具有抗病毒活性的化合物及其制備方法與應(yīng)用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明屬于醫(yī)藥【技術(shù)領(lǐng)域】，涉及一種中藥抗病毒化合物，該化合物的制備方法為用適量水溶解雙黃連樣品或者采用木犀科植物連翹Forsythia suspensa（Thunb）的果實(shí)，通過水煎煮提取，水溶液通過大孔吸附樹脂色譜柱，分別以水、10%、30%、95%乙醇-水梯度洗脫，收集95％乙醇洗脫部分濃縮干燥后制得。采用硅膠開放柱進(jìn)行吸附，采用氯仿-甲醇-水溶劑系統(tǒng)梯度洗脫，經(jīng)ODS制備液相純化獲得。本發(fā)明公開所述的化合物在抗病毒方面的應(yīng)用。
【專利說明】具有抗病毒活性的化合物及其制備方法與應(yīng)用

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及醫(yī)藥【技術(shù)領(lǐng)域】，特別涉及一類從中藥中獲得的具有抗病毒活性的化合 物及其作用。

【背景技術(shù)】
[0002] 病毒是最小的生物病原體，是引發(fā)人類多種感染性疾病的主要元兇，其危害性極 大、影響面甚廣。在目前的主要流行性傳染病中，病毒感染引起的疾病占據(jù)了一半以上。全 世界已發(fā)現(xiàn)的病毒超過3600多種，由病毒引發(fā)的疾病有：流感、麻疹、腮腺炎、小兒麻痹癥、 傳染性肝炎、乙型肝炎、艾滋病、皰疹病毒等。而且新的病毒還在不斷被發(fā)現(xiàn)，這已是人類衛(wèi) 生健康事業(yè)所面臨的最大困惑之一。
[0003] 目前，市場上有很多抗病毒藥物，其中中藥雙黃連具有清熱解毒、表里雙解、氣血 兩清、燥濕瀉火、消癰腫、散熱結(jié)之功效，雙黃連制劑是從金銀花、黃芩、連翹三種中藥中提 取制備而成，金銀花清熱解毒、疏風(fēng)散熱，連翹清熱解毒、疏散風(fēng)熱，兩藥均有透營傳氣之 功，黃芩清熱燥濕、瀉火解毒，善清上焦之熱。臨床主要用于呼吸系統(tǒng)、消化系統(tǒng)、循環(huán)系統(tǒng)、 外科、婦科等感染性疾病的治療，其治療效果確切、安全、有效。近年來在臨床中的應(yīng)用越來 越廣泛。
[0004] 近年來對(duì)金銀花、黃芩及連翹化學(xué)成分研究表明，金銀花的化學(xué)成分主要為 揮發(fā)油類、黃酮類、有機(jī)酸類、三萜皂苷類物質(zhì)等。揮發(fā)油是金銀花的有效成分。通過 氣質(zhì)聯(lián)用分離出芳樟醇（linalool)、雙花醇、棕櫚酸（palmitic acid)、二氫香華醇 (dihydrocarveol)、二十四碳酸甲酯（tetracosanoic acid methylester)、十八碳二烯酸 乙酯（9, 12-octadecadienoate)、掠櫚酸乙酯（palmitic acid ethylester)、1,1'-聯(lián)二環(huán) 己燒（1,1' -bicyclohexyl)等成分。綠原酸類化合物是金銀花的主要有效成分，包括綠 原酸（chlorogcnic acid)異綠原酸（isocholrogenic acid)和咖啡酸（caffeic acid), 其他有機(jī)酸還有肉豆蘧酸（myristic acid)及棕櫚酸（palmitic acid)。前三者是金銀花 的主要活性成分。另外金銀花中目前鑒定出的黃酮類化合物包括木犀草素（luteolin)、 忍冬苷（lonicerin)、木犀草素 7-〇- a -D 葡萄糖苷（luteolin_7-〇- a -D-glucoside)、木 犀草素-7_〇-β -D 半乳糖苷（luteolin-7-Ο-β -D-galatoside)、槲皮素-3-〇-β -D-葡萄 糖苷（qucrcotin-3-Ο-β -D-glucoside)、金絲桃苷（hypcroside)、corymbosin 和 5_ 輕基 3'，4'，7_ 三甲基黃酮（5_hydroxyl-3'，4'，7-trimethoxyflavone)。
