專利名稱：一種溪黃草素a的制備工藝的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于天然藥物提取技術(shù)領(lǐng)域，涉及ー種溪黃草素A的制備エ藝。
背景技術(shù)：
溪黃草素A (Rabdoserrin A),分子式C2tlH3tlO6,分子量366. 45,是一種ニ職類化合物，為棱晶(丙酮)，mp278 280°C。現(xiàn)代藥理研究表明，溪黃草素A具有具有抗癌活性，對人宮頸癌(HeLa)細胞有顯著的抑制作用。溪黃草素A來源于唇形科(Labiatae)溪黃草Rabdosia serra (Maxim. ) Hara 的全早。溪黃草具有清熱解毒、利濕退黃、散瘀消腫的功效，用于濕熱黃疸、膽嚢炎、泄瀉、瘡腫、跌打傷痛等癥，為多年生草本，廣泛分布于分布于東北及山西、陜西、甘肅、江蘇等 地，資源豐富，溪黃草中含ニ職類化合物溪黃草素(rabdoserrin)A,以及尾葉香茶菜素(excisanin) A, 2α-輕基熊果酸(2 a -hydroxyl-ursolic acid)，熊果酸(ursolic acid)，β _ 谷留醇(β -sitosterol)和 β _ 谷留醇式(β -sitosterol glucoside)。溪黃草素 A 具有較好的臨床應(yīng)用價值，可作為ー種有前途的抗腫瘤藥物，值得進一歩深入研究與開發(fā)。目前，國內(nèi)尚無溪黃草素A的制備エ藝報道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是提供ー種大量制備高純度溪黃草素A的エ藝。為了解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明采用下列技術(shù)方案
一種溪黃草素A的制備エ藝，其特征在于以溪黃草為原料，粉碎，以こ醇溶液為提取溶媒進行提取，將合并的提取液冷卻后過濾，濾液加活性炭攪拌，保溫脫色30min，過濾，脫色液濃縮至相對密度為1.05-1. 12，再通過3000-6000道爾頓的中空纖維超濾膜，操作壓カ為0. 1-0. 2MPa，透過液經(jīng)預(yù)處理好的大孔吸附樹脂吸附，先用水洗脫，再以50-70%こ醇水溶液洗脫，洗脫用量為3-6BV，洗脫液濃縮干燥得到粗品，以正己烷-こ酸こ酷-甲醇-水為溶劑系統(tǒng)，采用高速逆流色譜儀分離，收集流分減壓濃縮，冷凍干燥即得溪黃草素A。所述こ醇溶液的濃度為60-80%，提取方法為回流提取、滲漉提取、微波提取中的一種。所述活性炭為藥用活性炭，加入量為藥材量的2-5%，脫色溫度為40_60°C。所述溶劑系統(tǒng)體積比為(5-7) :(2-4) :(5-7) :(2-4)。本發(fā)明方法制備溪黃草素A，具有能耗低，綠色環(huán)保，且所用試劑可重復(fù)使用，制備量大，產(chǎn)品無損失，純度高等優(yōu)點。
具體實施例方式 下面將結(jié)合具體實施方式
對本發(fā)明作進ー步闡述，但本發(fā)明要求保護的范圍并不局限于下列實施方式。實施例I :
以溪黃草為原料，粉碎，取Ikg置于提取罐中，加入6倍量的70%こ醇進行加熱回流提取2小時，提取2次，合并兩次提取液放冷，過濾，濾液加2%的藥用活性炭加熱攪拌，60°C下保溫脫色30min，過濾，脫色過濾液濃縮至相對密度為I. 08，再通過截留分子量為6000道爾頓的中空纖維超濾膜系統(tǒng)中，調(diào)整操作壓カ為O. 2MPa，收集透過液，將透過液上樣于預(yù)處理好的大孔吸附樹脂柱，飽和吸附后，依次用水、5BV60%こ醇洗脫，收集60%こ醇洗脫液，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮，干燥即得溪黃草素A粗品。以體積比7:3:7:3的正己烷-こ酸こ酷-甲醇-水為溶劑系統(tǒng)，取上相為固定相，下相為流動相，開啟高速逆流色譜儀，取下相溶解粗品，注入色譜儀，調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)速為850rpm，流速2ml/min，收集溪黃草素A流分，減壓濃縮，冷凍干燥得溪黃草素A129mg，經(jīng)HPLC檢測，其含量為98. 8%。實施例2:
