酰)喜樹堿甲酸鹽(200mg，0.43mmol)和4-(咪唑基-羰基-亞氨基-N-甲基-4，2-吡咯羰基亞氨基(N-甲基-4，2-吡咯羰基亞氨基))-1，7-萘二磺酸二鈉鹽(354mg，0.516mmol)溶解于二甲基甲酰胺(10ml)，然后整個在室溫和氮氣下攪拌8小時。減壓除去溶劑，剩余物用二氯甲烷(30ml)處理，攪拌30分鐘，過濾得到粗產(chǎn)物。將其在LiChroprepRP-8柱上進行色譜純化，洗脫體系是A到B的梯度，A為水，B為水∶乙腈(85∶15)，得到165mg標題化合物。1H-NNR(400MHz；DMSO d6)δ0.9(t，J＝7.4Hz，3H，CH3CH2)；2.16(q，J＝7.4Hz，2H，CH3CH2)；2.73(m，2H，NHCH2CH2COO)；3.30(m，2H，NHCH2CH2COO)；3.76，3.84(二單峰，6H，2-NCH3)；5.30(s，2H，CH2-5)；5.49(s，2H，CH2-17)；6.03(t，J＝6.0Hz，1H，NHCH2CH2COO)；6.68，6.86，7.18，7.35(四雙重峰，J＝1.7Hz，4H，吡咯)；7.10(s，1H，14)；7.49(d，J＝7.8Hz，1H，3′)；7.68(m，2H，10+6′)；7.81(m，1H，11)，7.89(d，J＝8.8Hz，1H，5′)；7.96(d，J＝7.8Hz，1H，2′)；8.09(m，2H，12+9)；8.19(s，1H，CH2NHCONH)；8.68(s，1H，7)；9.18(d，J＝1.5Hz，1H，8′)；8.79，10.00(二單峰，2H，2-CONH).F.A.B MSm/z991，M--2Na+H；1013，M--Na用類似方法可以得到下列化合物N-(4-羰基亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(4-亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(4-亞氨基-1，7-萘二磺酸二鈉鹽)))-苯基丙氨酰-亮氨酰-甘氨酰-20-O-喜樹堿。實施例14O-(N-三苯甲基-苯基丙氨酰-亮氨酰-甘氨酰)苯甲?；状枷虮郊柞＜柞?408mg，3mmol)的吡啶(20ml)溶液中加入4-二甲基氨基-吡啶(244mg，2mmol)和N-三苯甲基-苯基丙氨酰-亮氨酰-甘氨酰-4-硝基苯基酯(1398mg，2mmol)，并整個回流攪拌6小時。反應(yīng)混合物用乙酸乙酯稀釋，用稀鹽酸(0.5N)和水洗滌，無水硫酸鈉干燥。真空蒸發(fā)溶劑至干，剩余物在硅膠柱上進行色譜純化，洗脫劑為乙酸乙酯∶己烷1∶1，得到930mg標題化合物。實施例15O-(苯基丙氨酰-亮氨酰-甘氨酰)苯甲?；状紝⒒衔颫-(N-三苯甲基-苯基丙氨酰-亮氨酰-甘氨酰)苯甲?；状?930mg)溶解于冰醋酸(110ml)和水(25ml)的混合物中，然后整個在室溫攪拌1.5小時。真空蒸發(fā)溶劑至干，剩余物溶解于乙酸乙酯，再用甲苯稀釋并蒸發(fā)，得到606mg標題化合物。1H-NMR(200MHz，CDCl3)δ0.89，0.91(二雙重峰，J＝6.1Hz，6H，δ+δ｀-Leu)；1.4-1.8(m，3H，β+β｀+γ-Leu)；2.72(dd，J＝9.0，13.6Hz，1H，β-Phe)；3.20(dd，J＝4.0，13.6Hz，1H，β｀-Phe)；3.68(dd，J＝4.0，9.0Hz，1H，α-Phe)；4.0-4.4(m，2H，α+α｀-Gly)；4.52(m，1H，α-Leu)；5.37(s，2H，COOCH2)；7.0-8.0(m，12H，2-Ph+NH-Leu+NH-Gly).實施例16N-(4-羰基亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(8-亞氨基-1，3，5-萘三磺酸三鈉鹽))苯基丙氨酰-亮氨酰-甘氨酰-O-苯甲?；状糩FCE29378]向O-(苯基丙氨酰-亮氨酰-甘氨酰)苯甲酰基甲醇(600mg)的二甲基甲酰胺(100ml)溶液中加入4-二甲氨基吡啶(160mg)和8-(4-(咪唑基-羰基-亞氨基)-N-甲基-2-吡咯羰基亞氨基)-1，3，5-萘三磺酸三鈉鹽(1068mg)，然后整個在室溫攪拌20小時。真空蒸發(fā)溶劑至干，剩余物在硅膠柱上進行色譜純化，用二氯甲烷∶甲醇2∶1洗脫，得到702mg標題化合物。1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ0.83，0.87(two d，J＝6.6Hz，6H，δ+δ｀-Leu)；1.4-1.7(m，3H，β+β｀+γ-Leu)；2.80(dd，J＝7.7，13.5Hz，1H，β-Phe)；3.1(dd，J＝4.8，13.5Hz，1H，β｀-Phe)；3.80(s，3H，NCH3)；3.9-4.1(m，2H，α+α｀-Gly)；4.38(m，1H，α-Leu)；4.47(m，1H，α-Phe)；5.50，5.53(二d，J＝17.3Hz，2H，COOCH2CO)；6.03(d，J＝8.1Hz，1H，NH-Phe)；6.91，7.01(two d，J＝1.6Hz，2H，3′+5′)；7.1-8.0(m，10H，2-Ph)；8.00，8.05(two d，J＝8.3Hz，2H，6+7)；8.18(d，J＝8.4 Hz，1H，NH-Leu)；8.37(t，J＝5.9Hz，1H，NH-Gly)；8.49(s，1H，NH-4′)；8.60(d，J＝2.0Hz，1H，2)；9.36(d，J＝2.0Hz，1H，4)；12.18(s，1H，NH-1).