[0005] 黃苳（Scutellaria baicalensis Georgi)含有多種活性化學(xué)成分，主要為黃酮類 化合物，另外，黃芩還含有木脂素類、酚、醇和有機(jī)酸及其苷類等化學(xué)成分。
[0006] 連翹屬植物主要含有萜類、苯乙醇及其苷類、木脂素類、黃酮類、C6_C2天然醇類 和一些醇、酯、醚、醛、酮等類化合物。揮發(fā)油主要存在于連翹種子中，從連翹種子揮發(fā)油 中得到，α-菔烯、坎烯、β-菔烯、對(duì)聚傘花烯等單萜類化合物，而三萜成分白樺脂酸、 齊墩果酸、熊果酸普遍存在于連翹屬植物中。1991年，胡旺云等還首次從連翹的二氯甲 燒可溶部位分離得到乙醜化三廠 Iso-Bauerenlacetate和20(s)-Dammar-24-ene-3_i3 -20-diol-3-aeetateS(胡旺云，羅士德.連翹中三個(gè)乙?；频姆蛛x和鑒定[J].中 草藥，1991，22(4) : 147-152.)。除上面提到的五個(gè)單萜化合物外，還有醇、酯、醛、酮類 化合物，如龍腦、樟腦、黃樟醚及香葉醛等。木脂素及其苷類是連翹屬植物中較早被認(rèn) 識(shí)的一類活性成分，其中，連翹苷是連翹藥材的主要成分之一，也是國家藥典所規(guī)定的 連翹質(zhì)盆控制指標(biāo)性成分。除上述成分外，匡海學(xué)等已從連翹中分離得到了正三十一 烷、β_谷甾醇等化合物（匡海學(xué)，張寧，陸志博.青翹的化學(xué)成分研究[J].中醫(yī)藥信 息，1985, 6(3) :25.)，俞崇靈從連翹中分離得到連翹酚(愈崇靈.連翹抗菌成分的研究[J]. 藥學(xué)學(xué)報(bào)，I960, 8(6) :241-243.)，陳玉俊等從連翹乙醇提取物中首次分離得到硬脂酸（陳 玉俊，項(xiàng)進(jìn)，許美娟等.連翹化學(xué)成分的研究[J].中國中藥志，1999, 24(5):296.),周成 萍等首次分離得到β -谷留酸、琥珀酸，王偉芳等從連翹果實(shí)中分離到連翹醇酯。
[0007] 基于以上研究，本發(fā)明人對(duì)雙黃連繼續(xù)深入研究，經(jīng)過大量試驗(yàn)，最終提取分離得 到了新的化合物，而且通過藥理實(shí)驗(yàn)研究該類化合物具有抗病毒活性，該化合物提取方法 適合工業(yè)化大生產(chǎn)。再根據(jù)雙黃連指紋圖譜研究以及化合物的基源關(guān)系，認(rèn)為這些新的化 合物來源于連翹藥材。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0008] 本發(fā)明目的是提供一類從中藥中分離獲得的新的化合物，該類化合物或含有該類 化合物的組合物具有抗病毒活性。
[0009] 本發(fā)明的另一目的是提供一種含有上述具有抗病毒化合物的組合物。
[0010] 本發(fā)明的又一目的是提供一種從雙黃連或中藥連翹制備該組合物及上述新化合 物的提取方法。
[0011] 本發(fā)明再一目的是提供該類化合物在制備抗病毒藥物中的應(yīng)用。
[0012] 本發(fā)明的化合物結(jié)構(gòu)如下：
[0013]

【權(quán)利要求】
1. 一種抗病毒化合物，其特征在于，該化合物為：
2. -種具有抗病毒藥物的組合物，其特征在于，包含治療有效量的權(quán)利要求1所述的 化合物是從中藥雙黃連中提取獲得的。
3. -種具有抗病毒藥物的組合物，其特征在于，包含治療有效量的權(quán)利要求1所述的 化合物是從連翹藥材中提取獲得的。
4. 如權(quán)利要求3所述的連翅為木犀科植物連翅Forsythia suspensa(Thunb)的果實(shí)。
5. 如權(quán)利要求2所述，該類抗病毒組合物通過如下方法制得：用適量水溶解雙黃連樣 品，水溶液通過大孔吸附樹脂色譜柱，分別以水、10%、30%、95%乙醇-水梯度洗脫，收集95 % 乙醇洗脫部分濃縮干燥后制得。
