新的結(jié)合劑-藥物綴合物(adc)及其用途
【專利摘要】本申請涉及針對靶標(biāo)C4.4a的N，N-二烷基耳他汀的新的結(jié)合劑-藥物綴合物(ADC)，涉及這些ADC的活性代謝物，涉及用于制備這些ADC的方法，涉及這些ADC用于治療和/或預(yù)防疾病的用途，以及涉及這些ADC用于生產(chǎn)藥物的用途，所述藥物用于治療和/或預(yù)防疾病，更具體地是過度增生性疾病和/或血管生成性疾病，例如，癌性疾病。此類治療可以作為單一療法或者與其它藥物或進(jìn)一步治療性措施聯(lián)用來實(shí)施。
【專利說明】新的結(jié)合劑-藥物綴合物(ADC)及其用途
[0001]本申請涉及針對祀標(biāo)C4.4a的N, N-二烷基耳他汀(auristatin)的新的結(jié)合劑-藥物綴合物(ADC)，涉及這些ADC的活性代謝物，涉及用于制備這些ADC的方法，涉及這些ADC用于治療和/或預(yù)防疾病的用途，以及涉及這些ADC用于生產(chǎn)藥物的用途，所述藥物用于治療和/或預(yù)防疾病，更具體地是過度增生性疾病和/或血管生成性疾病，例如，癌性疾病。此類治療可以作為單一療法或者與其它藥物或進(jìn)一步治療性措施聯(lián)用來實(shí)施。
[0002]癌性疾病是很多種組織中不受控制的細(xì)胞生長的結(jié)果。在很多情況下，新細(xì)胞穿透現(xiàn)有組織(侵襲性生長)，或者它們轉(zhuǎn)移至遠(yuǎn)端器官。癌性疾病發(fā)生在很多種器官中，并且該疾病通常以組織特異性方式發(fā)展。因此，作為通用術(shù)語的名稱“癌性疾病”描述一大群不同器官、組織和細(xì)胞類型的定義的疾病。
[0003]早期腫瘤可能能夠通過手術(shù)和放療措施除去。轉(zhuǎn)移的腫瘤通常僅可通過化療劑施用姑息性治療。在該情況下目標(biāo)是實(shí)現(xiàn)改善生命質(zhì)量和延長剩余壽命的最佳組合。
[0004]例如，目前胃腸外給藥的大部分化療劑通常不是針對腫瘤組織或腫瘤細(xì)胞目標(biāo)導(dǎo)向的，由于其全身性給藥，而是在體內(nèi)非特定分布，因此包括在不希望接觸該藥物的位置，例如健康細(xì)胞、組織和器官。這可能導(dǎo)致不希望的副作用，以及甚至導(dǎo)致一般毒性的嚴(yán)重影響，然后該毒性通常極大限制了藥物治療有用的劑量的范圍，或必須完全停止用藥。
[0005]因此，一方面，這些化療劑在腫瘤細(xì)胞或立即包圍組織中的改進(jìn)的且選擇性的可用性和相關(guān)的效果提高，以及另一方面，毒性副作用的最小化，已成為多年來新化療劑的發(fā)展中的焦點(diǎn)。至今人們已作出很多嘗試以發(fā)展將藥物引入靶細(xì)胞的有效方法。但是，例如優(yōu)化藥物和細(xì)胞內(nèi)目標(biāo)的關(guān)聯(lián)以及使相鄰細(xì)胞的藥物細(xì)胞間分布最小化仍然構(gòu)成棘手的問題。
[0006]例如，單克隆抗體適用于腫瘤組織和腫瘤細(xì)胞的靶向定位。近年來，已看到此類用于臨床治療癌性疾病的抗體的重要性顯著普遍提高，這是基于此類的試劑的活性，所述試劑例如曲妥珠單抗(赫賽汀)、利妥昔單抗(Rituxan)、西妥昔單抗(愛必妥)和貝伐單抗(阿伐他汀)，該試劑后來已被批準(zhǔn)用于治療單獨(dú)的具體腫瘤疾病[參見例如G.P.Adams 和 L.M.Weiner, Nat.Biotechnol.23,1147-1157 (2005) ] ? 因此，對所謂的免疫綴合物(例如，前述ADC)的興趣也已顯著增加，其中針對腫瘤相關(guān)抗原的內(nèi)化抗體通過連接單元(“接頭”)與細(xì)胞毒性劑共價(jià)結(jié)合。在將ADC引入至腫瘤細(xì)胞中并隨后切割綴合物之后，細(xì)胞毒性劑本身或另一種由細(xì)胞毒性劑形成的具有細(xì)胞毒性活性的代謝物在腫瘤細(xì)胞內(nèi)釋放，在腫瘤細(xì)胞中能夠直接地且選擇性地發(fā)揮其作用。與癌性疾病的常規(guī)化療相t匕，以該方式可以將對正常組織的破壞保持在極大接近極限內(nèi)[參見例如J.M.Lambert,Curr.0pin.Pharmacol.5,543-549(2005) ;Α.M.Wu and P.D.Senter ；Nat.Biotechnol.23,1137-1146 (2005) ；P.D.Senter, Curr.0pin.Chem.Biol.13,235-244 (2009) ；L.Ducry andB.Stump,Bioconjugate Chem.21,5-13(2010)]。
