專利名稱：含咪唑的法呢基蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移酶的抑制劑的制作方法
本申請(qǐng)是1994后8月19日提交的序號(hào)為08/292，916的申請(qǐng)的部分繼續(xù)申請(qǐng)，而該申請(qǐng)又是1994年3月31日提交的序號(hào)為08/221，153的申請(qǐng)的部分繼續(xù)申請(qǐng)。上述申請(qǐng)的全部內(nèi)容通過引用結(jié)合于本文中。
本發(fā)明涉及能夠抑制法呢基-蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移酶和Ras蛋白質(zhì)法呢基化從而可被用作抗癌劑的化合物。該化合物除可用來治療癌癥之外，還可用來治療與通過Ras產(chǎn)生作用的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通道有關(guān)的疾病，以及與除Ras之外的含CAAX的，并且也被酶-法呢基蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移酶轉(zhuǎn)譯后修飾的蛋白質(zhì)有關(guān)的疾病。所述化合物也可用作其它異戊烯基轉(zhuǎn)移酶的抑制劑，從而能有效地治療與其它蛋白質(zhì)的異戊烯其修飾有關(guān)的疾病。
哺乳動(dòng)物ras基因家族包括三種基團(tuán)。H-ras，K-ras和N-ras。Ras蛋白質(zhì)是一族結(jié)合和水解GTP、調(diào)節(jié)細(xì)胞生長和分化的蛋白質(zhì)。正常Ras蛋白質(zhì)的過度產(chǎn)生或者抑制其GTP酶性的突變均能導(dǎo)致失控的細(xì)胞分裂。
Ras的轉(zhuǎn)化活性取決于蛋白質(zhì)在血漿膜中的位置。膜結(jié)合通過一系列胞液Ras蛋白質(zhì)的轉(zhuǎn)譯后修飾而發(fā)生。在這一系列轉(zhuǎn)變中第一和必須遵循的步驟是這些蛋白質(zhì)的法呢基化。該反應(yīng)被酶-法呢基蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移酶(FPT)所催化，而且焦磷酸法呢酯(FPP)在該反應(yīng)中作為法呢基給體。RasC-末端含有記為“Cys-Aaa1-Aaa2-Xaa”盒(CAAX盒)的順序圖案，其中Cys是半胱氨酸。Aaa是脂族氨基酸，Xaa是絲氨酸或甲硫氨酸。法呢基化在CAAX盒的半胺氨酸殘基(Cys-186)上發(fā)生，從而通過硫醚聯(lián)結(jié)將異戊烯基接在該蛋白質(zhì)上。
根據(jù)本發(fā)明，式Ⅰ化合物 其對(duì)映體和非對(duì)映體及其藥學(xué)上可接受的鹽、前體藥物和溶劑化物能夠抑制S-法呢基蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移酶，所述酶與Ras致癌基團(tuán)作用有關(guān)。除非另作說明，在式Ⅰ和整個(gè)本說明書中，上述符號(hào)定義如下
J，K和L各自獨(dú)立地是N，NR9，O，S或CR10，前提是J，K和L中僅有一個(gè)可以是O或S，并且J或L中至少有一個(gè)必須是N，NR9，O或S以形成稠合的五元雜環(huán);J與K或K與L之間的鍵也可形成稠合到該稠合的五元雜環(huán)上的苯環(huán)的一條邊;
Q是芳基;
Q′，A1和A2各自獨(dú)立地是H，烷基，取代的烷基，苯基或取代的苯基;
G3是 R11，-C(O)OR11，-C(O)NR11R12，5-四唑基，-C(O)N(R13)OR11，-C(O)NHSO2R14或-CH2OR11;
G4是 它在1，2，3，4或5位連接并且環(huán)上的任意空位可選地被下列基團(tuán)取代鹵素、具有1-20個(gè)碳原子的烷基或取代的烷基、烷氧基、芳基、芳烷基、羥基、烷?；⑼轷Ｑ趸?、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、烷?；被?、巰基、烷硫基、烷硫羰基、烷基磺?；?、亞磺酰氨基、硝基、氰基、羰基、氨基甲?；?、N-羥基氨基甲?；-烷基氨基甲?；-二烷基氨基甲?；?、烷氧羰基、苯基取代的苯基或者這些基團(tuán)的組合;
Y和Z各自獨(dú)立地是-CH2-或-C(O)-;
R1-R14各自獨(dú)立地是H或具有1-20個(gè)碳原子的烷基;
R7、R8和R14也可以是芳基或芳烷基，R3、R9、R11、R12和R13也可以是芳烷基;
m，n是p各自獨(dú)立地是0、1或2;
q是0或1-4的整數(shù);且虛線代表可選的雙鍵。
下面列出的是描述本發(fā)明所用的各種術(shù)語的定義。除非在特定情況下予以限定，這些定義適用于整個(gè)說明中所用的該術(shù)語，不論它是單獨(dú)還是作為大基團(tuán)的一部分使用的。
術(shù)語“烷基”是指1-20個(gè)碳原子、優(yōu)選1-7個(gè)碳原子的直鏈或支鏈的未取代的烴基。語組“低級(jí)烷基”是指1-4個(gè)碳原子的未取代的烷基。
術(shù)語“取代的烷基”是指被例如1-4個(gè)下列取代基取代的烷基諸如鹵素、羥基、烷氧基、烷?；?、烷酰氧基、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、烷?；被?、巰基、烷硫基、烷硫羰基、烷基磺?；?、亞磺酰氨基、硝基、氰基、羰基、氨基甲酰基、取代的氨基甲?；?、烷氧羰基、苯基、取代的苯基、胍基、吲哚基、咪唑基、呋喃基、噻吩基、噻唑基、吡咯烷基、吡啶基、嘧啶基等。
術(shù)語“鹵素”或“鹵”是指氟、氯、溴和碘。
術(shù)語“烷氧基”是烷基-O-。
術(shù)語“烷酸基”是指烷基-C(O)-。
術(shù)語“烷酰基氧基”是指-C(O)-O-。
術(shù)語“烷基氨基”和“二烷基氨基”分別指(烷基)NH-和(烷基)2N-。
術(shù)語“烷酰基氨基”是指烷基-C(O)-NH-。
術(shù)語“烷硫基”是指烷基-S-。
術(shù)語“烷硫羰基”晃指烷基-S(O)-。
術(shù)語“烷基磺?；笔侵竿榛?S(O)2-。
術(shù)語“氨基甲?；笔侵?C(O)NH2。
術(shù)語“烷氧羰基”是指烷基-O-C(O)-。
術(shù)語“芳基”是指環(huán)上碳原子數(shù)為6-12的單環(huán)或雙環(huán)芳香烴基團(tuán)，如苯基，萘基，聯(lián)苯基和二苯基，它們各自可以是被取代的。
術(shù)語“芳烷基”是指通過烷基直接鍵合的芳基如芐基。
術(shù)語“取代的苯基”是指被例如1-4個(gè)下列基團(tuán)取代的苯基如烷基、鹵素、羥基、烷氧基、烷酰基、烷?；趸?、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、烷?；被?、巰基、烷硫基、硝基、氰基、羧基、羧基烷基、氨基甲?；⑼檠豸驶?、烷硫羰基、烷基磺?；喕酋０被?。
詞組“取代的氨基甲?；笔侵副?-2個(gè)選自羥基和烷基的取代基N-取代的氨基甲?；?，并且當(dāng)兩個(gè)取代基都是烷基時(shí)，它們可與相連的氮原子一起形成5-7元飽和環(huán)，所述環(huán)可選地被鹵素、羥基、烷氧基、氧、硝基、氰基、-C(O)H、-C(O)OH等取代。
由式Ⅰ化合物形成的鹽也在本發(fā)明范圍內(nèi)。盡管在例如本發(fā)明化合物的分離和純化中也可使用其它的鹽，但優(yōu)選藥學(xué)上可接受的(即無毒的生理學(xué)上可接受的)鹽。
式Ⅰ化合物可以與堿如鈉、鉀和鋰，與堿土金屬如鈣和鎂，與有機(jī)堿如二環(huán)己基胺、三丁基胺、吡啶和氨基酸如精氨酸、賴氨酸等成鹽。上述鹽的制法可以是例如將化合物Ⅰ中的羰酸等成鹽。上述鹽的制法可以是例如將化合物Ⅰ中的羧酸部分(如果有的話)與希望的離子在鹽可沉淀的介質(zhì)中進(jìn)行交換，或者在水性介質(zhì)中交換，接著蒸發(fā)。其它的鹽可按本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的方法生成。
式Ⅰ化合物可以與眾多的有機(jī)和無機(jī)酸形成鹽。所述鹽包括與氯化氫、溴化氫、甲磺酸、硫酸、乙酸、三氟乙酸、馬來酸、苯磺酸、甲苯磺酸和多種其它酸形成的鹽(例如硝酸鹽、磷酸鹽、硼酸鹽、酒石酸鹽、檸檬酸鹽、琥珀酸鹽、苯甲酸鹽、抗壞血酸鹽，水楊酸鹽等)。所述鹽可通過將化合物Ⅰ與當(dāng)量酸在鹽可沉淀的介質(zhì)中反應(yīng)或者在水性介質(zhì)中反應(yīng)，接著蒸發(fā)。
此外，可生成兩性離子(“內(nèi)鹽”)。
式Ⅰ化合物也可以是前體藥物形式。任何將在體內(nèi)轉(zhuǎn)化以產(chǎn)生生物活性劑(即式Ⅰ化合物)的化合物都是在本發(fā)明的范圍和精神內(nèi)的前體藥物。例如，式Ⅰ化合物可以是具有下式Ⅱ的前體藥物形式 式中R14是低級(jí)烷基，如甲基、乙基;
取代的低級(jí)烷基，如2-(N-嗎啉)乙基等;
低級(jí)芳烷基，如芐基、聯(lián)苯基甲基等;
(酰氧基)烷基，如(新戊酰氧基)甲基、1-(丙酰氧基)-2-甲基-1-丙基等;
(氨基酰氧基)芳酰氧基烷基，如對(duì)甘氨酰氧基苯甲酰氧基甲基等;
(氨基烷氧基)芳酰氧基烷基，如對(duì)-2-[(N-嗎啉)乙氧基]苯甲酰氧基甲基等;
取代的酰胺，如N，N-二(2-羥基乙基)乙酰氨基、4-甲基哌嗪-1-乙?；?-(2-羥基乙基)哌嗪-1-乙?；?或者二氧戊環(huán)甲基，如(5-甲基-2-氧代-1，3-二氧戊環(huán)-4-基)甲基等。
此外，對(duì)于A2是式-(CH2)WOH(其中w是2或3)代表的取代的烷基并且G是-C(O)OH的式Ⅰ′化合物而言，A可以與羧基相連，形成內(nèi)酯環(huán)，該環(huán)可在體內(nèi)打開，給出A2是-(CH2)WOH(w仍然是2或3)的式Ⅰ化合物。
前體藥物的各種形式是本領(lǐng)域熟知的。例如對(duì)于上前述藥物衍生物可參見a)Desiomofprodruas，H.Bundgaard，(Elsevier，1985)和MethodsinEnzymology，Vol.42，p.309-396K.Widder，etal.(AcademicPress，1985);
b)ATextbookofDrugDesignandDevelopment，Krogsgaard-Larsen和H.Bundgaard，Chapter 5，"DesignandApplicationofProdrugs，"H.Bundgaard，p.113-191(1991);
c)H.Bundgaard，AdvancedDrugDeliveryReviews，8，1-38(1992);
d)H.Bundgaard，etal.，JournalofPharmaceuticalSciences，77，285(1988);
e)N.Kakeya，etal.，ChemPharmBull，32，692(1984).
還應(yīng)當(dāng)理解，式Ⅰ化合物的溶劑化物(例如水化物)也在本發(fā)明的范圍內(nèi)。溶劑化的方法在本領(lǐng)域內(nèi)通常是公知的。
就式Ⅰ化合物而言，下列基團(tuán)是優(yōu)選的
D-，L-或DL--CH3，-CH(CH3)2，-CH2CH(CH3)2，-CH(CH3)CH2CH3，-C(CH3)3，-CH2OH，-CH2CH2OH，-CH2- -CH2CH2CH2OH，-CH(OH)CH3， -CH2C(O)OH，-CH2CH2C(O)OH，-CH2C(O)NH2，-CH2CH2C(O)NH2，-CH2CH2OCH3，-CH2CH2CONR15R16，-CH2SH，-CH2CH2SH，-CH2CH2SOCH3，CH2CH2SO2CH3或-CH2CH2SCH3，其中R15和R16各自獨(dú)立地是氫或烷基，或者R15和R16與相連的N原子一起形式5-7元飽和環(huán)，所述環(huán)可選地被鹵素、羥基、烷氧基、氧、硝基、氰基、-C(O)H、-C(O)OH等取代;
G3是-C(O)OH、-C(O)OR″或-C(O)NHSO2R14;
它在1，2，4或5位連接并且環(huán)上的任意空位可選地被具有1-20個(gè)碳原子的烷基或芳烷基取代。
特別優(yōu)選下列基團(tuán)
G2是 G3是-C(O)OH、-C(O)OR″或-C(O)NHSO2R14;
G4是 它在1，2，4或5位連接并且環(huán)上的任意空位可選地被具有1-20個(gè)碳原子的烷基或芳烷基取代;
A1是L--CH3，-CH(CH3)2，-CH2CH(CH3)2，-C(CH3)3， ，-CH(CH3)CH2CH3，-CH2OH或-CH(OH)CH3;
A2是L--CH2CH2SCH3，-CH2CH2OH，-CH2CH2CH2OH，-CH2CH2C(O)NH2，-CH2CH2OCH3，-CH2CH2CONR15R16，-CH2CH2SH，-CH2CH2SOCH3或-CH2CH2SO2CH3;和R1，R2，R3和R4是H.

G2是-NHCH(CH2C6H5)-，G3是-C(O)OH，Y和Z都是-C(O)-，A1和A2各自獨(dú)立地是 D-，L-或D，L--CH3，-CH(CH3)2，-CH2CH(CH3)2，-CH(CH3)CH2CH3，-C(CH3)3，-CH2OH，-CH2CH2OH， -CH2C(O)OH，-CH2CH2C(O)OH，-CH2C(O)NH2，-CH2CH2C(O)NH2，-CH2CH2C(O)NHOH，-CH2SH，-CH2CH2SH，-CH2CH2S(O)2NH2或-CH2CH2SCH3，R1-R6都是H。
n是1并且p是0時(shí)，那么G4最好是被取代的。
式Ⅰ化合物是S-法呢基蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移酶的抑制劑。因而，它們可用來治療各種癌癥，包括(但不限于)-癌，包括膀胱癌、乳腺癌、結(jié)腸癌、腎癌、肝癌、肺癌、卵巢癌、胰腺癌、胃癌、子宮頸癌、甲狀腺癌和皮膚癌;
-淋巴系的生血腫瘤，包括急性淋巴細(xì)胞白血病、B細(xì)胞淋巴瘤和Burketts淋巴瘤;
-骨髓系的生血種瘤、包括急性和慢性骨髓性白病和前髓細(xì)胞白血病;
-間充質(zhì)源的腫瘤，癌、包括纖維肉瘤和橫紋肌肉瘤、-其它腫瘤，包括黑瘤、精原細(xì)胞瘤、tetratocarcinoma、成神經(jīng)細(xì)胞瘤和神膠質(zhì)瘤。
式Ⅰ化合物尤其可用于治療與Ras非常有關(guān)的腫瘤如結(jié)腸、肺和胰腺腫瘤。通過給予含有一種本發(fā)明化合物(或其組合)的組合物，哺乳動(dòng)物宿主的腫瘤的發(fā)展被減緩。
式Ⅰ化合物也可用來治療除可能與通過Ras產(chǎn)生作用的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通道有關(guān)的癌癥之外的疾病，例如神經(jīng)纖維瘤。
式Ⅰ化合物還可用來治療與除Ras(例如核層和轉(zhuǎn)導(dǎo)物)之外的含CAAX的、并且被酶--法呢基蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移酶轉(zhuǎn)譯后修飾的蛋白質(zhì)有關(guān)的疾病。
式Ⅰ化合物也可用作其它異戊烯基轉(zhuǎn)移酶(例如牻牛兒基牻牛兒基轉(zhuǎn)移酶)的抑制劑，從而能有效地治療與其它蛋白質(zhì)(例如rap、rab、rac和rho基團(tuán)產(chǎn)物等)的異戊烯基修飾(例如牻牛兒基牻牛兒基化)有關(guān)的疾病。例如，它們可用作抗肝炎δ病毒(HDV)感染的藥的，最近發(fā)現(xiàn)的HDV的δ抗原的大異體的牻牛兒基牻牛兒基化是產(chǎn)生病毒感染的必要條件一事實(shí)暗示了這一點(diǎn)[J.S.Clenn等人，Science，256，1331(1992)]。
本發(fā)明化合物也可與已知的抗癌劑和細(xì)胞毒劑合并使用。如果要配制成固定的劑量，所述組合物產(chǎn)物使用下述劑量范圍內(nèi)的本發(fā)明化合物和允許劑量范圍內(nèi)的藥用活性劑。當(dāng)組合制劑不適宜時(shí)，式Ⅰ化合物可與已知的抗癌劑或細(xì)胞毒劑順序使用。
本發(fā)明化合物可以用藥用載體和稀釋劑配制，供口服、靜脈或皮下給藥。藥用組合物可按常規(guī)方法用適合于希望的給藥方式的固體或液體載體、稀釋劑和添加劑來配劑。就口服而言，該化合物可以片劑、膠囊劑、顆粒劑、粉劑等形式使用。這些化合物的使用劑量范圍可以是約0.05-50mg/kg/天，最好小于50mg/kg/天，可以單劑或分2至4次給藥。
下式Ⅲ化合物(式中Prot′是胺保護(hù)基，例如叔丁氧羰基(Boc)、芐氧羰基(Cbz)等) 可以與式Ⅳ羧酸被保護(hù)的氨基酸衍生物 偶合，生成下式Ⅴ化合物(式中Prot2是羧酸保護(hù)基團(tuán)，例如烷基、芐基、對(duì)甲氧芐基等) 關(guān)于氨基和羧酸保護(hù)基團(tuán)(以及生成和最終去保護(hù)的方法)的其它實(shí)例，可參見T.W.Greene和P.G.M.Wuts，"ProtectiveGroupsisOrganicSynthesis"，第二版，John，Wilely&Sons，NewYork，1991。
對(duì)于上述偶合，可以使用多種偶合劑，所述偶合包括1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽(EDC)與1-羥基苯并三唑(HOBT)的偶合、二環(huán)己基碳化二亞胺(DCC)與HOBT的偶合、六氟磷酸苯并三唑-1-基氧基三(二甲氨基)鏻(BOP)與或在無HOBT、羰基二咪唑(DCI)、二(2-氧代-3-噁唑烷基)次膦酰氯(BOP氯)、氯甲酸異丙酯(IPCF)等的偶合。
式Ⅳ化合物是本領(lǐng)域公知的?？蓞⒁娎鏡.M.Williams，"SynthesisofOpticallyActiveα-AminoAcids"，PergamonPress，Oxford，1989。
式Ⅲ化合物可用本領(lǐng)域公知的方法制備。例如，參見J.P.
Maffrand，U.S.PatentNo.4，147，787issuedApril3，1979;H.Kawakubo，etal.mJ.Med.Chem.，33，3110(1990);D.G.Harvey，etal.，J.ChemSoc.，153(1941);A.Brossi，etal.，J.Med.Chem.16，418，(1973);M.Cain，etal.，Heterocycles，19，1003(1982);S.Ueki，etal.，U.S.PatentNo.5，126，448issuedJune30，1992;J.W.Skiles，etal.，J.Med.Chem.，29，784(1986);V.Schollkopf，etal.，Angew.Chem.Int.Ed.Engl.，26，143(1987);I.HuberandD.Seebach，HelviticaChimActa，70，1944(1987);J.L.Stanton，etal.，J.Med.Chem.，26，1267(1983);andM.Okada，etal.，JP02，193，971，31July1990.
可以用適當(dāng)?shù)腘-去保護(hù)劑處理式V化合物，得到對(duì)應(yīng)的式Ⅵ游離胺;
(選擇Prot1和Prot2保護(hù)基團(tuán)，使得Prot1可在Prot2的存在下被選擇性地除去)。
使用適當(dāng)?shù)呐己蟿?例如BOP-Cl)，可以使式Ⅵ胺與適宜的式Ⅶ胺被保護(hù)的氨基酸(式中Prot3是胺保護(hù)基團(tuán)) 偶合，生成式Ⅷ化合物。
(式Ⅶ化合物是本領(lǐng)域公知的。參見例如R.M.Williams，′SynthesisofOpticallyActiveα-AninoAcids″，PergamonPress，Oxford，1989)。
式Ⅷ化合物也可以這樣制備使式Ⅸ化合物(式中Prot4是羧酸保護(hù)基)
與上述式Ⅶ胺被保護(hù)的氨基酸偶合，得到式Ⅹ化合物 式Ⅹ化合物的Prot4保護(hù)基團(tuán)可用本領(lǐng)域公知的方法選擇性地除去，得到下式Ⅺ化合物 (選擇Prot3和Prot4保護(hù)基團(tuán)，使得Prot4可在Prot3的存在下被選擇性地除去)。
隨后，將式Ⅺ化合物與式Ⅳ氨基酯偶合，得到化合物Ⅷ。
式Ⅷ化合物可以用本領(lǐng)域公知方法選擇性地N-去保護(hù)，得到式Ⅻ胺
(選擇Prot2和Prot3保護(hù)基團(tuán)，使得Prot3可以Prot2的存在下被選擇性地除去)此外，可將式Ⅵ′(a)、Ⅵ′(b)或Ⅵ′(c)胺 分別與適宜的式Ⅶ氨基被保護(hù)的氨基酸偶合，得到式Ⅷ′(a)、Ⅷ′(b)或Ⅷ′(c)化合物。
(然后可用本領(lǐng)域公知的方法除Prot3去保護(hù)基團(tuán))。
此外，Y和Z是-C(O)-的式Ⅰ化合物可以用本領(lǐng)域熟知的方法通過自動(dòng)固相肽合成來制備。可參見例如a)M.BodanskyandA.Bodansky，"ThePracticeofPeptideSynthesis"，Springer-Verlag，Berlin/Heidelberg/NewYork/Tokyo，1984;and
b)J.M.StewartandJ.D.Young，"SolidPhasePeptideSynthesis"，SpierceChemicalCo.，Rockport，Illinois，1984.
在另一方法中，用本領(lǐng)域公知的方法可以將式Ⅶ氨基酸(式中Prot3是適宜的氨基保護(hù)基團(tuán))轉(zhuǎn)變?yōu)槭舰?N-甲氧基-N-甲基酰胺 按照本領(lǐng)域公知的方法可以將式ⅩⅢ化合物還原成式ⅩⅣ醛(參見例如Fehrentz等人，Synthesis，676(1983))。
或者，式ⅩⅣ化合物可以這樣制備用還原劑如甲硼烷將式Ⅶ化合物還原，接著用例如Swern氧化法鈄將所得醇氧化(參見例如，Luly等人，J.Org.Chem.52，1487(1987));或Stanfield等人J.Org.Chem.46，4797(1981))。還有一種方法是用還原劑如氫化二異丁基鋁還原式Ⅶ化合物的酯類似物，制得式ⅩⅣ化合物。參見例如Rich等人，J.Org.Chem.43，3624(1978)。
可以按本領(lǐng)域公知的方法(例如Borch等人，J.Am.Chem，Soc.93，2897(1971))用式Ⅵ胺將式ⅩⅣN-被保護(hù)的醛還原性胺化，生成式ⅩⅤ化合物 可以用適宜的N-去保護(hù)劑處理式ⅩⅤ化合物，得到相應(yīng)的式ⅩⅥ游離胺 (選擇Prot2和Prot3保護(hù)基團(tuán)，使得可以在Prot2的存在下，選擇性去除Prot3)。
用產(chǎn)生酰胺鍵的標(biāo)準(zhǔn)條件，可以將式Ⅻ或ⅩⅥ化合物與式ⅩⅦ化合物
縮合(咪唑基團(tuán)可選地被本領(lǐng)域公知的試劑保護(hù)(Prot5)。例如可能使用三苯甲基、Boc、Cbz、Bom等)。所得式ⅩⅧ酯 可用堿來去保護(hù)。如果咪唑是被保護(hù)的，則可以用標(biāo)準(zhǔn)方法和試劑(例如，三苯甲基、Boc或Bom的酸化，Cbz的氫化等)去保護(hù)。
或者，用酸和還原劑(例如NaCNBH3)可以將式Ⅻ或ⅩⅥ化合物與式ⅩⅣ化合物 縮合并且如上述那樣去保護(hù)。
類似地，式Ⅷ′(a)、Ⅷ′(b)或Ⅷ′(c)化合物可以象上述那樣N-去保護(hù)和與式ⅩⅦ化合物或ⅩⅨ化合物縮合。
被保護(hù)的咪唑烷醇可用本領(lǐng)域公知的方法制備。參見例如F.Schneider，Z.Physiol.Chem.3，206-210(1961)和C.P.StewartBiochem.Journal，17，130-133(1923)。用本領(lǐng)域公知的方法，可以將這些化合物氧化，得到式ⅩⅦ化合物或ⅩⅨ化合物。而且，像式ⅩⅨ化合物那樣使用的化合物可用下述本領(lǐng)域公知的方法制備 再者，也是像式ⅩⅨ化合物那樣使用的化合物可以如下所述由咪唑基烷酸通過用三乙基硅烷和鈀/炭對(duì)硫酯進(jìn)行還原來制備 式ⅩⅨ、ⅩⅨ′或ⅩⅨ″化合物還可以被進(jìn)一步氧化，得到式ⅩⅦ化合物。
一些在咪唑環(huán)的碳原子上帶有烷基取代基的咪唑鏈烷酸可通過將應(yīng)的腈水解制得，而所述腈可采用本領(lǐng)域已知的方法制得。參見例如J.Med.Chem.，19，923(1976).