6. 如權(quán)利要求3所述，該類抗病毒組合物通過如下方法制得：將連翹藥材通過水煎煮 提取，提取液過濾，減壓濃縮成適當(dāng)體積的水溶液，該水溶液通過大孔吸附樹脂色譜柱，分 別以水、10%、30%、95%乙醇-水梯度洗脫，收集95%乙醇洗脫部分濃縮干燥后制得。
7. 如權(quán)利要求1所述的化合物，再根據(jù)上述任一權(quán)利要求5-6,進(jìn)一步提供了制備 具有抗病毒活性化合物的方法，所述的具體的步驟為：將95%乙醇-水梯度洗脫部分用 硅膠開放柱色譜分離，采用氯仿-甲醇-水溶劑系統(tǒng)梯度洗脫，洗脫液以1/3柱體積為 一份收集，根據(jù)硅膠薄層色譜斑點(diǎn)不同將洗脫液進(jìn)行合并，最后共得到10個(gè)流分。其中 氯仿-甲醇-水按照體積比100:0:0(簡寫為CHCl 3-Me0H-H20100:0:0)洗脫得到流分1， CHCl3-Me0H-H209:1:0. 1 洗脫得到流分 2-5，CHCl3-Me0H-H208:2:0. 2 洗脫得到流分 6-8， CHCl3-Me0H-H207:3:0. 5洗脫得到流分9, MeOH洗脫得到流分10。
8. 如權(quán)利要求1所述的化合物1-2,在根據(jù)權(quán)利要求7進(jìn)一步提供了制備該化合物的 具體方法：用CHCl3-Me0H-H 209:1:0. 1洗脫的流分5經(jīng)ODS柱色譜分離，采用甲醇-水系統(tǒng) 洗脫，甲醇梯度為30%、50%、70%，每個(gè)濃度梯度洗脫4個(gè)保留體積，每1/3保留體積為一份收 集，根據(jù)硅膠薄層色譜斑點(diǎn)情況進(jìn)行合并，共得到5A-5J共10個(gè)流分。其中30%甲醇-水 洗脫的流分5B經(jīng)HW-40柱色譜分離，以20%，40%甲醇-水洗脫得到B1-B5共5個(gè)流分，其 中20%甲醇-水洗脫的流分B2經(jīng)ODS制備液相（洗脫液為30%甲醇-水）分離，收集保留 時(shí)間為35. Omin和42. 5min的色譜峰，即為化合物1和化合物2。
9. 如權(quán)利要求1所述的化合物3-4,在根據(jù)權(quán)利要求7進(jìn)一步提供了制備該化合物的 具體方法：用CHCl3-Me0H-H 208:2:0. 2洗脫的流分8經(jīng)ODS柱色譜分離，采用甲醇-水系統(tǒng) 洗脫，甲醇梯度為30%、50%、70%，每個(gè)濃度梯度洗脫4個(gè)保留體積，每1/3保留體積為一份收 集，根據(jù)硅膠薄層色譜斑點(diǎn)情況進(jìn)行合并，共得到8A-8J共10個(gè)流分。其中30%甲醇-水 洗脫的流分8D經(jīng)HW-40柱色譜分離，以20%、40%甲醇-水洗脫得到D1-D5共5個(gè)流分，其 中20%甲醇-水洗脫的流分D2經(jīng)ODS制備液相（洗脫液為30%甲醇-水）分離，收集保留 時(shí)間為55. Omin的色譜峰，即為化合物4。 用CHCl3-Me0H-H207:3:0. 5洗脫的流分9經(jīng)ODS柱色譜分離，采用甲醇-水系統(tǒng)洗脫， 甲醇梯度為30%、50%、70%，每個(gè)濃度梯度洗脫4個(gè)保留體積，每1/3保留體積為一份收集，根 據(jù)硅膠薄層色譜斑點(diǎn)情況進(jìn)行合并，共得到9A-9J共10個(gè)流分。其中50%甲醇-水洗脫的 流分9D經(jīng)HW-40柱色譜分離，以20%，40%甲醇-水洗脫得到D1-D6共6個(gè)流分，其中20% 甲醇-水洗脫的流分D2經(jīng)ODS制備液相（洗脫液為40%甲醇-水）分離，收集保留時(shí)間為 62. Omin的色譜峰，即為化合物3。
10. 如權(quán)利要求1所述的化合物在制備抗病毒藥物中的應(yīng)用。
【文檔編號(hào)】C07H15/26GK104231018SQ201310221149
【公開日】2014年12月24日 申請(qǐng)日期:2013年6月6日 優(yōu)先權(quán)日:2013年6月6日
【發(fā)明者】張樹祥, 姚新生, 戴毅, 李暢, 王立成, 王穎 申請(qǐng)人:黑龍江省松花江藥業(yè)有限公司