[0007]除了抗體，例如小分子藥物領(lǐng)域的結(jié)合劑也可以用作選擇性地與具體目標(biāo)位置(“革巴標(biāo)”)(例如受體)結(jié)合的結(jié)合劑[參見例如E.Ruoslahti等人,Science279,377-380(1998) ;D.Karkan 等人，PLoS 0NE3 (6)，e2469 (2008 年 6 月 25 日)]。還已知細(xì)胞毒性藥物和定位配體(addressing ligand)的綴合物在配體和藥物之間存在確定的切割點(diǎn)用于藥物的釋放。例如，在肽鏈中可能存在這種類型的“預(yù)定的斷裂點(diǎn)”，該肽鏈可在特定位點(diǎn)通過位于作用位置的特異性酶而選擇性地被切割[參見例如R.A.Firestone和L.A.Telan,美國專利申請US2002/0147138]。
[0008]腫瘤組織和腫瘤細(xì)胞的特別合適的靶向定位是針對抗原C4.4a的單克隆抗體。C4.4a(基因:LYH)3)最早被描述為大鼠胰腺腫瘤細(xì)胞中的轉(zhuǎn)移相關(guān)的細(xì)胞表面蛋白(Roscl M.等人，0ncogenel998,17(15):1989-2002)。人 C4.4a 分離自它的胎盤 cDNA 文庫(ffurfel, J.等人.Gene2001，262:35-41)。C4.4a表現(xiàn)出與uPA受體的結(jié)構(gòu)同源性，且含有2個(gè)LY6結(jié)構(gòu)域，所述LY6結(jié)構(gòu)域表現(xiàn)出典型的三指折疊模式，且經(jīng)由9個(gè)二硫橋連接(Jacobsen B.和 Ploug M., Current Medicinal Chemistry2008,15:2559-2573)。C4.4a經(jīng)由糖磷脂酰肌醇(GPI)錨定在細(xì)胞中。所述蛋白被高度糖基化，且含有眾多N-和O-糖基化位點(diǎn)。C4.4a在肺癌、大腸癌、乳腺癌、卵巢癌、胰腺癌、腎癌、頭和頸腫瘤和黑素瘤的腫瘤細(xì)胞中表現(xiàn)出強(qiáng)表達(dá)。RNA分析已經(jīng)證實(shí)了 C4.4a在約50%的原發(fā)性肺腫瘤中和在約75%的肺癌轉(zhuǎn)移灶中的表達(dá)，盡管沒有檢測到在健康肺組織中的表達(dá)(WUrfel J.等人，Gene2001，262:35-41)。C4.4a可以用作非小細(xì)胞肺癌的預(yù)后標(biāo)志物:高C4.4a表達(dá)水平與預(yù)后不良相關(guān)(Hansen L.等人，Lung Cancer2007，58:260-266)。對于大腸癌而言也是如此。C4.4a被從腫瘤細(xì)胞表面清除，且可以用作預(yù)后血清標(biāo)志物(K.Konishi等人，Cancer Science2010)。黑素瘤的詳細(xì)表達(dá)分析已經(jīng)證實(shí)，C4.4a在約60%的原發(fā)性惡性黑素瘤中表達(dá)，并在100%的淋巴結(jié)和皮膚轉(zhuǎn)移灶中表達(dá)(Seiter S.等人，J InvestDermatol.2001，116(2):344-347)。與鄰近的正常組織相比，在乳腺癌組織中觀察到C4.4a基因表達(dá)的增量調(diào)節(jié)(Fletcher G.C., Br.J.Cancer2003,88 (4):579-585)。C4.4a 是腫瘤治療的一種理想靶蛋白，因?yàn)榻】到M織中的C4.4a表達(dá)被限制在皮膚角質(zhì)形成細(xì)胞和食道內(nèi)皮細(xì)胞以及胎盤細(xì)胞(WUrfel J.等人，Gene2001，262:35-41)。冊01/23553描述了 C4.4a抑制劑(例如抗-C4.4a抗體)的用途，這是一種能夠抑制C4.4a表達(dá)或活性的癌癥治療。