本發(fā)明的許多化合物也可通過下面的一種或多種反應(yīng)路線來制備
根據(jù)反應(yīng)路線1(Ⅰ)，將式ⅩⅩ的化合物用諸如叔丁氧羰基酐之類的保護(hù)基團(tuán)保護(hù)。將所得化合物用例如氫氧化鋇(Ba(OH)2)水解以制得式ⅩⅪ的化合物。將式ⅩⅪ的化合物與例如式HN(R3)(CH2) Q化合物偶合，并去保護(hù)得到所需的式ⅩⅫ14位取代的咪唑。
式ⅩⅩ化合物可如下制備
在該反應(yīng)路線1(Ⅰ)a中，使用例如所示的兩步法將酰胺還原為亞甲基胺。合適的偶合劑的一個(gè)實(shí)例是EDC(該兩步還原反應(yīng)路線也可用于通過二級(jí)酰胺的選擇性還原制備式ⅩⅫ化合物 類似地，式ⅩⅫ″化合物和ⅩⅫ″′化合物可用相應(yīng)前體制備)。
或者，式ⅩⅩ化合物可用如下所示的還原胺化反應(yīng)路線由組胺制得 此外，在反應(yīng)路線1中，或ⅩⅪ化合物還可進(jìn)一步被保護(hù)-如果必要的話。

然后可如同上面對(duì)于式ⅩⅪ化合物所述那樣，對(duì)式ⅩⅩ′化合物進(jìn)行處理，得到所需產(chǎn)物，即式ⅩⅫ化合物。
根據(jù)最終所需產(chǎn)物(見通式中G的定義)，式ⅩⅪ化合物也可如下處理
4′-咪唑基類似物也可采用下面反應(yīng)路線1(Ⅲ)所示的“從左往右”合成法制備 Ⅲ此外，，N-n-烷基化的4′-咪唑基類似物可如下制備
Ⅳ氨基取代的4′-咪唑基類似物可如下制備 如上所述，或ⅩⅩ的化合物在堿性條件下用重氮鹽處理，將產(chǎn)物氫化，將到式ⅩⅩ′化合物。
然后，可如上面對(duì)于式ⅩⅩ化合物所述那樣，對(duì)式ⅩⅩ′化合物進(jìn)行處理，得到所需產(chǎn)物，即式ⅩⅫV化合物。
反應(yīng)路線2(2′-咪唑基)式ⅩⅩⅢ2′-咪唑基類似物 可被保護(hù)，然后如同式ⅩⅪ化合物一樣處理得到式ⅩⅩⅣ化合物 可如下制備式ⅩⅩⅢ化合物
在該反應(yīng)路線中，原料中的羥基被取代;所得化合物中的酯如所述被裂解;并除去了-SO2CF3基團(tuán)。
式ⅩⅩⅢ′化合物可如下備
然后可用類似于式ⅩⅪ化合物的方法或類似于式ⅩⅩⅢ化合物的方法處理式ⅩⅩⅢ′化合物，制備式ⅩⅪⅤ′化合物 反應(yīng)路線3(N-咪唑基)
采用類似于反應(yīng)路線1所述的方法，可制備下面的N-咪唑基化合物

式ⅩⅩⅤ化合物可如下制備 n＝3的式ⅩⅩⅧ化合物是可商購的。n＝2的式ⅩⅩⅧ化合物可如下制備 側(cè)鏈保護(hù)基可與具有反應(yīng)活性官能團(tuán)的氨基酸一同用在這些方法中，例如羥基、羧基、氨基、巰基、胍基、咪唑基、吲哚基等。用于氨基酸殘基的具體的保護(hù)基取決于被保護(hù)的側(cè)鏈，而且通常是本領(lǐng)域公知的，側(cè)鏈保護(hù)基的實(shí)例包括對(duì)于羥基、乙?；⒈郊柞；?、芐基、叔丁基等;對(duì)于羧基環(huán)己基、芐基、甲基、乙基、叔丁基等;對(duì)于巰基芐基、4-甲基芐基、4-甲氧基基芐基、乙?；?、乙酰氨基甲基、三苯甲基(即三苯甲游基)等;對(duì)于氨基叔丁氧羰基(Boc)、芐氧羰基(Cbz)、N-[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基](Fmoc)、鄰苯二甲酰基(Pht)，對(duì)甲苯磺?；?Tos)、三氟乙?；?、2-(三甲基甲硅烷基)乙氧羰基(Teco)等;對(duì)于咪唑基2，4-二硝基苯基、芐氧基甲基、Tos、Boc、三苯甲游基等;對(duì)于吲哚基，甲?；?、Cbz、Teco、氨基甲酸2，2，2-三氯乙酯(TROC)等;對(duì)于胍基甲苯磺酰基、硝基、二(1-金剛基氧基羰基)等。
如希望的話，可通過例如在惰性溶劑或溶劑混合物中的一種或多種去保護(hù)劑處理來除去側(cè)錠保護(hù)基團(tuán)，保護(hù)基反合適的方法保護(hù)劑的實(shí)施例可參見M.Bodansky和A.Bodansky的“ThePracticeofPe-ptideSynthesis”，Springer-Verlag，Inc(1984);以及T.W.Greene和P.G.M.Wuts的"ProtectiveGroupsinOrganicSyn-thesis"，第二版，John，Wiley&Sons，NewYork，1991。
下面本發(fā)明將通過下列工作實(shí)施例來進(jìn)一步描述，所術(shù)工作實(shí)施例即為本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方案。除非另外指明，所有溫度均為攝氏度(℃)。這此實(shí)施例并非限制性的。
實(shí)施例1
(R＊)-N-[[1，2，3，4-四氫-2-[N-[2-(1H-咪唑-4-基乙?；?]-L-纈氨酰]-3-異喹啉基)羰基]-L-甲硫氨酰，三氟乙酸鹽A.(R＊)-N-[[2-[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]-(1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]基-L-甲硫氨酸甲酯將(S)-3，4-二氫-2，3(1H)-異喹啉二羧酸2-(1，1-二甲基乙)酯(2.0g，7.21mmol)和L-甲硫氨酸甲酯鹽酸鹽(1，44g，7.21mmol)在5∶15N-甲基吡咯烷酮(NMP)-二氯甲烷中的溶液在4℃攪拌。加入N，N-二異丙基乙基胺(DIEA，1，23ml，7.21mmol)，接著加入N-羥基苯并三唑(HOBT，974mg，7.21mmol)。將混合物攪拌5分鐘，然后加入1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳化二亞胺鹽酸鹽(EDC，1.38g，7.21mmol)。使反應(yīng)混合物回到室溫，攪拌過夜并在二氨甲烷和飽和氯化鈉之間分配。依次用檸檬酸水溶液、碳酸氫鈉水溶液和氯化鈉水溶液洗滌有機(jī)相，用硫酸鎂干燥并真空濃縮，得到2.64g(86%)化合物A。
B.(R＊)-N-[(1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基)羰基]-L-甲硫氨酸甲酯在室溫下，用10ml三氟乙酸(TFA)和0.5ml甲硫醚處理化合的A(2g，6.22mmol)在10ml二氯甲烷中的溶液，并攪拌0.5小時(shí)。真空濃縮反應(yīng)混合物，將其溶于二氯甲烷中，并濃縮。重復(fù)該過程五次，得到透明玻璃狀化合物B(99%)。
C.(R＊)-N-[[2-[N-[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-甲硫氨酸甲酯將化合物B(4.73mmol)溶于二氯甲烷(20ml)中，并冷卻至0℃。加入N-叔丁氧基羰基-L-纈氨酸(2.06g，9.47mmol)、二(2-氧代-3-噁唑烷基)次膦酰氯(Bop氯化物，1.2g，4.7mmol)和DIEA(1.6ml，9.5mmol)。將混合物在0℃攪拌24小時(shí)。再加入Bop氯化物(1.2g，4.7mmol)和DIEA(0.8ml，4.73mmol)并將混合物在0℃再攪拌12小時(shí)。將混合物濃縮，并進(jìn)行色譜(硅膠，用50%乙酸乙酯、50%己烷洗脫)純化。收集合適流份，并濃縮，得到透明油狀化合物C(2.4g，97%)。
D.(R＊)-N-[[2-(L-纈氨酰)-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基)碳基)-L-甲硫氨酸甲酯，鹽酸鹽在4℃，用1小時(shí)時(shí)間將化合物C(100mg，0.192mmol)溶于在二氧六環(huán)中的4N鹽酸中。將該溶液真空濃縮，得到粉紅色油狀物，將其用乙醚(3×20ml)驅(qū)洗(chase)，并與乙醚一同研制得到81mg(91%)化合物D，為粉紅色固體。
E.(R＊)-N-[[1，2，3，4-四氫-2-[N-[2-(1H-咪唑-4-基乙?；?]-L-纈氨酰]-3-異喹啉基)羰基]-L-甲硫氨酰甲酯向咪唑-4-乙酸(34mg，0.21mmol)、HOBT(28.3mg，0.21mmol)和0℃的化合物D(81mg，0.18mmol)在2ml二氯甲烷中的0℃的溶液中加入N-甲基嗎啉(NMM，44ml，0.40mmol)，接著加入EDC(40mg，0.21mmol)。將混合物在室溫下攪拌18小時(shí)，并在水和二氯甲烷之間分配。用水和鹽水洗滌有機(jī)相，并干燥(硫酸鎂)。真空除去溶劑，得到53mg(55%)化合物E。
F.(R＊)-N-[[1，2，3，4，-四氫-2-[N-[2-(1H-咪唑-4-基乙?；鵠-L-纈氨酰]-3-異喹啉基]羰基]-L-甲硫氨酸，三氟乙酸鹽向化合物E(53mg，0.1mmol)在甲醇(2ml)中的冷溶液中加入氫氧化鋰(16.5mg，0.4mmol)在3ml水中的溶液。將混合物在0℃攪拌3小時(shí)，并真空濃縮。將殘余物溶于5ml(80∶20)水/乙腈/0.1TFA中。將溶液進(jìn)行制備HPLC純化，條件為十八烷基硅烷柱(S-10，30×500)，梯度洗脫體系80%水20%乙腈0.1%TFA至55%水45%乙腈0.1%TFA，50分鐘，速度為40ml/分鐘。在這些條件下，約37分鐘后洗脫出化合物F。用分析反相HPLC分析各流份，將純度至少為99%的含產(chǎn)物流份收集并凍干，得到37mg(62%)白色固態(tài)標(biāo)題化合物。
元素分析 C25H33N5O5S-0.5 H2O-0.75 CF3CO2H理論值C，52.25;H，5.58;N，11.50;S，5.26;F，7.02實(shí)測(cè)值C，52.27;H，5.45;N，11.10;S，5.42;F，7.05.
實(shí)施例2 (R＊)-N-[[1，2，3，4-四氫-2-[N-(1H-咪唑-4-基羰基)-L-纈氨酰]-3-異喹啉基]羰基]-L-甲硫氨酸，三氟乙酸鹽(1∶1)A.5-羥甲基-1-三苯甲基咪唑?qū)⑷郊谆?2.2g，7.9mmol)在二甲基甲酰胺(DMF，5ml)中的溶液加入到4-羥甲基咪唑(1g，7.4mmol)和三乙胺(2.5ml，18mmol)在DMF(7.5ml)中的混合物中。將混合物攪拌18小時(shí)，過濾，并用水洗滌固體，真空干燥得到2.33g(93%)化合物A，為白色固體。
B.(1-三苯甲基咪唑-5-基)甲醛將化合物A(2.33，6.85mmol)在二氧六環(huán)(100ml)中的混合物加熱至85℃，得到均勻溶液。除去熱源，一次全部加入固體二氧化錳(Mn O2，5g，57.5mmol)，并攪拌混合物直至溫度開始下降。將混合物在85℃加熱6小時(shí)，濾過Celite 墊，濃縮濾液。將白色固體溶于二氯甲烷(20ml)中，加入己烷并將混合物放置過夜。將固體過濾并干燥，得到到1.68g(80%)化合物B，為白色固體。
C.(1-三苯甲基-咪唑-5-基)羧酸用氫氧化鈉(NaOH，570mg，14.4mmol)處理在55℃水(4ml)中的固體氧化銀(Ag2O，0.68g，3.0mmol)。加入化合物B(1g，3.0mmol)，并將混合物在55℃攪拌15分鐘。將混合物濾過Celite 墊，將濾液用6N鹽酸(HCl)酸化至pH3.5。收集所得到的棕黃色固體，用水漂洗，真空干燥得到110mg(10%)化合物C。
D.(R＊)-N-[[1，2，3，4-四氫-2-[N-(1-三苯甲基-咪唑-5-基羰基)-L-纈氨酰]-3-異喹唑基]羰基]-L-甲硫酸甲酯如實(shí)施例1的化合物E所述，由化合物C和實(shí)施例1的化合物D制得化合物D。
E.(R＊)-N-[[1，2，3，4-四氫-2-[N-(1-三苯甲基-咪唑-5-基羰基)-L-纈氨酰]-3-異喹啉基]-羰基-L-甲硫氨酸向化合物D(110mg，0.145mmol)在甲醇(5ml)中的冷溶液中加入1N氫氧化鈉(5ml)的溶液。將混合物攪拌2小時(shí)，并濃縮除去甲醇，將殘余物在水和二氯甲烷之間分配。將水應(yīng)用6NHCl酸化至pH4，用二氯甲烷萃取(4次)。將合并的有機(jī)相用水和鹽水洗滌，并干燥(硫酸鎂)。除去溶劑得到106mg(98%)粗品化合物E。
F.(R＊)-N-[[1，2，3，4-四氫-2-[N-(1H-咪唑-4-基羰基)-L-纈氨酰]-3-異喹啉基]羰基]-L-甲硫氨酸，三氟乙酸鹽(1∶1)向三乙基硅烷(0.23ml，1.4mmol)和TFA(5ml)在二氯甲烷(5ml)中的脫氣的溶液中加入化合物E。將混合物攪拌4小時(shí)，濃縮并將殘余物溶于25ml(80∶20)水/乙腈/0.1TFA中。將混合物離心并潷析除去不溶物。將溶液進(jìn)行制備HPLC純化，條件為十八烷基硅烷柱(S-10，30×500)，梯度洗脫體系80%水20%乙腈0.1%TFA至55%水45%乙腈0.1%TFA，50分鐘，速度為40ml/分鐘。在這些條件下，約29分鐘后洗脫出化合物F。用分析反相HPLC分析各流份，將純度至少為99%的含產(chǎn)物流份收集并凍干，得到14mg(19.6%)白色固態(tài)標(biāo)題化合物。
4444MS(M+H)+502元素分析 C24H31N5O5S-0.57 H2O-1.25 CF3CO2H理論值C，48.52;H，5.15;N，10.67.
實(shí)測(cè)值C，48.52;H，4.96;N，10.52.
實(shí)施例3
(R＊)-N-[[1，2，3，4-四氫-2-[(2-(1H-咪唑-4-基)乙基-L-纈氨酰]-3-異喹啉基]羰基]-L-甲硫氨酸，三氟乙酸鹽(2∶5)A、S-乙基-(1-乙氧基羰基-咪唑-4-基)-硫代乙酸用20分鐘時(shí)間，向4-咪唑乙酸(2g，12mmol)和三乙胺(5.1ml，37mmol)，在二氯甲烷(40ml)中的0℃的混合物中加入氯甲酸乙酯(2.5ml，26mmol)在二氯甲烷(10ml)中的溶液，以將反應(yīng)溫度維持在0-5℃之間。將混合物攪拌15小時(shí)，并順次加入乙硫醇(2.0ml，28mmol)和4-(N，N-二甲氨基)吡啶(DMAP)(100mg)。將混合的在0℃攪拌30分鐘，升溫至室溫，用水和鹽水洗滌、干燥(硫酸鎂)，并蒸發(fā)。將殘余物吸附在硅膠塞上，并將塞用二氯甲烷洗脫以除去未反應(yīng)的乙硫醇，接著用10%甲醇二氯甲烷洗脫。合并含產(chǎn)物的流份，并蒸發(fā)，得到0.55g油狀化合物A。
B.(1-乙氧基羰基-咪唑-4-基)乙醛向化合物A(0.5g，2.1mmol)和三乙基硅烷(1.64ml，10.3mmol)的脫氣的丙酮(15ml)溶液中加入10%鈀炭(100mg)。將混合物攪拌1小時(shí)，濾過Celite 墊，并濃縮液得到0.37g(98%)化合物B，為油狀物。
C.(R＊)-N-[[1，2，3，4-四氫-2-[N-(2-(1H-咪唑-4-基)乙基]-L-纈氨酰]-3-異喹啉基]羰基]-L-甲硫氨酸向?qū)嵤├?的化合物D(83mg，0.18mmol)以及本實(shí)施例化合物B(100mg)在甲醇(5ml)中的溶液中加入氰基硼氫化鈉(NaBH3CN，23mg，0.36mmol)。10分鐘后，再加入NaBH3CN(23mg，0.36mmol)和乙酸(21μl，0.36mmol)，并將混合物攪拌30分鐘。用1小時(shí)時(shí)間再加入兩批化合物B(150mg)、NaBH3CN(46mg，0.72mmol)和乙酸(41μl，0.72mmol)。將混合物攪拌18小時(shí)，并蒸發(fā)，并將殘余物溶于甲醇(5ml)中，加入NaOH(1N，4ml)，將溶液攪拌1小時(shí)，蒸發(fā)甲醇。用10ml水稀釋水相，加入1mlTFA。將混合物攪拌10分鐘，濃縮，并將殘余物溶于25ml含0.1%TFA的(80∶20)水乙腈中。將混合物離心并潷析除去不溶物。將溶液進(jìn)行制備HPLC純化，條件為十八烷基硅烷柱(S-10，30×500)，梯度洗脫體系80%水20%乙腈0.1%TFA至55%水45%乙腈0.1%TFA，50分鐘，速度為40ml/分鐘。在這些條件下，約32分鐘后洗脫出產(chǎn)物。將含產(chǎn)物最小純度99%的流份收集并凍干，得到22mg白色固態(tài)標(biāo)題化合物(24%)。
元素分析 C25H35N5O4S-0.3 H2O-2.5 CF3CO2H理論值C，45.49;H，4.84;N，8.84.
實(shí)測(cè)值C，45.49;H，4.68;N，8.77.
實(shí)施例4
N-[(2，3-二氯苯基)甲基]-N2-(1H-咪唑-4-基乙酰基)-L-異亮酰胺A.N-[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]-L-異亮酰胺，2，3-二氯苯甲酰胺將半水合Boc-異亮氨酸(0.61g，2.5mmol)、2，3-二氯芐胺鹽酸鹽(0.36g，1.75mmol)、NMM(0.22ml，2.0mmol)、EDC(0.48g，2.5mmol)和HOBT(0.34g，2.5mmol)在10ml9∶1THT∶DMF中的懸浮液攪拌13小時(shí)，加入半飽和的碳酸氫鈉和乙酸乙酯，將混合物分相，再用碳酸氫鈉水溶液洗滌有機(jī)相，并用5%硫酸氫鉀水溶液(兩次)和鹽水(一次)洗滌有機(jī)相，干燥(硫酸鎂)，并蒸發(fā)得到0.90g泡沫狀膠。經(jīng)硅膠閃色譜(25%乙酸乙酯/己烷洗脫)得到0.61g白色固態(tài)化合物A(92%)。
B.L-異亮氨酸，2，3-二氯苯甲酰胺鹽酸鹽向化合物A(0.60g，1.50mmol)中加入2ml在二氧六環(huán)中的4M鹽酸。將溶液攪拌1.5小時(shí)，蒸發(fā)并用乙醚驅(qū)洗，將所得白色固體懸浮在乙醚中，過濾，用乙醚漂洗并干燥得到0.47g(94%)白色固態(tài)化合物B。
C.N-[(2，3-二氯苯基)甲基]-N2-(1H-咪唑-4-基乙?；?-L-異亮酰胺將化合物B(0.12g，0.35mmol)、咪唑-4-乙酸鹽酸鹽(0.12g，0.71mmol)，NMM(0.12ml，1.0mmol)、EDC(0.138g，0.71mmol)和HOBT(0.095g，0.71mmol)在3mlDMF中的混合物攪拌過夜。真空除去DMF，同時(shí)給以溫?zé)?，加入半飽和碳酸氫鈉，并將混合物用10%異丙醇/二氯甲烷萃取兩次。將合并的有機(jī)相用鹽水洗滌，干燥(MgSO4)并蒸發(fā)得到0.18g灰白色膠狀固體，對(duì)其進(jìn)行快速色譜純化(條件為二氧化硅，先用5%甲醇/二氯甲烷/0.5%氫氧化銨洗脫，接著用10%甲醇/二氯甲烷10%氫氧化銨洗脫)。蒸發(fā)含潔凈產(chǎn)物的流份，將殘余物溶于10%異丙醇/二氯甲烷中，干燥(硫酸鎂)并蒸發(fā)，得到0.13g(94%)白色固體，用乙醚漂洗，得到標(biāo)題化合物，mp 167-169℃。
元素分析 C18H22N4O2Cl2-0.20 H2O-0.07C4H10O理論值C，54.07;H，5.73;N，13.80;Cl，17.46.
實(shí)測(cè)值C，54.06;H，5.58;N，13.86;Cl，17.06.
實(shí)施例5 (S)-N-[2-甲基-1-[(1，2，3，4-四氫-2-異喹啉基)羰基]丁基]-1H-咪唑-4-乙酰胺A.2-[N-[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]-L-異亮氨酰]-1，2，3，4-四氫異喹啉如實(shí)施例4的化合物A所述，由半水合Boc異亮氨酸和1，2，3，4-四氫異喹啉制得透明膠狀化合物A。
B.2-(L-異亮氨酰)-1，2，3，4-四氫異喹啉，鹽酸鹽向化合物A(1.60g，4.62mmol)中加入6ml在二氧六環(huán)中的4NHCl。將該溶液攪拌2.25小時(shí)，蒸發(fā)并用乙醚驅(qū)洗兩次，得以1.29g(98%)化合物B，為泡沫狀白色固體。
C.(S)-N-[2-甲基-1-[(1，2，3，4-四氫-2-異喹啉基)羰基]丁基]-1H-咪唑-4-乙酰胺如實(shí)施例4所述，由化合物B和咪唑-4-乙酸鹽酸鹽制得標(biāo)題化合物，mp73-78℃。
元素分析 C20H26N4O2-0.4 H2O理論值C，66.42;H，7.47;N，15.49.
實(shí)測(cè)值C，66.35;H，7.59;N，15.14.
