專利名稱：含有天冬酰胺糖鏈的糖肽制造方法以及該糖肽的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及到含有天冬酰胺糖鏈的糖肽制造方法以及利用該制造方法可獲得的糖肽。
背景技術(shù)：
近年來，作為繼核酸(DNA)、蛋白質(zhì)之后的第三個(gè)鏈狀生命分子，糖鏈分子引人注目。人體是由約60兆個(gè)細(xì)胞構(gòu)成的一大細(xì)胞社會(huì)，所有的細(xì)胞表面都被糖鏈分子覆蓋。例如，ABO式血型就是由細(xì)胞表面糖鏈的不同決定的。糖鏈具有參與細(xì)胞間識(shí)別和相互作用的功能，成為構(gòu)成細(xì)胞社會(huì)的要素。細(xì)胞社會(huì)的紊亂與癌、慢性疾病、感染病、老化等有關(guān)。例如，已知細(xì)胞如果癌化，就會(huì)引起糖鏈的結(jié)構(gòu)變化。另外也知道霍亂弧菌或流感病毒等通過識(shí)別、結(jié)合某一特定糖鏈，侵入、感染細(xì)胞。糖鏈功能的闡明，預(yù)期會(huì)帶動(dòng)依據(jù)新的原理的醫(yī)藥品和食品的開發(fā)等，對(duì)疾病的予防、治療有貢獻(xiàn)等廣泛的應(yīng)用。糖鏈由于單糖的序列、結(jié)合樣式以及部位、鏈長度以及分支樣式、整體的高級(jí)結(jié)構(gòu)等的多樣性，所以與核酸或蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)相比，是非常復(fù)雜的結(jié)構(gòu)。因此，來自其結(jié)構(gòu)的生物學(xué)信息與核酸和蛋白質(zhì)相比，多種多樣。現(xiàn)狀是雖然人們認(rèn)識(shí)到糖鏈研究的重要性，但由于其結(jié)構(gòu)復(fù)雜和多樣性，與核酸和蛋白質(zhì)相比，研究進(jìn)展緩慢。象上述那樣存在于細(xì)胞膜表面或血清等的很多蛋白質(zhì)都結(jié)合著糖鏈。糖鏈與蛋白質(zhì)共價(jià)結(jié)合的分子稱為糖蛋白質(zhì)，由于糖和蛋白質(zhì)的結(jié)合樣式不同，可以分為2類。一類是天冬酰胺(Asn)側(cè)鏈的氨基與糖鏈結(jié)合的天冬酰胺結(jié)合型糖鏈(N-糖苷鍵型)。另一類是在絲氨酸Ger)或蘇氨酸(Thr)的羥基處結(jié)合了糖鏈的粘蛋白結(jié)合型糖鏈(0-糖苷鍵型)。 所有的天冬酰胺結(jié)合型糖鏈帶有由5個(gè)糖殘基構(gòu)成的基本骨架，由于結(jié)合的糖鏈的非還原末端的糖殘基種類不同分為高甘露糖型、復(fù)合型、雜合型亞類。另外粘蛋白結(jié)合型糖鏈根據(jù)基本骨架(core)的不同又分為4類。作為肽合成法現(xiàn)在廣泛使用的方法是1963年由R. B. Merrifield開發(fā)的固相合成法。固相合成法是在稱為樹脂(resin)的固相上連接氨基酸，使肽鏈延伸下去。肽鏈延伸一結(jié)束，就將肽鏈從固相上切下，得到目的物。作為應(yīng)用，在肽鏈延伸時(shí)通過攙入結(jié)合了糖鏈的氨基酸，可以進(jìn)行糖肽鏈的合成。其中，在肽合成中應(yīng)用在Asn或kr (Thr)處結(jié)合了糖鏈的帶糖鏈氨基酸，就可以不斷地進(jìn)行糖肽鏈的合成。然而，盡管化學(xué)合成技術(shù)進(jìn)步，但化學(xué)合成帶有大的糖鏈的肽鏈的例子還很少。