以溪黃草為原料，粉碎至60目，取Ikg加入置于提取罐中，加入6倍量的60%こ醇進行微波提取I小時，提取3次，合并三次提取液放冷，過濾，濾液加3. 5%的藥用活性炭加熱攪拌，60°C下保溫脫色30min，過濾，脫色過濾液濃縮至相對密度為I. 12，再通過截留分子量為6000道爾頓的中空纖維超濾膜系統(tǒng)中，調(diào)整操作壓カ為O. IMPa,收集透過液，將透過液 上樣于預(yù)處理好的大孔吸附樹脂柱，飽和吸附后，依次用水、6BV70%こ醇洗脫，收集70%乙醇洗脫液，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮，干燥即得溪黃草素A粗品。以體積比6:2:5:3的正己烷-こ酸こ酷-甲醇-水為溶劑系統(tǒng)，取上相為固定相，下相為流動相，開啟高速逆流色譜儀，取下相溶解粗品，注入色譜儀，調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)速為850rpm,流速2ml/min,收集溪黃草素A流分,減壓濃縮,冷凍干燥得溪黃草素A120mg，經(jīng)HPLC檢測，其含量為98. 6%。實施例3
以溪黃草為原料，粉碎至20目，取3kg置于提取罐中，加入7倍量的80%こ醇進行滲漉提取，至滲漉液色變淡，收集提取液放冷，過濾，濾液加2%的藥用活性炭加熱攪拌，60°C下保溫脫色30min，過濾，脫色過濾液濃縮至相對密度為I. 05，再通過截留分子量為3000道爾頓的中空纖維超濾膜系統(tǒng)中，調(diào)整操作壓カ為O. 12MPa，收集透過液，將透過液上樣于預(yù)處理好的大孔吸附樹脂柱，飽和吸附后，依次用水、5BV50%こ醇洗脫，收集50%こ醇洗脫液，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮，干燥即得溪黃草素A粗品。以體積比5:3:5:4的正己烷-こ酸こ酷-甲醇-水為溶劑系統(tǒng)，取上相為固定相，下相為流動相，開啟高速逆流色譜儀，取下相溶解粗品，注入色譜儀，調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)速為850rpm，流速2ml/min，收集溪黃草素A流分，減壓濃縮，冷凍干燥得溪黃草素A125mg，經(jīng)HPLC檢測，其含量為98. 3%。實施例4:
以溪黃草為原料，粉碎至40目，取5kg置于提取罐中，加入8倍量的75%こ醇進行回流提取I小時，提取3次，合并三次提取液放冷，過濾，濾液加5%的藥用活性炭加熱攪拌，60°C下保溫脫色30min，過濾，脫色過濾液濃縮至相對密度為I. 10，再通過截留分子量為4000道爾頓的中空纖維超濾膜系統(tǒng)中，調(diào)整操作壓カ為O. 2MPa，收集透過液，將透過液上樣于預(yù)處理好的大孔吸附樹脂柱，飽和吸附后，依次用水、4BV65%こ醇洗脫，收集65%こ醇洗脫液，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮，干燥即得溪黃草素A粗品。