用類似方法可以得到下列化合物N-(4-羰基亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(8-亞氨基-1，3，5-萘三磺酸三鈉鹽))苯基丙氨酰-亮氨酰-甘氨酰-β-丙氯酰-O-苯甲?；状肌嵤├?721-(N-三苯甲基-苯基丙氨酰-亮氨酰-甘氨酰)氫化可的松向氫化可的松(362mg，1mmol)的吡啶(15ml)溶液中加入4-二甲氨基吡啶(122mg，1mmol)和N-三苯甲基-苯基丙氨酰-亮氨酰-甘氨酰-4-硝基苯基酯(769mg，1.1mmol)，然后整個在100℃攪拌3小時。反應(yīng)混合物用乙酸乙酯稀釋，用稀鹽酸(0.5N)和水洗滌，并用無水硫酸鈉干燥。真空蒸發(fā)溶劑至干，剩余物在硅膠柱上進行色譜純化，用乙酸乙酯∶己烷3∶1洗脫，得到750mg標題化合物。1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ0.75(s，3H，18)；0.83，0.86(二d，J＝6.4 Hz，6H，δ+δ｀-Leu)；1.35(s，3H，19)；2.76(d，J＝8.8Hz，NH-Phe)；3.40(m，1H，α-Phe)；3.7-4.0(m，3H，α-Leu+α，α｀-Gly)；4.24(m，1H，11)；4.31(d，J＝3.8Hz，1H，OH-11)；4.74，5.13(二d，J＝17.6Hz，2H，CH2-21)；5.39(s，1H，OH-17)；5.54(s，1H，4)；7.0-7.4(m，20H，4-Ph)；7.65(d，J＝7.6Hz，1H，NH-Leu)；8.18(t，J＝6.0Hz，1H，NH-Gly).實施例1821-(苯基丙氨酰-亮氨酰-甘氨酰)氫化可的松將21-(N-三苯甲基-苯基丙氨酰-亮氨酰-甘氨酰)氫化可的松(750mg)的冰醋酸(115ml)和水(25ml)的混合物在室溫攪拌3小時。真空蒸發(fā)溶劑至干，將剩余物溶解于甲醇，用甲苯稀釋并蒸發(fā)。剩余物在硅膠柱上進行色譜純化，用乙酸乙酯∶甲醇5∶1洗脫，得到400mg標題化合物。F.A.B.MSm/z678，M-H.1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ0.74(s，3H，18)；0.83，0.85(two d，J＝6.2Hz，6H，δ+δ｀-Leu)；1.34(s，3H，19)；2.61(dd，J＝8.5，13.5Hz，1H，β-Phe)；2.93(dd，J＝4.4，13.5Hz，1H，β｀-Phe)；3.42(dd，J＝4.4，8.5Hz，1H，α-Phe)；3.87(dd，J＝6.0，17.6Hz，1H，α-Gly)；3.96(dd，J＝6.0，17.6Hz，1H，α｀-Gly)；4.25(m，1H，11)；4.36(m，2H，OH-11+α-Leu)；4.76，5.13(二d，J＝17.6Hz，2H，CH2-21)；5.42(s，1H，OH-17)；5.54(s，1H，4)；7.1-7.3(m，5H，Ph)；7.95(d，J＝7.8Hz，1H，NH-Leu)；8.38(t，J＝6.0Hz，1H，NH-Gly).實施例1921-(N-(4-羰基亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(8-亞氨基-1，3，5-萘三磺酸三鈉鹽))苯基丙氨酰-亮氨酰-甘氨酰)氫化可的松[FCE29603]向21-(苯基丙氨酰-亮氨酰-甘氨酰)氫化可的松(400mg，0.59mmol)的二甲基甲酰胺(30ml)溶液中加入4-二甲氨基吡啶(72mg，0.59mmol)和8-(4-(咪唑基-羰基-亞氨基)-N-甲基-2-吡咯羰基亞氨基)-1，3，5-萘三磺酸三鈉鹽(609mg，0.915mmol)， 然后整個在室溫攪拌6小時。真空蒸發(fā)溶劑至干，剩余物在硅膠柱上進行色譜純化，用二氯甲烷∶ 甲醇2∶1洗脫，得到390mg標題化合物。F.A.B.MSm/z1010，M-H(作為游離酸).1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ0.76(s，3H，18)；0.83，0.87(二d，J＝6.6Hz，6H，δ+δ｀-Leu)；1.34(s，3H，19)；2.80(dd，J＝8.0，13.9Hz，1H，β-Phe)；3.00(dd，J＝4.4，13.9Hz，1H，β｀-Phe)；3.80(s，3H，NCH3)；3.87(dd，J＝17.6，6.1Hz，1H，α-Gly)；4.00(dd，J＝17.6，6.1Hz，1H，α｀-Gly)；4.24(m，1H，11)；4.35(m，2H，OH11+α-Leu)；4.46(m，1H，α-Phe)；4.77，5.14(two d，J＝17.6Hz，2H，CH2-21)；5.43(s，1H，OH-17)；5.54(s，1H，4)；6.02(d，J＝7.7Hz，1H，NH-Phe)；6.90，7.00(二d，J＝1.8Hz，2H，3′+5′)；7.1-7.3(m，5H，Ar-Phe)；8.00，8.04(二d，J＝8.4Hz，2H，6″+7″)；8.16(d，J＝8.4Hz，1H，NH-Leu)；8.31(t，J＝6.1Hz，1H，NH-Gly)；8.48(s，1H，CONH-4′)；9.61(d，J＝1.8Hz，1H，2″)；9.38(d，J＝1.8Hz，1H，4″)；12.17(s，1H，CONH-8″).實施例20Tallimustine偕胺肟將500mgtallimustine(按J.Med.Chem.32，774-778所述方法制備)的20mlDMF溶液在60℃加熱，并用0.68ml羥胺的1M DMF處理，從羥胺鹽酸鹽(70mg)，0.139ml三乙胺和1mlDMF的10％水中得到。30分鐘后，加入1當(dāng)量羥胺的1M DMF。