實(shí)施例6 (R＊)-N-2-[[1，2，3，4-四氫-2-[N-(1H-咪唑-2-基甲基)-3-甲基-L-纈氨酰]-3-異喹啉基]羰基]-L-谷氨酰胺，三氟乙酸鹽(1∶2)A、1-三苯甲基-咪唑-2-甲醛向咪唑-2-甲醛(700mg，7.28mmol)和DIEA(3.05ml，17.5mmol)在DMF(8ml)中的溶液中滴加三苯甲基氯(2.23g，8.00mmol)在DMF(25mmol)中的溶液。將混合物攪拌16小時(shí)，傾入水中，并用乙酸乙酯萃取3次。將合并的有機(jī)層用水洗滌兩次，用鹽水洗滌一次，干燥(硫酸鎂)并濃縮，將殘余用色譜(硅膠，50%乙酸乙酯/己烷)純化，得到化合物A，為淡黃色固體(800mg，39%)，(M+H)+339+。
B.3-甲基-N-[(苯基甲氧基)羰基]-L-纈氨酸向L-叔亮氨酸(10.2g，77.6mmol)在0℃的氫氧化鈉水溶液(2N，40ml)中的溶液中用30分鐘時(shí)間交替分五次加入氯甲酸芐酯(12.1ml，85.4mmol)和氫氧化鈉(2N，40ml)。移去冷水浴，1小時(shí)后將混合物調(diào)至pH10。將混合物用乙醚萃取兩次。將水層冷卻至0℃，并用5N鹽酸酸化(pH2)，用乙醚萃取3次。干燥有機(jī)層(硫酸鎂)，并濃縮得到稠油狀化合物B(18.2g，88%)。MS(CI)∶(M+H)＝266+。
C.(S)-1，2，3，4-四氫-2-[3-甲基-N-[(苯基甲氧基)羰基]-L-纈氨酰]-3-異喹啉羧酸甲酯在氬氣氣氛下，向化合物B(5.31g，20mmol)在二氯甲烷(80ml)中的0℃溶液中順次加入DIEA(10.6ml，60mmol)、苯并三唑-1-基氧基三(二甲氨基)鏻六氟酸鹽(BOP，5.08g，20mmol)和(S)-1，2，3，4-四氫異喹啉-3-羧酸甲酯鹽酸鹽(5.68g，25mmol)。將反應(yīng)混合物用2小時(shí)時(shí)間溫?zé)嶂?℃，并攪拌16小時(shí)。將混合物用1N鹽酸、飽和碳酸氫鈉和鹽水洗滌。將有機(jī)層干燥(硫酸鎂)，過濾并濃縮得到油狀物。用硅膠閃色譜柱純化(用20%在己烷中的乙酸乙酯洗脫)得到化合物C(4.0g，45%)。MS(CI)(M+H)+＝439+。
D.(S)-1，2，3，4-四氫-2-[3-甲基-N-[(苯基甲氧基)羰基]-L-纈氨酰]-3-異喹啉羧酸在室溫下，向化合物C(830mg，1.9mmol)在THF/甲醇(4ml/5ml)中的溶液中加入氫氧化鋰(1N，1.9ml)。1小時(shí)后，再加入氫氧化鋰(1N，1.5ml)。2小時(shí)后，加入氫氧化鈉(1N，1.9ml)。又過一小時(shí)后，除去溶劑，將殘余物在1N鹽酸和乙酸乙酯之間分配。干燥(硫酸鎂)有機(jī)層并濃縮得到化合物D(820mg)。
E.(R＊)-N2-[[1，2，3，4-四氫-2-[3-甲基-N-[(苯基甲氧基)羰基]-L-纈氨酰]-3-異喹啉基]羰基]-L-谷氨酰胺，1，1-二甲基乙酯向化合物D(0.9g，2.1mmol)、L-谷氨酰胺叔丁酯鹽酸鹽(0.50g，2.1mmol)和BOP(0，93g，2.1mmol)在3∶1CH3CN∶DMF(26ml)中的溶液中加入DIEA(1.1ml，6.3mmol)。將該溶液攪拌16小時(shí)，用1NHCl(100ml)終止反應(yīng)，并用乙酸乙酯萃取4次，將合并的有機(jī)萃取液用10%LiCl洗滌3次，干燥(硫酸鎂)、過濾并濃縮。將殘余物用閃色譜(1/1己烷/丙酮)純化，得到化合物E(1.1g，87%)為白色固體，mp 60-68℃。MS(M+H+)609。
F.(R＊)-N2-[[1，2，3，4-四氫-2-(3-甲基-L-纈氨酰)-3-異喹啉基]羰基]-L-谷氨酰胺，1，1-二甲基乙酯，鹽酸鹽將氫氧化鈀/炭(10%，91mg)與1NHCl(1.5ml)一起加入到化合物E(0.91g，1.5mmol)在THF(9，1ml)的溶液中。將氫氣袋接到燒瓶上，并將混合物攪拌3小時(shí)。將混合物濾過Celite ，真空濃縮濾液得到化合物F(0.77g，100%)，對(duì)其不經(jīng)純化直接使用。MS:(M+H)+475(游離堿)
G.(R＊)-N-2-[[1，2，3，4-四氫-2-[N-(1-三苯甲基-咪唑-2-基甲基)-3-甲基-L-纈氨酰]-3-異丙喹啉基]羰基]-L-谷氨酰胺，1，1-二甲基乙酯將化合物A(332mg，0.97mmol)的化合物F(250mg，0.489mmol)溶于甲醇(20ml)和冰乙酸(0.4ml)中，用15分鐘時(shí)間分批加入氰基硼氫化鈉(31mg，0.489mmol)。將混合物攪拌16小時(shí)，并冷卻至0℃，緩慢加入飽和碳酸氫鈉(30ml)。將混合物濃縮，并用乙酸乙酯萃取。將乙酸乙酯層用水和鹽水洗滌，干燥(硫酸鎂)，濃縮并經(jīng)色譜(硅膠95%二氯甲烷，5%甲醇)純化。將包含所需化合物的流份收集、濃縮并用制備HPLC純化(條件為YMC S-10 ODS柱，30×500mm，18%-63%甲醇水，含0.1%TFA，40分鐘，速度20ml/分鐘)。將包含所需產(chǎn)物的流份合并，濃縮、用二氯甲烷萃取兩次，干燥(MgSO4)并濃縮，得到化合物G，為透明油狀物(130mg，33%)，(M+H)+797+。
H.(R＊)-N-2-[[1，2，3，4-四氫-2-[N-(1H-咪唑-2-基甲基)-3-甲基-L-纈氨酰]-3-異喹啉基]羰基]-L-谷氨酰胺，三氟乙酸鹽(1∶2)將化合物G(130mg，0.34mmol)溶于二氯甲烷(10ml)、TFA(10ml)和三乙基硅烷(0.5ml)中，并將混合物攪拌1小時(shí)。將混合物濃縮，溶于二氯甲烷(60ml)中，并濃縮。將該過程重復(fù)五次，以定量產(chǎn)率得到白色粘稠固體粗產(chǎn)物。將固體粗品用制備HPLC(YMCS-10ODS柱，30×500mm;含0.1%TFA的18%-63%甲醇水，40分鐘，速度為20ml/分鐘純化將含有所需產(chǎn)物的流份合并并凍干，得到53mg(17%)標(biāo)題化合物，mp-89-90℃。D25°＝-34.0°(c＝0.1， 甲醇)元素分析 C25H34N6O5-3.20 CF3CO2H-2.60 H2O
理論值C，41.43;H，4.69;N，9.23.
實(shí)測(cè)值C，41.43;H，4.25;N，8.92.
實(shí)施例7 (R＊)-N2-[[1，2，3，4-四氫-2-[N-[(1-甲基-1H-咪唑-4-基)乙?；鵠-3-甲基-L-纈氨酰]-3-異喹啉基]羰基]-L-谷氨酰胺，三氟乙酸鹽(1∶2)A.(R＊)-N2-[[1，2，3，4-四氫-2-[N-[(1-甲基-1H-咪唑-4-基)乙?；鵠-3-甲基-L-纈氨酰-3-異喹啉基]羰基]-L-欲氨酰胺，1，1-二甲基乙酯由實(shí)施例6的化合物F和1-甲基咪唑-4-乙酸鹽酸鹽按實(shí)施例1的化合物E所述制備化合物A，(M+H)+596+。
B.(R＊)-N2-[[1，2，3，4-四氯-2-[N-[(1-甲基-1H-咪唑-4-基)乙?；鵠-3-甲基-L--纈氨酰]-3-異喹啉基]羰基]-L-谷氨酰胺，三氟乙酸鹽(1∶2)將TFA(2ml)和化合物A(100mg，0.168mmol)在二氯甲烷(5ml)中的混合物攪拌兩小時(shí)并濃縮。將殘余物溶于25ml(80∶20)水/乙腈/0.1TFA中，將混合物離心，潷析除去不溶物。將溶液進(jìn)行制備HPLC純化，條件為十八烷基硅烷柱(S-10，30×500)，梯度洗脫體系80%水20%乙腈0.1%TFA至55%水45%乙腈0.1%TFA，50分鐘，速度為50ml/分鐘。在這些條件下，約18.2分鐘后洗脫出肽。用分析反相HPLC分析各流份，將富含產(chǎn)物的流份收集并凍干。將殘余物溶于水(5ml)中，加入1NNaOH以將pH調(diào)至10，將溶液攪拌15分鐘，用TFA酸化至pH2.5。將溶液放入C-18sep-pak筒(2g)，用2個(gè)柱體積的乙腈和10個(gè)柱體積的水對(duì)其進(jìn)行預(yù)洗滌。將筒用水、接著用10%乙腈水溶液0.1%TFA(10ml)、接著用30%乙腈水溶液0.1TFA洗脫。將含結(jié)凈產(chǎn)物的流份合并，得到27mg(30%)白色固態(tài)標(biāo)題化合物。
MSM+H＝556，M+Li＝562.
元素分析 C27H36N6O6Li-1.0 CH3OH1.33 H2O理論值C，54.45;H，6.96;N，15.87.
實(shí)測(cè)值C，54.55;H，6.78;N，15.48.
實(shí)施例8 (R＊)-N2-[[1，2，3，4-四氫-2-[N-[3-(1H-咪唑-4-基)-1-氧代丙基]-N-甲基-L-纈氨酰]-3-異喹啉基]羰基]-L-谷氨酰胺，三氟乙酸鹽(1∶2)A.(R＊)-N2-[[1，2，3，4-四氫-2-[N-[3-(1-咪唑-4-基)-1-氧代丙基]-N-甲基-L-纈氨酰]-3-異喹啉基]羰基]-L-谷氨酰胺，1，1-二甲基乙酯按實(shí)施例1的化合物E所述，由實(shí)施例6的化合物F和(N-三苯甲基咪唑-4-基)丙酸制備化合物A。(M+H)+569+。
B.(R＊)-N2-[[1，2，3，4-四氫-2-[N-[3-(1H-咪唑-4-基)-1-氧代丙基]-N-甲基-L-纈氨酰]-3-異喹啉基]羰基]-L-谷氨酰胺，三氟乙酸鹽(1∶2)按實(shí)施例2的化合物F所述，由化合物A制備白色固態(tài)標(biāo)題化合物。
MSM+H＝541.
元素分析 C27H36N6O6-2.13 CF3CO2H0.31 H2O理論值C，47.92;H，4.91;N，10.73.
實(shí)測(cè)值C，47.58;H，5.20;N，11.11.
實(shí)施例9
(R＊)-N-[[1，2，3，4-四氫-2-[N-(1H-咪唑-4-基甲基)-L-纈氨酰]-3-異喹啉基]羰基]-L-甲硫氨酸，三氟乙酸鹽(1∶1)A.(R＊)-N-[[2-[N-[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-甲硫氨酸將在甲醇(20ml)中的實(shí)施例1的化合物C(1.0g，1.91mmol)和5NNaOH(5ml)攪拌3小時(shí)，用5NHCl(4.8ml)中和至pH7，并濃縮。將殘余物溶于乙酸乙酯(100ml)和水(100ml)中，分層，用5NHCl將水層酸化至pH2，并用乙酸乙酸反萃取(5×50ml)。將合并的有機(jī)層用鹽水(100ml)洗滌，干燥(硫酸鎂)并濃縮得到透明油狀物。將該油狀物溶于二氯甲烷(10ml)中，加入TFA(10ml)和三乙基硅烷(0.5ml)，并將混合物攪40分鐘，并濃縮。將殘余物溶于二氯甲烷(50ml)中并濃縮，重復(fù)五次，得到粗產(chǎn)物，為白色粘調(diào)稠固體(800mg)。將該粗制固體的一半(400mg)用制備HPLC純化(條件為YMC-C18柱，2.2×25cm，5μ，120，埃;溶劑A0.1%TFA/水，;溶劑B0.1%TFA/乙腈25%-35%B，40分鐘，流速9ml/分鐘)。合并含所需產(chǎn)物的流份，凍干得到化合物A(230mg，54%)，mp129-130℃。
B.(R＊)-N-[[1，2，3，4-四氫-2-[N-(1-三苯甲基-咪唑-4-基甲基)-L-纈氨酰]-3-異步喹啉基]羰基]-L-甲硫氨酸按實(shí)施例6的化合物G所述，由化合物A和實(shí)施例2的化合物B制備化合物B，產(chǎn)率56%。不經(jīng)純化直接進(jìn)行。
C.(R＊)-N-[[1，2，3，4-四氫-2-[N-(1H-咪唑-4-基甲基)-L-纈氨酰]-3-異喹啉基]羰基]-L-甲硫氨酸，三氟乙酸鹽(1∶1)
按實(shí)施例6的化合物H所述，由化合物B制備白色固態(tài)標(biāo)題化合物。
MSM+H＝488.
元素分析 C24H33N5O4S-1.4CF3CO2H0.21 H2O理論值C，49.84;H，5.21;N，10.84.
實(shí)測(cè)值C，49.52;H，5.22;N，11.10.
實(shí)施例10 (S)-N-[[1，2，3，4-四氫-2-[N-(1H-咪唑-4-基乙酰基)-3-甲基-L-纈氨酰]-3-異喹啉基]羰基]-L-谷氨酰胺，三氟乙酸鹽(1∶2)A.(S)-N-[[1，2，3，4-四氫-2-[N-(1H-咪唑-4-基乙?；?-3-甲基-L-纈氨酰]-3-異喹啉基]羰基]-L-谷氨酰胺，1，1-二甲基乙酯按實(shí)施例1的化合物E所述，由實(shí)施例6的化合物F和4-咪唑乙酸鹽酸鹽制得化合物A，產(chǎn)率78%，(M+H)+587+。
B.(S)-N-[[1，2，3，4-四氫-2-[N-(1H-咪唑-4-基乙?；?-3-甲基-L-纈氨酰]-3-異喹啉基]羰基]-L-谷氨酰胺，三氟乙酸鹽(1∶2)將化合物B(135mg，0.23mmol)和TFA(5ml)在二氯甲烷(5ml)中的溶液攪拌四小時(shí)并濃縮。將殘余物溶于30ml(80∶20∶0.1)水/乙腈/TFA。將混合物離心并潷析除去不溶物。將溶液進(jìn)行制備HPLC純化，條件為十八烷基硅烷柱(S-10，30×500)，梯度洗脫體系80%水20%乙腈0.1%TFA至55%水45%乙腈0.1%TFA，50分鐘，速度為50ml/分鐘。在這些條件下，在約18.31和21.9分鐘時(shí)分別洗脫出兩種物質(zhì)。用分析反相HPLC分析各流份，將含有較短保留時(shí)間峰且純度至少99%的流份收集并凍干，得到11mg(10%)實(shí)施例11的標(biāo)題化合物，為白色固體。類似地，將含較長保留時(shí)間峰且純度至少99%的流份收集并凍干，得到30mg(31%)實(shí)施例10的標(biāo)題化合物，為白色固體。
MSM+H＝527.
元素分析 C26H34N6O6-2.0 CF3CO2H理論值C，47.75;H，4.81;N，11.14.
實(shí)測(cè)值C，48.10;H，4.86;N，11.57.
實(shí)施例11
(S)-N-[[1，2，3，4-四氫-2-[N-(1H-咪唑-4-基乙酰基)-3-甲基-L-纈氨酰]-3-異喹啉基]羰基]-L-谷氨酸，三氟乙酸鹽(1∶2)按實(shí)施例10所述制備實(shí)施例11的標(biāo)題化合物。
MSM+H＝527.
元素分析 C26H33N5O7-1.7 CF3CO2H理論值C，49.02;H，4.99;N，11.67.
實(shí)測(cè)值C，49.25;H，4.69;N，11.24.
實(shí)施例12 N2-[[(S)-2-[N-[2-氨基-2-(1H-咪唑-4-基)乙基]-3-甲基-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-谷氨酰胺，三氟乙酸鹽(1∶3)A.N-甲基-N-甲氧基-[2-氨基-[N-[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]]-2-(N-[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]-咪唑-4-基)]乙酰胺向2-氨基-[N-[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]]-2-(N-[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]-咪唑-4-基)乙酸(330mg，0.97mmol;制備方法見Schneider F.Z.Physiol.Chem.，3，206-210(1961);Janusz，J.M.，Young，P·A.，Blum，R.B.，Riley，C.M.J.Med.Chem.33，1676-1682(1990))、N，O-二甲基羥胺鹽酸鹽(97mg，1mmol)和六氟磷酸溴代-三吡咯烷基鏻(PyBrop)(466mg，1mmol)在二氯甲烷(10ml)中的0℃的溶液中加入DIEA(0.523ml，3mmol)和DMAP(12.2mg，0.1mmol)。將該溶液在環(huán)境溫度下攪拌2小時(shí)并濃縮。將殘余物溶于乙酸乙酯(40ml)中，并將溶液用1N硫酸氫鉀(KHSO4)洗滌(3×30ml)，接著用水(1×30ml)洗滌。將有機(jī)層干燥(硫酸鎂)、過濾并濃縮。將殘余物用色譜純化(閃色譜，二氧化硅7.1×20cm，1∶1乙酸乙酯∶己烷)。將含產(chǎn)物的流份收集并濃縮得到260mg(70%)化合物A，為白色固體，MS(M+H)+385+。
B.N2-[[(S)-2-[N-[2-氨基-[N-[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]]-2-(N-[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]-(咪唑-4-基)乙基]-3-甲基-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-谷氨酰胺，1，1-二甲乙酯向冷卻至0℃的化合物A(0.18g，0.47mmol)在THF(20ml)的溶液中滴加1M氫化鋁鋰在THF中的溶液(0.47ml，0.47mmol)。在氬氣下將溶液攪拌0.5小時(shí)，接著滴加1M硫酸氫鉀至pH4。將混合物在0℃攪拌1小時(shí)，加入乙醚(40ml)和水(40ml)，并分層。將水層用乙醚洗滌，收集有機(jī)層，干燥(MgSO4)并濃縮。立即將高度不穩(wěn)定的殘余物連同3A分子篩(0.5g)、乙酸(0.2ml)和實(shí)施例6的化合物F(300mg，0.58mmol)一起溶于無水甲醇(20ml)中。將溶液攪拌10分鐘，接著用1小時(shí)時(shí)間分批加入NaBH3CN(29mg，0.47mmol)。將溶液攪拌4小時(shí)并濃縮，將殘余物用色譜(閃色譜，二氧化硅(9∶1氯仿∶甲醇)純化。收集含產(chǎn)物的流份，并濃縮，得到90mg(25%)化合物B，為淡黃色油狀物。MS(M+H)+784+。
C.N2-[[(S)-2-[N-[2-氨基-2-(1H-咪唑-4-基)乙基-3-甲基-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-谷氨酰胺，三氟乙酸鹽(1∶3)將在TFA(5ml)中的化合物B(40mg，0.05mmol)和二氯甲烷(5ml)的溶液攪拌2.5小時(shí)并濃縮。將殘余物溶于3ml50/500.1%TFA/甲醇和0.1%TFA/水的混合物中，并進(jìn)行HPLC(YMCC18柱(S-10，ODS30×500mm)純化;溶劑A0.1%TFA/90%水，10%甲醇;溶劑B0.1%TFA/90%甲醇;10%水;10-35%B/A，60分鐘)。將含主要峰的流份收集并凍干得到20mg(45%)標(biāo)題化合物，為松軟的白色固體。
MS(M+H)+528+.
1H-NMR(CDCl3，400 MHz)δ 8.40(1H，m)，7.46(1H，m)，7.22(4H，m)，5.10(1H，m)，4.8-4.3(5H，m)，4.19(1H，m)，3.3-3.0(2H，m)，2.28(1H，m)，1.92(2H，m)，1.80(1H，m)，1.10(9H，d).
實(shí)施例13
(S，S)-N2-[[2-[[2-氨基-3-(1H-咪唑-4-基)-1-氧代丙基]-3-甲基-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]-羰基]-L-谷氨酰胺，-鋰鹽A.(S，S)-N2-[[2-[[2-氨基-[N-[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]]-3-(1H-咪唑-4-基)-1-氧代丙基]-3-甲基-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-谷氨酰胺，1，1-二甲基乙酯按實(shí)施例1的化合物E所述，冊(cè)實(shí)施例6的化合物F和Boc-L-組氨酸制得化合物A，產(chǎn)率71%。(M+H)712。
B.(S，S)-N2-[[2-[[2-氨基-3-(1H-咪唑-4-基)-1-氧代丙基]-3-甲基-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]-羰基]-L-谷氨酰胺，-鋰鹽將化合物A(100mg，140mmol)和TFA(1ml)在二氯甲烷(10ml)中的混合物攪拌兩小時(shí)并濃縮。將殘余用在5ml二氯甲烷中的TFA(1m)再處理30分鐘并蒸發(fā)。將殘余物溶于25ml(80∶20∶0.1)的水/乙腈TFA中。將混合物離心并潷析除去不溶性材料。將溶液進(jìn)行制備HPLC純化，條件為十八烷基硅烷柱(S-10;30×500)，用85%水15%乙腈0.1%TFA至50%水50%乙腈0.1TFA梯度體系，50分鐘，流速為50ml/分鐘。在這些條件下，用約22分鐘洗脫出產(chǎn)物。用分析反相HPLC分析這些流份，將化合物的最小純度90%的流份收集并凍干。將殘余物溶于25ml水中，用1N氫氧化鋰(LiOH)將pH調(diào)至7.5。將溶液進(jìn)行HP-20柱(25×200mm)處理，HP-20柱需預(yù)先用水洗滌。將該柱用水(200ml)洗脫。將聞物用100%水至50%乙腈水溶液的梯度體系用2小時(shí)以2ml/分鐘的流速洗脫。將潔凈的產(chǎn)物合并并凍干，得到14.8mg(19%)標(biāo)題化物，為白色固體。
MSM+H＝556.
元素分析 C27H36N7O6Li-1.0 CH3OH1.33 H2O理論值C，54.45;H，6.96;N，15.87.
實(shí)測(cè)值C，54.55;H，6.78;N，15.48.
實(shí)施例14 (S)-N-[[1，2，3，4-四氫-2-[N-[2-(1H-咪唑-4-基)丙基]-3-甲基-L-纈氨酰]-3-異喹啉基]羰基]-L-谷氨酰胺，-鋰鹽A.3-(N-三苯甲基咪唑-4-基)硫代丙酸乙酯將EDC(0.52g，2.7mmol)加入到(N-三苯甲基咪唑-4-基)丙酸(0.8g，2.09mmol)、乙硫酸(0.42ml，5.65mmol)和DMAP(50mg)在二氯甲烷(10ml)中的0℃的均勻溶液中。將混合物在室溫?cái)嚢?小時(shí)。將該均勻溶液用5%KHSO4洗滌兩次，并用飽和碳酸氫鈉(NaHCO3)和鹽水洗滌，用MgSO4干燥。將干燥劑過濾，將濾液蒸發(fā)得到0.85g(95%)化合物A。MS(M+Na)＝449+。
B.3-(N-三苯甲基咪唑-4-基)丙醛向化合物A(0.8g，1.88mmol)和三乙基硅烷(10ml，6.33mmol)在丙酮(5ml)中的脫氣溶液中加入10%鈀/炭(100mg)。將混合物攪拌30分鐘，再加入三乙基硅烷(0.25ml，1.58mmol)和10%鈀/炭(100mg)，繼續(xù)攪拌1小時(shí)。將混合物濾過Celite 墊，將該墊用丙酮漂洗并將合并的濾液蒸發(fā)，得到0.7g(100%)化合物B粗品。
MS(M+Na)+＝389。
C.(S)-N-[[1，2，3，4-四氫-2-[N-2-(1-三苯甲基-咪唑-4-基)丙基]-3-甲基-L-纈氨酰]-3-異喹啉基]羰基]-L-谷氨酰胺，1，1-二甲基乙酯按實(shí)施例6的化合物G所述，由化合物B和實(shí)施例6的化合物F制備化合物C，產(chǎn)率100%。不需純化，直接進(jìn)行反應(yīng)。MS(M+H)＝825。
D.(S)-N-[[1，2，3，4-四氫-2-[N-[2-(1H-咪唑-4-基)丙基]-3-甲基-L-纈氨酰]-3-異喹啉基]羰基]-L-谷氨酰胺，-鋰鹽按實(shí)施例2的化合物F所述，由化合物C制備標(biāo)題化合物。在經(jīng)制備HPLC純化后，將純化的材料溶于25ml水中，并用1NLiOH將pH調(diào)至7.5。將溶液進(jìn)行HP-20柱(25×200mm)處理，HP-20柱需預(yù)先用水洗滌。將該柱用水(200ml)洗脫。將聞物用100%水至50%乙腈水溶液的弱梯度體系用2小時(shí)以2ml/分鐘的流速洗脫。將潔凈的產(chǎn)物合并并凍干，得到53.3mg(34%)標(biāo)題化物，為白色固體。
MSM+H＝526.
元素分析 C27H37N6O5Li-3.43 H2O理論值C，54.56;H，7.43;N，14.13.
實(shí)測(cè)值C，54.56;H，7.32;N，13.79.
實(shí)施例15
(S)-N-[[1，2，3，4-四氫-2-[N-[2-(1H-咪唑-4-基)乙基]-3-甲基-L-纈氨酰-3-異喹啉基]羰基]-L-谷氨酰胺，-鋰鹽A.(咪唑-4-基)-硫代乙酸乙酯向4-咪唑乙酸鹽酸鹽(0.5g，3.08mmol)在二氯甲烷(10ml)中的0℃的均勻溶液中加入DIEA(0.50ml，3.08mmol)，接著加入乙硫醇(0.56ml，7.68mmol)和EDC(0.65g，3.40mmol)。1小時(shí)后加入DMF(1ml)以提高酸的溶解性。將混合物在室溫?cái)嚢?8小時(shí)，并在飽和NaHCO3和二氯甲烷之間分配。用水和鹽水洗滌有機(jī)相，并用MgSO4干燥。將干燥劑過濾，蒸發(fā)濾液，得到0.52g(100%)化合物A。MS(M+H)+＝171+。
B.(N-三苯甲基咪唑-4-基)硫代乙酸乙酯按實(shí)施例2的化合物A所述，由三苯甲基氯和化合物A制備化合物B。經(jīng)用(2∶1)己烷/乙酸乙酯洗脫的硅膠閃色譜處理得到產(chǎn)率54%的化合物B。MS(M+H)+＝413+。
C.(N-三苯甲基咪唑-4-基)乙醛按實(shí)施例14的化合物B所述，由化合物B制備化合物C。
D.(S)-N-[[1，2，3，4-四氫-2-[N-[2-(1-三苯甲基-咪唑-4-基)乙基]-3-甲基-L-纈氨酰-3-異喹啉基]羰基]-L-谷氨酰胺，1，1-二甲基乙酯按實(shí)施例6的化合物G所述，由化合物C和實(shí)施例6的化合物F的制備化合物D，用二氯甲烷作洗脫劑。不經(jīng)純化直接進(jìn)行。MS(M+H)＝118。
E.(S)-N-[[1，2，3，4-四氫-2-[N-[2-(1H-咪唑-4-基)乙基]-3-甲基-L-纈氨酰]-3-異喹啉基]羰基]-L-谷氨酰胺，-鋰鹽按實(shí)施例14的化合物D所述，由化合物D制得白色固態(tài)標(biāo)題化合物。(由化合物C計(jì)算，產(chǎn)率21%)。
MSM+H＝513.
元素分析 C26H35N6O5Li-0.5 CH3OH;1.48 H2O理論值C，56.70;H，7.17;N，14.97.