其中的一個(gè)問題就是與天冬酰胺殘基結(jié)合的糖鏈的絕對(duì)量不足。作為獲得糖鏈的手段，有只將糖鏈從存在于生物體內(nèi)的糖蛋白質(zhì)分離的方法。然而將糖鏈從糖蛋白質(zhì)切出時(shí)使用的胼危險(xiǎn)，要大量合成糖鏈有困難。另外生物體內(nèi)存在很多結(jié)構(gòu)酷似的糖鏈，要只獲得單一糖鏈很難。另外由于通過胼分解使糖鏈與天冬酰胺殘基解離，游離的糖鏈一定要與天冬酰胺殘基再結(jié)合，結(jié)果分離步驟數(shù)增加。而通過化學(xué)合成合成糖鏈時(shí)，雖然有合成連接了 10個(gè)左右糖殘基的糖鏈的例子， 但其中很多例子是，花費(fèi)1年時(shí)間只能合成目的物糖鏈數(shù)毫克左右。因此通過化學(xué)合成獲得糖鏈很困難。第二個(gè)問題是用于在肽固相合成后將肽鏈從固相切下的TFA (三氟乙酸)處理。例如，由于糖鏈非還原末端存在的唾液酸在酸性條件下容易水解，所以通過TFA處理，唾液酸有可能從合成的糖肽被切下。由于這個(gè)原因，在固相合成中使用含有唾液酸的糖鏈的例子幾乎沒有。作為該問題的解決方法，在肽合成后通過唾液酸轉(zhuǎn)移酶將唾液酸轉(zhuǎn)移到糖鏈的方法已有報(bào)道。然而，該方法作為導(dǎo)入唾液酸的方法雖然有用，但由于糖轉(zhuǎn)移酶價(jià)格高，仍然存在著糖肽大量合成困難的問題。然而，象如下所述那樣，在本發(fā)明由于可通過人工方式容易、大量地合成糖肽，上述利用唾液酸轉(zhuǎn)移酶導(dǎo)入唾液酸或其衍生物也可以應(yīng)用于工業(yè)上。另外雖然天然存在著結(jié)合著唾液酸的糖鏈，但天然中不存在結(jié)合著唾液酸衍生物的糖鏈，為了將唾液酸衍生物導(dǎo)入糖鏈，不管怎樣只有使用唾液酸轉(zhuǎn)移酶的方法。本發(fā)明的課題在于提供通過人工方式容易地、大量地合成在肽鏈的任意位置至少含有1個(gè)以上天冬酰胺糖鏈或粘蛋白結(jié)合型糖鏈的糖肽制造方法。本發(fā)明課題還提供容易地獲得唾液酸糖肽的方法，其中即使是含有唾液酸的天冬酰胺糖鏈，經(jīng)酸處理，唾液酸也不會(huì)從糖肽被切下。另外，本發(fā)明課題還提供糖肽制造方法，其中，通過人工方式可以容易地、大量地合成在肽鏈的任意位置至少含有1個(gè)以上的任意除去糖殘基的各種新的天冬酰胺糖鏈。另外本發(fā)明的課題提供導(dǎo)入了唾液酸或其衍生物的糖肽制造方法，通過使用唾液酸轉(zhuǎn)移酶將唾液酸或其衍生物導(dǎo)入糖肽。本發(fā)明的課題提供通過上述各種糖肽制造方法獲得的糖肽。