一種從鮮荷葉中同步分離荷葉黃酮和葉綠素的方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種從鮮荷葉中同步分離荷葉黃酮和葉綠素的方法，包括如下步驟：a、將鮮荷葉和濃度90-95%乙醇加入提取罐中，于30-80℃提取2-4次，每次提取1-2小時(shí)，合并提取液；b、向提取液中加入石油醚，攪拌靜置，得到萃取液層和萃余液層；c、將所述步驟b得到的萃取液進(jìn)行減壓濃縮，得到綠色油狀液體；d、將步驟b得到的萃余液通過超濾膜超濾，得到通過超濾膜的濃縮液；e、將步驟d得到的濃縮液加入純凈水稀釋，將稀釋后的溶液過大孔吸附樹脂柱，荷葉黃酮被吸附在大孔吸附樹脂上，經(jīng)洗脫、濃縮干燥得到荷葉黃酮。本發(fā)明的方法能夠從鮮荷葉中同步分離荷葉黃酮和葉綠素，方法簡(jiǎn)單易行，生產(chǎn)成本低，適應(yīng)工業(yè)化應(yīng)用。
【專利說明】一種從鮮荷葉中同步分離荷葉黃酮和葉綠素的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種荷葉提取物的提取方法，特別是涉及一種從荷葉中同步分離荷葉黃酮和葉綠素的方法。
【背景技術(shù)】 [0002]荷葉為睡蓮科植物蓮的葉子，為藥食兩用植物葉。荷葉中含有黃酮、生物堿等活性物質(zhì)?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究表明，荷葉黃酮具有抗氧化、抗衰老、清熱、降血脂、降膽固醇以及治療心腦血管疾病等功能。荷葉生物堿具有降脂減肥、抑菌、抗病毒的作用。荷葉中還含有多糖，多糖具有特殊的生物活性，是一種免疫調(diào)節(jié)劑，并且沒有毒副作用，可以作為臨床用藥或疫苗。荷葉中的葉綠素作為一種天然色素可以廣泛的應(yīng)用于醫(yī)藥、食品、化妝品等行業(yè)。
[0003]現(xiàn)有技術(shù)中對(duì)荷葉中荷葉黃酮的提取大多采用干荷葉，需要對(duì)鮮荷葉進(jìn)行干燥粉碎，不僅增加了提取過程的操作步驟，而且浪費(fèi)了荷葉中富含的葉綠素。另外，現(xiàn)有的荷葉黃酮的提取方法中，主要采用水提法或有機(jī)溶劑浸提法從荷葉中提取荷葉黃酮后，輔助其他方法進(jìn)行提純分離，如柱層析法、薄層層析法、鉛鹽沉淀法等，但均存在不同的缺點(diǎn)而限制了工業(yè)化應(yīng)用。目前的提取技術(shù)所得到的荷葉黃酮雜質(zhì)含量高，導(dǎo)致荷葉黃酮含量較低，限制了荷葉黃酮的應(yīng)用。
[0004]因此，急需開發(fā)一種荷葉的提取方法，能夠?qū)︴r荷葉進(jìn)行深度綜合利用，從鮮荷葉中同時(shí)分離出荷葉黃酮和葉綠素，提高荷葉黃酮的純度，并且能夠進(jìn)一步從荷葉中分離得到荷葉生物堿和多糖。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是提供一種從鮮荷葉中同步分離荷葉黃酮和葉綠素的方法，該方法簡(jiǎn)單易行，生產(chǎn)成本低，適于工業(yè)化應(yīng)用，并且該方法能夠獲得高純度的荷葉黃酮，而且能夠進(jìn)一步提取荷葉生物堿和多糖，實(shí)現(xiàn)對(duì)荷葉的深度綜合利用。