實(shí)測(cè)值C，57.00;H，6.97;N，14.57.
實(shí)施例16 (S)-2，3，4-四氫-2-[2-[[2-(1H-咪唑-4-基)乙基]氨基]-3-甲基-1-氧代丁基]異喹啉，1∶1鹽酸/三氟乙酸鹽A.((咪唑-4-基)-1-氧化乙基)-L-纈氨酸苯基甲酯在氬氣氛中，將EDC(1.73g，9mmol)加入到纈氨酸芐酯鹽酸鹽(2.0g，8.2mmol)、咪唑-4-乙酸鹽酯鹽(1，46g，9mmol)、HOBT(1.22g，9mmol)和NMM(3ml，27mmol)在10ml無水DMF中的0℃的溶液中。將該漿液冷卻攪拌0.5小時(shí)，并在室溫?cái)嚢?小時(shí)。將乳狀反應(yīng)液蒸發(fā)至干燥(30℃、高真空)，并將殘余物用飽和NaHCO3稀釋，用乙酸乙酯萃取(三次)。將合并的萃取液用鹽水洗滌(兩次)并干燥(硫酸鎂)，除去溶劑得到3.6g透明橙色粘稠油狀物。經(jīng)閃色譜(二氯甲烷)甲醇?xì)溲趸@(9550.5)處理，得到2.0g(78%)化合物A，為粘性泡沫狀物。
B.((咪唑-4-基)-1-硫代乙基)-L-纈氨酸苯甲酯將化合物A(0.8g，2.5mmol)和Lawesson試劑(1.0g，2.5mmol)在30ml無水甲苯中的懸浮液在90℃加熱1小時(shí)。在加熱過程中得到澄清黃色溶液。冷卻至室溫分離出粘稠油狀物。將混合物不經(jīng)處理直接進(jìn)行閃色譜(2.5×30cm硅膠柱)純化。(直接將甲苯溶液潷析到柱上，將沉淀溶于二氯甲烷中，也將該溶液加到柱中)。用三氯甲烷甲醇?xì)溲趸@(9550.5)洗脫，得到0.75g(90%)化合物B，為透明粘調(diào)油狀物。
C.((咪唑-4-基)乙基)-L-纈氨酸苯甲酯向在超尺寸燒瓶中的-40℃氬氣氣氛下的化合物B(0.75g，2.27mmol)和NiCl2·6H2O(1.08g，4.54mmol)在15ml甲醇及15mlTHF中的溶液中分批加入硼氫化鈉(NaBH)圓體(515mg，13.62mmol)加入硼氫化的立即得到黑色沉淀，伴有劇烈的氫氣逸出。硼氫化物的每次加入都是在先前加入硼氫化物引起的反應(yīng)基本停止后進(jìn)行的。加完后，連續(xù)攪拌2小時(shí)。在此期間將反應(yīng)體系升溫至約0℃。然后向暗色漿液中加入九水合硫化鈉(Na2S·9H2O)(1.09g，4.45mmol)。再繼續(xù)攪拌0.5小時(shí)，在濾過Celite 除去固體后，再加甲醇將黑色濾餅充分洗滌。將澄清黃色濾波蒸發(fā)至干燥，用二氯甲烷將半固態(tài)殘余物萃取完畢。將合并的萃取液蒸發(fā)至干燥得到約0.8g油狀物。閃色譜(2.5×30cm，硅膠，5%甲醇/三氯甲烷)得到513mg(75%)化合物C，為透明粘調(diào)油狀物。
D.N-[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]-N-[1-[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]-咪唑-4-基-乙基]-L-纈氨酸苯甲酯在氬氣氣氛下，將化合物C(4.0g，13.3mmol)和叔丁氧羰基(BOC)酐(8.7g，40mmol)在100mml二氯甲烷中的溶液在室溫下攪拌2天，然后再加入2gBOC酐。再繼續(xù)攪的拌一天。將混合物體積減至約50ml，將剩余的溶液進(jìn)行閃色譜(5×30cm，硅膠，30%乙酸乙酯-己烷)純化，得到4.2g(63%)透明粘調(diào)油狀化合物D。
E.N-[(1，1-二甲在乙氧基)羰基]-N-[咪唑-4-基-乙基]-L-纈氨酸在氬氣氣氛下，將化合物D(2.0g，4mmol)和八水合氫氧化鋇(Ba(OH)2·8H2O)(3.15g，10mmol)在15ml水和15ml甲醇中的溶液在50℃加熱1小時(shí)，比間形成白色沉淀。冷卻到室溫后，減壓除去甲醇，向剩余的白色漿液中加入960mg(10mmol)碳酸銨((NH4)2CO3)固體。攪拌0.5小時(shí)后，過濾除去固體，再加入水將濾餅充分洗滌。將透明的無色濾波用乙醚洗滌一次，并蒸發(fā)至干燥，得到白色固體。將該材料懸浮于水中，再將懸浮液蒸發(fā)至干燥，得到1.1g(88%)精細(xì)白色粉末狀化合物E。
F.(S)-，2，3，4-四氫-2-[[N-[(1，1-二甲基乙氧基)羰基][2-(1H-咪唑-4-基)乙基]氨基]-3-甲基-1-氧代丁基異喹啉將1-羥基-7-偶氮-苯并三唑(HOAT)(0.066g，0.48mmol)和EDC(0.093g，0.48mmol)加入到化合物E(0.10g，0.32mmol)在DMF(1.5ml)中的溶液中，并將混合物攪拌30分鐘。加入1，2，3，4-四氫異喹啉(0.121ml，0.97mmol)和DIEA(0.101ml，0.64mmol)，并將混合物攪拌16小時(shí)。將反應(yīng)用10%氯化鋰(LiCl)(30ml)和飽和NaHCO3(10ml)終止，并將溶液用乙酸乙酯(2×30ml)萃取。將合并的有機(jī)萃取液用10%LiCl(2×30ml)洗滌，干燥(MgSO4)過濾并真空濃縮。將殘余物用閃色譜化純化(用19/1氯仿/甲醇洗脫)得到化合物F(0.094g，67%)為泡沫狀物。MS(M-H)-425。
G.(S)-1，2，3，4-四氫-2-[2-[[2-(1H-咪唑-4-基)乙基]氨基]-3-甲基-1-氧代丁基]異喹啉，1∶1鹽酸/三氟乙酸鹽將TFA(2.0ml，26mmol)加入到化合物F(0.090g，0.21mmol)在二氯甲烷(2.0ml)中的溶液中，并將反應(yīng)混合物攪拌1小時(shí)，真空濃縮。將殘余物溶于水(10ml)中，微孔過濾并凍干，得到標(biāo)題化合物(0.012g，100%)，當(dāng)玻璃狀固體。
MS(M+H)+327.
元素分析 C19H26N4O-1.0 HCl-2.11 H2O-1.0 CF3CO2H理論值C，48.99;H，6.31;N，10.88.
實(shí)測(cè)值C，48.99;H，5.90;N，10.81.
實(shí)施例17
(S)-3-[[[(2，3-二氯苯基)甲基][2-[[2-(1H-咪唑-4-基)乙基)氨基]-3-甲基-1-氧代丁基]氨基]甲基]苯甲酸二鹽酸鹽A.N-[(2，3-二氯苯基)甲基]-N-((3-甲基羰基)苯甲基)胺鹽酸鹽將乙酸(0.57ml，10mmol)加入到3-羧基苯甲醛(1.0g，6.7mmol)和2，3-二氯芐胺(1.3ml，10mmol)在二氯甲烷(33ml)中的溶液中。將混合物攪拌1小時(shí)，加入三乙酰氧基硼氫化鈉(2.1g，10mmol)，并將溶液攪拌16小時(shí)，真空濃縮，將殘余物溶于甲醇(50ml)中，并將溶液冷卻至0℃，向混合物中鼓泡通入無水HCl。將溶液升溫至室溫，加熱回流6小時(shí)，并真空濃縮，將殘余物溶于10%NaHCO3(50ml)中，將水溶液用乙酸乙酯(3×100ml)萃取。將合并的有機(jī)萃取液干燥(MgSO4)，過濾并真空濃縮。將殘余物溶于乙醚(20ml)中，用在二氧六環(huán)(5ml)中的4M HCl處理，并將固體過濾。將固體材料用乙醚(3×10ml)洗滌并真空干燥，得到化合物A(1.95g，8.1%)，為白色固體。MS(M+H)+324。
B.(S)-3-[[(2，3-二氯苯基)甲基][2-[N-(1，1-二甲基乙氧基)羰基][2-(1-三苯甲基-咪唑-4-基)乙基]氨基)-3-甲基-1-氧代丁基]氨基]甲基]苯甲酸甲酯將DIEA(0.32ml，1.8mmol)加入到化合物A(0.33g，0.90mmol)及實(shí)施例30的化合物A(0.25g，0.45mmol)在二氯甲烷(2.3ml)中的溶液中。將溶液冷卻至0℃，加入DMAP(0.083g，0.68mmol)和PyBrop(0.32g，0.68mmol)。將混合物升溫至室溫，攪拌72小時(shí)，用1NHCl(50ml)終止反應(yīng)，并用乙酸乙酯(3×50ml)萃取。將合并的有機(jī)萃取液用10%NaHCO3(1×50ml)洗滌，干燥(MgSO4)，過濾并真空濃縮得到化合物B(0.78g，100%)為粘稠固體。MS(M+H)+859。
C.(S)-3-[[[(2，3-二氯苯基)甲基][2-[N-[(1，1-二甲基乙氧基)羰基][2-(1-三苯甲基-咪唑-4-基)乙基]氨基)-3-甲基-1-氧代丁基]氨基]甲基]苯甲酸將氫氧化鈉(1N，10ml，10mmol)加入到化合物B(0.78g，0.90mmol)在甲醇(30ml)中的溶液中。將混合物攪拌16小時(shí)，并真空濃縮，并將殘余物溶于1NHCl(50ml)中。將溶液用二氧化甲烷(3×50ml)萃取，并將合并的有機(jī)萃取液干燥(MgSO4)，過濾并真空濃縮，得到化合物C(0.76g，100%)，為粘稠固體。MS(M+H)+845。
D.(S)-3-[[[(2，3-二氯苯基)甲基][2-[[2-(1H-咪唑-4-基)乙基)氨基]-3-甲基-1-氧代丁基]氨基]甲基]苯甲酸二鹽酸鹽向化合物C(0.764g，0.904mmol)在二氯甲烷(7ml)中的溶液中加入三乙基硅烷(2.2ml，13.6mmol)，接著加入TFA(10ml，130mmol)。將混合物攪拌16小時(shí)，并真空濃縮，將殘余物與己烷(3×10ml)一同研制，棄掉己烷層。將殘余物用制備HPLC(YMC S10 ODS 30×500mm，含0.1%TFA的10-90%甲醇水溶液，60分鐘梯度洗脫，20ml/分鐘)純化。真空下濃縮合適的流份。將殘余物溶于甲醇(10ml)中，加入1NHCl(2ml)。將混合物攪拌5分鐘，并真空濃縮。將后面的過程復(fù)度兩次，將殘余物溶于水(10ml)中，微孔過濾并凍干得到標(biāo)題化合物(0.070g，13%)。MS(M+H)+503。
實(shí)施例18
N-[(2，3-二氯苯基)甲基)-N-[1H-咪唑-4-基)乙基-L-纈氨酰胺鹽酸鹽將實(shí)施例16的化合物E(15.6mg，0.05mmol)、三乙胺(8μl，0.055mmol)、2，3-二氯芐胺(200μl，0.25M，在二氯甲烷中的溶液，0.055mmol)和BOP(220μl，0.25M，在二氯甲烷中的溶液，0.055mmol)的懸浮液在25℃攪拌18小時(shí)。向混合物中加入TFA(1ml)，并再繼續(xù)攪拌2小時(shí)。將混合物真空濃縮，將殘余物與其它4個(gè)類似反應(yīng)的材料合并，將合并的材料用制備HPLC(YMCS-10ODS柱，30×500mm，用50ml/分鐘線性梯度，10%-90%甲醇水溶液，含0.1%TFA，用30分鐘時(shí)間純化。將第二(或第四)主要峰的流份合并并濃縮。再采用同述方法將殘余物純化。將含主要峰的流份合并并濃縮。將殘余物凍干得到標(biāo)題化合物。當(dāng)白色固體(70mg，75%)。
MS(M+H)+369.
元素分析 C17H22N4OCl2-1.00 H2O-2.06 HCl理論值C，44.16;H，5.68;N，12.12;F，31.13.
實(shí)測(cè)值C，44.53;H，5.94;N，11.41;F，31.24.
實(shí)施例19
N-[(2，3-二氯苯基)甲基]-N2-(1H-咪唑-2-基乙?；?-L-纈氨酰胺，三氟乙酸鹽A.2-羥乙基-N-三苯甲基咪唑向N-三苯甲基咪唑(15.5g，50mmol)在THF中的0℃的溶液中用30分鐘時(shí)間滴加常規(guī)丁基鋰(nBuli)(34.4ml，55mmol)。將混合物攪拌1小時(shí)，接著用30分鐘時(shí)間溫和加熱至30℃，將溶液液冷卻至0℃，并用套管向混合物中加入環(huán)氧乙烷(24.4ml，50mmol)。將混合物在0℃攪拌2小時(shí)，并用16小時(shí)逐漸溫?zé)嶂镰h(huán)增溫度。將溶液濃縮，并將殘余物用色譜(閃色譜，19∶1，氯仿∶甲醇)純化，得到14.5g，(82%)化合物A，為白色固體，MS(M+Na)+337+。
B.N2-[(三氯甲磺?；?]-N2-[2-(1-三苯甲基-咪唑-2-基)乙基]-L-纈氨酸芐酯在氮?dú)庀拢瑢⒒衔顰(880mg，2.5mmol)、N-三氟甲磺?；?L-纈氨酸芐酯(842g，2.5mmol)和三苯膦(655mg，2.5mmol)的溶液中滴加溶于THF(2ml)中的偶氮二羧酸二異丙酯(0.49ml，2.5mmol)。將溶液攪拌16小時(shí)并濃縮，并將殘余物用色譜(閃色譜，1∶1;乙酸乙酯∶己烷)純化得1.4g(83%)化合物B，為白色結(jié)晶固體。(M+H)+676+。
C.N2-[(三氟甲磺酰基)]-N-[2-(1-三苯甲基-咪唑-2-基)乙基]-L-纈氨酸在大氣壓力下，將溶于甲醇(30ml)和THF(40ml)中的化合物B(3g，4.4mmol)的溶液在鈀/炭(10%，0.3g)上氫化。2.5小時(shí)后，將溶液濾過Celite ，將濾波濃縮得到2.6g(100%)化合物C，為白色結(jié)晶固體。(M+H)+586+。
D.[(咪唑-2-基)乙基]-L-纈氨酸將新鮮蒸餾的氨(25ml)加入到化合物C(2.5g，4.3mmol)和叔丁醇(25ml)在THF(25ml)中的-70℃的溶液中。加入新切下的鈉塊直至藍(lán)色持續(xù)40分鐘。加入氯化銨至藍(lán)色消散。將溶液濃縮至干燥，并將殘余物溶于15ml水中，對(duì)其進(jìn)行陽離子交換柱分離，方法如下將10當(dāng)量的樹脂用0.1NHCl(100ml)洗滌，接著用水(100ml)洗滌;將樣品上柱，并將柱用水(200ml)洗滌;將柱用300ml 1M氫氧化銨(NH4OH)洗滌，并收集各流份。收集合適流份并用氮?dú)夤呐萃ㄟ^以除去溶解的氨。將溶液濃縮得到化合物D 833mg(85%)，為灰白色粉末。(M+H)+212+。
E.N-[(2，3-二氯苯基)甲基]-N-(1H-咪唑-2-基乙?；?-L-纈氨酰胺，三氟乙酸鹽在氮?dú)庀?，將化合物D(100mg，0.44mmol)、2，3-二氯芐胺(77mg，0.44mmol)、BOP(190mg，0.44mmol)和DIEA(0.77ml，0.44mmol)在DMF(3ml)和DMSO(0.1ml)中的溶液攪拌3小時(shí)。將混合物濃縮，并將殘余溶于50/500.1%TFA/甲醇和0.1%TFA/水的混合物中。將其用YMCC18柱(S-10，ODS30×500mm)分離，并在下列條件下用HPLC純化溶劑A;0.1%TFA/90%水+10%甲醇，溶劑B0.1%TFA/90%甲醇+10%水;10-35%B/A，60分鐘。將含產(chǎn)物的流份收集并凍開，得到標(biāo)題化合物，為白色固體。
MS(M+H)+369.
元素分析 C18H24N4OCl2-0.98 H2O-2.19 CF3CO2H理論值C，40.34;H，4.14;N，8.80;F，19.61.
實(shí)測(cè)值C，40.34;H，3.85;N，8.55;F，19.59.
實(shí)施例20
[S-(R＊，R＊)]-1，2，3，4-四氫-2-[N-(1H-咪唑-4-基乙?；?-L-纈氨酰]-N-[3-(甲磺?；?-1-[(苯基甲氧基)甲基]丙基]-3-異喹啉甲酰胺，三氟乙酸鹽A.[S-[2-[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]-4-甲磺酰基-O-苯甲基]-丁-1-醇在25℃，將[S-[2-[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]-4-甲磺酰基]-丁-1-醇(212mg，0.79mmol)、氫化鈉(40mg，60%分散于油中，1.0mmol)和芐基溴(0.12ml，1.0mmol)在DMF(2ml)中的混合物攪拌18小時(shí)，將混合物用二氯甲烷稀釋，用飽和碳酸氫鈉水溶液洗洗，用MgSO4干燥并濃縮。將殘余物用硅膠(60g)進(jìn)行閃色譜純化，用2∶1己烷∶乙酸乙酯洗脫，得到化合物A(165mg，58%)B.[S-[2-氨基]-4-甲磺?；?0-苯甲基]-丁-1-醇，三氟乙酸鹽將化合物A(165mg，0.46mmol)、二氯甲烷(1ml)和TFA(2ml)的混合物攪拌6小時(shí)，并真空濃縮，得到化合物B(125mg，90%)。
C.[S-(R＊，R＊)]-1，2，3，4-四氫-2-[N-L-纈氨酰]-3-異喹啉羧酸苯甲酯，鹽酸鹽按實(shí)施例1的化合物C和D的所述，由四氫異喹啉-3-羧酸苯甲酯和第二步中的BOC-L-纈氨酸制備化合物C。
D.[S-(R＊，R＊)]-1，2，3，4-四氫-2-[N-(1H-咪唑-4-基乙?；?-L-纈氨酰]-3-異喹啉羧酸苯甲酯向0℃氮?dú)庀碌倪溥蛞宜岬拟c鹽(2.26g，12.3mmol)在DMF(15ml)中的懸浮液中加入BOP(5.42g，12.3mmol)。攪拌30分鐘后，加入化合物C(4.12g，10.2mmol)，接著加入NMM)(1.12ml，10-2mmol)。5小時(shí)后，將混合物真空濃縮。將殘余物溶于乙酸乙酯(150ml)中，并將溶液用10%碳酸氫鈉(2×70ml)和10%LiCl(70ml)洗滌。用乙酸乙酯(3×100ml)萃取LiCl水層。合并有機(jī)層，用硫酸鈉干燥，過濾并真空濃縮得到化合物D(5.32g)，HPLC分析表明其他純度為71%。將該材料與同樣反應(yīng)的材料合并(總共6.30g)，并用硅膠色譜純化(二氯甲烷∶甲醇，98∶2至88∶12)得到化合物D(3.8g，產(chǎn)率59%)E.[S-(R＊，R＊)]-1，2，3，4-四氫-2-[N-(1H-咪唑-4-基乙?；?-L-纈氨酰]-3-異喹啉羧酸鈉鹽向化合物D(4.19g，8.84mmol)在甲醇(50ml)中的溶液中加入10%鈀/炭(1.2g)。在氫氣氛下將懸浮液攪拌2小時(shí)，濾過Celite ，并將濾餅用甲醇(10ml)洗滌。真空濃縮濾液，將殘余物溶于甲醇(20ml)中，并加入1N氫氧化鈉(9.46ml，9.46mmol)。真空除去甲醇，并用反相CHP20P柱色譜(水∶乙腈梯度洗脫∶100∶0至0∶100)純化水性漿液得到化合物E(2.48g，69%)，MS(M+H)+385。
F.[S-(R＊，R＊)]-1，2，3，4-四氫-2-[N-(1H-咪唑-4-基乙?；?-L-纈氨酰]-N-[3-(甲磺酰基)-1-[(苯基甲氧基)甲基]丙基]-3-異喹啉甲酰胺，三氟乙酸鹽在25℃下，將化合物E(122mg，0.30mmol)、化合物B(80mg，0.27mmol)、BOP(155mg，0.35mmol)、三乙胺(50μl，0.35mmol)、二氯甲烷(0.5ml)和DMF(0.5ml)的混合物攪拌18小時(shí))。將混合物用乙酸乙酯稀釋，用飽和碳酸氫鈉溶液和鹽水洗滌，用硫酸鎂干燥并濃縮。將殘余物用制備HPLC(YMCS5ODS柱，30×250mm，用含0.1%TFA的10%-90%甲醇水溶液梯度洗癰，30分鐘)純化。將含主要產(chǎn)物的流份合并并濃縮。將殘余物凍干得到白色固態(tài)標(biāo)題化合物(53mg，24%)。
MSM+H＝624.
元素分析 C32H41N6O6S-1.5 CF3CO2H2.5H2O理論值C，50.06;H，5.70;N，8.34;S，3.82;F，10.18.
實(shí)測(cè)值C，49.92;H，5.33;N，8.01;S，3.75;F，9.92.
實(shí)施例21 N-[(2，3-二氯苯基)甲基)-N2-[2-(2-甲基-1H-咪唑-4-基)乙基]-L-纈氨酰胺，二鹽酸鹽A.2-甲基-4-氯甲基咪唑鹽酸鹽向15ml亞硫酰氯中分批加入3.0g(27mmol)2-甲基-4-羥甲基咪唑(按照Darant等J.Med.Chem.，19，923(1976)中方法制備)。一經(jīng)加入便發(fā)生劇烈反應(yīng)。將得到的黑色溶液在75℃加熱0.5小時(shí)，并蒸發(fā)至干燥，將殘余物從THF中蒸發(fā)一次以除去殘余的亞硫酰氯。將所得棕色固體用乙醇-乙醚重結(jié)晶。冷凍放置得到3.3g(19.7mmol，73%)化合物A，為棕色晶體。
B.2-甲基-4-氰基甲基咪唑向11g氰化鉀(KCN)在20ml水中的冷凍卻的溶液中用0.5小時(shí)滴加3.3g(19.7mmol)化合物A在60ml乙醇中的溶液。一經(jīng)加入，便得到大量沉淀。再繼續(xù)攪拌0.5小時(shí)，同時(shí)冷卻。將固體過濾，并用乙醇充分洗滌濾餅。向?yàn)V液中加入20ml飽和NaHCO3，并將溶液蒸發(fā)至干燥得到深色固體殘余物。將該材料用熱乙酸乙酯萃取兩次。將合并的萃取液干燥(MgSO4)，除去溶劑，得到1.9深色固體。將該材料與二氯甲烷一同研制，過濾不溶物，得到1.2g(50%)化合物B，為淡褐色粉末。
C.(2-甲基-咪唑-4-基)乙酸將1.2g(9.9mmol)化合物B和6.3g(20mmol)Ba(OH)2·8H2O在25ml水中的懸浮在氬氣下加熱回流3小時(shí)。過濾除去冷卻形成的沉淀并棄掉。向?yàn)V液中加入1.9g(2.0mmol)碳酸銨，并將所得白色漿液再攪拌1小時(shí)。過濾除去固體，用水充分洗滌濾餅。將濾液蒸發(fā)至干燥，并將殘余物再自水中蒸發(fā)兩次，得到(1.3g(9.3mmol，93%)化合物D，為油狀物，放置后結(jié)晶。
D.N2-[2-(2-甲基-1H-咪唑-4-基)-1-氧代乙基]-L-纈氨酯芐酯按實(shí)施例4的化合物A所示，由化合物C和纈氨酸芐酯鹽酸鹽制備化合物D。閃色譜(硅膠)，5%甲醇-氯仿)純化，得到化合物D，粘稠泡沫狀物。
E.N2-[2-(2-甲基-1H-咪唑-4-基)-1-硫代乙基]-L-纈氨酯芐酯按實(shí)施例16的化合物B所述，由化合物D制得化合物E，為黃色粘稠油狀物。
F.N2-[2-(2-甲基-1H-咪唑-4-基)乙基]-L-纈氨酯芐酯按實(shí)施例16的化合物C所述，由化合物E制備化合物F，為淡黃色油狀物。
G.N-[2-(2-甲基-1H-咪唑-4-基)乙基]-L-纈氨酸按實(shí)施例16的化合物E所述，由化合物F制備化合物G，為淡色固體。
H.N-[(2，3-二氯苯基)甲基)-N2-[2-(2-甲基-1H-咪唑-4-基)乙基]-L-纈氨酰胺，二鹽酸鹽在氬氣氛下，向化合物G(100g，0.44mmol)在1.5ml DMF中的懸浮液中加入194mg(0.44mmol)BOP、77mg(0.44mmol)2，3-二氯芐胺和87μl(0.5mmol)DIEA。將該懸浮攪拌過夜，并將得到的淡黃色溶液蒸發(fā)干燥。將殘余物用乙酸乙酯稀釋，并用飽和NaHCO3和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)，除去溶劑，得到透明黃色油狀殘余物，對(duì)其時(shí)行40cc硅膠柱閃色譜處理。用二氯甲烷∶甲醇∶氫氧化銨(95∶5∶0.5)洗脫，得到122mg實(shí)施例21的游離堿，為白色泡沫。將該材料用制備HPLC純化，(條件為YMC S-10.120A ODS柱，用40-100%B梯度洗脫(A10%甲醇-水+0.1%TFA，B水-甲醇+0.1%TFA)得到油狀殘余物，將其溶于1N鹽酸中，并再蒸發(fā)至干燥。將殘余物再從水中蒸發(fā)兩次得到白色固體。將該材料與乙醚一同研制，并將固體過濾，得到87mg(0.19mmol，43%)標(biāo)題化合物，為白色粉末，mp-239-241℃。
MS(M+H)+383.D-3.0°(C 0.87，甲醇)。
元素分析 C18H26N4OCl4-0.50 H2O理論值C，46.57;H，5.65;N，12.07.
