專利名稱：治療性dll4結(jié)合蛋白的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
·本發(fā)明涉及DLL4結(jié)合蛋白的開發(fā)和使用及其在抑制、預(yù)防和/或治療癌癥、腫瘤、其他血管生成依賴性疾病、血管生成非依賴性疾病、以及特征在于異常DLL4表達(dá)或活性的黃斑變性和年齡相關(guān)的黃斑變性疾病中的用途。
背景技術(shù)：
細(xì)胞間通訊是許多生物學(xué)過程例如分化、增殖和穩(wěn)態(tài)所需的。由廣泛范圍的真核細(xì)胞利用的一種系統(tǒng)是Notch信號傳導(dǎo)途徑。這個途徑尤其是Notch受體對于功能性腫瘤血管生成也是關(guān)鍵的。因此，Notch受體功能的抑制、Notch受體的阻斷和/或Notch信號傳導(dǎo)途徑的阻斷是抗癌組合物和療法的潛在策略。Notch受體的小分子抑制劑已證明是毒性的，因為它們抑制遍及機體的Notch受體的野生型(正常)組織表達(dá)。因此，Notch信號傳導(dǎo)途徑的不同成員應(yīng)視為用于治療學(xué)的潛在靶。關(guān)于Notch受體的脈管系統(tǒng)配體是δ4或δ樣4(DLL4)。在脈管系統(tǒng)中大量表達(dá)的 DLL4 對于脈管發(fā)育是關(guān)鍵的(Yan 等人，Cancer Res.，13 (24):7243-7246 (2007)；Shutter 等人，(7(9/7(951 Dev. ,14 (11):1313-1318 (2000) ;Gale 等人，Natl. Acad.Sci. USAAQl (45):15949-15954 (2004) ;Krebs 等人，Dev. , 14 (11) :1343-1352(2000))。由于脈管發(fā)育中的主要缺陷，對于DLL4雜合的小鼠是胚胎致死的(Gale等人，Proc. Natl. Acad. Sci. "5 ，101 (45) : 15949-15954 (2004) ;Duarte 等人，ifer.，18 (20):2474-2478 (2004) ;Krebs 等人，ifeK , 18 (20):2469-2473 (2004))。DLL4的表達(dá)可以通過 VEGF 誘導(dǎo)(Liu 等人，#o7. Cell Biol., 23 (1):14-25 (2003) ;Lobov 等)κ，Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 104 (9) :3219-3224 (2007))。總之，DLL4 可以負(fù)面調(diào)節(jié)VEGF信號傳導(dǎo)，部分通過阻遏VEGFR2且誘導(dǎo)VEGFRl (Harrington等人，Microvasc.Tfes.，75 (2) :144-154 (2008) ;Suchting 等人，Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 104 (9)3225-3230 (2007))。在DLL4和VEGF之間的巧妙配合對于功能性血管生成是必需的。除其生理學(xué)作用外，DLL4在腫瘤血管中是上調(diào)的(Gale等人，Proc. Natl. Acad.Sci. USAAQl (45):15949-15954 (2004) ;Mailhos 等 k, Differentiation,m (2-3)135-144 (2001);Patel 等人，Tfes.，65 (19):8690-8697 (2005);Patel 等人，CZi/ .Cancer Res. ,12 (16):4836-4844 (2006) ；Noguera-Troise 等人，Tfeiare,444 (7122)1032-1037(2006))。DLL4的阻斷潛在抑制多重模型中的原發(fā)性腫瘤生長(Noguera-Troise等人，艙i re，444 (7122):1032-1037 (2006)；Ridgway 等人，艙iare，444 (7122):1083-1087(2006) ；Scehnet 等人，Blood, 109 (11) :4753-4760 (2007))。DLL4 的抑制甚至針對對于抗VEGF療法有抵抗力的腫瘤也是有效的。DLL4和VEGF的組合抑制提供了增強的抗腫瘤活性。有趣的是，與減少腫瘤脈管形成的VEGF抑制不同，DLL4阻斷導(dǎo)致腫瘤脈管系統(tǒng)密度中的增加，其中脈管是異 常的，不能支持有效的血液運輸，并且是有效地?zé)o功能的。因此，DLL4提供了用于癌癥治療的潛在靶。本領(lǐng)域需要能夠靶向DLL4_Notch途徑并且從而抑制或甚至預(yù)防腫瘤血管生成和生長的治療劑。發(fā)明概沭
本發(fā)明提供了結(jié)合人DLL4的蛋白質(zhì)。本發(fā)明的DLL4結(jié)合蛋白包括但不限于大鼠單克隆抗體、嵌合抗體、cDNA嫁接抗體(⑶R grafted antibody)、人源化抗體、靈長類化的(primate-ized)抗體、親和力成熟的抗體、及其能夠結(jié)合人DLL4的片段。優(yōu)選地,本文描述的結(jié)合蛋白以高親和力結(jié)合人DLL4。更優(yōu)選地，根據(jù)本發(fā)明的結(jié)合蛋白能夠中和人DLL4。本發(fā)明還提供了制備且使用DLL4結(jié)合蛋白的方法。本發(fā)明的一個方面提供了能夠結(jié)合人DLL4的結(jié)合蛋白，其中所述結(jié)合蛋白包含選自下述氨基酸序列的至少一種氨基酸序列SEQ ID NO: 157, SEQ ID NO: 158, SEQ IDNO:159,SEQ ID NO:160,SEQ ID N0:161、SEQ ID NO:162,SEQ ID NO:163和SEQ ID NO:164。本發(fā)明的一個方面涉及包含抗原結(jié)合結(jié)構(gòu)域的結(jié)合蛋白，其中所述結(jié)合蛋白能夠結(jié)合人DLL4，所述抗原結(jié)合結(jié)構(gòu)域包含至少一個或多個(即，兩個、三個、四個、五個或六個)CDRs，其中
CDR-Hl 選自
X1-X2-X3-X4-X5 (SEQ ID NO: 151)，其中；
乂1是隊!1或Y;
乂2是卩；
X3 是P;
乂4 是 M ;
X5是A或S ;
SEQ ID NO: 157 的殘基 31-35 (CDR-Hl 38H12)；
SEQ ID NO: 161 的殘基 31-35 (CDR-Hl 37D10)；
SEQ ID NO: 163 的殘基 31-35 (CDR-Hl 32C7)；
SEQ ID NO: 165 的殘基 31-35 (CDR-Hl 14G1)；
SEQ ID NO: 167 的殘基 31-35 (CDR-Hl 14A11)；
SEQ ID NO: 169 的殘基 31-35 (CDR-Hl 15D6)；
SEQ ID NO: 171 的殘基 31-35 (CDR-Hl VH. I 1A11)；
SEQ ID NO: 172 的殘基 31-35 (CDR-Hl VH. Ia 1A11)；
SEQ ID NO: 173 的殘基 31-35 (CDR-Hl VH. Ib 1A11)；
SEQ ID NO: 174 的殘基 31-35 (CDR-Hl VH. 2a 1A11)；
SEQ ID NO: 179 的殘基 31-35 (CDR-Hl VH. I 38H12)；
SEQ ID NO: 180 的殘基 31-35 (CDR-Hl VH. IA 38H12)；
SEQ ID NO: 181 的殘基 31-35 (CDR-Hl VH. Ib 38H12)；SEQ ID NO: 182 的殘基 31-35 (CDR-Hl VH. 2a 38H12)；
SEQ ID NO: 187 的殘基 31-35 (CDR-Hl hlAllVH. I)；
SEQ ID NO: 188 的殘基 31-35 (CDR-Hl hlAll. A6)；
SEQ ID NO: 189 的殘基 31-35 (CDR-Hl hlAll. A8)；
SEQ ID NO: 190 的殘基 31-35 (CDR-Hl hlAll. C6)；
SEQ ID NO: 191 的殘基 31-35 (CDR-Hl hlAll. All)；
SEQ ID NO: 192 的殘基 31-35 (CDR-Hl hlAll. B5)；
SEQ ID NO: 193 的殘基 31-35 (CDR-Hl hlAll. E12)；
SEQ ID NO: 194 的殘基 31-35 (CDR-Hl hlAll. G3)；
SEQ ID NO: 195 的殘基 31-35 (CDR-Hl hlAll. F5);和 SEQ ID NO: 196 的殘基 31-35 (CDR-Hl hlAll. H2)；
CDR-H2 選自
X1-X2-X3-X4-X5-X6-X7-X8-X9- X10 - X11 - X12 - X13 - X14 - X15 - X16 - X17 (SEQ IDNO:152)，其中；
X1是T或S ;
X2 是 I ;
X3 是 S ;
X4是S或G ;
X5 是 S ;
X6 是 D ;
X7 是 G、A、D、S 或 E ;
X8是T或W ;
父9是1\ 或A ;
X1。是 Y、S、T 或N;
X11是Y或I ;
X12是R或G ;
X13 是 D ;
Xl4 是 S ;
X15 是 V ;
X16是K ;和 X17 是 G ;
SEQ ID NO: 157 的殘基 50-66 (CDR-H2 38H12)；
SEQ ID NO: 161 的殘基 50-68 (CDR-H2 37D10)；
SEQ ID NO: 163 的殘基 50-66 (CDR-H2 32C7)；
SEQ ID NO: 165 的殘基 50-66 (CDR-H2 14G1)；
SEQ ID NO: 167 的殘基 50-66 (CDR-H2 14A11)；
SEQ ID NO: 169 的殘基 50-66 (CDR-H2 15D6)；
SEQ ID NO: 171 的殘基 50-66 (CDR-H2 VH. I 1A11)；
SEQ ID NO: 172 的殘基 50-66 (CDR-H2 VH. Ia 1A11)；SEQ ID NO: 173 的殘基 50-66 (CDR-H2 VH. Ib 1A11)；
SEQ ID NO: 174 的殘基 50-66 (CDR-H2 VH. 2a 1A11)；
SEQ ID NO: 179 的殘基 50-66 (CDR-H2 VH. I 38H12)；
SEQ ID NO: 180 的殘基 50-66 (CDR-H2 VH. IA 38H12)；
SEQ ID NO: 181 的殘基 50-66 (CDR-H2 VH. Ib 38H12)；
SEQ ID NO: 182 的殘基 31-35 (CDR-Hl VH. 2a 38H12)；
SEQ ID NO: 187 的殘基 50-66 (CDR-H2 hlAllVH. I)；
SEQ ID NO: 188 的殘基 50-66 (CDR-H2 hlAll. A6)；
SEQ ID NO: 189 的殘基 50-66 (CDR-H2 hlAll. A8)；
SEQ ID NO: 190 的殘基 50-66 (CDR-H2 hlAll. C6)；
SEQ ID NO: 191 的殘基 50-66 (CDR-H2 hlAll. All)；
SEQ ID NO: 192 的殘基 50-66 (CDR-H2 hlAll. B5)；
SEQ ID NO: 193 的殘基 50-66 (CDR-H2 hlAll. E12)；
SEQ ID NO: 194 的殘基 50-66 (CDR-H2 hlAll. G3)；
SEQ ID NO: 195 的殘基 50-66 (CDR-H2 hlAll. F5);和SEQ ID NO: 196 的殘基 50-66 (CDR-H2 hlAll. H2)；
CDR-H3 選自
X1-X2-X3-X4-X5-X6-X7-X8-X9 (SEQ ID NO: 153)，其中；XjG;
乂2是丫；
X3是 Y;
X4 是 N ;
X5 是 S ;
X6 是 P ;
XjF;
X8是A ;和X9 是 Y、F 或 S ;
SEQ ID NO: 157 的殘基 99-107 (CDR-H3 38H12)；
SEQ ID NO: 161 的殘基 101-111 (CDR-H3 37D10)；
SEQ ID NO: 163 的殘基 99-105 (CDR-H3 32C7)；
SEQ ID NO: 165 的殘基 99-105 (CDR-H3 14G1)；
SEQ ID NO: 167 的殘基 99-110 (CDR-H3 14A11)；
SEQ ID NO: 169 的殘基 99-110 (CDR-H3 15D6)；
SEQ ID NO: 171 的殘基 99-107 (CDR-H3 VH. I 1A11)；
SEQ ID NO: 172 的殘基 99-107 (CDR-H3 VH. Ia 1A11)；
SEQ ID NO: 173 的殘基 99-107 (CDR-H3 VH. Ib 1A11)；
SEQ ID NO: 174 的殘基 99-107 (CDR-H3 VH. 2a 1A11)；
SEQ ID NO: 179 的殘基 99-107 (CDR-H3 VH. I 38H12)；
SEQ ID NO: 180 的殘基 99-107 (CDR-H3 VH. IA 38H12)；SEQ ID NO: 181 的殘基 99-107 (CDR-H2 VH. Ib 38H12)；
SEQ ID NO: 182 的殘基 99-107 (CDR-Hl VH. 2a 38H12)；
SEQ ID NO: 187 的殘基 99-107 (CDR-H3 hlAllVH. I)；
SEQ ID NO: 188 的殘基 99-107 (CDR-H3 hlAll. A6)；
SEQ ID NO: 189 的殘基 99-107 (CDR-H3 hlAll. A8)；
SEQ ID NO: 190 的殘基 99-107 (CDR-H3 hlAll. C6)；
SEQ ID NO: 191 的殘基 99-107 (CDR-H3 hlAll. All)；
SEQ ID NO: 192 的殘基 99-107 (CDR-H3 hlAll. B5)；
SEQ ID NO: 193 的殘基 99-107 (CDR-H3 hlAll. E12)；·
SEQ ID NO: 194 的殘基 99-107 (CDR-H3 hlAll. G3)；
SEQ ID NO: 195 的殘基 99-107 (CDR-H3 hlAll. F5);和SEQ ID NO: 196 的殘基 99-107 (CDR-H3 hlAll. H2)；
CDR-Ll 選自
X1-X2-X3-X4-X5-X6-X7-X8-X9- X10 - X11 (SEQ ID NO: 154)，其中；XjR;
X2 是 A ;
X3 是 S ;
X4是E或Q ;
X5是D或E ;
X6 是 I ;
X7是Y或W ;
父8是3、1、￥^或1 ;
X9 是 N ;
Xi0是L ;和
X11是 A ;
SEQ ID NO: 158 的殘基 24-34 (CDR-Ll 38H12)；
SEQ ID NO: 162 的殘基 24-34 (CDR-Ll 37D10)；
SEQ ID NO: 164 的殘基 24-34 (CDR-Ll 32C7)；
SEQ ID NO: 166 的殘基 24-34 (CDR-Ll 14G1)；
SEQ ID NO: 168 的殘基 23-37 (CDR-Ll 14A11)；
SEQ ID NO: 170 的殘基 23-37 (CDR-Ll 15D6)；
SEQ ID NO: 175 的殘基 24-34 (CDR-Ll VL. I 1A11)；
SEQ ID NO: 176 的殘基 24-34 (CDR-Ll VL. Ia 1A11)；
SEQ ID NO: 177 的殘基 24-34 (CDR-Ll VL. Ib 1A11)；
SEQ ID NO: 178 的殘基 24-34 (CDR-Ll VL. 2a 1A11)；
SEQ ID NO: 183 的殘基 24-34 (CDR-Ll VL. I 38H12)；
SEQ ID NO: 184 的殘基 24-34 (CDR-Ll VL. Ia 38H12)；
SEQ ID NO: 185 的殘基 24-34 (CDR-Ll VL. Ib 38H12)；
SEQ ID NO: 186 的殘基 24-34 (CDR-Ll VL. 2a 38H12)；SEQ ID NO: 197 的殘基 24-34 (CDR-LlhlAllVL. I)；
SEQ ID NO: 198 的殘基 24-34 (CDR-LlhlAll. A2)；
SEQ ID NO: 199 的殘基 24-34 (CDR-LlhlAll. A12)；
SEQ ID NO:200 的殘基 24-34 (CDR-LlhlAll. A7)；
SEQ ID NO:201 的殘基 24-34 (CDR-LlhlAll. B4)；
SEQ ID NO:202 的殘基 24-34 (CDR-LlhlAll. B5);和
SEQ ID NO:203 的殘基 24-34 (CDR-LlhlAll. E12)；CDR-L2 選自
X1 -X2-X3-X4-X5-X6-X7 (SEQ ID NO: 155)，其中；
X1 是 D ;
乂2是丁 ；
X3是N或S ;
X4 是N、D、S、I、Y或 V ;
X5 是 L ;
X6是A ;和X7 是 D ;
SEQ ID NO: 158 的殘基 50-56(CDR-L238Η12)；
SEQ ID NO: 162 的殘基 50-56(CDR-L237D10)；
SEQ ID NO: 164 的殘基 50-56(CDR-L232C7)；
SEQ ID NO: 166 的殘基 50-56(CDR-L214G1)；
SEQ ID NO: 168 的殘基 53-59(CDR-L214Α11)；
