專利名稱：偶聯(lián)試劑盒的制作方法
技術(shù)領域：
本試劑盒是一種使用活化載體及配套試劑組成。該試劑盒主要用于親和純化、固定化蛋 白和固定化酶領域。
背景技術(shù)：
眾所周知載體與配體的偶聯(lián)在親和純化、固定化蛋白和固定化酶領域處于一個核心的位 置。而現(xiàn)在市面上的活化載體主要由國外壟斷，并且以溴化氰或者環(huán)氧氯丙垸活化為主，而 溴化氰有劇毒，為了環(huán)境和人身的安全，操作非常的困難和麻煩，并且對設備要求較高，材 料難以制備和保存，副反應也多，結(jié)合不牢，制備的產(chǎn)品所純化的產(chǎn)物雜質(zhì)較多。而環(huán)氧氯 丙烷活化要在極端pH值下進行，效率極低，反應率最高只有20%，反應時間多達幾天。因 為沒有試劑盒產(chǎn)品，所以這些活化載體，都需要使用者自行配置一系列各種各樣的緩沖液， 操作繁雜，且都需要封閉反應，故對使用者的實驗室條件、操作熟練度、實驗素養(yǎng)提出較高 的要求，并且操作時間過長，導致效率降低且易造成實驗材料的浪費。該領域沒有出現(xiàn)過集 成的偶聯(lián)試劑盒來提高效率。

發(fā)明內(nèi)容
為克服常規(guī)的活化載體的缺點，本發(fā)明提供了一種操作簡易、反應迅速、不需封閉步驟、 反應效率高的試劑盒，使原來的3到5步操作、l到3天反應時間，縮短到i歩操作和幾小 時反應時間，反應率相對環(huán)氧氯丙烷法提高4到5倍。對實驗室條件、操作熟練度、試驗素 養(yǎng)要求較低，可減少培訓時間、降低勞動強度和降低試驗成本，使得親和層析、固定化酶技 術(shù)能廣泛應用，并且能應用于各級科研院所。
本發(fā)明的目的還在于提供這種試劑盒的生產(chǎn)方法。
為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供一種活化載體與配套緩沖體系結(jié)合方式，是一種能適應試 劑盒類產(chǎn)品使用方便、快速的發(fā)展趨勢的試劑盒。該試劑盒含有活化載體、配套緩沖體系， 其中辨化載體可以是豫基二咪唑活化的含羥基或,基或氨基的水不溶性物質(zhì)以及他們的交聯(lián)., 衍生il。配套緩沖體系為pH值在8到12之間的含碳酸鹽或硼酸鹽的緩沖體系，它可以是反 應使用的溶液，濃縮液或者固體。
更具體的說，該方法包含如下步驟
a. 取一份活化的載體，置于適當?shù)娜萜髦小?br> b. 取0. 01mol/L到0. 5mol/L碳酸氫鈉溶液，用0. 01mol/L到0. 5mol/L碳酸鈉^液調(diào)節(jié) pH值到8到12。也可以用0. 01raol/L到0. 5mol/L硼酸鹽緩沖替代，或按比例制成濃 縮液或固體。
c. 加入0到2mol/L的氯化鈉或其他中性鹽，此即為緩沖體系。
d. —份體積的活化載體配適量緩沖體系，包裝后即成此試劑盒。該發(fā)明彌補了常規(guī)活化載體的操作復雜、反應效率低、需要時間長的缺陷，提高了勞動 生產(chǎn)率和減低了難度，使原來的3到5步操作、l到3天反應時間，縮短到l步操作和幾小 時反應時間。并且提高了載體的利用率，反應率相對環(huán)氧氯丙烷法提高4到5倍。
具體實施例方式
下列實施例是對本發(fā)明的進一步解釋和說明，對本發(fā)明不構(gòu)成任何限制。 實施例1
取羧基苯乙烯lg，放入含20%乙醇的羰基二咪唑飽和溶液中，磁力攪拌8小時后，濾去 羰基二咪唑溶液，無菌氮氣吹干，裝瓶。取lOOmLO. lmol/L碳酸氫鈉溶液裝瓶，即可。使用 時把配體溶于碳酸氫鈉溶液中，投入活化羧基苯乙烯，磁力攪拌過夜后，即可得到偶聯(lián)配體 的載體。
權(quán)利要求
1.一種偶聯(lián)試劑盒及其制作方法，包括活化載體的選擇，配套緩沖體系的配制。其特征是活化載體與配套緩沖體系兩種主要部件和附屬部件構(gòu)成。其中活化載體的范圍是羰基二咪唑活化的含羥基或羧基或氨基的水不溶性物質(zhì)以及他們的交聯(lián)衍生物。其中配套緩沖體系為pH值在8到12之間的含碳酸鹽或硼酸鹽的緩沖體系。
2. 根據(jù)權(quán)利1所要求的偶聯(lián)試劑盒的活化載體，其特征在于含羥基或羧基或氨基的水不溶性物質(zhì)及其互相交聯(lián)產(chǎn)物或交聯(lián)于更牢固的載體上所得產(chǎn)物，經(jīng)羰基二咪唑活化后得到的活化 載體，其形態(tài)可為粉狀、小球狀、膜狀、管狀、柱狀。
3. 根據(jù)權(quán)利1所要求的偶聯(lián)試劑盒的緩沖體系，其特征在于含碳酸鹽或硼酸鹽，pH在8到12 之間。可以是工作液也可以是濃縮液或者固體，其最后用于反應時pH在8到12之間。該緩 沖體系的工作溶液的體積或重量不小于載體體積或重量的一半。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種使用活化載體及配套試劑生產(chǎn)一種偶聯(lián)試劑盒的方法，該試劑盒操作簡單，反應迅速，反應效率高，不需要常規(guī)活化載體需要的封閉步驟，達到減少培訓時間和勞動強度的效果。該試劑盒主要用于親和純化、固定化蛋白和固定化酶領域。
文檔編號C07K17/00GK101575378SQ20091011406
公開日2009年11月11日 申請日期2009年5月15日 優(yōu)先權(quán)日2009年5月15日
發(fā)明者凡 吳 申請人:凡 吳