實(shí)測(cè)值C，46.39;H，5.48;N，11.82.
實(shí)施例22
N-[(2，3-二氯苯基)甲基]-N2-[2-(5-甲基-1H-咪唑-4-基)乙基]-L-纈氨酰胺，二鹽酸鹽A.5-甲基-4-羥甲基咪唑向氫化鋁鋰(5.4g，142mmol)在THF(200ml)中的0℃的懸浮液中加批加入4-甲基咪唑-5-羧酸乙酯(15.4g，100mmol)在THF(100ml)中的漿液。將溶液在室溫?cái)嚢?4小時(shí)，加入濃HCl，并蒸發(fā)有機(jī)溶劑。加入無水乙醇，并將混合物加熱至沸騰，并濾過Celitr 。將濾液蒸發(fā)，得23g化合物1(＞＞100%)，為棕色半圓體。
13C(CD3OD)9.27，53.94，127.92，130.10，133.67 ppm.
B.5-甲基-4-氯甲基咪唑向1ml亞硫酰氯中加入0.35g(2.35mmol)化合物A。將所得溶液在65℃加熱1小時(shí)，在室溫?cái)嚢?天，蒸發(fā)至干燥，并將殘余物用乙醚洗滌兩次，得到0.37g(94%)化合物B，為白色固體。
C.5-甲基-4-氰甲基咪唑按實(shí)施例21的化合物B所述，由化合物B制備化合物C，為褐色固體。
D.(5-甲基-咪唑-4-基)乙酸乙酯將化合物C(2.58g，21.3mmol)在2NNaOH(40ml)中溶液加熱回流3.5小時(shí)。將溶液用濃HCl酸化，并過濾少量不溶物。蒸發(fā)濾液，將殘余物溶于水中，并將溶液蒸發(fā)。將殘余物用沸騰的無水乙醇萃取兩次，將合并的萃取液蒸發(fā)，得到游離酸和產(chǎn)物的乙酯的混合物。將殘余物溶于無水乙醇(50ml)中，加入濃HCl(2ml)，并將溶液攪拌16小時(shí)并蒸發(fā)。將殘余懸浮于5%碳酸氫鈉水溶液中，并將混合物用10%異丙醇/二氯甲烷萃取3次。將合并的有機(jī)萃取液干燥(硫酸鎂)，過濾并蒸發(fā)，得到1.82g(48%)化合物D，為褐色油狀物，經(jīng)放置后結(jié)晶。
13C(CDCl3)10.28，14.17，32.14，60.93，133.33，171.43 ppm.
E.(5-甲基-咪唑-4-基)乙酸按實(shí)施例21的化合物C所述，由化合物D制備化合物E，為結(jié)晶固體。
F.N2-[2-(5-甲基-1H-咪唑-4-基)-1-氧代乙基]-L-纈氨酸芐酯按實(shí)施例4的化合物A所述，由化合物E和纈氨酸芐酯鹽酸鹽制備化合物F。經(jīng)閃色譜(硅膠，5%甲醇/氯仿)得到化合物G，為粘稠泡沫狀物。
G.N2-[2-(5-甲基-1H-咪唑-4-基)-1-硫代乙基]-L-纈氨酸芐酯按實(shí)施例16的化合物B所述，由化合物F制備化合物F，為粘稠油狀物。
H.N2-[2-(5-甲基-1H-咪唑-4-基)乙基]-L-纈氨酸芐酯按實(shí)施例16的化合物G所述，由化合物G制備化合物H，為淡黃色油狀物。
I.N2-[2-(5-甲基-1H-咪唑-4-基)乙基]-L-纈氨酸按實(shí)施例16的化合物E所述，由化合物H制備化合物I，為白色油狀物。J.N-[(2，3-二氯苯基)甲基]-N2-[2-(5-甲基-1H-咪唑-4-基)乙基]-L-纈氨酰胺，二鹽酸鹽按實(shí)施例21的化合物H所述，由化合物I制備標(biāo)題化合物，為白色凍干物。
MS(M+H)+383.D-3.2°(C 0.85，甲醇).
元素分析 C18H26N4OCl4-2.19 H2O理論值C，43.62;H，6.18;N，11.30.
實(shí)測(cè)值C，43.73;H，5.88;N，11.19.
實(shí)施例23 (3S)-1，2，3，4-四氫-2-[N-[2-(1H-咪唑-4-基)乙基]-D，L-纈氨酰]-N-[3-(甲磺?；?丙基]-3-異喹啉甲酰胺，三氟乙酸鹽(1∶2)A.[(咪唑-4-基)乙基]-D，L-纈氨酸乙酯向組氨二鹽酸鹽(5.96g，32.4mmol)和2-氧代-3-甲基丁酸乙酯(5.14g，35.6mmol)在160mmol無水甲醇中的溶液中加入8g3 分子篩。將混合物攪拌15分鐘。向其中加入800mg10%鈀/炭，并將所得混合物在氫氣氣氛(氫氣球)下攪拌24小時(shí)并過濾，將固體用50ml1∶1甲醇-水洗滌。真空濃縮濾液。將殘余物用苯/甲醇驅(qū)洗幾次得到9.43g(93%)白色固體。按如下方法得到游離胺。將5g其二鹽酸鹽在250ml10%異丙醇/二氯甲烷中的懸浮液用100ml飽和NaHCO3水溶液洗滌。用100ml10%異丙醇/二氯甲烷萃取水層。然后將水層用氯化鈉飽和，并用10%異丙醇/二氯甲烷(2×100ml)反萃取。將合并的有機(jī)萃取液用硫酸鈉干燥，過濾并真空濃縮得到3.43g(85%總產(chǎn)率)的化合物A，為白色固體。
B.[(N-三苯甲基-咪唑-4-基)乙基]-D，L-纈氨酸乙酯按實(shí)施例6的化合物A所述，用乙腈作溶劑，用25-100%乙酸乙酯/己烷進(jìn)行色譜純化，由化合物A制得化合物B，(M+H)+482C.N2-[(2，2，2-三氯乙氧基羰基)]-N2-[2-(1-三苯甲基-咪唑-4-基)乙基]-D，L-纈氨酸乙酯向化合物B(1.88g，3.90mmol)在20mlTHF中的0℃的溶液中加入20ml飽和NaHCO3水溶液。在攪拌下，用5分鐘時(shí)間滴加在4mlTHF中的氯甲酸2，2，2-三氯乙酯(0.96g，81%(重量)，4.29mmol)。將所得混合物在0℃攪拌30分鐘，升溫至室溫并真空濃縮除THF。將水性混合物用乙酸乙酯萃取，用飽和NaHCO3水溶液和鹽水各25ml洗滌有機(jī)層。將有機(jī)層用硫酸鈉干燥，過濾并真室濃縮。將殘余物(2.15g)用色譜(以20-40%乙酸乙酯/己烷洗脫)純化，得到1.52g(62%)化合物C。
D.N2-[(2，2，2-三氯乙氧基羰基)]-N2-[2-(1-三苯甲基-咪唑-4-基)乙基]-D，L-纈氨酸向化合物C(1.00g，1.60mmol)在10ml乙醇中的溶液中加入5ml1M氫氧化鋰。將該混濁混合物在50℃加熱12小時(shí)。再向反應(yīng)混合物中加入1.6ml1MLiOH，并將混合物在50℃加熱6小時(shí)，冷卻至室溫并用6.6ml1MHCl處理。將混合物真空濃縮除去乙醇。將水性混合物用二氯甲烷(3×50ml)萃取。將合并的有機(jī)層用硫酸鈉干燥，過濾并真空濃縮，得到911mg(95%)化合物D。
E.(3S)-1，2，3，4-四氫-2-[N-[(2，2，2-三氯乙氧基羰基)]-N-[2-(1-三苯甲基-咪唑-4-基)乙基]-D，L-纈氨酰]-3-異喹啉羧酸甲酯向化合物C(660mg，1.10mmol)，L-1，2，3，4-四氫異喹啉-3-羧酸甲酯(412mg，2.20mmol)和HOBT(297mg，2.20mmol)的5ml二氯甲烷中的混合的中加入0.2mlDIEA和EDC(317mg，1.65mmol)。將混合物攪拌24小時(shí)，再加入EDC(211mg，1.1mmol)和1mlDMF，并將混合物攪拌48小時(shí)。將混合物用乙酸乙酯(100ml)稀釋，并用水、pH4磷酸鹽緩沖液、飽和NaHCO3水溶液和鹽水各50ml進(jìn)行洗滌。將有機(jī)層用硫酸鈉干燥，過濾并真空濃縮。將殘余物(855mg)用色譜(20-60%乙酸乙酯-己烷)純化，得到428mg(50%)化合物E。(M+H)+771。
F.(3S)-1，2，3，4-四氫-2-[N2-[(2，2，2-三氯乙氧基羰基)]-N2-[2-(1-三苯甲基-咪唑-4-基)乙基]-D，L-纈氨酰]-3-異喹啉羧酸按實(shí)施例23的化合物D所述，由化合物E制備化合物F，反應(yīng)在0℃進(jìn)行，用稀HCl處理。
G.(3S)-1，2，3，4-四氫-2-[N-[(2，2，2-三氯乙氧基羰基)]-N2-[2-(1-三苯甲基-咪唑-4-基)乙基]-D，L-纈氨酰]-N-[3-(甲磺?；?丙基]-3-異喹啉甲酰胺向化合物F(168mg，0.222mmol)在2ml 3∶1乙腈-DMF中的溶液中加入甲基3-氨基丙基砜(58mg，0.33mmol)、BOP試劑(150mg，0.33mmol)和0.12mlDIEA。將混合物攪拌18小時(shí)，真空濃縮，用乙酸乙酯(50ml)稀釋，并用10%檸檬酸、飽和NaHCO3水溶液和鹽水各25ml洗滌。將有機(jī)層用硫酸鈉干燥，過濾并真空濃縮。將殘余物(236mg)用色譜(50-100%乙酸乙酯-己烷，然后是5%甲醇-乙酸乙酯)純化，得到186mg(96%)化合物G。(M+H)+876。
H.(3S)-1，2，3，4-四氫-2-[N-[2-(1H-咪唑-4-基)乙基]-D，L-纈氨酰]-N-[3-(甲磺?；?丙基]-3-異喹啉甲酰胺，三氟乙酸鹽(1∶2)向化合物G(170mg，0.194mmol)在1.5ml二氯甲烷中的溶液中加入三乙基硅烷(0.19ml，1.2mmol)和1.5ml TFA。將混合物攪拌5小時(shí)，并真空濃縮，將殘余物用己烷(2×2ml)和乙醚(2×2ml)研制。將殘余油狀物(160mg)用制備HPLC(YMC S-10 ODS 30×500mm，20ml/分鐘，含0.1%TFA的20-100%甲醇水溶液，60分鐘)純化，將濃縮的流份凍干得到113mg(83%)標(biāo)題化合物，為白色固體。MS(M+H)+490。
實(shí)施例24 (3S)-N-[[1，2，3，4-四氫-2-[N-[2-(1H-咪唑-4-基)乙基]-D，L-纈氨酰]-3-異喹啉基]羰基]-3-[(甲磺?；?甲基]-L-丙氨酸甲酯，三氟乙酸鹽(1∶2)A.(3S)-N-[[1，2，3，4-四氫-2-[N2-[(2，2，2-三氯乙氧基羰基)]-N2-[2-(1-三苯甲基-咪唑-4-基)乙基]-D，L-纈氨酰]-3-異喹啉基]羰基]-3-[(甲磺?；?甲基]-L-丙氨酸甲酯按實(shí)施例23的化合物G所述，由實(shí)施例23的化合物F和L-甲硫氨酸甲酯鹽酸鹽制備化合物A。(M+H)+934。
B.(3S)-N-[[1，2，3，4-四氫-2-[N-[2-(1H-咪唑-4-基)乙基]-D，L-纈氨酰]-3-異喹啉基]羰基]-3-[(甲磺?；?甲基]-L-丙氨酸甲酯，三氟乙酸鹽(1∶2)按實(shí)施例23的化合物H所述，電化合物A制備標(biāo)題化合物，為白色固體。MS(M+H)+548。
實(shí)施例25 (3S)-N-[[1，2，3，4-四氫-2-[N-[2-(1H-咪唑-4-基)乙基]-D，L-纈氨酰]-3-異喹啉基]羰基]-3-[(甲磺?；?甲基]-L-丙氨酸，三氟乙酸鹽(1∶2)A.(3S)-N-[[1，2，3，4-四氫-2-[N2-(2，2，2-三氯乙氧基羰基)]-N-[2-(1-三苯甲基咪唑-4-基)乙基]-D，L-纈氨酰]-3-異喹啉基]羰基]-3-[(甲磺?；?甲基]-L-丙氨酸向?qū)嵤├?4的化合物A(100mg，0.107mmol)在1.0ml甲醇中的溶液中加0.30ml 1M LiOH。將混合物攪拌12小時(shí)，用0.3ml 1M HCl處理并真空濃縮。將混合物用25ml二氯甲烷稀釋并用1∶1M HCl-鹽水洗滌。水層用100ml二氯甲烷提取。將合并的有機(jī)層用硫酸鈉干燥、過濾并真空濃縮，得到95mg(97%)化合物A。(M+H)+920。
B.(3S)-N-[(1，2，3，4-四氫-2-[N-[2-(1H-咪唑-4-基)乙基]-D，L-纈氨?；鵠-3-異喹啉基]羰基-3-[(甲磺?；?甲基]-L-丙氨酸，三氟乙酸鹽(1∶2)向化合物A(95mg，0.103mmol)的二氯甲烷(1.0ml)溶液中加入三乙基硅烷(0.10ml)和1.0mlTFA。將混合物于室溫?cái)嚢?.5小時(shí)并真空濃縮。將殘留用1ml己烷研制。得到的油狀的物用制備HPLC(YMCS-10ODS30×500mm，20ml/分，20→100%含有0.1%TFA的含水醇)純化，將濃縮的流份冷凍干燥，得到47mg(59%)標(biāo)題化合物，為白色固體。
MS(M+H)+534實(shí)施例26 N2-[(S)-2-[[2-[[2-(1H-咪唑-4-基)乙基]氨基]-3-甲基丁基]氨基]-1-氧代-3-苯基丙基]-3-[(甲磺?；?甲基]-L-丙氨酸，三氟乙酸鹽
A.N2-[(2，2，2-三氯乙氧基羰基)]-N2-[2-(1-三苯甲基-咪唑-4-基)乙基]-D，L-纈氨醛向?qū)嵤├?3的化合物C(507mg，0.81mmol)的-78℃甲苯(5ml)溶液中以使反應(yīng)溫度保持在-65℃以下的速度加入氫化二異丁基鋁溶液(2.7ml 1.5M 甲苯溶液4.05mmol)。將混合物于-78℃攪拌4小時(shí)，低于-65℃的甲醇終止反應(yīng)，溫?zé)嶂潦覝?，加入碳酸氫鈉水溶液(13ml)。將混合物用Celite 墊過濾，并將該墊用乙酸乙酯(20ml)洗滌。濾液用鹽水洗滌，干燥(硫酸鈉)，濃縮。殘留物用硅石閃柱色譜純化，以己烷∶乙酸乙酯(1∶1)洗滌，得到化合物A(268mg，57%)，為凝膠狀物。MS(M+H)+582。
B.N-[(s)-2-[N-[(2，2，2-三氯乙氧基羰基)-[2-(1-三苯甲基咪唑-4-基)乙基]氨基]-3-甲基丁基]氨基-3-苯基丙酸甲酯將化合物A(260mg，0.45mmol)和苯丙氨酸甲酯HCl鹽(116mg，0.54mmol)在甲醇(2.5ml)和乙酸(0.2ml)中的混合物攪拌15分鐘。用10分鐘時(shí)間向該溶液中分批加入氰基硼氫鈉(30mg，0.48mmol)攪拌1小時(shí)后，將混合物濃縮后使其在乙酸乙酯(20ml)和碳酸氫鈉水溶液(20ml)之間分配。有機(jī)層用鹽水洗滌，干燥(硫酸鈉)并濃縮。殘余物用閃柱色譜(二氧化硅，己烷∶乙酸乙酯(1∶1)純化，得到化合物B(230mg，69%)，為泡沫狀物。MS(M+H)+745。
C.N-[(S)-2-[(2，2，2-[三氯乙氧基碳基)-[2-(1-三苯甲基咪唑-4-基)乙基]氨基]-3-甲基丁基]氨基]-3-甲基丁基]氨基]-3-苯基丙酸將化合物B(230mg，0.31mmol)在甲醇(2ml)和氫氧化鋰水溶液(0.62ml，1N，0.62mmol)中的混合物攪拌24小時(shí)。除去大部分溶劑。殘留物用己烷研制兩次，將殘留物冷卻到0℃，并用HCl水溶液(0.62ml，1N)酸化。將得到的混合物分配于乙酸乙酯(20ml)和鹽水(20ml)中。將有機(jī)層干燥(硫酸鈉)并濃縮，得到化合物C(230mg，100%)，為泡沫狀物。MS(M+H)+731。
D.N-[(s)-2-[[2-[N-[(2，2，2-三氯乙氧基羰基)[2-(1-三苯甲基咪唑-4-基)乙基]氨基]]-3-甲基丁基]氨基]-1-氧代-3-苯基丙基]-3-[(甲磺?；?甲基]-L-丙氨酸甲酯在0℃下向合物C(230mg，0.31mmol)、甲硫氨酸砜甲酯HCl鹽(86mg，0.37mmol)和HOBT(47.4mg，0.31mmol)在DMF(1ml)中的混合物中加入NMM(55mg，0.55mmol)，接著加入EDC(71.3mg，0.372mmol)。將混合物于室溫?cái)嚢柽^夜，然后將其分配于乙酸乙酯(20ml)和水(10ml)中。將有機(jī)層用鹽水洗滌，用硫酸鎂干燥，并濃縮。殘留物用二氧化硅閃柱色譜純化，以乙酸乙酯洗脫，得到化合物D(181mg，64%)，為泡沫狀物。MS(M+H)+908。
E.N-[(s)-2-[[2-[N-[(2，2，2-三氯乙氧基羰基)[2-(1-三苯甲基咪唑-4-基)乙基]氨基]]-3-甲基丁基]氨基-1-氧代-3-苯基丙基]-3-[(甲磺?；?甲基]-L-丙氨酸化合物E由化合物D按用于實(shí)施例25的化合物A的方法制得，為泡沫狀物。MS(M+H)+894。
F.N-[(S)-2-[[2-[[2-(1H-咪唑-4-基)乙基]氨基]-3-甲基丁基]氨基-1-氧代-3-苯基丙基]-3-[(甲磺?；?甲基]-L-丙氨酸，三氟乙酸鹽標(biāo)題化合物按用于實(shí)施例25的化合物B的所述方法由化合物E制備，為固體。
M.P.55-60℃(軟化).
MS(M+H)+301。
元素分析 C24H37N5O5S-1.0 H2O-3.4 CF3CO2H理論值C，40.50;H，4.68;N，7.67;F，21.22.
實(shí)測(cè)值C，40.50;H，4.76;N，7.64;F，21.31.
實(shí)施例27 N-[(2，3-二氯苯基)甲基]-2-[(2-(1H-咪唑-4-基)乙基]氨基]乙酰胺A.[2-(咪唑-4-基)乙基]氨基乙酸甲酯向攪拌著的組胺二鹽酸鹽(2.0g，10.8mmol)和二羥乙酸(1.10g，11.9mmol)的甲醇(40ml)溶液中加入5g 3 分子篩。攪拌15分鐘后，加入10%鈀/炭(0.2g)，并將該漿液在氫氣氛(氣球)下攪拌16小時(shí)。將混合物用Celite 墊過濾，用甲醇將該墊洗滌幾次。將HCl氣體通入濾液中鼓泡，并將該溶液攪拌過液，將溶液濃縮。將殘留物懸浮于10%異丙醇/二氯甲烷中，用碳酸氫鈉(35ml)洗滌該溶液。水層再用10%異丙醇/二氯甲烷(2×35ml)提取，將合并的提取液用硫酸鎂干燥，過濾，濃縮，得到化合物A(0.43g，24%)。
B.[2-(N-三苯甲基咪唑-4-基)乙基]氨基乙酸甲酯將化合物A(0.55g，2.1mmol)和氯三苯甲烷(0.60g，2.1mmol)的溶液在乙腈中攪拌14小時(shí)。將混合物濃縮。殘留物用二氯甲烷(75ml)稀釋。將該溶液用碳酸氫鈉(25ml)。鹽水(25ml)洗滌，用硫酸鎂干燥，過濾并濃縮。用硅膠純化，以25%乙酸乙酯/己烷，乙酸乙酯和1%甲醇/三氯甲烷梯度洗滌，得到化合物B。
C.N-[[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]-[2-(N-三苯甲基咪唑-4-基)乙基]]氨基乙酸甲酯將化合的B(0.5g，1.2mmol)、DMAP(0.05g)、Boc-酐(0.33g，1.52mmol)和三乙胺(0.13g，0.17mmol，1.29mmol)的溶液在氬氣下在二氯甲烷(6ml)中攪拌14小時(shí)，并使其分配于氯仿(30ml)和鹽水(10ml)中。提取(2×30ml)水層。將合并用有機(jī)提取液用10%KHSO4(2×10ml)和鹽水(2×10ml)洗滌，的硫酸鎂干燥，過濾，濃縮，得到化合物C(0.578g，94%)。
D.N-[[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]-[2-(N-三苯甲基咪唑-4-基)乙基]]氨基乙酸將1NNaOH(0.28ml，0.28mmol)加至化合物C(0.10g，0.19mmol)的甲醇(1ml)溶液中。15小時(shí)后，將反應(yīng)混合物用乙酸乙酯(20ml)稀釋，用10%HCl(10ml)中和并使其分層。將水層用乙酸乙酯(2×20ml)提取。將合并的有機(jī)層用鹽水(1×20ml)洗滌，用硫酸鎂干燥，過濾并濃縮，得到化合物D，為玻璃狀固體(0.80g，83%)E.N-[(2，3-二氯苯基)甲基]-N2-[[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]-[2-(N-三苯甲基咪唑-4-基)乙基]]氨基乙酰胺將化合物D(0.080g，0.156mmol)、HOBT(0.026g，0.17mmol)、3，4-二氯芐胺(0.027g，0.15mmol)、EDC(0.032g，0.17mmol)和DIEA(0.022g，0.030mmol，0.17mmol)的溶液在THF/DMF(4ml/1.5ml)中在氬氣條件下攪拌13小時(shí)。將混合物分配于10%HCl(10ml)和乙酸乙酯(20ml)中。水層用乙酸乙酯(2×20ml)提取。將合并的有機(jī)層用水(20ml)、碳酸氫鈉(2×20ml)、鹽水(2×20ml)洗滌。用硫酸鎂干燥，過濾并濃縮。將產(chǎn)物用硅膠純化，以三氯甲烷和三氯甲烷/甲醇(95/5)梯度洗脫，得到化合物E(0.078g，75%)。
F.N-[(2，3-二氯苯基)甲基]-2-[[2-(1H-咪唑-4-基]乙基]氨基]乙酰胺將三乙基硅烷(0.035ml，0.22mmol)、TFA(0.5ml)和化合物E(0.075g，0.11mmol)的溶液在氬氣下在二氧甲烷(2ml)中攪拌16小時(shí)后濃縮。將殘留物用己烷/乙酸乙酯研制，凍干，得到標(biāo)化合物(43.1mg，69%)MS(M+H)+＝327+，(M-H)-＝325-.
實(shí)施例28 N-[(2，3-二氯苯基)甲基]-N2-[2-(1-甲基-1H-咪唑-5-基)乙基]-D，L-纈氨酰胺，二鹽酸鹽A.[(1-甲基咪唑-5-基)乙基]-D，L-纈氨酸乙酯化合物A按用于實(shí)施例23的化合物A的方法由3-甲基組胺二鹽酸鹽和2-氧代-3-甲基丁酸乙酯制得。
B.[(1-甲基咪唑-5-基)]乙基]-D，L纈氨酸化合物B按用于實(shí)施例16的化合物E的方法用水作反應(yīng)用溶劑由化合物A制得。
C.N-[(2，3-二氯苯基)甲基]-N2-[2-(1-甲基-1H-咪唑-5-基)乙基]-D，L-纈氨酰胺，二鹽酸鹽由化合物B按用于實(shí)施例19的化合物E的方法，通過將偶聯(lián)反應(yīng)在攪拌下進(jìn)行24小時(shí)而制得化合物C。
MS(M+H)+＝383+1H NMR(CD3OD) δ 1.06(d，J＝6.8，3H)，1.12(d，J＝7.3，3H)，2.25-2.35(m，1H)，3.15-3.45(m，4H)，3.89(s，3H)，3.91(d，J＝5.1，1H)，4.5-4.7(m，2H)，7.29(m，1H)，7.40-7.55(m，3H)，8.90(s，1H)，9.0(m，1H).