SEQ ID NO: 170 的殘基 53-59(CDR-L215D6)；
SEQ ID NO: 175 的殘基 50-56(CDR-L2VL. I 1Α11)；
SEQ ID NO: 176 的殘基 50-56(CDR-L2VL. Ia 1Α11)；
SEQ ID NO: 177 的殘基 50-56(CDR-L2VL. Ib 1Α11)；
SEQ ID NO: 178 的殘基 50-56(CDR-L2VL. 2a 1A11)；
SEQ ID NO: 183 的殘基 50-56(CDR-L2VL. I 38H12)；
SEQ ID NO: 184 的殘基 50-56(CDR-L2VL. Ia 38H12)；
SEQ ID NO: 185 的殘基 50-56(CDR-L2VL. Ib 38H12)；
SEQ ID NO: 186 的殘基 50-56(CDR-L2VL. 2a 38H12)；
SEQ ID NO: 197 的殘基 50-56(CDR-L2hlAllVL. I)；
SEQ ID NO: 198 的殘基 50-56(CDR-L2hlAll. A2)；
SEQ ID NO: 199 的殘基 50-56(CDR-L2hlAll. A12)；
SEQ ID NO:200 的殘基 50-56(CDR-L2hlAll. A7)；
SEQ ID NO:201 的殘基 50-56(CDR-L2hlAll. B4)；
SEQ ID NO:202 的殘基 50-56(CDR-L2hlAll. B5);和
SEQ ID NO:203 的殘基 50-56(CDR-L2hlAll. E12)；
和
CDR-L3 選自X1-X2-X3-X4-X5-X6-X7-X8-X9 (SEQ ID NO: 156)，其中；
X1 是 Q ;
X2 是 Q ;
X3是 Y; X4 是 N、D 或 T ;
X5 是 N、Y 或 W ;
X6是Y或V ;
X7 是 P ;
X8是P ;和 χ^τ。SEQ ID NO: 158 的殘基 89-97 (CDR-L3 38H12)；
SEQ ID NO: 162 的殘基 89-97 (CDR-L3 37D10)；
SEQ ID NO: 164 的殘基 89-97 (CDR-L3 32C7)；
SEQ ID NO: 166 的殘基 89-98 (CDR-L3 14G1)；
SEQ ID NO: 168 的殘基 92-100 (CDR-L3 14A11)；
SEQ ID NO: 170 的殘基 92-100 (CDR-L3 15D6)；
SEQ ID NO: 175 的殘基 89-97 (CDR-L3 VL. I 1A11)；
SEQ ID NO: 176 的殘基 89-97 (CDR-L3 VL. Ia 1A11)；
SEQ ID NO: 177 的殘基 89-97 (CDR-L3 VL. Ib 1A11)；
SEQ ID NO: 178 的殘基 89-97 (CDR-L3 VL. 2a 1A11)；
SEQ ID NO: 183 的殘基 89-97 (CDR-L3 VL. I 38H12)；
SEQ ID NO: 184 的殘基 89-97 (CDR-L3 VL. Ia 38H12)；
SEQ ID NO: 185 的殘基 89-97 (CDR-L3 VL. Ib 38H12)；
SEQ ID NO: 186 的殘基 89-97 (CDR-L3 VL. 2a 38H12)；
SEQ ID NO: 197 的殘基 89-97 (CDR-L3 hlAllVL. I)；
SEQ ID NO: 198 的殘基 89-97 (CDR-L3 hlAll. A2)；
SEQ ID NO: 199 的殘基 89-97 (CDR-L3 hlAll. A12)；
SEQ ID NO:200 的殘基 89-97 (CDR-L3 hlAll. A7)；
SEQ ID NO:201 的殘基 89-97 (CDR-L3 hlAll. B4)；
SEQ ID NO:202 的殘基 89-97 (CDR-L3 hlAll. B5)；
SEQ ID NO: 203 的殘基 89-97 (CDR-L3 hlAlLE12)。優(yōu)選地，本發(fā)明的DLL4結(jié)合蛋白包含至少一個⑶R，其包含選自下述的氨基酸序列
SEQ ID NO: 157 的殘基 31-35 (CDR-Hl 38H12)；SEQ ID NO: 157 的殘基 50-66 (CDR-H238H12) ；SEQ ID NO: 157 的殘基 99-107 (CDR-H3 38H12)；
SEQ ID NO: 158 的殘基 24-34 (CDR-Ll 38H12)；SEQ ID NO: 158 的殘基 50-56 (CDR-L238H12) ；SEQ ID NO: 158 的殘基 89-97 (CDR-L3 38H12)；
SEQ ID NO: 159 的殘基 31-35 (CDR-Hl 1A11) ；SEQ ID NO: 159 的殘基 50-66 (CDR-H21A11) ；SEQ ID NO: 159 的殘基 99-107 (CDR-H3 1A11);SEQ ID NO: 160 的殘基 24-34 (CDR-Ll 1A11) ；SEQ ID NO: 160 的殘基 50-56 (CDR-L21A11) ；SEQ ID NO: 160 的殘基 89-97 (CDR-L3 1A11)；
SEQ ID NO: 161 的殘基 31-35 (CDR-Hl 37D10)；SEQ ID NO: 161 的殘基 50-68 (CDR-H237D10) ；SEQ ID NO: 161 的殘基 101-111 (CDR-H3 37D10)；
SEQ ID NO: 162 的殘基 24-34 (CDR-Ll 37D10)；SEQ ID NO: 162 的殘基 50-56 (CDR-L237D10) ；SEQ ID NO: 162 的殘基 89-97 (CDR-L3 37D10)；
SEQ ID NO: 163 的殘基 31-35 (CDR-Hl 32C7) ；SEQ ID NO: 163 的殘基 50-66 (CDR-H232C7) ；SEQ ID NO: 163 的殘基 99-105 (CDR-H3 32C7)；
SEQ ID NO: 164 的殘基 24-34 (CDR-Ll 32C7) ；SEQ ID NO: 164 的殘基 50-56 (CDR-L232C7) ；SEQ ID NO: 164 的殘基 89-98 (CDR-L3 32C7)；
SEQ ID NO: 165 的殘基 31-35 (CDR-Hl 14G1) ；SEQ ID NO: 165 的殘基 50-66 (CDR-H2·14G1) ；SEQ ID NO: 165 的殘基 99-105 (CDR-H3 14G1)；
SEQ ID NO: 166 的殘基 24-34 (CDR-L1 14G1) ；SEQ ID NO: 166 的殘基 50-56 (CDR-L214G1) ；SEQ ID NO: 166 的殘基 89-98 (CDR-L3 14G1)；
SEQ ID NO: 167 的殘基 31-35 (CDR-Hl 14A11)；SEQ ID NO: 167 的殘基 50-66 (CDR-H214A11) ；SEQ ID NO: 167 的殘基 99-110 (CDR-H3 14A11)；
SEQ ID NO: 168 的殘基 23-37 (CDR-Ll 14A11)；SEQ ID NO: 168 的殘基 53-59 (CDR-L214A11) ；SEQ ID NO: 168 的殘基 92-100 (CDR-L3 14A11)；
SEQ ID NO: 169 的殘基 31-35 (CDR-H1 15D6) ；SEQ ID NO: 169 的殘基 50-66 (CDR-H215D6) ；SEQ ID NO: 169 的殘基 99-110 (CDR-H3 15D6)；
SEQ ID NO: 170 的殘基 23-37 (CDR-L1 15D6) ；SEQ ID NO: 170 的殘基 53-59 (CDR-L215D6) ；SEQ ID NO: 170 的殘基 92-100 (CDR-L3 15D6)；
SEQ ID NO: 171 的殘基 31-35 (CDR-H1 VH. I 1A11) ；SEQ ID NO: 171 的殘基 50-66(CDR-H2 VH. I 1A11)；SEQ ID NO: 171 的殘基 99-107 (CDR-H3 VH. I 1A11)；SEQ ID NO: 172的殘基 31-35 (CDR-Hl VH. Ia 1A11)；SEQ ID NO: 172 的殘基 50-66 (CDR-H2 VH. Ia 1A11)；SEQ ID NO: 172 的殘基 99-107(CDR-H3 VH. Ia 1A11)；SEQ ID NO: 173 的殘基 31_35(CDR-H1VH. Ib 1A11)；SEQ ID NO: 173 的殘基 50-66 (CDR-H2 VH. Ib 1A11)；SEQ ID NO:173 的殘基99-107 (CDR-H3 VH. Ib IAlI) ；SEQ ID NO: 174 的殘基 31-35 (CDR-Hl VH. 2a IAlI) ；SEQID NO: 174 的殘基 50-66 (CDR-H2 VH. 2a 1A11) ；SEQ ID NO: 174 的殘基 99-107 (CDR-H3VH. 2a 1A11) ；SEQ ID NO: 175 的殘基 24-34 (CDR-L1 VL. I 1A11) ；SEQ ID NO:175 的殘基50-56 (CDR-L2 VL. I 1A11) ；SEQ ID NO: 175 的殘基 89-97 (CDR-L3 VL. I 1A11) ；SEQ IDNO: 176 的殘基 24-34 (CDR-Ll VL. Ia 1A11)；SEQ ID NO: 176 的殘基 50-56 (CDR-L2 VL. Ia1A11) ；SEQ ID NO: 176 的殘基 89-97 (CDR-L3 VL. Ia 1A11) ；SEQ ID NO: 177 的殘基 24-34(CDR-Ll VL. Ib 1A11)；SEQ ID NO: 177 的殘基 50-56(CDR-L2 VL. Ib 1A11)；SEQ ID NO: 177的殘基 89-97 (CDR-L3 VL. Ib 1A11)；SEQ ID NO: 178 的殘基 24-34 (CDR-Ll VL. 2a 1A11)；SEQ ID NO: 178 的殘基 50-56 (CDR-L2 VL. 2a 1A11)；SEQ ID NO: 178 的殘基 89-97 (CDR-L3VL. 2a 1A11)；SEQ ID NO: 179 的殘基 31-35 (CDR-Hl VH. I 38H12)；SEQ ID NO:179 的殘基50-66 (CDR-H2 VH. I 38H12) ；SEQ ID NO: 179 的殘基 99-107 (CDR-H3 VH. I 38H12) ；SEQID NO: 180 的殘基 31-35 (CDR-Hl VH. IA 38H12) ；SEQ ID NO: 180 的殘基 50-66 (CDR-H2VH. IA 38H12)；SEQ ID NO: 180 的殘基 99-107 (CDR-H3 VH. IA 38H12)；SEQ ID NO: 181 的殘基 31-35(CDR-H1 VH. Ib 38H12)；SEQ ID NO: 181 的殘基 50-66(CDR-H2 VH. Ib 38H12)；SEQID NO: 181 的殘基 99-107 (CDR-H3 VH. Ib 38H12) ；SEQ ID NO: 182 的殘基 31-35 (CDR-HlVH. 2a 38H12)；SEQ ID NO: 182 的殘基 50-66 (CDR-H2 VH. 2a 38H12)；SEQ ID NO: 182 的殘基 99-107 (CDR-H3 VH. 2a 38H12) ；SEQ ID NO: 183 的殘基 24-34 (CDR-Ll VL. I 38H12)；SEQ ID NO: 183 的殘基 50-56 (CDR-L2 VL. I 38H12)；SEQ ID NO: 183 的殘基 89-97 (CDR-L3VL. I 38H12)；SEQ ID NO: 184 的殘基 24-34 (CDR-Ll VL. Ia 38H12)；SEQ ID NO: 184 的殘基50-56 (CDR-L2 VL. Ia 38H12) ；SEQ ID NO: 184 的殘基 89-97 (CDR-L3 VL. Ia 38H12) ；SEQID NO: 185 的殘基 24-34 (CDR-Ll VL. Ib 38H12) ；SEQ ID NO: 185 的殘基 50-56 (CDR-L2VL. Ib 38H12)；SEQ ID NO: 185 的殘基89-97(CDR-L3 VL. Ib 38H12)；SEQ ID NO: 186 的殘基24-34 (CDR-Ll VL. 2a 38H12) ；SEQ ID NO: 186 的殘基 50-56 (CDR-L2 VL. 2a 38H12) ；SEQID NO: 186 的殘基 89-97 (CDR-L3 VL. 2a 38H12) ；SEQ ID NO: 187 的殘基 31-35 (CDR-HlhlAllVH. I) ；SEQ ID NO: 187 的殘基 50-66 (CDR-H2 hlAllVH. I) ；SEQ ID NO:187 的殘基99-107 (CDR-H3 hlAllVH. I) ；SEQ ID NO: 188 的殘基 31-35 (CDR-Hl hlAll. A6) ；SEQ IDNO: 188 的殘基 50-66 (CDR-H2 hlAll. A6)；SEQ ID NO: 188 的殘基 99-107 (CDR-H3 hlAll.·A6) ；SEQ ID NO:189 的殘基 31-35 (CDR-H1 hlAll. A8) ；SEQ ID NO: 189 的殘基 50-66(CDR-H2 hlAll. A8)；SEQ ID NO: 189 的殘基 99-107 (CDR-H3 hlAll. A8)；SEQ ID NO: 190 的殘基 31-35 (CDR-Hl hlAll. C6)；SEQ ID NO: 190 的殘基 50-66 (CDR-H2 hlAll. C6)；SEQ IDNO: 190 的殘基 99-107 (CDR-H3 hlAll. C6)；SEQ ID NO: 191 的殘基 31-35 (CDR-Hl hlAll.All) ；SEQ ID NO: 191 的殘基 50-66 (CDR-H2 hlAll. All) ；SEQ ID NO: 191 的殘基 99-107(CDR-H3 hlAll. A11)；SEQ ID NO: 192 的殘基 31-35 (CDR-H1 hlAll. B5)；SEQ ID NO: 192 的殘基 50-66(CDR-H2 hlAll. B5)；SEQ ID NO: 192 的殘基 99-107(CDR-H3 hlAll. B5)；SEQ IDNO: 193 的殘基 31-35 (CDR-Hl hlAll. E12)；SEQ ID NO: 193 的殘基 50-66 (CDR-H2 hlAll.E12) ；SEQ ID NO: 193 的殘基 99-107 (CDR-H3 hlAll. E12) ；SEQ ID NO: 194 的殘基 31-35(CDR-Hl hlAll. G3) ；SEQ ID NO: 194 的殘基 50-66 (CDR-H2 hlAll. G3) ；SEQ ID NO: 194的殘基 99-107 (CDR-H3 hlAll. G3) ；SEQ ID NO: 195 的殘基 31-35 (CDR-Hl hlAll. F5)；SEQ ID NO: 195 的殘基 50-66 (CDR-H2 hlAll. F5)；SEQ ID NO: 195 的殘基 99-107 (CDR-H3hlAll. F5)；SEQ ID NO: 196 的殘基 31_35(CDR-H1 hlAll. H2)；SEQ ID NO: 196 的殘基 50-66(CDR-H2 hlAll. H2) ；SEQ ID NO: 196 的殘基 99-107 (CDR-H3 hlAll. H2) ；SEQ ID NO: 197的殘基 24-34 (CDR-Ll hlAllVL. I) ；SEQ ID NO: 197 的殘基 50-56 (CDR-L2 hlAllVL. I)；SEQ ID NO: 197 的殘基 89-97 (CDR-L3 hlAllVL. 1)；SEQ ID NO: 198 的殘基 24-34 (CDR-LlhlAll. A2)；SEQ ID NO: 198 的殘基 50-56(CDR-L2 hlAll. A2)；SEQ ID NO: 198 的殘基 89-97(CDR-L3 hlAll. A2) ；SEQ ID NO: 199 的殘基 24-34 (CDR-Ll hlAll. A12) ；SEQ ID NO: 199的殘基 50-56 (CDR-L2 hlAll. A12) ；SEQ ID NO: 199 的殘基 89-97 (CDR-L3 hlAll. A12)；SEQ ID NO:200 的殘基 24-34 (CDR-Ll hlAll. A7) ；SEQ ID NO: 200 的殘基 50-56 (CDR-L2hlAll. A7)；SEQ ID NO:200 的殘基 89-97(CDR-L3 hlAll. A7)；SEQ ID NO:201 的殘基 24-34(CDR-Ll hlAll. B4)；SEQ ID NO:201 的殘基 50-56 (CDR-L2 hlAll. B4)；SEQ ID NO:201 ^殘基 89-97 (CDR-L3 hlAll. B4)；SEQ ID NO:202 的殘基 24-34 (CDR-Ll hlAll. B5)；SEQ IDNO:202 的殘基 50-56 (CDR-L2 hlAll. B5) ；SEQ ID NO:202 的殘基 89-97 (CDR-L3 hlAll.B5) ；SEQ ID NO: 203 的殘基 24-34 (CDR-L1 hlAll. E12) ；SEQ ID NO: 203 的殘基 50-56(CDR-L2 hlAll. E12) ；SEQ ID NO:203 的殘基 89-97 (CDR-L3 hlAll. E12)0在一個實施方案中，本發(fā)明的DLL4結(jié)合蛋白包含本文(上文或下文)描述的至少三個CDRs。在非限制性例子中，本發(fā)明的DLL4結(jié)合蛋白包含本文描述的三個CDRs，其中所述三個⑶Rs是如本文描述的⑶R-H1、⑶R-H2和⑶R-H3。在另一個非限制性例子中，本發(fā)明的DLL4結(jié)合蛋白包含本文描述的三個⑶Rs，其中所述三個⑶Rs是如本文描述的⑶R-H1、CDR-H2 和 CDR-H3。在一個實施方案中，本發(fā)明的DLL4結(jié)合蛋白包含本文(上文或下文)描述的一個或多個CDRs,例如本文描述的一個、兩個、三個、四個、五個或六個CDRs。在優(yōu)選實施方案·中，本發(fā)明的DLL4結(jié)合蛋白包含本文描述的六個⑶Rs，例如如本文描述的⑶R-H1、⑶R-H2、CDR-H3、CDR-Ll、CDR-L2 和 CDR-L3。在另一個實施方案中，本發(fā)明的DLL4結(jié)合蛋白包含選自一組可變結(jié)構(gòu)域⑶Rs的三個⑶Rs，其中所述可變結(jié)構(gòu)域⑶Rs組選自下述可變結(jié)構(gòu)域⑶R組