將溶液蒸發(fā)至干，剩余物用快速色譜純化(二氯甲烷∶甲醇85∶15)，得到400mg標題化合物為白色固體。F.A.B.MSm/z713，M+H；244.1H-NMR(200MHz，DMSO-d6)δ2.20(m.2H)；3.32(m，2H)；3.79(s，3H)；3.83(s，3H)；3.85(s，3H)；3.90-3.70(m，8H)；5.40(bs，2H)；6.82(m，2H)；6.83(d，J＝1.7Hz，1H)；7.4(d，J＝1.7Hz，1H)；7.6(d，J＝1.7Hz，1H)；7.17(d，1.7Hz，1H)；7.23(d，1.7Hz，1H)；7.28(d，J＝1.7Hz，1H)；7.83(m，2H)；7.87(t，J＝5.7Hz，1H)；8.82(s，1H)；9.86(s，1H)；9.92(s，1H)；實施例21O-(N-三苯甲基-苯基丙氨酰-亮氨酰-甘氨酰)tallimustine偕胺肟向tallimustine偕胺肟(250mg，0.35mmol)的二甲基甲酰胺(9ml)溶液中加入4-二甲氨基吡啶(48mg，0.35mmol)和N.三苯甲基-苯基丙氨酰-亮氨酰-甘氨酰-4-硝基苯基酯(315mg，0.45mmol)，然后整個在室溫攪拌4小時。真空蒸發(fā)溶劑至干，剩余物在硅膠柱上進行色譜純化，用二氯甲烷∶甲醇28∶2洗脫，得到357mg標題化合物。實施例22O-(苯基丙氨酰-亮氨酰-甘氨酰)tallimustine偕胺肟將O-(N-三苯甲基-苯基丙氨酰-亮氨酰-甘氨酰)tallimustine偕胺肟(314mg)的冰醋酸(28ml)和水(6.5ml)的混合物在室溫攪拌1小時。真空蒸發(fā)溶劑至干，剩余物溶解于甲醇，用甲苯稀釋并蒸發(fā)，得到254mg粗的化合物。F.A.B.MSm/z1031，M+H；697，M-(O-GlyLeu-Phe)+2H；336；261；244.1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ0.83，0.86(二雙重峰，J＝6.4Hz，6H，δ+δ′-Leu)；1.3-1.5(m，3H，β+β′+γ-Leu)；2.31(t，J＝7.5Hz，2H，CONHCH2CH2)；2.63(dd，J＝13.3，8.2Hz，1H，β-Phe)；2.94(dd，J＝13.3，4.4Hz，1H，β′-Phe)；3.2-3.4(m，3H，CONHCH2CH2+α-Phe)；3.6-4.0(m，19H，3-NCH3+α，α′-Gly+N(CH2CH2Cl)2)；4.36(m，1H，α-Leu)；6.45(bs，2H，NH2)；6.7-7.4(m，13H，6H吡咯+Ar-Phe+2H Ph)；7.85(m，2H，Ph)；8.03(m，2H，NH-Leu+CONHCH2CH2)；8.33(t，J＝5.9Hz，1H，NH-Gly)；9.91，9.95，10.02(三單峰，3H，3-CONH).實施例23N-(4-羰基亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(8-亞氨基-1，3，5-萘三磺酸三鈉鹽))苯基丙氨酰-亮氨酰-甘氨酰)-O-tallimustine偕胺肟向O-(苯基丙氨酰-亮氨酰-甘氨酰)tallimustine偕胺肟(254mg，0.246mmol)的二甲基甲酰胺(30ml)溶液中加入4-二甲氨基吡啶(30mg，0.246mmol)和8-(4-(咪唑基-羰基-亞氨基)-N-甲基-2-吡咯羰基亞氨基)-1，3，5-萘三磺酸三鈉鹽(172mg，0.258mmol)，然后整個在50℃攪拌4小時。真空蒸發(fā)溶劑至干，剩余物在硅膠柱上進行色譜純化，用二氯甲烷∶甲醇7∶3洗脫，得到240mg標題化合物。F.A.B.MSm/z1561，M-H(作為游離酸).1H-NMR(400MHz.DMSO-d6)δ0.83，0.87(二雙重峰，J＝6.6Hz，6H，δ+δ′-Leu)；1.4-1.7(m，3H，β+β′+γ-Leu)；2.31(t，J＝7.5Hz，2H，CONHCH2CH2)；2.81(dd，J＝13.7，8.0Hz，1H，β-Phe)；3.00(dd，J＝13.7，4.4Hz，1H，β′-Phe)；3.3-3.5(m，2H，CONHCH2CH2)；3.7-4.1(m，22H，4-NCH3+α，α′-Gly+N(CH2CH2Cl)2)；4.35(m，1H，α-Leu)；4.45(m，1H，+α-Phe)；6.2(d，J＝7.7Hz，1H，NH-Phe)；6.45(bs，2H，NH2)；6.7-7.3(m，15H，8H吡咯+Ar-Phe+2H Ph)；7.84(m，2H，Ph)；7.9-8.1(m，3H，CONHCH2CH2+6+7)；8.18(d，J＝8.4Hz，1H，NH-Leu)；8.25(t，J＝5.9Hz，1H，NH-Gly)；8.47(s，1H，NH-4′)；8.61(d，J＝2.6Hz，1H，2)；9.37(d，J＝2.6Hz，1H，4)；9.88，9.92，10.0，12.2(四個單峰，4H，4-CONH).實施例247-(咪唑基-羰基-亞氨基-N-甲基-4，2-吡咯羰基亞氨基)-1，3-萘二磺酸二鉀鹽在氮氣和室溫下， 1小時之內(nèi)向攪拌的N，N’-羰基二咪唑(1.48g，9.14mmol)的二甲基甲酰胺(5ml)溶液中滴加7-(4-氨基-N-甲基-2-吡咯羰基亞氨基)-1，3-萘二磺酸二鉀鹽(458mg，0.914mmol)的二甲基甲酰胺(5ml)溶液。3.5小時后，減壓濃縮反應(yīng)混合物至3ml，然后加入丙酮(100ml)。濾出固體沉淀并用丙酮洗滌，得到476mg標題化合物為粉紅色粉末。1H-NMR(200MHz，DMSO-d6)δ3.95(s，3H)；7.1(m，1H)；7.25(d，1H)；7.3(d′1H)；7.8(t，1H)；7.9(m，2H)；8.0(m，1H)；8.25(d，1H)；8.4(m，1H)；8.95(bs，1H)；10.3(bs′1H)；10.4(bs′1H).