實(shí)施例29 N-[(2，3-二氯苯基)甲基]-N2-[2-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)乙基]-D，L-纈氨酰胺，三氟乙酸鹽用在實(shí)施例28的制備中所述的三步操作由1-甲基組胺二鹽酸鹽制得標(biāo)題化合物。
MS(M+H)+＝383+.
1H NMR(CD3OD) δ 1.02(d，J＝6.8，3H)，1.08(d，J＝7.3，3H)，2.20-2.30(m，1H)，3.1-3.4(m，-4H)，3.78(d，J＝5.1，1H)，3.90(s，3H)，4.59(ABq，J＝15.0，△δ＝0.05，2H)，7.29(m，1H)，7.40(m，2H)，7.50(d，J＝7.7，1H)，8.81(s，1H).
實(shí)施例30 N-乙基-N2-[2-(1H-咪唑-4-基)乙基]-N-[(4-甲氧基苯基)甲基]-L-纈氨酰胺A.N-[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]-N-[1-三苯甲基咪唑-4-基乙基]-L-纈氨酸向10g(32.2mmol)實(shí)施例16的化合物E在150ml無二氯甲烷中的漿液用4.4ml(40.1mmol)NMM處理，并將漿液在氬氣層下在冰浴中冷卻。用15分鐘時(shí)間加入1M三甲基硅烷基氯的二氯甲烷(40ml)溶液;除去水浴。再攪拌2.5小時(shí)后，加入第二份NMM(3.85ml，35mmol)，然后加入9.75g(35mmol)三苯甲基氯。將混合物于室溫?cái)嚢柽^夜，用150ml甲醇處理，并再攪拌3小時(shí)。真空蒸發(fā)，得到固體，將其在500ml二氯甲烷中制成漿液，并例在600ml干K-60硅石墊上。將該墊用6×500ml二氯甲烷洗滌，然后用4×100ml5%甲醇的二氯甲烷液洗滌。最初5%的洗滌液含物質(zhì)，經(jīng)TLC(Rf＝0.29，5%甲醇的二氯甲烷溶液)檢查為純物質(zhì)，真空蒸發(fā)，得到10.8g化合物A，為淺黃色泡沫狀物。還得到較少量純物質(zhì)，將其在相同的條件下再進(jìn)行色譜純化，得到粘性泡沫狀物。將該物質(zhì)用200ml庚烷和15ml乙醚覆蓋。室溫靜置過夜，得到固體。將其粉末化，過濾，用庚烷洗滌，真空干燥，又得到4.5g化合物A，為粉末(86%總效率)。
B.N-乙基-N2-[2-(1H-咪唑-4-基)乙基]-N-[(4-甲氧基苯基)甲基]-L-纈氨酰胺將化合物A(29mg，0.05mmol)、N-乙基-對(duì)甲氧基芐胺的二氯甲烷溶液(200μl，0.25M，0.05mmol)、HOAt的DMF溶液(200μl，0.3M，0.06mmol)和二異丙基碳化二亞胺的二氯甲烷溶液(200μl，0.3M，0.06mmol)的混合物在密封容器內(nèi)靜置2天。加入TFA(1ml)和三乙基硅烷(0.1ml)。將混合物再靜置2小時(shí)。將混合物真空濃縮。將殘留物溶于1∶1二氯甲烷∶甲醇(3ml)中。將該溶液加至含1gSCX樹脂(Variam)的固相提取筒中。將該筒依次用以下溶液洗滌10ml1∶1二氯甲烷∶甲醇，10ml甲醇，10ml0.01N含氨甲醇和10ml0.01N含氨甲醇。棄去上述洗滌液。然后將該筒用10ml1.0N氨的甲醇溶液洗脫。收集洗脫液并真空濃縮，得到標(biāo)題化合物，為無色油狀物(20mg，100%)。
MS(M+M)+359實(shí)施例31 N-[[(2，3-二氯苯甲)甲基]-2-[[2-(1H-咪唑-4-基)乙基]氨基]-3-甲基戊酰胺，二鹽酸鹽A.[2-[(1H-咪唑-4-基)乙基]氨基]-3-甲基戊酸向攪拌著的組胺二鹽酸鹽(2.0g，10.8mmol)和4-甲基-2-氧代戊酸鈉鹽(1.81g，11.9mmol)的甲醇(40ml)溶液中加入5g 3 分子篩。攪拌20分鐘后，加入10%鈀/炭(10.2g)，并將該漿液在氫氣氛(氣球)下攪拌14小時(shí)。將混合物用Celitr 墊過濾，用甲醇將該墊洗滌幾次。將合并的濾波濃縮，得到化合物A，為固體(3.52g，＞100%)。
B.N-[[(2，3-二氯苯甲)甲基]-2-[[2-(1H-咪唑-4-基)乙基]氨基]-3-甲基戊酰胺，二鹽酸鹽該標(biāo)題化合物按用于實(shí)施例27的化合物E的方法由化合物A和2，3-二氯芐胺例得。用制備HPLC(YMC，S-10，ODS，3×500mm，用含0.1%TFA和10→90%含水醇梯度洗脫)純化，得到標(biāo)題化合物(0.11g，13%)。
MSM+H＝383.
元素分析 C18H24N4OCl2-2.2 HCl1.0 H2O理論值C，44.90;H，5.90;N，11.63.
實(shí)測(cè)值C，44.64;H，5.78;N，11.42.
實(shí)施例32
N-[(2，3-二氯苯基)甲基]-2-[[2-(1H-咪唑-4-基)乙基]氨基]-4-苯基丁酰胺，三氟乙酸鹽A.[[2-(1H-咪唑-4-基)乙基]氨基]-4-苯基丁酸乙酯按用于實(shí)施例31的化合物A的方法由2-氧化-4-苯基丁酸乙酯制得化合物A。
B.[[2-(1H-咪唑-4-基)乙基]氨基]-4-苯基丁酸將NaOH(8.28ml，8.28mmol)加至化合物A(0.10g，3.48mmol)的甲醇(15ml)溶液中。攪拌15小時(shí)后，將反應(yīng)混合物用乙酸乙酯(20ml)稀釋，用1N HCl(8.3ml)中和并使其分層。將水層用10%異丙醇的二氯甲烷溶液(3×30ml)提取。將合并的有機(jī)層濃縮，得到化合物B，為白色固體(1.04g，115%)。MSM+H+＝274。
C.N-[(2，3-二氯苯基)甲基]-2-[[2-(1H-咪唑-4-基)乙基]氨基]-4-苯基丁酰胺，三氟乙酸鹽按用于實(shí)施例31的化合物B的方法由化合物B制得標(biāo)題化合物。
MSM+H＝431.
元素分析 C22H24N4OCl2-2.2 CF3CO2H1.0 H2O理論值C，45.24;H，4.05;N，7.99.
實(shí)測(cè)值C，45.25;H，3.74;N，7.95.
實(shí)施例33
N-[(2，3-二氯苯基)甲基]-N-[2-(1-(苯基甲基)-(1H-咪唑-5-基)]乙基]-L-纈氨酰胺，二鹽酸鹽A.N2-[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]-N-[2-(1H-咪唑-4-基)乙基]-N-(2，3-二氯苯基甲基)-L-纈氨酰胺將DIEA(0.674ml，3.87mmol)加至實(shí)施例16的化合物E(1.0g，3.23mmol)、2，3-二氯芐胺(0.625g，3.87mmol)和BOP(1.71g，3.87mmol)的1∶1二氯甲烷/DMF(20ml)溶液中。將混合物攪拌16小時(shí)，用10%碳酸氫鈉(20ml)終止反應(yīng)，并用乙酸乙酯(3×70ml)提取。將合并的有機(jī)提取液用10%LiCl(2×50ml)洗滌，干燥(硫酸鎂)，過濾并真空濃縮。將殘留物用閃色譜(以19/1氯仿/甲醇洗脫)純化，得到化合物A(1.45g，96%)。
MS(M+H)+469。
B.N2-[(1，1-二甲基乙基氧基)羰基]-N2-[2-(1-[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]-咪唑-4-基)乙基]-N-(2，3-二氯苯基甲基)-L-纈氨酰胺將三乙胺(0.486ml，3.49mmol)加至化合物A(0.47g，1.0mmol)和Boc酐(0.39g，1.79mmol)的二氯甲烷(30ml)溶液中。將混合物攪拌19小時(shí)，用水(50ml)終止反應(yīng)。分出有機(jī)層，水層用二氯甲烷(2×50ml)提取。將有機(jī)層干燥(硫酸鎂)，過濾并真空濃縮，得到化合物B(0.466g，82%)。
MS(M+H)+596。
C.N-[(2，3-二氯苯基)甲基]-N2-[2-(1-(苯基甲基)-(1H-咪唑-5-基)]乙基]-L-纈氨酰胺，二鹽酸鹽將芐醇(0.014ml，0.135mmol)加至-78℃的triflicanhydride(0.023ml，0.135mmol)和DIEA(0.024ml，0.135mmol)的二氯甲烷(1ml)溶液中。將混合物于-78℃攪拌30分鐘。加入化合物B(0.070g，0.123mmol)的溶液。將混合物于-78℃再攪拌4小時(shí)，然后于室溫?cái)嚢?小時(shí)。將混合物用二氯甲烷(1ml)稀釋，加入TFA(1ml)。于室溫?cái)嚢?小時(shí)后將溶液真空濃縮，用制備HPLC(YMCS10ODS30×500mm，含0.1%TFA的10→90%含水甲醇60分鐘梯度洗脫，20ml/分鐘)純化，并將適宜的流份真空濃縮。將殘留物溶于甲醇(2ml)中，加入1NHCl(2ml)。將混合物攪拌5分鐘，真空濃縮。將后一步驟重復(fù)2次。將殘留物溶于水(2ml)中，經(jīng)微孔濾過和凍干后得到標(biāo)題化合物(0.037g，53%)，MP140-150℃。
MS(M+H)+459.
元素分析 C24H28N4OCl2-1.0 H2O-2.0 HCl理論值C，52.59;H，5.84;N，10.22.
實(shí)測(cè)值C，52.59;H，6.01;N，9.83.
實(shí)施例34
N-[(2，3-二氯苯式)甲基]-N2-[2-[1-(3-甲基丁基)-1H-咪唑-5-基]乙基]-L-纈氨酰胺，二鹽酸鹽A.N2-[(1，1-二甲基乙氧基)羰基)-N-[2-(1-(3-甲基丁基)-1H-咪唑-5-基)乙基]-N-(2，3-二氯苯基甲基)-L-纈氨酰胺將異戊醇(0.019ml，0.176mmol)加至-78℃的triflic anhydr-ide(0.030ml，0.176mmol)和DIEA(0.031ml，0.176mmol)的二氯甲烷(0.25ml)溶液中。將混合物于-78℃攪拌15分鐘。加入實(shí)施例33的化合物B(0.10g，0.176mmol)的二氯甲烷(0.25ml)溶液。將混合物于-78℃再攪拌4小時(shí)，然后于室溫?cái)嚢?小時(shí)。將反應(yīng)用pH緩沖劑7.0(2ml)終止，并用二氯甲烷(3×30ml)提取。將合并的有機(jī)提取液干燥(硫酸鎂)，過濾并真空濃縮。將殘余留物用閃色譜(19/1氯仿/甲醇)純化。將適宜的流份真空濃縮，得到化合物A(0.054g，57%)，MS(M+H)+539。
N-[(2，3-二氯苯式)甲基]-N-[2-[1-(3-甲基丁基)-1H-咪唑-5-基]乙基]-L-纈氨酰胺，二鹽酸鹽將無水HCl(4M二氧六環(huán)溶液2ml，8.0mmol)加至化合物A(0.05g，0.093mmol)中并將混合物攪拌2小時(shí)，真空濃縮。將殘留物用制備HPLC(YMCS10ODS30×500mm，含0.1%TFA的10→90%含水甲醇60分鐘梯度洗脫，20ml/分鐘)純化，并將適宜的流份真空濃縮。將殘留物溶于甲醇(10ml)中，加入1NHCl(2ml)。將混合物攪拌5分鐘，真空濃縮。將后一步驟重復(fù)2次。將殘留物溶于水(10ml)中，經(jīng)微孔濾過和凍干后得到標(biāo)題化合物(39mg，82%)，MP110-120℃。
MSM+H＝439.
元素分析 C22H32N4OCl2-2 HCl1.83理論值C，48.46;H，6.96;N，10.27.
實(shí)測(cè)值C，48.46;H，6.74;N，10.03.
實(shí)施例35 N2-[2-(1H-咪唑-4-基)乙基]-N，N-二(苯基甲基)-D，L-纈氨酰胺，三氟乙酸鹽A.[(咪唑-4-基)乙基]-D，L-纈氨酸按用于實(shí)施例16的化合物E的方法由實(shí)施例23的化合物A制得化合物A。
B.N2-[2-(1H-咪唑-4-基)乙基]-N，N-二(苯基甲基)-D，L-纈氨酰胺，三氟乙酸鹽按用于實(shí)施例21的化合物H和方法由化合物A制得標(biāo)題化合物，為白色固體凍干的，只是它在制備HPLC后直接以三氟乙酸鹽的形式被分離。MS(M+H)+391+。
實(shí)施例36
N-[(2，3-二氯苯基)甲基]-N2-[2-[1-(2-苯基乙基)-1H-咪唑-5-基]乙基]-L-纈氨酰胺，二鹽酸鹽用實(shí)施例34的第2步所述的方法由實(shí)施例33的化合物B和2-苯基乙醇制得標(biāo)題化合物。mp83-93℃。
MS(M+H)+473.
元素分析 C25H30N4OCl2-1.51 H2O-2.0 HCl理論值C，52.35;H，6.15;N，9.77.
實(shí)測(cè)值C，52.38;H，6.22;N，9.74.
實(shí)施例37 N-[(2，3-二氯苯基)甲基]-N2-[2-(1-十二烷基-1H-咪唑-5-基)乙基]-L-纈氨酰胺，二鹽酸鹽用實(shí)施例34的第2步所述方法由實(shí)施例33的化合物B和1-十二烷醇制得標(biāo)題化合物。
mp123-133℃.
MS(M+H)+537.
元素分析 C29H46N4OCl2-1.3 H2O-2.0 HCl理論值C，54.95;H，8.04;N，8.84.
實(shí)測(cè)值C，54.83;H，7.89;N，8.96.
實(shí)施例38 N-[(2，3-二氯苯基)甲基]-2-[[2-(1H-咪唑-1-基)乙基]氨基]-4-甲基戊酰胺，二鹽酸鹽A.N-[2-(咪唑-1-基)乙基]苯鄰二甲酰亞胺在氬氣下向咪唑(680mg，10mmol)和溴乙基苯鄰二甲酰亞胺(2.54mg，10mmol)的無水THF(15ml)溶液中加入氫化鈉(0.4g，10mmol，60%在油中)。將混合物于室溫?cái)嚢?4小時(shí)后，加入水(15ml)和乙酸乙酯(10ml)使其分成兩層。有機(jī)層用1NHCl(2×15ml)提取。將酸層用碳酸氫鈉固體仔細(xì)處理(直至pH9)，用氯仿(20ml)和10%異丙醇的氯仿(20ml)溶液提取。將有機(jī)層合并，干燥(硫酸鎂)，真空濃縮，得到化合物A，為白色固體(230mg，收率11%)。
MS(M+H)+＝242+。
B.［2-(咪唑-1-基)乙基]胺，二鹽酸鹽向化合物A(600mg，2.49mmol)的甲醇(15ml)溶液中加入水合肼。將混合物攪拌9小時(shí)，用Celite 濾出白色沉淀。將濾液濃縮，將殘留物溶于氯仿(10ml)中，過濾，將濾液用1N HCl(10ml)提取。將水層濃縮，得到化合物B，為黃色固體(390mg，收率；84%)，不經(jīng)進(jìn)一步純化直接使用。
C.2-[[2-(1H-咪唑-1-基)乙基]氨基]-4-甲基戊酸按用于實(shí)施例31的化合物A的方法由化合物B和4-甲基-2-氧化戊酸的鈉鹽制得化合物C。
用二氯甲烷研制，得到白色固體狀化合物C。
MS(M+H)+＝226+。
D.N-[(2，3-二氯苯基)甲基]-2-[[2-(1H-咪唑-1-基)乙基]氨基]-4-甲基戊酰胺，二鹽酸鹽向化合物C(225mg，0.9mmol)在DMF(3ml)中的懸浮液中依次加入二甲亞砜(DMSO)(0.5ml)、DIEA(350μl，2mmol)、2，3-二氯芐胺(176mg，1mmol)、HOAT(136mg，1mmol)和EDC(191mg，1mmol)。將混合物在氬氣下攪拌14小時(shí)。濃縮，將殘留物溶于含0.1%TFA的甲醇中，用制備HPLC純化，以含0.1%TFA的10→90%含水甲醇線性梯度洗脫。收集合適的流份，濃縮。將10ml1NHCl加至殘留物中將溶液凍干。
MS(M+H)+＝383+.
1H NMR(CD3OD，400 MHz)d 9.10(1H，s)，7.80(1H，s)，7.65(1H，s)，7.50(1H，s)，7.42(1H，s)，7.31(1H，s)，4.80-4.50(5H，m)，4.0(1H，s)，3.80-3.50(2H，m)，1.90-1.50(3H，m)，0.98(6H，d，J＝20Hz).
實(shí)施例39 N2-[2-(1H-咪唑-5-基)乙基]-N-(1-甲基乙基)-N-(苯基甲基)-L-纈氨酰胺，二鹽酸鹽向0℃的實(shí)施例27化合物D(100mg，0.18mmol)的無水二氯甲烷(360μl)溶液中加入N-異丙基-N-芐胺(60μl，0.36mmol)，DIEF(62μl，0.36mmol)和PyBrop(127mg，0.27mmol)。將混合物于室溫?cái)嚢?0小時(shí)。加入三乙基硅烷(50μl)和TFA(1ml)。將混合物于室溫?cái)嚢?小時(shí)并真空濃縮。將殘留物用制備HPLC(YMCS-10ODS30×500mm，28ml/分，20→90%含有0.1%TFA的含水甲醇，60分鐘)，并將濃縮的流份凍干。將吸濕的凍干物用1MHCl(1×2ml，1×0.5ml)處理，將殘留物溶于水中凍干。將得到的黃色玻璃狀物用乙醚研制，溶于水中，然后凍干，得到26mg(35%)標(biāo)題化合物，為白色固體。
MSM+H＝343.
1H NMR(CD3OD) δ 1.05-1.35(m，12H)，2.20-2.40(m，1H)，3.1-3.4(m，2H)，3.55-3.70(m，2H)，4.03(d，J＝3.5，1H)4.20-4.30(m，1H)，4.61(ABq，J＝15.8，△δ＝0.22，2H)，7.15-7.50(m，6H)，8.90(s，-0.3H，旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體)，8.92(s，～0.7H，旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體).
實(shí)施例40 N-[(2，3-二氯苯基)甲基]-N-[2-(1H-咪唑-5-基)乙基]-N-(1-甲基乙基)-L-纈氨酰胺，二鹽酸鹽
A.N-[(2，3-二氯苯基)甲基]-N-(1-甲基乙基)胺向異丙胺(590mg，10mmol)和5%乙酸-甲醇(10ml)溶液中加入2，3-二氯苯甲醛(350mg，2.0mmol)和0.5g 3 分子篩。將混合物攪拌15分鐘，用氰基硼氫鈉(140mg，2.0mmol)處理并攪拌12小時(shí)。將混合物過濾，將濾液真室濃縮。將殘留物溶于20ml 1M HCl中，用乙醚(2×10ml)提取。水層通過加入20ml 3M NaOH堿化。將該水性混合物用二氯甲烷(2×20ml)提取。將二氯甲烷提取液用硫酸鈉干燥，過濾并真空濃縮，得到346mg(80%)化合物A。
B.N-[(2，3-二氯苯基)甲基]-N-[2-(1H-咪唑-5-基)乙基]-N-(1-甲基乙基)-L-纈氨酰胺，二鹽酸鹽標(biāo)題化合物按用于實(shí)施例39的方法由化合物A制備得，為白色固體。
MSM+H＝411.
1H NMR(CD3OD) δ 1.10-1.40(m，12H)，2.30-2.50(m，1H)，3.2-3.5(m，～2H)，3.99(d，J＝3.5，1H)，4.20-4.40(m，1H)，4.65-4.75(m，2H)，4.7(ABq，J＝17，△δ＝0.2，2H)，7.0-7.6(m，4H)，8.90(s，1H).
實(shí)施例41
N-[(2，3-二氯苯基)甲基]-N2-[2-(1H-咪唑-5-基)乙基]-N-(苯基甲基)-L-纈氨酰胺，二鹽酸鹽A.N-[(2，3-二氯苯基)甲基]-N-(苯基甲基)胺向芐胺(240mg，2.2mmol)、2，3-二氯甲烷(10ml)溶液中加入乙酸(0.14ml，2.0mmol)、2，3-二氯苯甲醛(350mg，2.0mmol)和三乙酰氧基硼氫化鈉(640mg，3.0mmol)。將混合物攪拌4小時(shí)，用50ml二氯甲烷稀釋，用50ml飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌。將有機(jī)層用硫酸鈉干燥。過濾，真空濃縮。將殘留物(750mg)色譜純化(用50%乙酸乙酯-己烷洗脫)，得到344mg(65%)化合物A。
B.N-[(2，3-二氯苯基)甲基]-N2-[2-(1H-咪唑-5-基)乙基]-N-(苯基甲基)-L-纈氨酰胺，二鹽酸鹽按用于實(shí)施例39的方法由化合物A制得標(biāo)題化合物，為白色固體。
MSM+H＝459.
1H NMR(CD3OD) δ 1.10(m，3H)，1.17(d，J＝6.5，3H)，2.25-2.45(m，1H)，3.1-3.4(m，～2H)，4.45-4.65(m，2H)，4.66(ABq，J＝15.9，△δ＝0.35，2H)，5.0(ABq，J＝14.6，△δ＝0.46，2H)7.15-7.55(m，9H)，8.91(s，1H).
實(shí)施例42
(S)-3-[[(2-[[2-(1H-咪唑-4-基)乙基]氨基]-3-甲基-1-氧代丁基](苯基甲基)氨基]甲基]苯甲酸，二鹽酸鹽用實(shí)施例17第4步所述的方法由3-羧基苯甲醛、芐胺和實(shí)施例30的化合物A制得標(biāo)題化合物。
MS(M+H)+435。
實(shí)施例43 N-乙基-N2-[2-(1H-咪唑-4-基)乙基]-N-(苯基甲基)-D，L-纈氨酰胺，三氟乙酸鹽按用于實(shí)施例35的化合物B的方法由實(shí)施例35的化合物A和N-乙基-N-芐胺制得標(biāo)題化合物。
MS(M+H)+329+.
1H NMR(270MHz，DMSO-d6，旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體的混合物)δ1.10(6H，m，1.23(3H，m)，2.25(1H，m)，3.15(2H，m)，3.33(1H，m)，3.60(1H，m)，3.80(1H，m)，4.50(2H，m)，5.05(1H，m)，7.3-7.66H，m)，9.04(1H，s).
實(shí)施例44
N-[(2，3-二氯苯基)甲基]-N2-[3-(1H-咪唑-2-基)丙基]-L-纈氨酰胺，二鹽酸鹽A.3-[咪唑-2-基]丙酸乙酯向氫化鈉(1.86g，45.8mmol，60%礦物均油分散體，用THF預(yù)洗滌并用氮?dú)飧稍?和1，2-二甲氧基乙烷(DEM，20ml)和冷(0℃)溶液中用15分鐘滴加溶于DME(10ml)中的膦?；宜崛阴?12g，54.1mmol)。將該溶液于室溫?cái)嚢?小時(shí)，然后加入在20ml DME中的2-咪唑乙醛(4g，41.6mmol)。攪拌溶液。加熱至回流(85℃)15分鐘，然后冷卻至60℃，在該溫度下維持1小時(shí)。在冷卻時(shí)將溶液濃縮至1/2體積，過濾。將固體用甲醇/乙酸乙酯/己烷重結(jié)晶，得到5.1g(74%)化合物A，為白色晶狀固體。MS(M+H)+167+。
B.3-[咪唑-2-基]丙酸乙酯將化合物A(4.01g，24.2mmol)的無水乙醇(100ml，加熱溶解)溶液用鈀/炭(0.5g)在室溫氫化16小時(shí)。在真空下除去氫后，用Celite 床濾除催化劑。將濾波真空濃縮，得到4.0g(100%)化合物B，為白色晶體固體。MS(M+H)+169+。
C.3-[N-三苯甲基咪唑-2-基]丙酸乙酯化合物C按用于實(shí)施例6的化合物A的方法用二氯甲烷作溶劑、三乙胺作堿由化合物B制得，經(jīng)水性處理后，用乙酸乙酯/己烷重結(jié)晶。得到化合物C，為白色微晶狀固體。MS(M+H)+411+。
D.3-[N-三苯甲基咪唑-2-基]丙-1-醇將化合物C(0.80g，0.95mmol)和THF(15ml)溶液在氬氣下冷卻至0℃，攪拌下滴加1M氫化鋁鋰溶液(2ml，2mmol)，并將反應(yīng)混合物于環(huán)境溫度攪拌16小時(shí)。緩慢加入水(2ml)，并將溶液濃縮。加入水(40ml)和乙醚(60ml)使其分層。將醚層干燥(硫酸鎂)并濃縮。對(duì)殘留物進(jìn)行色譜純化(二氧化硅閃色譜，10∶1二氯甲烷∶甲醇)。收集含產(chǎn)物的流份并濃縮，得到680mg(95%)化合物D，為白色晶狀固體。MS(M+H)+。
E.3-[N-三苯甲基咪唑-2-基]丙醛將草酰氯(0.3ml，0.6mmol)的二氯甲烷(2ml)溶液在氬氣中冷卻至-63℃。用10分鐘時(shí)間加入在二氯甲烷(0.5ml)中的DMSO(0.056ml，0.8mmol)，接著用15分鐘時(shí)間加入化合物D(147mg，0.4mmol)的二氯甲烷(6ml)液使反應(yīng)溫度保持在-50℃以下。將得到的清徹溶液于-63℃攪拌50分鐘。用15分鐘時(shí)間加入三乙胺(0.25ml，1.8mmol)的二氯甲烷(1ml)溶液，保持該溶液在-50℃以下。將混合物攪拌15分鐘，隨后加入1M硫酸氫鉀(4.5ml)、水(20ml)和乙醚(60ml)。分層后將水層用半飽和碳酸氫鈉水溶液堿化，并用乙酸乙酯(3×30ml)洗滌。將合并的有機(jī)層干燥(硫酸鎂)，濃縮，得到146mg(＞99%)化合物E，為帶黃色的膠狀物。
1H-NMR;(CDCl3，270MHz) δ 9.53(1H，s)，7.33-7.12(15H，m)，6.94(1H，s)，6.76(1H，s)，2.37(2H，m)，2.22(2H，m).
