專利名稱：一種提高甜菊糖總甙的新方法
技術領域：
本發(fā)明屬于生物工程和新型甜味劑領域，特別涉及甜菊糖總甙含量的方法。
背景技術：
甜菊糖是從菊科草本植物甜葉菊中精提的新型天然甜味劑。它具有高甜度、低熱能的特點，其甜度是蔗糖的200— 350倍，熱值僅為蔗糖的I / 300。是繼甘蔗、甜菜之外第三種最具有開價值和健康推崇的天然蔗糖替代品，被譽為“世界第三糖源”。甜菊糖在一般著色性，安全無毒，被廣泛應用于食品、釀酒、醫(yī)藥、日用化工等行業(yè)。甜菊糖的九種甜味成分中，甜菊甙、萊鮑迪甙A(RA)和萊鮑迪甙C(RC)的相對含量較高，共占90%以上，是決定甜菊糖味質(zhì)的主要成分。RA甜度最高，相當于蔗糖的450倍，甜味特性也與蔗糖相接近；甜菊甙甜味相當于蔗糖的300倍，具有一定的苦味和不愉快的后味，影響了甜菊糖的味質(zhì)，限制了其更為廣泛的應用。現(xiàn)在中國市場上的甜菊糖產(chǎn)品有相當一部分產(chǎn)品的總甙含量較低，不能滿足客戶的需求，需要再次精制以提高產(chǎn)品總甙。本發(fā)明提供一種簡單易行的方法能將總甙含量較低的產(chǎn)品總甙提高到95%以上。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明解決的技術問題是提供ー種將總甙含量較低的產(chǎn)品總甙提高到95%以上的エ藝。エ藝流程為將甜菊糖原料溶于有機溶劑中，保持溫度為25-45°C，保持2-8小時進行結晶；結晶過程中進行攪拌，攪拌轉(zhuǎn)速為30_100rpm ;上述結晶溶液進行固液分離，烘干獲得精制甜菊糖；結晶溶液的固液分離選擇抽濾或離心分離；
所述甜菊糖原料的質(zhì)量與溶劑的體積比為I : 2-10;上述甜菊糖原料總甙含量不得低于70%。所述有機溶劑為こ醇和丙酮的混合溶劑；所述こ醇純度為90-100%，丙酮純度為100% ；所述こ醇純度優(yōu)選為98-100% ；丙酮與こ醇的比例為I : 2-6;丙酮與こ醇的比例優(yōu)選I : 3-5;所述結晶溫度優(yōu)選30_35°C，結晶時間優(yōu)選4-6小時；所述結晶過程中攪拌轉(zhuǎn)速優(yōu)選40_60rpm ；所述離心機轉(zhuǎn)速為1500-3000rpm ；所述精制樣品的烘干溫度為50_80°C。
有益效果本發(fā)明可將甜菊糖原料的總甙由70%提高至95%以上；本發(fā)明產(chǎn)品的收率較高，一般在35%_70%之間。
具體實施例方式下面通過具體的實施方案敘述本發(fā)明方法。另外，實施方案應理解為說明性的，而非限制本發(fā)明的范圍，本發(fā)明的實質(zhì)和范圍僅由權利要求書所限定。對于本領域技術人員而言，在不背離本發(fā)明實質(zhì)和范圍的前提下，對這些實施方案中的結晶條件進行的各種改變或改動也屬于本發(fā)明的保護范圍。本發(fā)明提高甜菊糖總甙含量的エ藝如下將甜菊糖原料溶于有機溶劑中，
保持溫度為25-450C，保持2-8小時進行結晶；結晶過程中進行攪拌，攪拌轉(zhuǎn)速為30_100rpm ;上述結晶溶液進行固液分離，烘干獲得精制甜菊糖；結晶溶液的固液分離選擇抽濾或離心分離；所述甜菊糖原料的質(zhì)量與溶劑的體積比為I : 2-10;上述甜菊糖原料總式含量不得低于70%。所述有機溶劑為こ醇和丙酮的混合溶劑；所述こ醇純度為90-100%，丙酮純度為100% ；所述こ醇純度優(yōu)選為98-100% ；丙酮與こ醇的比例為I : 2-6;丙酮與こ醇的比例優(yōu)選I : 3-5;所述結晶溫度優(yōu)選30_35°C，結晶時間優(yōu)選4-6小時；所述結晶過程中攪拌轉(zhuǎn)速優(yōu)選40_60rpm ；所述離心機轉(zhuǎn)速為1500_3000rpm ；所述精制樣品的烘干溫度為50_80°C。甜菊糖總甙的測定法法如下HPLC定量測定方法(JECFA 2010會議標準)檢測步驟按照以下液相色譜條件檢測每種糖甙的含量。試劑こ腈，在210nm下檢測透光度>95%.標準品規(guī)格甜菊甙標準品干重純度>99% 萊鮑迪式A標準品干重純度>99%含有9種甜菊糖甙的基準溶液鮑含甜菊甙、萊鮑迪甙A、萊鮑迪甙B、萊鮑迪甙C、萊鮑迪甙D、萊鮑迪甙F、杜爾克甙A、懸鉤子甙和甜菊雙糖甙。用7 3的水こ腈溶液將含有9種甜菊糖甙的標準溶液進行稀釋，以便用來確定各個糖甙的出峰時間。標準品可在日本W(wǎng)ako公司和美國ChromaDex公司買到。標準品溶液的配制精確稱取50毫克甜菊甙標準品和50毫克萊鮑迪甙A標準品，分別放入50毫升的容量瓶中，然后加入7 3的水こ腈溶液進行溶解至50毫升刻度。樣品溶液的配制精確稱取50 — 100毫克甜菊甙樣品，放入50毫升的容量瓶中，然后加入7 3的水こ腈溶液進行溶解至50毫升刻度。