VH 38H12 CDR 鉬
CDR-Hl: SEQ ID NO: 157 的殘基 31-35 CDR-H2: SEQ ID NO: 157 的殘基 50-66 CDR-H3 SEQ ID NO: 157 的殘基 99-107 VL 38H12 CDR 鉬
CDR-Ll:SEQ ID NO: 158 的殘基 24-34
CDR-L2:SEQ ID NO: 158 的殘基 50-56
CDR-L3:SEQ ID NO: 158 的殘基 89-97
VH IAll CDR 組
CDR-Hl: SEQ ID NO: 159 的殘基 31-35 CDR-H2: SEQ ID NO: 159 的殘基 50-66 CDR-H3: SEQ ID NO: 159 的殘基 99-107 VL IAll CDR 組
CDR-Ll:SEQ ID NO: 160 的殘基 24-34
CDR-L2:SEQ ID NO: 160 的殘基 50-56
CDR-L3:SEQ ID NO: 160 的殘基 89-97
VH 37D10 CDR 組
CDR-Hl: SEQ ID NO: 161 的殘基 31-35 CDR-H2: SEQ ID NO: 161 的殘基 50-68 CDR-H3: SEQ ID NO: 161 的殘基 101-111 VL 37D10 CDR 組
CDR-Ll:SEQ ID NO: 162 的殘基 24-34
CDR-L2:SEQ ID NO: 162 的殘基 50-56
CDR-L3:SEQ ID NO: 162 的殘基 89-97
VH 32C7 CDR 組
CDR-Hl: SEQ ID NO: 163 的殘基 31-35CDR-H2: SEQ ID NO: 163 的殘基 50-66CDR-H3: SEQ ID NO: 163 的殘基 99-105VL 32C7 CDR 鉬
CDR-Ll:SEQ ID NO: 164 的殘基 24-34
CDR-L2:SEQ ID NO: 164 的殘基 50-56
CDR-L3:SEQ ID NO: 164 的殘基 89-98
VH 14G1 CDR 鉬
CDR-Hl: SEQ ID NO: 165 的殘基 31-35CDR-H2: SEQ ID NO: 165 的殘基 50-66
CDR-H3: SEQ ID NO: 165 的殘基 99-105VL 14G1 CDR 鉬
CDR-Ll:SEQ ID NO: 166 的殘基 24-34
CDR-L2:SEQ ID NO: 166 的殘基 50-56
CDR-L3:SEQ ID NO: 166 的殘基 89-97
VH 14A11 CDR 鉬
CDR-Hl: SEQ ID NO: 167 的殘基 31-35CDR-H2: SEQ ID NO: 167 的殘基 50-66CDR-H3: SEQ ID NO: 167 的殘基 99-110VL 14A11 CDR 鉬
CDR-Ll:SEQ ID NO: 168 的殘基 23-37
CDR-L2:SEQ ID NO: 168 的殘基 53-59
CDR-L3:SEQ ID NO: 168 的殘基 92-100
VH 15D6 CDR 組
CDR-Hl: SEQ ID NO: 169 的殘基 31-35CDR-H2: SEQ ID NO: 169 的殘基 50-66CDR-H3: SEQ ID NO: 169 的殘基 99-110VL 15D6 CDR 組
CDR-Ll:SEQ ID NO: 170 的殘基 23-37
CDR-L2:SEQ ID NO: 170 的殘基 53-59
CDR-L3:SEQ ID NO: 170 的殘基 92-100
VH VH. I IAll CDR 組CDR-Hl: SEQ ID NO: 171 的殘基 31-35CDR-H2: SEQ ID NO: 171 的殘基 50-66CDR-H3: SEQ ID NO: 171 的殘基 99-107VH VH. Ia IAll CDR 組CDR-Hl: SEQ ID NO: 172 的殘基 31-35CDR-H2: SEQ ID NO: 172 的殘基 50-66CDR-H3: SEQ ID NO: 172 的殘基 99-107VH VH. Ib IAll CDR 組CDR-Hl: SEQ ID NO: 173 的殘基 31-35CDR-H2: SEQ ID NO: 173 的殘基 50-66CDR-H3: SEQ ID NO: 173 的殘基 99-107VH VH. 2a IAU CDR 鉬CDR-Hl: SEQ ID NO: 174 的殘基 31-35CDR-H2: SEQ ID NO: 174 的殘基 50-66CDR-H3: SEQ ID NO: 174 的殘基 99-107VL VL I IAU CDR 鉬
CDR-Ll:SEQ ID NO: 175 的殘基 24-34
CDR-L2:SEQ ID NO: 175 的殘基 50-56
CDR-L3:SEQ ID NO: 175 的殘基 89-97
VL VL la IAU CDR 鉬·
CDR-Ll:SEQ ID NO: 176 的殘基 24-34
CDR-L2:SEQ ID NO: 176 的殘基 50-56
CDR-L3:SEQ ID NO: 176 的殘基 89-97
VL VL Ib IAU CDR 鉬
CDR-Ll:SEQ ID NO: 177 的殘基 24-34
CDR-L2:SEQ ID NO: 177 的殘基 50-56
CDR-L3:SEQ ID NO: 177 的殘基 50-56
VL VL 2a IAll CDR 組
CDR-Ll:SEQ ID NO: 178 的殘基 24-34
CDR-L2:SEQ ID NO: 178 的殘基 50-56
CDR-L3:SEQ ID NO: 178 的殘基 89-97
VH VH. I 38H12 CDR組
CDR-Hl: SEQ ID NO: 179 的殘基 31-35
CDR-H2: SEQ ID NO: 179 的殘基 50-66
CDR-H3: SEQ ID NO: 179 的殘基 99-107
VH VH. Ia 38H12 CDR組
CDR-Hl: SEQ ID NO: 180 的殘基 31-35
CDR-H2: SEQ ID NO: 180 的殘基 50-66
CDR-H3: SEQ ID NO: 180 的殘基 99-107
VH VH. Ib 38H12 CDR 組
CDR-Hl: SEQ ID NO: 181 的殘基 31-35
CDR-H2: SEQ ID NO: 181 的殘基 50-66
CDR-H3: SEQ ID NO: 181 的殘基 99-107
VH VH. 2a 38H12 CDR組
CDR-Hl: SEQ ID NO: 182 的殘基 31-35
CDR-H2: SEQ ID NO: 182 的殘基 50-66
CDR-H3: SEQ ID NO: 182 的殘基 99-107VL VL I 38H12 CDR 組
CDR-Ll:SEQ ID NO: 183 的殘基 24-34
CDR-L2:SEQ ID NO: 183 的殘基 50-56
CDR-L3:SEQ ID NO: 183 的殘基 89-97
VL VL la 38H12 CDR 組
CDR-Ll:SEQ ID NO: 184 的殘基 24-34
CDR-L2:SEQ ID NO: 184 的殘基 50-56
CDR-L3:SEQ ID NO: 184 的殘基 89-97
VL VL Ib 38H12 CDR組
CDR-Ll:SEQ ID NO: 185 的殘基 24-34
CDR-L2:SEQ ID NO: 185 的殘基 50-56
CDR-L3:SEQ ID NO: 185 的殘基 89-97
VL VL 2a 38H12 CDR 組
CDR-Ll:SEQ ID NO: 186 的殘基 24-34
CDR-L2:SEQ ID NO: 186 的殘基 50-56
CDR-L3:SEQ ID NO: 186 的殘基 89-97
VH Mnm I CDR 鉬
CDR-Hl: SEQ ID NO: 187 的殘基 31-35CDR-H2: SEQ ID NO: 187 的殘基 50-66CDR-H3: SEQ ID NO: 187 的殘基 99-107VH hAll. A6 CDR 鉬
CDR-Hl: SEQ ID NO: 188 的殘基 31-35CDR-H2: SEQ ID NO: 188 的殘基 50-66CDR-H3: SEQ ID NO: 188 的殘基 99-107VH hAll. A8 CDR 鉬
CDR-Hl: SEQ ID NO: 189 的殘基 31-35CDR-H2: SEQ ID NO: 189 的殘基 50-66CDR-H3: SEQ ID NO: 189 的殘基 99-107VH hAll. C6 CDR 組
CDR-Hl: SEQ ID NO: 190 的殘基 31-35CDR-H2: SEQ ID NO: 190 的殘基 50-66CDR-H3: SEQ ID NO: 190 的殘基 99-107VH hAll. All CDR 組
CDR-Hl: SEQ ID NO: 191 的殘基 31-35CDR-H2: SEQ ID NO: 191 的殘基 50-66CDR-H3: SEQ ID NO: 191 的殘基 99-107VH hAll. B5 CDR 組
CDR-Hl: SEQ ID NO: 192 的殘基 31-35CDR-H2: SEQ ID NO: 192 的殘基 50-66CDR-H3: SEQ ID NO: 192 的殘基 99-107VH hAll. E12 CDR 鉬
CDR-Hl: SEQ ID NO: 193 的殘基 31-35CDR-H2: SEQ ID NO: 193 的殘基 50-66CDR-H3: SEQ ID NO: 193 的殘基 99-107VH hAll. G3 CDR 鉬
CDR-Hl: SEQ ID NO: 194 的殘基 31-35CDR-H2: SEQ ID NO: 194 的殘基 50-66CDR-H3: SEQ ID NO: 194 的殘基 99-107VH hAll. F5 CDR 鉬
CDR-Hl: SEQ ID NO: 195 的殘基 31-35·CDR-H2: SEQ ID NO: 195 的殘基 50-66CDR-H3: SEQ ID NO: 195 的殘基 99-107VH hAll. H2 CDR 鉬
CDR-Hl: SEQ ID NO: 196 的殘基 31-35CDR-H2: SEQ ID NO: 196 的殘基 50-66CDR-H3: SEQ ID NO: 196 的殘基 99-107VL hlAllVL. I CDR 鉬
CDR-Ll:SEQ ID NO: 197 的殘基 24-34
CDR-L2:SEQ ID NO: 197 的殘基 50-56
CDR-L3:SEQ ID NO: 197 的殘基 89-97
VL hlAll. A2 CDR 組
CDR-Ll:SEQ ID NO: 198 的殘基 24-34
CDR-L2:SEQ ID NO: 198 的殘基 50-56
CDR-L3:SEQ ID NO: 198 的殘基 89-97
VL hlAll. A12 CDR 組
CDR-Ll:SEQ ID NO: 199 的殘基 24-34
CDR-L2:SEQ ID NO: 199 的殘基 50-56
CDR-L3:SEQ ID NO: 199 的殘基 89-97
VL hlAll. A7 CDR 組
CDR-Ll:SEQ ID NO: 200 的殘基 24-34
CDR-L2:SEQ ID NO:200 的殘基 50-56
CDR-L3:SEQ ID NO: 200 的殘基 89-97
VL hlAll. B4 CDR 組
CDR-Ll:SEQ ID NO: 201 的殘基 24-34
CDR-L2:SEQ ID NO:201 的殘基 50-56
CDR-L3:SEQ ID NO: 201 的殘基 89-97
VL hlAll. B5 CDR 組
CDR-Ll:SEQ ID NO: 202 的殘基 24-34CDR-L2:SEQ ID NO:202 的殘基 50-56
CDR-L3:SEQ ID NO: 202 的殘基 89-97
和
VL hlAll. E12 CDR 鉬
CDR-Ll:SEQ ID NO: 203 的殘基 24-34
CDR-L2:SEQ ID NO:203 的殘基 50-56
CDR-L3:SEQ ID NO: · 203 的殘基 89-97。在一個實施方案中，DLL4結(jié)合蛋白包含來自上組中的至少兩組可變結(jié)構(gòu)域⑶Rs·的 CDRs。在另一個實施方案中，本發(fā)明的DLL4結(jié)合蛋白包含選自上組中具有三個⑶Rs的任何VH組的三個⑶Rs和上組中具有三個⑶Rs的任何VL組的三個⑶Rs。在另外一個實施方案中，本發(fā)明的DLL4結(jié)合蛋白包含來自選自下述的⑶Rs的一對VH和VL組的如上所述具有三個⑶Rs的VH組和如上所述具有三個⑶Rs的VL組
VH 38H12 CDR 組和 VL 38H12 CDR 組，
VH IAll CDR 組和 VL IAll CDR 組，
VH 37D10 CDR 組和 VL 37D10 CDR 組，
VH 32C7 CDR 組和 VL 32C7 CDR 組，
VH 14G1 組和 VL 14G1 CDR 組，
VH 14A11 CDR 組和 VL 14A11 CDR 組，
VH 15D6 CDR 組和 VL 15D6 CDR 組，
VH VH. I IAll CDR 組和 VL VL. I IAll CDR 組，
VH VH. I IAll CDR 組和 VL VL. Ia IAll CDR 組，
VH VH. I IAll CDR 組和 VL VL. Ib IAll CDR 組，
VH VH. I IAll CDR 組和 VL VL. 2a IAll CDR 組，
VH VH. Ia IAll CDR 組和 VL VL. I IAll CDR 組，
VH VH. Ia IAll CDR 組和 VL VL. Ia IAll CDR 組，
VH VH. Ia IAll CDR 組和 VL VL. Ib IAll CDR 組，
VH VH. Ia IAll CDR 組和 VL VL. 2a IAll CDR 組，
VH VH. Ib IAll CDR 組和 VL VL. I IAll CDR 組，
VH VH. Ib IAll CDR 組和 VL VL. Ia IAll CDR 組，
VH VH. Ib IAll CDR 組和 VL VL. Ib IAll CDR 組，
VH VH. Ib IAll CDR 組和 VL VL. 2a IAll CDR 組，
VH VH. 2a IAll CDR 組和 VL VL. I IAll CDR 組，
VH VH. 2a IAll CDR 組和 VL VL. Ia IAll CDR 組，
VH VH. 2a IAll CDR 組和 VL VL. Ib IAll CDR 組，
VH VH. 2a IAll CDR 組和 VL VL. 2a IAll CDR 組，
VH VH. I 38H12 CDR 組和 VL VL. I 38H12 CDR 組，
VH VH. I 38H12 CDR 組和 VL VL. Ia 38H12 CDR 組，
VH VH. I 38H12 CDR 組和 VL VL. Ib 38H12 CDR 組，VH VH. I 38H12 CDR 組和 VL VL. 2a 38H12 CDR 組，
VH VH. Ia 38H12 CDR 組和 VL VL. I 38H12 CDR 組，
VH VH. Ia 38H12 CDR 組和 VL VL. Ia 38H12 CDR 組，
VH VH. Ia 38H12 CDR 組和 VL VL. Ib 38H12 CDR 組，
VH VH. Ia 38H12 CDR 組和 VL VL. 2a 38H12 CDR 組，
VH VH. Ib 38H12 CDR 組和 VL VL. I 38H12 CDR 組，
VH VH. Ib 38H12 CDR 組和 VL VL. Ia 38H12 CDR 組，
VH VH. Ib 38H12 CDR 組和 VL VL. Ib 38H12 CDR 組，
VH VH. Ib 38H12 CDR 組和 VL VL. 2a 38H12 CDR 組，
VH VH. 2a 38H12 CDR 組和 VL VL. I 38H12 CDR 組，
VH VH. 2a 38H12 CDR 組和 VL VL. Ia 38H12 CDR 組，
