專(zhuān)利名稱(chēng)：蛋白質(zhì)結(jié)晶篩選的96條件試劑盒的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種用于蛋白質(zhì)結(jié)晶篩選的試劑盒，特別是用于蛋白質(zhì)結(jié)晶篩選的96 條件試劑盒。
背景技術(shù)：
公開(kāi)號(hào)為101817869A的中國(guó)專(zhuān)利一種以聚乙二醇作為沉淀劑用于蛋白質(zhì)結(jié)晶篩 選96條件試劑盒(PEG Grid kreen)，具體組成如表1，包括三部分，沉淀劑、添加劑、緩沖 1。
齊UySiiBMCD-Hj^ (Biological Macromolecule CrystallizationDatabase) ψ 統(tǒng)計(jì)出的使用頻率最高的前八種，濃度為10% -30% w/v ；添加劑包括11種，分別是硫酸 銨，甲酸鈉、氯化鎂、丙二酸鈉、2-甲基_2，4戊二醇、乙二醇、異丙醇、Tacsimate pH 7. O、甘 氨酸、酒石酸鉀鈉、乙二胺四乙酸，其濃度為0. IM ；緩沖液包括4種，分別是乙酸鈉、檸檬酸 鈉、2，2-雙二羥甲基苯胺、N-2-羥乙基哌嗪-N’ -2-乙磺酸，濃度為0. 1Μ，ρΗ值范圍從4到 8。表1 :PEG Grid Screen 96 條件成分表
權(quán)利要求
1. 一種蛋白質(zhì)結(jié)晶篩選的96條件試劑盒，包括緩沖液、沉淀劑和添加劑，其特征在于 成分組成如下表序號(hào)緩沖液pH沉淀劑添加劑Al0.1 M檸檬酸ρΗ3·535% ν/ν PEG 4000.2M硫酸銨A20.1M檸檬酸鈉--檸檬酸ρΗ4.540% ν/ν PEG 4000.2M硫酸銨A30.1M2,2-雙二羥甲基苯胺pH 5.535% ν/ν PEG 4000.1M硫酸銨A40.1M哌嗪-N, N-雙(2-乙磺 酸)pH 6.540% ν/ν PEG 4000.1M硫酸銨A50.1M咪唑-鹽酸ρΗ7.535% ν/ν PEG 4000.1M硫酸鉸A60.1M N，N-雙(2-羥乙基)甘氨 酸pH 8.540% ν/ν PEG 4000.2M硫酸銨A70.1M檸檬酸鈉--檸檬酸ρΗ3.5AOVovh PEG 550 MME0.2M 1,6-己二醇A80.1M檸檬酸鈉--檸檬酸ρΗ4.530% ν/ν PEG 550 MME0.1 M硫腈酸鉀A90. IM雙二羥甲基苯胺ρΗ5.530% ν/ν PEG 550 MME0.05 M無(wú)水氯化鈣AlO0. IM 2,2-雙二羥甲基苯胺ρΗ6.630% ν/ν PEG 550 MME0.05 M無(wú)水氯化鈣All0.1M哌嗪-N, N-雙(2-乙磺 酸)ρΗ6.530% ν/ν PEG 550 MME0.2 M無(wú)水氯化 丐A120.1M咪唑-鹽酸ρΗ7.540% ν/ν PEG 550 MME0.1 M無(wú)水氯化鈣Bl0.1M檸檬酸ρΗ3.530% w/v PEG 10000.2 M 一水硫酸鋰B20.1M檸檬酸鈉--檸檬酸ρΗ4.535% w/v PEG 10000.1 M 一水硫酸鋰B30. IM 2,2-雙―羥甲基苯胺ρΗ5.530% w/v PEG 10000.2 M 一水硫酸鋰B40.1M哌嗪-N，N-雙(2-乙磺 酸)ρΗ6.535% w/v PEG 10000.1 M 一水硫酸鋰-B50.1 M咪唑-鹽酸ρΗ 7.530% w/v PEG 10000.2 M 一水硫酸鋰B60.1M N，N-雙(2-羥乙基)甘氨 酸ρΗ8.535% w/v PEG 10000.1 M 一水硫酸鋰B70.1M檸檬酸鈉--檸檬酸ρΗ3.530% w/v PEG 20000.4M氯化鈉B80.1M檸檬酸鈉--檸檬酸ρΗ4.535% w/v PEG 20000.2M氯化鈉B90.1M2,2-雙二羥甲基苯胺ρΗ5.530% w/v PEG 20000.4M氯化鈉BlO0.1M哌嗪-N, N-雙(2-乙磺 酸)ρΗ6.535% w/v PEG 20000.2M氯化鈉B110.1M咪唑-鹽酸ρΗ7.530% w/v PEG 20000.4M氯化鈉B120.1M N,N-雙(2-羥乙基)甘氨 酸ρΗ8.535% w/v PEG 20000.2M氯化鈉Cl30% w/v PEG 2000 MME0.1 M硫氰酸鉀C230% w/v PEG 2000 MME0.15 M溴化鉀C330% w/v PEG 2000 MME0.2M氯化鉀C40.1M檸檬酸鈉--檸檬酸ρΗ3.535% w/v PEG 2000 MMEC50.05M磷酸氫二鈉/磷酸二氫 鈉ρΗ7.035% w/v PEG 2000 MMEC60.1M N,N-雙(2-羥乙基)甘氨 酸ρΗ8.535% w/v PEG 2000 MME
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的蛋白質(zhì)結(jié)晶篩選的96條件試劑盒，其特征在于所述沉淀劑 是 PEG4000、PEG6000、PEG8000、PEG3350、PEG400、PEG 1000、PEG2000、PEG10000、PEG2000、 PEG 550MME、PEG 2000MME、PEG 5000MME、硫酸銨、2-甲基-2，4 戊二醇或 Tacsimate 的任一 種。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的蛋白質(zhì)結(jié)晶篩選的96條件試劑盒，其特征在于所述添加劑 是一價(jià)鹽、二價(jià)鹽、三價(jià)鹽、己二醇或乙二胺四乙酸的任一種。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的蛋白質(zhì)結(jié)晶篩選的96條件試劑盒，其特征在于所述緩沖液 是2，2_雙二羥甲基苯胺、咪唑-鹽酸、檸檬酸鈉-檸檬酸、N，N-雙(2-羥乙基)甘氨酸、三 羥甲基氨基甲烷或哌嗪-N，N-雙乙磺酸)的任一種。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種蛋白質(zhì)結(jié)晶篩選的96條件試劑盒，用于解決現(xiàn)有的現(xiàn)有的96條件篩選試劑盒在蛋白質(zhì)結(jié)晶條件篩選中成功率低的技術(shù)問(wèn)題。技術(shù)方案是以聚乙二醇系列作為主要沉淀劑用于蛋白質(zhì)結(jié)晶篩選96條件試劑盒，本試劑盒所選PEG種類(lèi)覆蓋齊全，分子量從400到20000，而且還包括聚乙二醇單甲醚550、2000、5000，同時(shí)還包括了幾種成功率較高的鹽類(lèi)如丙二酸鈉，2-甲基-2，4戊二醇，增加了結(jié)晶的可能性，提高了蛋白質(zhì)結(jié)晶條件篩選成功率。
文檔編號(hào)C07K1/30GK102060907SQ20101053552
公開(kāi)日2011年5月18日 申請(qǐng)日期2010年11月4日 優(yōu)先權(quán)日2010年11月4日
發(fā)明者尹大川, 張仙芳 申請(qǐng)人:西北工業(yè)大學(xué)