專利名稱：：具有增加的脅迫耐受性和產(chǎn)量的轉(zhuǎn)基因植物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：—般而言，本發(fā)明涉及過量表達編碼下述多肽的核酸序列的轉(zhuǎn)基因植物，所述多肽能在正?；蚍巧锩{迫條件下賦予增加的脅迫耐受性以及由此增加的植物生長和作物產(chǎn)量。此外，本發(fā)明涉及新穎的經(jīng)分離的編碼下述多肽的核酸序列，所述多肽向植物賦予非生物脅迫條件下，增加的耐受性，和/或，正常或非生物脅迫條件下，增加的植物生長和/或增加的產(chǎn)量。
背景技術(shù)：
：非生物環(huán)境脅迫，例如干旱、鹽度、熱和冷，是植物生長和作物產(chǎn)量的主要限制性因素。作物產(chǎn)量在本文中被定義為每英畝收獲的相關(guān)農(nóng)業(yè)產(chǎn)品(例如谷粒(grain)、草料(forage)或種子)的蒲式耳數(shù)量。這些脅迫導致的多種作物(例如大豆、稻、玉米(玉蜀黍)、棉花和小麥)的作物損失和作物產(chǎn)量損失是顯著的經(jīng)濟和政治因素，它們在很多非發(fā)達國家導致食品短缺。水可利用性是非生物脅迫及其對植物生長的影響的重要方面。持續(xù)暴露給干旱條件導致植物代謝的重大改變，這最終引起細胞死亡以及由此導致產(chǎn)量損失。因為一些土壤中的高鹽含量導致細胞可攝入的水較少，高鹽濃度對植物產(chǎn)生類似于干旱對植物的影響。此外，在冷凍的溫度下，由于植物內(nèi)形成冰，植物細胞丟失水。因此，干旱、熱、鹽度和冷脅迫導致的作物損傷主要都是由于脫水導致的。因為植物在其生命周期期間一般暴露給水可利用性降低的環(huán)境，大多數(shù)植物都進化出了針對非生物脅迫導致的干燥的保護性機制。但是，如果干燥條件的嚴重性太高以及持續(xù)時間太長的話，對大多數(shù)作物植物的發(fā)育、生長、植物尺寸和產(chǎn)量會有很大影響。因此，開發(fā)有效使用水的植物是可能能在世界范圍內(nèi)顯著改進人類生活的策略。傳統(tǒng)植物育種策略相對較慢，并且需要非生物脅迫耐受的基礎(chǔ)品系與其它種質(zhì)雜交，以開發(fā)新的非生物脅迫抗性品系。對于此類基礎(chǔ)品系來說有限的種質(zhì)來源以及遠族相關(guān)的植物物種之間雜交的不相容性代表了傳統(tǒng)育種中遇到的顯著問題。針對耐受性的育種還遠未成功。很多農(nóng)業(yè)生物技術(shù)公司已試圖鑒定能賦予對非生物脅迫應答的耐受性的基因，努力開發(fā)轉(zhuǎn)基因的非生物脅迫耐受性作物植物。雖然涉及植物中脅迫應答或水分利用效率的一些基因已被分析，但是，對賦予脅迫耐受性和/或水分利用效率的植物基因的分析和克隆仍相當不完全，還僅是碎片式的。迄今為止，在開發(fā)轉(zhuǎn)基因非生物脅迫耐受性作物植物上取得的成功是有限的，還沒有此類植物被商品化。為了開發(fā)轉(zhuǎn)基因非生物脅迫耐受性的作物植物，必須要在模式植物系統(tǒng)、作物植物的溫室研究和田間試驗中檢驗多個參數(shù)。例如，水分利用效率(WUE)是通常與干旱耐受性相關(guān)的參數(shù)。對植物對干燥、滲壓震擾和極端溫度的應答的研究也被用于測定植物對非生物脅迫的耐受性或抗性。當針對轉(zhuǎn)基因的存在對植物的脅迫耐受性的影響加以測試時，對土壤性質(zhì)、溫度、水和養(yǎng)分利用率以及光強度進行標準化的能力是溫室或植物生長室環(huán)境較之田間的固有優(yōu)勢。WUE已通過多種途徑被定義和測量。一種手段是計算整株植物干重與植物生命期間消耗的水的重量之比。另一變化是當測量生物量積累和水分利用時，采用較短的時間間隔。還一手段使用來自植物的局限部份的測量，例如，僅測量地上部分的生長和水分利用。WUE還被定義為來自葉或葉的部分的C(^攝取與水蒸氣損失的比例，這通常在非常短的時間期間上測量(例如數(shù)秒/數(shù)分鐘)。用同位素比質(zhì)譜儀測量的植物組織中固定的13C/12C的比例也被用于評估利用C3光合作用的植物中的WUE。WUE的增加指示生長和水消耗相對提高的效率，但是該信息單獨采用時并不能表明這兩種過程中的一種改變或者兩者都改變。在選擇用于改善作物的性狀時，由于水分利用減少導致的WUE增加(生長不改變)將在水輸入費用較高的灌溉農(nóng)業(yè)系統(tǒng)中具有特別的益處。主要由于生長增加驅(qū)動的WUE增加(而沒有相應的水分利用躍增)將可用于所有農(nóng)業(yè)系統(tǒng)。在水供應不受限的很多農(nóng)業(yè)系統(tǒng)中，生長的增加，即使其隨著水分利用的增加花費(即，WUE無改變)，也可增加產(chǎn)量。因此，需要增加WUE和生物量積累兩者的新方法來改善農(nóng)業(yè)生產(chǎn)力。伴隨對與非生物脅迫耐受性相關(guān)的參數(shù)的測量，還測量指示轉(zhuǎn)基因?qū)ψ魑锂a(chǎn)量的潛在影響的參數(shù)。對于葉類作物，例如，苜蓿、青貯玉米和干草而言，植物生物量與總產(chǎn)量相關(guān)。但是對于谷粒作物而言，已用其它參數(shù)來估計產(chǎn)量，例如植物尺寸(通過總的植物干重測量)、地上部分干重、地上部分鮮重、葉面積、莖體積、植物高度、蓮座直徑、葉長度、根長度、根量、分蘗數(shù)量和葉數(shù)量。通常，早期發(fā)育階段的植物尺寸將與發(fā)育晚期的植物尺寸相關(guān)。通常，具有較大葉面積的較大植物可比較小的植物吸收更多的光和二氧化碳，因此在相同期間可能獲得更多的重量。除了可能的微環(huán)境持續(xù)或遺傳優(yōu)點之外，植物必須最初就獲得較大的尺寸。植物尺寸和生長速率存在強烈的遺傳因素，因此對于一系列多種基因型而言，一種環(huán)境條件下的植物尺寸可能與另一種條件下的尺寸相關(guān)。以這種方式，用標準環(huán)境來近似田間作物在不同位置和時間遇到的多樣的和動態(tài)的環(huán)境。收獲指數(shù)——種子產(chǎn)量與地上部分干重之比，在很多環(huán)境條件下都相對穩(wěn)定，因此植物尺寸和谷粒產(chǎn)量之間可能強相關(guān)。植物尺寸和谷粒產(chǎn)量內(nèi)在聯(lián)系，因為谷粒生物量中的大部分都依賴于植物莖葉流動或貯藏的光合作用生產(chǎn)力。因此，已經(jīng)通過選擇植物尺寸(甚至是在發(fā)育早期階段)來篩選出暴露給田間測試時可能展示出增加的產(chǎn)量的植物。至于非生物脅迫耐受性，生長室或溫室中標準條件下對早期發(fā)育時的植物尺寸的測量是測量轉(zhuǎn)基因的存在所賦予的可能的產(chǎn)量優(yōu)點的標準實踐。因此，人們需要鑒定出在脅迫耐受性植物和/或在使用水中有效的植物中表達的其它基因，它們能向宿主植物和其它植物物種賦予脅迫耐受性和/或增加的水分利用效率。新產(chǎn)生的脅迫耐受性植物和/或具有增加的水分利用效率的植物將具有很多優(yōu)點，例如，可種植作物植物的范圍增加，例如通過減少植物物種的水需求而實現(xiàn)。其它想要的優(yōu)點包括增加的對枝條或莖應答于風、雨、害蟲或疾病的倒伏、彎曲的抗性。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明已經(jīng)公開用某些多核苷酸轉(zhuǎn)化植物，當所述多核苷酸作為轉(zhuǎn)基因存在于植物中時，導致植物生長和對環(huán)境脅迫的應答增強，因而增加了植物的農(nóng)業(yè)產(chǎn)品的產(chǎn)量。能介導此類增強的多核苷酸已從擬南芥(Arabidopsisthaliana)、辣椒(C即sic咖a皿皿m)、大腸桿菌(Escherichiacoli)、小立碗蘚(Physcomitrellapatens)、酉良酒酵母(Saccharomycescerevisiae)、小麥(Triticumaestivum)、玉米(Zeamays)、大豆(Glycinemax)、亞麻(Li皿musitatissimum)、小麥、禾舀(0ryzasativa)、向曰葵(Helianthusann皿s)和歐洲油菜(Brassicanapus)分離，其序列在表1所示的序列表中示出。表l<table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>在一種實施方式中，本發(fā)明提供了經(jīng)包含經(jīng)分離的下述多核苷酸的表達盒轉(zhuǎn)化的轉(zhuǎn)基因植物，所述多核苷酸編碼CAAX氨基末端蛋白酶家族的蛋白。在另一實施方式中，本發(fā)明提供了經(jīng)包含經(jīng)分離的下述多核苷酸的表達盒轉(zhuǎn)化的轉(zhuǎn)基因植物，所述多核苷酸編碼異戊二烯基依賴性CAAX蛋白酶。在另一實施方式中，本發(fā)明提供了經(jīng)包含經(jīng)分離的下述多核苷酸的表達盒轉(zhuǎn)化的轉(zhuǎn)基因植物，所述多核苷酸編碼SAR8.2蛋白前體。在另一實施方式中，本發(fā)明提供了經(jīng)包含經(jīng)分離的下述多核苷酸的表達盒轉(zhuǎn)化的轉(zhuǎn)基因植物，所述多核苷酸編碼推定的膜蛋白。在另一實施方式中，本發(fā)明提供了經(jīng)包含經(jīng)分離的下述多核苷酸的表達盒轉(zhuǎn)化的轉(zhuǎn)基因植物，所述多核苷酸編碼蛋白磷酸酶2C蛋白。在另一實施方式中，本發(fā)明提供了經(jīng)包含經(jīng)分離的下述多核苷酸的表達盒轉(zhuǎn)化的轉(zhuǎn)基因植物，所述多核苷酸編碼線粒體載體蛋白。在另一實施方式中，本發(fā)明提供了經(jīng)包含經(jīng)分離的下述多核苷酸的表達盒轉(zhuǎn)化的轉(zhuǎn)基因植物，所述多核苷酸編碼蛋白激酶。在另一實施方式中，本發(fā)明提供了經(jīng)包含經(jīng)分離的下述多核苷酸的表達盒轉(zhuǎn)化的轉(zhuǎn)基因植物，所述多核苷酸編碼肽基脯氨酸異構(gòu)酶。在另一實施方式中，本發(fā)明提供了經(jīng)包含經(jīng)分離的下述多核苷酸的表達盒轉(zhuǎn)化的轉(zhuǎn)基因植物，所述多核苷酸編碼未知蛋白1。