附加糖鏈的多肽和含有該多肽的醫(yī)藥組合物的制作方法
【專利摘要】為了提供對生長抑素受體具有親和性、且與生長抑素相比血中穩(wěn)定性提高的附加糖鏈的多肽。所述附加糖鏈的多肽的特征在于：其是生長抑素或其類似物中至少1個(gè)氨基酸被附加糖鏈的氨基酸置換的附加糖鏈的多肽。
【專利說明】附加糖鏈的多肽和含有該多肽的醫(yī)藥組合物
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及附加糖鏈的多肽、和含有該多肽的醫(yī)藥組合物。
【背景技術(shù)】
[0002]生長抑素是存在于中樞神經(jīng)系統(tǒng)及周邊組織兩者中的環(huán)肽。生長抑素最初分離自哺乳類的下丘腦，被鑒定為來自腦下垂體前葉的生長激素分泌物的重要抑制劑。該肽廣泛地分布于例如下丘腦、胰腺、消化道等中，經(jīng)由與生長抑素受體的結(jié)合而發(fā)揮作用。此外，生長抑素因抑制腦下垂體中的生長激素(GH)的分泌、抑制促甲狀腺激素(TSH)分泌，以及抑制消化道中的胃泌素、選擇素、膽囊收縮素(CCK)、VIP(Vasoactive IntestinalPolyp印tide，血管活性腸肽)、胰腺中的胰高血糖素、胰島素等各種激素的分泌而為人知曉。另外，還已知生長抑素具有抑制消化道蠕動(dòng)的作用。
[0003]具有結(jié)構(gòu)式:Ala-Gly-Cys-Lys-Asn-Phe-Phe-Trp-Lys-Thr-Phe-Thr-Se;r-Cys(序列編號I)的天然的生長抑素(也作為生長激素釋放抑制因子(SRIF)而為人知曉)最初是由Guillemin及合作研究者分離。該生長抑素通過與受體家族相互作用而發(fā)揮其效果。已知生長抑素受體(SSTR)存在I至5的亞型(SSTR1~SSTR5)，其中SSTR2分布于GH分泌性人腦下垂體腺瘤、中樞神經(jīng)系統(tǒng)、腦下垂體前葉、視網(wǎng)膜、腎上腺髓質(zhì)、胃、十二指腸黏膜、小腸、結(jié)腸的各組織、以及胰腺蘭氏小島的胰高血糖素分泌性A細(xì)胞中。此外，已知每個(gè)這些受體也在各種腫瘤中進(jìn)行表達(dá)，例如據(jù)報(bào)道:在功能性腦下垂體腺瘤中，SSTRl與SSTR5進(jìn)行表達(dá)；在胃腸道腫瘤中，除了 SSTR2以外，SSTRU SSTR3也進(jìn)行表達(dá)；在嗜鉻細(xì)胞瘤中，SSTR3進(jìn)行表達(dá)；在前列腺癌中， SSTRl和SSTR5進(jìn)行表達(dá)；在結(jié)腸直腸癌中，SSTR5進(jìn)行表達(dá)(非專利文獻(xiàn)I)。此外，SSTR4據(jù)報(bào)道可作為具有拮抗性調(diào)節(jié)作用的受體而發(fā)揮功能、以及有可能在青光眼相關(guān)的疾病的治療中較為重要(非專利文獻(xiàn)2)。正因?yàn)槿绱?，生長抑素及其類似物對于生長抑素相關(guān)疾病或各種腫瘤是潛在地有用的治療藥。
[0004]另一方面，天然存在的生長抑素由于血中半衰期為較短的2~3分鐘，所以表現(xiàn)出生物利用度較小和作用的持續(xù)時(shí)間較短這兩個(gè)不理想的性質(zhì)，因此使作為治療劑的使用或應(yīng)用受限?；谠摾碛?，為找出在效力、活體穩(wěn)定性、作用的持續(xù)時(shí)間、或考慮生長激素、胰島素或胰高血糖素的釋放抑制的選擇性中任一方面均優(yōu)異的生長抑素類似物，業(yè)界不斷開發(fā)出各種生長抑素類似物。
[0005]作為可在臨床上利用的最先得到承認(rèn)的生長抑素類似物，報(bào)道有奧曲肽(Octreotide)(專利文獻(xiàn)I和專利文獻(xiàn)2)，已知該奧曲肽對生長抑素受體SSTR2、SSTR3、和SSTR5具有親和性。
[0006]奧曲肽是開發(fā)為由8個(gè)氨基酸構(gòu)成的環(huán)狀肽，該奧曲肽具有作為顯示生長抑素的生物活性的重要部分的4個(gè)氨基酸(Phe-Trp-Lys-Thr)的序列，在該序列的兩末端具有形成雙硫(S-S)鍵的Cys，和進(jìn)一步在其兩末端的Cys的外側(cè)具有D-Phe與Thr (ol)。該奧曲肽可通過利用其氨基酸序列使血中半衰期提高，而獲得作用的持續(xù)性，此外，與生長抑素相t匕，對生長激素(GH)的選擇性較高，這使得其具有強(qiáng)效的作用。[0007]包括這種奧曲肽在內(nèi)的生長抑素類似物可用于患有激素分泌性及激素依賴性腫瘤的患者的治療。目前已利用奧曲肽治療與作為神經(jīng)內(nèi)分泌系統(tǒng)腫瘤的轉(zhuǎn)移性類癌腫瘤相關(guān)的癥狀(潮紅、腹瀉、心臟瓣膜疾病和腹痛)和與血管活性腸肽(VIP)分泌腺瘤相關(guān)的癥狀(水性腹瀉)。
[0008]例如，在類癌和VIP產(chǎn)生性腫瘤中，奧曲肽抑制其活性因子的分泌和作用。因此，在以大量分泌性腹瀉為特征的VIP產(chǎn)生性腫瘤中，生長抑素類似物可以通過抑制VIP分泌，以及通過直接影響腸道分泌，而使其腹瀉減輕。
[0009]然而，另一方面，有報(bào)道指出許多神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤對諸如奧曲肽等生長抑素類似物具有耐性(非專利文獻(xiàn)3)。此外，還有報(bào)告指出將奧曲肽用于肢端肥大癥的治療，但對于約三分之一的肢端肥大癥患者并無效果。進(jìn)一步，有報(bào)告指出對于大半的類癌腫瘤患者，奧曲肽僅在施用初期發(fā)揮效果，若時(shí)間延長，貝1J會(huì)引起急速減敏(tachyphylaxis)(速增耐性、急速免疫)。進(jìn)一步，有報(bào)道指出對于抑制初期的庫欣氏病(Cushing’s disease)患者產(chǎn)生促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)，奧曲肽并未顯示出任何效果。
[0010]由于如上所述的問題，對于表達(dá)多種生長抑素受體的腫瘤，期望開發(fā)出可以如天然的生長抑素那樣以較高的親和性與多種受體亞型結(jié)合的生長抑素類似物，且有提示指出這種對生長抑素受體具有親和性的生長抑素類似物有可能對用之前的生長抑素類似物無治療效果的患者或具有耐性的患者也具有效果(非專利文獻(xiàn)4)。
[0011]因此，期望開發(fā)出具有與天然存在的生長抑素類似的結(jié)構(gòu)、同樣地對生長抑素受體具有親和性、且與生長抑素相比具有延長的血中半衰期的生長抑素類似物。
[0012]另一方面，已明確糖鏈在活體內(nèi)擔(dān)負(fù)的各種作用，為使血中的半衰期延長，還提出有對奧曲肽附加糖鏈的方法(例如，專利文獻(xiàn)3)。
[0013]然而，由于其結(jié)構(gòu)的復(fù)雜性和多樣性使得研究進(jìn)展緩慢，糖鏈的種類或附加糖鏈的位置不能說已達(dá)到最適合。尚未報(bào)道有克服了之前的生長抑素類似物的問題的附加糖鏈的多肽。
[0014][現(xiàn)有技術(shù)文獻(xiàn)]
[0015][專利文獻(xiàn)]
[0016][專利文獻(xiàn)I]美國專利第4，310,518號
[0017][專利文獻(xiàn)2]美國專利第4，235，886號
[0018][專利文獻(xiàn)3]日本專利特開平03-014599號
[0019][非專利文獻(xiàn)]
[0020][非專利文獻(xiàn) I] Currrent Opinion in Pharmacology, 2004, Vol.4, pp.608-613[0021 ] [非專利文獻(xiàn) 2] J.Med.Chem.2003，Vol.46，pp.5587-5596
[0022][非專利文獻(xiàn) 3]Mol Endocrinol, 2010，Vol.24(1)，pp.240-249
[0023][非專利文獻(xiàn)4]Molecular and Cellular Endocrinology, Vol.286, 2008, pp.69-74

【發(fā)明內(nèi)容】

[0024][發(fā)明所要解決的問題]
[0025]本發(fā)明的目的在于提供一種附加糖鏈的多肽，所述附加糖鏈的多肽對生長抑素受體具有親和性，且與生長抑素相比血中穩(wěn)定性提高。
[0026][解決問題的技術(shù)手段]
[0027]本發(fā)明的發(fā)明人等為解決上述問題而反復(fù)進(jìn)行研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)了可以維持對生長抑素受體的親和性，且血中穩(wěn)定性提高的附加糖鏈的多肽。
[0028]即，本發(fā)明涉及附加糖鏈的多肽，其特征在于，其是在選自由以下的㈧~(F)所組成的組中多肽中，至少I個(gè)氨基酸經(jīng)附加糖鏈的氨基酸置換的附加糖鏈的多肽:(A)由以序列編號I表示的氨基酸序列構(gòu)成的SRIF14 ； (B)在由以序列編號I表示的氨基酸序列的構(gòu)成的SRIF14中，I個(gè)或多個(gè)氨基酸缺失、經(jīng)置換或附加的多肽；(C)SRIFH的類似物；(D)相對于包含以序列編號I表不的氨基酸序列的SRIF14,具有80%以上的同源性的多肽；(E)在(A)~⑶中，在N末端側(cè)進(jìn)一步含有N個(gè)(其中，N為I以上20以下的整數(shù))氨基酸的多肽；和(F)在㈧~⑶中，在C末端側(cè)進(jìn)一步含有M個(gè)(其中，M為I以上6以下的整數(shù))氨基酸的多肽；且對生長抑素受體具有親和性。
[0029]此處，在本發(fā)明的附加糖鏈的多肽的一個(gè)實(shí)施方案中，特征在于:所述經(jīng)附加糖鏈的氨基酸置換的氨基酸為相當(dāng)于SRIF14中的第19位的氨基酸。
[0030]此外，在本發(fā)明的附加糖鏈的多肽的一個(gè)實(shí)施方案中，所述附加糖鏈的多肽的特征在于:在所述(E)的多肽中，至少I個(gè)氨基酸經(jīng)附加糖鏈的氨基酸置換，其中，所述經(jīng)附加糖鏈的氨基酸置換的至少I個(gè)氨基酸存在于所述(E)的多肽的N末端側(cè)的所述N個(gè)氨基酸中的任一個(gè)。 [0031]此外，在本發(fā)明的附加糖鏈的多肽的一個(gè)實(shí)施方案中，所述附加糖鏈的多肽的特征在于:在所述(F)的多肽中，至少I個(gè)氨基酸經(jīng)附加糖鏈的氨基酸置換，其中，所述經(jīng)附加糖鏈的氨基酸置換的至少I個(gè)氨基酸存在于所述(F)的多肽的C末端側(cè)的所述M個(gè)氨基酸中的任一個(gè)。
[0032]此外，在本發(fā)明的附加糖鏈的多肽的一個(gè)實(shí)施方案中，所述附加糖鏈的多肽的特征在于:在所述多肽(E)中，至少I個(gè)氨基酸經(jīng)附加糖鏈的氨基酸置換，進(jìn)一步，附加在N末端側(cè)的所述N個(gè)氨基酸的序列以X-Y-表示，其中，X表示L個(gè)(其中，L為I以上6以下的整數(shù))任意的氨基酸的序列，且Y為選自由以下的(I)~(15)所組成的組中的序列:(l)Lys、 (2)Arg-Lys> (3)Glu-Arg-Lys、 (4)Arg-Glu-Arg-Lys、 (5)Pro-Arg-Glu-Arg-Lys、(6)Ala-Pro-Arg-Glu-Arg-Lys、 (7)Met_AIa_Prο-Arg-GIu_Arg_Lys、 (8)Ala-Met-Ala-Pro-Arg-GIu-Arg-Lys> (9)Pro-Ala-Met-Ala-Pro-Arg-GIu—Arg-Lys> (IO)Asn-Pro-Ala-Met-Ala-Pro-Arg-Glu-Arg-Lys、 (11)Ser-Asn-Pro—Ala-Met-Ala-Pro-Arg-GIu-Arg-Lys> (12)Asn-Ser-Asn-Pro-Ala-Met-Ala—Pro-Arg-Glu-Arg-Lys> (13)Ala-Asn-Ser-Asn-Pro-Ala-Met-Ala-Pro-Arg-Glu—Arg-Lys> (14)Ser-Ala-Asn-Ser-Asn-Pro-Ala-Met-Ala-Pro-Arg-Glu-Arg-Lys、和(15)在上述序列(2)~(14)中，I個(gè)或多個(gè)氨基酸缺失、經(jīng)置換或附加的序列。
[0033]此外，在本發(fā)明的附加糖鏈的多肽的一個(gè)實(shí)施方案中，特征在于:所述經(jīng)附加糖鏈的氨基酸置換的至少I個(gè)氨基酸的存在于L個(gè)氨基酸中的任一個(gè)，所述L個(gè)氨基酸是代表表示附加在所述多肽(E)的N末端側(cè)的所述N個(gè)氨基酸的序列的X-Y-中的X。
[0034]此外，在本發(fā)明的附加糖鏈的多肽的一個(gè)實(shí)施方案中，特征在于:附加在N末端側(cè)的所述N個(gè)氨基酸經(jīng)由連接子(linker)而連接至所述N末端側(cè)。[0035]此外，本發(fā)明的附加糖鏈的多肽的另一個(gè)實(shí)施方案中，特征在于，本發(fā)明的附加糖鏈的多肽是在選自由以下的(A)~(F)所組成的組中的多肽中，至少I個(gè)氨基酸經(jīng)附加糖鏈的氨基酸置換的附加糖鏈的多肽:(A)由以序列編號2表示的氨基酸序列構(gòu)成的SRIF28 ；
(B)在由以序列編號2表示的氨基酸序列構(gòu)成的SRIF28中I個(gè)或多個(gè)氨基酸缺失、經(jīng)置換或附加的多肽；(C) SRIF28的類似物；(D)相對于由以序列編號2表示的氨基酸序列構(gòu)成的SRIF28，具有80%以上的同源性的多肽；(E)在(A)~(D)中，在N末端側(cè)進(jìn)一步含有J個(gè)(其中，J為I以上6以下的整數(shù))氨基酸的多肽；和(F)在㈧~⑶中，在C末端側(cè)進(jìn)一步含有K個(gè)(其中，K為I以上6以下的整數(shù))氨基酸的多肽；且對生長抑素受體具有親和性。
[0036]此外，在本發(fā)明的附加糖鏈的多肽的一個(gè)實(shí)施方案中，特征在于所述經(jīng)附加糖鏈的氨基酸置換的氨基酸為選自由下述氨基酸所組成的組中的至少I個(gè)氨基酸:相當(dāng)于SRIF28中的第I位的氨基酸、相當(dāng)于SRIF28中的第5位的氨基酸、相當(dāng)于SRIF28中的第9位的氨基酸、相當(dāng)于SRIF28中的第12位的氨基酸、相當(dāng)于SRIF28中的第13位的氨基酸、相當(dāng)于SRIF28中的第14位的氨基酸、和相當(dāng)于SRIF28中的19位之氨基酸。
[0037]此外，在本發(fā)明的附加糖鏈的多肽的一個(gè)實(shí)施方案中，所述附加糖鏈的多肽的特征在于:在上述(E)的多肽中，至少I個(gè)氨基酸經(jīng)附加糖鏈的氨基酸置換，其中，所述經(jīng)附加糖鏈的氨基酸置換的至 少I個(gè)氨基酸存在于上述(E)的多肽的N末端側(cè)的所述J個(gè)氨基酸的任一個(gè)。
[0038]此外，在本發(fā)明的附加糖鏈的多肽的一個(gè)實(shí)施方案中，所述附加糖鏈的多肽的特征在于:在上述(F)的多肽中，至少I個(gè)氨基酸經(jīng)附加糖鏈的氨基酸置換，其中，所述經(jīng)附加糖鏈的氨基酸置換的至少I個(gè)氨基酸存在于上述(F)的多肽的C末端側(cè)的所述K個(gè)氨基酸的任一個(gè)。
[0039]此外，在本發(fā)明的附加糖鏈的多肽的一個(gè)實(shí)施方案中，特征在于:所述對生長抑素受體的親和性對選自由SSTR1、SSTR2、SSTR3、SSTR4、和SSTR5所組成的組中的至少2種以上受體具有親和性。
[0040]此外，在本發(fā)明的附加糖鏈的多肽的一個(gè)實(shí)施方案中，特征在于:所述附加糖鏈的多肽的對至少SSTRl和SSTR4中的任一種具有親和性。
[0041]此外，在本發(fā)明的附加糖鏈的多肽的一個(gè)實(shí)施方案中，特征在于:所述附加糖鏈的多肽的對SSTRl和SSTR4兩者都具有親和性。
[0042]此外，在本發(fā)明的附加糖鏈的多肽的一個(gè)實(shí)施方案中，特征在于:所述附加糖鏈的多肽對SSTR1、SSTR2、SSTR3、SSTR4、和SSTR5全部都具有親和性。
[0043]此外，在本發(fā)明的附加糖鏈的多肽的一個(gè)實(shí)施方案中，特征在于:所述附加糖鏈的多肽與SRIF28相比，具有增大的血中穩(wěn)定性。
[0044]此外，在本發(fā)明的附加糖鏈的多肽的一個(gè)實(shí)施方案中，特征在于:所述各附加糖鏈的氨基酸為附加糖鏈的Asn或附加糖鏈的Cys。
[0045]此外，在本發(fā)明的附加糖鏈的多肽的一個(gè)實(shí)施方案中，特征在于:在所述各附加糖鏈的氨基酸中，糖鏈與氨基酸不經(jīng)由連接子而結(jié)合。
[0046]此外，在本發(fā)明的附加糖鏈的多肽的一個(gè)實(shí)施方案中，特征在于:在所述各附加糖鏈的氨基酸中，糖鏈由4個(gè)以上的糖的構(gòu)成。[0047]此外，在本發(fā)明的附加糖鏈的多肽的一個(gè)實(shí)施方案中，特征在于:在所述各附加糖鏈的氨基酸中，糖鏈為雙觸角(biantennary)復(fù)合型糖鏈、三觸角復(fù)合型糖鏈、或四觸角復(fù)合型糖鏈。
[0048]此外，在本發(fā)明的附加糖鏈的多肽的一個(gè)實(shí)施方案中，特征在于:在所述各附加糖鏈的氨基酸中，糖鏈為雙觸角復(fù)合型糖鏈。
[0049]此外，在本發(fā)明的附加糖鏈的多肽的一個(gè)實(shí)施方案中，特征在于:所述雙觸角復(fù)合型糖鏈為選自由二唾液酸糖鏈、單唾液酸糖鏈、去唾液酸糖鏈、二乙酰葡糖胺(diGlcNAc)糖鏈、和二甘露糖糖鏈所組成的組中的糖鏈。
[0050]此外，在本發(fā)明的附加糖鏈的多肽的一個(gè)實(shí)施方案中，特征在于:在所述各附加糖鏈的氨基酸中，糖鏈為下述式所表示的糖鏈，
[0051][化學(xué)式I]
[0052]
【權(quán)利要求】
1.附加糖鏈的多肽，其特征在于，其是在選自由以下的㈧~(F)所組成的組中的多肽中，至少I個(gè)氨基酸經(jīng)附加糖鏈的氨基酸置換的附加糖鏈的多肽: (A)由以序列編號I表示的氨基酸序列構(gòu)成的SRIF14； (B)在由以序列編號I表示的氨基酸序列構(gòu)成的SRIF14中，I個(gè)或多個(gè)氨基酸缺失、經(jīng)置換或附加的多肽； (C)SRIF14的類似物； (D)相對于由以序列編號I表不的氨基酸序列構(gòu)成的SRIF14,具有80%以上的同源性的多肽； (E)在(A)~⑶中，在N末端側(cè)進(jìn)一步含有N個(gè)(其中，N為I以上20以下的整數(shù))氨基酸的多肽；和 (F)在㈧~⑶中，在C末端側(cè)進(jìn)一步含有M個(gè)(其中，M為I以上6以下的整數(shù))氨基酸的多肽；且 對生長抑素受體具有親和性。
2.如權(quán)利要 求1所述的附加糖鏈的多肽，其特征在于，所述經(jīng)附加糖鏈的氨基酸置換的氨基酸為相當(dāng)于SRIF14中的第19位的氨基酸。
3.如權(quán)利要求1所述的附加糖鏈的多肽，其特征在于，所述附加糖鏈的多肽是在所述(E)的多肽中，至少I個(gè)氨基酸經(jīng)附加糖鏈的氨基酸置換的附加糖鏈的多肽， 其中，所述經(jīng)附加糖鏈的氨基酸置換的至少I個(gè)氨基酸存在于所述(E)的多肽的N末端側(cè)的所述N個(gè)氨基酸的任一個(gè)。
4.如權(quán)利要求1所述的附加糖鏈的多肽，其特征在于，所述附加糖鏈的多肽是在所述(F)的多肽中，至少I個(gè)氨基酸經(jīng)附加糖鏈的氨基酸置換的附加糖鏈的多肽， 其中，所述經(jīng)附加糖鏈的氨基酸置換的至少I個(gè)氨基酸存在于所述(F)的多肽的C末端側(cè)的所述M個(gè)氨基酸的任一個(gè)。
5.如權(quán)利要求1所述的附加糖鏈的多肽，其特征在于，所述附加糖鏈的多肽是在所述(E)的多肽中，至少I個(gè)氨基酸經(jīng)附加糖鏈的氨基酸置換的附加糖鏈的多肽， 進(jìn)一步，附加在N末端側(cè)的所述N個(gè)氨基酸的序列以X-Y-表示， 其中，X表示L個(gè)(其中，L為I以上6以下的整數(shù))任意的氨基酸的序列，且，Y為選自由以下的(I)~(15)所組成的組中的序列:
⑴ Lys、
(2)Arg-Lys>
(3)Glu-Arg-Lys>
(4)Arg-Glu-Arg-Lys、
(5)Pro-Arg-Glu-Arg-Lys、
(6)Ala-Pro-Arg-Glu-Arg-Lys、
(7)Met-Ala-Pro-Arg-GIu-Arg_Lys、
(8)Ala-Met-Ala-Pro-Arg-Glu-Arg-Lys>
(9)Pro-Ala-Met-Ala-Pro-Arg-GIu-Arg-Lys >
(10)Asn-Pro-Ala-Met-Ala-Pro-Arg-Glu-Arg-Lys>
(11)Ser-Asn-Pro-Ala-Met-Ala-Pro-Arg-Glu-Arg-Lys>(12)Asn-Ser-Asn-Pro-Ala-Met-Ala-Pro-Arg-Glu-Arg-Lys、
(13)Ala-Asn-Ser-Asn-Pro-Ala-Met-Ala-Pro-Arg-Glu-Arg-Lys、
(14)Ser-Ala-Asn-Ser-Asn-Pro-Ala-Met-Ala-Pro-Arg-Glu-Arg-Lys、和 (15)在上述序列(2)~(14)中，1個(gè)或多個(gè)氨基酸缺失、經(jīng)置換或附加的序列。
6.如權(quán)利要求5所述的附加糖鏈的多肽，其特征在于，所述經(jīng)附加糖鏈的氨基酸置換的至少I個(gè)氨基酸存在于代表表示附加在所述(E)的多肽的N末端側(cè)的所述N個(gè)氨基酸的序列的X-Y-中的X的L個(gè)氨基酸的任一個(gè)。
7.如權(quán)利要求3所述的附加糖鏈的多肽，其特征在于，附加在N末端側(cè)的所述N個(gè)氨基酸經(jīng)由連接子而連接至所述N末端側(cè)。
8.附加糖鏈的多肽，其特征在于，其是在選自由以下的(A)~(F)所組成的組中的多肽中，至少I個(gè)氨基酸經(jīng)附加糖鏈的氨基酸置換的附加糖鏈的多肽: (A)由以序列編號2表示的氨基酸序列構(gòu)成的SRIF28； (B)在由以序列編號2表示的氨基酸序列構(gòu)成的SRIF28中，1個(gè)或多個(gè)氨基酸缺失、經(jīng)置換或附加的多肽； (C)SRIF28的類似物； (D)相對于由以序列編號2表不的氨基酸序列構(gòu)成的SRIF28,具有80%以上的同源性的多肽； (E)在(A)~⑶中，在N末端側(cè)進(jìn)一步含有J個(gè)(其中，J為I以上6以下的整數(shù))氨基酸的多肽；和 (F)在(A)~⑶中，在C末端側(cè)進(jìn)一步含有K個(gè)(其中，K為1以上6以下的整數(shù))氨基酸的多肽；且 對生長抑素受體具有親和性。
9.如權(quán)利要求8所述的附加糖鏈的多肽，其特征在于，所述經(jīng)附加糖鏈的氨基酸置換的氨基酸為選自由下述氨基酸所組成的組中的至少1個(gè)氨基酸:相當(dāng)于SRIF28中的第I位的氨基酸、相當(dāng)于SRIF28中的第5位的氨基酸、相當(dāng)于SRIF28中的第9位的氨基酸、相當(dāng)于SRIF28中的第12位的氨基酸、相當(dāng)于SRIF28中的第13位的氨基酸、相當(dāng)于SRIF28中的第14位的氨基酸、和相當(dāng)于SRIF28中的第19位的氨基酸。
10.如權(quán)利要求8所述的附加糖鏈的多肽，其特征在于，所述附加糖鏈的多肽是在所述(E)的多肽中，至少1個(gè)氨基酸經(jīng)附加糖鏈的氨基酸置換的附加糖鏈的多肽， 其中，所述經(jīng)附加糖鏈的氨基酸置換的至少1個(gè)氨基酸存在于所述(E)的多肽的N末端側(cè)的所述J個(gè)氨基酸的任一個(gè)。
11.如權(quán)利要求8所述的附加糖鏈的多肽，其特征在于，所述附加糖鏈的多肽是在所述(F)的多肽中，至少1個(gè)氨基酸經(jīng)附加糖鏈的氨基酸置換的附加糖鏈的多肽， 其中，所述經(jīng)附加糖鏈的氨基酸置換的至少1個(gè)氨基酸存在于所述(F)的多肽的C末端側(cè)的所述K個(gè)氨基酸的任一個(gè)。
12.如權(quán)利要求1至11中任一項(xiàng)所述的附加糖鏈的多肽，其特征在于，所述對生長抑素受體的親和性是對選自由SSTR1、SSTR2、SSTR3、SSTR4、和SSTR5所組成的組中的受體中的至少2種以上受體具有親和性。
13.如權(quán)利要求12所述的附加糖鏈的多肽，其特征在于，所述附加糖鏈的多肽對至少SSTRl和SSTR4中的任一種具有親和性。
14.如權(quán)利要求12所述的附加糖鏈的多肽，其特征在于，所述附加糖鏈的多肽對SSTRl和SSTR4兩者均具有親和性。
15.如權(quán)利要求12所述的附加糖鏈的多肽，其特征在于，所述附加糖鏈的多肽對SSTRU SSTR2、SSTR3、SSTR4、和 SSTR5 全部都具有親和性。
16.如權(quán)利要求1至15中任一項(xiàng)所述的附加糖鏈的多肽，其特征在于，所述附加糖鏈的多肽與SRIF28相比，具有增大的血中穩(wěn)定性。
17.如權(quán)利要求1至16中任一項(xiàng)所述的附加糖鏈的多肽，其特征在于，所述各附加糖鏈的氨基酸為附加糖鏈的Asn或附加糖鏈的Cys。
18.如權(quán)利要求1至17中任一項(xiàng)所述的附加糖鏈的多肽，其特征在于，在所述各附加糖鏈的氨基酸中，糖鏈與氨基酸不經(jīng)由連接子而結(jié)合。
19.如權(quán)利要求1至18中任一項(xiàng)所述的附加糖鏈的多肽，其特征在于，在所述各附加糖鏈的氨基酸中，所述糖鏈由4個(gè)以上的糖構(gòu)成。
20.如權(quán)利要求1至19中任一項(xiàng)所述的附加糖鏈的多肽，其特征在于，在所述各附加糖鏈的氨基酸中，所述糖鏈為雙觸角復(fù)合型糖鏈、三觸角復(fù)合型糖鏈、或四觸角復(fù)合型糖鏈。
21.如權(quán)利要求1至19中任一項(xiàng)所述的附加糖鏈的多肽，其特征在于，在所述各附加糖鏈的氨基酸中，所述糖鏈為雙觸角復(fù)合型糖鏈。
22.如權(quán)利要求20或21所述的附加糖鏈的多肽，其特征在于，所述雙觸角復(fù)合型糖鏈為選自由二唾液酸糖鏈、單唾液酸糖鏈、去唾液酸糖鏈、二乙酰葡糖胺糖鏈和二甘露糖糖鏈所組成的組中的糖鏈。
23.如權(quán)利要求1至18中任一項(xiàng)所述的附加糖鏈的多肽，其特征在于，在所述各附加糖鏈的氨基酸中，所述糖鏈為下述式所表示的糖鏈: [化學(xué)式I]
24.如權(quán)利要求1至20中任一項(xiàng)所述的附加糖鏈的多肽，其特征在于，所述糖鏈在非還原末端具有至少I個(gè)唾液酸，且所述唾液酸的羧基由碳數(shù)I~30的烷基氨基、芐基、氨基、或氨基乙基氨基修飾。
25.如權(quán)利要求1至24中任一項(xiàng)所述的附加糖鏈的多肽，其特征在于，所述附加糖鏈的多肽具有多個(gè)附加糖鏈的氨基酸，且 所述各附加糖鏈的氨基酸中的糖鏈均相同。
26.如權(quán)利要求1至25中任一項(xiàng)所述的附加糖鏈的多肽，其特征在于，所述附加糖鏈的多肽具有相當(dāng)于SRIF28中的第17位的Cys和第28位的Cys的Cys， 進(jìn)一步，這些Cys相互以雙硫鍵結(jié)合。
27.如權(quán)利要求1至26中任一項(xiàng)所述的附加糖鏈的多肽，其特征在于，所述附加糖鏈的多肽的C末端被酰胺化。
28.如權(quán)利要求1至26中任一項(xiàng)所述的附加糖鏈的多肽，其特征在于，在所述附加糖鏈的多肽的N末端導(dǎo)入有疊氮基。
29.如權(quán)利要求1至28中任一項(xiàng)所述的附加糖鏈的多肽，其特征在于，所述附加糖鏈的多肽被標(biāo)記。
30.醫(yī)藥組合物，其特征在于包含: (I)如權(quán)利要求1至29中任一項(xiàng)所述的附加糖鏈的多肽和/或其藥學(xué)上可接受的鹽、和 (II)藥學(xué)上可接受的載體。
31.如權(quán)利要求30所述的醫(yī)藥組合物，其特征在于，在所述附加糖鏈的多肽中，糖鏈?zhǔn)菍?shí)質(zhì)上均一的。
32.如權(quán)利要求30或31所述的醫(yī)藥組合物，其特征在于，所述醫(yī)藥組合物用于治療或預(yù)防與生長抑素相關(guān)的疾病。
33.如權(quán)利要求30所述的醫(yī)藥組合物，其特征在于，所述與生長抑素相關(guān)的疾病為選自由下述疾病所組成的組中的至少I種疾病:肢端肥大癥、巨人癥、阿爾茨海默病及其他形形式的癡呆癥、癌、激素產(chǎn)生性腫瘤、內(nèi)分泌腫瘤、類癌、血管活性腸肽瘤、胰島瘤、胰高血糖素瘤、糖尿病及其并發(fā)癥、疼痛、關(guān)節(jié)炎、腹瀉、胃潰瘍、炎癥性腸病、腸易激綜合癥、庫欣氏病、激素分泌異常、消化道阻塞、腸梗阻、術(shù)后再狹窄、放射線損傷、眼疾病、干眼病、青光眼、角膜實(shí)質(zhì)炎、虹膜炎、白內(nèi)障、和結(jié)膜炎。
34.與生長抑素相關(guān)的疾病的治療或預(yù)防方法，其特征在于，施用有效量的如權(quán)利要求1至29中任一項(xiàng)所述的附加糖鏈的多肽。
35.如權(quán)利要求34所述的治療或預(yù)防方法，其特征在于，所述與生長抑素相關(guān)的疾病為選自由下述疾病所組成的組中的至少I種疾病:肢端肥大癥、巨人癥、阿爾茨海默病及其他形式的癡呆癥、癌、激素產(chǎn)生性腫瘤、內(nèi)分泌腫瘤、類癌、血管活性腸肽瘤、胰島瘤、胰高血糖素瘤、庫欣氏病、激素分泌異常、糖尿病及其并發(fā)癥、疼痛、關(guān)節(jié)炎、腹瀉、胃潰瘍、炎癥性腸病、腸易激綜合癥、消化道阻塞、腸梗阻、術(shù)后再狹窄、眼疾病、放射線損傷、干眼病、青光目艮、角膜實(shí)質(zhì)炎、虹 膜炎、白內(nèi)障、和結(jié)膜炎。
【文檔編號】C07K2/00GK103930441SQ201280053754
【公開日】2014年7月16日 申請日期:2012年9月3日 優(yōu)先權(quán)日:2011年9月4日
【發(fā)明者】落合洋文, 下田泰治, 深江一博, 前田政敏, 石井一之, 吉田健太, 手塚克成, 田鶴圭亮 申請人:株式會(huì)社糖鎖工學(xué)研究所