專(zhuān)利名稱(chēng)：旋毛蟲(chóng)與宮頸癌相關(guān)抗原抗體制備方法及醫(yī)用用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明提供了旋毛蟲(chóng)與宮頸癌細(xì)胞相關(guān)抗原抗體的制備方法，還提供了其抗體的醫(yī)用用途，屬生物制藥領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
旋毛蟲(chóng)是一種寄生于人和多種動(dòng)物體內(nèi)的線蟲(chóng)，近年來(lái)研究發(fā)現(xiàn)其具有較強(qiáng)的抗腫瘤活性，但對(duì)其抗腫瘤活性成分尚不清楚。特別是旋毛蟲(chóng)與宮頸癌相關(guān)抗原抗體未見(jiàn)文獻(xiàn)報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明提供了旋毛蟲(chóng)與宮頸癌細(xì)胞相關(guān)抗原抗體的制備方法，適用于工業(yè)化生產(chǎn)。本發(fā)明公開(kāi)了旋毛蟲(chóng)與宮頸癌細(xì)胞相關(guān)抗原抗體的醫(yī)用用途，用于制備治療宮頸癌的藥物制劑。本發(fā)明旋毛蟲(chóng)與宮頸癌相關(guān)抗原抗體，其特征在于
抗毛蟲(chóng)與宮頸癌相關(guān)抗原抗體的抗原分子量是40Kd和55 Kd0本發(fā)明公開(kāi)的旋毛蟲(chóng)與宮頸癌細(xì)胞相關(guān)抗原抗體的制備方法如下
旋毛蟲(chóng)與宮頸癌相關(guān)抗原加等量的完全福氏佐劑乳化后，皮下免疫BalB/C小鼠。IOd 后在用旋毛蟲(chóng)與宮頸癌相關(guān)抗原與等量的不完全弗氏佐劑乳化后，同樣進(jìn)行第二次免疫， 一周后在進(jìn)行第三次免疫。第二次和第三次免疫后都要對(duì)小鼠尾靜脈采血用ELISA測(cè)量效價(jià)值。當(dāng)效價(jià)達(dá)到標(biāo)準(zhǔn)后，靜脈采血制備血清。下述藥理實(shí)驗(yàn)證實(shí)了本發(fā)明抗旋毛蟲(chóng)與宮頸癌Hela細(xì)胞相關(guān)抗原抗體具有顯著的抑制腫瘤生長(zhǎng)的作用，可以作為制備抗腫瘤制劑被應(yīng)用。一、抗旋毛蟲(chóng)與宮頸癌(Hela)細(xì)胞相關(guān)抗原抗體抗腫瘤效果
將21只雌性裸鼠隨機(jī)分為旋毛蟲(chóng)可溶性抗原抗體3個(gè)不同劑量組、旋毛蟲(chóng)與宮頸癌 Hela細(xì)胞相關(guān)抗原抗體3個(gè)不同劑量組和對(duì)照組，每組3只。分別給每只裸鼠的右后肢皮下注射接種IOOPLHela細(xì)胞細(xì)胞懸液(即4X IO6個(gè)細(xì)胞/只)。荷瘤20d后，分別按每只 0. 2mL (分別含抗體25 μ g、35 μ g、45 μ g三個(gè)不同劑量)腹腔注射旋毛蟲(chóng)不同抗原的抗體， 對(duì)照組腹腔注射PBS。每隔2d注射一次，共注射5次，治療4周后斷頸處死裸鼠，剝離腫塊， 測(cè)量稱(chēng)量腫瘤重量和體積。所得結(jié)果數(shù)據(jù)利用SPSS 14.0 for Windows軟件進(jìn)行分析，并計(jì)算抑瘤率(抑瘤率=(1-T/C) XlOO %)。二、不同抗體對(duì)裸鼠體內(nèi)腫瘤的體積和重量影響情況
由表1可知對(duì)注射不同抗體各組腫瘤體積和重量進(jìn)行方差分析結(jié)果抗旋毛蟲(chóng)可溶性粗抗原抗體組和抗旋毛蟲(chóng)與宮頸癌Hela細(xì)胞相關(guān)抗原抗體組與對(duì)照組相比，裸鼠體內(nèi)的腫瘤的體積差異顯著(F=16. 694，P=O. 04);明顯低于對(duì)照組；腫瘤的重量差異顯著 (F=17. 921, P=O. 03)，明顯低于對(duì)照組?？剐x(chóng)可溶性粗抗原抗體組和抗旋毛蟲(chóng)與宮頸癌Hela細(xì)胞相關(guān)抗原抗體組腫瘤體積平均抑瘤率分別為50. 99和82.沈％，抗旋毛蟲(chóng)可溶性粗抗原抗體組和抗旋毛蟲(chóng)與宮頸癌Hela細(xì)胞相關(guān)抗原抗體組腫瘤重量平均抑瘤率分別為 64. 24 和 92. 82%。 表1 各組小鼠體內(nèi)腫瘤體積和重量
權(quán)利要求
1.一種旋毛蟲(chóng)與宮頸癌相關(guān)抗原抗體，其特征在于抗毛蟲(chóng)與宮頸癌相關(guān)抗原抗體的抗原分子量是40Kd和55 Kd0
2.權(quán)利要求1所述旋毛蟲(chóng)與宮頸癌相關(guān)抗原抗體的制備方法，包括以下步驟旋毛蟲(chóng)與宮頸癌相關(guān)抗原加等量的完全福氏佐劑乳化后，皮下免疫BalB/C小鼠；IOd 后在用旋毛蟲(chóng)與宮頸癌相關(guān)抗原與等量的不完全弗氏佐劑乳化后，同樣進(jìn)行第二次免疫， 一周后在進(jìn)行第三次免疫；第二次和第三次免疫后都要對(duì)小鼠尾靜脈采血用ELISA測(cè)量效價(jià)值；當(dāng)效價(jià)達(dá)到標(biāo)準(zhǔn)后，靜脈采血制備血清。
3.權(quán)利要求1所述的旋毛蟲(chóng)與宮頸癌相關(guān)抗原抗體在制備治療宮頸癌藥物中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明提供了旋毛蟲(chóng)與宮頸癌細(xì)胞相關(guān)抗原抗體的制備方法，還提供了其抗體的醫(yī)用用途，腫瘤細(xì)胞對(duì)異體鑒識(shí)物比較敏感，旋毛蟲(chóng)與宮頸癌細(xì)胞相關(guān)抗原能產(chǎn)生針對(duì)腫瘤強(qiáng)的特異性和非特異性免疫反應(yīng)，同時(shí)旋毛蟲(chóng)與腫瘤細(xì)胞相關(guān)抗原易于制備和工業(yè)化。
文檔編號(hào)C07K14/435GK102241758SQ20111011692
公開(kāi)日2011年11月16日 申請(qǐng)日期2011年5月7日 優(yōu)先權(quán)日2011年5月7日
發(fā)明者宮鵬濤, 張國(guó)才, 張楠, 張西臣, 李建華, 李淑紅, 李 赫, 楊舉, 王燕春 申請(qǐng)人:吉林大學(xué)