實施例25N-十四烷酰咪唑向肉豆蔻酸(1.0g，4.38mmol)的乙酸乙酯(10ml)溶液中分小批加入N，N’-羰基二咪唑(697g，4.3mmol)。整個在室溫下攪拌2小時后，CO2釋放停止，觀察到白色固體結(jié)晶沉淀。濾出固體，用乙酸乙酯(幾ml)洗滌并干燥，得到566mg標題化合物。1H-NMR(200MHz′DMSO-d6)δ0.85(t，3H)；1.1-1.4(m，20H)；1.55-1.75(m，2H)；3.0(t，2H)；7.05(m′1H)；7.7(t，1H)；8.4(m，1H).實施例26(2S，3R，4E)-1，3-二羥基-2-十四烷酰氨基-4-十八烯(C14-神經(jīng)酰胺)向(2S，3R，4E)-1，3-二羥基-2-氨基-4-十八烯(D-神經(jīng)鞘氨醇，F(xiàn)luka，100mg，0.334mmol)的二氯甲烷(15ml)溶液中一批加入93mgN-十四烷酰咪唑(0.334mmol)，然后整個在室溫攪拌90小時。減壓除去溶劑，剩余物在硅膠柱上進行快速色譜純化，用CH2Cl2∶ EtOH95∶5洗脫，得到148mg標題化合物為白色固體。1H-NMR(200MHz′CDCl3)δ0.75-0.95(m′6H)；1.1-1.5(m，40H)；1.5-1.7(m，4H)；1.95-2.1(m′2H)；2.2(t，2H)；2.7-2.8(m，2H)；3.6-3.8(m，1H)；3.85-4.0(m，2H)；4.25-4.35(m，1H)；5.45-5.6(m，1H)；5.7-5.85(m，1H)；6.2(d，1H).實施例271-O-(N-三苯甲基-苯基丙氨酰-亮氨酰-甘氨酰)-(2S，3R，4E)-1，3-二羥基-2-十四烷酰氨基-4-十八烯在氮氣和室溫下，向攪拌的(2S，3R，4E)-1，3-二羥基-2-十四烷酰氨基-4-十八烯(142mg，0.28mmol)和4-二甲氨基吡啶(68mg，0.56mmol)的無水1，2-二氯乙烷(50ml)溶液中滴加N-三苯甲基-苯基丙氨酰-亮氨酰-甘氨酰-對-硝基苯基酯(195mg，0.28mmol)的1，2-二氨乙烷(10ml)溶液，并整個攪拌4天。減壓除去溶劑，剩余物在硅膠柱上進行快速色譜純化，用石油醚∶乙酸乙酯1∶1洗脫，得到106mg標題化合物為無色油。實施例281-O-(苯基丙氨酰-亮氨酰-甘氨酰)-(2S，3R，4E)-1，3-二羥基-2-十四烷酰氨基-4-十八烯向乙酸(10ml)和水(2ml)的混合物中添加1-O-(N-三苯甲基-苯基丙氨酰-亮氨酰-甘氨酰)-(2S，3R，4E)-1，3-二羥基-2-十四烷酰氨基-4-十八烯(106mg，0.1mmol)，并整個在室溫攪拌3小時。減壓除去溶劑，剩余物在硅膠柱上進行快速色譜純化，用EtOAc∶EtOH85∶15洗脫，得到65mg標題化合物為白色固體。1H-NMR(200MHz，CDCl3)δ0.8-1.0(m，12H)；1.1-2.1(三組多重峰，52H)；2.25(t′2H)；2.75(dd′1H)；3.2(dd，1H)；3.7(dd，1H)；3.8-4.25(m，5H)；4.3-4.5(m，2H)；5.4-5.5(m，1H)；5.65-5.85(m，1H)；6.5(d，1H)；6.95(t，1H)；7.15-7.4(m，5H)；7.75(d，1H).實施例291-O-(N-(4-羰基亞氨基，N-甲基-2-吡咯羰基(7-亞氨基-1，3-萘二磺酸二鉀鹽))苯基丙氨酰-亮氨酰-甘氨酰)-(2S，3R，4E)-1，3-二羥基-2-十四烷酰氨基-4-十八烯 [FCE29604A]將化合物1-O-(苯基丙氨酰-亮氨酰-甘氨酰)-(2S，3R，4E)-1，3-二羥基-2-十四烷酰氨基-4-十八烯(65mg，0.078mmol)溶解于無水二甲基甲酰胺(10ml)，并一批加入7-(咪唑基-羰基亞氨基-N-甲基-4，2-吡咯羰基亞氨基)-1，3-萘二磺酸二鉀鹽(59.5mg，0.1mmol)。整個在室溫攪拌2小時。減壓除去溶劑，剩余物在硅膠柱上進行快速色譜純化，用CH2Cl2∶MeOH3∶1，然后是2∶1洗脫，得到56mg標題化合物為白色固體。F.A.B.MSm/z1276，M-2K+H.1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ0.8-0.9(m，12H，δ，δ′-Leu+2-CH3(CH2)11CH2)；1.1-1-4(m，44H，2-CH3(CH2)11CH2)；1.4-1.7(m，3H，β，γ，γ′-Leu)；1.92(m，2H，CH2-6)；2.03(t，J＝7.5Hz，2H，CH2CONH-2)；2.82(dd，J＝13.8，7.9Hz，1H，β-Phe)；3.01(dd，J＝13.8，4.7Hz，1H，β′-Phe)；3.7-3.9(m，4H，α，α′-Gly+2+3)；4.0-4.3(m，2H，CH2-1)；4.36(m，1H，α-Leu)；4.50(m，1H，α-Phe)；5.00(d，J＝5.3Hz，1H，OH-3)；5.34(dd，J＝6.4，15.5Hz，1H，4)；5.56(dt，J＝15.5，6.4Hz，1H，5)；6.10(d，J＝7.8Hz，1H，NH-Phe)；6.85-6.9(二雙重峰，J＝1.8Hz，2H，3A+5A)；7.1-7.3(m，5H，Ar-Phe)；7.54(d，J＝8.8Hz，1H，NH-2)；7.84(d，J＝9.1Hz，1H，5B)；7.89(dd，J＝9.1，2.0Hz，1H，6B)；8.00(d，J＝1.8Hz，1H，4B)；8.1-8.3(m，3H，2B+NHGly+NHLeu)；8.31(s，1H，NHA)；8.83(d，J＝2.0Hz，1H，8B)；10.02(s，1H，NHB).