以體積比5:3:6:2的正己烷-こ酸こ酷-甲醇-水為溶劑系統(tǒng)，取上相為固定相，下相為流動相，開啟高速逆流色譜儀，取下相溶解粗品，注入色譜儀，調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)速為850rpm，流速2ml/min，收集溪黃草素A流分，減壓濃縮，冷凍干燥得溪黃草素A139mg，經(jīng)HPLC檢測，其含量為98. 3%。實施例5:以溪黃草為原料，粉碎至20目，取IOkg置于提取罐中，加入7倍量的70%こ醇進行滲漉提取，至滲漉液色變淡，收集提取液放冷，過濾，濾液加3%的藥用活性炭加熱攪拌，60°C下保溫脫色30min，過濾，脫色過濾液濃縮至相對密度為I. 05，再通過截留分子量為3000道爾頓的中空纖維超濾膜系統(tǒng)中，調(diào)整操作壓カ為O. 15MPa，收集透過液，將透過液上樣于預(yù)處理好的大孔吸附樹脂柱，飽和吸附后，依次用水、3BV60%こ醇洗脫，收集60%こ醇洗脫液，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮，干燥即得溪黃草素A粗品。以體積比5:4:7:3的正己烷-こ酸こ酷-甲醇-水為溶劑系統(tǒng)，取上相為固定相，下相為流動相，開啟高速逆流色譜儀，取下相溶解粗品，注入 色譜儀，調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)速為850rpm，流速2ml/min，收集溪黃草素A流分，減壓濃縮，冷凍干燥得溪黃草素A123mg，經(jīng)HPLC檢測，其含量為98. 2%。
權(quán)利要求
1.一種溪黃草素A的制備エ藝，其特征在干以溪黃草為原料，粉碎，以こ醇溶液為提取溶媒進行提取，將合并的提取液冷卻后過濾，濾液加活性炭攪拌，保溫脫色30min，過濾，脫色液濃縮至相對密度為1.05-1. 12，再通過3000-6000道爾頓的中空纖維超濾膜，操作壓カ為O. 1-0. 2MPa，透過液經(jīng)預(yù)處理好的大孔吸附樹脂吸附，先用水洗脫，再以50-70%こ醇水溶液洗脫，洗脫用量為3-6BV，洗脫液濃縮干燥得到粗品，以正己烷-こ酸こ酷-甲醇-水為溶劑系統(tǒng)，采用高速逆流色譜儀分離，收集流分減壓濃縮，冷凍干燥即得溪黃草素A。
2.如權(quán)利要求I所述ー種溪黃草素A的制備エ藝，其特征在于所述こ醇溶液的濃度為60-80%，提取方法為回流提取、滲漉提取、微波提取中的ー種。
3.如權(quán)利要求I所述ー種溪黃草素A的制備エ藝，其特征在于所述活性炭為藥用活性炭，加入量為藥材量的2-5%，脫色溫度為40-60°C。
4.如權(quán)利要求I所述ー種溪黃草素A的制備エ藝，其特征在于所述溶劑系統(tǒng)體積比為(5-7):(2-4):(5-7) : (2-4)。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種溪黃草素A的制備工藝，其特征在于采用大孔樹脂富集和高速逆流色譜分離技術(shù)相結(jié)合，從溪黃草中提取分離高純度溪黃草素A。其制備工藝步驟為將溪黃草粉碎，加入溶媒提取，將合并的提取液冷卻后過濾，濾液加活性炭脫色，脫色液通過3000-10000道爾頓的超濾膜，透過液經(jīng)預(yù)處理好的大孔吸附樹脂吸附，乙醇水溶液洗脫，得到的洗脫液濃縮得到粗品，采用高速逆流色譜分離得到溪黃草素A。本發(fā)明具有操作簡單、能耗低、產(chǎn)品質(zhì)量高等優(yōu)點，適合工業(yè)化生產(chǎn)。
文檔編號C07D493/20GK102827182SQ20121034552
公開日2012年12月19日 申請日期2012年9月18日 優(yōu)先權(quán)日2012年9月18日
發(fā)明者劉東鋒 申請人:南京澤朗醫(yī)藥科技有限公司