VH VH. 2a 38H12 CDR 組和 VL VL. Ib 38H12 CDR 組，
VH VH. 2a 38H12 CDR 組和 VL VL. 2a 38H12 CDR 組，
VH hlAll. A6 CDR 組和 VL hlAllVL. I CDR 組，
VH hlAll. C6 CDR 組和 VL hlAllVL. I CDR 組，
VH hlAll. All CDR 組和 VL hlAllVL. I CDR 組，
VH hlAll. A8 CDR 組和 VL hlAllVL. I CDR 組，
VH hlAllVH. I CDR 組和 VL hlAll. B4 CDR 組，
VH hlAllVH. I CDR 組和 VL hlAll. A7 CDR 組，
VH hlAllVH. I CDR 組和 VL hlAll. A12 CDR 組，
VH hlAllVH. I CDR 組和 VL hlAll. A2 CDR 組，
VH hlAll. B5 CDR 組和 VL hlAll. B5 CDR 組，
VH hlAll. E12 CDR 組和 VL hlAll. E12 CDR 組，
VH hlAll. G3 CDR 組和 VL hlAll. E12 CDR 組，
VH hlAll. F5 CDR 組和 VL hlAll. E12 CDR 組，和VH hlAll. H2 CDR 組和 VL hlAll. E12 CDR 組。在一個優(yōu)選實施方案中，DLL4結(jié)合蛋白具有包含六個⑶Rs的DLL4抗原結(jié)合結(jié)構(gòu)域(或結(jié)合位點)，其中CDR-H1、CDR-H2和CDR-H3位于重鏈可變區(qū)(VH)中，并且CDR-L1、⑶R-L2和⑶R-L3位于輕鏈可變區(qū)(VL)，并且其中VH和VL區(qū)的結(jié)合形成DLL4結(jié)合蛋白的功能性DLL4抗原結(jié)合結(jié)構(gòu)域。在這個實施方案的進(jìn)一步非限制性例子中，具有兩個DLL4抗原結(jié)合結(jié)構(gòu)域的DLL4結(jié)合蛋白包含兩組VH和VL區(qū)，并且因此包含十二個CDRs。在另一個實施方案中，DLL4結(jié)合蛋白具有包含六個CDRs的抗原結(jié)合結(jié)構(gòu)域，其中CDR-Hl、CDR-H2和CDR-H3位于重鏈可變區(qū)(VH)中，并且CDR-Ll、CDR_L2和CDR-L3位于輕鏈可變區(qū)(VL)，并且其中每個可變區(qū)中的剩余序列這樣構(gòu)成構(gòu)架(FR)區(qū)，從而使得對于總共四個FR序列，即FR1、FR2、FR3和FR4，每個⑶R位于兩個FR區(qū)序列之間。在這個實施方案中，F(xiàn)R和CDR序列在可變區(qū)中的排列是FR1-CDR1-FR2-CDR2-FR3-CDR3-FR4。在這個實施 方案中，由VH區(qū)和VL區(qū)結(jié)合形成的結(jié)合結(jié)構(gòu)域包含八個FR序列和六個CDRs。 本發(fā)明的DLL4結(jié)合蛋白包括⑶R嫁接的抗體，其中使用本領(lǐng)域可獲得的重組技術(shù)，一個物種(供體物種)的抗體VH和/或VL區(qū)的一個或多個CDRs嫁接入且替換另一個(接納體(acceptor))物種的抗體VH和/或VL區(qū)的相應(yīng)CDRs。供體物種的例子是本文描述的大鼠抗人DLL4單克隆抗體，并且接納體物種的例子是人免疫球蛋白Y (IgG)分子，其中人IgG分子的VH和VL區(qū)的人FR序列是接受來自供體大鼠單克隆抗體的嫁接入CDRs的人接納體構(gòu)架序列。所得到的CDR嫁接的抗體的人接納體構(gòu)架序列可以進(jìn)一步突變，以改善CDR嫁接的抗體的一種或多種性質(zhì)。作為非限制性例子，CDR嫁接的抗體的一個或多個FR序列的一個或多個殘基可以突變，以改善DLL4結(jié)合親和力或降低CDR嫁接的抗體在人受試者中的免疫原性。在本發(fā)明的一個實施方案中，包含上文描述的一個或多個⑶Rs的DLL4結(jié)合蛋白進(jìn)一步包含人接納體構(gòu)架序列。優(yōu)選地，DLL4結(jié)合蛋白包含一個或多個(例如一個、兩個、三個、四個、五個、六個、七個或八個)人接納體構(gòu)架序列。本發(fā)明的DLL4結(jié)合蛋白中存在的人接納體構(gòu)架序列可以包含一個或多個氨基酸 殘基，其已回復(fù)突變?yōu)榻Y(jié)合DLL4的大鼠單克隆抗體中存在的一個或多個相應(yīng)氨基酸殘基，和/或已突變?yōu)闇p少或消除不希望有的反應(yīng)的一個或多個位點的一個或多個氨基酸殘基，例如以減少或消除關(guān)于不需要的糖基化的位點和/或關(guān)于不需要的N末端焦谷氨酸鹽形成的位點和/或關(guān)于潛在減少的免疫原性危險的位點。在一個實施方案中，包含上文描述的一個或多個⑶Rs的DLL4結(jié)合蛋白進(jìn)一步包含選自下表3和4中的人接納體構(gòu)架序列的一個或多個(例如任何一個、兩個、三個、四個、五個、六個、七個或八個)人接納體構(gòu)架序列。本發(fā)明的DLL4結(jié)合蛋白中存在的來自表3和4的一個或多個人接納體構(gòu)架序列可以進(jìn)一步包含一個或多個氨基酸殘基，其已回復(fù)突變?yōu)榻Y(jié)合DLL4的大鼠單克隆抗體中存在的一個或多個相應(yīng)氨基酸殘基，和/或已突變?yōu)闇p少或消除不希望有的反應(yīng)的一個或多個位點的一個或多個氨基酸，例如以減少或消除關(guān)于不需要的糖基化的位點和/或關(guān)于不需要的N末端焦谷氨酸鹽形成的位點和/或關(guān)于潛在減少的免疫原性危險的位點。在另一個實施方案中，本發(fā)明提供了包含上文描述的一個或多個⑶Rs的DLL4結(jié)合蛋白，其中所述結(jié)合蛋白還包含選自下述的可變區(qū)序列中存在的任何構(gòu)架序列的一個或多個(例如任何一個、兩個、三個、四個、五個、六個、七個或八個/結(jié)合結(jié)構(gòu)域)人接納體構(gòu)架序列。
權(quán)利要求
1.一種能夠結(jié)合DLL4的結(jié)合蛋白，其包含選自下述氨基酸序列組的至少一種氨基酸序列SEQ ID NO: 157、SEQ ID NO: 158、SEQ ID NO: 159、SEQ ID NO: 160、SEQ ID NO: 161、SEQ ID NO:162、SEQ ID NO:163 和 SEQ ID NO:164。
2.一種包含抗原結(jié)合結(jié)構(gòu)域的結(jié)合蛋白，其中所述結(jié)合蛋白能夠結(jié)合人DLL4，所述抗原結(jié)合結(jié)構(gòu)域包含至少一個⑶R，其中 CDR-Hl 選自 X1 -X2-X3-X4-X5 (SEQ ID NO: 151)，其中； 乂1是隊!1或Y; 乂2是卩； X3 是P; \是M ;和 X5是A或S ;SEQ ID NO: 157 的殘基 31-35 (CDR-Hl 38H12)；SEQ ID NO: 161 的殘基 31-35 (CDR-Hl 37D10)；SEQ ID NO: 163 的殘基 31-35 (CDR-Hl 32C7)；SEQ ID NO: 165 的殘基 31-35 (CDR-Hl 14G1)；SEQ ID NO: 167 的殘基 31-35 (CDR-Hl 14A11)；SEQ ID NO: 169 的殘基 31-35 (CDR-Hl 15D6)；SEQ ID NO: 171 的殘基 31-35 (CDR-Hl VH. I 1A11)；SEQ ID NO: 172 的殘基 31-35 (CDR-Hl VH. Ia 1A11)；SEQ ID NO: 173 的殘基 31-35 (CDR-Hl VH. Ib 1A11)；SEQ ID NO: 174 的殘基 31-35 (CDR-Hl VH. 2a 1A11)；SEQ ID NO: 179 的殘基 31-35 (CDR-Hl VH. I 38H12)；SEQ ID NO: 180 的殘基 31-35 (CDR-Hl VH. IA 38H12)；SEQ ID NO: 181 的殘基 31-35 (CDR-Hl VH. Ib 38H12)；SEQ ID NO: 182 的殘基 31-35 (CDR-Hl VH. 2a 38H12)；SEQ ID NO: 187 的殘基 31-35 (CDR-Hl hlAllVH. I)；SEQ ID NO: 188 的殘基 31-35 (CDR-Hl hlAll. A6)；SEQ ID NO: 189 的殘基 31-35 (CDR-Hl hlAll. A8)；SEQ ID NO: 190 的殘基 31-35 (CDR-Hl hlAll. C6)；SEQ ID NO: 191 的殘基 31-35 (CDR-Hl hlAll. All)；SEQ ID NO: 192 的殘基 31-35 (CDR-Hl hlAll. B5)；SEQ ID NO: 193 的殘基 31-35 (CDR-Hl hlAll. E12)；SEQ ID NO: 194 的殘基 31-35 (CDR-Hl hlAll. G3)；SEQ ID NO: 195 的殘基 31-35 (CDR-Hl hlAll. F5);和SEQ ID NO: 196 的殘基 31-35 (CDR-Hl hlAll. H2)； CDR-H2 選自X1-X2-X3-X4-X5-X6-X7-X8-X9- X10 - X11 - X12 - X13 - X14 - X15 - X16 - X17 (SEQ IDNO:152)，其中；X1是T或S ;X2 是 I ;X3 是 S ;X4是S或G ;X5 是 S ;X6 是 D ;X7 是 G、A、D、S 或 E ;X8是T或W ;父9是1\ 或A ;X1。是 Y、S、T 或N;X11是Y或I ;X12是R或G ;X13 是 D ;Xl4 是 S ;X15 是 V ;X16是K ;和X17 是 G ;SEQ ID NO: 157 的殘基 50-66 (CDR-H2 38H12)；SEQ ID NO: 161 的殘基 50-68 (CDR-H2 37D10)；SEQ ID NO: 163 的殘基 50-66 (CDR-H2 32C7)；SEQ ID NO: 165 的殘基 50-66 (CDR-H2 14G1)；SEQ ID NO: 167 的殘基 50-66 (CDR-H2 14A11)；SEQ ID NO: 169 的殘基 50-66 (CDR-H2 15D6)；SEQ ID NO: 171 的殘基 50-66 (CDR-H2 VH. I 1A11)；SEQ ID NO: 172 的殘基 50-66 (CDR-H2 VH. Ia 1A11)；SEQ ID NO: 173 的殘基 50-66 (CDR-H2 VH. Ib 1A11)；SEQ ID NO: 174 的殘基 50-66 (CDR-H2 VH. 2a 1A11)；SEQ ID NO: 179 的殘基 50-66 (CDR-H2 VH. I 38H12)；SEQ ID NO: 180 的殘基 50-66 (CDR-H2 VH. IA 38H12)；SEQ ID NO: 181 的殘基 50-66 (CDR-H2 VH. Ib 38H12)；SEQ ID NO: 182 的殘基 31-35 (CDR-Hl VH. 2a 38H12)；SEQ ID NO: 187 的殘基 50-66 (CDR-H2 hlAllVH. I)；SEQ ID NO: 188 的殘基 50-66 (CDR-H2 hlAll. A6)；SEQ ID NO: 189 的殘基 50-66 (CDR-H2 hlAll. A8)；SEQ ID NO: 的殘基 50-66 (CDR-H2 hlAll. C6)；SEQ ID NO: 191 的殘基 50-66 (CDR-H2 hlAll. All)；SEQ ID NO: 192 的殘基 50-66 (CDR-H2 hlAll. B5)；SEQ ID NO: 193 的殘基 50-66 (CDR-H2 hlAll. E12)；SEQ ID NO: 194 的殘基 50-66 (CDR-H2 hlAll. G3)；SEQ ID NO: 195 的殘基 50-66 (CDR-H2 hlAll. F5);和SEQ ID NO: 196 的殘基 50-66 (CDR-H2 hlAll. H2)；CDR-H3 選自X1-X2-X3-X4-X5-X6-X7-X8-X9 (SEQ ID NO: 153)，其中；XjG;乂2是丫；X3是 Y;X4 是 N ;X5 是 S ;X6 是 P ;XjF;X8是A ;和X9 是 Y、F 或 S ;SEQ ID NO: 157 的殘基 99-107 (CDR-H3 38H12)；SEQ ID NO: 161 的殘基 101-111 (CDR-H3 37D10)；SEQ ID NO: 163 的殘基 99-105 (CDR-H3 32C7)；SEQ ID NO: 165 的殘基 99-105 (CDR-H3 14G1)；SEQ ID NO: 167 的殘基 99-110 (CDR-H3 14A11)；SEQ ID NO: 169 的殘基 99-110 (CDR-H3 15D6)；SEQ ID NO: 171 的殘基 99-107 (CDR-H3 VH. I 1A11)；SEQ ID NO: 172 的殘基 99-107 (CDR-H3 VH. Ia 1A11)；SEQ ID NO: 173 的殘基 99-107 (CDR-H3 VH. Ib 1A11)；SEQ ID NO: 174 的殘基 99-107 (CDR-H3 VH. 2a 1A11)；SEQ ID NO: 179 的殘基 99-107 (CDR-H3 VH. I 38H12)；SEQ ID NO: 180 的殘基 99-107 (CDR-H3 VH. IA 38H12)；SEQ ID NO: 181 的殘基 99-107 (CDR-H2 VH. Ib 38H12)；SEQ ID NO: 182 的殘基 99-107 (CDR-Hl VH. 2a 38H12)；SEQ ID NO: 187 的殘基 99-107 (CDR-H3 hlAllVH. I)；SEQ ID NO: 188 的殘基 99-107 (CDR-H3 hlAll. A6)；SEQ ID NO: 189 的殘基 99-107 (CDR-H3 hlAll. A8)；SEQ ID NO: 190 的殘基 99-107 (CDR-H3 hlAll. C6)；SEQ ID NO: 191 的殘基 99-107 (CDR-H3 hlAll. All)；SEQ ID NO: 192 的殘基 99-107 (CDR-H3 hlAll. B5)；SEQ ID NO: 193 的殘基 99-107 (CDR-H3 hlAll. E12)；SEQ ID NO: 194 的殘基 99-107 (CDR-H3 hlAll. G3)；SEQ ID NO: 195 的殘基 99-107 (CDR-H3 hlAll. F5);和 SEQ ID NO: 196 的殘基 99-107 (CDR-H3 hlAll. H2)；CDR-Ll 選自X1-X2-X3-X4-X5-X6-X7-X8-X9- X10 - X11 (SEQ ID NO: 154)，其中；XjR;X2 是 A ;X3 是 S ;X4是E或Q ;X5是D或E ; X6 是 I ;X7是Y或W ;父8是3、1、￥^或1 ;X9 是 N ;Xi0是L ;和X11 是 A ;SEQ ID NO: 158 的殘基 24-34 (CDR-Ll 38H12)；SEQ ID NO: 162 的殘基 24-34 (CDR-Ll 37D10)；SEQ ID NO: 164 的殘基 24-34 (CDR-Ll 32C7)；SEQ ID NO: 166 的殘基 24-34 (CDR-Ll 14G1)；SEQ ID NO: 168 的殘基 23-37 (CDR-Ll 14A11)；SEQ ID NO: 170 的殘基 23-37 (CDR-Ll 15D6)；SEQ ID NO: 175 的殘基 24-34 (CDR-Ll VL. I 1A11)；SEQ ID NO: 176 的殘基 24-34 (CDR-Ll VL. Ia 1A11)；SEQ ID NO: 177 的殘基 24-34 (CDR-Ll VL. Ib 1A11)；SEQ ID NO: 178 的殘基 24-34 (CDR-Ll VL. 2a 1A11)；SEQ ID NO: 183 的殘基 24-34 (CDR-Ll VL. I 38H12)；SEQ ID NO: 184 的殘基 24-34 (CDR-Ll VL. Ia 38H12)；SEQ ID NO: 185 的殘基 24-34 (CDR-Ll VL. Ib 38H12)；SEQ ID NO: 186 的殘基 24-34 (CDR-Ll VL. 2a 38H12)；SEQ ID NO: 197 的殘基 24-34 (CDR-Ll hlAllVL. I)；SEQ ID NO: 198 的殘基 24-34 (CDR-Ll hlAll. A2)；SEQ ID NO: 199 的殘基 24-34 (CDR-Ll hlAll. A12)；SEQ ID NO:200 的殘基 24-34 (CDR-Ll hlAll. A7)；SEQ ID NO:201 的殘基 24-34 (CDR-Ll hlAll. B4)；SEQ ID NO:202 的殘基 24-34 (CDR-Ll hlAll. B5);和SEQ ID NO:203 的殘基 24-34 (CDR-Ll hlAll. E12)；CDR-L2 選自X1 -X2-X3-X4-X5-X6-X7 (SEQ ID NO: 155)，其中；X1 是 D ;乂2是丁 ；X3是N或S ;X4 是N、D、S、I、Y或 V ;X5 是 L ;X6是A ;和X7 是 D ;SEQ ID NO: 158 的殘基 50-56(CDR-L2 38H12)；SEQ ID NO: 