用類似方法可以得到下列化合物1-O-(N-(4-羰基亞氨基，N-甲基-2-吡咯羰基-(7-亞氨基-1，3-萘二磺酸二鈉鹽))-苯基丙氨酰-亮氨酰-甘氨酰)-(2S，3R，4E)-1，3-二羥基-2-乙酰氨基-4-十八烯；1-O-(N-(4-羰基亞氨基，N-甲基-2-吡咯羰基-(7-亞氨基-1，3-萘二磺酸二鈉鹽))-苯基丙氨酰-亮氨酰-甘氨酰)-(2S，3R，4E)-1，3-二羥基-2-exanoyl氨基-4-十八烯；1-O-(N-(4-羰基亞氨基，N-甲基-2-吡咯羰基-(7-亞氨基-1，3-萘二磺酸二鈉鹽))-苯基丙氨酰-亮氨酰-甘氨酰)-(2S，3R，4E)-1，3-二羥基-2-十八烷酰氨基-4-十八烯；1-O-(N-(4-羰基亞氨基，N-甲基-2-吡咯羰基-(7-亞氨基-1，3-萘二磺酸二鈉鹽))-β-丙氨酰)-(2S，3R，4E)-1，3-二羥基-2-十四烷酰氨基-4-十八烯；1-O-(N-(4-羰基亞氨基，N-甲基-2-吡咯羰基-(7-亞氨基-1，3-萘二磺酸二鈉鹽))-β-丙氨酰)-(2S，3R，4E)-1，3-二羥基-2-乙酰氨基-4-十八烯；1-O-(N-(4-羰基亞氨基，N-甲基-2-吡咯羰基-(7-亞氨基-1，3-萘二磺酸二鈉鹽))-β-丙氨酰)-(2S，3R，4E)-1，3-二羥基-2-exanoyl氨基-4-十八烯；1-O-(N-(4-羰基亞氨基，N-甲基-2-吡咯羰基-(7-亞氨基-1，3-萘二磺酸二鈉鹽))-β-丙氨酰)-(2S，3R，4E)-1，3-二羥基-2-十八烷酰氨基-4-十八烯；1-O-(N-(4-羰基亞氨基，N-甲基-2-吡咯羰基-(8-亞氨基-1，3，5-萘三磺酸三鈉鹽))-苯基丙氨酰-亮氨酰-甘氨酰)-(2S，3R，4E)-1，3-二羥基-2-十四烷酰氨基-4-十八烯；及1-O-(N-(4-羰基亞氨基，N-甲基-2-吡咯羰基-(8-亞氨基-1，3，5-萘三磺酸三鈉鹽))-苯基丙氨酰-亮氨酰-甘氨酰)-(2S，3R，4E)-1，3-二羥基-2-十八烷酰氨基-4-十八烯。實施例307-表-taxotere向taxotere(200mg)的甲苯(100ml)溶液中加入1，8-(二氮雜雙環(huán))[5.4.0]十一-7-烯(4mg)，并整個在回流溫度攪拌8小時。溶液用乙酸乙酯稀釋，有機相用稀HCl，水和鹽水洗滌。干燥并蒸發(fā)，接著用硅膠色譜純化(乙酸乙酯∶己烷3∶1)，得到140mg標題化合物。
1H-NMR(CDCl3)δ3.6(m，1H，7β).實施例31β-(4-羰基亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(4-亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(4-亞氨基-1，7-萘二磺酸)))-丙氨酰-2’-紫杉酚將β-(4-羰基亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(4-亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(4-亞氨基-1，7-萘二磺酸二鈉鹽)))-丙氨酰-2’-紫杉酚的水∶乙醇(9∶1)溶液在Amberlite IR-120(H)柱上進行色譜純化，用水∶乙醇(9∶1)作洗脫劑。真空蒸發(fā)溶液至干，得到標題化合物。實施例32靜脈注射液1-10mg/ml靜脈注射藥物制劑可以通過將500mg化合物FCE28284溶解于注射用水(100ml)中來制作。
輸液前，可以根據(jù)常規(guī)作法將得到的溶液稀釋，存儲和/或輸送于玻璃、聚丙烯、聚烯烴或聚乙烯襯里的設(shè)備中。
用類似方法，也可以制備含有1-10mg/ml化合物FCE29142或化合物FCE28855的靜脈注射藥物制劑。
權(quán)利要求
1.式(II)化合物及其藥物上可接受的鹽 其中R是酸性基團；m是整數(shù)1-3；n是0或整數(shù)1-3；A是可酶催化水解的間隔基；X是生物活性化合物。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的式(II)化合物，其中R是選自磺酸，羧酸和磷酸的酸性基團。
3.根據(jù)權(quán)利要求1的式(II)化合物，其中X是taxane化合物，偏端霉素化合物，神經(jīng)酰胺化合物，喜樹堿化合物，表鬼臼毒素化合物，蒽環(huán)類化合物，苯甲?；状迹臍銼和氫化可的松的化合物。
4.根據(jù)權(quán)利要求1的式(II)化合物，其中可酶催化水解的間隔基A是a)-Y-CO-，其中Y是C1-C6亞烷基或C2-C6亞鏈烯基鏈，二價C3-C5環(huán)烷基或亞苯基；或b)氨基酸殘基或肽間隔基，選自βAla，Gly，Phe-Gly，Phe-Phe-，Leu-Gly，Val-Ala，Phe-Ala，Leu-Phe，Leu-Ala，Phe-Leu-Gly，Phe-Phe-Leu，Leu-Leu-Gly，Phe-Tyr-Ala，Phe-Gly-Phe，Phe-Phe-Gly，Phe-Leu-Gly-Phe，Gly-Phe-Leu-Gly-Phe，Gly-βAla，Phe-Gly-βAla，Phe-Phe-βAla，Leu-Gly-βAla，Val-Ala-βAla，Phe-Ala-βAla，Leu-Phe-βAla，Leu-Gly-βAla，Phe-Leu-Gly-βAla，Phe-Phe-Leu-βAla，Leu-Leu-Gly-βAla，Phe-Tyr-Ala-βAla，Phe-Gly-Phe，Phe-Phe-Gly-βAla，Phe-Leu-Gly-Phe-βAla，Gly-Phe-Leu-Gly-Phe-βAla和氨基己酰基。