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明涉及到在肽鏈的任意位置至少含有1個(gè)以上天冬酰胺糖鏈的糖肽制造方法，其特征是(1)使帶有羥基的樹脂(resin)的羥基與氨基氮被脂溶性保護(hù)基保護(hù)了的氨基酸的羧基進(jìn)行酯化反應(yīng)，(2)脫去上述脂溶性保護(hù)基，形成游離氨基，(3)使該游離氨基與氨基氮被脂溶性保護(hù)基保護(hù)的氨基酸的羧基進(jìn)行酰胺化反應(yīng)，(4)脫去上述脂溶性保護(hù)基，形成游離氨基，(5)將上述(3)和(4)步驟重復(fù)1次以上，(6)與氨基氮被脂溶性保護(hù)基保護(hù)的天冬酰胺糖鏈的天冬酰胺部分的羧基進(jìn)行酰胺化反應(yīng)，(7)脫去上述脂溶性保護(hù)基，形成游離氨基，(8)使該游離氨基與氨基氮被脂溶性保護(hù)基保護(hù)的氨基酸的羧基進(jìn)行酰胺化反應(yīng)，(9)將上述(7)和⑶步驟重復(fù)1次以上，(10)脫去上述脂溶性保護(hù)基，形成游離氨基，(11)用酸將樹脂(resin)切去。本發(fā)明涉及到適當(dāng)追加(6)與氨基氮被脂溶性保護(hù)基保護(hù)的天冬酰胺糖鏈的天冬酰胺部分的羧基進(jìn)行酰胺化反應(yīng)，(7)脫去上述脂溶性保護(hù)基，形成游離氨基步驟的在肽鏈任意位置至少含有2個(gè)以上天冬酰胺糖鏈的糖肽制造方法。本發(fā)明涉及到在最后步驟進(jìn)行(6)與氨基氮被脂溶性保護(hù)基保護(hù)的天冬酰胺糖鏈的天冬酰胺部分的羧基進(jìn)行酰胺化反應(yīng)，(7)脫去上述脂溶性保護(hù)基，形成游離氨基步驟的在肽鏈上至少含有1個(gè)以上天冬酰胺糖鏈的糖肽制造方法。本發(fā)明涉及到取代(6)的步驟或除了(6)的步驟之外，再使(1)帶有羥基的樹脂 (resin)的羥基與氨基氮被脂溶性保護(hù)基保護(hù)的天冬酰胺糖鏈的天冬酰胺部分的羧基進(jìn)行酯化反應(yīng)的糖肽制造方法。本發(fā)明涉及到(6)的天冬酰胺糖鏈含有6個(gè)以上糖殘基的糖肽制造方法。本發(fā)明涉及到(6)的天冬酰胺糖鏈含有9-11個(gè)糖殘基的糖肽制造方法。本發(fā)明涉及到(6)的天冬酰胺糖鏈含有6個(gè)以上糖殘基，并且結(jié)合2分叉糖鏈的糖肽制造方法。本發(fā)明涉及到(6)的天冬酰胺糖鏈?zhǔn)翘於０范僖核崽擎溁蛱於０穯瓮僖核崽擎湥撏僖核岬聂然槐Ｗo(hù)基保護(hù)的糖肽制造方法。本發(fā)明涉及到(6)的天冬酰胺糖鏈?zhǔn)翘於０访撏僖核崽擎湹奶请闹圃旆椒?。本發(fā)明涉及用粘蛋白結(jié)合型糖鏈取代天冬酰胺糖鏈的一部或全部的糖肽制造方法。本發(fā)明涉及到一種在肽鏈的任意位置至少含有1個(gè)以上通過上述制造方法可獲得的天冬酰胺糖鏈或粘蛋白結(jié)合型糖鏈的糖肽。本發(fā)明涉及到天冬酰胺糖鏈或粘蛋白結(jié)合型糖鏈含有6個(gè)以上糖殘基，并且結(jié)合 2分叉糖鏈的糖肽。本發(fā)明涉及到是結(jié)合了從天冬酰胺二唾液酸糖鏈和天冬酰胺單唾液酸糖鏈選擇的至少1種以上糖鏈作為天冬酰胺糖鏈的糖肽。本發(fā)明涉及到一種在肽鏈任意位置至少含有1個(gè)以上天冬酰胺糖鏈，而且在末端帶有唾液酸或其衍生物殘基的糖肽制造方法，其特征是(1)使帶有羥基的樹脂(resin)的羥基與氨基氮被脂溶性保護(hù)基保護(hù)的氨基酸的羧基進(jìn)行酯化反應(yīng)，(2)脫去上述脂溶性保護(hù)基，形成游離氨基，(3)使該游離氨基與氨基氮被脂溶性保護(hù)基保護(hù)的氨基酸的羧基進(jìn)行酰胺化反應(yīng)，(4)脫去上述脂溶性保護(hù)基，形成游離氨基，
(5)將上述(3)和(4)步驟重復(fù)1次以上，(6)與氨基氮被脂溶性保護(hù)基保護(hù)的天冬酰胺糖鏈的天冬酰胺部分的羧基進(jìn)行酰胺化反應(yīng)，(7)脫去上述脂溶性保護(hù)基，形成游離氨基，(8)使該游離氨基與氨基氮被脂溶性保護(hù)基保護(hù)的氨基酸的羧基進(jìn)行酰胺化反應(yīng)，(9)將上述(7)和⑶步驟重復(fù)1次以上，(10)脫去上述脂溶性保護(hù)基，形成游離氨基，(11)用酸將樹脂(resin)切去，(12)利用唾液酸轉(zhuǎn)移酶使唾液酸或其衍生物轉(zhuǎn)移到得到的糖肽上。本發(fā)明涉及到在上述步驟(11)的用酸切去樹脂(resin)前，使標(biāo)記試劑反應(yīng)的糖肽制造方法。本發(fā)明涉及到標(biāo)記試劑是丹酰鹵化物的糖肽制造方法。本發(fā)明涉及到一種5-乙酰胺-3，5，7-三脫氧-7-氟-D-甘油基-β -D-乳糖_2_吡喃壬酮糖酸(nonulopyranosidonic acid)的制造方法，其特征是使N-乙?；?4-脫氧-4-氟-D-甘露糖胺、丙酮酸鈉、牛血清白蛋白、唾液酸醛縮酶進(jìn)行反應(yīng)。本發(fā)明涉及到一種5-乙酰胺-3，5，7_三脫氧-7-氟-D-甘油基-β-D-乳糖-2-吡喃壬酮糖酸的制造方法，其特征是在乙酸酐存在下，對(duì)芐基2-疊氮-2，4-雙脫氧-4-氟-β -D-甘露吡喃糖苷加氫，得到N-乙?；?4-脫氧-4-氟-D-甘露糖胺，然后使其與丙酮酸鈉、牛血清白蛋白、唾液酸醛縮酶進(jìn)行反應(yīng)。本發(fā)明人在先前申請(qǐng)的專利2001-185685號(hào)(以下、稱為先前申請(qǐng)專利)中開發(fā)了與以往相比可以非常容易而且大量地獲得各種分離的天冬酰胺糖鏈衍生物的天冬酰胺糖鏈衍生物、天冬酰胺糖鏈、糖鏈的制造方法，以及結(jié)合了任意缺失糖殘基的糖鏈的新的天冬酰胺糖鏈衍生物、天冬酰胺糖鏈、糖鏈。該先前申請(qǐng)的方法，例如包括(1)包括以下工序的來自天冬酰胺糖鏈的天冬酰胺糖鏈衍生物的制造方法(a) 將脂溶性保護(hù)基導(dǎo)入到在含有1種或2種以上天冬酰胺糖鏈的混合物中所含有的該天冬酰胺糖鏈中，獲得天冬酰胺糖鏈衍生物混合物的工序，以及(b)將該天冬酰胺糖鏈衍生物混合物或該天冬酰胺糖鏈衍生物混合物含有的天冬酰胺糖鏈衍生物水解后得到的混合物進(jìn)行層析，對(duì)各天冬酰胺糖鏈衍生物進(jìn)行分離的工序。(2)上述(1)所述的天冬酰胺糖鏈衍生物制造方法，其中還包括(b’)用糖水解酶對(duì)工序(b)中分離的天冬酰胺糖鏈衍生物進(jìn)行水解的工序。(3)上述(1)或( 所述天冬酰胺糖鏈衍生物制造方法，其中含有1種或2種以上天冬酰胺糖鏈的混合物是含有下述式(A)化合物和/或在該化合物中缺失1個(gè)以上糖殘基的化合物的混合物。(4)上述(1)-03)任一項(xiàng)所述天冬酰胺糖鏈衍生物制造方法，其中脂溶性保護(hù)基是芴甲氧羰基(Fmoc)基。
(5)上述(1)-03)任一項(xiàng)所述天冬酰胺糖鏈衍生物制造方法，其中工序(a)是向含有在非還原末端帶有唾液酸殘基的1種或2種以上天冬酰胺糖鏈的混合物中所含的該天冬酰胺糖鏈導(dǎo)入Fmoc基，而且向唾液酸殘基導(dǎo)入芐基后得到天冬酰胺糖鏈衍生物混合物的工序。(6)包括以下工序的天冬酰胺糖鏈制造方法(a)將脂溶性保護(hù)基導(dǎo)入到在含有1種或2種以上的天冬酰胺糖鏈的混合物所含的該天冬酰胺糖鏈中，獲得天冬酰胺糖鏈衍生物混合物的工序，以及(b)將該天冬酰胺糖鏈衍生物混合物或該天冬酰胺糖鏈衍生物混合物含有的天冬酰胺糖鏈衍生物水解后得到的混合物進(jìn)行層析，對(duì)各天冬酰胺糖鏈衍生物進(jìn)行分離的工序，以及(c)除去工序(b)中分離的天冬酰胺糖鏈衍生物的保護(hù)基后，得到天冬酰胺糖鏈的工序。(7)上述(6)所述天冬酰胺糖鏈制造方法，還包括(b’ )用糖水解酶對(duì)在工序(b)中分離的天冬酰胺糖鏈衍生物進(jìn)行水解的工序和 /或(c’ )用糖水解酶對(duì)在工序(C)中得到的天冬酰胺糖鏈進(jìn)行水解的工序。(8)上述(6)或(7)所述天冬酰胺糖鏈制造方法，其中含有1種或2種以上天冬酰胺糖鏈的混合物是含有下述式(A)化合物和/或在該化合物中缺失1個(gè)以上糖殘基的化合物的混合物。(9)上述(6)-(8)任一項(xiàng)所述天冬酰胺糖鏈制造方法，其中脂溶性保護(hù)基是Fmoc基。(10)上述(6)-(8)任一項(xiàng)所述天冬酰胺糖鏈制造方法，其中工序(a)是向在含有在非還原末端帶有唾液酸殘基的1種或2種以上天冬酰胺糖鏈的混合物中所含該天冬酰胺糖鏈中導(dǎo)入Fmoc基，而且向唾液酸殘基導(dǎo)入芐基后，得到天冬酰胺糖鏈衍生物混合物的工序。
權(quán)利要求
1.一種在肽鏈的任意位置至少含有1個(gè)以上天冬酰胺糖鏈的糖肽的制造方法，其特征是(1)使帶有羥基的樹脂(resin)的羥基與氨基氮被脂溶性保護(hù)基保護(hù)的氨基酸的羧基進(jìn)行酯化反應(yīng)，(2)脫去上述脂溶性保護(hù)基，形成游離氨基，(3)使該游離氨基與氨基氮被脂溶性保護(hù)基保護(hù)的氨基酸的羧基進(jìn)行酰胺化反應(yīng)，(4)脫去上述脂溶性保護(hù)基，形成游離氨基，(5)將上述(3)和⑷工序重復(fù)1次以上，(6)使該游離氨基與氨基氮被脂溶性保護(hù)基保護(hù)、但全部的羥基沒有保護(hù)的天冬酰胺糖鏈的天冬酰胺部分的羧基進(jìn)行酰胺化反應(yīng)，(7)脫去上述脂溶性保護(hù)基，形成游離氨基，(8)使該游離氨基與氨基氮被脂溶性保護(hù)基保護(hù)的氨基酸的羧基進(jìn)行酰胺化反應(yīng)，(9)將上述(7)和⑶工序重復(fù)1次以上，(10)脫去上述脂溶性保護(hù)基，形成游離氨基，(11)用酸將樹脂(resin)切去。
2.在肽鏈的任意位置至少含有2個(gè)以上天冬酰胺糖鏈的糖肽的制造方法，該方法包括權(quán)利要求1所述的方法，其中，適當(dāng)追加(6)的使該游離氨基與氨基氮被脂溶性保護(hù)基保護(hù)、但全部的羥基沒有保護(hù)的天冬酰胺糖鏈的天冬酰胺部分的羧基進(jìn)行酰胺化反應(yīng)，及(7) 的脫去上述脂溶性保護(hù)基，形成游離氨基的工序。
3.權(quán)利要求1所述的在肽鏈上至少含有1個(gè)以上天冬酰胺糖鏈的糖肽的制造方法，其中，在最后工序進(jìn)行(6)的使該游離氨基與氨基氮被脂溶性保護(hù)基保護(hù)、但全部的羥基沒有保護(hù)的天冬酰胺糖鏈的天冬酰胺部分的羧基進(jìn)行酰胺化反應(yīng)，及(7)的脫去上述脂溶性保護(hù)基，形成游離氨基的工序。
4.權(quán)利要求1所述的糖肽制造方法，其中，取代(6)的工序或除了(6)的工序之外，進(jìn)行(1)的工序，使帶有羥基的樹脂(resin)的羥基與氨基氮被脂溶性保護(hù)基保護(hù)、但全部的羥基沒有保護(hù)的天冬酰胺糖鏈的天冬酰胺部分的羧基進(jìn)行酯化反應(yīng)。
5.權(quán)利要求1所述的糖肽制造方法，其中，權(quán)利要求1(6)的天冬酰胺糖鏈至少含有6 個(gè)以上糖殘基。
6.權(quán)利要求1所述的糖肽制造方法，其中，權(quán)利要求1(6)的天冬酰胺糖鏈含有9-11個(gè)糖殘基。
7.權(quán)利要求1所述的糖肽制造方法，其中，權(quán)利要求1(6)的天冬酰胺糖鏈至少含有6 個(gè)糖殘基，并且結(jié)合2分叉型糖鏈。
8.權(quán)利要求1所述的糖肽制造方法，其中，權(quán)利要求1(6)的天冬酰胺糖鏈?zhǔn)翘於０范僖核崽擎溁蛱於０穯瓮僖核崽擎?，該唾液酸的羧基被保護(hù)基保護(hù)。
9.權(quán)利要求1所述的糖肽制造方法，其中，權(quán)利要求1(6)的天冬酰胺糖鏈?zhǔn)翘於０愤B脫唾液酸糖鏈。
10.權(quán)利要求8所述的糖肽制造方法，其中，該唾液酸的羧基的保護(hù)基是芐基。
11.權(quán)利要求1所述的糖肽制造方法，其中，該脂溶性保護(hù)基是9-芴甲氧羰基(Fmoc)
12.權(quán)利要求1所述的糖肽制造方法，其中，用粘蛋白結(jié)合型糖鏈代替天冬酰胺糖鏈的一部分或全部。
13.—種可通過權(quán)利要求1所述的方法獲得的、在肽鏈的任意位置至少含有1個(gè)以上的天冬酰胺糖鏈或粘蛋白結(jié)合型糖鏈的糖肽，該天冬酰胺糖鏈?zhǔn)菑奶於０范僖核崽擎満吞於０穯瓮僖核崽擎溨羞x擇的至少1種以上，該唾液酸的羧基被保護(hù)基保護(hù)。