檢測步驟在以下條件下注入5 μ I的樣品溶液。色譜柱Shiseido公司的Capcell pak C18MGII型色譜柱或者Phenomenex公司的Luna5 μ C18 (2) IOOA型色譜柱或者相當規(guī)格的色譜柱(長度250毫米；內(nèi)徑4. 6毫米，填料粒度5 μ m)。；流動相比例為32 68的こ腈和磷酸鈉緩沖液(規(guī)格10mmol/L，pH值2. 6)的混合液。磷酸鈉緩沖液的配置方法將2. 76克磷酸ニ氫鈉溶解到2升水中，加入磷酸將pH值調(diào)整到2. 6流速I毫升/毎分鐘。 檢測器210nm紫外檢測。色譜柱溫度40°C記錄大約30分鐘的檢測圖譜。峰值識別和計算將樣品溶液的出峰與含有9種甜菊糖甙的基準溶液的出峰時間(見附后圖譜)相對比，確定樣品溶液中各個出峰對應的糖甙。算出樣品溶液中9種糖甙對應的峰面積，算出甜菊甙標準品溶液和萊鮑迪甙A標準品溶液的峰面積。按照以下公式，計算樣品中萊鮑迪甙A之外的8種糖甙中每ー種糖甙的百分比%X= [ffs/ff] X [fxAx/As] x 100按照以下公式，計算樣品中萊鮑迪甙A的百分比% 萊鮑迪式 A= [WR/ff] X [Ax/AR] X 100公式中X代表每種糖甙Ws是甜菊甙標準品溶液中甜菊甙的干重(mg)WR是萊鮑迪甙A標準品溶液中萊鮑迪甙A的干重(mg)W是樣品溶液中樣品的干重(mg)As是甜菊甙標準品溶液的峰面積AR是萊鮑迪甙A標準品溶液的峰面積Ax是樣品溶液每種糖甙的峰面積fx是每種糖甙的分子量與甜菊甙分子量的比值I. 00 (甜菊甙)，I. 20 (萊鮑迪甙A), 1.00(萊鮑迪甙B)，I. 18 (萊鮑迪甙C)，1.40(萊鮑迪甙D)，I. 16(萊鮑迪甙F)，0. 98 (杜爾克甙A) ,0.80(懸鉤子甙),0.80(甜菊雙糖甙)。計算甜菊糖甙總量的百分比(將9種糖甙的百分比相加)實施例I取甜菊糖原料100g，加入200ml溶劑，こ醇純度為98%，丙酮純度為100%，丙酮乙醇=1 3，充分溶解后置于三ロ燒瓶中，水浴控制溫度30攝氏度，攪拌速度為90rpm，時間為8小吋，將結晶混合液用布氏漏斗進行抽濾，所得晶體50°C過夜烘干，得干樣42. 3g。液相測定結果為
權利要求
1.一種提高甜菊糖總甙的新方法，步驟如下 將甜菊糖原料溶于有機溶劑中，保持溫度為25-45°C，保持2-8小時進行結晶；結晶過程中進行攪拌，攪拌轉(zhuǎn)速為30-100rpm ;上述結晶溶液進行固液分離，烘干獲得精制甜菊糖，所述甜菊糖原料的質(zhì)量與溶劑的體積比為I : 2-10，所述有機溶劑為こ醇和丙酮的混合溶剤。
2.根據(jù)權利要求I所述ー種提高甜菊糖總甙的新方法，其特征在于所述結晶溶液的固液分離為抽濾或離心分離。
3.根據(jù)權利要求I所述ー種提高甜菊糖總甙的新方法，其特征在于所述こ醇純度為.90-100%,丙酮純度為100%。
4.根據(jù)權利要求3所述ー種提高甜菊糖總甙的新方法，其特征在于所述こ醇純度優(yōu)選為 98-I00%ο
5.根據(jù)權利要求I所述ー種提高甜菊糖總甙的新方法，其特征在于所述丙酮與こ醇的比例為I : 2-6。
6.根據(jù)權利要求5所述ー種提高甜菊糖總甙的新方法，其特征在于所述丙酮與こ醇的比例優(yōu)選I 3-5。
7.根據(jù)權利要求I所述ー種提高甜菊糖總甙的新方法，其特征在于所述結晶溫度優(yōu)選.30-35 0C，結晶時間優(yōu)選4-6小時。
8.根據(jù)權利要求I所述ー種提高甜菊糖總甙的新方法，其特征在于所述離心機轉(zhuǎn)速為.1500-3000rpm,所述精制樣品的烘干溫度為50_80°C。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種提高甜菊糖總甙的新方法，本發(fā)明屬于生物工程和新型甜味劑領域，特別涉及甜菊糖總甙含量的方法。一種提高甜菊糖總甙的新方法，步驟如下將甜菊糖原料溶于有機溶劑中，保持溫度為25-45℃，保持2-8小時進行結晶；結晶過程中進行攪拌，攪拌轉(zhuǎn)速為30-100rpm；上述結晶溶液進行固液分離，烘干獲得精制甜菊糖，所述甜菊糖原料的質(zhì)量與溶劑的體積比為1∶2-10，所述有機溶劑為乙醇和丙酮的混合溶劑。本發(fā)明可將甜菊糖原料的總甙由70%提高至95%以上。
文檔編號C07H1/08GK102690305SQ20121018487
公開日2012年9月26日 申請日期2012年6月6日 優(yōu)先權日2012年6月6日
發(fā)明者喬長晟, 李利寧, 李振海, 樓鵬, 王彥飛 申請人:天津北洋百川生物技術有限公司