162 的殘基 50-56(CDR-L2 37D10)；SEQ ID NO: 164 的殘基 50-56(CDR-L2 32C7)；SEQ ID NO: 166 的殘基 50-56(CDR-L2 14G1)；SEQ ID NO: 168 的殘基 53-59(CDR-L2 14A11)；SEQ ID NO: 170 的殘基 53-59(CDR-L2 15D6)；SEQ ID NO: 175 的殘基 50-56(CDR-L2 VL. I 1A11)；SEQ ID NO: 176 的殘基 50-56(CDR-L2 VL. Ia 1A11)；SEQ ID NO: 177 的殘基 50-56(CDR-L2 VL. Ib 1A11)；SEQ ID NO: 178 的殘基 50-56(CDR-L2 VL. 2a 1A11)；SEQ ID NO: 183 的殘基 50-56(CDR-L2 VL. I 38H12)；SEQ ID NO: 184 的殘基 50-56(CDR-L2 VL. Ia 38H12)；SEQ ID NO: 185 的殘基 50-56(CDR-L2 VL. Ib 38H12)；SEQ ID NO: 186 的殘基 50-56(CDR-L2 VL. 2a 38H12)；SEQ ID NO: 197 的殘基 50-56(CDR-L2 hlAllVL. I)；SEQ ID NO: 198 的殘基 50-56(CDR-L2 hlAll. A2)；SEQ ID NO: 199 的殘基 50-56(CDR-L2 hlAll. A12)；SEQ ID NO:200 的殘基 50-56(CDR-L2 hlAll. A7)；SEQ ID NO:201 的殘基 50-56(CDR-L2 hlAll. B4)；SEQ ID NO:202 的殘基 50-56(CDR-L2 hlAll. B5);和SEQ ID NO:203 的殘基 50-56(CDR-L2 hlAll. E12)；和 CDR-L3 選自X1-X2-X3-X4-X5-X6-X7-X8-X9 (SEQ ID NO: 156)，其中；X1 是 Q ;X2 是 Q ;X3是 Y;X4 是 N、D 或 T ;X5 是 N、Y 或 W ;X6是Y或V ;X7 是 P ;X8是P ;和X9 是 T ;SEQ ID NO: 158 的殘基 89-97(CDR-L3 38H12)；SEQ ID NO: 162 的殘基 89-97(CDR-L3 37D10)；SEQ ID NO: 164 的殘基 89-97(CDR-L3 32C7)；SEQ ID NO: 166 的殘基 89-98(CDR-L3 14G1)；SEQ ID NO: 168 的殘基 92-100 (CDR-L3 14A11)；SEQ ID NO: 170 的殘基 92-100 (CDR-L3 15D6)；SEQ ID NO: 175 的殘基 89-97 (CDR-L3 VL. I 1A11)；SEQ ID NO: 176 的殘基 89-97 (CDR-L3 VL. Ia 1A11)；SEQ ID NO: 177 的殘基 89-97 (CDR-L3 VL. Ib 1A11)；SEQ ID NO: 178 的殘基 89-97 (CDR-L3 VL. 2a 1A11)；SEQ ID NO: 183 的殘基 89-97 (CDR-L3 VL. I 38H12)；SEQ ID NO: 184 的殘基 89-97 (CDR-L3 VL. Ia 38H12)；SEQ ID NO: 185 的殘基 89-97 (CDR-L3 VL. Ib 38H12)；SEQ ID NO: 186 的殘基 89-97 (CDR-L3 VL. 2a 38H12)；SEQ ID NO: 197 的殘基 89-97 (CDR-L3 hlAllVL. I)；SEQ ID NO: 198 的殘基 89-97 (CDR-L3 hlAll. A2)；SEQ ID NO: 199 的殘基 89-97 (CDR-L3 hlAll. A12)；SEQ ID NO:200 的殘基 89-97 (CDR-L3 hlAll. A7)；SEQ ID NO:201 的殘基 89-97 (CDR-L3 hlAll. B4)；SEQ ID NO:202 的殘基 89-97 (CDR-L3 hlAll. B5);和SEQ ID NO:203 的殘基 89-97 (CDR-L3 hlAll. E12)0
3.根據(jù)權(quán)利要求2的結(jié)合蛋白，其中所述至少一個CDR包含選自下述的氨基酸序列SEQ ID NO: 157 的殘基 31-35 (CDR-Hl 38H12)；SEQ ID NO: 157 的殘基 50-66 (CDR-H238H12) ；SEQ ID NO: 157 的殘基 99-107 (CDR-H3 38H12) ；SEQ ID NO: 158 的殘基 24-34(CDR-Ll 38H12) ；SEQ ID NO: 158 的殘基 50-56 (CDR-L2 38H12) ；SEQ ID NO: 158 的殘基89-97 (CDR-L3 38H12)；SEQ ID NO: 159 的殘基 31-35 (CDR-Hl 1A11)；SEQ ID NO: 159 的殘基 50-66 (CDR-H2 1A11)；SEQ ID NO: 159 的殘基 99-107 (CDR-H3 1A11)；SEQ ID NO: 160 的殘基 24-34(CDR-Ll 1A11)；SEQ ID NO: 160 的殘基 50-56(CDR-L2 1A11)；SEQ ID NO: 160 的殘基 89-97 (CDR-L3 1A11)；SEQ ID NO: 161 的殘基 31-35 (CDR-Hl 37D10)；SEQ ID NO: 161的殘基 50-68 (CDR-H2 37D10) ；SEQ ID NO: 161 的殘基 101-111 (CDR-H3 37D10) ；SEQ IDNO: 162 的殘基 24-34 (CDR-Ll 37D10)；SEQ ID NO: 162 的殘基 50-56 (CDR-L2 37D10)；SEQID NO: 162 的殘基 89-97 (CDR-L3 37D10) ；SEQ ID NO: 163 的殘基 31-35 (CDR-Hl 32C7)；SEQ ID NO: 163 的殘基 50-66 (CDR-H2 32C7) ；SEQ ID NO: 163 的殘基 99-105 (CDR-H332C7)；SEQ ID NO: 164 的殘基 24-34 (CDR-Ll 32C7)；SEQ ID NO: 164 的殘基 50-56 (CDR-L232C7)；SEQ ID NO: 164 的殘基 89-98 (CDR-L3 32C7)；SEQ ID NO: 165 的殘基 31-35 (CDR-H114G1) ；SEQ ID NO: 165 的殘基 50-66 (CDR-H2 14G1) ；SEQ ID NO: 165 的殘基 99-105(CDR-H3 14G1)；SEQ ID NO: 166 的殘基 24-34(CDR-Ll 14G1)；SEQ ID NO: 166 的殘基 50-56(CDR-L2 14G1)；SEQ ID NO: 166 的殘基 89-98(CDR-L3 14G1)；SEQ ID NO: 167 的殘基 31-35(CDR-Hl 14A11) ；SEQ ID NO: 167 的殘基 50-66 (CDR-H2 14A11) ；SEQ ID NO:167 的殘基99-110 (CDR-H3 14A11) ；SEQ ID NO: 168 的殘基 23-37 (CDR-L1 14A11) ；SEQ ID NO: 168的殘基 53-59 (CDR-L2 14A11) ；SEQ ID NO: 168 的殘基 92-100 (CDR-L3 14A11) ；SEQ IDNO: 169 的殘基 31-35 (CDR-Hl 15D6)；SEQ ID NO: 169 的殘基 50-66 (CDR-H2 15D6)；SEQ IDNO: 169 的殘基 99-110 (CDR-H3 15D6) ；SEQ ID NO: 170 的殘基 23-37 (CDR-L1 15D6) ；SEQID NO: 170 的殘基 53-59 (CDR-L2 15D6) ；SEQ ID NO: 170 的殘基 92-100 (CDR-L3 15D6)；SEQ ID NO: 171 的殘基 31-35 (CDR-Hl VH. I 1A11)；SEQ ID NO: 171 的殘基 50-66 (CDR-H2VH. I 1A11) ；SEQ ID NO: 171 的殘基 99-107 (CDR-H3 VH. I 1A11) ；SEQ ID NO:172 的殘基31-35 (CDR-H1 VH. Ia 1A11) ；SEQ ID NO: 172 的殘基 50-66 (CDR-H2 VH. Ia 1A11) ；SEQID NO: 172 的殘基 99-107 (CDR-H3 VH. Ia 1A11) ；SEQ ID NO: 173 的殘基 31-35 (CDR-HlVH. Ib 1A11)；SEQ ID NO: 173 的殘基 50-66 (CDR-H2 VH. Ib 1A11)；SEQ ID NO:173 的殘基99-107 (CDR-H3 VH. Ib IAlI) ；SEQ ID NO: 174 的殘基 31-35 (CDR-Hl VH. 2a IAlI) ；SEQID NO: 174 的殘基 50-66 (CDR-H2 VH. 2a 1A11) ；SEQ ID NO: 174 的殘基 99-107 (CDR-H3VH. 2a 1A11) ；SEQ ID NO: 175 的殘基 24-34 (CDR-L1 VL. I 1A11) ；SEQ ID NO:175 的殘基50-56 (CDR-L2 VL. I 1A11) ；SEQ ID NO: 175 的殘基 89-97 (CDR-L3 VL. I 1A11) ；SEQ IDNO: 176 的殘基 24-34 (CDR-Ll VL. Ia 1A11)；SEQ ID NO: 176 的殘基 50-56 (CDR-L2 VL. Ia1A11) ；SEQ ID NO: 176 的殘基 89-97 (CDR-L3 VL. Ia 1A11) ；SEQ ID NO: 177 的殘基 24-34(CDR-Ll VL. Ib 1A11)；SEQ ID NO: 177 的殘基 50-56(CDR-L2 VL. Ib 1A11)；SEQ ID NO: 177的殘基 89-97 (CDR-L3 VL. Ib 1A11)；SEQ ID NO: 178 的殘基 24-34 (CDR-Ll VL. 2a 1A11)；SEQ ID NO: 178 的殘基 50-56 (CDR-L2 VL. 2a 1A11)；SEQ ID NO: 178 的殘基 89-97 (CDR-L3VL. 2a 1A11)；SEQ ID NO: 179 的殘基 31-35 (CDR-Hl VH. I 38H12)；SEQ ID NO:179 的殘基50-66 (CDR-H2 VH. I 38H12) ；SEQ ID NO: 179 的殘基 99-107 (CDR-H3 VH. I 38H12) ；SEQ ID NO: 180 的殘基 31-35 (CDR-Hl VH. IA 38H12) ；SEQ ID NO: 180 的殘基 50-66 (CDR-H2VH. IA 38H12)；SEQ ID NO: 180 的殘基 99-107 (CDR-H3 VH. IA 38H12)；SEQ ID NO: 181 的殘基 31-35(CDR-H1 VH. Ib 38H12)；SEQ ID NO: 181 的殘基 50-66(CDR-H2 VH. Ib 38H12)；SEQID NO: 181 的殘基 99-107 (CDR-H3 VH. Ib 38H12) ；SEQ ID NO: 182 的殘基 31-35 (CDR-HlVH. 2a 38H12)；SEQ ID NO: 182 的殘基 50-66 (CDR-H2 VH. 2a 38H12)；SEQ ID NO: 182 的殘基 99-107 (CDR-H3 VH. 2a 38H12) ；SEQ ID NO: 183 的殘基 24-34 (CDR-Ll VL. I 38H12)；SEQ ID NO: 183 的殘基 50-56 (CDR-L2 VL. I 38H12)；SEQ ID NO: 183 的殘基 89-97 (CDR-L3VL. I 38H12)；SEQ ID NO: 184 的殘基 24-34 (CDR-Ll VL. Ia 38H12)；SEQ ID NO: 184 的殘基50-56 (CDR-L2 VL. Ia 38H12) ；SEQ ID NO: 184 的殘基 89-97 (CDR-L3 VL. Ia 38H12) ；SEQID NO: 185 的殘基 24-34 (CDR-Ll VL. Ib 38H12) ；SEQ ID NO: 185 的殘基 50-56 (CDR-L2VL. Ib 38H12)；SEQ ID NO: 185 的殘基89-97(CDR-L3 VL. Ib 38H12)；SEQ ID NO: 186 的殘基24-34 (CDR-Ll VL. 2a 38H12) ；SEQ ID NO: 186 的殘基 50-56 (CDR-L2 VL. 2a 38H12) ；SEQID NO: 186 的殘基 89-97 (CDR-L3 VL. 2a 38H12) ；SEQ ID NO: 187 的殘基 31-35 (CDR-HlhlAllVH. I) ；SEQ ID NO: 187 的殘基 50-66 (CDR-H2 hlAllVH. I) ；SEQ ID NO:187 的殘基99-107 (CDR-H3 hlAllVH. I) ；SEQ ID NO: 188 的殘基 31-35 (CDR-Hl hlAll. A6) ；SEQ IDNO: 188 的殘基 50-66 (CDR-H2 hlAll. A6)；SEQ ID NO: 188 的殘基 99-107 (CDR-H3 hlAll.A6) ；SEQ ID NO:189 的殘基 31-35 (CDR-H1 hlAll. A8) ；SEQ ID NO: 189 的殘基 50-66(CDR-H2 hlAll. A8)；SEQ ID NO: 189 的殘基 99-107 (CDR-H3 hlAll. A8)；SEQ ID NO: 190 的殘基 31-35 (CDR-Hl hlAll. C6)；SEQ ID NO: 190 的殘基 50-66 (CDR-H2 hlAll. C6)；SEQ IDNO: 190 的殘基 99-107 (CDR-H3 hlAll. C6)；SEQ ID NO: 191 的殘基 31-35 (CDR-Hl hlAll.All) ；SEQ ID NO: 191 的殘基 50-66 (CDR-H2 hlAll. All) ；SEQ ID NO: 191 的殘基 99-107(CDR-H3 hlAll. A11)；SEQ ID NO: 192 的殘基 31-35 (CDR-H1 hlAll. B5)；SEQ ID NO: 192 的殘基 50-66(CDR-H2 hlAll. B5)；SEQ ID NO: 192 的殘基 99-107(CDR-H3 hlAll. B5)；SEQ IDNO: 193 的殘基 31-35 (CDR-Hl hlAll. E12)；SEQ ID NO: 193 的殘基 50-66 (CDR-H2 hlAll.E12) ；SEQ ID NO: 193 的殘基 99-107 (CDR-H3 hlAll. E12) ；SEQ ID NO: 194 的殘基 31-35(CDR-Hl hlAll. G3) ；SEQ ID NO: 194 的殘基 50-66 (CDR-H2 hlAll. G3) ；SEQ ID NO: 194的殘基 99-107 (CDR-H3 hlAll. G3) ；SEQ ID NO: 195 的殘基 31-35 (CDR-Hl hlAll. F5)；SEQ ID NO: 195 的殘基 50-66 (CDR-H2 hlAll. F5)；SEQ ID NO: 195 的殘基 99-107 (CDR-H3hlAll. F5)；SEQ ID NO: 196 的殘基 31_35(CDR-H1 hlAll. H2)；SEQ ID NO: 196 的殘基 50-66(CDR-H2 hlAll. H2) ；SEQ ID NO: 196 的殘基 99-107 (CDR-H3 hlAll. H2) ；SEQ ID NO: 197的殘基 24-34 (CDR-Ll hlAllVL. I) ；SEQ ID NO: 197 的殘基 50-56 (CDR-L2 hlAllVL. I)；SEQ ID NO: 197 的殘基 89-97 (CDR-L3 hlAllVL. 1)；SEQ ID NO: 198 的殘基 24-34 (CDR-LlhlAll. A2)；SEQ ID NO: 198 的殘基 50-56(CDR-L2 hlAll. A2)；SEQ ID NO: 198 的殘基 89-97(CDR-L3 hlAll. A2) ；SEQ ID NO: 199 的殘基 24-34 (CDR-Ll hlAll. A12) ；SEQ ID NO: 199的殘基 50-56 (CDR-L2 hlAll. A12) ；SEQ ID NO: 199 的殘基 89-97 (CDR-L3 hlAll. A12)；SEQ ID NO:200 的殘基 24-34 (CDR-Ll hlAll. A7) ；SEQ ID NO:200 的殘基 50-56 (CDR-L2hlAll. A7)；SEQ ID NO:200 的殘基 89-97(CDR-L3 hlAll. A7)；SEQ ID NO:201 的殘基 24-3 4 (CDR-Ll hlAll. B4)；SEQ ID NO:201 的殘基 50-56 (CDR-L2 hlAll. B4)；SEQ ID NO:201 ^殘基 89-97 (CDR-L3 hlAll. B4)；SEQ ID NO:202 的殘基 24-34 (CDR-Ll hlAll. B5)；SEQ IDNO:202 的殘基 50-56 (CDR-L2 hlAll. B5) ；SEQ ID NO:202 的殘基 89-97 (CDR-L3 hlAll.B5) ；SEQ ID NO:203 的殘基 24-34 (CDR-L1 hlAll. E12) ；SEQ ID NO:203 的殘基 50-56(CDR-L2 hlAll. E12) ；SEQ ID NO:203 的殘基 89-97 (CDR-L3 hlAll. E12)0
4.根據(jù)權(quán)利要求2的結(jié)合蛋白，其中所述結(jié)合蛋白包含至少三個CDRs。
5.根據(jù)權(quán)利要求4的結(jié)合蛋白，其中所述至少三個CDRs選自可變結(jié)構(gòu)域CDR組，其選自下述 VH 38H12 CDR 組 CDR-Hl: SEQ ID NO: 157 的殘基 31-35 CDR-H2: SEQ ID NO: 157 的殘基 50-66 CDR-H3 SEQ ID NO: 157 的殘基 99-107 VL 38H12 CDR 組 CDR-Ll: SEQ ID NO: 158 的殘基 24-34 CDR-L2: SEQ ID NO: 158 的殘基 50-56 CDR-L3: SEQ ID NO: 158 的殘基 89-97 VH IAll CDR 組 CDR-Hl: SEQ ID NO: 159 的殘基 31-35 CDR-H2: SEQ ID NO: 159 的殘基 50-66 CDR-H3: SEQ ID NO: 159 的殘基 99-107 VL IAll CDR 組 CDR-Ll: SEQ ID NO: 160 的殘基 24-34 CDR-L2: SEQ ID NO: 160 的殘基 50-56 CDR-L3: SEQ ID NO: 160 的殘基 89-97VH 37D10 CDR 鉬CDR-Hl: SEQ ID NO: 161 的殘基 31-35CDR-H2: SEQ ID NO: 161 的殘基 50-68CDR-H3: SEQ ID NO: 161 的殘基 101-111VL 37D10 CDRjECDR-Ll: SEQ ID NO: 162 的殘基 24-34CDR-L2: SEQ ID NO: 162 的殘基 50-56CDR-L3: SEQ ID NO: 162 的殘基 89-97VH 32C7 CDR 鉬CDR-Hl: SEQ ID NO: 163 的殘基 31-35CDR-H2: SEQ ID NO: 163 的殘基 50-66CDR-H3: SEQ ID NO: 163 的殘基 99-105VL 32C7 CDR 鉬 CDR-Ll: SEQ ID NO: 164 的殘基 24-34CDR-L2: SEQ ID NO: 164 的殘基 50-56CDR-L3: SEQ ID NO: 164 的殘基 89-98VH 14G1 CDR 鉬CDR-Hl: SEQ ID NO: 165 的殘基 31-35CDR-H2: SEQ ID NO: 165 的殘基 50-66CDR-H3: SEQ ID NO: 165 的殘基 99-105VL 14G1 CDR 組CDR-Ll: SEQ ID NO: 166 的殘基 24-34CDR-L2: SEQ ID NO: 166 的殘基 50-56CDR-L3: SEQ ID NO: 166 的殘基 89-97VH 14A11 CDR 組CDR-Hl: SEQ ID NO: 167 的殘基 31-35CDR-H2: SEQ ID NO: 167 的殘基 50-66CDR-H3: SEQ ID NO: 167 的殘基 99-110VL 14A11 CDR 組CDR-Ll: SEQ ID NO: 168 的殘基 23-37CDR-L2: SEQ ID NO: 168 的殘基 53-59CDR-L3: SEQ ID NO: 168 的殘基 92-100VH 15D6 CDR 組CDR-Hl: SEQ ID NO: 169 的殘基 31-35CDR-H2: SEQ ID NO: 169 的殘基 50-66CDR-H3: SEQ ID NO: 169 的殘基 99-110VL 15D6 CDR 組CDR-Ll: SEQ ID NO: 170 的殘基 23-37CDR-L2: SEQ ID NO: 170 的殘基 53-59CDR-L3:SEQ ID NO: 170 的殘基 92-100VH VH. IIAll CDR 鉬CDR-Hl:SEQ ID NO: 171 的殘基 31-35CDR-H2:SEQ ID NO: 171 的殘基 50-66CDR-H3:SEQ ID NO: 171 的殘基 99-107VH VH. IaIAU CDR 鉬CDR-Hl:SEQ ID NO: 172 的殘基 31-35CDR-H2:SEQ ID NO: 172 的殘基 50-66CDR-H3:SEQ ID NO: 172 的殘基 99-107VH VH. IbIAU CDR 鉬CDR-Hl:SEQ ID NO: 173 的殘基 31-35 CDR-H2:SEQ ID NO: 173 的殘基 50-66CDR-H3:SEQ ID NO: 173 的殘基 99-107VH VH. 2aIAU CDR 鉬CDR-Hl:SEQ ID NO: 174 的殘基 31-35CDR-H2:SEQ ID NO: 174 的殘基 50-66CDR-H3:SEQ ID NO: 174 的殘基 99-107VL VL. I IAll CDR 組CDR-Ll:SEQ ID NO: 175 的殘基 24-34CDR-L2:SEQ ID NO: 175 的殘基 50-56CDR-L3:SEQ ID NO: 175 的殘基 89-97VL VL. IaIAll CDR 組CDR-Ll:SEQ ID NO: 176 的殘基 24-34CDR-L2:SEQ ID NO: 176 的殘基 50-56CDR-L3:SEQ ID NO: 176 的殘基 89-97VL VL IbIAll CDR 組CDR-Ll:SEQ ID NO: 177 的殘基 24-34CDR-L2:SEQ ID NO: 177 的殘基 50-56CDR-L3:SEQ ID NO: 177 的殘基 50-56VL VL 2aIAll CDR 組CDR-Ll:SEQ ID NO: 178 的殘基 24-34CDR-L2:SEQ ID NO: 178 的殘基 50-56CDR-L3:SEQ ID NO: 178 的殘基 89-97VH VH. I 38H12 CDR組CDR-Hl:SEQ ID NO: 179 的殘基 31-35CDR-H2:SEQ ID NO: 179 的殘基 50-66CDR-H3:SEQ ID NO: 179 的殘基 99-107VH VH. Ia38H12 CDR組CDR-Hl:SEQ ID NO: 180 的殘基 31-35CDR-H2: SEQ ID NO: 180 的殘基 50-66CDR-H3: SEQ ID NO: 180 的殘基 99-107VH VH. Ib 38H12 CDR組CDR-Hl: SEQ ID NO: 181 的殘基 31-35 CDR-H2: SEQ ID NO: 181 的殘基 50-66CDR-H3: SEQ ID NO: 181 的殘基 99-107VH VH. 2a 38H12 CDR組CDR-Hl: SEQ ID NO: 182 的殘基 31-35CDR-H2: SEQ ID NO: 182 的殘基 50-66CDR-H3: SEQ ID NO: 182 的殘基 99-107VL VL I 38H12 CDR 組CDR-Ll: SEQ ID NO: 183 的殘基 24-34CDR-L2: SEQ ID NO: 183 的殘基 50-56CDR-L3: SEQ ID NO: 183 的殘基 89-97VL VL la 38H12 CDR 組CDR-Ll: SEQ ID NO: 184 的殘基 24-34CDR-L2: SEQ ID NO: 184 的殘基 50-56CDR-L3: SEQ ID NO: 184 的殘基 89-97VL VL Ib 38H12 CDR 組CDR-Ll: SEQ ID NO: 185 的殘基 24-34CDR-L2: SEQ ID NO: 185 的殘基 50-56CDR-L3: SEQ ID NO: 185 的殘基 89-97VL VL 2a 38H12 CDR 組CDR-Ll: SEQ ID NO: 186 的殘基 24-34CDR-L2: SEQ ID NO: 186 的殘基 50-56CDR-L3: SEQ ID NO: 186 的殘基 89-97VH hAlim I CDR 組CDR-Hl: SEQ ID NO: 187 的殘基 31-35CDR-H2: SEQ ID NO: 187 的殘基 50-66CDR-H3: SEQ ID NO: 187 的殘基 99-107VH hAll. A6 CDR 組CDR-Hl: SEQ ID NO: 188 的殘基 31-35CDR-H2: SEQ ID NO: 188 的殘基 50-66CDR-H3: SEQ ID NO: 188 的殘基 99-107VH hAll. A8 CDR 組CDR-Hl: SEQ ID NO: 189 的殘基 31-35CDR-H2: SEQ ID NO: 189 的殘基 50-66CDR-H3: SEQ ID NO: 189 的殘基 99-107VH hAll. C6 CDR 組CDR-Hl: SEQ ID NO: 190 的殘基 31-35CDR-H2: SEQ ID NO: 190 的殘基 50-66CDR-H3: SEQ ID NO: 190 的殘基 99-107VH hAll. All CDR 鉬CDR-Hl: SEQ ID NO: 191 的殘基 31-35CDR-H2: SEQ ID NO: 191 的殘基 50-66CDR-H3: SEQ ID NO: 191 的殘基 99-107VH hAll. B5 CDR 鉬CDR-Hl: SEQ ID NO: 192 的殘基 31-35CDR-H2: SEQ ID NO: 192 的殘基 50-66CDR-H3: SEQ ID NO: 192 的殘基 99-107VH hAll. E12 CDR 鉬CDR-Hl: SEQ ID NO: 193 的殘基 31-35·CDR-H2: SEQ ID NO: 193 的殘基 50-66CDR-H3: SEQ ID NO: 193 的殘基 99-107VH hAll. G3 CDR 鉬CDR-Hl: SEQ ID NO: 194 的殘基 31-35CDR-H2: SEQ ID NO: 194 的殘基 50-66CDR-H3: SEQ ID NO: 194 的殘基 99-107VH hAll. F5 CDR 組CDR-Hl: SEQ ID NO: 195 的殘基 31-35CDR-H2: SEQ ID NO: 195 的殘基 50-66CDR-H3: SEQ ID NO: 195 的殘基 99-107VH hAll. H2 CDR 組CDR-Hl: SEQ ID NO: 196 的殘基 31-35CDR-H2: SEQ ID NO: 196 的殘基 50-66CDR-H3: SEQ ID NO: 196 的殘基 99-107VL hlAllVL. I CDR 組CDR-Ll: SEQ ID NO: 197 的殘基 24-34CDR-L2: SEQ ID NO: 197 的殘基 50-56CDR-L3: SEQ ID NO: 197 的殘基 89-97VL hlAll. A2 CDR 組CDR-Ll: SEQ ID NO: 198 的殘基 24-34CDR-L2: SEQ ID NO: 198 的殘基 50-56CDR-L3: SEQ ID NO: 198 的殘基 89-97VL hlAll. A12 CDR 組CDR-Ll: SEQ ID NO: 199 的殘基 24-34CDR-L2: SEQ ID NO: 199 的殘基 50-56CDR-L3: SEQ ID NO: 199 的殘基 89-97VL hlAll. A7 CDR 鉬 CDR-Ll: SEQ ID NO: 200 的殘基 24-34 CDR-L2: SEQ ID NO:200 的殘基 50-56 CDR-L3: SEQ ID NO: 200 的殘基 89-97 VL hlAll. B4 CDR 鉬 CDR-Ll: SEQ ID NO: 201 的殘基 24-34 CDR-L2: SEQ ID NO:201 的殘基 50-56 CDR-L3: SEQ ID NO: 201 的殘基 89-97 VL hlAll. B5 CDR 鉬 CDR-Ll: SEQ ID NO: 202 的殘基 24-34 CDR-L2: SEQ ID NO:202 的殘基 50-56 CDR-L3: SEQ ID NO: 202 的殘基 89-97· 和·VL hlAll. E12 CDR 鉬CDR-Ll: SEQ ID NO: 203 的殘基 24-34CDR-L2: SEQ ID NO:203 的殘基 50-56CDR-L3: SEQ ID NO: · 203 的殘基 89-97。
6.根據(jù)權(quán)利要求5的結(jié)合蛋白，其包含來自至少兩個可變結(jié)構(gòu)域⑶R組的⑶Rs?！?br>
7.根據(jù)權(quán)利要求6的結(jié)合蛋白，其中所述至少兩個可變結(jié)構(gòu)域CDR組是選自下述的一對CDR組 VH 38H12 CDR 組和 VL 38H12 CDR 組， VH IAll CDR 組和 VL IAll CDR 組， VH 37D10 CDR 組和 VL 37D10 CDR 組， VH 32C7 CDR 組和 VL 32C7 CDR 組， VH 14G1 組和 VL 14G1 CDR 組， VH 14A11 CDR 組和 VL 14A11 CDR 組， VH 15D6 CDR 組和 VL 15D6 CDR 組，VH VH. I IAll CDR 組和 VL VL. I IAll CDR 組，VH VH. I IAll CDR 組和 VL VL. Ia IAll CDR 組，VH VH. I IAll CDR 組和 VL VL. Ib IAll CDR 組，VH VH. I IAll CDR 組和 VL VL. 2a IAll CDR 組，VH VH. Ia IAll CDR 組和 VL VL. I IAll CDR 組，VH VH. Ia IAll CDR 組和 VL VL. Ia IAll CDR 組，VH VH. Ia IAll CDR 組和 VL VL. Ib IAll CDR 組，VH VH. Ia IAll CDR 組和 VL VL. 2a IAll CDR 組，VH VH. Ib IAll CDR 組和 VL VL. I IAll CDR 組，VH VH. Ib IAll CDR 組和 VL VL. Ia IAll CDR 組，VH VH. Ib IAll CDR 組和 VL VL. Ib IAll CDR 組，VH VH. Ib IAll CDR 組和 VL VL. 2a IAll CDR 組，VH VH. 2a IAll CDR 組和 VL VL. I IAll CDR 組，VH VH. 2a IAll CDR 組和 VL VL. Ia IAll CDR 組，VH VH. 2a IAll CDR 組和 VL VL. Ib IAll CDR 組，VH VH. 2a IAll CDR 組和 VL VL. 2a IAll CDR 組，VH VH. I 38H12 CDR 組和 VL VL. I 38H12 CDR 組，VH VH. I 38H12 CDR 組和 VL VL. Ia 38H12 CDR 組，VH VH. I 38H12 CDR 組和 VL VL. Ib 38H12 CDR 組，VH VH. I 38H12 CDR 組和 VL VL. 2a 38H12 CDR 組， VH VH. Ia 38H12 CDR 組和 VL VL. I 38H12 CDR 組，VH VH. Ia 38H12 CDR 組和 VL VL. Ia 38H12 CDR 組，VH VH. Ia 38H12 CDR 組和 VL VL. Ib 38H12 CDR 組，VH VH. Ia 38H12 CDR 組和 VL VL. 2a 38H12 CDR 組，VH VH. Ib 38H12 CDR 組和 VL VL. I 38H12 CDR 組，VH VH. Ib 38H12 CDR 組和 VL VL. Ia 38H12 CDR 組，VH VH. Ib 38H12 CDR 組和 VL VL. Ib 38H12 CDR 組，VH VH. Ib 38H12 CDR 組和 VL VL. 2a 38H12 CDR 組，VH VH. 2a 38H12 CDR 組和 VL VL. I 38H12 CDR 組，VH VH. 2a 38H12 CDR 組和 VL VL. Ia 38H12 CDR 組，VH VH. 2a 38H12 CDR 組和 VL VL. Ib 38H12 CDR 組，VH VH. 2a 38H12 CDR 組和 VL VL. 2a 38H12 CDR 組，VH hlAll. A6 CDR 組和 VL hlAllVL. I CDR 組，VH hlAll. C6 CDR 組和 VL hlAllVL. I CDR 組，VH hlAll. All CDR 組和 VL hlAllVL. I CDR 組，VH hlAll. A8 CDR 組和 VL hlAllVL. I CDR 組，VH hlAllVH. I CDR 組和 VL hlAll. B4 CDR 組，VH hlAllVH. I CDR 組和 VL hlAll. A7 CDR 組，VH hlAllVH. I CDR 組和 VL hlAll. A12 CDR 組，VH hlAllVH. I CDR 組和 VL hlAll. A2 CDR 組，VH hlAll. B5 CDR 組和 VL hlAll. B5 CDR 組，VH hlAll. E12 CDR 組和 VL hlAll. E12 CDR 組，VH hlAll. G3 CDR 組和 VL hlAll. E12 CDR 組，VH hlAll. F5 CDR 組和 VL hlAll. E12 CDR 組，和VH hlAll. H2 CDR 組和 VL hlAll. E12 CDR 組。
