專利名稱：豬仔笠異黃酮類化合物的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及豬仔笠異黃酮類化合物的應(yīng)用，屬于醫(yī)藥領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
豬仔笠屬名Eriosema chinense Vog，為豆科毛瓣花屬植物，約100種，分布于熱帶和亞熱帶地區(qū)。據(jù)《中藥大詞典》記載豬仔笠塊根入藥，具有清熱解毒、生熱煩渴、化痰潤(rùn)肺、止咳之功效，而且是治療傷風(fēng)咳嗽、止呼吸道感染、發(fā)熱煩渴、痢疾、跌打損傷等疾病的珍稀名貴中草藥。豬仔笠主要用于治療咳嗽、哮喘，療效顯著，安全可靠，價(jià)廉而方便，是一種良好的中草藥資源，值得開(kāi)發(fā)研究和推廣運(yùn)用。豬仔笠雖然已在民間應(yīng)用較廣，但對(duì)豬仔笠的有效成分以及生物活性的研究未見(jiàn)有關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道，豬仔笠的臨床用藥機(jī)理尚不明確， 僅憑經(jīng)驗(yàn)，這就限制了其在臨床上的應(yīng)用范圍而沒(méi)有得到充分有效的開(kāi)發(fā)利用。同時(shí)，由于其主要活性成分不明，就無(wú)法對(duì)豬仔笠的有效成分進(jìn)行檢測(cè)、對(duì)藥材質(zhì)量進(jìn)行有效控制和道地藥材進(jìn)行權(quán)威鑒定。在中藥的諸多研究中，對(duì)活性成分、藥理作用和藥效與成分關(guān)系的研究較少，所以無(wú)法闡明中藥治療疾病的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)和作用機(jī)理等重要科學(xué)問(wèn)題，也無(wú)法為尋找新藥物或合成新藥提供先導(dǎo)物或結(jié)構(gòu)母核，無(wú)法提升中藥新藥研究方法和技術(shù)水平。因此深入、系統(tǒng)和有效地分離、純化、結(jié)構(gòu)鑒定以及活性的追蹤驗(yàn)證是開(kāi)展和加強(qiáng)中藥藥效物質(zhì)基礎(chǔ)和作用機(jī)理系統(tǒng)研究的必然。而在傳統(tǒng)的分離技術(shù)基礎(chǔ)之上，積極探索和應(yīng)用新的分離方法和技術(shù)是加速中藥藥效物質(zhì)基礎(chǔ)和作用機(jī)理系統(tǒng)研究的發(fā)展趨勢(shì)。開(kāi)展對(duì)豬仔笠藥理活性成分的研究，掌握豬仔笠被廣泛用于治療咳嗽、化痰的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)，可為豬仔笠治療咳嗽、化痰的藥理研究和臨床應(yīng)用提供參考，為探索該屬植物的活性成分及其化學(xué)分類學(xué)方面提供借鑒。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種豬仔笠異黃酮類化合物的應(yīng)用。本發(fā)明所述的豬仔笠異黃酮類化合物，具有下述結(jié)構(gòu)的異黃酮類化合物，本發(fā)明以化合物5表述。本發(fā)明所采用的高速逆流色譜法(High-speed Countercurrent Chro-matography)，簡(jiǎn)稱 “HSCCC”，下同。
本發(fā)明所述的豬仔笠異黃酮類化合物的提取方法為包括如下步驟1)將豬仔笠塊根粉碎，用乙醇回流提取獲得乙醇提取液，將乙醇提取液減壓濃縮得浸膏，浸膏加入水混懸得混懸液，混懸液用石油醚萃取，把經(jīng)石油醚萃取后留下的混懸液再用醋酸乙酯萃取獲得醋酸乙酯萃取液，減壓濃縮醋酸乙酯萃取液得醋酸乙酯浸膏；2)將醋酸乙酯浸膏用正己烷醋酸乙酯甲醇水混合溶劑體系的下相溶解后得溶解液，可取等體積的上相萃取該溶解液多次，至上相萃取液為無(wú)色或幾乎無(wú)色為止，不要上相萃取的萃取液，只把下相部分蒸干即得醋酸乙酯浸膏II ；3)醋酸乙酯浸膏II經(jīng)過(guò)制備型HSCCC在正己烷醋酸乙酯甲醇水按適宜體積比例的溶劑體系下分離，獲得色譜峰，其中只有一個(gè)峰5的峰型對(duì)稱且含量較高的組分流出液，通過(guò)手工收集該組分流出液，本發(fā)明可通過(guò)自然蒸發(fā)流出液的部分溶劑后析出白色針晶的異黃酮類化合物。