F.N-[(2，3-二氯苯基)甲基]-N2-[3-((1-三苯甲基)咪唑-2-基)丙基]-L-纈氨酰胺，二鹽酸鹽化合物F按用于實(shí)施例26的化合物C的方法由化合物E和L-纈氨酸、2，3-二氯芐胺，鹽酸鹽(按用于實(shí)施例4的化合物A和B的方法由Boc-Val-OH和2，3-二氯芐胺制得)經(jīng)在反應(yīng)過程中加入3 分子篩制得。用硅膠色譜純化，(二氯甲烷∶甲醇/9∶1)，得到化合物F，為透明玻璃狀物。MS(M+H)+625+。
C.N-[(2，3-二氯芐基)甲基]-N2-[3-(1H-咪唑-2-基)丙基]-L-纈氨酰胺，二鹽酸鹽按用于實(shí)施例17的化合物D和方法由化合物F制得標(biāo)題化合物。
MS(M+H)+383+.D-18.8°(C＝0.13， 甲醇).
元素分析 C18H24N4OCl2-2.21 H2O-2 HCl理論值C，43.58;H，6.18;N，11.29.
實(shí)測(cè)值C，43.59;H，5.88;N，11.52.
實(shí)施例45 N2-[2-(1H-咪唑-5-基)乙基]-N，N-二(苯基甲基)-L-纈氨酰胺，二鹽酸鹽A.N2-[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]-N2-[2-(1H-咪唑-5-基)乙基]-N，N-二(苯基甲基)-L-纈氨酰胺將1.11g(2.0mmol)實(shí)施例30的化合物A和333mg(2.45mmol)HOAT在15mlDMF中的溶液依次用411mg(2.09mmol)二芐胺和322mg(2.56mmol)二異丙基碳化二亞胺處理。30小時(shí)后，將混合物用200ml乙酸乙酯稀釋，并用2×100ml5%磷酸二氫鈉、2×100ml5%碳酸氫鈉和2×100ml鹽水洗滌。干燥(硫酸鈉)并蒸發(fā)，得到2g泡沫狀物，將其用300mlK-60硅膠色譜(庚烷/乙酸乙酯，1/1)純化。將經(jīng)TLC檢查為純物質(zhì)的流份合并并蒸發(fā)，得到1.1g(75%)化合物A。
B.N2-[2-(1H-咪唑-5-基)乙基]-N，N-二(苯基甲基)-L-纈氨酰胺，二鹽酸鹽將化合物A(1.1g，1.5mmol)溶于25ml冷二氯甲烷中，并于25℃用25mlTFA處理。用1小時(shí)時(shí)間溫至室溫后，真空除去二氯甲烷，并將該TFA溶液于室溫靜置3小時(shí)。真空除TFA，用10ml1NHCl處理殘留物。將得到的漿液蒸發(fā)至近干，加入20ml水，并將漿液過濾。濾液用乙酸乙酯(24×50ml)提取。將水層真空蒸發(fā)至干。加入水(50ml)并蒸發(fā)4次。最后將殘留物溶于50ml水中并凍干，得到致密的顆粒狀物。將其溶于150ml水中，反復(fù)凍干，得到471mg(80%)標(biāo)題化合物，為不大致密但仍是顆粒狀的物質(zhì)。
MS(M+H)+391+.
元素分析 C24H30N4O-0.4 H2O-2 HCl理論值C，60.40;H，6.97;N，11.74;Cl，16.19.
實(shí)測(cè)值C，60.40;H，7.18;N，11.86;Cl，16.25.
實(shí)施例46 N-[(2，3-二氯苯基)甲基]-2-[[3-(1H-咪唑-4-基)丙基]氨基]-4-甲基戊酰胺，二鹽酸鹽標(biāo)題化合物按用于實(shí)施例31的方法由1-(3-氨基丙基)咪唑、4-甲基-2-氧代戊酸的鈉鹽和2，3-二氯芐胺在2步程序中制得，只是在將還原胺化混合物攪拌13小時(shí)后氫化，并在偶合反應(yīng)中用HOAT代替HOBT。
MS[M+H]+＝397.
1H(CD3OD，400MHz)δ9.04(s，H)，7.71(s，H)7.62(s，H)，7.52-7.50(d，H，J＝18MHz)，7.40-7.38(d，H，J＝19MHz)，7.32-7.28(t，H)，4.63-4.50(q，2H)，4.41(m，2H)，3.90-3.89(m，H)，3.12-2.95(m，2H)，2.34(m，2H)，1.80-1.64(m，3H)，0.99-0.93(dd，6H).
實(shí)施例47 (S)-(R＊，R＊)-1，2，3，4-四氫-2-[2-[[2-(1H-咪唑-4-基)乙基]氨基]-3-甲基-1-氧代戊基]異喹啉，二鹽酸鹽標(biāo)題化合物按用于實(shí)施例16的化合物B和C的方法由實(shí)施例5的標(biāo)題化合物制得。經(jīng)色譜純化后，將得到的粘稠油狀物由含鹽酸的甲醇溶液中蒸發(fā)的制備鹽酸鹽。將膠質(zhì)殘留物用乙酸乙酯結(jié)晶，得到膠狀固體，將其用乙醚研制，過濾，得到標(biāo)題化合物，為淡黃色粉末。
mp145°(d)MS(M+H)+341+.D-8.2°(C 0.82，甲醇).
元素分析 C20H28N4O-1.72 H2O-2 HCl
理論值C，54.06;H，7.58;N，12.61.
實(shí)測(cè)值C，54.45;H，7.62;N，12.15.
實(shí)施例48 2-[[2-(2-氨基-1-咪唑-4-基)乙基]氨基]-N-[(2，3-二氯苯基)甲基]-3-甲基丁酰胺，二鹽酸鹽A.[(2-苯基偶氮-1H-咪唑-4-基)乙基]-D，L-纈氨酸乙酯通過將290mg(4.18mmol)亞硝酸鈉(NaNO2)在1ml水中的冷卻加至冰冷卻的720mg(4.18mmol)對(duì)溴苯胺的20%HCl(7ml)溶液中制得對(duì)溴苯胺的氯化重氮物溶液。將該溶液冷卻下攪拌0.5小時(shí)后滴加至冰冷卻的1.0g(4.18mmol)實(shí)施例23的化合物A的0.25M碳酸氫鈉(168ml)溶液中。在滴加時(shí)產(chǎn)生桔紅色的沉淀物中間產(chǎn)物。將反應(yīng)混合物在冰冷卻下再攪拌2小時(shí)。濾出沉淀物，并將濾餅用水充分洗滌。將深紅色的濾餅溶于二氯甲烷中，干燥(硫酸鎂)，對(duì)該溶液進(jìn)行硅膠閃柱(50cc)色譜，以50%乙酸乙酯-己烷洗脫，得到1.0g(57%)化合物A，為亮黃色固體。
B.[(2-氨基-1H-咪唑-4-基)乙基]-D，L-纈氨酸乙酯將1.0g(2.4mmol)的化合物A在50ml含100mg氧化鉑(PtO2)催化劑的乙醇中的溶液在Parr裝置中于室溫在50psi下氫化過夜。用Celite 濾除催化劑后，將澄明無色濾液蒸發(fā)至干，得到粘稠油狀殘留物。將其溶于水中。將該溶液用乙醚洗滌2次以除去在氫化過程中釋出的苯胺。將留下的水溶液蒸發(fā)至干，并將油狀殘留物用氯仿稀釋。加入少量飽和碳酸氫鈉，攪拌混合物，同時(shí)分批再加入碳酸氫鈉固體。繼續(xù)攪拌0.5小時(shí)，加入硫酸鎂固體以除去任何剩余的水份。濾除固體，將濾餅再用氯仿充分洗滌。將濾液蒸發(fā)至干，得到帶棕色的油狀殘留物。將其在45cc硅膠柱上進(jìn)行閃色譜，以25%甲醇的氯仿溶液洗脫，得到590mg(98%)化合物B，為淡黃色泡沫狀物。
C.[(2-氨基-1H-咪唑-4-基)乙基)-D，L-纈氨酸化合物C按用于實(shí)施例16的化合物E的方法由化合物B制得，為褐色泡沫狀物。
D.2-[[2-(2-氨基-1H-咪唑-4-基)乙基]氨基]-N-[(2，3-二氯苯基)甲基]-3-甲基丁酰胺，二鹽酸鹽化合物D按用于實(shí)施例21的化合物H的方法由化合物C制得。然后將反應(yīng)溶劑蒸發(fā)，將殘留物在YMCS-10ODS，50×300mm柱上進(jìn)行制備HPLC，以0→100%溶液B梯度洗脫(A∶10%甲醇∶水+0.1%TFA，B∶10%水∶甲醇+0.1%TFA),得到褐色固體泡沫狀物。將其在YMCS-5ODS，30×250mm柱上再進(jìn)行制備HPLC，用所述梯度洗脫，得到澄清無色玻璃狀物。將其用乙醚研制，得到標(biāo)題化合物，為白色粉末，mp215°(d)。
MS(M+H)+384+.
元素分析 C17H23N5OCl2-0.88 H2O-2 HCl理論值C，43.17;H，5.70;N，14.81.
實(shí)測(cè)值C，43.28;H，5.65;N，14.53.
實(shí)施例49
N-[(2，3-二氯苯基)甲基]-N2-[2-(1H-咪唑-4-基)乙基]-D，L-纈氨酰胺，三氟乙酸鹽向?qū)嵤├?5的化合物A(85mg，0.4mmol)在60∶40DMF∶DMSO(3.2mmol)中的均勻懸浮液中依次加入2，3-二氯芐胺(70mg，0.4mmol)和DMF(0.4ml)溶液、NMM(44μl，0.4mmol)和BOP(177mg，0.4mmol)的二氯甲烷(1.6mmol)溶液。將得到的混合物于25℃靜置18小時(shí)，然后將產(chǎn)物按如下固相提取分離1)將含1.0gSCX樹脂(Varian)的固相提取筒用10ml甲醇弄濕;
2)將反應(yīng)混合物加至柱中;
3)用30ml甲醇沖洗該柱;
4)用7ml0.1N含氨甲醇沖洗該柱;
5)將該柱用7.5ml1.0N含氨甲醇洗脫，并將洗脫液收入配衡管中。將含產(chǎn)物的溶液真空濃縮得到油狀物殘留物(154mg)。將殘留物在YMCS10ODS柱(3×500mm)上進(jìn)行制備HPLC純化，用含0.1%TAF的10%→90%含水甲醇以50ml/分鐘的速率用30分鐘時(shí)間線性梯度洗脫。將含主要UV吸收峰(220mm)的流份合并并濃縮。將殘留物凍干，得到標(biāo)題化合物，為白色固體(110mg，46%)。
元素分析 C17H22N4OCl2-1.25 H2O-2 CF3CO2H理論值C，40.69;H，4.31;N，9.04;F，18.39;Cl，11.44.
實(shí)測(cè)值C，41.09;H，4.18;N，8.62;F，18.50;Cl，11.43.
實(shí)施例50 N-[(2，3-二氯苯基)甲基]-N2-[2-(1-甲基-1H-咪唑-5-基)乙基-L-纈氨酰胺，二鹽酸鹽標(biāo)題化合物用實(shí)施例34的兩步程序由實(shí)施例33的化合物B和methtriflate制得。
元素分析 C18H24N4O2Cl2-0.7 H2O-2.11 HCl理論值C，45.73;H，5.86;N，11.85;Cl，30.82.
實(shí)測(cè)值C，45.93;H，5.50;N，11.65;Cl，30.81.
實(shí)施例51 (S)-N-[[1，2，3，4-四氫-2-[N-[3-(1H-咪唑-2-基)丙基]-L-纈氨酰基]-3-異喹啉基]羰基]-L-甲硫酸氨酸，三氟乙酸鹽(1∶2)A.(S)-N-[[1，2，3，4-四氫-2-[N-[2-(1-三苯甲基咪唑-4-基)丙基]-L-纈氨?；鵠-3-異喹啉基]羰基]-L-谷氨酰胺甲酯化合物A按用于實(shí)施例6的化合物G的方法由實(shí)施例14的化合物B和實(shí)施例1的化合物D制得，為略帶黃色的油狀物(收率67%)。隨后在二氧化硅上進(jìn)行色譜純化，以乙酸乙酯∶己烷(1∶1)洗脫，然后以二氯甲烷∶甲醇(9∶1)洗脫。將其不經(jīng)再次純化而直接使用。
MS(M+H)＝772。
B.(S)-N-[[1，2，3，4-四氫-2-[N-[2-(1-三苯甲基咪唑-4-基)丙基]-L-纈氨?；鵠-3-異喹啉基]羰基]-L-谷氨酰胺甲酯向化合物A(130mg，0.169mmol)的THF(3ml)和甲醇(1ml)溶液中加入氫氧化鋰(LiOH)(1M，0.2ml，0.2mmol)。將溶液攪拌2小時(shí)，隨后加入1NHCl水溶液(0.2ml，0.2mmol)。將溶液濃縮至干，用1∶1的二氯甲烷∶甲醇(3×20ml)混合物洗滌，過濾并濃縮，得到125mg(98%)化合物B，為不透明的玻璃狀物。
MS(M+H)+758+。
C.(S)-N-[[1，2，3，4-四氫-2-[N-[3-(1H-咪唑-2-基)丙基]-L-纈氨?；鵠-3-異喹啉基]羰基]-L-甲硫酸氨酸，三氟乙酸鹽(1∶2)標(biāo)題化合物按用于實(shí)施例2的化合物F的方法由化合物B制得，收率為54%，為白色粉末。
MS(M-H)-514-.
元素分析 C26H37N6O4S-0.35 H2O-2.3 CF3CO2H理論值C，46.87;H，5.14;N，8.93;S，4.09;F，16.72.
實(shí)測(cè)值C，46.92;H，5.05;N，8.83;S，4.11;F，16.65.
實(shí)施例52-148見下表。
實(shí)施例52-72A.N-[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]-N-[1-三苯甲基咪唑-4-基乙基]-L-纈氨酸，鈉鹽將氫氧化鈉(4.7ml1.0N水溶液，4.7mmol)加至實(shí)施例30的化合物A(2.61g，4.7mmol)的甲醇(10ml)溶液中。將得到的混合物攪拌5分鐘，然后真空濃縮。將殘留物真空干燥，得到化合物A，為白色粉末。無需純化直接作用。
B.實(shí)施例52-72化合物A與各種胺的偶聯(lián)用標(biāo)準(zhǔn)的二異丙基碳化二亞胺(DIC)中介偶聯(lián)來完成。該方法通過采用Zymark BenchmateTM自動(dòng)工作站(robotic workstation)來自動(dòng)進(jìn)行酸-胺偶聯(lián)和對(duì)得到的酰胺產(chǎn)物進(jìn)行純化。用IBM PC操縱Zymark BenchmateTM工作站的操作程序并記錄BenchmateTM的步驟。制備實(shí)施例52-72的化合物的方案如下16×100mm試管中裝入0.075mmol胺成分并用塑料蓋/柱支加蓋上。若胺以游離堿形式使用，則BenchmateTM對(duì)各管依次完成下列操作1.加0.3ml二氯甲烷;
2.加0.3ml的0.25M化合物A的DMF溶液(0.075mmol);
3.加0.3ml的0.3MHOAt的DMF溶液(0.09mmol);
4.以速度3渦旋30秒鐘;
5.加0.3ml的0.3MDIC的二氯甲烷溶液(0.09mmol);
6.以速度3渦旋30秒鐘;
7.注入5ml二氯甲烷洗滌。
若胺以鹽酸鹽形式使用，則BenchmateTM在各管中依次完成下列操作1.加0.3ml二氯甲烷;
2.加0.3ml(7.6mg，0.075mmol)的0.25M三乙胺的二氯甲烷溶液;
3.通過以速度3渦旋30秒鐘將管中的內(nèi)容物混合;
4.加0.3ml(45.8mg，0.075mmol)的0.25M化合物A的DMF溶液;
5.加0.30ml(12.2mg，0.090mmol)的0.30MHOAT的DMF溶液;
6.通過以速度3渦旋30秒鐘將管中內(nèi)容物混合;
7.加0.30ml(11.3mg，0.090mmol)的0.30MDIC的二氯甲烷溶液;
8.通過以速度3渦旋30秒鐘將管中內(nèi)容物混合;
9.注入5ml二氯甲烷洗滌。
對(duì)于這兩種偶聯(lián)方案，在將2.0ml TFA和0.2ml三乙基硅烷人工加至各管中后，使各管靜置24小時(shí)。4小時(shí)后，將試管在Savant Speed-VacTM中真空濃縮。將各管放回至BenchmateTM中，并將內(nèi)容物用離子交換色譜在由使用以下方案的BenchmateTM工作站中介的固相提取筒中純化1.加5ml1∶1甲醇∶二氯甲烷至試管中;
2.以速度3渦旋60秒鐘;
3.用10ml1∶1甲醇∶二氯甲烷以0.15ml/秒的速率弄濕含1.0gSCX樹脂的Varian固相提取筒;
4.將反應(yīng)內(nèi)容物以0.02ml/秒的速率加至柱中;
5.用15ml1∶1甲醇∶二氯甲烷以0.10ml/秒的速率沖洗柱;
6.用7.5ml甲醇以0.10ml/秒的速率沖洗柱;
7.用5ml0.01N氨的甲醇溶液以0.10ml/秒的速率沖洗程;
8.用7.5ml1.0N氨的甲醇溶液以0.05ml/秒的速率洗脫柱至配衡的接收管中;
9.注入5ml1∶1甲醇∶二氯甲烷洗滌。
然后將接收管的內(nèi)容物在Savant Speed-VacTM中真空濃縮。用HPLC測(cè)定產(chǎn)物的均一性，用電子噴霧式質(zhì)譜(electrospray mass spec-troscopy)確認(rèn)同一性。
實(shí)施例78-83實(shí)施例73-83的化合物按用于實(shí)施例52-72的方法由化合物A制得。所有化合物經(jīng)制備HPLC在以下條件下進(jìn)一步純化;30×250mmYMCS5ODS柱，用含0.1%TFA的10→90%含水甲醇以25ml/分梯度洗脫。用在220nm處的紫外吸收度監(jiān)測(cè)各流份。將含目標(biāo)產(chǎn)物(通常為主峰)的流份合并，真空濃縮，得到實(shí)施例73-83的化合物，為玻璃態(tài)油狀物。用分析HPLC測(cè)定其均一性，用電子噴霧式質(zhì)子確認(rèn)同一性。
實(shí)施例84-100由實(shí)施例20的化合物E制備實(shí)施例84-100的化合物的方案如下將0.75mmol胺成分裝入16×100mm管中并用塑料蓋/柱支架松松地蓋上。然后用BenchmateTM對(duì)各管完成下列操作1)加0.2ml二氯甲烷;
2)加0.3ml(0.075mmol)的0.25M實(shí)施例20的化合物E的DMF溶液;
3)通過以速度3渦旋30秒鐘將管中內(nèi)容物混合;
4)加0.33ml(0.08mmol)的0.25MBOP的DMF溶液;
5)通過以速度3渦旋轉(zhuǎn)30秒鐘將管中內(nèi)容物混合;
6)注入5ml二氯甲烷洗滌。
20小時(shí)后，將反應(yīng)混合物離子交換色譜在由使用以下程序的BenchmateTM自動(dòng)工作站中介的固相提取筒中純化1)用10ml甲醇以0.25ml/秒的速率并弄濕Varian固相提取柱(500mg，SCX陽離子交換);
2)將反應(yīng)內(nèi)容物以0.05ml/秒的速率加至柱中;
3)用2×10ml甲醇以0.1ml/秒的速率洗柱;
4)用5ml1M氨的甲醇溶液以0.1m/秒的速率洗柱;
5)用5ml用1M氨的甲醇溶液以0.1m/秒的速率洗脫柱，并收集至配衡的接收管中。
所和溶液/溶劑輸送均繼之以1.8ml的空氣，并且在將反應(yīng)內(nèi)容物加至離子交換柱中后利用10秒鐘推送延遲(pushdelay)。
將產(chǎn)物溶液在Savant Speed VacTM(約2mmHg，20小時(shí))上濃縮，得到產(chǎn)物。
實(shí)施例101-108實(shí)施例101-108的化合物按用于實(shí)施例84-100的化合物的方法來制備，只是在偶聯(lián)程序的步驟5和6之間要插入以下步驟5b.加0.3ml(7.5mg，0.075mmol)的0.25M三乙胺;和5c.通過以速度3渦旋30秒鐘將管中內(nèi)容物混合;
并且在純化程序的步驟1之前要增加以下步驟1a.向反應(yīng)混合物中加入0.2ml甲醇;和1b.通過以速度3渦旋30秒鐘將管中內(nèi)容物混合。
實(shí)施例109-131A.N-[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]-N-[咪唑-4-基乙基]-L-纈氨酸，四丁基銨鹽向?qū)嵤├?6的化合物E(778mg，2.5mmol)的甲醇(3.0ml)溶液中加入1.0M氫氧化四丁基銨(2.5ml，2.5ml，在甲醇中)，將混合物真空濃縮。將殘留物溶于二氯甲烷(10ml;1)中，用0.5μm過濾板過濾。將溶液濃縮并溶于10ml二氯甲烷中，得到0.25M化合物A溶液。
B.實(shí)施例109-131在16×100mm管中裝入0.8mg(0.075mmol)胺成分并用塑料蓋/柱支架松松蓋上。若胺以游離堿形式使用，則BenchmateTM對(duì)各管依次完全下列操作1.加0.3ml二氯甲烷;
2.通過以速度3渦旋30秒鐘將管中的內(nèi)容物混合;
3.加0.3ml(59.5mg，0.075mmol)的0.25M化合物A的二氯甲烷溶液;
4.通過以速度3渦旋30秒鐘將管中內(nèi)容物混合;
5.加0.36ml(39.8mg，0.090mmol)的0.25MBOP的二氯甲烷溶液;
6.通過以速度3渦旋30秒鐘將管中的內(nèi)容物混合;
7.注入5ml二氯甲烷洗滌。
若胺以鹽酸鹽形式使用，則BemhmateTM對(duì)各管依次完成下列操作1.加0.3mlDMF;
2.通過以速度了渦度30秒鐘將管中內(nèi)容物混合;
3.加0.3ml(7.6mg，0.075mmol)的0.25M三乙胺溶液;
4.通過以速度3渦旋30秒鐘將管中內(nèi)容物混合;
5.加0.3ml(59.5mg，0.075mmol)的0.25M化合物A的二氯甲烷溶液;
6.通過以速度3渦旋30秒鐘將管中內(nèi)容物混合;
7.加0.33ml(36.4mg，0.082mmol)的0.25MBOP的DMF溶液;
8.通過以速度3渦旋30秒鐘將管中內(nèi)容物混合;
9.注入5mlDMF洗滌。
對(duì)于這兩種偶聯(lián)方案而言，20小時(shí)后，將反應(yīng)容器移至通風(fēng)櫥中，加入TFA(1ml)。2小時(shí)后，將反應(yīng)混合物在Savant Speed VacTM(約2mmHg，20小時(shí))上濃縮。然后用離子交換色譜在由使和以下程序的BenchmateTM自動(dòng)工作站中介的固相提取筒中純化1.將1.0ml甲醇加至反應(yīng)混合物中;
2.向反應(yīng)混合物中加入0.2ml二氯甲烷;
3.通過以速度3渦旋60秒將管中內(nèi)容物混合;
4.用10ml甲醇以0.25ml/秒的速率弄濕Varian固相提取柱(1.0g，SCX陽離子交換);
5.將反應(yīng)內(nèi)容物以0.05ml/秒的速率加至柱中;
6.用3×10ml甲醇以0.1ml/秒的速度洗滌柱;
7.用5ml1M氨的甲醇溶液以0.1ml/秒的速率洗脫柱并收集至配衡接收管中。
所有溶液/溶劑輸送均繼之以1.8ml的空氣，并且在將反應(yīng)內(nèi)容物加至離子交換中后利用10秒鐘推送延遲。
將反應(yīng)產(chǎn)物在Savant Speed VacTM(約2mmHg，20小時(shí))上濃縮。將實(shí)施例109-112和127-131的化合物用制備HPLC在YMC ODS-A柱中純化(S-5mm，250×30mm，λ＝220，10-90%含水甲醇，0.1%TFA，30分鐘梯度洗脫)并制成TFA鹽。
實(shí)施例132-140實(shí)施例30的化合物A與各種胺的偶聯(lián)用PyBrop中介偶聯(lián)來完成。該方法通過采用與ShimdazuLC-8制備HPLC相連的ShimdazuSILIOA自動(dòng)進(jìn)樣工作站來自動(dòng)進(jìn)行酸-胺偶聯(lián)并對(duì)得到的酰胺產(chǎn)物進(jìn)行純化。該工作站使用ShimdazuSCL-10A系統(tǒng)控制器來擬定程序的建立用于試劑混合的預(yù)處理文件。由實(shí)施例30的化合物A和相應(yīng)的胺制備酰胺的程序如下在4ml玻璃的自動(dòng)取樣器小瓶中裝入0.2mmol胺成分。用外包特氟隆的橡膠隔片蓋上。然后ShimadzuSIL10A依次對(duì)各瓶完成下列操作1.加0.20ml的0.5M實(shí)施例30的化合物A(0.10mmol)的二氯甲烷溶液;