[0009]C4.4a的精確功能是未知的。在傷口愈合的過程中，它在遷移性角質(zhì)形成細(xì)胞中被增量調(diào)節(jié)(Hansen L.等人，Biochem J.2004,380 =845-857) ?有人認(rèn)為，C4.4a在腫瘤細(xì)胞侵襲中起作用，據(jù)推測是通過與細(xì)胞外基質(zhì)的相互作用(Kiiscl M.等人，0ncogenel998,17(15):1989-2002 ；Paret C.等人，British Journal of Cancer2007，97:1146-1156)。潛在的配體是層粘連蛋白I和5以及半乳糖凝集素3 (Paret C.，Int.J.Cancer2005,115:724-733)。
[0010]耳他汀E(AE)和單甲基耳他汀E(MMAE)是多拉司他`汀的合成類似物，是線性假肽的特定集合，所述線性假肽最初從海洋源分離并且其在某些情況下對于腫瘤細(xì)胞具有極有效的細(xì)胞毒性活性[關(guān)于綜述，參見例如G.R.Pettit, Prog.Chem.0rg.Nat.Prod.70,1-79(1997) ;G.R.Pettit 等人，Ant1-Cancer Drug DesignlO, 529-544 (1995) ；G.R.Pettit等人，Ant1-Cancer Drug Designl3, 243-277 (1998)]。
[0011]
【權(quán)利要求】
1.通式(Ia)的結(jié)合劑-藥物綴合物以及它們的鹽、溶劑合物和所述鹽的溶劑合物
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的通式(Ia)的結(jié)合劑-藥物綴合物以及它們的鹽、溶劑合物和所述鹽的溶劑合物，其中η是1-50的數(shù)字，
AK 是 AK1 或 AK2
其中 AK1是結(jié)合劑，其經(jīng)由所述結(jié)合`劑的硫原子鍵合至基團(tuán)G， AK2是結(jié)合劑，其經(jīng)由所述結(jié)合劑的氮原子鍵合至基團(tuán)G， G在AK=AK1時(shí)，是下式的基團(tuán)
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的通式(Ia)的結(jié)合劑-藥物綴合物以及它們的鹽、溶劑合物和所述鹽的溶劑合物，其中η是1-20的數(shù)字，
AK 是 AK1 或 AK2
其中 AK1是抗體或結(jié)合抗原的抗體片段，其結(jié)合C4.4a，且經(jīng)由所述結(jié)合劑的半胱氨酸殘基的硫原子鍵合至基團(tuán)G， AK2是抗體或結(jié)合抗原的抗體片段，其結(jié)合C4.4a，且經(jīng)由所述結(jié)合劑的賴氨酸殘基的NH側(cè)基鍵合至基團(tuán)G， G在AK=AK1時(shí)，是下式的基團(tuán)

4.根據(jù)權(quán)利要求1-3中的任一項(xiàng)所述的通式(Ia)的結(jié)合劑-藥物綴合物以及它們的鹽、溶劑合物和所述鹽的溶劑合物，其中η是1-10的數(shù)字，
AK 是 AK1 或 AK2其中 AK1是抗體，其包含抗體B01-3、B01-10、M31-B01或D02-6的6個(gè)CDR序列、抗體B01-3、B01-10、M31-BOI或D02-6的可變輕鏈和可變重鏈、或者抗體B01-3、B01-10、M31-BOI或D02-6的輕鏈和重鏈，且經(jīng)由所述結(jié)合劑的半胱氨酸殘基的硫原子鍵合至基團(tuán)G， AK2是抗體，其包含抗體B01-3、B01-10、M31-B01或D02-6的6個(gè)CDR序列、抗體BO1-3、B01-10、M31-BOI或D02-6的可變輕鏈和可變重鏈、或者抗體B01-3、B01-10、M31-BOI或D02-6的輕鏈和重鏈，且經(jīng)由所述結(jié)合劑的賴氨酸殘基的NH側(cè)基鍵合至基團(tuán)G， G在AK=AK1時(shí)，是下式的基團(tuán)


5.根據(jù)權(quán)利要求1-4中的任一項(xiàng)所述的通式(Ia)的結(jié)合劑-藥物綴合物以及它們的鹽、溶劑合物和所述鹽的溶劑合物，其中 η是1-10的數(shù)字，
AK 是 AK2