上述步驟幻的醋酸乙酯浸膏用混合溶劑(正己烷、醋酸乙酯、甲醇、水)萃取分離的溶劑體系配比以體積比計(jì)量是正己烷醋酸乙酯甲醇水=3 6 3 6 4 8 2 6。步驟3)的HSCCC分離的溶劑體系(體積比計(jì)量)為正己烷醋酸乙酯甲醇 水=1 6 2 9 1 6 2 8)；固定相為上相；流動(dòng)相為下相；HSCCC分離流速 0. 5 4. OmL · mirT1 ；轉(zhuǎn)速:500 1500r · mirT1 ；固定相的保留值不低于50%。步驟1)粉碎的豬仔笠塊根，粉碎的豬仔笠塊根，可以用50 100%乙醇浸沒(méi)藥材且液面高出藥材約0. 5 1cm，在80 95°C和常壓力回流提取2 4次，合并乙醇提取液， 將乙醇提取液用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀減壓濃縮得浸膏，浸膏加入2 15倍量的水混懸得混懸液，混懸液用0. 5 2倍水的石油醚萃取8 12次后所余下的混懸液再用是混懸液量的0. 5 2倍的醋酸乙酯萃取8 12次，合并萃取液，采用目前本領(lǐng)域通用的旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀減壓濃縮醋酸乙酯萃取液得醋酸乙酯浸膏。當(dāng)然優(yōu)選用95%乙醇在優(yōu)選82 85°C和常壓力回流提取三次，合并三次乙醇提取液，將乙醇提取液用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀減壓濃縮得浸膏，浸膏加入3 5倍的水混懸，用0. 5 1倍水的石油醚萃取10次后所余下的混懸液再用0. 5 1倍余下的混懸液量的醋酸乙酯萃取10次獲得醋酸乙酯萃取液，合并獲得的醋酸乙酯萃取液，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀減壓濃縮醋酸乙酯萃取液得醋酸乙酯浸膏。步驟2)的醋酸乙酯浸膏用混合溶劑萃取分離的正己烷醋酸乙酯甲醇水的優(yōu)選混合溶劑體系是5 5 5 5。步驟3)所述的HSCCC分離的最佳的HSCCC溶劑優(yōu)選體系為正己烷醋酸乙酯甲醇水=3 6 3 6 ；固定相上相；流動(dòng)相下相；流速2. OmL · mirT1 ；轉(zhuǎn)速 700r · mirT1 ；固定相的保留值不低于50%，檢測(cè)波長(zhǎng)254nm。經(jīng)測(cè)定本發(fā)明正己烷醋酸乙酯甲醇水(3 6 3 6)固定相的保留率為 52. 4%。本發(fā)明所述的豬仔笠異黃酮提取物，在制備抑制金黃葡萄球菌、抗炎、止咳、化痰的藥物中的應(yīng)用，即能作為抑制金黃葡萄球菌、抗炎、止咳和化痰的藥物。本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)是本發(fā)明采用分離、純化的新手段HSCCC分離方法來(lái)分離純化豬仔笠異黃酮提取物。HSCCC利用多層螺旋管行星式運(yùn)動(dòng)形成特殊的離心力矢量場(chǎng)，來(lái)實(shí)現(xiàn)兩溶劑相在管柱里的單向性流體動(dòng)力學(xué)分布狀態(tài)，在這種情況下，可以保證流動(dòng)相高速穿過(guò)管柱時(shí)固定相在管柱里的保留百分率達(dá)50%以上，同時(shí)大大促進(jìn)了兩相間的充分混合和逆流傳遞。這種體系由于能夠采用多樣的體系條件和操作方式，對(duì)從天然產(chǎn)物粗提物中分離提取不同特性的有效成分提供了良好的條件，因而，更符合分離分析和制備純化工作的需要。HSCCC溶劑體系的選擇對(duì)于HSCCC十分關(guān)鍵，同時(shí)也是最難解決的問(wèn)題，溶劑選擇的困難制約了逆流色譜的應(yīng)用。通常，兩相溶劑體系應(yīng)滿足以下要求(1)不造成樣品的分解或變性；⑵足夠高的樣品溶解度；(3)上-下兩相的體積大致相等，以免浪費(fèi)溶劑；⑷ 樣品在溶劑系統(tǒng)中合適的分配系數(shù)值；(5)溶劑體系的分層時(shí)間小于30s，使固定相能實(shí)現(xiàn)足夠高的保留。一般來(lái)說(shuō)，前三點(diǎn)可以較簡(jiǎn)便地進(jìn)行判斷，后兩點(diǎn)對(duì)高速逆流色譜儀顯得特別重要，需要經(jīng)過(guò)測(cè)定或?qū)嶒?yàn)判斷。測(cè)定方法包括TLC、HPLC和分析型HSCCC法等。TLC法的準(zhǔn)確度較低，但方便、快速，可以對(duì)溶劑系統(tǒng)的適用性作出便捷的初步判斷。根據(jù)斑點(diǎn)色度可以觀察樣品中各組分的相對(duì)含量及其在兩相溶劑中的分配情況，即估計(jì)分配系數(shù)的大小及差異，由此可以確定溶劑系統(tǒng)的適用性及各組分的流出順序。因此本發(fā)明的實(shí)驗(yàn)采用TLC法，但TLC法只能對(duì)溶劑系統(tǒng)的適用性作出初步的判斷，對(duì)分配系數(shù)作大致的估算，在缺乏經(jīng)驗(yàn)的情況下，很難據(jù)此把握溶劑系統(tǒng)用于逆流色譜分離的可行性。因此本實(shí)驗(yàn)通過(guò)TLC法檢測(cè)到溶劑的上、下相均有目標(biāo)產(chǎn)物后，再通過(guò)分析型HSCCC法篩選最佳的溶劑系統(tǒng)。結(jié)果表明1.溶劑體系的選擇是HSCCC分離中最為關(guān)鍵的環(huán)節(jié)，溶劑體系選擇的合適與否， 直接關(guān)系到分離結(jié)果得好壞。正己烷/醋酸乙酯/甲醇/水是已被廣泛應(yīng)用的溶劑分離系統(tǒng)之一，主要應(yīng)用于弱極性物質(zhì)的分離。在溶劑體系中，正己烷和水分別成為兩相，再根據(jù)需要加入甲醇、醋酸乙酯來(lái)調(diào)節(jié)溶劑系統(tǒng)的極性，以達(dá)到好的分離效果。對(duì)于正己烷/醋酸乙酯/甲醇/水的體系，若目標(biāo)組分易溶于該體系的上相，增加甲醇水的含量，可將目標(biāo)組分拉向下相。反之，則可降低甲醇的比例。原因在于當(dāng)甲醇的量增加時(shí)，其一方面可以減小水相的極性，同時(shí)又可增加有機(jī)相的極性，可以達(dá)到改變待分離成分在兩相中的分配系數(shù)的目的。本研究探索出分離醋酸乙酯浸膏II部位的最佳溶劑系統(tǒng)為正己烷醋酸乙酯 甲醇水=3 6 3 6，這些溶劑體系不僅有合適的上、下相之比，合適的固定相保留值，而且對(duì)目標(biāo)成分有比較理想的分配。2.和傳統(tǒng)的通過(guò)溶劑萃取、反復(fù)層析的方法相比，HSCCC不僅可以大大簡(jiǎn)化諸多步驟、節(jié)約時(shí)間，且不會(huì)造成溶劑和樣品的損失，目標(biāo)產(chǎn)物能達(dá)到較高的純度。且在HSCCC 操作過(guò)程中，只要調(diào)試好儀器，進(jìn)樣完畢后，后續(xù)分離過(guò)程則完全可以實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化，且分離過(guò)程可以結(jié)合紫外進(jìn)行檢測(cè)。上述特點(diǎn)顯示了 HSCCC在分離、提純化合物方面的明顯優(yōu)勢(shì)。 當(dāng)然，HSCCC在分離、提純化合物方面也不會(huì)是萬(wàn)能的。有的化合物由于難于選擇合適的溶劑系統(tǒng)，則不能借助HSCCC的手段分離。另有，用來(lái)進(jìn)行HSCCC分離的樣品應(yīng)盡可能使目標(biāo)成分純度提高。這樣既便于尋找合適的溶劑系統(tǒng)，又可有效地提高分離效果。因此，HSCCC 在應(yīng)用于化學(xué)成分的分離提純時(shí)，應(yīng)盡可能與其它常用的分離方法互補(bǔ)進(jìn)行。本實(shí)驗(yàn)用傳統(tǒng)的溶劑回流提取方法，通過(guò)HSCCC與傳統(tǒng)的薄層層析制備相結(jié)合進(jìn)行分離純化，首次從該藥材醋酸乙酯浸膏II部位分離得到新化合物5。本發(fā)明通過(guò)對(duì)醋酸乙酯浸膏II提取物——化合物5研究發(fā)現(xiàn)，1)醋酸乙酯浸膏II提取物——化合物5對(duì)金黃葡萄球菌有較好的抑菌活性，醋酸乙酯浸膏II提取物——化合物5對(duì)某些菌也具有一定的抑制效果，可能含有量比較少但是活性很高的物質(zhì)。幻本發(fā)明的醋酸乙酯浸膏II提取物——化合物5 能抑制二甲苯所致的小白鼠耳腫脹作用，具有良好的抗炎效果?；帽景l(fā)明的醋酸乙酯浸膏 II提取物——化合物5能延長(zhǎng)咳嗽潛伏期，減少咳嗽次數(shù)，具有良好的鎮(zhèn)咳作用。4)本發(fā)明的醋酸乙酯浸膏II提取物——化合物5明顯增加小鼠氣管酚紅排泌量，表明可促進(jìn)腺體分泌，使痰液黏度下降而易于咳出，從而起到祛痰作用。
具體實(shí)施例方式下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行詳細(xì)說(shuō)明第一部分醋酸乙酯部位的化學(xué)成分研究1實(shí)驗(yàn)儀器及材料1. 1 藥材豬仔笠購(gòu)自地點(diǎn)福建龍巖；鑒定福建省中醫(yī)藥研究院王振登研究員鑒定。1. 2 儀器微量分析天平(北京塞多利斯天平有限公司)；RE-52A旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(上海亞榮生化儀器廠)；恒溫水浴鍋；玻璃硅膠柱子GcmX30cm)；部分收集器(上海滬西分析儀器廠有限公司)；恒流泵(上海滬西分析儀器廠有限公司)；層析缸；超聲清洗儀(昆山市超聲儀器有限公司)；紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)(VARIAN，Cary 50) ；HP6890氣相色譜-HP5973質(zhì)譜聯(lián)用儀；AVATAR360紅外光譜儀(美國(guó)Thermo Nicoler) ；GS 20分析型高速逆流色譜儀(北京天寶物華生物技術(shù)有限公司)；GS 10制備型高速逆流色譜儀(北京天寶物華生物技術(shù)有限公司)；高效液相色譜儀(美國(guó)Agilent IlOOseries)；元素分析儀(德國(guó)Vario ELIII)； 質(zhì)譜儀(美國(guó)LCQ Deca XP Max)；核磁共振儀(美國(guó)Unity 500)。1.3 試劑正己烷、醋酸乙酯、甲醇、雙蒸水、石油醚(60_90°C )均為AR級(jí)；色譜甲醇；無(wú)特別標(biāo)明均為分析純?cè)噭恢鶎游龉枘z100-200目、薄層層析硅膠H均為青島海洋化工生產(chǎn)。2實(shí)驗(yàn)方法2. 2醋酸乙酯浸膏II化學(xué)成分研究2. 2.1樣品的制備將豬仔笠塊根粉碎1kg，用95%乙醇浸沒(méi)藥材且液面高出藥材約1cm，在優(yōu)選84°C 溫度和常壓力下回流提取三次Oh，2h, 2h)，合并三次乙醇提取液，將乙醇提取液用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀減壓濃縮得浸膏140g，浸膏加入850毫升水混懸，用0. 8倍上述水量的石油醚萃取10 次后留下的混懸液再用與所留下的混懸液同等體積的醋酸乙酯萃取，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀減壓濃縮醋酸乙酯萃取液得醋酸乙酯浸膏60g。將上述60g的醋酸乙酯浸膏用正己烷醋酸乙酯甲醇水(以體積比計(jì)量)= 5:5:5: 5體系的下相IOOmL溶解后得溶解液，取與下相等體積的上相萃取上述的溶解液多次，至上相萃取的液體為無(wú)色后，把溶于下相部分蒸干析出醋酸乙酯浸膏II 48g。2. 2. 2HSCCC溶劑體系的選擇及樣品溶液的制備HSCCC溶劑體系的選擇按照被分離物質(zhì)的粗略極性選擇用哪類分離體系，在該實(shí)驗(yàn)中，選擇弱極性的正己烷體系，同時(shí)采用薄層色譜法選擇溶劑體系的配比，首先按選定的溶劑系統(tǒng)配制一定量的兩相溶劑，各取2mL于小試管中，加入數(shù)毫克樣品，劇烈振蕩Imin后，靜置分層，用毛細(xì)管取近似等量的上下兩層溶液于TLC板上，待溶劑揮發(fā)完后用溶劑系統(tǒng)中的有機(jī)層展開(kāi)，用碘缸顯色，根據(jù)斑點(diǎn)色度和面積可以觀察樣品中各組分在兩相溶劑中的分配情況，即估算分配系數(shù)的大小和差異，由此判斷溶劑系統(tǒng)的適用性，再通過(guò)分析型高速逆流儀確定溶劑系統(tǒng)。 樣品溶液的制備將200mg醋酸乙酯浸膏II溶解在2mL體積比為1/1的上下相溶劑系統(tǒng)中，用4. 5μπι有機(jī)系的濾膜過(guò)濾，本發(fā)明的實(shí)例中濾膜采用尼龍的濾膜，以備HSCCC進(jìn)樣。 2. 2. 3HSCCC 分離步驟每次分離之前，首先配制已選擇好的兩相溶劑系統(tǒng)，將其充分混合后靜置分層。在使用前將兩相分離，先用恒流泵將上述選定溶劑體系的上相打入HSCCC的柱內(nèi)(總體積為 V)，直至注滿整個(gè)管子。然后開(kāi)啟HSCCC，轉(zhuǎn)速為700r · mirT1，同時(shí)流動(dòng)相以2. OmL · mirT1 的流速打入HSCCC，等到聚四氟乙烯管尾端流出流動(dòng)相后，表明HSCCC中兩相已達(dá)到平衡， 收集柱尾端流出的固定相體積V1，通過(guò)六通閥將樣品注入HSCCC，流動(dòng)相流出端紫外檢測(cè)器波長(zhǎng)為254nm。根據(jù)色譜圖手工收集各色譜峰組分。分離結(jié)束后，用氮?dú)鈱上嗳軇木鬯姆蚁┞菪苤袥_出，測(cè)定固定相的保留值(SF)$ = V-V/VXIOO^。2. 2. 4各個(gè)組分的純度分析豬仔笠醋酸乙酯浸膏II經(jīng)HSCCC分離得到的各組分通過(guò)HPLC進(jìn)行純度分析。2. 2. 5各個(gè)組分的結(jié)構(gòu)鑒定分離得到的化合物通過(guò)元素分析、MS、IR、UV、NMR, GC/MS等波譜學(xué)方法進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定。3. 7醋酸乙酯浸膏II HSCCC溶劑體系按“2. 2. 2”項(xiàng)下方法篩選，最后得到較佳的溶劑體系(以體積比計(jì)量)正己烷 醋酸乙酯甲醇水=3 6 3 6。獲得醋酸乙酯浸膏II的分析型HSCCC圖譜，從圖譜中可知主要有3個(gè)峰，其中第一個(gè)峰，可能是幾種極性相似的化合物的混合體，后2個(gè)峰分離度比較好，達(dá)到基線分離，故選擇該溶劑體系。3. 8醋酸乙酯浸膏II的HSCCC分離結(jié)果200mg浸膏II在一定色譜條件(正己烷醋酸乙酯甲醇水=3 6 3 6) 下經(jīng)過(guò)制備型HSCCC分離，獲得色譜峰形圖譜。從圖譜可以看出，只有一個(gè)峰5峰型對(duì)稱且含量較高，通過(guò)手工收集得到白色針晶，得到:3mg化合物5。實(shí)驗(yàn)條件為溶劑體系正己烷 醋酸乙酯甲醇7jC= 3 6 3 6 ；固定相上相；流動(dòng)相下相；流速2. OmL · mirT1 ； 轉(zhuǎn)速:700r · mirT1。3. 9醋酸乙酯浸膏II固定相保留值測(cè)定正己烷醋酸乙酯甲醇7jC= 3 6 3 6固定相的保留率為52. 4%。3. 10化合物5的純度HSCCC分離所得化合物5的HPLC分析結(jié)果，顯示為單一峰，且峰形對(duì)稱，色譜條件 水/乙腈以起始比例95 5，IOmin后為90 10，15min后為80 20，20min為60 40， 30min 后為 50 50，40min 后為 40 60，柱溫30°C，流速ImL · mirT1，檢測(cè)波長(zhǎng)2Mnm。3. 11化合物5的結(jié)構(gòu)3. 11. 1化合物5的紫外吸收光譜