[0006]為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明提供了一種從鮮荷葉中同步分離荷葉黃酮和葉綠素的方法，包括如下步驟:
[0007]a、將重量比為1:8-25的鮮荷葉和質(zhì)量濃度為90_95%的乙醇加入提取罐中，于30-80°C提取2-4次，每次提取1-2小時(shí)，合并提取液，鮮荷葉是指含水量大于70% (質(zhì)量)的新鮮荷葉；
[0008]b、向步驟a得到的提取液中加入石油醚，提取液與石油醚的體積比為2-3:1，攪拌，靜置，得到含有石油醚和葉綠素的萃取液層以及含有乙醇、荷葉黃酮、荷葉生物堿和多糖的萃余液層；
[0009]C、將所述步驟b得到的含有石油醚和葉綠素的萃取液在真空度不小于700mmHg下進(jìn)行減壓濃縮，得到綠色油狀液體，真空度=大氣壓強(qiáng)-絕對(duì)壓強(qiáng)，也即真空表的表壓；
[0010]d、將步驟b得到的萃余液通過超濾膜超濾，除去雜質(zhì)和蛋白質(zhì)等大分子物質(zhì)，得到通過超濾膜的濃縮液，超濾膜優(yōu)選截留分子量為10000的超濾膜；[0011]e、將步驟d得到的濃縮液加入純凈水稀釋，優(yōu)選，純凈水與濃縮液的質(zhì)量比為90-100:1，將稀釋后的溶液過大孔吸附樹脂柱，荷葉黃酮被吸附在大孔吸附樹脂上，經(jīng)洗脫、濃縮干燥得到荷葉黃酮。大孔吸附樹脂采用能夠吸附荷葉黃酮的樹脂即可，如AB-8、DlOU D201等已知能吸附荷葉黃酮的樹脂。發(fā)明人在研究過程中發(fā)現(xiàn)大孔吸附樹脂XDA-6對(duì)荷葉黃酮具有優(yōu)異的選擇吸附性能，采用XDA-6大孔吸附樹脂可以使分離得到的荷葉黃酮純度達(dá)到98%以上，XDA-6可以通過市場(chǎng)購(gòu)買獲得，生產(chǎn)廠商如揚(yáng)州制藥廠、西安藍(lán)曉科技有限公司等，XDA-6樹脂的比表面積為600m2/g，平均孔徑為100 A (A:音譯為“埃”，10的負(fù)10次方米，納米的十分之一)，偶極矩0.4，平均粒徑500iim，均一系數(shù)(D90/D40) 1.6。
[0012]上述從鮮荷葉中同步分離荷葉黃酮和葉綠素的方法，其中，所述步驟c中，將減壓濃縮得到的綠色油狀液體進(jìn)行微波真空干燥，真空度不小于740mmHg，溫度不高于60°C，干燥后得到葉綠素粉末，葉綠素的色價(jià)可以達(dá)到200以上，可以直接應(yīng)用于食品、化妝品、醫(yī)藥等領(lǐng)域。
[0013]上述從鮮荷葉中同步分離荷葉黃酮和葉綠素的方法，其中，所述步驟e中，用質(zhì)量濃度為70%的乙醇洗脫大孔吸附樹脂柱上吸附的荷葉黃酮，將洗脫液通過100分子量的膜濃縮，得到被100分子量膜截留的濃縮液，濃縮液經(jīng)噴霧干燥得到荷葉黃酮。采用100分子量膜對(duì)洗脫液進(jìn)行濃縮，避免了加熱濃縮方法中高溫對(duì)荷葉黃酮活性的破壞，有效的保持了荷葉黃酮的活性。
[0014]上述從鮮荷葉中同步分離荷葉黃酮和葉綠素的方法，其中，該方法還包括步驟f，將從步驟e中通過大孔吸附樹脂流出的流出液再經(jīng)過另一大孔吸附樹脂柱，以使荷葉生物堿被吸附在該大孔吸附樹脂上。吸附荷葉生物堿的大孔吸附樹脂采用帶有酰胺基團(tuán)的大孔吸附樹脂，優(yōu)選為D306，D306可以通過市場(chǎng)購(gòu)買獲得，如揚(yáng)州制藥廠生產(chǎn)的D306樹脂，D306
樹脂的比表面積為800m2/g，平均孔徑為350 A (A:音譯為〃埃〃，10的負(fù)10次方米，納米的十分之一)，偶極矩1.4，平均粒徑700iim，均一系數(shù)(D90/D40) 1.6。
[0015]上述從鮮荷葉中同步分離荷葉黃酮和葉綠素的方法，其中，所述步驟f中，用質(zhì)量濃度為70%的乙醇洗脫大孔吸附樹脂柱上吸附的荷葉生物堿，將洗脫液通過100分子量的膜濃縮，得到被100分子量膜截留的濃縮液，濃縮液經(jīng)噴霧干燥得到荷葉生物堿。
[0016]上述從鮮荷葉中同步分離荷葉黃酮和葉綠素的方法，其中，所述步驟d中超濾膜采用截留分子量為10000的超濾膜，該方法還包括步驟g，將步驟f中經(jīng)過大孔吸附樹脂D306流出的流出液經(jīng)納濾膜或反滲透膜截留后，得到密度為1.12-1.18g/cm3的截留液體，向截留液體中加入質(zhì)量濃度為95%乙醇使液體中乙醇質(zhì)量濃度達(dá)到70%，攪拌，靜置，得到多糖沉淀。納濾膜可以采用截留分子量為100分子量納濾膜或200分子量納濾膜。納濾膜和反滲透膜均可以市場(chǎng)購(gòu)買獲得，采用的反滲透膜也即RO膜，可以采用美國(guó)陶氏化學(xué)生產(chǎn)的RO膜。該方法中采用I萬分子量的超濾膜將蛋白質(zhì)、大分子多糖等大分子物質(zhì)截留下來，含有荷葉黃酮、荷葉堿和多糖的物質(zhì)通過超濾膜，經(jīng)過兩次樹脂吸附，荷葉黃酮和荷葉堿分別被吸附在樹脂柱上，含有多糖的吸附余液在納濾膜或反滲透膜的作用下除去小分子物質(zhì)，得到含有多糖的截留液體，該方法能夠分離得到10000分子量以下的多糖。本發(fā)明的方法采用納濾膜或反滲透膜分離多糖，尤其是將應(yīng)用于水處理領(lǐng)域中的反滲透膜用于分離多糖，為荷葉多糖的分離提供了全新的方法，增加了獲得荷葉多糖的途徑，并且分離得到的多糖純度和收率均可以達(dá)到90%以上。
[0017]本發(fā)明的從鮮荷葉中同步分離荷葉黃酮和葉綠素的方法，具有如下有益效果:
[0018]1、直接采用鮮荷葉進(jìn)行提取分離操作，減少了現(xiàn)有技術(shù)中將鮮荷葉干燥成干荷葉再進(jìn)行提取的工藝步驟，同時(shí)充分利用了鮮荷葉中的葉綠素，為天然葉綠素的提取提供了新途徑，將葉綠素分離后再將提取液過大孔吸附樹脂柱，避免了對(duì)柱子的污染，同時(shí)能夠有效分離荷葉黃酮，提高荷葉黃酮的純度和收率；
[0019]2、本發(fā)明的方法采用XDA-6大孔吸附樹脂對(duì)荷葉黃酮進(jìn)行分離，能夠使分離得到的荷葉黃酮純度達(dá)到98%以上；
[0020]3、本發(fā)明的方法分離提取得到的葉綠素色價(jià)可以達(dá)到200以上；
[0021]4、本發(fā)明的方法在分離荷葉黃酮和葉綠素時(shí)，能夠進(jìn)一步分離得到荷葉生物堿和多糖，實(shí)現(xiàn)了從荷葉中同時(shí)分離荷葉黃酮、葉綠素、荷葉生物堿和多糖，對(duì)荷葉進(jìn)行了深度開發(fā)綜合利用，提高了荷葉的附加值，并且分離得到荷葉黃酮、葉綠素、荷葉生物堿和多糖收率均可以達(dá)到90%以上；
[0022]5、本發(fā)明的方法采用納濾膜分離多糖，尤其采用反滲透膜分離多糖，為從荷葉中分離多糖提供了新的分離途徑，并且提高了多糖的純度，使分離后的多糖純度可以達(dá)到90%以上。
【具體實(shí)施方式】
[0023]下面結(jié)合實(shí)施例詳細(xì)描述本發(fā)明。
[0024]實(shí)施例1
[0025]將鮮荷葉粉碎，在提取罐中加入I重量份的鮮荷葉和15重量份質(zhì)量濃度為90%的乙醇，于50°C提取3次，每次提取1.5小時(shí)，合并提取液，向提取液中加入石油醚，提取液與加入的石油醚的體積比為3:1，攪拌，靜置，得到含有石油醚和葉綠素的萃取液層以及含有乙醇、荷葉黃酮、荷葉生物堿和多糖的萃余液層。
[0026]將含有石油醚和葉綠素的萃取液在真空度700mmHg下進(jìn)行減壓濃縮，得到綠色油狀液體，將綠色油狀液體進(jìn)行微波真空干燥，真空度為740mmhg，溫度為60°C，經(jīng)微波真空干燥得到葉綠素粉末，所得葉綠素的色價(jià)達(dá)240，收率可達(dá)91% (收率=噴霧干燥所得到的葉綠素質(zhì)量/鮮荷葉中所含葉綠素的質(zhì)量)。
[0027]將含有乙醇、荷葉黃酮、荷葉生物堿和多糖的萃余液通過十萬分子量超濾膜膜超濾，得到通過超濾膜的濃縮液，向濃縮液中加入純凈水稀釋，純凈水與濃縮液的質(zhì)量比為99:1，將稀釋后的溶液過第一大孔吸附樹脂柱，第一大孔吸附樹脂柱采用XDA-6大孔吸附樹脂，荷葉黃酮被吸附在第一大孔吸附樹脂柱上，用質(zhì)量濃度為70%的乙醇洗脫第一大孔吸附樹脂柱上吸附的荷葉黃酮，將洗脫液通過100分子量的膜濃縮，得到被100分子量膜截留的濃縮液，濃縮液經(jīng)噴霧干燥得到荷葉黃酮粉末。荷葉黃酮純度即質(zhì)量含量達(dá)到98.47%，收率可達(dá)93% (收率=噴霧干燥所得到的荷葉黃酮質(zhì)量/鮮荷葉中所含黃酮的質(zhì)量)。
[0028]將從第一大孔吸附樹脂柱流出的流出液經(jīng)過第二大孔吸附樹脂柱，第二大孔吸附樹脂柱采用D306大孔吸附樹脂，使荷葉生物堿被吸附在第二大孔吸附樹脂柱上。用質(zhì)量濃度為70%的乙醇洗脫第二大孔吸附樹脂柱上吸附的荷葉生物堿，將洗脫液通過100分子量的膜濃縮，得到被100分子量膜截留的濃縮液，濃縮液經(jīng)噴霧干燥得到荷葉生物堿粉末。荷葉生物堿純度即質(zhì)量含量達(dá)到84.2%，收率可達(dá)92% (收率=噴霧干燥所得到的荷葉生物堿質(zhì)量/鮮荷葉中所含荷葉生物堿的質(zhì)量)。
[0029]實(shí)施例2
[0030]將鮮荷葉粉碎，在提取罐中加入I重量份的鮮荷葉和8重量份質(zhì)量濃度為95%的乙醇，于80°C提取4次，每次提取2小時(shí)，合并提取液，向提取液中加入石油醚，提取液與加入的石油醚的體積比為2:1，攪拌，靜置，得到含有石油醚和葉綠素的萃取液層以及含有乙醇、荷葉黃酮、荷葉生物堿和多糖的萃余液層。
[0031]將含有石油醚和葉綠素的萃取液在真空度750mmHg下進(jìn)行減壓濃縮，得到綠色油狀液體，將綠色油狀液體進(jìn)行微波真空干燥，真空度為760mmhg，溫度為55°C，經(jīng)微波真空干燥得到葉綠素粉末，所得葉綠素的色價(jià)達(dá)260，收率可達(dá)92% (收率=噴霧干燥所得到的葉綠素質(zhì)量/鮮荷葉中所含葉綠素的質(zhì)量)。
[0032]將含有乙醇、荷葉黃酮、荷葉生物堿和多糖的萃余液通過10000分子量的超濾膜超濾，得到通過超濾膜的濃縮液，向濃縮液中加入純凈水稀釋，純凈水與濃縮液的質(zhì)量比為100:1，將稀釋后的溶液過第一大孔吸附樹脂柱，第一大孔吸附樹脂柱采用XDA-6大孔吸附樹脂，荷葉黃酮被吸附在第一大孔吸附樹脂柱上，用質(zhì)量濃度為70%的乙醇洗脫第一大孔吸附樹脂柱上吸附的荷葉黃酮，將洗脫液通過100分子量的膜濃縮，得到被100分子量膜截留的濃縮液，濃縮液經(jīng)噴霧干燥得到荷葉黃酮粉末。荷葉黃酮純度即質(zhì)量含量達(dá)到98.15%，收率可達(dá)92% (收率=噴霧干燥所得到的荷葉黃酮質(zhì)量/鮮荷葉中所含黃酮的質(zhì)量)。
[0033]將從第一大孔吸附樹脂柱流出的流出液經(jīng)過第二大孔吸附樹脂柱，第二大孔吸附樹脂柱采用D306大孔吸附樹脂，使荷葉生物堿被吸附在第二大孔吸附樹脂柱上。用質(zhì)量濃度為70%的乙醇洗脫第二大孔吸附樹脂柱上吸附的荷葉生物堿，將洗脫液通過100分子量的膜濃縮，得到被100分子量膜截留的濃縮液，濃縮液經(jīng)噴霧干燥得到荷葉生物堿粉末。荷葉生物堿純度即質(zhì)量含量達(dá)到83.6%，收率可達(dá)91.5% (收率=噴霧干燥所得到的荷葉生物堿質(zhì)量/鮮荷葉中所含荷葉生物堿的質(zhì)量)。
[0034]將從第二大孔吸附樹脂柱流出的流出液經(jīng)100分子量納濾膜截留，除去小分子物質(zhì)，得到被100分子量納濾膜截留的密度為1.12g/cm3的截留液體，向截留后的液體中加入質(zhì)量濃度為95%乙醇使液體中乙醇質(zhì)量濃度達(dá)到70%，攪拌，靜置，得到多糖沉淀，過濾干燥得到多糖。多糖純度即質(zhì)量含量達(dá)到91.7%，收率達(dá)到91% (收率=過濾干燥所得到的多糖質(zhì)量/鮮荷葉中所含多糖質(zhì)量)。
[0035]實(shí)施例3
[0036]將鮮荷葉粉碎，在提取罐中加入I重量份的鮮荷葉和25重量份質(zhì)量濃度為90%的乙醇，，于80°C提取2次，每次提取I小時(shí)，合并提取液，向提取液中加入石油醚，提取液與加入的石油醚的體積比為3:1，攪拌，靜置，得到含有石油醚和葉綠素的萃取液層以及含有乙醇、荷葉黃酮、荷葉生物堿和多糖的萃余液層。
[0037]將含有石油醚和葉綠素的萃取液在真空度SOOmmHg下進(jìn)行減壓濃縮，得到綠色油狀液體，將綠色油狀液體進(jìn)行微波真空干燥，真空度為800mmhg，溫度為50°C，經(jīng)微波真空干燥得到葉綠素粉末，所得葉綠素的色價(jià)達(dá)210，收率可達(dá)90.7% (收率=噴霧干燥所得到的葉綠素質(zhì)量/鮮荷葉中所含葉綠素的質(zhì)量)。
[0038]將含有乙醇、荷葉黃酮、荷葉生物堿和多糖的萃余液通過一萬分子量超濾膜超濾，得到通過超濾膜的濃縮液，向濃縮液中加入純凈水稀釋，純凈水與濃縮液的質(zhì)量比為90:1，將稀釋后的溶液過第一大孔吸附樹脂柱，第一大孔吸附樹脂柱采用XDA-6大孔吸附樹脂，荷葉黃酮被吸附在第一大孔吸附樹脂柱上，用質(zhì)量濃度為70%的乙醇洗脫第一大孔吸附樹脂柱上吸附的荷葉黃酮，將洗脫液通過100分子量的膜濃縮，得到被100分子量膜截留的濃縮液，濃縮液經(jīng)噴霧干燥得到荷葉黃酮粉末。荷葉黃酮純度即質(zhì)量含量達(dá)到98.32%，收率可達(dá)93.5% (收率=噴霧干燥所得到的荷葉黃酮質(zhì)量/鮮荷葉中所含黃酮的質(zhì)量)。
[0039]將從第一大孔吸附樹脂柱流出的流出液經(jīng)過第二大孔吸附樹脂柱，第二大孔吸附樹脂柱采用D306大孔吸附樹脂，使荷葉生物堿被吸附在第二大孔吸附樹脂柱上。用質(zhì)量濃度為70%的乙醇洗脫第二大孔吸附樹脂柱上吸附的荷葉生物堿，將洗脫液通過100分子量的膜濃縮，得到被100分子量膜截留的濃縮液，濃縮液經(jīng)噴霧干燥得到荷葉生物堿粉末。荷葉生物堿純度即質(zhì)量含量達(dá)到83.9%，收率可達(dá)92.3% (收率=噴霧干燥所得到的荷葉生物堿質(zhì)量/鮮荷葉中所含荷葉生物堿的質(zhì)量)。
[0040]將從第二大孔吸附樹脂柱流出的流出液經(jīng)反滲透膜截留，除去小分子物質(zhì)，得到被反滲透膜截留的密度為1.15g/cm3的截留液體，向截留后的液體中加入質(zhì)量濃度為95%乙醇使液體中乙醇質(zhì)量濃度達(dá)到70%，攪拌，靜置，得到多糖沉淀，過濾干燥得到多糖。多糖純度即質(zhì)量含量達(dá)到93.1%，收率達(dá)到92.6% (收率=過濾干燥所得到的多糖質(zhì)量/鮮荷葉中所含多糖質(zhì)量)。
[0041]本實(shí)施例中，經(jīng)過超濾膜濃縮并經(jīng)稀釋的液體中含有荷葉黃酮、荷葉生物堿和多糖，將稀釋液通過大孔吸附樹脂XDA-6除去荷葉黃酮，之后流經(jīng)大孔吸附樹脂D306除去荷葉生物堿，由于該兩種樹脂對(duì)荷葉黃酮和荷葉生物堿的高選擇性，使多糖基本不被二種樹脂吸附，大大提高了多糖的收率。發(fā)明人在實(shí)驗(yàn)過程中發(fā)現(xiàn)，雖然兩種樹脂在處理只含有多糖的溶液時(shí)能夠吸附多糖，但大孔吸附樹脂XDA-6在處理含有多糖和荷葉黃酮的溶液時(shí)，以及大孔吸附樹脂D306在處理含有多糖和荷葉生物堿的溶液時(shí)，表現(xiàn)出優(yōu)異的選擇性，兩種樹脂在這種情況下僅吸附微量的多糖，參見表1和表2中實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。
[0042]表1
[0043]
【權(quán)利要求】
1.一種從鮮荷葉中同步分離荷葉黃酮和葉綠素的方法，包括如下步驟: a、將重量比為1:8-25的鮮荷葉和質(zhì)量濃度為90-95%的乙醇加入提取罐中，于30_80°C提取2-4次，每次提取1-2小時(shí)，合并提取液； b、向步驟a得到的提取液中加入石油醚，提取液與石油醚的體積比為2-3:1，攪拌，靜置，得到含有石油醚和葉綠素的萃取液層以及含有乙醇、荷葉黃酮、荷葉生物堿和多糖的萃余液層； C、將所述步驟b得到的含有石油醚和葉綠素的萃取液在真空度不小于700mmHg下進(jìn)行減壓濃縮，得到綠色油狀液體； d、將步驟b得到的萃余液通過超濾膜超濾，得到通過超濾膜的濃縮液； e、將步驟d得到的濃縮液加入純凈水稀釋，將稀釋后的溶液過大孔吸附樹脂柱，荷葉黃酮被吸附在大孔吸附樹脂上，經(jīng)洗脫、濃縮干燥得到荷葉黃酮。
2.如權(quán)利要求1所述的從鮮荷葉中同步分離荷葉黃酮和葉綠素的方法，其中，所述步驟c中，將減壓濃縮得到的綠色油狀液體進(jìn)行微波真空干燥得到葉綠素粉末，真空度不小于 740mmHg。
3.如權(quán)利要求1所述的從鮮荷葉中同步分離荷葉黃酮和葉綠素的方法，其中，所述步驟e中吸附荷葉黃酮的大孔吸附樹脂為XDA-6。
4.如權(quán)利要求1或3所述的從鮮荷葉中同步分離荷葉黃酮和葉綠素的方法，其中，所述步驟e中，加入的純凈水與濃縮 液的質(zhì)量比為90-100:1。
5.如權(quán)利要求1或3所述的從鮮荷葉中同步分離荷葉黃酮和葉綠素的方法，其中，所述步驟e中，用質(zhì)量濃度為70%的乙醇洗脫大孔吸附樹脂柱上吸附的荷葉黃酮，將洗脫液通過100分子量的膜濃縮，濃縮液經(jīng)噴霧干燥得到荷葉黃酮。
6.如權(quán)利要求3所述的從鮮荷葉中同步分離荷葉黃酮和葉綠素的方法，其中，該方法還包括步驟f，將從步驟e中通過大孔吸附樹脂流出的流出液再經(jīng)過另一大孔吸附樹脂柱，以使荷葉生物堿被吸附在該大孔吸附樹脂上，該大孔吸附樹脂為帶有酰胺基團(tuán)的大孔吸附樹脂。
7.如權(quán)利要求6所述的從鮮荷葉中同步分離荷葉黃酮和葉綠素的方法，其中，所述步驟f中，用質(zhì)量濃度為70%的乙醇洗脫大孔吸附樹脂柱上吸附的荷葉生物堿，將洗脫液通過100分子量的膜濃縮，濃縮液經(jīng)噴霧干燥得到荷葉生物堿。
8.如權(quán)利要求6所述的從鮮荷葉中同步分離荷葉黃酮和葉綠素的方法，其中，所述步驟f中吸附荷葉生物堿的大孔吸附樹脂為D306。
9.如權(quán)利要求8所述的從鮮荷葉中同步分離荷葉黃酮和葉綠素的方法，其中，所述步驟d中超濾膜采用截留分子量為10000的超濾膜，該方法還包括步驟g，將步驟f中經(jīng)過大孔吸附樹脂D306流出的流出液經(jīng)納濾膜或反滲透膜截留后，得到密度為1.12-1.18g/cm3的截留液體，向截留液體中加入質(zhì)量濃度為95%乙醇使液體中乙醇質(zhì)量濃度達(dá)到70%，攪拌，靜置，得到多糖沉淀。
10.如權(quán)利要求9所述的從鮮荷葉中同步分離荷葉黃酮和葉綠素的方法，其中，所述步驟g中，所述納濾膜為100分子量納濾膜或200分子量納濾膜。
【文檔編號(hào)】C07D487/22GK103479730SQ201310449938
【公開日】2014年1月1日 申請(qǐng)日期:2013年9月27日 優(yōu)先權(quán)日:2013年9月27日
【發(fā)明者】徐君, 周愛琴 申請(qǐng)人:周愛琴, 揚(yáng)州寶蓮生物科技有限公司