其中 AK2是抗體，其包含抗體Β01-3、Β01-10、Μ31-Β01或D02-6的6個(gè)CDR序列、抗體BO1-3、Β01-10、M31-BOI或D02-6的可變輕鏈和可變重鏈、或者抗體Β01-3、Β01-10、M31-BOI或D02-6的輕鏈和重鏈，且經(jīng)由所述結(jié)合劑的賴氨酸殘基的NH側(cè)基鍵合至基團(tuán)G， G是羰基， L1是鍵， B是鍵， L2是直鏈(C3-C6)-烷二基或者是下式的基團(tuán) 其中
6.根據(jù)權(quán)利要求1-4中的任一項(xiàng)所述的通式(Ia)的結(jié)合劑-藥物綴合物以及它們的鹽、溶劑合物和所述鹽的溶劑合物，其中η是1-10的數(shù)字，
AK 是 AK1, 其中 AK1是抗體，其包含抗體Β01-3、Β01-10、Μ31-Β01或D02-6的6個(gè)CDR序列、抗體Β01-3、Β01-10、M31-BOI或D02-6的可變輕鏈和可變重鏈、或者抗體Β01-3、Β01-10、M31-BOI或D02-6的輕鏈和重鏈，且經(jīng)由所述結(jié)合劑的半胱氨酸殘基的硫原子鍵合至基團(tuán)G， G是下式的基團(tuán)
7.式(XXXa)的化合物以及它們的鹽、溶劑合物和所述鹽的溶劑合物
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的式(XXXa)的化合物以及它們的鹽、溶劑合物和所述鹽的溶劑合物，其中 Cys是半胱氨酸殘基，其經(jīng)由側(cè)鏈的硫原子鍵合至琥珀酰亞胺的碳原子， L1是鍵、直鏈(C2-C6)-烷二基、下式的基團(tuán)
9.根據(jù)權(quán)利要求7或8中的任一項(xiàng)所述的式(XXXa)的化合物以及它們的鹽、溶劑合物和所述鹽的溶劑合物，其中 Cys是半胱氨酸殘基，其經(jīng)由側(cè)鏈的硫原子鍵合至琥珀酰亞胺的碳原子， L1是鍵或直鏈(C2-C6)-烷二基， B是鍵或下式的基團(tuán)
10.式(XXXI)的化合物以及它們的鹽、溶劑合物和所述鹽的溶劑合物
11.根據(jù)權(quán)利要求10所述的式(XXXI)的化合物以及它們的鹽、溶劑合物和所述鹽的溶劑合物，其中L1是鍵、直鏈(C2-C6)-烷二基或下式的基團(tuán)
12.根據(jù)權(quán)利要求10或11中的任一項(xiàng)所述的式(XXXI)的化合物以及它們的鹽、溶劑合物和所述鹽的溶劑合物，其中L1是鍵， B是鍵， L2是直鏈(C2-C6)-烷二基或者是下式的基團(tuán)
13.選自下述組的式(XXXa)和(XXXI)的化合物以及它們的鹽、溶劑合物和所述鹽的溶劑合物: N-6-(3-{[ (2R)-2-氨基-2-羧基乙基]硫烷基}-2, 5-二氧代吡咯燒-1-基)己基]-N-甲基-L-纈氨?；?N-[(3R，4S，5S)-l-{(2S)-2-[(lR，2R)-3-{[(lS)-l-羧基-2-(1Η-吲哚-3-基)乙基]氨基}-1_甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基]吡咯烷-1-基}-3_甲氧基-5-甲基-1-氧代庚烷-4-基]-N-甲基-L-纈氨酰胺， N-[6-(3-{[ (2R) -2-氨基-2-羧基乙基]硫烷基} -2, 5- 二氧代吡咯燒-1-基)己基]-N-甲基-L-纈氨?；?N-[(3R，4S，5S)-l-{(2S)-2-[(lR，2R)-3-{[(2S)-3-(lH-吲哚-3-基)-1- (I，2-噁嗪烷-2-基)-1-氧代丙烷-2-基]氨基}-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基]吡咯烷-1-基} -3-甲氧基-5-甲基-1-氧代庚烷-4-基]-N-甲基-L-纈氨酰胺，N-(6-{[(5S)-5-氨基-5-羧基戊基]氨基}-6_氧代己基)-N-甲基-L-纈氨?；?_N_ [ (3R, 4S, 5S) _1_ {(2S) —2— [ (IR, 2R) _3_ {[ (2S) _3_ (IH- 口引噪 _3_ 基)_1_ (1,2-1l惡嗪烷-2-基)-1_氧代丙烷-2-基]氨基}-1_甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基]吡咯烷-1-基}-3_甲氧基-5-甲基-1-氧代庚烷-4-基]-N-甲基-L-纈氨酰胺三氟乙酸鹽，N-(6-{[(5S)-5-氨基-5-羧基戊基]氨基}-6_氧代己基)-N-甲基-L-纈氨?；?_N_ [ (3R, 4S, 5S) -1- {(2S) ~2~ [ (IR, 2R) -3- {[ (IS) -1-竣基-2- (1H- Π引噪-3-基)乙基]氨基}-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基]吡咯烷-1-基} -3-甲氧基-5-甲基-1-氧代庚烷-4-基]-N-甲基-L-纈氨酰胺。