在另一實施方式中，本發(fā)明提供了經(jīng)包含經(jīng)分離的下述多核苷酸的表達盒轉(zhuǎn)化的轉(zhuǎn)基因植物，所述多核苷酸編碼未知蛋白2。在另一實施方式中，本發(fā)明提供了經(jīng)包含經(jīng)分離的下述多核苷酸的表達盒轉(zhuǎn)化的轉(zhuǎn)基因植物，所述多核苷酸編碼鳥氨酸脫羧酶。在另一實施方式中，本發(fā)明提供了經(jīng)包含經(jīng)分離的下述多核苷酸的表達盒轉(zhuǎn)化的轉(zhuǎn)基因植物，所述多核苷酸編碼谷胱甘肽還原酶。在另一實施方式中，本發(fā)明提供了經(jīng)包含經(jīng)分離的下述多核苷酸的表達盒轉(zhuǎn)化的轉(zhuǎn)基因植物，所述多核苷酸編碼未知蛋白3。在另一實施方式中，本發(fā)明提供了經(jīng)包含經(jīng)分離的下述多核苷酸的表達盒轉(zhuǎn)化的轉(zhuǎn)基因植物，所述多核苷酸編碼蛋白磷酸酶2A蛋白。在另一實施方式中，本發(fā)明提供了經(jīng)包含經(jīng)分離的下述多核苷酸的表達盒轉(zhuǎn)化的轉(zhuǎn)基因植物，所述多核苷酸編碼MEK1蛋白激酶。在另一實施方式中，本發(fā)明提供了經(jīng)包含經(jīng)分離的下述多核苷酸的表達盒轉(zhuǎn)化的轉(zhuǎn)基因植物，所述多核苷酸編碼含AP2結(jié)構(gòu)域的轉(zhuǎn)錄因子。在又一實施方式中，本發(fā)明涉及通過本發(fā)明的轉(zhuǎn)基因植物產(chǎn)生的種子，其中，種子是針對包含上文所述的多核苷酸的轉(zhuǎn)基因的純育。在正?；蛎{迫條件下，較之植物的野生型品種而言，源于本發(fā)明的種子的植物展示出對環(huán)境脅迫的增加的耐受性和/或增加的植物生長和/或增加的產(chǎn)量。在還一方面，本發(fā)明涉及通過或從本發(fā)明的轉(zhuǎn)基因植物、其植物部分或其種子生產(chǎn)的產(chǎn)品，例如，食物、飼料、食物補充物、飼料補充物、化妝品或藥物。本發(fā)明還提供了表1中鑒定的某些經(jīng)分離的多核苷酸以及表1中鑒定的某些經(jīng)分離的多肽。本發(fā)明還涉及包含本發(fā)明的經(jīng)分離多核苷酸的重組載體。在又一實施方式中，本發(fā)明關(guān)注生產(chǎn)前述轉(zhuǎn)基因植物的方法，其中所述方法包括用包含本發(fā)明的經(jīng)分離的多核苷酸的表達載體轉(zhuǎn)化植物細胞，以及從植物細胞產(chǎn)生表達所述多核苷酸編碼的多肽的轉(zhuǎn)基因植物。所述多肽在植物中的表達導致在正常和/或脅迫條件下較之植物的野生型品種而言對環(huán)境脅迫的耐受性和/或生長和/或產(chǎn)量增加。在另一實施方式中，本發(fā)明提供了增加植物對環(huán)境脅迫的耐受性和/或生長和/或產(chǎn)量的方法。所述方法包括下述步驟用包含本發(fā)明的經(jīng)分離的多核苷酸的表達盒轉(zhuǎn)化植物細胞，以及從植物細胞產(chǎn)生轉(zhuǎn)基因植物，其中所述轉(zhuǎn)基因植物包含所述多核苷酸。附圖簡述圖1顯示了對公開的氨基酸序列At-FACE-2(SEQIDNO:6)、ZM57353913(SEQIDNO:8)和ZM59252659(SEQIDNO:10)的比對。比對是使用VectorNTI的AlignX產(chǎn)生的。甚本承。"墓軀，，胡^躲革執(zhí)普^丫t魂鴣扭^'嵐《串目胡W躲胡暮暴晉瞎土緣軀^W^承'棟疑祉目魂扭^胡墓軀盈雖胡斜班瞎一胡^軀普T^讓s膽^躲革執(zhí)^士扭畓頃。嵐《w^^翳罷te、iwg(胡w祖g(rai奪產(chǎn)軍班'茈挲來絲^短一胡[ti斜+毋胡y扭^，班承扭^普D'w躲胡躲瞎3扭一《丟阜w^哲。tf《扭^^但:^楚勝:^鄰蔬w胡y扭蹄資封W3^H5執(zhí)彩巡'頂蹄肆胡茈執(zhí)革専itfy扭蹄^"扭^，，資氺'W封淑^^本承["oo]。図奪轉(zhuǎn)胡図奪轉(zhuǎn)胡邈縣輯多嵐《孫胡彩巡^本琴每普土浙班每但勞百浙'胡墓^躲聽^墓土躲聽普ra但蹄肆図奪轉(zhuǎn)胡能甚本。翁i班、r/、棟3r斜i班、斜is、涼頂紛攀、將3涼頂帀《、迎、+。、'凝'聽、翁迎、褂、^'i翻土D班每《腺蹄肆?！断偬闼羷僖?guī)瞎蹄肆、蹄肆躲a班每^蹄肆，，資氺'扭封淑^^本承°邈輯胡^蹄肆士承#土來本、胡嵐《孫阜琴楚餘淑'裂期丄^薪楚扭氺躲wa頂軍封淑g'蹄肆胡斜班普"蹄肆図奪轉(zhuǎn)，，'l革胡^:^本賄"soo]。呢謝暮^胡^^l艱關(guān)繼腔呢謝胡4帀蹄肆凝昔但翌擎暮，胡^蹄肆承鍋輯胡^《孫^浙'土甜勞眾佛^^HT^'皐膽扭^蔬審強胡蹄肆7逸'W黎王I。^吝鵬胡呢謝胡眾佛翁必扭阜膽扭^蔬帀強胡蹄肆7逸w^暫蹄肆図奪轉(zhuǎn)胡能甚本。蹄肆図奪轉(zhuǎn)胡蹄激留楚^邈縣輯多胡嵐《孫胡革箭^t挲翌挲暮，丄掛群能甚本'^￥《軀籠扭一承[osoo]。規(guī)瞎+—《丟封淑但g擎但"規(guī)瞎，，瞎群'fl《歸'浙図°^土丁胡封^巡^士￥,迪班'扭/+多^+—*挲但("UB，，^"B，，)"扭/小一，，'扭封淑^^本承。蹄翻ra呢被蔓非膽'胡目胡:^^軀籠革執(zhí)彩掛丄《普xn^資氺胡封淑^^本。翠w胡將敏彩巡能甚本教彌wag^ra'熟由本Y浙斜a封ife，班腺禪^^奪短軀胡瞎群^禪^"《短班￥禪^"《短班阜巡。禪^tf《賞多丄瞎群'^熟由本承[6M)0]彩扭^《軀籠黎H[8M)0]。胡帀^x斷iv胡i丄nj。，a封淑普柳°扭測(oot:onaiQ3S)8869T，89WZ勝(96:onaiQ3S)6ZS898丄艦、(，6:onaiQ3S)MW06T艦、(26:ONaiQ3S)SSSZ0Z6，Z「^sfef鍋奪篤胡M《扭丄g齊9圍[，O]。胡帀^XI丄N"P9A封淑普扭W°扭測(06:ONaiQ3S)090ZnZ9WZ勝(88:0NaiQ3S)SS600，6SWZ、(98:onaiQ3S)6W8S丄^;S0、(，8:onaiQ3S)^6908ZSS0、(Z8:onaiQ3S)ZT9Z99T9ni、(08:onaiQ3S)的6Z丄899VH、(8丄onaiQ3SUZS90ZS州8、(9丄onaiQ3S)6809S8Z州8、(W:ONaiQ3S)W)SZSS89WZ「《sfef鍋奪篤胡M《扭丄g齊S圍[9M)0]。胡帀^X油HV胡I丄NJo^9A封淑普扭W°扭測(09:ONaiQ3S)剛0SZ環(huán)Z、(8S:ONaiQ3S)S6S丄S，S9WZ、(9S:ONaiQ3SnS89Z0Z9WZ、(，S:ONaiQ3S)98TS989SV丄、(ZS:0NaiQ3S)ZS6S99T肌T(0S:ONaiQ3SnSZ丄S3「《謝鍋奪篤胡M《扭丄g齊，圍[SM)O]。胡帀^xiilnjo^9a封淑普扭W。扭W胡(8，ONaiQ3S)9丄ZS丄0Z9WZ勝(9，ONdlQ3S)(U0TS9丄SWZ、(種ONaiQ3S)6^6SnSN8、ONaiQ3S)99068S6州8、(0，ONaiQ3S)9S0986Z州8、(8S:ONaiQ3s)osos9n，g、(9S:onaiQ3s)06as3「《謝鍋奪篤胡M《扭丄g齊s圍[計oo]封淑普扭W。扭W胡(W:0NaiQ3SnS9丄8S89WZ勝(ZS:ONaiQ3Sn%980S9WZ、(OS:ONaiQ3S)6T0TS0Z9WZ、(8Z:onaiQ3S)S8的T0Z9WZ、(9Z:onaiQ3S)SS9Z60T9WZ、(招onaiQ3S)6UZ9，8SWZ、ONaiQ3S)TZ86，0SSM)、(0Z:ONaiQ3S)08088丄6W!3、(8T:ONaiQ3S)99M0S6州g、(9T:ONaiQ3S)的S丄S3「《謝鍋奪篤胡M《扭丄g齊Z圍[SM)O]明中，性狀是從引入植物品種的一種或多種經(jīng)分離的多核苷酸的轉(zhuǎn)基因表達產(chǎn)生的。如還在本文中所使用的，術(shù)語"野生型品種"指這樣作為對照植物針對比較目的對其加以分析的一組植物，其中，野生型品種植物與轉(zhuǎn)基因植物(經(jīng)根據(jù)本發(fā)明的經(jīng)分離的多核苷酸轉(zhuǎn)化的植物)相同，但是，野生型品種植物沒有經(jīng)本發(fā)明的經(jīng)分離的多核苷酸轉(zhuǎn)化。如本文中的定義，術(shù)語"核酸"和"多核苷酸"可相互替換，它們表示直鏈或帶支鏈的、單鏈或雙鏈的RNA或DNA或其雜交體。該術(shù)語還包括RNA/DNA雜交體。"經(jīng)分離的"核酸分子是這樣的其基本上與所述核酸天然來源中存在的其它核酸分子(即，編碼其它多肽的序列)分開。例如，經(jīng)克隆的核酸被認為是經(jīng)分離的。如果核酸已被人為干涉所改變，或者被放在并非其天然位點的基因座或位置上，或者如果其通過轉(zhuǎn)化被引入細胞，核酸就被認為是經(jīng)分離的。此外，經(jīng)分離的核酸分子，例如cDNA分子，當通過重組技術(shù)生產(chǎn)時可不含其天然相關(guān)的一些其它細胞材料，當通過化學合成時，不含化學前體或其它化學品。雖然其任選包括位于基因編碼區(qū)域3'和5'末端的非翻譯序列，但是其優(yōu)選去除了其天然存在的復制子中編碼區(qū)域天然側(cè)翼的序列。在本文中使用時，術(shù)語"環(huán)境脅迫"指與鹽度、干旱、氮、溫度、金屬、化學品、病原性或氧化脅迫或其任何組合相關(guān)的次最優(yōu)條件。術(shù)語"水分利用效率"和"WUE"指植物產(chǎn)生的有機質(zhì)的量除以植物生產(chǎn)有機質(zhì)所使用的水的量，即，植物的干重相對于植物的水分利用。在本文中使用時，術(shù)語"干重"指植物中水之外的所有物質(zhì)，其包括，例如，碳水化合物、蛋白、油和礦物質(zhì)營養(yǎng)物。任何植物物種可被轉(zhuǎn)化，以產(chǎn)生根據(jù)本發(fā)明的轉(zhuǎn)基因植物。本發(fā)明的轉(zhuǎn)基因植物可以是雙子葉植物或單子葉植物。例如，并且并非限制性地，本發(fā)明的轉(zhuǎn)基因植物可源于下述雙子葉植物科中的任何豆科(Leguminosae)，包括豌豆、苜蓿和大豆等植物；傘形科(Umbelliferae)，包括胡蘿卜和芹菜等植物；茄科(Solanaceae)，包括番茄、馬鈴薯、茄子、煙草和胡椒等植物；十字花科(Cruciferae)，特別是蕓苔屬(Brassica)，其包括油菜(oilseedr即e)、甜菜、甘藍、花椰菜和椰菜等植物；以及擬南芥(A.thaliana);菊科(Compositae)，其包括萵苣等植物；錦葵科(Malvaceae)，其包括棉花；豆科(Fabaceae)，其包括花生等植物，等等。本發(fā)明的轉(zhuǎn)基因植物可源于單子葉植物，例如，小麥、大麥、高粱、粟、黑麥、黑小麥、玉米、稻、燕麥和甘蔗。本發(fā)明的轉(zhuǎn)基因植物還包括樹，例如蘋果、梨、榲梓、李、櫻桃、桃、油杉L杏、番木瓜、芒果和其它木本物種，包括松柏類和落葉類的樹，例如楊樹、松、紅杉、雪松、橡樹等。尤其優(yōu)選的是擬南芥、煙草(Nicotianatabacum)、油菜、大豆、玉米(玉蜀黍)、小麥、亞麻、馬鈴薯和萬壽菊。如表1所示，本發(fā)明的一種實施方式是經(jīng)包含經(jīng)分離的下述多核苷酸的表達盒轉(zhuǎn)化的轉(zhuǎn)基因植物，所述多核苷酸編碼CAAX氨基末端蛋白酶家族的蛋白。該實施方式的轉(zhuǎn)基因植物可包含編碼CAAX氨基末端蛋白酶家族的蛋白的任何多核苷酸。該實施方式的轉(zhuǎn)基因植物包含下述多核苷酸，其編碼具有包含SEQIDNO:2的1至301位氨基酸的序列的CAAX氨基末端蛋白酶家族蛋白；以及具有包含SEQIDN0:4的l至293位氨基酸的序列的蛋白。在另一實施方式中，本發(fā)明提供了經(jīng)包含經(jīng)分離的下述多核苷酸的表達盒轉(zhuǎn)化的轉(zhuǎn)基因植物，所述多核苷酸編碼異戊二烯基依賴性CAAX蛋白酶。該實施方式的轉(zhuǎn)基因植物可包含編碼異戊二烯基依賴性CAAX蛋白酶的任何多核苷酸。該實施方式的轉(zhuǎn)基因植物包含下述多核苷酸，其編碼具有包含SEQIDN0:6的l至311位氨基酸的序列的異戊二烯基依賴性CAAX蛋白酶；具有包含SEQIDNO:8的1至313位氨基酸的序列的蛋白；具有包含SEQIDNO:10的1至269位氨基酸的序列的蛋白。在另一實施方式中，本發(fā)明提供了經(jīng)包含經(jīng)分離的下述多核苷酸的表達盒轉(zhuǎn)化的轉(zhuǎn)基因植物，所述多核苷酸編碼SAR8.2蛋白前體。該實施方式的轉(zhuǎn)基因植物可包含編碼SAR8.2蛋白前體的任何多核苷酸。該實施方式的轉(zhuǎn)基因植物包含下述多核苷酸，其編碼具有包含SEQIDNO:12的1至86位氨基酸的序列的SAR8.2蛋白前體。在另一實施方式中，本發(fā)明提供了經(jīng)包含經(jīng)分離的下述多核苷酸的表達盒轉(zhuǎn)化的轉(zhuǎn)基因植物，所述多核苷酸編碼推定的膜蛋白。該實施方式的轉(zhuǎn)基因植物可包含編碼推定的膜蛋白的任何多核苷酸。該實施方式的轉(zhuǎn)基因植物包含下述多核苷酸，其編碼具有包含SEQIDNO:14的1至696位氨基酸的序列的推定的膜蛋白。在另一實施方式中，本發(fā)明提供了經(jīng)包含經(jīng)分離的下述多核苷酸的表達盒轉(zhuǎn)化的轉(zhuǎn)基因植物，所述多核苷酸編碼蛋白磷酸酶2C蛋白。該實施方式的轉(zhuǎn)基因植物可包含編碼蛋白磷酸酶2C蛋白的任何多核苷酸。該實施方式的轉(zhuǎn)基因植物包含下述多核苷酸，其編碼具有包含SEQIDNO:16的1至284位氨基酸的序列的蛋白磷酸酶2C蛋白；具有包含SEQIDNO:18的l至384位氨基酸的序列的蛋白；具有包含SEQIDNO:20的1至346位氨基酸的序列的蛋白；具有包含SEQIDNO:22的1至375位氨基酸的序列的蛋白；具有包含SEQIDNO:24的1至390位氨基酸的序列的蛋白；具有包含SEQIDNO:26的1至398位氨基酸的序列的蛋白；具有包含SEQIDNO:28的1至399位氨基酸的序列的蛋白；具有包含SEQIDNO:30的1至399位氨基酸的序列的蛋白；具有包含SEQIDNO:32的1至399位氨基酸的序列的蛋白；具有包含SEQIDNO:34的1至276位氨基酸的序列的蛋白。在另一實施方式中，本發(fā)明提供了經(jīng)包含經(jīng)分離的下述多核苷酸的表達盒轉(zhuǎn)化的轉(zhuǎn)基因植物，所述多核苷酸編碼線粒體載體蛋白。該實施方式的轉(zhuǎn)基因植物可包含編碼線粒體載體蛋白的任何多核苷酸。該實施方式的轉(zhuǎn)基因植物包含下述多核苷酸，其編碼具有包含SEQIDNO:36的1至303位氨基酸的序列的線粒體載體蛋白；具有包含SEQIDNO:38的1至315位氨基酸的序列的蛋白；具有包含SEQIDNO:40的1至289位氨基酸的序列的蛋白；具有包含SEQIDNO:42的1至303位氨基酸的序列的蛋白；具有包含SEQIDNO:44的1至299位氨基酸的序列的蛋白；具有包含SEQIDNO:46的1至299位氨基酸的序列的蛋白；具有包含SEQIDNO:48的1至311位氨基酸的序列的蛋白。在另一實施方式中，本發(fā)明提供了經(jīng)包含經(jīng)分離的下述多核苷酸的表達盒轉(zhuǎn)化的轉(zhuǎn)基因植物，所述多核苷酸編碼蛋白激酶。該實施方式的轉(zhuǎn)基因植物可包含編碼蛋白激酶的任何多核苷酸。該實施方式的轉(zhuǎn)基因植物包含下述多核苷酸，其編碼具有包含SEQIDNO:50的1至356位氨基酸的序列的蛋白激酶；具有包含SEQIDNO:52的1至364位氨基酸的序列的蛋白；具有包含SEQIDNO:54的1至361位氨基酸的序列的蛋白；具有包含SEQIDNO:56的1至370位氨基酸的序列的蛋白；具有包含SEQIDNO:58的1至377位氨基酸的序列的蛋白；具有包含SEQIDNO:60的1至382位氨基酸的序列的蛋白。在另一實施方式中，本發(fā)明提供了經(jīng)包含經(jīng)分離的下述多核苷酸的表達盒轉(zhuǎn)化的轉(zhuǎn)基因植物，所述多核苷酸編碼肽基脯氨酸異構(gòu)酶。該實施方式的轉(zhuǎn)基因植物可包含編碼肽基脯氨酸異構(gòu)酶的任何多核苷酸。該實施方式的轉(zhuǎn)基因植物包含下述多核苷酸，其編碼具有包含SEQIDNO:62的1至523位氨基酸的序列的肽基脯氨酸異構(gòu)酶。在另一實施方式中，本發(fā)明提供了經(jīng)包含經(jīng)分離的下述多核苷酸的表達盒轉(zhuǎn)化的轉(zhuǎn)基因植物，所述多核苷酸編碼未知蛋白1。該實施方式的轉(zhuǎn)基因植物可包含編碼未知蛋白l的任何多核苷酸。該實施方式的轉(zhuǎn)基因植物包含下述多核苷酸，其編碼具有包含SEQIDNO:64的1至111位氨基酸的序列的未知蛋白1。在另一實施方式中，本發(fā)明提供了經(jīng)包含經(jīng)分離的下述多核苷酸的表達盒轉(zhuǎn)化的轉(zhuǎn)基因植物，所述多核苷酸編碼未知蛋白2。該實施方式的轉(zhuǎn)基因植物可包含編碼未知蛋白2的任何多核苷酸。該實施方式的轉(zhuǎn)基因植物包含下述多核苷酸，其編碼具有包含SEQIDNO:66的1至104位氨基酸的序列的未知蛋白2。在另一實施方式中，本發(fā)明提供了經(jīng)包含經(jīng)分離的下述多核苷酸的表達盒轉(zhuǎn)化的轉(zhuǎn)基因植物，所述多核苷酸編碼鳥氨酸脫羧酶。該實施方式的轉(zhuǎn)基因植物可包含編碼鳥氨酸脫羧酶的任何多核苷酸。該實施方式的轉(zhuǎn)基因植物包含下述多核苷酸，其編碼具有包含SEQIDNO:68的1至466位氨基酸的序列的鳥氨酸脫羧酶。在另一實施方式中，本發(fā)明提供了經(jīng)包含經(jīng)分離的下述多核苷酸的表達盒轉(zhuǎn)化的轉(zhuǎn)基因植物，所述多核苷酸編碼谷胱甘肽還原酶。該實施方式的轉(zhuǎn)基因植物可包含編碼谷胱甘肽還原酶的任何多核苷酸。該實施方式的轉(zhuǎn)基因植物包含下述多核苷酸，其編碼具有包含SEQIDNO:70的1至483位氨基酸的序列的谷胱甘肽還原酶。在另一實施方式中，本發(fā)明提供了經(jīng)包含經(jīng)分離的下述多核苷酸的表達盒轉(zhuǎn)化的轉(zhuǎn)基因植物，所述多核苷酸編碼未知蛋白3。該實施方式的轉(zhuǎn)基因植物可包含編碼未知蛋白3的任何多核苷酸。該實施方式的轉(zhuǎn)基因植物包含下述多核苷酸，其編碼具有包含SEQIDNO:72的1至129位氨基酸的序列的未知蛋白3。在另一實施方式中，本發(fā)明提供了經(jīng)包含經(jīng)分離的下述多核苷酸的表達盒轉(zhuǎn)化的轉(zhuǎn)基因植物，所述多核苷酸編碼蛋白磷酸酶2A蛋白。該實施方式的轉(zhuǎn)基因植物可包含編碼蛋白磷酸酶2A蛋白的任何多核苷酸。該實施方式的轉(zhuǎn)基因植物包含下述多核苷酸，其編碼具有包含SEQIDNO:74的1至306位氨基酸的序列的蛋白磷酸酶2A蛋白；具有包含SEQIDNO:76的l至306位氨基酸的序列的蛋白；具有包含SEQIDNO:78的1至306位氨基酸的序列的蛋白；具有包含SEQIDNO:80的1至306位氨基酸的序列的蛋白；具有包含SEQIDNO:82的1至306位氨基酸的序列的蛋白；具有包含SEQIDNO:84的1至307位氨基酸的序列的蛋白；具有包含SEQIDNO:86的1至306位氨基酸的序列的蛋白；具有包含SEQIDNO:88的1至306位氨基酸的序列的蛋白；具有包含SEQIDNO:90的1至306位氨基酸的序列的蛋白。在另一實施方式中，本發(fā)明提供了經(jīng)包含經(jīng)分離的下述多核苷酸的表達盒轉(zhuǎn)化的轉(zhuǎn)基因植物，所述多核苷酸編碼MEK1蛋白激酶。該實施方式的轉(zhuǎn)基因植物可包含編碼MEKl蛋白激酶的任何多核苷酸。該實施方式的轉(zhuǎn)基因植物包含下述多核苷酸，其編碼具有包含SEQIDNO:92的1至355位氨基酸的序列的MEK1蛋白激酶；具有包含SEQIDNO:94的1至355位氨基酸的序列的蛋白；具有包含SEQIDNO:96的1至338位氨基酸的序列的蛋白；具有包含SEQIDNO:100的1至350位氨基酸的序列的蛋白。在另一實施方式中，本發(fā)明提供了經(jīng)包含經(jīng)分離的下述多核苷酸的表達盒轉(zhuǎn)化的轉(zhuǎn)基因植物，所述多核苷酸編碼含AP2結(jié)構(gòu)域的轉(zhuǎn)錄因子。該實施方式的轉(zhuǎn)基因植物可包12含編碼含AP2結(jié)構(gòu)域的轉(zhuǎn)錄因子的任何多核苷酸。該實施方式的轉(zhuǎn)基因植物包含下述多核苷酸，其編碼具有包含SEQIDN0:98的1至197位氨基酸的序列的含AP2結(jié)構(gòu)域的轉(zhuǎn)錄因子。本發(fā)明還提供了通過表達表l所列出的多核苷酸的轉(zhuǎn)基因植物產(chǎn)生的種子，其中，所述種子含有所述多核苷酸，并且其中，所述植物較之植物的野生型品種而言，在正?；蛎{迫條件下增加的生長和/或產(chǎn)量和/或?qū)Νh(huán)境脅迫的增加的耐受性方面是純育的。本發(fā)明還提供了通過或從表達所述多核苷酸的轉(zhuǎn)基因植物、其植物部分或其種子生產(chǎn)的產(chǎn)品?？墒褂帽绢I(lǐng)域公知的多種方法獲得產(chǎn)品。在本文中使用時，詞語"產(chǎn)品"包括但不限于食物、飼料、食物補充物、飼料補充物、化妝品或藥物。食物被認為是用于營養(yǎng)或用于補充營養(yǎng)的組合物。動物飼料和動物飼料補充物特別地被認為是食物。本發(fā)明還提供了通過轉(zhuǎn)基因植物、植物部分和植物種子中的任何生產(chǎn)的農(nóng)業(yè)產(chǎn)品。農(nóng)業(yè)產(chǎn)品包括但不限于植物提取物、蛋白、氨基酸、碳水化合物、脂肪、油、聚合物、維生素等。在一種優(yōu)選的實施方式中，本發(fā)明的經(jīng)分離的多核苷酸包含下述多核苷酸，其具有選自表1列出的多核苷酸序列的序列。這些多核苷酸可包含編碼區(qū)域的序列以及5'非翻譯序列和3'非翻譯序列。可使用標準分子生物學技術(shù)和本文提供的序列信息來分離本發(fā)明的多核苷酸，例如使用自動DNA合成儀來進行。"同源物"在本文中被定義為分別具有相似或基本相同的核苷酸或氨基酸序列的兩條核酸或多肽。同源物包括等位變體、類似物和直向同源物，它們?nèi)缦挛乃x。在本文中使用時，術(shù)語"類似物"指具有相同或相似功能但是在不相關(guān)的生物中分別進化的兩條核酸。在本文中使用時，術(shù)語"直向同源物"指來自不同物種但是通過物種形成從共同的祖先基因進化來的兩條核酸。術(shù)語同源物還包括由于遺傳密碼子簡并性而與表1所示的核苷酸序列之一有所不同但卻編碼同樣多肽的核酸分子。在本文中使用時，"天然存在的"核酸分子指具有自然界中存在的核苷酸序列的RNA或DNA分子(即編碼天然多肽)。為測定兩條氨基酸序列(例如，表1的多肽序列之一及其同源物)的百分比序列同一性，就最優(yōu)比較目的而言，將序列對齊(例如，可在一條多肽的序列中引入缺口，以與另外的多肽或核酸最優(yōu)對齊)。然后比較相應氨基酸位置上的氨基酸殘基。當一條序列中的位置被另一序列中相應位置上的同樣的氨基酸殘基占據(jù)時，分子在該位置就是相同的?？稍趦蓷l核酸序列之間進行同樣類型的比較。優(yōu)選地，本發(fā)明的多肽的經(jīng)分離的氨基酸同源物、類似物和直向同源物與表1所示的整條氨基酸序列至少大約50-60%，優(yōu)選至少大約60-70%，更優(yōu)選至少大約70-75%、75-80%、80-85%、85-90%或90-95%，最優(yōu)選至少大約96%、97%、98%、99%相同或者更相同。在另一優(yōu)選的實施方式中，本發(fā)明的經(jīng)分離的核酸同源物包含下述核苷酸序列，所述核苷酸序列與表1所示的核苷酸序列至少大約40-60%，優(yōu)選至少大約60-70%，更優(yōu)選至少大約70-75%、75-80%、80-85%、85-90%或90-95%，進一步優(yōu)選至少大約95%、96%、97%、98%、99%相同或者更相同。就本發(fā)明的目的而言，使用VectorNTI9.0(PC)軟件包(Invitrogen，1600FaradayAve.，Carlsbad,CA92008)來測定兩條核酸或多肽序列之間的百分比序列同一性。為測定兩條核酸的百分比同一性，使用的缺口開放罰分為15，缺口延伸罰分為6.66。為測定兩條多肽的百分比同一性，使用的缺口開放罰分為IO，缺口延伸罰分為O.1。所有其它參數(shù)都按照默認設(shè)置來設(shè)置。就多重比對的目的而言(ClustalW算法)，缺口開放罰分為IO，缺口延伸罰分為0.05，使用blosum62矩陣。應當理解，就測定序列同一性的目的而言，當比較DNA序列和RNA序列時，胸腺嘧啶核苷酸等同于尿嘧啶核苷酸。對應于表1所列出的多肽的同源物、類似物和直向同源物的核酸分子可基于其與所述多肽的同一性來分離，其中使用編碼各多肽的多核苷酸或基于其的引物作為雜交探針，根據(jù)標準雜交技術(shù)在嚴緊雜交條件下來進行。本文中關(guān)于DNA到DNA的印跡雜交而言，術(shù)語"嚴緊條件"指在10XDenhart's溶液、6XSSC、0.5%SDS和100iig/ml變性的鮭魚精DNA中于6(TC進行雜交。在62t:，3XSSC/0.1%SDS接著IXSSC/0.1%SDS以及最后0.IXSSC/0.1%SDS中對印跡依序洗30分鐘(每次)。此外，在本文中使用時，在一種優(yōu)選的實施方式中，術(shù)語"嚴緊條件"指在6XSSC溶液中于65t:進行雜交。在另一實施方式中，"高度嚴緊條件"指在10XDenhart's溶液、6XSSC、0.5%SDS和100iig/ml變性的鮭精DNA中于65t:雜交過夜。在65t:，3XSSC/0.1%SDS接著IXSSC/0.1%SDS以及最后0.IXSSC/0.1%SDS中對印跡依序洗30分鐘(每次)。用于進行核酸雜交的方法是本領(lǐng)域公知的。優(yōu)選地，在嚴緊或高度嚴緊條件下與表1列出的核苷酸序列雜交的本發(fā)明的經(jīng)分離的核酸分子對應于天然存在的核酸分子。有多種方法可用于從簡并寡核苷酸序列生產(chǎn)可能的同源物的文庫?？稍谧詣覦NA合成儀中進行簡并基因序列的化學合成，然后將合成的基因連接進合適的表達載體。使用簡并基因組允許在一種混合物中提供編碼想要的可能序列的組的所有序列。用于合成簡并寡核苷酸的方法是本領(lǐng)域已知的。此外，可制造經(jīng)優(yōu)化的核酸。優(yōu)選地，經(jīng)優(yōu)化的核酸編碼下述多肽，所述多肽具有與表1所列出的那些多肽相似的功能和/或當其在植物中過量表達時能在正常和/或水受限條件下調(diào)節(jié)植物生長和/或產(chǎn)量和/或?qū)Νh(huán)境脅迫的耐受性，以及更優(yōu)選地，在正常和/或水受限條件下增加植物生長和/或產(chǎn)量和/或?qū)Νh(huán)境脅迫的耐受性。在本文中使用時，"經(jīng)優(yōu)化的"指經(jīng)遺傳改造以增加其在給定的植物或動物中的表達的核酸。為提供經(jīng)針對植物進行優(yōu)化的核酸，可將基因的DNA序列修飾為1)包含高度表達的植物基因偏好的密碼子；2)包含植物中基本發(fā)現(xiàn)的核苷酸堿基組成中的A+T含量；3)形成植物起始序列；4)以消除導致RNA不穩(wěn)定、不適當聚腺苷酸化、降解和終止的序列，或者消除形成二級結(jié)構(gòu)發(fā)卡或RNA剪接位點的序列；或5)消除反義可讀框?？赏ㄟ^利用一般植物或特定植物中的密碼子選擇分布頻率，來實現(xiàn)核酸在植物中的增加表達。用于優(yōu)化植物中核酸表達的方法可在EPA0359472、EPA0385962、PCT申請No.W091/16432、美國專利No.5，380，831、美國專利No.5，436，391、Perlack等人，1991，Proc.Natl.Acad.Sci.USA88:3324-3328和Murray等人，1989，NucleicAcidsRes.17:477-498中找到?？蓪Ρ景l(fā)明的經(jīng)分離的多核苷酸加以優(yōu)化，使得其密碼子選擇分布頻率與高度表達的植物基因偏差優(yōu)選不超過25%，更優(yōu)選不超過大約10%。此外，要考慮到簡并第三堿基的百分比G+C含量(單子葉植物看起來在該位置偏好G+C，而雙子葉植物則不)。還要認識到，XCG(其中X是A、T、C或G)核苷酸在雙子葉植物中是最不優(yōu)選的密碼子，而XTA密碼子在單子葉和雙子葉植物中都應當避免。本發(fā)明的經(jīng)優(yōu)化的核酸優(yōu)選還具有與所選用的宿主植物十分接近CG和TA雙聯(lián)體避免指數(shù)。更優(yōu)選地，這些指數(shù)與宿主的偏差不超過大約10-15%。本發(fā)明還提供了經(jīng)分離的重組表達載體，其包含上文所述的多核苷酸，其中，所述載體在宿主細胞中的表達導致較之宿主細胞的野生型品種而言，植物在正?；蛩芟迼l件下增加生長和/或產(chǎn)量，和/或增加對環(huán)境脅迫的耐受性。本發(fā)明的重組表達載體包含以適于在宿主細胞中表達核酸的形式存在的本發(fā)明的核酸，這意味著，重組表達載體包括一條或多條調(diào)控序列，其是基于待被使用用于表達的宿主細胞選擇的，其與待表達的核酸序列有效地相連。在本文中關(guān)于重組表達載體使用時，"有效地相連"意欲表示感興趣的核苷酸序列與調(diào)控序列以允許核苷酸序列表達的方式相連(例如，當載體被引入宿主細胞中時，在細菌或植物宿主細胞中)。術(shù)語"調(diào)控序列"意欲包括啟動子、增強子和其它表達控制元件(例如聚腺苷化信號)。此類調(diào)控序列是本領(lǐng)域公知的。調(diào)控序列包括指導核苷酸序列在多種類型的宿主細胞中組成型表達的那些以及僅在某些宿主細胞或某些條件下指導核苷酸序列表達的那些。本領(lǐng)域技術(shù)人員理解，對表達載體的設(shè)計可取決于下述因素，例如，對待轉(zhuǎn)化的宿主細胞的選擇、想要的多肽的表達水平等。本發(fā)明的表達載體可引入宿主細胞，以由此生產(chǎn)本文所述的核酸編碼的多肽。植物基因表達應當與合適的啟動子有效地相連，所述啟動子賦予適時地、細胞特異性或組織特異性方式的基因表達?？捎糜诒景l(fā)明的表達盒的啟動子包括能在植物細胞中啟動轉(zhuǎn)錄的任何啟動子。此類啟動子包括但不限于可從植物、植物病毒和細菌(含有在植物中表達的基因，例如農(nóng)桿菌屬(Agrobacterium)和根瘤菌屬(Rhizobium))獲得的那些。啟動子可以是組成型、誘導型、發(fā)育階段優(yōu)先、細胞類型優(yōu)先、組織優(yōu)先或器官優(yōu)先的。組成型啟動子在大多數(shù)條件下都有活性。組成型啟動子的例子包括CaMV19S和35S啟動子，sXCaMV35S啟動子，S印l啟動子，稻肌動蛋白啟動子，擬南芥肌動蛋白啟動子，泛素(ubiquitan)啟動子，pEmu，玄參花葉病毒35S啟動子，Smas啟動子，超級啟動子(美國專利No.5，955，646)，GRP1-8啟動子，肉桂醇脫氫酶啟動子(美國專利No.5，683，439)，來自農(nóng)桿菌屬的T-DNA的啟動子，例如，甘露堿合酶、胭脂堿合酶和章魚堿合酶，二磷酸核酮糖羧化酶小亞基(ssu-RUBISCO)啟動子等。誘導型啟動子偏好于某些環(huán)境條件下具有活性，例如，存在或不存在營養(yǎng)物或代謝產(chǎn)物時、熱或冷、光照、病原體攻擊、厭氧條件等。例如，來自蕓苔屬(Brassica)的hsp80啟動子是熱激誘導的；PPDK啟動子由光誘導；來自煙草、擬南芥和玉蜀黍的PR-1啟動子可通過病原體的感染誘導；Adhl啟動子由缺氧和冷脅迫誘導。還可通過誘導型啟動子來協(xié)助植物基因表達(綜述參見Gatz，1997，Annu.Rev.PlantPhysiol.PlantMol.Biol.48:89-108)。如果想要基因表達以時間特異性方式發(fā)生，可化學誘導的啟動子是尤其合適的。此類啟動子的例子是水楊酸誘導型啟動子(PCT申請No.WO95/19443)、四環(huán)素誘導型啟動子(Gatz等人，1992，PlantJ.2:397-404)和乙醇誘導型啟動子(PCT申請No.WO93/21334)。在本發(fā)明的一種優(yōu)選的實施方式中，誘導型啟動子是脅迫誘導型啟動子。就本發(fā)明的目的而言，脅迫誘導型啟動子偏好于在一種或多種下述脅迫下具有活性與鹽度、干旱、氮、溫度、金屬、化學品、病原體和氧化脅迫相關(guān)的次最優(yōu)條件。脅迫誘導型啟動子包括但不限于Cor78(Chak等人，2000，Planta210:875-883;Hovath等人，1993，PlantPhysiol.103:1047-1053)、Corl5a(Artus等人，1996，PNAS93(23):13404-09)、Rci2A(Medina等人，2001，PlantPhysiol.125:1655-66;Nylander等人，2001，PlantMol.Biol.45:341-52;Navarre和Goffeau，2000，EMBOJ.19:2515-24;C即el等人，1997，PlantPhysiol.115:569-76)、Rd22(Xiong等人，2001，PlantCell13:2063-83;Abe等人，1997，PlantCell9:1859-68;Iwasaki等人，1995，Mol.Gen.Genet.247:391-8)、cDet6(Lang和Palve，1992，PlantMol.Biol.20:951-62)、ADH1(Hoeren等人，1998，Genetics149:479-90)、KATl(Nakamura等人，1995，PlantPhysiol.109:371-4)、KST1(Mllller-R6ber等人，1995，EMBO14:2409-16)、Rhal(Terryn等人，1993，PlantCell5:1761-9;Terryn等人，1992，F(xiàn)EBSLett.299(3):287-90)、ARSK1(Atkinson等人，1997，GenBank登錄號L22302和PCT申請No.W097/20057)、PtxA(Plesch等人，GenBank登錄號X67427)、SbHRGP3(Ahn等人，1996，PlantCell8:1477-90)、GH3(Liu等人，1994，PlantCell6:645-57)、病原體誘導型PRP1基因啟動子(Ward等人，1993，Plant.Mol.Biol.22:361-366)、來自番茄的熱誘導型hsp80-啟動子(美國專利No.5187267)、來自馬鈴薯的冷誘導型a-淀粉酶啟動子(PCT申請No.W096/12814)或創(chuàng)傷誘導型pinll啟動子(歐洲專利No.375091)。關(guān)于干旱、冷和鹽誘導型的啟動子的其它例子，例如RD29A啟動子，參見Yamaguchi-Shinozalei等人，1993，Mol.Gen.Genet.236:331-340。發(fā)育階段優(yōu)先的啟動子偏好在某些發(fā)育階段表達。組織和器官優(yōu)先的啟動子包括偏好在某些組織或器官(例如葉、根、種子或木質(zhì)部)中表達的那些。組織優(yōu)先和器官優(yōu)先啟動子的例子包括但不限于果實優(yōu)先、胚珠優(yōu)先、雄性組織優(yōu)先、種子優(yōu)先、珠被優(yōu)先、塊莖優(yōu)先、柄(stalk)優(yōu)先、果皮優(yōu)先、葉優(yōu)先、柱頭優(yōu)先、花粉優(yōu)先、花藥優(yōu)先、花瓣優(yōu)先、萼片優(yōu)先、花梗優(yōu)先、長角果優(yōu)先、莖優(yōu)先、根優(yōu)先的啟動子等。種子優(yōu)先的啟動子偏好在種子發(fā)育和/或萌發(fā)期間表達。例如，種子優(yōu)先的啟動子可以是胚優(yōu)先、胚乳優(yōu)先和種皮優(yōu)先的(見Thompson等人，1989，BioEssays10:108)。種子優(yōu)先的啟動子的例子包括但不限于纖維素合酶(celA)、Ciml、Y_玉米醇溶蛋白、球蛋白_1、玉米19kD玉米醇溶蛋白(cZ19Bl)等。其它合適的組織優(yōu)先或器官優(yōu)先啟動子包括來自油菜(r即eseed)的n即in基因啟動子(美國專利No.5,608，152)、來自蠶豆(Viciafaba)的USP啟動子(Baeumlein等人，1991，Mol.Gen.Genet.225(3):459-67)、來自擬南芥屬(Arabidopsis)的油質(zhì)蛋白啟動子(PCT申請No.W098/45461)、來自菜豆(Phaseolusvulgaris)的菜豆蛋白啟動子(美國專利No.5，504，200)、來自蕓苔屬的Bce4啟動子(PCT申請No.W091/13980)或豆球蛋白B4啟動子(LeB4;Baeumlein等人，1992，PlantJournal,2(2):233-9)以及在單子葉植物(例如玉米、大麥、小麥、黑麥、稻等)中賦予種子特異性表達的啟動子。值得注意的合適啟動子是來自大麥的Ipt2或Iptl基因啟動子(PCR申請No.W095/15389和PCT申請No.W095/23230)或者PCT申請No.W099/16890中描述的那些啟動子(來自大麥的大麥醇溶蛋白基因、稻谷蛋白基因、稻水稻素基因、稻谷醇溶蛋白基因、小麥的麥醇溶蛋白基因、小麥谷蛋白基因、燕麥谷蛋白基因、高粱kasirin基因和黑麥的裸麥醇溶蛋白基因的啟動子)?？捎糜诒景l(fā)明的表達盒的其它啟動子包括但不限于主要葉綠體a/b結(jié)合蛋白啟動子，組蛋白啟動子，Ap3啟動子，e-conglycin啟動子，油菜籽蛋白啟動子，大豆凝集素啟動子，玉米15kD玉米醇溶蛋白啟動子、22kD玉米醇溶蛋白啟動子、27kD玉米醇溶蛋白啟動子、g_玉米醇溶蛋白啟動子、waxy、shrunken1、shrunken2禾口bronze啟動子禾口Zml3啟動子(美國專利No.5，086，169)、玉米多聚半乳糖醛酸酶啟動子(PG)(美國專利16Nos.5，412，085和5，545，546)和SGB6啟動子(美國專利No.5，470，359)以及合成的或其它天然啟動子。控制異源基因在植物中表達的其它機動性可通過使用來自異源來源的DNA結(jié)合結(jié)構(gòu)域和應答元件(即，來自非植物來源的DNA結(jié)合結(jié)構(gòu)域)獲得。此類異源DNA結(jié)合結(jié)構(gòu)域的例子是LexADNA結(jié)合結(jié)構(gòu)域(Brent和Ptashne，1985，Cell43:729-736)。在本發(fā)明的一種優(yōu)選的實施方式中，表1列出的多核苷酸在來自高等植物(例如種子植物，例如作物植物)的植物細胞中表達。多核苷酸可通過任何手段"引入"植物細胞，包括轉(zhuǎn)染、轉(zhuǎn)化或轉(zhuǎn)導、電穿孔、顆粒轟擊、農(nóng)桿菌感染等。用于轉(zhuǎn)化或轉(zhuǎn)染植物細胞的合適方法已被公開，例如，使用美國專利Nos.4，945，050、5，036，006、5，100，792、5，302，523、5，464，765、5，120，657、6，084，154等所示的顆粒轟擊。更優(yōu)選地，可使用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化來制造本發(fā)明的轉(zhuǎn)基因玉米種子，如美國專利Nos.5，591，616、5，731，179、5，981，840、5，990，387、6，162，965、6，420，630，美國專利公開號2002/0104132等所述?？墒褂美鐨W洲專利No.EP0424047、U.S.專利No.5，322，783、歐洲專利No.EP0397687、美國專利No.5，376，543或美國專利No.5，169，770所述的技術(shù)來進行對大豆的轉(zhuǎn)化。小麥轉(zhuǎn)化的一個特別例子可于PCT申i青No.W093/07256中發(fā)現(xiàn)?？墒褂妹绹鴮＠鸑os.5，004，863、5，159，135、5，846，797等中公開的方法來轉(zhuǎn)化棉花?？墒褂妹绹鴮＠鸑os.4，666，844、5，350，688、6，153，813、6，333，449、6，288，312、6，365，807、6，329，571等中公開的方法來轉(zhuǎn)化稻。其它植物轉(zhuǎn)化方法公開于，例如，美國專利Nos.5，932，782、6，153，811、6，140，553、5，969，213、6，020，539等中。適于將轉(zhuǎn)基因插入特定植物的任何植物轉(zhuǎn)化方法都可根據(jù)本發(fā)明使用。根據(jù)本發(fā)明，引入的多核苷酸如果并入非染色體自主復制子或整合進植物染色體中，則其可穩(wěn)定保持于植物細胞中。或者，引入的多核苷酸可存在于染色體外非復制載體上且可瞬時轉(zhuǎn)化或具有瞬時活性。本發(fā)明的另一方面涉及經(jīng)分離的多肽，其具有選自表1列出的多肽序列的序列。"經(jīng)分離的"或"經(jīng)純化的"多肽不含(通過重組DNA技術(shù)生產(chǎn)時)一些細胞材料或(化學合成時)化學品前體或其它化學品。"基本不含細胞材料"這種說法包括這樣的多肽制備物，其中，將多肽與天然或重組生產(chǎn)其的細胞中的一些細胞組分分開。在一種實施方式中，"基本不含細胞材料"這種說法包括這樣的本發(fā)明的多肽制備物其具有少于大約30%(以干重)污染性多肽，更優(yōu)選少于大約20%的污染性多肽，進一步更優(yōu)選少于大約10%的污染性多肽，最優(yōu)選少于大約5%的污染性多肽。對酶活性和動力學參數(shù)的測定在本領(lǐng)域中已很成熟。用于測定任何給定的經(jīng)改造的酶的活性的實驗必須針對野生型酶的特定活性加以定制，這是本領(lǐng)域技術(shù)人員能力范圍內(nèi)的。關(guān)于酶的綜述是一般性的，關(guān)于測定很多酶活性的結(jié)構(gòu)、動力學、原理、方法、應用和例子詳細描述有很多，它們是本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的。本發(fā)明還涉及生產(chǎn)包含表1列出的至少一種多核苷酸的轉(zhuǎn)基因植物的方法，其中，所述多核苷酸在植物中的表達導致較之植物的野生型品種而言，植物在正?；蛩芟迼l件下生長和/或產(chǎn)量增加，和/或?qū)Νh(huán)境脅迫的耐受性增加，所述方法包括下述步驟(a)向植物細胞中引入包含表l所列出的至少一種多核苷酸的表達載體，以及(b)從植物細胞產(chǎn)生表達所述多核苷酸的轉(zhuǎn)基因植物，其中，多核苷酸在轉(zhuǎn)基因植物中的表達導致較之植物的野生型品種而言，植物在正?；蛩芟迼l件下生長和/或產(chǎn)量增加，和/或?qū)Νh(huán)境脅迫的耐受性增加。植物可以是，但不限于，原生質(zhì)體、配子生產(chǎn)細胞和再生為整株植物的細胞。在本文中使用時，"轉(zhuǎn)基因"指含有表1列出的至少一種重組多核苷酸的任何植物、植物細胞、愈傷組織、植物組織或植物部分。在很多情況中，重組多核苷酸被穩(wěn)定整合進染色體或穩(wěn)定的染色體外元件，使得其傳到后續(xù)世代。本發(fā)明還提供了在正常或水受限條件下增加植物生長和/或產(chǎn)量和/或增加植物對環(huán)境脅迫的耐受性的方法，所述方法包括下述步驟在植物中增加表1所列出的至少一種多核苷酸的表達。可通過本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的任何方法增加蛋白的表達。可通過在正常和/或較不合適的條件下培養(yǎng)經(jīng)修飾的植物，然后分析植物的生長特征和/或代謝，來評估遺傳修飾對植物生長和/或產(chǎn)量和/或脅迫耐受性的影響。此類分析技術(shù)是本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的，其包括干重、濕重、多肽合成、碳水化合物合成、脂類合成、蒸發(fā)蒸騰速率、一般植物和/或作物產(chǎn)量、開花、繁殖、結(jié)籽(seedsetting)、根生長、呼吸速率、光合速率、代謝組成等，其中使用生物
技術(shù)領(lǐng)域：
技術(shù)人員已知的方法來進行。通過下述實施例來進一步闡述本發(fā)明，所述實施例不應被以任何方式理解為對本發(fā)明的范圍施加限制。實施例l:克隆cDNA使用已知方法從各植物物種的專屬文庫分離cDNAs。對序列加以加工，并使用生物信息學分析來加以注釋。表2到18中展示了經(jīng)分離的序列與各最接近的已知公開序列的氨基酸同一性和相似性程度(使用成對比較缺口罰分10;缺口延伸罰分0.1;計分矩陣:blos咖62)。表2At2g20725(SEQIDNO:2)與已知的CAAX氨基末端蛋白酶蛋白的比較<table>tableseeoriginaldocumentpage18</column></row><table>表3At3g26085(SEQIDNO:4)與已知的CAAX氨基末端蛋白酶蛋白的比較公共數(shù)據(jù)庫登錄號物種序列同一性(％)NP—566788擬南芥100.00%BAC43478擬南芥99.70%AAM63917擬南芥99.30%NP—001078210擬南芥91.00%BAB01072擬南芥65.30%表4AtFACE-2(SEQIDNO:6)與已知的異戊二烯基依賴性CAAX蛋白酶的比較公共數(shù)據(jù)庫登錄號物種序列同一性(％)NP—850262擬南芥100.00%BAC43705擬南芥99.70%CAN61196葡萄(Vitisvinifers)36.70%XP—695285斑馬魚(Daniorerio)32.70%XP—001342272斑馬魚(D.rerio)32.70%表5CASAR82A(SEQIDNO:12)與已知的SAR8.2蛋白前體的比較公共數(shù)據(jù)庫登錄號物種序列同一性(％)AAF18935辣椒100.00%AAL56986辣椒97.70%AAL16783辣椒93.00%AAL16782辣椒91.90%AAR97871辣椒52.30%表6b3358(SEQIDNO:14)與已知的推定的膜蛋白的比較[O川]<table>tableseeoriginaldocumentpage20</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage21</column></row><table>表9EST257(SEQIDNO:50)與已知的蛋白激酶的比較<table>tableseeoriginaldocumentpage21</column></row><table>表10EST465(SEQIDNO:62)與已知的肽基脯氨酸異構(gòu)酶的比較<table>tableseeoriginaldocumentpage21</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage22</column></row><table>表11YBL109w(SEQIDNO:64)與未知蛋白1的比較<table>tableseeoriginaldocumentpage22</column></row><table>表12YBL100c(SEQIDNO:66)與未知蛋白2的比較<table>tableseeoriginaldocumentpage22</column></row><table>表13YKL184w(SEQIDNO:68)與已知的鳥氨酸脫羧酶的比較<table>tableseeoriginaldocumentpage22</column></row><table>表14YPL091w(SEQIDNO:70)與已知的谷胱甘肽還原酶的比較<table>tableseeoriginaldocumentpage23</column></row><table>表15TA54587433(SEQIDNO:72)與未知蛋白3的比較<table>tableseeoriginaldocumentpage23</column></row><table>表16ZM68532504(SEQIDNO:74)與已知的蛋白磷酸酶2A蛋白的比較<table>tableseeoriginaldocumentpage23</column></row><table>表17ZM59202533(SEQIDNO:92)與已知的MEKl蛋白激酶的比較<table>tableseeoriginaldocumentpage24</column></row><table>表18BN42671700(SEQIDNO:98)與已知的含AP2結(jié)構(gòu)域的轉(zhuǎn)錄因子的比較<table>tableseeoriginaldocumentpage24</column></row><table>將AtFACE-2的全長DNA序列(SEQIDNO:5)以e—1Q的e值針對卡諾拉油菜(canola)、大豆、稻、玉米、亞麻、向日葵和小麥cDNAs的專屬數(shù)據(jù)庫進行blast(Altschul等人，1997，NucleicAcidsRes.25:3389-3402)。針對推定的全長序列分析所有的重疊群命中，并對代表推定的全長重疊群的最長的克隆加以完全測序。鑒定出來自玉米的兩種同源物。這些序列與最接近的已知公開序列的氨基酸同一性的程度列于表19和20中(使用成對比較缺口罰分:10;缺口延伸罰分0.1;計分矩陣:blo達62)。表19ZM57353913(SEQIDNO:8)與已知的異戊二烯基依賴性CAAX蛋白酶的比較<table>tableseeoriginaldocumentpage24</column></row><table>公共數(shù)據(jù)庫登錄號物種序列同一性(％)EAZ33973稻36.60%XP—001353747果蟲雖(Drosophilapseudoobscura)33.50%表20ZM59252659(SEQIDNO:10)與已知的異戊二烯基依賴性CAAX蛋白酶的比較公共數(shù)據(jù)庫登錄號物種序列同一性(％)NP—850262擬南芥47.00%BAC43705擬南芥47.00%EAZ33973稻41.腦NP—001055298稻38.30%CAN61196葡萄31.90%將EST564的全長DNA序列(SEQIDNO:15)以e—1Q的e值針對卡諾拉油菜、大豆、稻、玉米、亞麻、向日葵和小麥cDNAs的專屬數(shù)據(jù)庫進行blast(Altschul等人，1997，NucleicAcidsRes.25:3389-3402)。針對推定的全長序列分析所有的重疊群命中，并對代表推定的全長重疊群的最長的克隆加以完全測序。鑒定出來自玉米的六種同源物，來自大豆的兩種同源物和來自卡諾拉油菜的一種同源物。這些序列與最接近的已知公開序列的氨基酸同一性的程度列于表21-29中(使用成對比較缺口罰分10;缺口延伸罰分0.1;計分矩陣blosum62)。表21BN49502266(SEQIDNO:18)與已知的蛋白磷酸酶2C蛋白的比較公共數(shù)據(jù)庫登錄號物種序列同一性(％)NP—195118擬南芥91.10%NP—001067133稻63.20%<table>tableseeoriginaldocumentpage26</column></row><table>表22GM49788080(SEQIDNO:20)與已知的蛋白磷酸酶2C蛋白的比較<table>tableseeoriginaldocumentpage26</column></row><table>表23GM53049821(SEQIDNO:22)與已知的蛋白磷酸酶2C蛋白的比較<table>tableseeoriginaldocumentpage26</column></row><table>表24ZM58462719(SEQIDNO:24)與已知的蛋白磷酸酶2C蛋白的比較<table>tableseeoriginaldocumentpage27</column></row><table>公共數(shù)據(jù)庫登錄號物種序列同一性(％)AAK20060稻77.80%表27ZM62051019(SEQIDNO:30)與已知的蛋白磷酸酶2C蛋白的比較公共數(shù)據(jù)庫登錄號物種序列同一性(％)ABE77197高粱92.50%NP—001048899稻88.00%EAY88457稻87.00%NP—001065203稻79.50%AAK20060稻78.80%表28ZM65086957(SEQIDNO:32)與已知的蛋白磷酸酶2C蛋白的比較公共數(shù)據(jù)庫登錄號物種序列同一性(％)ABE77197高粱91.00%NP—001048899稻86.50%EAY88457稻85.50%NP—001065203稻78.80%AAK20060稻78.00%表29ZM68587657(SEQIDNO:34)與已知的蛋白磷酸酶2C蛋白的比較<table>tableseeoriginaldocumentpage29</column></row><table>將EST390的全長DNA序列(SEQIDNO:35)以e—1Q的e值針對卡諾拉油菜、大豆、稻、玉米、亞麻、向日葵和小麥cDNAs的專屬數(shù)據(jù)庫進行blast(Altschul等人，1997，NucleicAcidsRes.25:3389-3402)。針對推定的全長序列分析所有的重疊群命中，并對代表推定的全長重疊群的最長的克隆加以完全測序。鑒定出來自卡諾拉油菜的四種同源物和來自玉米的兩種同源物。這些序列與最接近的已知公開序列的氨基酸同一性的程度列于表30-35中(使用成對比較缺口罰分:10;缺口延伸罰分0.1;計分矩陣:blo達62)。表30BN51363030(SEQIDNO:38)與已知的線粒體載體蛋白的比較<table>tableseeoriginaldocumentpage29</column></row><table>表31BN42986056(SEQIDNO:40)與已知的線粒體載體蛋白的比較<table>tableseeoriginaldocumentpage30</column></row><table>公共數(shù)據(jù)庫登錄號物種序列同一性(％)CAC12820煙草85.30%表34ZM57651070(SEQIDNO:46)與已知的線粒體載體蛋白的比較公共數(shù)據(jù)庫登錄號物種序列同一性(％)NP—001066927稻57.00%NP—680566擬南芥53.80%BAF00711擬南芥51.70%CAN71674葡萄43.20%CAN71674葡萄43.20%表35ZM62073276(SEQIDNO:48)與已知的線粒體載體蛋白的比較公共數(shù)據(jù)庫登錄號物種序列同一性(％)AAU11471甘蔗(S.officinarum)94.90%NP—001054904稻92.30%BAA08105稷(Panicummiliaceum)86.20%BAA08103稷(P.miliaceum)85.50%EAY80779稻82.90%將EST257的全長DNA序列(SEQIDNO:49)以e—1Q的e值針對卡諾拉油菜、大豆、稻、玉米、亞麻、向日葵和小麥cDNAs的專屬數(shù)據(jù)庫進行blast(Altschul等人，1997，NucleicAcidsRes.25:3389-3402)。針對推定的全長序列分析所有的重疊群命中，并對代表推定的全長重疊群的最長的克隆加以完全測序。鑒定出來自玉米的三種同源物、來自亞麻的一種同源物和來自小麥的一條序列。這些序列與最接近的已知公開序列的氨基酸同一性的程度列于表36-40中(使用成對比較缺口罰分10;缺口延伸罰分0.1;計分矩陣blosum62)。表36LU61665952(SEQIDNO:52)與已知的蛋白激酶的比較公共數(shù)據(jù)庫登錄號物種序列同一性(％)NP—566716擬南芥75.10%CAN82019葡萄74.50%NP—193214擬南芥74.50%A,6452合成構(gòu)建體73.00%A,6453合成構(gòu)建體72.30%表37TA56863186(SEQIDNO:54)與已知的蛋白激酶的比較公共數(shù)據(jù)庫登錄號物種序列同一性(％)AAO72550稻87.30%NP—001046047稻79.80%EAZ01979稻73.80%NP—001058291稻73.60%AA048744稻73.40%表38ZM62026837(SEQIDNO:56)與已知的蛋白激酶的比較公共數(shù)據(jù)庫登錄號物種序列同一性(％)AAR01726稻83.40%NP—001050732稻77.00%EAY91142稻76.30%<table>tableseeoriginaldocumentpage33</column></row><table>表39ZM65457595(SEQIDNO:58)與已知的蛋白激酶的比較<table>tableseeoriginaldocumentpage33</column></row><table>表40ZM67230154(SEQIDNO:60)與已知的蛋白激酶的比較<table>tableseeoriginaldocumentpage33</column></row><table>將ZM68532504的全長DNA序列(SEQIDNO:73)以e—10的e值針對卡諾拉油菜、大豆、稻、玉米、亞麻、向日葵和小麥cDNAs的專屬數(shù)據(jù)庫進行blast(Altschul等人，1997，NucleicAcidsRes.25:3389-3402)。針對推定的全長序列分析所有的重疊群命中，并對代表推定的全長重疊群的最長的克隆加以完全測序。鑒定出來自卡諾拉油菜的兩種同源物、來自玉米的兩種同源物、來自亞麻的一種同源物、來自稻的兩條序列和來自向日葵的一條序列。這些序列與最接近的已知公開序列的氨基酸同一性的程度列于表41-48中(使用成對比較缺口罰分:10;缺口延伸罰分0.1;計分矩陣:blo達62)。表41BN42856089(SEQIDNO:76)與已知的蛋白磷酸酶2A蛋白的比較公共<table>tableseeoriginaldocumentpage34</column></row><table>表43HA66872964(SEQIDNO:80)與已知的蛋白磷酸酶2A蛋白的比較<table>tableseeoriginaldocumentpage34</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage35</column></row><table>表44LU61662612(SEQIDNO:82)與已知的蛋白磷酸酶2A蛋白的比較<table>tableseeoriginaldocumentpage35</column></row><table>表450S32806943(SEQIDNO:84)與已知的蛋白磷酸酶2A蛋白的比較<table>tableseeoriginaldocumentpage35</column></row><table>表460S34738749(SEQIDNO:86)與已知的蛋白磷酸酶2A蛋白的比較公共數(shù)據(jù)庫登錄號物種序列同一性(％)AAQ67226番茄97.70%BAA92697蠶豆97.10%CAC11129歐洲山毛櫸96.70%BAA92698蠶豆96.10%AAQ67225番茄96.10%表47ZM59400933(SEQIDNO:88)與已知的蛋白磷酸酶2A蛋白的比較公共數(shù)據(jù)庫登錄號物種序列同一性(％)AAC72838稻95.80%AAA91806稻94.40%BAA92697蠶豆92.80%AAQ67226番茄92.80%AAQ67225番茄92.80%表48ZM62132060(SEQIDNO:90)與已知的蛋白磷酸酶2A蛋白的比較公共數(shù)據(jù)庫登錄號物種序列同一性(％)AAC72838稻95.10%AAA91806稻93.80%BAA92697蠶豆92.80%AAQ67226番茄92.50%<table>tableseeoriginaldocumentpage37</column></row><table>將ZM59202533的全長DNA序列(SEQIDNO:91)以e—1Q的e值針對卡諾拉油菜、大豆、稻、玉米、亞麻、向日葵和小麥cDNAs的專屬數(shù)據(jù)庫進行blast(Altschul等人，1997，NucleicAcidsRes.25:3389-3402)。針對推定的全長序列分析所有的重疊群命中，并對代表推定的全長重疊群的最長的克隆加以完全測序。鑒定出來自卡諾拉油菜的兩種同源物和來自玉米的一種同源物。這些序列與最接近的已知公開序列的氨基酸同一性的程度列于表49-51中(使用成對比較缺口罰分:10;缺口延伸罰分0.1;計分矩陣:blo達62)。表49BN41901422(SEQIDNO:94)與已知的MEK1蛋白激酶的比較<table>tableseeoriginaldocumentpage37</column></row><table>表50BN47868329(SEQIDNO:96)與已知的MEK1蛋白激酶的比較<table>tableseeoriginaldocumentpage37</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage38</column></row><table>表51ZM68416988(SEQIDNO:100)與已知的MEK1蛋白激酶的比較<table>tableseeoriginaldocumentpage38</column></row><table>實施例2:澆水良好的擬南芥屬植物將表1的多核苷酸連接進含有可選擇標記的雙元載體。得到的重組載體含有處于組成型啟動子下的正義向的相應基因。按照標準條件將重組載體轉(zhuǎn)化進根癌農(nóng)桿菌(Agrobacteriumtumefaciens)菌株。按照標準條件培養(yǎng)和轉(zhuǎn)化擬南芥(A.thaliana)生態(tài)型Col-0或C24。針對對可選擇標記基因賦予的對選擇劑的抗性，來篩選Tl和T2植物。T3種子用于溫室或生長室實驗。種植之前大約3-5天，冷卻種子以分層(stratification)。然后種植種子，應用肥料，使用透明圓頂(transparentdomes)保持濕度。將植物于22。C種植于溫室中，光周期為16小時光照/8小時黑暗。每周對植物澆水2次。在19和22天，使用商業(yè)可獲得的成像系統(tǒng)，針對每株植物，測量植物面積、葉面積、生物量、顏色分布、顏色強度和生長速率。生物量被計算為最后測量的時間點處的總植物葉面積。生長速率被計算為最后測量的時間點處的植物葉面積減第一次測量的時間點處的植物葉面積的差再除以第一次測量的時間點處的植物葉面積。健康指數(shù)倍計算為深綠色葉面積除以總植物葉面積。實施例3:氮脅迫耐受性的擬南芥屬植物將表1的多核苷酸連接進含有可選擇標記的雙元載體。得到的重組載體含有處于組成型啟動子下的正義向的相應基因。按照標準條件將重組載體轉(zhuǎn)化進根癌農(nóng)桿菌菌株。按照標準條件培養(yǎng)和轉(zhuǎn)化擬南芥生態(tài)型Col-0或C24。針對對可選擇標記基因賦予的對選擇劑的抗性，來篩選Tl和T2植物。使用不含有機組分的基底(substrate)，將植物生長于平臺(flat)上。每塊平臺用水弄濕，然后將對選擇劑有抗性的幼苗移種到基底上。在設(shè)置到22t:、相對濕度為55%、光照周期設(shè)置為16小時光照/8小時黑暗的生長室中培養(yǎng)植物。在第12、15、22和29天向供水中加入受控的低或高氮營養(yǎng)溶液。在第18、25和32天給予沒有營養(yǎng)溶液的供水。使用商業(yè)可獲得的成像系統(tǒng)，在第26、30和33天，采集托盤(tray)上所有植物的圖像。在每個成像時間點，測量針對每株植物的生物量和植物表型，包括植物面積、葉面積、生物量、顏色分布、顏色強度和生長速率。實施例4:脅迫耐受性的油菜/卡諾拉油菜植物用4天齡卡諾拉油菜幼苗的子葉葉柄作為外植體，用于組織培養(yǎng)，并按照EP1566443進行轉(zhuǎn)化。商業(yè)栽培種Westar(AgricultureCanada)是用于轉(zhuǎn)化的標準品種，但是也可使用其它品種。含有雙元載體的根癌農(nóng)桿菌GV3101:pMP90RK被用于卡諾拉油菜轉(zhuǎn)化。用于轉(zhuǎn)化的標準雙元載體是pSUN(W002/00900)，但是還描述過用于植物轉(zhuǎn)化的很多不同的雙元載體系統(tǒng)(例如，An，G.，在AgrobacteriumProtocols,MethodsinMolecularBiology巻44，第47_62頁，GartlandKMA禾口MRDavey編著，H麗naPress,Totowa，NewJersey)。利用包含選擇標記基因、植物啟動子和表1的多核苷酸的植物基因表達盒?？墒褂枚喾N選擇標記基因，包括美國專利Nos.5，767，366和6，225，105公開的突變的乙酰羥酸合酶(AHAS)基因。用合適的啟動子調(diào)控性狀基因，以提供對基因轉(zhuǎn)錄的組成型、發(fā)育、組織或環(huán)境調(diào)控。將卡諾拉油菜種子在70%乙醇中表面滅菌2分鐘，在55t:溫自來水中孵育15分鐘，然后在1.5%的次氯酸鈉中孵育10分鐘，接著用滅菌的蒸餾水漂洗三次。然后將種子置于沒有激素的MS培養(yǎng)基上，該培養(yǎng)基含有GamborgB5維生素、3%蔗糖和0.8%0xoidagar。在24。C低光照(<50yMol/m2s，16小時光照)下令種子發(fā)芽4天。從體外幼苗上切下連有子葉的子葉葉柄外植體，通過將葉柄外植體的切口端浸入細菌懸浮液來用農(nóng)桿菌屬接種。然后在24°C，16小時光照下，在包括維生素的MS培養(yǎng)基上對外植體培養(yǎng)3天，培養(yǎng)基中含有3.75mg/l的BAP、3X蔗糖、0.5g/lMES(pH5.2)、0.5mg/1GA3、0.8%0xoidagar。與農(nóng)桿菌共培養(yǎng)3天之后，將葉柄外植體轉(zhuǎn)到含有3.75mg/lBAP、0.5mg/1GA3、0.5g/1MES(pH5.2)、300mg/l特美汀和選擇劑的再生培養(yǎng)基上，直到枝條再生。一旦外植體開始發(fā)育枝條，就將其轉(zhuǎn)移到枝條延長培養(yǎng)基(A6，含有完全強度的MS培養(yǎng)基，其包括維生素、2%蔗糖、0.5%0xoidagar、100mg/1肌醇、40mg/1硫酸腺嘌呤、0.5g/1MES(pH5.8)、0.0025mg/lBAP、0.lmg/1IBA、300mg/1特美汀和選擇劑)上。使用T叫Man探針，通過qPCR，分析來自初代轉(zhuǎn)基因植物(TO)的體外和溫室材料的樣品，以驗證T-DNA的存在，以及測定T-DNA整合的數(shù)量。通過自花授粉從初代轉(zhuǎn)基因植物產(chǎn)生種子。將第二代植物培養(yǎng)于溫室條件下，并自花授粉。使用T叫Man探針通過qPCR分析植物，以驗證T-DNA的存在，以及測定T-DNA整合的數(shù)量。比較純合轉(zhuǎn)基因植物、雜合轉(zhuǎn)基因植物和單性(azygous)(失效轉(zhuǎn)基因)植物的脅迫耐受性，例如，在實施例2和3所述的檢驗中，還在溫室和田間研究兩者中比較它們的實施例5:篩選脅迫耐受性稻植物使用已知的方法來產(chǎn)生包含表1的多核苷酸的轉(zhuǎn)基因稻植物。產(chǎn)生大約15至20個獨立轉(zhuǎn)化子(T0)。將初代轉(zhuǎn)化子從組織培養(yǎng)室轉(zhuǎn)移到溫室，用于培養(yǎng)和收獲T1種子。針對轉(zhuǎn)基因的存在/不存在以3:1分離的T1后代的5個事件被保留下來。對于這些事件中的每個而言，通過視覺標記篩選，選擇含有轉(zhuǎn)基因(雜合和純合子)的10株T1幼苗和缺乏轉(zhuǎn)基因(失效合子(皿llizygotes))的10株T1幼苗。將選出的Tl植物轉(zhuǎn)到溫室。每株植物獲得獨特的條形碼標記，以將表型數(shù)據(jù)與相應植物明確聯(lián)系起來。在下述環(huán)境設(shè)置下，將選出的Tl植物培養(yǎng)于10cm直徑盆中的土壤上光周期=11.5小時，日光強度二30，0001ux或更高，日間溫度=281:或更高，夜間溫度=221:，相對濕度=60-70%。轉(zhuǎn)基因植物和相應的失效合子以隨機位置并排種植。從播種階段起，到成熟階段為止，令植物數(shù)次通過數(shù)字成像箱。每個時間點，以至少6個不同角度采集每株植物的影像(2048X1536像素，1600萬色)。在第二次實驗中，用T2植物驗證用Tl植物進行的第一次實驗中獲得的數(shù)據(jù)。具有正確表達模式的品系被選用來進行進一步的分析。通過監(jiān)測標記表達，篩選來自Tl中陽性植物(雜合子和純合子)的種子批次。對于選擇的每一事件而言，再保留雜合子的種子批次，用于T2評估。在每批種子批次內(nèi)，在溫室中培養(yǎng)同樣數(shù)量的陽性和陰性植物以用于評估。針對其改善的生長和/或產(chǎn)量和/或脅迫耐受性，篩選轉(zhuǎn)基因植物，例如，使用實施例2和3描述的檢驗，對產(chǎn)量而言，溫室和田間研究兩者中均進行。實施例6:脅迫耐受性的大豆植物使用共有的共同未決國際申請?zhí)朩O2005/121345中描述的方法，將表l的多核苷酸轉(zhuǎn)化進大豆，該文獻的內(nèi)容通過弓I用并入本文。然后針對其在水受限條件下改善的生長和/或干旱、鹽和/或冷耐受性，篩選轉(zhuǎn)基因植物，例如，使用實施例2和3描述的檢驗，并且在溫室和田間兩者研究中針對產(chǎn)量來篩選。實施例7:脅迫耐受性的小麥植物使用Ishida等人，1996，NatureBiotech.14745-50所述的方法將表1的多核苷酸轉(zhuǎn)入小麥。將不成熟的胚與攜帶有"超級雙元"載體的根癌農(nóng)桿菌共培養(yǎng)，通過器官發(fā)生回收轉(zhuǎn)基因植物。該流程提供了2.5%至20%的轉(zhuǎn)化效率。然后針對其在水受限條件下改善的生長和/或產(chǎn)量和/或脅迫耐受性來篩選轉(zhuǎn)基因植物，例如，使用實施例2和3描述的檢驗，對產(chǎn)量而言，溫室和田間研究兩者中均進行。實施例8:脅迫耐受性的玉米植物使用農(nóng)桿菌屬將表1的多核苷酸轉(zhuǎn)化進玉米的不成熟胚。在吸漲(imbibition)后，將胚轉(zhuǎn)到?jīng)]有選擇劑的培養(yǎng)基。7至10天后，將胚轉(zhuǎn)到含有選擇劑的培養(yǎng)基上，培養(yǎng)4周(2周轉(zhuǎn)移一次)，以獲得經(jīng)轉(zhuǎn)化的愈傷組織細胞。通過將抗性愈傷組織轉(zhuