專利名稱：一種糖肽類化合物的純化方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于糖肽類化合物領(lǐng)域，具體地說，涉及一種糖肽類化合物的純化方法。
背景技術(shù)：
現(xiàn)有糖肽類化合物一般采用反相硅膠或者葡聚糖凝膠作為介質(zhì)進(jìn)行純化制備，其 中，應(yīng)用最廣的反相硅膠是C18，即將樣品粗分后，溶于水溶液(或者含有機(jī)溶劑的水溶液) 中，以能與水互溶的有機(jī)溶劑水溶液(或含緩沖鹽的水溶液)作為洗脫劑，解吸液經(jīng)脫鹽等 后處理、干燥得到純品。這種方法由于存在成本較高、收率低、不可逆吸附嚴(yán)重、介質(zhì)耐受性 差等缺陷，一般只能用于實(shí)驗(yàn)室少量樣品的制備。工業(yè)化生產(chǎn)中應(yīng)用較多的是采用葡聚糖凝膠作為介質(zhì)進(jìn)行純化制備，如專利號 為200310109688. 9的中國發(fā)明專利中使用G-15純化去甲萬古霉素，就是先將樣品濃縮至 20000 30000 μ g/ml，再過G-15，以磷酸水溶液解吸，解吸液pH值調(diào)至7. 0 7. 4，過濾， 濾餅以鹽酸水溶液溶解后加丙酮結(jié)晶、過濾、洗滌、脫鹽、干燥等步驟，得到純品。不過葡聚 糖凝膠存在在不同溶劑中溶脹系數(shù)相差較大，分辨率不高，且在解吸時拖尾嚴(yán)重，解吸速度 過慢等缺陷，也不是一種理想的制備工藝。因此，有必要提供一種新的糖肽類化合物的純化方法，以用于糖肽類化合物的實(shí) 驗(yàn)室少量樣品制備和工業(yè)化生產(chǎn)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的就在于克服現(xiàn)有糖肽類化合物純化工藝所存在的缺點(diǎn)和不足，從而 提供一種糖肽類化合物的純化方法，以有效提高目的組分的品質(zhì)，縮短純化周期，減少收率 損失。本發(fā)明的糖肽類化合物的純化方法包括以下步驟A)將所述糖肽類化合物水溶液上樣至反相聚合物填料Uni PS ；B)使用體積百分比為1-10%的甲醇水溶液作為預(yù)洗溶液進(jìn)行預(yù)洗；C)使用體積百分比為5-20%的甲醇水溶液作為洗脫溶液進(jìn)行洗脫。根據(jù)本發(fā)明的一個優(yōu)選實(shí)施例，使用的反相聚合物填料Uni PS為Uni PS25-300 或 UniPS40-300。根據(jù)本發(fā)明的一個優(yōu)選實(shí)施例，使用的洗脫溶液中含0-0. 01% HCl0根據(jù)本發(fā)明的一個優(yōu)選實(shí)施例，使用的糖肽類化合物為經(jīng)過粗純的糖肽類化合 物。根據(jù)本發(fā)明的一個優(yōu)選實(shí)施例，還包括將獲得的洗脫液濃縮干燥的步驟。本發(fā)明還有一個目的在于，提供反相聚合物填料Uni PS用于純化糖肽類化合物的應(yīng)用。根據(jù)本發(fā)明的一個優(yōu)選實(shí)施例，使用的反相聚合物填料Uni PS為Uni PS25-300 或 UniPS40-300。3
使用本發(fā)明的純化方法，可有效提高糖肽類化合物目的組分的品質(zhì)，縮短純化周 期，減少收率損失，而且該方法不僅可以用于糖肽類化合物在實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行少量樣品的制備， 還能應(yīng)用于糖肽類化合物的工業(yè)化生產(chǎn)。
具體實(shí)施例方式以下結(jié)合具體實(shí)施例，對本發(fā)明作進(jìn)一步說明。應(yīng)理解，以下實(shí)施例僅用于說明本 發(fā)明而非用于限定本發(fā)明的范圍。在本發(fā)明的下述實(shí)施例中，使用的凝膠型陽離子交換樹脂001 X 4購自上海華震 科技有限公司，大孔吸附樹脂XAD-1600購自Rohm & Haas，反相聚合物填料Uni PS25-300 購自蘇州納微科技有限公司。在本發(fā)明的下述實(shí)施例中，使用的洗脫溶液和預(yù)洗溶液的濃度百分比均為體積百 分比。在本發(fā)明的下述實(shí)施例中，使用的化合物1-8的主體結(jié)構(gòu)如結(jié)構(gòu)式(I)所示，其相 應(yīng)的取代基R1-R6分別如表1所示