5.根據(jù)權(quán)利要求1的式(II)化合物，其中R是磺酸基；m是2或3；n是1或2；A是-Y’-CO-，其中Y’選自-CH2-CH2-，-CH＝CH-和環(huán)丙基或1，2-亞苯基；或是氨基酸殘基，或是選自β-Ala，Gly，Leu-Gly和Phe-Leu-Gly的肽間隔基；X是紫杉酚，7-表紫杉酚，表紅霉素，taxotere，喜樹堿，9-氨基-喜樹堿，鬼臼亞乙苷，阿霉素，甲氧基-嗎啉代-阿霉素，苯甲?；状迹瑃allimustine-偕胺肟，N-(C2-C30)-?；?D-鞘氨醇，四氫S和氫化可的松，及其藥物上可接受的鹽。
6.下列化合物或其藥物上可接受的鹽，特別是鈉鹽N-(4-羰基亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(4-亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(4-亞氨基-1，7-萘二磺酸)))-β-丙氨酰-2’-紫杉酚；N-(4-羰基亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(4-亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(7-亞氨基-1，3，5-萘三磺酸)))-β-丙氨酰-2’-紫杉酚；N-(4-羰基亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(4-亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(8-亞氨基-1，3，5-萘三磺酸)))-β-丙氨酰-2’-紫杉酚；N-(4-羰基亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(4-亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(4-亞氨基-1，7-萘二磺酸)))-β-丙氨酰-2’(7-表)紫杉酚；N-(4-羰基亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(4-亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(8-亞氨基-1，3，5-萘三磺酸)))-β-丙氨酰-2’(7-表)紫杉酚；N-(4-羰基亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(4-亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(4-亞氨基-1，7-萘二磺酸)))-β-丙氨酰-2’-taxotere；N-(4-羰基亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(4-亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(8-亞氨基-1，3，5-萘三磺酸)))-β-丙氨酰-2’-taxotere；N-(4-羰基亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(4-亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(4-亞氨基-1，7-萘二磺酸)))-β-丙氨酰-3’-鬼臼亞乙苷；N-(4-羰基亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(4-亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(8-亞氨基-1，3，5-萘三磺酸)))-β-丙氨酰-3’-鬼臼亞乙苷；N-(4-羰基亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(4-亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(4-亞氨基-1，7-萘二磺酸)))-β-丙氨酰-3’-阿霉素；N-(4-羰基亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(4-亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(8-亞氨基-1，3，5-萘三磺酸)))-β-丙氨酰-3’-阿霉素；N-(4-羰基亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(4-亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(4-亞氨基-1，7-萘二磺酸)))-β-丙氨酰-21-四氫S；N-(4-羰基亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(4-亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(8-亞氨基-1，3，5-萘三磺酸)))-β-丙氨酰-21-氫化可的松；β-(4-羰基亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(4-亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(4-亞氨基-1，7-萘二磺酸)))-丙?