14.通式(I)的結(jié)合劑-藥物綴合物以及它們的鹽、溶劑合物和所述鹽的溶劑合物
15.根據(jù)權(quán)利要求14所述的具有通式(I)的結(jié)合劑-藥物綴合物以及它們的鹽、溶劑合物和所述鹽的溶劑合物， 其中 η是1-50的數(shù)字，
AK 是 AK1 或 AK2
16.根據(jù)權(quán)利要求14或15所述的具有通式(I)的結(jié)合劑-藥物綴合物以及它們的鹽、溶劑合物和所述鹽的溶劑合物，
17.根據(jù)權(quán)利要求14-16中的任一項(xiàng)所述的具有通式(I)的結(jié)合劑-藥物綴合物以及它們的鹽、溶劑合物和所述鹽的溶劑合物，其中 η是1-20的數(shù)字，
AK 是 AK1 或 AK2
其中 AK1是抗體或結(jié)合抗原的抗體片段，其結(jié)合C4.4a，且經(jīng)由所述結(jié)合劑的半胱氨酸殘基的硫原子鍵合至基團(tuán)G， AK2是抗體或結(jié)合抗原的抗體片段，其結(jié)合C4.4a，且經(jīng)由所述結(jié)合劑的賴氨酸殘基的NH側(cè)基鍵合至基團(tuán)G， G在AK=AK1時(shí)，是下式的基團(tuán)
18.根據(jù)權(quán)利要求14-17中的任一項(xiàng)所述的具有通式(I)的結(jié)合劑-藥物綴合物以及它們的鹽、溶劑合物和所述鹽的溶劑合物，其中η是1-10的數(shù)字，
AK 是 AK1 或 AK2
其中AK1是抗體，其包含抗體Β01-3、Β01-10、Μ31-Β01或D02-6的6個(gè)CDR序列、抗體Β01-3、Β01-10、M31-BOI或D02-6的可變輕鏈和可變重鏈、或者抗體Β01-3、Β01-10、M31-BOI或D02-6的輕鏈和重鏈，且經(jīng)由所述結(jié)合劑的半胱氨酸殘基的硫原子鍵合至基團(tuán)G， AK2是抗體，其包含抗體B01-3、B01-10、M31-B01或D02-6的6個(gè)CDR序列、抗體BO1-3、B01-10、M31-BOI或D02-6的可變輕鏈和可變重鏈、或者抗體B01-3、B01-10、M31-BOI或D02-6的輕鏈和重鏈，且經(jīng)由所述結(jié)合劑的賴氨酸殘基的NH側(cè)基鍵合至基團(tuán)G， G在AK=AK1時(shí)，是下式的基團(tuán)
19.用于制備根據(jù)權(quán)利要求14-18中的任一項(xiàng)所述的具有通式(I)的本發(fā)明化合物的方法，其特征在于，使所述結(jié)合劑在緩沖液中的溶液 [A]與合適的還原劑例如二硫蘇糖醇或三(2-羧基乙基)膦鹽酸鹽混合，隨后與式(II)的化合物反應(yīng)
20.通過根據(jù)權(quán)利要求19或50所述的方法制備的化合物以及它們的鹽、溶劑合物和所述鹽的溶劑合物，其中AK1和AK2是抗體，其包含抗體Β01-3、Β01-10或D02-6的6個(gè)⑶R序列、抗體Β01-3、Β01-10或D02-6的可變輕鏈和可變重鏈、或者抗體Β01-3、Β01_10或D02-6的輕鏈和重鏈。
21.式(XXX)的化合物以及它們的鹽、溶劑合物和所述鹽的溶劑合物
22.根據(jù)權(quán)利要求21所述的式(XXX)的化合物以及它們的鹽、溶劑合物和所述鹽的溶劑合物，其中 Cys是半胱氨酸殘基，其經(jīng)由側(cè)鏈的硫原子鍵合至琥珀酰亞胺的碳原子， L1是鍵、直鏈(C2-C6)_烷二基或者是下式的基團(tuán)
23.根據(jù)權(quán)利要求1-6、14-18中的任一項(xiàng)所述的結(jié)合劑-藥物綴合物，其中所述結(jié)合劑結(jié)合癌癥IE分子。
24.根據(jù)權(quán)利要求1-6、14-18或23中的任一項(xiàng)所述的結(jié)合劑-藥物綴合物，其中所述結(jié)合劑結(jié)合細(xì)胞外靶分子。