權(quán)利要求
1.一種糖肽類化合物的純化方法，其特征在于包括以下步驟A)將所述糖肽類化合物水溶液上樣至反相聚合物填料UniPS；B)使用體積百分比為1-10%的甲醇水溶液作為預(yù)洗溶液進(jìn)行預(yù)洗；C)使用體積百分比為5-20%的甲醇水溶液作為洗脫溶液進(jìn)行洗脫。
2.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述反相聚合物填料UniPS為Uni PS25-300 或 Uni PS40-300。
3.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述洗脫溶液中還含有HCl。
4.如權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于，所述HCl的濃度為0-0.01%。
5.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述預(yù)洗溶液的流速為1-3倍柱體積/小時。
6.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述洗脫溶液的流速為2-3倍柱體積/小時。
7.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述糖肽類化合物為經(jīng)過粗純的糖肽類化 合物。
8.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述糖肽類化合物包括萬古霉素類化合物。
9.如權(quán)利要求8所述的方法，其特征在于，所述萬古霉素類化合物包括萬古霉素、N-去 甲萬古霉素、6位萬古糖胺三糖萬古霉素、6位萬古糖胺單糖萬古霉素、無氯萬古霉素、N-甲 基萬古霉素、4位葡萄糖單糖萬古霉素、無糖萬古霉素。
10.如權(quán)利要求1-9中任一項(xiàng)所述的方法，其特征在于，所述方法還包括收集洗脫液和 將洗脫液濃縮干燥的步驟。
11.反相聚合物填料UniPS用于純化糖肽類化合物的應(yīng)用。
12.如權(quán)利要求11所述的應(yīng)用，其特征在于，所述反相聚合物填料UniPS為Uni PS25-300 或 Uni PS40-300。
13.如權(quán)利要求11所述的應(yīng)用，其特征在于，所述糖肽類化合物為經(jīng)過粗純的糖肽類 化合物。
14.如權(quán)利要求11所述的應(yīng)用，其特征在于，所述糖肽類化合物包括萬古霉素類化合物。
15.如權(quán)利要求14所述的應(yīng)用，其特征在于，所述萬古霉素類化合物包括萬古霉素、 N-去甲萬古霉素、6位萬古糖胺三糖萬古霉素、6位萬古糖胺單糖萬古霉素、無氯萬古霉素、 N-甲基萬古霉素、4位葡萄糖單糖萬古霉素、無糖萬古霉素。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種糖肽類化合物的純化方法，該方法包括以下步驟A)將糖肽類化合物水溶液上樣至反相聚合物填料Uni PS；B)使用預(yù)洗溶液預(yù)洗；C)以洗脫溶液洗脫。使用本發(fā)明提供的方法，可有效提高糖肽類化合物目的組分的品質(zhì)，縮短純化周期，減少收率損失，且該方法不僅可以用于糖肽類化合物在實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行少量樣品的制備，還能應(yīng)用于糖肽類化合物的工業(yè)化生產(chǎn)。
文檔編號C07K9/00GK102050866SQ200910198279
公開日2011年5月11日 申請日期2009年11月4日 優(yōu)先權(quán)日2009年11月4日
發(fā)明者夏興, 戈梅, 朱麗, 李秋爽, 阮林高, 陳代杰 申請人:上海來益生物藥物研究開發(fā)中心有限責(zé)任公司