；?2’-紫杉酚；β-(4-羰基亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(4-亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(7-亞氨基-1，3，5-萘三磺酸)))-丙酰基-2’-紫杉酚；β-(4-羰基亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(4-亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(8-亞氨基-1，3，5-萘三磺酸)))-丙酰基-2’-紫杉酚；β-(4-羰基亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(4-亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(4-亞氨基-1，7-萘二磺酸)))-丙酰基-2’-(7-表)紫杉酚；β-(4-羰基亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(4-亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(8-亞氨基-1，3，5-萘三磺酸)))-丙?；?2’-(7-表)紫杉酚；β-(4-羰基亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(4-亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(4-亞氨基-1，7-萘二磺酸)))-丙酰基-2’-taxotere；β-(4-羰基亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(4-亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(8-亞氨基-1，3，5-萘三磺酸)))-丙?；?2’-taxotere；β-(4-羰基亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(4-亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(4-亞氨基-1，7-萘二磺酸)))-丙?；?20-喜樹堿；β-(4-羰基亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(4-亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(8-亞氨基-1，3，5-萘三磺酸)))-丙酰基-20-(9-氨基)喜樹堿；β-(4-羰基亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(4-亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(4-亞氨基-1，7-萘二磺酸)))-丙?；?3’-鬼臼亞乙苷；β-(4-羰基亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(4-亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(8-亞氨基-1，3，5-萘三磺酸)))-丙?；?14-(3’-甲氧基嗎啉代)-阿霉素；β-(4-羰基亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(4-亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(4-亞氨基-1，7-萘二磺酸)))-丙?；?1-苯甲酰基甲醇；β-(4-羰基亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(4-亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(8-亞氨基-1，3，5-萘三磺酸)))-丙?；?21-氫化可的松；N-(4-羰基亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(4-亞氨基-1，7-萘二磺酸))-β-丙氨酰-2’-紫杉酚；N-(4-羰基亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(7-亞氨基-1，3，5-萘三磺酸))-β-丙氨酰-2’-紫杉酚；N-(4-羰基亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(8-亞氨基-1，3，5-萘三磺酸))-β-丙氨酰-2’-紫杉酚；N-(4-羰基亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(8-亞氨基-1，3，5-萘三磺酸))-苯基丙氨酰-亮氨酰-甘氨酰-2’-紫杉酚；3-(4-羰基亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(4-亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(7-亞氨基-1，3-萘二磺酸)))-丙酰基-3’-N-柔紅霉素；N-(4-羰基亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(4-亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(4-亞氨基-1，7-萘二磺酸)))-β-丙氨酰-20-O-喜樹堿；N-(4-羰基亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(4-亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(4-亞氨基-1，7-萘二磺酸)))-苯基丙氨酰-亮氨酰-甘氨酰-20-O-喜樹堿；N-(4-羰基亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(8-亞氨基-1，3，5-萘三磺酸))-苯基丙氨酰-亮氨酰-甘氨酰-O-苯甲酰基甲醇；N-(4-羰基亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(8-亞氨基-1，3，5-萘三磺酸))-苯基丙氨酰-亮氨酰-甘氨酰-β-丙氨酰-O-苯甲?；状?；21-(N-(4-羰基亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(8-亞氨基-1，3，5-萘三磺酸))-苯基丙氨酰-亮氨酰-甘氨酰)-氫化可的松；N-(4-羰基亞氨基，N-甲基，2-吡咯羰基-(8-亞氨基-1，3，5-萘三磺酸))-苯基丙氨酰-亮氨酰-甘氨酰)-O-tallimustine-偕胺肟；1-O-(N-(4-羰基亞氨基，N-甲基-2-吡咯羰基-(7-亞氨基-1，3-萘二磺酸))-苯基丙氨酰-亮氨酰-甘氨酰)-(2S，3R，4E)-1，3-二羥基-2-十四烷酰氨基-4-十八烯；1-O-(N-(4-羰基亞氨基，N-甲基-2-吡咯羰基-(7-亞氨基-1，3-萘二磺酸))-苯基丙氨酰-亮氨酰-甘氨酰)-(2S，3R，4E)-1，3-二羥基-2-乙酰氨基-4-十八烯；1-O-(N-(4-羰基亞氨基，N-甲基-2-吡咯羰基-(7-亞氨基-1，3-萘二磺酸))-苯基丙氨酰-亮氨酰-甘氨酰)-(2S，3R，4E)-1，3-二羥基-2-exanoyl氨基-4-十八烯；1-O-(N-(4-羰基亞氨基，N-甲基-2-吡咯羰基-(7-亞氨基-1，3-萘二磺酸))-苯基丙氨酰-亮氨酰-甘氨酰)-(2S，3R，4E)-1，3-二羥基-2-十八烷酰氨基-4-十八烯；1-O-(N-(4-羰基亞氨基，N-甲基-2-吡咯羰基-(7-亞氨基-1，3-萘二磺酸))-β-丙氨酰)-(2S，3R，4E)-1，3-二羥基-2-十四烷酰氨基-4-十八烯；1-O-(N-(4-羰基亞氨基，N-甲基-2-吡咯羰基-(7-亞氨基-1，3-萘二磺酸))-β-丙氨酰)-(2S，3R，4E)-1，3-二羥基-2-乙酰氨基-4-十八烯；1-O-(N-(4-羰基亞氨基，N-甲基-2-吡咯羰基-(7-亞氨基-1，3-萘二磺酸))-β-丙氨酰)-(2S，3R，4E)-1，3-二羥基-2-exanoyl氨基-4-十八烯；1-O-(N-(4-羰基亞氨基，N-甲基-2-吡咯羰基-(7-亞氨基-1，3-萘二磺酸))-β-丙氨酰)-(2S，3R，4E)-1，3-二羥基-2-十八烷酰氨基-4-十八烯；1-O-(N-(4-羰基亞氨基，N-甲基-2-吡咯羰基-(8-亞氨基-1，3，5-萘三磺酸))-苯基丙氨酰-亮氨酰-甘氨酰)-(2S，3R，4E)-1，3-二羥基-2-十四烷酰氨基-4-十八烯；及1-O-(N-(4-羰基亞氨基，N-甲基-2-吡咯羰基-(8-亞氨基-1，3，5-萘三磺酸))-苯基丙氨酰-亮氨酰-甘氨酰)-(2S，3R，4E)-1，3-二羥基-2-十八烷酰氨基-4-十八烯。
7.一種權(quán)利要求1定義的式(II)化合物或其鹽的制備方法，該方法包括a)將式(III)化合物 其中，R，m和n定義同權(quán)利要求1，與式(IV)化合物反應(yīng)，X-CO-Y-COOH (IV)其中，X定義同權(quán)利要求1，Y是C1-C6亞烷基或C2-C6亞鏈烯基，二價C3-C5環(huán)烷基或亞苯基，得到式(II)化合物，其中A是-Y-CO-；或b)將式(V)化合物或其反應(yīng)性衍生物 其中，R，m和n定義同權(quán)利要求1，Y定義如上，與式(VI)化合物反應(yīng)，X (VI)其中，X定義同權(quán)利要求1，得到式(II)化合物，其中A是-Y-CO-；或c)將式(VII)化合物 其中，R，m和n定義同權(quán)利要求1，Z是離去基團，與式(VIII)化合物反應(yīng)，X-A’H (VIII)其中，X定義同權(quán)利要求1，A’是如權(quán)利要求4定義的A的氨基酸殘基或肽間隔基，得到式(II)化合物，其中A是氨基酸殘基或肽間隔基；或d)將式(IX)化合物， 其中，R，m和n定義同權(quán)利要求1，A’是如權(quán)利要求4定義的A的氨基酸殘基或肽間隔基，與式(VI)化合物反應(yīng)，X (VI)其中，X定義同權(quán)利要求1，得到式(II)化合物，其中A是氨基酸殘基或肽間隔基；而且，如果需要，可將式(II)化合物鹽化；和/或，如果需要，將式(II)化合物從其鹽中游離出來；和/或，如果需要，從它們的混合物中分離出式(II)化合物的異構(gòu)體。
8.一種藥物組合物，含有藥物上可接受的載體和/或稀釋劑，以及作為活性成分的至少一種權(quán)利要求1定義的式(II)化合物或其藥物上可接受的鹽。
9.權(quán)利要求1定義的式(II)化合物或其藥物上可接受的鹽作為抗增殖劑，特別是抗腫瘤和抗血管生成劑，以及消炎劑的用途。
10.一種改善生物活性化合物X系統(tǒng)生物藥效性的方法，該方法包括提供這樣的與下列載體基團結(jié)合的活性化合物X或其藥物上可接受的鹽， 其中R，m，n和A定義同權(quán)利要求1。
11.一種根據(jù)權(quán)利要求10的方法，其中化合物X是選自taxane化合物，偏端霉素化合物，神經(jīng)酰胺化合物，喜樹堿化合物，表鬼臼毒素化合物，蒽環(huán)類化合物，苯甲?；状?，四氫S和氫化可的松的化合物，或它們藥物上可接受的鹽。
全文摘要
本發(fā)明涉及用作抗增殖劑，特別是抗腫瘤和抗血管生成劑，以及消炎劑的式(II)化合物及其藥物上可接受的鹽，其中R是酸性基團；m是整數(shù)1-3；n是0或整數(shù)1-3；A是可酶催化水解的間隔基；X是生物活性化合物。
文檔編號C07D405/14GK1148391SQ96190152
公開日1997年4月23日 申請日期1996年2月8日 優(yōu)先權(quán)日1995年3月1日
發(fā)明者N·蒙蓋利, G·比亞索利, A·羅姆巴狄伯吉亞, M·吉奧姆, E·普森逖, F·安蓋魯西 申請人:法瑪西雅厄普約翰公司