8.根據(jù)權(quán)利要求4的結(jié)合蛋白，其進(jìn)一步包含人接納體構(gòu)架序列。
9.根據(jù)權(quán)利要求5的結(jié)合蛋白，其進(jìn)一步包含人接納體構(gòu)架序列。
10.根據(jù)權(quán)利要求6的結(jié)合蛋白，其進(jìn)一步包含人接納體構(gòu)架序列。
11.根據(jù)權(quán)利要求7的結(jié)合蛋白，其進(jìn)一步包含人接納體構(gòu)架序列。
12.根據(jù)權(quán)利要求8的結(jié)合蛋白，其中所述人接納體構(gòu)架序列選自表3和4中列出的接納體序列。
13.根據(jù)權(quán)利要求9的結(jié)合蛋白，其中所述人接納體構(gòu)架序列選自表3和4中列出的接納體序列。
14.根據(jù)權(quán)利要求10的結(jié)合蛋白，其中所述人接納體構(gòu)架序列選自表3和4中列出的接納體序列。
15.根據(jù)權(quán)利要求11的結(jié)合蛋白，其中所述人接納體構(gòu)架序列選自表3和4中列出的接納體序列。
16.根據(jù)權(quán)利要求8的結(jié)合蛋白，其中所述人接納體構(gòu)架序列選自可變區(qū)序列中的任何構(gòu)架序列，所述可變區(qū)序列選自下述
17.根據(jù)權(quán)利要求9的結(jié)合蛋白，其中所述人接納體構(gòu)架序列選自可變區(qū)序列中的任何構(gòu)架序列，所述可變區(qū)序列選自下述
18.根據(jù)權(quán)利要求io的結(jié)合蛋白，其中所述人接納體構(gòu)架序列選自可變區(qū)序列中的任何構(gòu)架序列，所述可變區(qū)序列選自下述
19.根據(jù)權(quán)利要求11的結(jié)合蛋白，其中所述人接納體構(gòu)架序列選自可變區(qū)序列中的任何構(gòu)架序列，所述可變區(qū)序列選自下述
20.根據(jù)權(quán)利要求8的結(jié)合蛋白，其中所述結(jié)合蛋白包含選自下述的至少一個接納體構(gòu)架序列 重鏈構(gòu)架-I (H-FRl) E-V-Q-L-V-E-S-G-G-G-L-V-Q-P-G-G-S-L-R-L-S-C-A-A-S-G-F-T-F-X30 (SEQ IDNO: 143)，其中 X3。是 S、R或 G ; 重鏈構(gòu)架-2 (H-FR2) ff-V-R-Q-A-P-G-K-G-L-E-ff-V-A (SEQ ID NO: 144)； 重鏈構(gòu)架-3 (H-FR3)R-F-T-I-S-R-D-N-A-K-X11-S-L-Y-L-Q-M-N-S-L-R-A-E-D-T-A-V-Y-Y-C-X31-R (SEQ IDN0:145)，其中； X11是N或S ;和X31是A或S ; 重鏈構(gòu)架-4 (H-FR4) ff-G-Q-G-T-L-V-T-V-S-S (SEQ ID NO: 146)； 輕鏈構(gòu)架-I (L-FRl)D-I-Q-M-T-Q-S-P-S-S-L-S-A-S-V-G-D-R-V-T-I-T-C (SEQ ID NO:147)； 輕鏈構(gòu)架-2 (L-FR2) =W-Y-Q-Q-K-P-G-K-X9-P-K-L-L-I-X15 (SEQ ID NO: 148)，其中； X9是A或S ;和 X15是F或Y ; 輕鏈構(gòu)架-3 (L-FR3)G-V-P-S-R-F-S-G-S-G-S-G-T-D-X15-T-L-T-I-S-S-L-Q-P-E-D-F-A-T-Y-Y-C (SEQ IDNO: 149)，其中； X15是？或S ;和 輕鏈構(gòu)架-4 (L-FR4) =F-G-Q-G-T-K-L-E-I-K (SEQ ID NO: 150)。
21.根據(jù)權(quán)利要求9的結(jié)合蛋白，其中所述結(jié)合蛋白包含選自下述的至少一個接納體構(gòu)架序列 重鏈構(gòu)架-I (H-FRl) E-V-Q-L-V-E-S-G-G-G-L-V-Q-P-G-G-S-L-R-L-S-C-A-A-S-G-F-T-F-X30 (SEQ IDNO: 143)，其中 X3。是 S、R或 G ; 重鏈構(gòu)架-2 (H-FR2) ff-V-R-Q-A-P-G-K-G-L-E-ff-V-A (SEQ ID NO: 144)； 重鏈構(gòu)架-3 (H-FR3)R-F-T-I-S-R-D-N-A-K-X11-S-L-Y-L-Q-M-N-S-L-R-A-E-D-T-A-V-Y-Y-C-X31-R (SEQ IDNO:145)，其中； X11是N或S ;和 X31是A或S ; 重鏈構(gòu)架-4 (H-FR4) ff-G-Q-G-T-L-V-T-V-S-S (SEQ ID NO: 146)； 輕鏈構(gòu)架-I (L-FRl)D-I-Q-M-T-Q-S-P-S-S-L-S-A-S-V-G-D-R-V-T-I-T-C (SEQ ID NO:147)； 輕鏈構(gòu)架-2 (L-FR2) =W-Y-Q-Q-K-P-G-K-X9-P-K-L-L-I-X15 (SEQ ID NO: 148)，其中； X9是A或S ;和 X15是F或Y ; 輕鏈構(gòu)架-3 (L-FR3)G-V-P-S-R-F-S-G-S-G-S-G-T-D-X15-T-L-T-I-S-S-L-Q-P-E-D-F-A-T-Y-Y-C (SEQ IDNO: 149)，其中； X15是？或S ;和 輕鏈構(gòu)架-4 (L-FR4) =F-G-Q-G-T-K-L-E-I-K (SEQ ID NO: 150)。
22.根據(jù)權(quán)利要求10的結(jié)合蛋白，其中所述結(jié)合蛋白包含選自下述的至少一個接納體構(gòu)架序列 重鏈構(gòu)架-I (H-FRl) E-V-Q-L-V-E-S-G-G-G-L-V-Q-P-G-G-S-L-R-L-S-C-A-A-S-G-F-T-F-X30 (SEQ IDNO: 143)，其中 X3。是 S、R或 G ;重鏈構(gòu)架-2 (H-FR2) ff-V-R-Q-A-P-G-K-G-L-E-ff-V-A (SEQ ID NO: 144)； 重鏈構(gòu)架-3 (H-FR3)R-F-T-I-S-R-D-N-A-K-X11-S-L-Y-L-Q-M-N-S-L-R-A-E-D-T-A-V-Y-Y-C-X31-R (SEQ IDN0:145)，其中； X11是N或S ;和 X31是A或S ; 重鏈構(gòu)架-4 (H-FR4) ff-G-Q-G-T-L-V-T-V-S-S (SEQ ID NO: 146)；輕鏈構(gòu)架-I (L-FRl) D-I-Q-M-T-Q-S-P-S-S-L-S-A-S-V-G-D-R-V-T-I-T-C (SEQ ID NO:147)； 輕鏈構(gòu)架-2 (L-FR2) =W-Y-Q-Q-K-P-G-K-X9-P-K-L-L-I-X15 (SEQ ID NO: 148)，其中； X9是A或S ;和 X15是F或Y ; 輕鏈構(gòu)架-3 (L-FR3)G-V-P-S-R-F-S-G-S-G-S-G-T-D-X15-T-L-T-I-S-S-L-Q-P-E-D-F-A-T-Y-Y-C (SEQ IDNO: 149)，其中； X15是？或S ;和 輕鏈構(gòu)架-4 (L-FR4) =F-G-Q-G-T-K-L-E-I-K (SEQ ID NO: 150)。
23.根據(jù)權(quán)利要求11的結(jié)合蛋白，其中所述結(jié)合蛋白包含選自下述的至少一個接納體構(gòu)架序列 重鏈構(gòu)架-I (H-FRl) E-V-Q-L-V-E-S-G-G-G-L-V-Q-P-G-G-S-L-R-L-S-C-A-A-S-G-F-T-F-X30 (SEQ IDNO: 143)，其中 X3。是 S、R或 G ; 重鏈構(gòu)架-2 (H-FR2) ff-V-R-Q-A-P-G-K-G-L-E-ff-V-A (SEQ ID NO: 144)； 重鏈構(gòu)架-3 (H-FR3)R-F-T-I-S-R-D-N-A-K-X11-S-L-Y-L-Q-M-N-S-L-R-A-E-D-T-A-V-Y-Y-C-X31-R (SEQ IDNO:145)，其中； X11是N或S ;和 X31是A或S ; 重鏈構(gòu)架-4 (H-FR4) ff-G-Q-G-T-L-V-T-V-S-S (SEQ ID NO: 146)； 輕鏈構(gòu)架-I (L-FRl)D-I-Q-M-T-Q-S-P-S-S-L-S-A-S-V-G-D-R-V-T-I-T-C (SEQ ID NO:147)； 輕鏈構(gòu)架-2 (L-FR2) =W-Y-Q-Q-K-P-G-K-X9-P-K-L-L-I-X15 (SEQ ID NO: 148)，其中； X9是A或S ;和 X15是F或Y ; 輕鏈構(gòu)架-3 (L-FR3)G-V-P-S-R-F-S-G-S-G-S-G-T-D-X15-T-L-T-I-S-S-L-Q-P-E-D-F-A-T-Y-Y-C (SEQ IDNO: 149)，其中； X15是？或S ;和 輕鏈構(gòu)架-4 (L-FR4) =F-G-Q-G-T-K-L-E-I-K (SEQ ID NO: 150)。
24.根據(jù)權(quán)利要求2的結(jié)合蛋白，其中所述結(jié)合蛋白包含人接納體構(gòu)架序列和具有選自下述的氨基酸序列的至少一個可變結(jié)構(gòu)域
25.根據(jù)權(quán)利要求24的結(jié)合蛋白，其中所述結(jié)合蛋白包含兩個可變結(jié)構(gòu)域，其中所述兩個可變結(jié)構(gòu)域具有選自下述的氨基酸序列
26.根據(jù)權(quán)利要求8的結(jié)合蛋白，其中所述人接納體構(gòu)架序列包含在關(guān)鍵殘基上的至少一個構(gòu)架區(qū)氨基酸取代，所述關(guān)鍵殘基選自 與⑶R接近的殘基； 糖基化位點殘基； 稀有殘基； 能夠與人DLL4相互作用的殘基； 能夠與CDR相互作用的殘基； 規(guī)范殘基； 在重鏈可變區(qū)和輕鏈可變區(qū)之間的接觸殘基； 在Vernier區(qū)內(nèi)的殘基；和在Chothia定義的可變重鏈⑶Rl和Kabat定義的第一個重鏈構(gòu)架之間重疊的區(qū)域中的殘基。
27.根據(jù)權(quán)利要求11的結(jié)合蛋白，其中所述人接納體構(gòu)架序列包含在關(guān)鍵殘基上的至少一個構(gòu)架區(qū)氨基酸取代，所述關(guān)鍵殘基選自 與⑶R接近的殘基； 糖基化位點殘基； 稀有殘基； 能夠與人DLL4相互作用的殘基； 能夠與CDR相互作用的殘基； 規(guī)范殘基； 在重鏈可變區(qū)和輕鏈可變區(qū)之間的接觸殘基； 在Vernier區(qū)內(nèi)的殘基；和在Chothia定義的可變重鏈⑶Rl和Kabat定義的第一個重鏈構(gòu)架之間重疊的區(qū)域中的殘基。
28.根據(jù)權(quán)利要求25的結(jié)合蛋白，其中所述人接納體構(gòu)架序列包含在關(guān)鍵殘基上的至少一個構(gòu)架區(qū)氨基酸取代，所述關(guān)鍵殘基選自 與⑶R接近的殘基； 糖基化位點殘基； 稀有殘基； 能夠與人DLL4相互作用的殘基； 能夠與CDR相互作用的殘基； 規(guī)范殘基； 在重鏈可變區(qū)和輕鏈可變區(qū)之間的接觸殘基； 在Vernier區(qū)內(nèi)的殘基；和 在Chothia定義的可變重鏈⑶Rl和Kabat定義的第一個重鏈構(gòu)架之間重疊的區(qū)域中的殘基。
29.根據(jù)權(quán)利要求26的結(jié)合蛋白，其中所述結(jié)合蛋白包含共有人可變結(jié)構(gòu)域序列。
30.根據(jù)權(quán)利要求27的結(jié)合蛋白，其中所述結(jié)合蛋白包含共有人可變結(jié)構(gòu)域序列。
31.根據(jù)權(quán)利要求28的結(jié)合蛋白，其中所述結(jié)合蛋白包含共有人可變結(jié)構(gòu)域序列。
32.根據(jù)權(quán)利要求8的結(jié)合蛋白，其中所述人接納體構(gòu)架包含至少一個構(gòu)架區(qū)氨基酸取代，其中所述構(gòu)架的氨基酸序列與人種系接納體構(gòu)架的序列至少65%等同，并且包含與人種系接納體構(gòu)架等同的至少70個氨基酸殘基。
33.根據(jù)權(quán)利要求11的結(jié)合蛋白，其中所述人接納體構(gòu)架包含至少一個構(gòu)架區(qū)氨基酸取代，其中所述構(gòu)架的氨基酸序列與人種系接納體構(gòu)架的序列至少65%等同，并且包含與人種系接納體構(gòu)架等同的至少70個氨基酸殘基。
34.根據(jù)權(quán)利要求25的結(jié)合蛋白，其中所述人接納體構(gòu)架包含至少一個構(gòu)架區(qū)氨基酸取代，其中所述構(gòu)架的氨基酸序列與人種系接納體構(gòu)架的序列至少65%等同，并且包含與人種系接納體構(gòu)架等同的至少70個氨基酸殘基。
35.根據(jù)權(quán)利要求2的結(jié)合蛋白，其中所述結(jié)合蛋白包含具有選自下述的氨基酸序列的至少一個可變結(jié)構(gòu)域
36.根據(jù)權(quán)利要求35的結(jié)合蛋白，其中所述結(jié)合蛋白包含兩個可變結(jié)構(gòu)域，其中所述兩個可變結(jié)構(gòu)域具有選自下述的氨基酸序列
37.根據(jù)權(quán)利要求2的DLL4結(jié)合蛋白，其中所述結(jié)合蛋白能夠阻斷DLL4與Notch蛋白質(zhì)的相互作用。
38.根據(jù)權(quán)利要求36的DLL4結(jié)合蛋白，其中所述結(jié)合蛋白能夠阻斷DLL4與選自下述的Notch蛋白質(zhì)的相互作用Notch_l、Notch-2、Notch-3、Notch-4及其組合。
39.根據(jù)權(quán)利要求2的DLL4結(jié)合蛋白，其中所述結(jié)合蛋白能夠調(diào)節(jié)DLL4的生物學(xué)功倉泛。
40.根據(jù)權(quán)利要求2的DLL4結(jié)合蛋白，其中所述結(jié)合蛋白能夠中和DLL4的生物學(xué)功倉泛。
41.根據(jù)權(quán)利要求2的DLL4結(jié)合蛋白，其中所述結(jié)合蛋白能夠抑制VEGFR2活性、VEGFRl活性或兩者。
42.根據(jù)權(quán)利要求2的DLL4結(jié)合蛋白，其中所述結(jié)合蛋白能夠消除DLL4結(jié)合其受體的能力。
43.根據(jù)權(quán)利要求2的DLL4結(jié)合蛋白，其中所述結(jié)合蛋白能夠抑制正常血管生成。
44.根據(jù)權(quán)利要求2的DLL4結(jié)合蛋白，其中如通過表面等離振子共振測量的，所述結(jié)合蛋白具有選自下述的與DLL4的結(jié)合速率常數(shù)(Kon):至少約ΙΟ 1 ;至少約IO3M^ ;至少約IO4MY1 ;至少約IO5MY1 ;和至少約IO6IT1S'
45.根據(jù)權(quán)利要求8的DLL4結(jié)合蛋白，其中如通過表面等離振子共振測量的，所述結(jié)合蛋白具有選自下述的與DLL4的結(jié)合速率常數(shù)(Kon):至少約ΙΟ 1 ;至少約IO3M^ ;至少約IO4MY1 ;至少約IO5MY1 ;和至少約IO6IT1S'
46.根據(jù)權(quán)利要求24的DLL4結(jié)合蛋白，其中如通過表面等離振子共振測量的，所述結(jié)合蛋白具有選自下述的與DLL4的結(jié)合速率常數(shù)(Kon):至少約ΙΟ 1 ;至少約ΙΟ 1 ；至少約IO4MY1 ;至少約IO5MY1 ;和至少約IO6IT1S'
47.根據(jù)權(quán)利要求2的DLL4結(jié)合蛋白，其中如通過表面等離振子共振測量的，所述結(jié)合蛋白具有選自下述的與DLL4的解離速率常數(shù)(KofT):至多約ΙΟ ;至多約ΙΟΛΓ1 ;至多約10 ;和至多約KT6S'
48.根據(jù)權(quán)利要求8的DLL4結(jié)合蛋白，其中如通過表面等離振子共振測量的，所述結(jié)合蛋白具有選自下述的與DLL4的解離速率常數(shù)(KofT):至多約ΙΟ ;至多約ΙΟΛΓ1 ;至多約10 ;和至多約KT6S'
49.根據(jù)權(quán)利要求24的DLL4結(jié)合蛋白，其中如通過表面等離振子共振測量的，所述結(jié)合蛋白具有選自下述的與DLL4的解離速率常數(shù)(KofT):至多約KT3iT1 ;至多約ΙΟ、—1 ;至多約10 ;和至多約KT6S'
50.根據(jù)權(quán)利要求2的DLL4結(jié)合蛋白，其中所述結(jié)合蛋白具有選自下述的與DLL4的解離常數(shù)(Kd):至多約Kr7 M ;至多約Kr8 M ;至多約Kr9 M ;至多約1(T10 M ;至多約1(Γη M ；至多約1(T12 M ;和至多IO^13M0
51.根據(jù)權(quán)利要求8的DLL4結(jié)合蛋白，其中所述結(jié)合蛋白具有選自下述的與DLL4的解離常數(shù)(Kd):至多約Kr7 M ;至多約Kr8 M ;至多約Kr9 M ;至多約1(T10 M ;至多約1(Γη M ；至多約1(T12 M ;和至多IO^13M0
52.根據(jù)權(quán)利要求24的DLL4結(jié)合蛋白，其中所述結(jié)合蛋白具有選自下述的與DLL4的解離常數(shù)(Kd):至多約I。-7 M ;至多約IO-8 M ;至多約10-9 M ;至多約10, M ;至多約1(Γη M ；至多約1(T12 M ;和至多IO^13M0