大多數(shù)黃酮類化合物在乙醇中的紫外吸收光譜由兩個(gè)主要吸收帶組成。出現(xiàn)在 300 400nm之間的吸收帶稱為帶I，出現(xiàn)在240 ^Onm之間的吸收帶稱為帶II。不同類型的黃酮化合物的帶I或帶II的峰位、峰形和吸收強(qiáng)度不同，因此從紫外光譜可以推測(cè)黃酮類化合物的結(jié)構(gòu)類型，從化合物5的紫外光譜的圖譜可知，以在240 ^Onm之間的吸收帶為主，桂皮?；到y(tǒng)破壞，故帶I為弱峰，帶II為主峰，推測(cè)是異黃酮類。3.11.2化合物5的紅外吸收光譜根據(jù)化合物5的紅外光譜圖譜，將主要峰歸屬如下337 !^1附近的強(qiáng)吸收峰，表明有酚羥基存在，1638cm"1為不飽和酮基吸收峰，示有酮結(jié)構(gòu)存在；1617CHT1，1576cm"1顯示有苯環(huán)存在，841CHT1為苯中C-H面內(nèi)彎曲振動(dòng)；288001^-28150^1附近的吸收峰，為-OCH3 的CH鍵的伸縮振動(dòng)吸收；進(jìn)一步證實(shí)有黃酮骨架結(jié)構(gòu)存在。3. 11.3化合物5的元素組成和質(zhì)譜分析結(jié)果元素分析測(cè)定值N :< 0. 30%，C :67. 45%, H :4. 92% ；ESI-MS圖譜顯示負(fù)離子峰為』83[M-1]_，說(shuō)明分子量為284 ；結(jié)合元素分析，推斷分子式為=C16H12O5 ；GC/MS測(cè)定結(jié)果，顯示分子量為觀4，結(jié)構(gòu)為4' -Methoxy-5,7-dihydroxy isoflavone ；結(jié)合元素分析和質(zhì)譜，故初步鑒定化合物 5 為 4' -Methoxy-5, 7-dihydroxy isoflavone。3. 11.4化合物5的核磁共振氫譜和碳譜化合物5 的 1HNMR 圖譜顯示，1H-匪IU400MHZ，MeOD) δ :7. 85 (1H, s)，異黃酮 C-2 上氫的特征峰；7. 24QH，d，2'，6' -H), 6. 73 (2H, d,3'，5' -H)，為 B 環(huán)中 C-2'，6' -H 和 C-3'，5' -H的特征峰；6.32 (2H，s)，芳環(huán)上的羥基使得鄰位氫產(chǎn)生高場(chǎng)位移，提示為C-6， 8位上氫的吸收峰；3. 78 (3H，s, OCH3)為甲氧基上氫的吸收峰。化合物5 的 13C NMR 圖譜顯示，13C NMR(1OOMHZ, MeOD) δ :55. 02 (-OCH3)為 C-4' 上甲氧基的C信號(hào)；151. 11 (C-2)，123. 08 (C-3)，176. 37 (C-4)為異黃酮類的特征吸收峰； 130. 17(C-2 ‘ ,6 ‘ ), 114. 62 (C-3 ‘ ,5 ‘ )，157. 14 (C-9)，160. 06 (C-5)，161. 60 (C-4 ‘)， 163. 40 (C-7)，125. 55 (C-1 ‘ )，107. 82 (C-10)，94. 72 (C-8)，96. 04 (C-6)。上述氫譜的氫信號(hào)和碳譜的碳信號(hào)與4' -Methoxy-5, 7-dihydroxy isoflavone基本符合。綜合上述紅外圖譜、紫外圖譜、核磁共振圖譜、元素分析及質(zhì)譜，最后鑒定化合物5 為 4'-甲氧基 _5，7-二羥基異黃酮 -Methoxy-5，7-dihydroxy isoflavone)，結(jié)構(gòu)式
如下，是首次從該植物分離得到的一個(gè)化合物。
權(quán)利要求
1. 一種豬仔笠異黃酮類化合物，具有下述結(jié)構(gòu)的異黃酮化合物
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種豬仔笠異黃酮類化合物的應(yīng)用，所述豬仔笠異黃酮類化合物為白色針晶的異黃酮類化合物，在制備抑制金黃葡萄球菌、抗炎、止咳、化痰的藥物中的應(yīng)用。
文檔編號(hào)C07D311/36GK102153532SQ20111006008
公開(kāi)日2011年8月17日 申請(qǐng)日期2009年8月24日 優(yōu)先權(quán)日2009年8月24日
發(fā)明者李凌峰, 李宇翔, 李清祿, 黃美玲 申請(qǐng)人:福建農(nóng)林大學(xué)