14.一種在肽鏈的任意位置至少含有1個(gè)以上天冬酰胺糖鏈，而且在末端帶有唾液酸或其衍生物殘基的糖肽的制造方法，所述方法包括(1)使帶有羥基的樹脂的羥基與氨基氮被脂溶性保護(hù)基保護(hù)的氨基酸的羧基進(jìn)行酯化反應(yīng)，(2)脫去上述脂溶性保護(hù)基，形成游離氨基，(3)使該游離氨基與氨基氮被脂溶性保護(hù)基保護(hù)的氨基酸的羧基進(jìn)行酰胺化反應(yīng)，(4)脫去上述脂溶性保護(hù)基，形成游離氨基，(5)將上述(3)和⑷工序重復(fù)1次以上，(6)使該游離氨基與氨基氮被脂溶性保護(hù)基保護(hù)、但全部的羥基沒有保護(hù)的天冬酰胺糖鏈的天冬酰胺部分的羧基進(jìn)行酰胺化反應(yīng)，(7)脫去上述脂溶性保護(hù)基，形成游離氨基，(8)使該游離氨基與氨基氮被脂溶性保護(hù)基保護(hù)的氨基酸的羧基進(jìn)行酰胺化反應(yīng)，(9)將上述(7)和⑶工序重復(fù)1次以上，(10)脫去上述脂溶性保護(hù)基，形成游離氨基，(11)用酸將樹脂切去，及(12)利用唾液酸轉(zhuǎn)移酶使唾液酸或其衍生物轉(zhuǎn)移到得到的糖肽上。
15.權(quán)利要求14所述的糖肽制造方法，其中，在上述工序(11)的用酸切去樹脂之前使標(biāo)記試劑與樹脂反應(yīng)。
16.權(quán)利要求15所述的糖肽制造方法，其中，標(biāo)記試劑是丹酰鹵化物。
17.—種5-乙酰胺-3,5,7-三脫氧-7-氟-D-甘油基-β -D-半乳糖-2-吡喃壬酮糖酸的制造方法，其特征是，使N-乙?；?4-脫氧-4-氟-D-甘露糖胺、丙酮酸鈉、牛血清白蛋白和唾液酸醛縮酶反應(yīng)。
18.—種5-乙酰胺-3,5,7-三脫氧-7-氟-D-甘油基-β -D-半乳糖-2-吡喃壬酮糖酸的制造方法，其特征是，在乙酸酐存在下，對(duì)芐基2-疊氮-2，4- 二脫氧-4-氟-β -D-吡喃甘露糖苷加氫，得到N-乙?；?4-脫氧-4-氟-D-甘露糖胺，然后使其與丙酮酸鈉、牛血清白蛋白和唾液酸醛縮酶反應(yīng)。
全文摘要
至少含有1個(gè)以上天冬酰胺糖鏈的糖肽、其制造方法以及用上述方法可以得到的糖肽，其特征在于，(1)使帶有羥基的樹脂(resin)的羥基與氨基氮被脂溶性保護(hù)基保護(hù)的氨基酸的羧基進(jìn)行酯化反應(yīng)，(2)脫去上述脂溶性保護(hù)基，形成游離氨基，(3)使該游離氨基與氨基氮被脂溶性保護(hù)基保護(hù)的氨基酸或天冬酰胺糖鏈的天冬酰胺部分的羧基進(jìn)行酰胺化反應(yīng)，(4)脫去上述脂溶性保護(hù)基，形成游離氨基，(5)將上述(3)和(4)工序重復(fù)1次以上，(6)用酸將樹脂(resin)切去。
文檔編號(hào)C07K5/103GK102241743SQ20111011531
公開日2011年11月16日 申請(qǐng)日期2003年7月4日 優(yōu)先權(quán)日2002年7月5日
發(fā)明者梶原康宏 申請(qǐng)人:大塚化學(xué)株式會(huì)社, 梶原康宏