25.根據(jù)權(quán)利要求1-6、14-18或23-24中的任一項(xiàng)所述的結(jié)合劑-藥物綴合物，其中所述結(jié)合劑結(jié)合細(xì)胞外癌癥靶分子。
26.根據(jù)權(quán)利要求1-6、14-18或23-25中的任一項(xiàng)所述的結(jié)合劑-藥物綴合物，其中所述靶分子、細(xì)胞外靶分子、癌癥靶分子或細(xì)胞外癌癥靶分子是蛋白。
27.根據(jù)權(quán)利要求1-6、14-18或23-26中的任一項(xiàng)所述的結(jié)合劑-藥物綴合物，其中所述結(jié)合劑在結(jié)合所述細(xì)胞外靶分子以后被表達(dá)所述靶分子的細(xì)胞內(nèi)化。
28.根據(jù)權(quán)利要求1-6、14-18或23-27中的任一項(xiàng)所述的結(jié)合劑-藥物綴合物，其中所述結(jié)合劑是結(jié)合劑蛋白。
29.根據(jù)權(quán)利要求1_6、14、15、20或23-28中的任一項(xiàng)所述的結(jié)合劑-藥物綴合物，其中所述結(jié)合劑是抗體或其結(jié)合抗原的抗體片段或抗體模擬物。
30.根據(jù)權(quán)利要求1-6、14-18或23-29中的任一項(xiàng)所述的結(jié)合劑-藥物綴合物，其中所述抗體是單克隆抗體。
31.根據(jù)權(quán)利要求1-6、14-18或23-30中的任一項(xiàng)所述的結(jié)合劑-藥物綴合物，其中所述抗體是人抗體、人源化抗體或嵌合抗體。
32.根據(jù)權(quán)利要求1-6、14-18或23-31中的任一項(xiàng)所述的結(jié)合劑-藥物綴合物，其中所述抗體是完整抗體或改性的完整抗體。
33.根據(jù)權(quán)利要求1-6、14-18或23-32中的任一項(xiàng)所述的結(jié)合劑-藥物綴合物，其中所述抗體是IgG類抗體。
34.根據(jù)權(quán)利要求1-6、14-16、20或23-33中的任一項(xiàng)所述的結(jié)合劑-藥物綴合物，其中所述結(jié)合劑結(jié)合選自下述組的細(xì)胞外癌癥靶分子:EGF受體(NP_005219.2)、間皮素(Q13421-3)、C4.4a (NP_055215.2)和碳酸酐酶 IX (CA IX ；NP_001207.2)。`
35.根據(jù)權(quán)利要求1-6、14-16、20或23-34中的任一項(xiàng)所述的結(jié)合劑-藥物綴合物，其中所述結(jié)合劑特異性地結(jié)合選自下述組的細(xì)胞外癌癥靶分子=EGF受體(NP_005219.2)、間皮素(Q13421-3)、C4.4a (NP_055215.2)和碳酸酐酶 IX (CA IX ；NP_001207.2)。
36.根據(jù)權(quán)利要求1-6、14-16、20或23-35中的任一項(xiàng)所述的結(jié)合劑-藥物綴合物，其中所述抗體結(jié)合C4.4a。
37.根據(jù)權(quán)利要求1-6、14-18或23-36中的任一項(xiàng)所述的結(jié)合劑-藥物綴合物，其中所述抗體結(jié)合C4.4a的SI結(jié)構(gòu)域(SEQ ID NO:1的氨基酸位置1_85)。
38.根據(jù)權(quán)利要求1-6、14-18或23-37中的任一項(xiàng)所述的結(jié)合劑-藥物綴合物，其中所述抗體特異性地結(jié)合C4.4a。
39.根據(jù)權(quán)利要求1-6、14-18或23-38中的任一項(xiàng)所述的結(jié)合劑-藥物綴合物，其中所述結(jié)合劑是抗-C4.4a抗體或結(jié)合抗原的抗體片段，其與抗體M31-B01和/或與抗體M20-D02-S-A 競爭結(jié)合 C4.4a。
40.根據(jù)權(quán)利要求1-6、14-16、20或23-39中的任一項(xiàng)所述的結(jié)合劑-藥物綴合物，其選自:包含由序列SEQ ID NO:75-77代表的可變重鏈的CDR序列、且包含由序列SEQ ID NO:78-80代表的可變輕鏈的CDR序列的抗體(B01-10)，包含由序列SEQ ID NO:5、9和13代表的可變重鏈的⑶R序列、且包含由序列SEQ ID NO: 17、21和25代表的可變輕鏈的⑶R序列的抗體(M31-B01)，包含由序列SEQ ID NO:6、10和14代表的可變重鏈的⑶R序列、且包含由序列SEQ ID NO:18,22和26代表的可變輕鏈的CDR序列的抗體(M20-D02-S-A)，包含由序列SEQ ID NO:7,11和15代表的可變重鏈的⑶R序列、且包含由序列SEQ ID NO:19、23和27代表的可變輕鏈的⑶R序列的抗體(M60-G03)，包含由序列SEQ ID NO:8、12和16代表的可變重鏈的⑶R序列、且包含由序列SEQ ID NO:20、24和28代表的可變輕鏈的⑶R序列的抗體(36-H02)，包含由序列SEQ ID NO:45-47代表的可變重鏈的⑶R序列、且包含由序列SEQ ID NO:48-50代表的可變輕鏈的CDR序列的抗體(B01-3)，包含由序列SEQ ID NO:55-57代表的可變重鏈的⑶R序列、且包含由序列SEQ ID NO:58-60代表的可變輕鏈的⑶R序列的抗體001-5),包含由序列SEQ ID NO:65-67代表的可變重鏈的⑶R序列、且包含由序列SEQ ID NO:68-70代表的可變輕鏈的CDR序列的抗體(B01-7)，包含由序列SEQ ID NO:85-87代表的可變重鏈的⑶R序列、且包含由序列SEQ ID NO:88-90代表的可變輕鏈的⑶R序列的抗體(B01-12),包含由序列SEQ ID NO:95-97代表的可變重鏈的⑶R序列、且包含由序列SEQ ID NO:98-100代表的可變輕鏈的CDR序列的抗體(D02-4)，包含由序列SEQ IDNO:105-107代表的可變重鏈的⑶R序列、且包含由序列SEQ ID NO:108-110代表的可變輕鏈的⑶R序列的抗體(D02-6)，包含由序列SEQ ID NO:115-117代表的可變重鏈的⑶R序列、且包含由序列SEQ ID NO:118-120代表的可變輕鏈的⑶R序列的抗體(D02-7)，包含由序列SEQ ID NO =125-127代表的可變重鏈的CDR序列、且包含由序列SEQ ID NO =128-130代表的可變輕鏈的⑶R序列的抗體(D02-11)，和包含由序列SEQ ID NO:135-137代表的可變重鏈的⑶R序列、且包含由序列SEQ ID NO =138-140代表的可變輕鏈的⑶R序列的抗體(D02-13)。
41.根據(jù)權(quán)利要求1-6、14-18、20或23-40中的任一項(xiàng)所述的結(jié)合劑-藥物綴合物，其中所述C4.4a抗體或結(jié)合抗原的抗體片段選自:包含由序列SEQ ID NO:81代表的可變重鏈的氨基酸序列、且包含由序列SEQ ID NO:82代表的可變輕鏈的氨基酸序列的抗體(B01-7)，包含由序列SEQ ID NO:33代表的可變重鏈的氨基酸序列、且包含由序列SEQ IDNO:29代表的可變輕鏈的氨基酸序列的抗體(M31-B01)，包含由序列SEQ ID NO:34代表的可變重鏈的氨基酸序列、且包含由序列SEQ ID NO:30代表的可變輕鏈的氨基酸序列的抗體(M20-D02S-A)，包含由序列SEQ ID NO:35代表的可變重鏈的氨基酸序列、且包含由序列SEQ ID NO:31代表的可變輕鏈的氨基酸序列的抗體(M60-G03)，包含由序列SEQ ID NO:36代表的可變重鏈的氨基酸序列、且包含由序列SEQ ID NO:32代表的可變輕鏈的氨基酸序列的抗體(M36-H02)，包含由序列SEQ ID NO:51代表的可變重鏈的氨基酸序列、且包含由序列SEQ ID NO:52代表的可變輕鏈的氨基酸序列的抗體(B01-3)，包含由序列SEQ ID NO:61代表的可變重鏈的氨基酸序列、且包含由序列SEQ ID NO:62代表的可變輕鏈的氨基酸序列的抗體(B01-5)，包含由序列SEQ ID NO:71代表的可變重鏈的氨基酸序列、且包含由序列SEQ ID NO:72代表的可變輕 鏈的氨基酸序列的抗體(B01-7)，包含由序列SEQ ID NO:91代表的可變重鏈的氨基酸序列、且包含由序列SEQ ID NO:92代表的可變輕鏈的氨基酸序列的抗體(B01-12)，包含由序列SEQ ID NO:101代表的可變重鏈的氨基酸序列、且包含由序列SEQ ID NO:102代表的可變輕鏈的氨基酸序列的抗體(D02-4)，包含由序列SEQ ID NO:111代表的可變重鏈的氨基酸序列、且包含由序列SEQ ID NO:112代表的可變輕鏈的氨基酸序列的抗體(D02-6)，包含由序列SEQ ID NO:121代表的可變重鏈的氨基酸序列、且包含由序列SEQ ID NO:122代表的可變輕鏈的氨基酸序列的抗體(D02-7)，包含由序列SEQ ID NO:131代表的可變重鏈的氨基酸序列、且包含由序列SEQ ID NO:132代表的可變輕鏈的氨基酸序列的抗體(D02-11)，和包含由序列SEQ ID NO:141代表的可變重鏈的氨基酸序列、且包含由序列SEQ ID NO:142代表的可變輕鏈的氨基酸序列的抗體(D02-13)。
42.根據(jù)權(quán)利要求1-6、14-18、20或23-41中的任一項(xiàng)所述的結(jié)合劑-藥物綴合物，其中所述C4.4a抗體或結(jié)合抗原的抗體片段選自: 包含由SEQ ID NO:346代表的輕鏈的氨基酸序列、且包含由SEQ ID NO:347代表的重鏈的氨基酸序列的抗體(M31-B01)， 包含由SEQ ID NO:352代表的輕鏈的氨基酸序列、且包含由SEQ ID NO:353代表的重鏈的氨基酸序列的抗體(B01-3)， 包含由SEQ ID NO:364代表的輕鏈的氨基酸序列、且包含由SEQ ID NO:365代表的重鏈的氨基酸序列的抗體(B01-10)，和 包含由SEQ ID NO:382代表的輕鏈的氨基酸序列、且包含由SEQ ID NO:383代表的重鏈的氨基酸序列的抗體(D02-6)。
43.根據(jù)權(quán)利要求1-18或20-42中的任一項(xiàng)所述的結(jié)合劑-藥物綴合物或化合物，其用于治療和/或預(yù)防疾病。
44.根據(jù)權(quán)利要求1-18或20-42中的任一項(xiàng)所述的結(jié)合劑-藥物綴合物或化合物，其用于治療和/或預(yù)防過度增生性和/或血管生成性疾病的方法。
45.根據(jù)權(quán)利要求1-18或20-42中的任一項(xiàng)所述的結(jié)合劑-藥物綴合物或化合物，其用于生產(chǎn)藥物，所述藥物用于治療和/或預(yù)防過度增生性和/或血管生成性疾病。
46.藥物，其包含與惰性的、無毒的、藥學(xué)上合適的賦形劑相組合的根據(jù)權(quán)利要求1-18或20-42中的任一項(xiàng)所述的結(jié)合劑-藥物綴合物或化合物。
47.藥物，其包含與一種或多種抗過度增生性的、細(xì)胞生長抑制性的或細(xì)胞毒性的物質(zhì)相組合的根據(jù)權(quán)利要求1-18或20-42中的任一項(xiàng)所述的結(jié)合劑-藥物綴合物或化合物。
48.根據(jù)權(quán)利要求46-47所述的藥物，其用于治療和/或預(yù)防過度增生性和/或血管生成性疾病。
49.用于治療和/或預(yù)防人類和動(dòng)物的過度增生性和/或血管生成性疾病的方法，所述方法使用有效量的至少一種根據(jù)權(quán)利要求1-18或20-42中的任一項(xiàng)所述的結(jié)合劑-藥物綴合物或化合物或在權(quán)利要求46-48中的任一項(xiàng)中定義的藥物。
50.用于制備根據(jù)權(quán)利要求1-6中的任一項(xiàng)所述的通式(Ia)的本發(fā)明化合物的方法，其特征在于，使所述結(jié)合劑在緩沖液中的溶液 [A]與合適的還原劑例如二硫蘇糖醇或三(2-羧基乙基)膦鹽酸鹽混合，隨后與式(IIa)的化合物反應(yīng)
51.選自下述化合物的結(jié)合劑-藥物綴合物:
52.選自下述化合物的結(jié)合劑-藥物綴合物:
【文檔編號(hào)】C07K16/30GK103826661SQ201280019602
【公開日】2014年5月28日 申請日期:2012年4月20日 優(yōu)先權(quán)日:2011年4月21日
【發(fā)明者】H-G.勒亨, L.林登, S.埃爾謝赫, J.維盧達(dá), C.C.科皮茨, J.舒馬赫, S.格雷文, C.馬勒特, B.施特爾特路德維希, S.戈?duì)柗茽? R.貝爾, I.黑斯勒, A.哈倫加, K-H.狄勞赫, S.布魯?shù)? H.佩特魯爾, H.耶里森, S.波爾科夫斯基 申請人:西雅圖基因公司