2.加0.40ml含0.5MDMAP(0.2mmol)和1.0M三乙胺(0.4mmol)的二氯甲烷溶淮;
3.加0.25ml的1.0MPyBrop的三氯甲烷溶液(0.25mmol);
4.通過針抽吸混合3次;
5.注入;2ml乙腈洗滌。
在所有試劑加完后，將裝有反應(yīng)瓶的架移至軌通道搖動(dòng)器上，并將這些小瓶以200轉(zhuǎn)/分搖動(dòng)18小時(shí)。然后將TFA(1.0ml)和0.075ml三乙基硅熔手工加至各瓶中。4小時(shí)后，去掉瓶蓋，將內(nèi)容物在Sav-antSpeed-Vac中真空濃縮，將瓶中的殘留物溶于1.0mlTHF和1.0ml甲醇中，將溶液自動(dòng)取樣器依次注入Shimadzu制備HPLC中。在YMCS5ODS柱(30×250mm)上進(jìn)行色譜，用含0.1%TFA的10%→90%含水甲醇以25ml/分線性梯度洗脫30分鐘。用在220mm處的紫外吸收度監(jiān)測(cè)各流份。將含目標(biāo)產(chǎn)物(用質(zhì)譜測(cè)定)的流份在Speed-Vac中濃縮，得到實(shí)施例132-140的化合物。
實(shí)施例141-148A.(3S)-1，2，3，4-四氫-2-[N2-[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]-N2-[2-(1-三苯甲基咪唑-4-基乙基]-L-纈氨酰胺]-3-異喹啉羧酸甲酯將HOAT(1.31g，9.36mmol)在氬氣中加至實(shí)施例30的化合物A(3.55g，6.42mmol)、L-1，2，3，4-四氫異喹啉-3-羧酸甲酯(4.38g，19.2mmol)、EDC(1.84g，9.63mmol)和DIEA(5.59ml，32.1mmol)在DMF(26ml)中的漿液中。16小時(shí)后，將反應(yīng)混合物用碳酸氫鈉(20ml)、10%LiCl(10ml)和乙酸乙酯(75ml)稀釋。水層用乙酸乙酯(2×75ml)提取。合并的有機(jī)層用碳酸氫鈉(30ml)和LiCl(2×30ml)洗滌。用硫酸鎂干燥，過濾并濃縮。將殘留物用硅膠柱閃色譜純化，用9/1、8/2、7/3、6/4己烷/乙酸乙酯階梯式梯度洗脫。將分出的產(chǎn)物溶于乙酸乙酯中，用10%HCl洗滌該溶液。將有機(jī)層濃縮，得到化合物A，為淡黃色油狀物(2.75g，59%)。
B.(3S)-1，2，3，4-四氫-2-[N2-[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]-N2-[2-(1-三苯甲基咪唑-4-基乙基]-L-纈氨酰胺]-3-異喹啉羧酸將1NNaOH(9.1ml，9.1mmol)加至化合物A(2.75g，3.78mmol)的甲醇/THF(18/13ml)溶液中。攪拌15小時(shí)后，將反應(yīng)混合物用乙酸乙酯(30ml)稀釋，并用1NHCl(5ml)中和。水層用乙酸乙酯(2×100ml)提取。將合并的有機(jī)層用硫酸鎂干燥，過濾濃縮，得到的化合物B。為淡黃色油狀物(2.56g，100%)。
在16×100mm管中裝入0.075mmol胺并用塑料蓋/柱支架松松地蓋上。然后Benchmate對(duì)各管完成下列操作1.加0.3ml二氯甲烷;
2.加0.3ml(53.4mg，0.075mmol)的0.25M化合物B的二氯甲烷溶液;
3.加0.3ml(72.2mg，0.090mmol)的0.30MHOAT的DMF溶液;
4.通過以速度3渦旋30秒鐘將管中內(nèi)容物混合;
5.加0.30ml(11.3mg，0.090mmol)的0.30MDIC的二氯甲熔溶液;
6.通過以速度3渦旋30秒鐘將管中內(nèi)容物混合;
7.注入5ml二氯甲烷洗滌。
20小時(shí)后，將反應(yīng)容器移至風(fēng)櫥中，加入TFA(1.5ml)。使混合物靜置20分鐘。加入三乙基硅烷(150ml)。24小時(shí)后，將混合物Savant Speed Vac上濃縮(約2mmHg，72小時(shí))。殘留物用離子交換色譜在由使用以下程序的Benchmate 自動(dòng)工作站中介的固相提取筒中純化1.加5.0ml甲醇/二氯甲烷(1∶1);
2.通過以速度3渦旋60秒鐘將管中內(nèi)容物混合;
3.用10ml甲醇/二氯甲烷以0.15ml/秒的速率弄濕Varian固相提取柱(1.5gSCX陽離子交換);
4.將反應(yīng)內(nèi)容物以0.02ml/秒的速率加至柱中;
5.用3×7.5ml甲醇/二氯甲烷(1∶1)以0.1ml/秒洗滌柱子;
6.用0.01mM氨的甲醇溶液洗滌柱子;
7.用7.5ml1M氨的甲醇溶液以0.095ml/秒的速度洗脫柱子并收集入配衡接收管。
所有溶液/溶劑輸送均繼之以1.0ml空氣，并且在將反應(yīng)內(nèi)容物加至離子交換柱中后利用5秒鐘推送延遲，將產(chǎn)物溶液在SaventSpe-edVac(約2mmHg，20小時(shí))上濃縮，得到實(shí)施例141-148的化合物。對(duì)于實(shí)施例148的化合物，將三乙胺(0.3ml，0.25M，0.075mmol)加至反應(yīng)混合物中，這是因?yàn)榧琢虬彼崞S磺胺鹽酸鹽被用作原料胺。













權(quán)利要求
1.式Ⅰ化合物或其對(duì)映體、非對(duì)映體、藥學(xué)上可接受的鹽、前體藥物或溶劑化物；式Ⅰ如下 式中 J、K和L各自獨(dú)立地是N，NR9，O，S或CR10，前提是J，K和L中僅有一個(gè)可以是O或S，并且J或L中至少有一個(gè)必須是N，NR9，O或S以形成稠合的五元雜環(huán)；J與K或K與L之間的鍵也可形成稠合到該稠合的五元雜環(huán)上的苯環(huán)的一條邊；Q是芳基；Q′，A1和A2各自獨(dú)立地是H，烷基，取代的烷基，苯基或取代的苯基；G3是R11,-C(O)OR11,-C(O)NR11R12,5-四唑基，-C(O)N(R13)OR11;-C(O)NHSO2R14或-CH2OR11;G4是 ，它在1，2，4或5位連接并且環(huán)上的任意空位可選地被下列基團(tuán)取代鹵素、具有1-20個(gè)碳原子的烷基或取代的烷基、烷氧基、芳基、芳烷基、羥基、烷?；?、烷酰氧基、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、烷酰基氨基、巰基、烷硫基、烷硫羰基、烷基磺?；?、亞磺酰氨基、硝基、氰基、羧基、氨基甲酰基、N-羥基氨基甲?；-烷基氨基甲?；?、N-二烷基氨基甲?；?、烷氧羰基、苯基、取代的苯基或者這些基團(tuán)的組合；Y和Z各自獨(dú)立地是-CH2-或-C(O)-；R1-R14各自獨(dú)立地是H或具有1-20個(gè)碳原子的烷基；R7、R8和R14也可以是芳基或芳烷基，R3、R9、R11、R12和R13也可以是芳烷基；m、n和p各自獨(dú)立地是0、1或2；q是0或1-4的整數(shù)；且虛線代表可選的雙鍵。
2.權(quán)利要求1的化合物，其中 G4在1，2，4或5位連接并且環(huán)上的任意空位可選地被具有1-20個(gè)碳原子的烷基或芳烷基取代;以及A1和A2各自獨(dú)立地為H或D-，L-或D，L--CH3，-CH(CH3)2，-CH2CH(CH3)2，-CH(CH3)CH2CH3，-C(CH3)3，-CH2OH，-CH2CH2OH， -CH2CH2CH2OH，-CH(OH)CH3， -CH2C(O)OH，-CH2CH2C(O)OH，-CH2C(O)NH2，-CH2CH2C(O)NH2，-CH2CH2OCH3，-CH2CH2CONR15R16，-CH2SH，-CH2CH2SH，-CH2CH2SOCH3，-CH2CH2SO2CH3或-CH2CH2SCH3，其中R15和R16各自獨(dú)立地是氫或烷基，或者R15和R16與相連的N原子一起形成取代或未取代的5-7元飽和環(huán)。
3.權(quán)利要求1的化合物，其中G2是
4.權(quán)利要求1的化合物，其中A1和A2各自獨(dú)立地是氫或者D-，L-或D，L--CH3，-CH(CH3)2，-CH2CH(CH3)2，-CH(CH3)CH2CH3，-C(CH3)3，-CH2OH，-CH2CH2OH，-CH2CH2CH2OH，-CH(OH)CH3， -CH2C(O)OH，-CH2CH2C(O)OH，-CH2C(O)NH2，-CH2CH2C(O)NH2，-CH2CH2OCH3，-CH2CH2CONR15R16，-CH2SH，-CH2CH2SH，-CH2CH2SOCH3，-CH2CH2SO2CH3或-CH2CH2SCH3，其中R15和R16各自獨(dú)立地是氫或烷基，或者R15和R16與相連的N原子一起形成取代或未取代的5-7元飽和環(huán)。
5.權(quán)利要求1的化合物，其中
6.權(quán)利要求1的化合物，其中A2是L--CH2CH2SCH3，-CH2CH2OH，-CH2CH2CH2OH，-CH2CH2C(O)NH2，-CH2CH2OCH3，-CH2CH2CONR15R16，-CH2CH2SH，-CH2CH2SOCH3，或-CH2CH2SO2CH3.
7.權(quán)利要求1的化合物，其中G2是 并且取代或未取代的稠合的五元雜環(huán)是
8.權(quán)利要求1的化合物，其中G4是 它在1，2，4或5位連接并且環(huán)上的任意空位可選地被具有1-20個(gè)碳原子的烷基或芳烷基取代。
9.權(quán)利要求1的化合物，其中G2是
10.權(quán)利要求1的化合物，其中G2是 -CH(CH3)CH2CH3，-CH2OH或-CH(OH)CH3;A2是-L--CH2CH2SCH3，-CH2CH2OH，-CH2CH2CH2OH，-CH2CH2C(O)NH2，-CH2CH2OCH3，-CH2CH2CONR15R16，-CH2CH2SH，-CH2CH2SOCH3或-CH2CH2SO2CH3;且R1，R2，R3和R4是H。
11.權(quán)利要求1的化合物，它選自(R＊)-N-[[1，2，3，4-四氫-2-[N-[2-(1H-咪唑-4-基乙?；?]-L-纈氨酰]-3-異喹啉基)羰基]-L-甲硫氨酸，(R＊)-N-[[1，2，3，4-四氫-2-[N-(1H-咪唑-4-基羰基)]-L-纈氨酰]-3-異喹啉基]羰基]-L-甲硫氨酸，(R＊)-N-[[1，2，3，4-四氫-2-[N-(2-(1H-咪唑-4-基)乙基-L-纈氨酰]-3-異喹啉基)羰基]-L-甲硫氨酸，N-[(2，3-二氯苯基)甲基]-N2-(1H-咪唑-4-基乙?；?-L-異亮酰胺，(S)-N-[2-甲基-1-[(1，2，3，4-四氫-2-異喹啉基)羰基]丁基]-1H-咪唑-4-乙酰胺，(R＊)-N-2-[[1，2，3，4-四氫-2-[N-(1H-咪唑-2-基甲基)-3-甲基-L-纈氨酰]-3-異喹啉基]羰基]-L-谷氨酰胺，(R＊)-N-[[1，2，3，4-四氫-2-[N-[(1-甲基-1H-咪唑-4-基)乙?；鵠-3-甲基-L-纈氨酰]-3-異喹啉基]羰基]-L-谷氨酰胺，(R＊)-N2-[[1，2，3，4-四氫-2-[N-[3-(1H-咪唑-4-基)-1-氧代丙基]-N-甲基-L-纈氨酰]-3-異喹啉基]羰基]-L-谷氨酰胺，(R＊)-N-[[1，2，3，4-四氫-2-[N-(1H-咪唑-4-基甲基)-L-纈氨酰]-3-異喹啉基]羰基]-L-甲硫氨酸，(S)-N-[[1，2，3，4-四氫-2-[N-(1H-咪唑-4-基乙?；?-3-甲基-L-纈氨酰]-3-異喹啉基]羰基]-L-谷氨酰胺，(S)-N-[[1，2，3，4-四氫-2-[N-(1H-咪唑-4-基乙?；?-3-甲基-L-纈氨酰]-3-異喹啉基]羰基]-L-谷氨酸，N2-[[(S)-2-[N-[2-氨基-2-(1H-咪唑-4-基)乙基]-3-甲基-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]羰基]-L-谷氨酰胺，(S，S)-N2-[[2-[[2-氨基-3-(1H-咪唑-4-基)-1-氧代丙基]-3-甲基-L-纈氨酰]-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉基]-羰基]-L-谷氨酰胺，(S)-N-[[1，2，3，4-四氫-2-[N-[2-(1H-咪唑-4-基)丙基]-3-甲基-L-纈氨酰]-3-異喹啉基]羰基]-L-谷氨酰胺，(S)-N-[[1，2，3，4-四氫-2-[N-[2-(1H-咪唑-4-基)乙基]-3-甲基-L-纈氨酰-3-異喹啉基]羰基]-L-谷氨酰胺，(S)-1，2，3，4-四氫-2-[2-[[2-(1H-咪唑-4-基)乙基]氨基]-3-甲基-1-氧代丁基]異喹啉，(S)-3-[[[(2，3-二氯苯基)甲基][2-[[2-(1H-咪唑-4-基)乙基)氨基]-3-甲基-1-氧代丁基]氨基]甲基]苯甲酸，N-[(2，3-二氯苯基)甲基)-N2-[2-(1H-咪唑-4-基)乙基-L-纈氨酰胺，N-[(2，3-二氯苯基)甲基]-N2-[2-(1H-咪唑-2-基乙基)-L-纈氨酰胺，[S-(R＊，R＊)]-1，2，3，4-四氫-2-[N-(1H-咪唑-4-基乙?；?-L-纈氨酰]-N-[3-(甲磺?；?-1-[(苯基甲氧基)甲基]丙基]-3-異喹啉甲酰胺，N-[(2，3-二氯苯基)甲基)-N2-[2-(2-甲基-1H-咪唑-4-基)乙基]-L-纈氨酰胺，N-[(2，3-二氯苯基)甲基)-N2-[2-(5-甲基-1H-咪唑-4-基)乙基]-L-纈氨酰胺，(3S)-1，2，3，4-四氫-2-[N-[2-(1H-咪唑-4-基)乙基]-D，L-纈氨酰]-N-[3-(甲磺?；?丙基]-3-異喹啉甲酰胺，(3S)-N-[[-1，2，3，4-四氫-2-[N-[2-(1H-咪唑-4-基)乙基]-D，L-纈氨酰]-3-異喹啉基]羰基]-3-[(甲磺?；?甲基]-L-丙氨酸甲酯，(3S)-N-[[-1，2，3，4-四氫-2-[N-[2-(1H-咪唑-4-基)乙基]-D，L-纈氨酰]-3-異喹啉基]羰基]-3-[(甲磺?；?甲基]-L-丙氨酸，N-[(S)-2-[[2-[[2-(1H-咪唑-4-基)乙基]氨基]-3-甲基丁基]氨基-1-氧代-3-苯基丙基]-3-[(甲磺酰基)甲基]-L-丙氨酸，N-[(2，3-二氯苯基)甲基]-2-[[2-(1H-咪唑-4-基)乙基]氨基]乙酰胺，N-[(2，3-二氯苯基)甲基]-N2-[2-(1-甲基-1H-咪唑-5-基)乙基]-D，L-纈氨酰胺，N-[(2，3-二氯苯基)甲基]-N2-[2-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)乙基]-D，L-纈氨酰胺，N-乙基-N2-[2-(1H-咪唑-4-基)乙基]-N-[(4-甲氧基苯基)甲基]-L-纈氨酰胺，N-[(2，3-二氯苯基)甲基]-2-[[2-(1H-咪唑-4-基)乙基]氨基]-3-甲基戊酰胺，N-[(2，3-二氯苯基)甲基]-2-[[2-(1H-咪唑-4-基)乙基]氨基]-4-苯基丁酰胺，N-[(2，3-二氯苯基)甲基]-N2-[2-(1-(苯基甲基)-(1H-咪唑-5-基)]乙基]-L-纈氨酰胺，N-[(2，3-二氯苯基)甲基]-N2-[2-[1-(3-甲基丁基)-1H-咪唑-5-基]乙基]-L-纈氨酰胺，N-[2-(1H-咪唑-4-基)乙基]-N，N-二(苯基甲基)-D，L-纈氨酰胺，N-[(2，3-二氯苯基)甲基]-N2-[2-[1-(2-苯基乙基)-1H-咪唑-5-基]乙基]-L-纈氨酰胺，N-[(2，3-二氯苯基)甲基]-N2-[2-(1-十二烷基-1H-咪唑-5-基)乙基]-L-纈氨酰胺，N-[(2，3-二氯苯基)甲基]-N2-[2-(咪唑-1-基)乙基]-D，L-纈氨酰胺，N2-[2-(1H-咪唑-5-基)乙基]-N-(1-甲基乙基)-N-(苯基甲基)-L-纈氨酰胺，N-[(2，3-二氯苯基)甲基]-N2-[2-(1H-咪唑-5-基)乙基]-N-(1-甲基乙基)-L-纈氨酰胺，N-[(2，3-二氯苯基)甲基]-N2-[2-(1H-咪唑-5-基)乙基]-N-(苯基甲基)-L-纈氨酰胺，(S)-3-[[2-[[2-(1H-咪唑-4-基)乙基]氨基]-3-甲基-1-氧代丁基](苯基甲基)氨基]甲基]苯甲酸，N-乙基-N2-[2-(1H-咪唑-4-基)乙基]-N-(苯基甲基)-D，L-纈氨酰胺，N-[(2，3-二氯苯基)甲基]-N2-[3-(1H-咪唑-2-基)丙基]-L-纈氨酰胺，N2-[2-(1H-咪唑-5-基)乙基]-N，N-二(苯基甲基)-L-纈氨酰胺，N-[(2，3-二氯苯基)甲基]-2-[[3-(1H-咪唑-4-基)丙基]氨基]-4-甲基戊酰胺，[(S)-(R＊，R＊)]-1，2，3，4-四氫-2-[2-[[2-(1H-咪唑-4-基)乙基]氨基]-3-甲基-1-氧代戊基異喹啉，2-[[2-(2-氨基-1H-咪唑-4-基)乙基]-N-[(2，3-二氯苯基)甲基]-3-甲基丁酰胺，N-[2，3-二氯苯基)甲基]-N2-[2-(1H-咪唑-4-基)乙基]-D，L-纈氨酰胺，N-[(2，3-二氯苯基)甲基]-N2-[2-(1-甲基-1H-咪唑-5-基)乙基]-L-纈氨酰胺，(S)-N-[[1，2，3，4-四氫-2-[N-[3-(1H-咪唑-2-基)丙基]-L-纈氨酰基]-3-異喹啉基]羰基]-L-甲硫氨酸，
12.抑制法呢基蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移酶的方法，包括給予哺乳類受治療者以法呢基蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移酶抑制有效量的權(quán)利要求1化合物。
13.抑制異戊烯基轉(zhuǎn)移酶的方法，包括給予哺乳類受治療者以異戊烯基轉(zhuǎn)移酶抑制有效量的權(quán)利要求1化合物。
14.抑制腫瘤的方法，包括給予哺乳類受治療者以腫瘤抑制有效量的權(quán)利要求1化合物。
15.治療與通過Ras產(chǎn)生作用的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通道有關(guān)的疾病的方法，包括給予哺乳類受治療者以治療所述疾病有效量的權(quán)利要求1化合物。
16.治療與被酶-法呢基蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移酶轉(zhuǎn)譯后修飾的蛋白質(zhì)有關(guān)的疾病的方法，包括給予哺乳類受治療者以治療所述疾病有效量的權(quán)利要求1化合物。
17.治療與被酶-牻牛兒基牻牛兒基蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移酶轉(zhuǎn)譯后修飾的蛋白質(zhì)有關(guān)的疾病的方法，包括給予哺乳類受治療者以治療所述疾病有效量的權(quán)利要求1化合物。
18.式Ⅰ化合物或其對(duì)映體、非對(duì)映體、藥學(xué)上可接受的鹽、前體藥物或溶劑化物;式Ⅰ如下 式中， J、K和L各自獨(dú)立地是N，NR9，O，S或CR10，前提J，K和L中僅有一個(gè)可以是O或S，并且J或L中至少有一個(gè)必須是N，NR9，O或S以形成稠合的五元雜環(huán);J與K或K與L之間的鍵也可形成稠合到該稠合的五元雜環(huán)上的苯環(huán)的一條邊，Q是芳基;Q′，A1和A2各自獨(dú)立地是H，烷基，取代的烷基，苯基或取代的苯基;G3是、R11，-C(O)OR11，-C(O)NR11R12，5-四唑基，-C(O)N(R13)OR11，-C(O)NHSO2R14或-CH2OR11;G4是 ，它在1，2，4或5位連接并且上的任意空位可選地被下列基團(tuán)取代鹵素、具有1-20個(gè)碳原子的烷基或取代的烷基、烷氧基、芳基、芳烷基、羥基、烷?；⑼轷Ｑ趸?、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、烷?；被?、巰基、烷硫基、烷硫羰基、烷基磺酰基、亞磺酰氨基、硝基、氰基、羰基、氨基甲酰基、N-羥基氨基甲?；?、N-烷基氨基甲?；?、N-二烷基氨基甲?；⑼檠豸驶?、苯基取代的苯基或者這些基團(tuán)的組合;Y和Z各自獨(dú)立地是-CH2-或-C(O)-;R1-R14各自獨(dú)立地是H或具有1-20個(gè)碳原子的烷基;R7、R8和R14也可以是芳基或芳烷基，R9、R11、R12和R13也可以是芳烷基;m，n是p各自獨(dú)立地是0、1或2;q是0或1。
19.式Ⅰ化合物或其對(duì)映體、非對(duì)映體、藥學(xué)上可接受的鹽、前體藥物或溶劑化物;式Ⅰ如下 J、K和L各自獨(dú)立地是N，NR9，O，S或CR10，前提是J，K和L中僅有一個(gè)可以是O或S，并且J或L中至少有一個(gè)必須是N，NR9，O或S以形成稠合的五元雜環(huán);J與K或K與L之間的鍵也可形成稠合到該稠合的五元雜環(huán)上的苯環(huán)的一條邊。Q是芳基;Q1，A1和A2各自獨(dú)立地是H，烷基，取代的烷基，苯基或取代的苯基;G3是R11，-C(O)OR11，-C(O)NR11R12，5-四唑基，-C(O)N(R13)OR11，-C(O)NHSO2R14或-CH2OR11;G4是 ，它在1，2，4或5位連接并且環(huán)上的任意空位可選地被下列基團(tuán)取代鹵素、具有1-20個(gè)碳原子的烷基或取代的烷基、烷氧基、芳基、芳烷基、羥基、烷酰基、烷酰氧基、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、烷酰基氨基、巰基、烷硫基、烷硫羰基、烷基磺?；喕酋０被?、硝基、氰基、羧基、氨基甲?；?、N-羥基氨基甲?；?、N-烷基氨基甲?；?、N-二烷基氨基甲?；?、烷氧羰基、苯基、取代的苯基或者這些基團(tuán)的組合;Y和Z各自獨(dú)立地是-CH2-或-C(O)-;R1-R14各自獨(dú)立地是H或具有1-20個(gè)碳原子的烷基;R7、R8和R10也可以是芳基或芳烷基，R9、R11、R12和R13也可以是芳烷基;m，n是p各自獨(dú)立地是0、1或2;q是0或1;且虛線代表可選的雙鍵。
全文摘要
式I化合物或其對(duì)映體、非對(duì)映體、藥學(xué)上可接受的鹽、前體藥物或溶劑化物能夠有效地抑制法呢基轉(zhuǎn)移酶；式I如上(其中各基團(tuán)定義見說明書)。
文檔編號(hào)C07K5/062GK1112117SQ95103978
公開日1995年11月22日 申請(qǐng)日期1995年3月31日 優(yōu)先權(quán)日1994年3月31日
發(fā)明者J·T·亨特 申請(qǐng)人:布里斯托爾-邁爾斯斯奎布公司