53.—種包含權(quán)利要求2中所述的結(jié)合蛋白的抗體構(gòu)建體，所述抗體構(gòu)建體進(jìn)一步包含接頭多肽或免疫球蛋白恒定結(jié)構(gòu)域。
54.根據(jù)權(quán)利要求53的抗體構(gòu)建體，其選自 免疫球蛋白分子， 單克隆抗體， 嵌合抗體， ⑶R嫁接的抗體，F(xiàn)ab，F(xiàn)abi，F(xiàn) (ab，) 2，F(xiàn)v, 二硫鍵連接的Fv， scFv, 單結(jié)構(gòu)域抗體， 雙抗體， 多特異性抗體， 雙重特異性抗體，和 雙特異性抗體。
55.根據(jù)權(quán)利要求53的抗體構(gòu)建體，其中所述抗體構(gòu)建體包含選自下述的重鏈免疫球蛋白恒定結(jié)構(gòu)域 人IgM恒定結(jié)構(gòu)域， 人IgGl恒定結(jié)構(gòu)域， 人IgG2恒定結(jié)構(gòu)域， 人IgG3恒定結(jié)構(gòu)域， 人IgG4恒定結(jié)構(gòu)域， 人IgE恒定結(jié)構(gòu)域，和 人IgA恒定結(jié)構(gòu)域。
56.根據(jù)權(quán)利要求53的抗體構(gòu)建體，其包含具有選自下述的氨基酸序列的免疫球蛋白恒定結(jié)構(gòu)域SEQ ID NO: 3、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO: 5、SEQ ID NO:6 及其組合。
57.—種包含如權(quán)利要求53-56中任一項中所述的抗體構(gòu)建體的抗體綴合物，所述抗體綴合物進(jìn)一步包含選自下述的試劑顯像劑、治療劑、細(xì)胞毒劑和免疫粘附分子。
58.根據(jù)權(quán)利要求57的抗體綴合物，其中所述試劑是選自下述的顯像劑放射性標(biāo)記、酶、熒光標(biāo)記、發(fā)光標(biāo)記、生物發(fā)光標(biāo)記、磁性標(biāo)記和生物素。
59.根據(jù)權(quán)利要求57的抗體綴合物，其中所述顯像劑是選自下述的放射性標(biāo)記3H、14C、35S,90Y,"Tc,111 In, 1251 , 1311 , 177Lu, 166Ho 和 153Sm。
60.根據(jù)權(quán)利要求57的抗體綴合物，其中所述試劑是選自下述的治療劑或細(xì)胞毒劑抗代謝物、烷化劑、抗生素、生長因子、細(xì)胞因子、抗血管生成劑、抗有絲分裂劑、蒽環(huán)霉素、毒素和細(xì)胞凋亡劑。
61.根據(jù)權(quán)利要求53的抗體構(gòu)建體，其中所述結(jié)合蛋白具有人糖基化模式。
62.根據(jù)權(quán)利要求57的抗體綴合物，其中所述結(jié)合蛋白具有人糖基化模式。
63.根據(jù)權(quán)利要求4的結(jié)合蛋白，其中所述結(jié)合蛋白作為晶體存在。
64.根據(jù)權(quán)利要求53的抗體構(gòu)建體，其中所述抗體構(gòu)建體作為晶體存在。
65.根據(jù)權(quán)利要求57的抗體綴合物，其中所述抗體綴合物作為晶體存在。
66.根據(jù)權(quán)利要求63的結(jié)合蛋白，其中所述晶體是無載體的藥學(xué)控釋晶體。
67.根據(jù)權(quán)利要求64的抗體構(gòu)建體，其中所述晶體是無載體的藥學(xué)控釋晶體。
68.根據(jù)權(quán)利要求65的抗體綴合物，其中所述晶體是無載體的藥學(xué)控釋晶體。
69.根據(jù)權(quán)利要求63的結(jié)合蛋白，其中所述結(jié)合蛋白晶體具有比所述結(jié)合蛋白的可溶性配對物更大的體內(nèi)半衰期。
70.根據(jù)權(quán)利要求64的抗體構(gòu)建體，其中所述抗體構(gòu)建體晶體具有比所述抗體構(gòu)建體的可溶性配對物更大的體內(nèi)半衰期。
71.根據(jù)權(quán)利要求65的抗體綴合物，其中所述抗體綴合物晶體具有比所述抗體綴合物的可溶性配對物更大的體內(nèi)半衰期。
72.根據(jù)權(quán)利要求63的結(jié)合蛋白，其中所述結(jié)合蛋白晶體保留所述非晶體形式的結(jié)合蛋白的生物學(xué)活性。
73.根據(jù)權(quán)利要求64的抗體構(gòu)建體，其中所述抗體構(gòu)建體晶體保留所述非晶體形式的抗體構(gòu)建體的生物學(xué)活性。
74.根據(jù)權(quán)利要求65的抗體綴合物，其中所述抗體綴合物晶體保留所述非晶體形式的抗體綴合物的生物學(xué)活性。
75.一種分離的核酸，其編碼權(quán)利要求2中所述的結(jié)合蛋白氨基酸序列。
76.—種編碼選自下述的多肽的分離的核酸包含重鏈可變結(jié)構(gòu)域的多肽，其中所述重鏈可變結(jié)構(gòu)域包含如權(quán)利要求2中所述的⑶R-H1、⑶R-H2和⑶R-H3中的一個或多個；包含輕鏈可變結(jié)構(gòu)域的多肽，其中所述輕鏈可變結(jié)構(gòu)域包含如權(quán)利要求2中所述的CDR-L1、⑶R-L2和⑶R-L3中的一個或多個；以及兩種多肽的組合。
77.—種載體,其包含根據(jù)權(quán)利要求76的分離的核酸。
78.根據(jù)權(quán)利要求77的載體，其中所述載體選自pcDNA、pTT、pTT3、pEFBOS、pBV、pJV和 PBJ o
79.—種宿主細(xì)胞，其包含權(quán)利要求77中所述的載體。
80.根據(jù)權(quán)利要求79的宿主細(xì)胞，其中所述宿主細(xì)胞是原核細(xì)胞。
81.根據(jù)權(quán)利要求80的宿主細(xì)胞，其中所述宿主細(xì)胞是大腸桿菌細(xì)胞。
82.根據(jù)權(quán)利要求79的宿主細(xì)胞，其中所述宿主細(xì)胞是真核細(xì)胞。
83.根據(jù)權(quán)利要求82的宿主細(xì)胞，其中所述真核細(xì)胞選自原生生物細(xì)胞、動物細(xì)胞、植物細(xì)胞和真菌細(xì)胞。
84.根據(jù)權(quán)利要求83的宿主細(xì)胞，其中所述真核細(xì)胞是選自下述的動物細(xì)胞哺乳動物細(xì)胞、禽類細(xì)胞和昆蟲細(xì)胞。
85.根據(jù)權(quán)利要求84的宿主細(xì)胞，其中所述哺乳動物細(xì)胞是CHO細(xì)胞。
86.根據(jù)權(quán)利要求84的宿主細(xì)胞，其中所述哺乳動物細(xì)胞是COS細(xì)胞。
87.根據(jù)權(quán)利要求83的宿主細(xì)胞，其中所述真菌細(xì)胞是釀酒酵母。
88.根據(jù)權(quán)利要求84的宿主細(xì)胞，其中所述昆蟲細(xì)胞是Sf9細(xì)胞。
89.—種產(chǎn)生結(jié)合人DLL4的結(jié)合蛋白的方法，其包括在足以產(chǎn)生結(jié)合人DLL4的結(jié)合蛋白的條件下在培養(yǎng)基中培養(yǎng)如權(quán)利要求79中所述的宿主細(xì)胞。
90.一種DLL4結(jié)合蛋白，其根據(jù)權(quán)利要求89的方法產(chǎn)生。
91.一種用于釋放結(jié)合蛋白的組合物，所述組合物包含 Ca)制劑，其中所述制劑包含如權(quán)利要求63-65中任一項中所述的結(jié)晶結(jié)合蛋白，和成分；和 (b)至少一種聚合載體。
92.根據(jù)權(quán)利要求93的組合物，其中所述聚合載體是選自下述的一種或多種的聚合物聚丙烯酸、聚氰基丙烯酸酯、聚氨基酸、聚酐、聚酯肽、聚酯、聚乳酸、乳酸乙醇酸共聚物或PLGA、聚b-羥基丁酸酯、聚己內(nèi)酯、聚二氧雜環(huán)己酮、聚乙二醇、聚(羥丙基)甲基丙烯酰胺、聚有機磷腈、聚原酸酯、聚乙烯醇、聚乙烯吡咯烷酮、馬來酸酐-烷基乙烯基醚共聚物、Pluronic多元醇、清蛋白、藻酸鹽、纖維素和纖維素衍生物、膠原、血纖蛋白、明膠、透明質(zhì)酸、寡糖、糖胺聚糖、硫酸化多糖、其摻合物及其共聚物。
93.根據(jù)權(quán)利要求91的組合物，其中所述成分選自清蛋白、蔗糖、海藻糖、乳糖醇、明膠、羥丙基-β -環(huán)糊精、甲氧基聚乙二醇和聚乙二醇。
94.一種用于治療哺乳動物的方法，其包括給哺乳動物施用有效量的如權(quán)利要求91中所述的組合物的步驟。
95.一種藥物組合物，其包含如權(quán)利要求2中所述的DLL4結(jié)合蛋白和藥學(xué)可接受的載體。
96.權(quán)利要求95的藥物組合物，其進(jìn)一步包含用于治療其中DLL4活性是有害的病癥的至少一種另外試劑。
97.權(quán)利要求95的藥物組合物，其中所述另外試劑選自下述治療劑；顯像劑；抗腫瘤藥；化學(xué)治療劑；血管生成抑制劑；抗VEGF抗體；抗EGFR抗體；抗cMet抗體；抗ErbB3抗體；抗HER2抗體；抗CD20抗體；阿柏西普；激酶抑制劑；共刺激分子阻斷劑；抗B7. 2抗體；CTLA4-Ig ;粘附分子阻斷劑；抗E選擇素抗體；抗L選擇素抗體；抗細(xì)胞因子抗體或其功能片段；抗11-18抗體；抗了即抗體；抗11^-6抗體；氨甲蝶呤；皮質(zhì)類固醇；環(huán)孢素；雷帕霉素；FK506 ;DNA燒化劑；順鉬；卡鉬；抗微管蛋白劑；紫杉醇；多西他賽；阿霉素；吉西他濱；吉西他賓；蒽環(huán)霉素；亞得里亞霉素；拓?fù)洚悩?gòu)酶I抑制劑；拓?fù)洚悩?gòu)酶II抑制劑；5_氟尿嘧啶(5-FU);甲酰四氫葉酸；依立替康；受體酪氨酸激酶抑制劑；凋亡抑制劑；Bcl2/BclX抑制劑；埃羅替尼；吉非替尼；C0X-2抑制劑；塞來昔布；環(huán)孢素；雷帕霉素；可檢測標(biāo)記或報道分子；TNF拮抗劑；抗風(fēng)濕劑；肌肉弛緩劑；麻醉藥；止痛劑；麻醉劑；鎮(zhèn)靜劑；局部麻醉劑；神經(jīng)肌肉阻斷劑；抗微生物劑；抗牛皮癬劑；皮質(zhì)類固醇；促蛋白合成類固醇；促紅細(xì)胞生成素；免疫接種；免疫球蛋白；免疫抑制劑；生長激素；激素替代藥物；放射性藥物；抗抑郁劑；抗精神病藥；刺激劑；哮喘藥物治療；β激動劑；吸入類固醇；腎上腺素；其腎上腺素類似物；細(xì)胞因子；和細(xì)胞因子拮抗劑。
98.一種用于減少人DLL4活性的方法，其包括使人DLL4與如權(quán)利要求2中所述的結(jié)合蛋白接觸，從而使得所述人DLL4活性減少。
99.一種用于減少患有其中DLL4活性是有害的病癥的人受試者中的人DLL4活性的方法，其包括給所述人受試者施用如權(quán)利要求2中所述的結(jié)合蛋白，從而使得所述人受試者中的人DLL4活性減少。
100.一種用于就其中DLL4活性是有害的疾病或病癥治療受試者的方法，通過給所述受試者施用如權(quán)利要求2中所述的DLL4結(jié)合蛋白，從而使得實現(xiàn)治療。
101.權(quán)利要求100的方法，其中所述病癥選自乳腺癌、結(jié)腸癌、直腸癌、肺癌、口咽癌、下咽癌、食管癌、胃癌、胰腺癌、肝癌、膀胱癌、膽管癌、小腸癌、泌尿道癌、女性生殖道癌、男性生殖道癌、內(nèi)分泌腺癌、皮膚癌、血管瘤、黑素瘤、肉瘤、腦瘤、神經(jīng)癌、眼腫瘤、腦膜癌、來自造血惡性腫瘤的實體瘤、腫瘤轉(zhuǎn)移灶、眼新生血管形成、水腫、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、粥樣硬化斑塊、Crohn氏病、炎性腸病、頑固性腹水、牛皮癬、肉瘤樣病、動脈硬化、敗血病、潰瘍病、燒傷、胰腺炎、多囊卵巢病(P0D)、子宮內(nèi)膜異位癥、子宮肌瘤、良性前列腺肥大、T細(xì)胞急性成淋巴細(xì)胞白血病(Τ-ALL)、伴皮質(zhì)下梗死和腦白質(zhì)病的腦常染色體顯性動脈病(CADASIL)、多發(fā)性硬化(MS)、法洛四聯(lián)癥(TOF)、Alagille綜合征(AS)、黃斑變性和年齡相關(guān)的黃斑變性疾病、以及特征在于異常DLL4活性的其他血管生成非依賴性疾病和依賴性疾病。
102.根據(jù)權(quán)利要求101的方法，其中所述病癥是原發(fā)性和轉(zhuǎn)移性癌。
103.根據(jù)權(quán)利要求101的方法，其中所述泌尿道癌選自腎癌、膀胱癌和尿道上皮癌。
104.根據(jù)權(quán)利要求101的方法，其中所述女性生殖道癌選自宮頸癌、子宮癌、卵巢癌、絨毛膜癌和妊娠滋養(yǎng)細(xì)胞疾病。
105.根據(jù)權(quán)利要求101的方法，其中所述男性生殖道癌選自前列腺癌、精囊癌、睪丸癌和生殖細(xì)胞腫瘤。
106.根據(jù)權(quán)利要求101的方法，其中所述內(nèi)分泌腺癌選自甲狀腺癌、腎上腺癌和垂體癌。
107.根據(jù)權(quán)利要求101的方法，其中所述肉瘤選自骨肉瘤、軟組織肉瘤和卡波濟肉瘤。
108.根據(jù)權(quán)利要求101的方法，其中所述腦膜癌選自星形細(xì)胞瘤、神經(jīng)膠質(zhì)瘤、成膠質(zhì)細(xì)胞瘤、成視網(wǎng)膜細(xì)胞瘤、神經(jīng)瘤、成神經(jīng)細(xì)胞瘤、許旺細(xì)胞瘤和腦膜瘤。
109.根據(jù)權(quán)利要求101的方法，其中來自造血惡性腫瘤的所述實體瘤是白血病、何杰金氏白血病、非何杰金氏白血病、淋巴瘤、何杰金氏淋巴瘤和非何杰金氏淋巴瘤。
110.110.根據(jù)權(quán)利要求101的方法，其中所述眼新生血管形成選自糖尿病失明、視網(wǎng)膜病變、年齡誘導(dǎo)的黃斑變性和發(fā)紅。
111.根據(jù)權(quán)利要求101的方法，其中對于所述受試者的所述施用是通過選自下述的至少一種方式腸胃外、皮下、肌內(nèi)、靜脈內(nèi)、動脈內(nèi)、關(guān)節(jié)內(nèi)、支氣管內(nèi)、腹內(nèi)、囊內(nèi)、軟骨內(nèi)、腔內(nèi)、體腔內(nèi)、小腦內(nèi)、腦室內(nèi)、結(jié)腸內(nèi)、頸內(nèi)、胃內(nèi)、肝內(nèi)、心肌內(nèi)、骨內(nèi)、骨盆內(nèi)、心包內(nèi)、腹膜內(nèi)、胸膜內(nèi)、前列腺內(nèi)、肺內(nèi)、直腸內(nèi)、腎內(nèi)、視網(wǎng)膜內(nèi)、脊柱內(nèi)、滑膜內(nèi)、胸內(nèi)、子宮內(nèi)、膀胱內(nèi)、推注、陰道、直腸、頰、舌下、鼻內(nèi)和經(jīng)皮。
112.—種治療患有其中DLL4是有害的病癥的患者的方法，其包括在治療有效量的第二種試劑施用之前、同時或之后，施用如權(quán)利要求2中所述的DLL4結(jié)合蛋白的步驟，其中所述第二種試劑選自能夠結(jié)合人VEGFR2的抗體或其片段；氨甲蝶呤；能夠結(jié)合人TNF的抗體或其片段；皮質(zhì)類固醇； 環(huán)孢素；雷帕霉素；FK506 ;非類 固醇消炎藥(NSAID);放射治療劑；抗腫瘤藥；化學(xué)治療劑；DNA燒化劑；順鉬；卡鉬；抗微管蛋白劑；紫杉醇；多西他賽；紫衫酚；阿霉素；吉西他濱；吉西他賓；蒽環(huán)霉素；亞得里亞霉素；拓?fù)洚悩?gòu)酶I抑制劑；拓?fù)洚悩?gòu)酶II抑制劑；5_氟尿嘧啶(5-FU);甲酰四氫葉酸；依立替康；受體酪氨酸激酶抑制劑；厄洛替尼；吉非替尼；C0X-2抑制劑；塞來昔布；激酶抑制劑；血管生成抑制劑；抗VEGF抗體；阿柏西普；共刺激分子阻斷劑；抗B7. I抗體；抗B7. 2抗體；CTLA4-Ig ;抗CD20抗體；粘附分子阻斷劑；抗LFA-I抗體；抗E選擇素抗體；和抗L選擇素抗體；小分子抑制劑；抗細(xì)胞因子抗體或其功能片段；抗IL-18抗體；抗TNF抗體；抗IL-6抗體；抗細(xì)胞因子受體抗體；可檢測標(biāo)記或報道物；TNF拮抗劑；抗風(fēng)濕劑；肌肉弛緩劑；麻醉藥；止痛劑；麻醉劑；鎮(zhèn)靜劑；局部麻醉劑；神經(jīng)肌肉阻斷劑；抗微生物劑；抗牛皮癬劑；皮質(zhì)類固醇；促蛋白合成類固醇；促紅細(xì)胞生成素；免疫接種；免疫球蛋白；免疫抑制劑；生長激素；激素替代藥物；放射性藥物；抗抑郁劑；抗精神病藥；刺激劑；哮喘藥物治療；β激動劑；吸入類固醇；腎上腺素；腎上腺素類似物；細(xì)胞因子；和細(xì)胞因子拮抗劑。
113.根據(jù)權(quán)利要求2的結(jié)合蛋白，其中所述結(jié)合蛋白是抗體。
114.根據(jù)權(quán)利要求113的抗體，其中所述抗體選自單克隆抗體、全長四聚免疫球蛋白、IgG分子、IgG1分子、嵌合抗體、CDR嫁接的抗體、人源化抗體和親和力成熟的抗體。
115.根據(jù)權(quán)利要求114的抗體，其中所述抗體是單克隆抗體。
116.根據(jù)權(quán)利要求36的結(jié)合蛋白，其中所述兩個可變結(jié)構(gòu)域具有選自下述的氨基酸序列SEQ ID NO:188 和 SEQ ID NO:197，SEQ ID NO:190 和 SEQ ID NO:197，和SEQ ID NO:191和 SEQ ID NO:197。
117.根據(jù)權(quán)利要求36的結(jié)合蛋白，其中所述兩個可變結(jié)構(gòu)域具有SEQID ΝΟ:181和SEQ ID NO: 185的氨基酸序列。
全文摘要
本發(fā)明描述了DLL4結(jié)合蛋白，包括抗體、CDR嫁接的抗體、人源化抗體及其DLL4結(jié)合片段、以高親和力結(jié)合人DLL4的蛋白質(zhì)、和中和DLL4和/或VEGF活性的DLL4結(jié)合蛋白。DLL4結(jié)合蛋白用于治療或預(yù)防癌癥和腫瘤且尤其用于治療或預(yù)防腫瘤血管生成。
文檔編號C07K16/18GK102906113SQ201180021478
公開日2013年1月30日 申請日期2011年2月28日 優(yōu)先權(quán)日2010年3月2日
發(fā)明者Y.李, J.J.顧, S.摩根-拉普, M.陳, C-M.謝 申請人:Abbvie公司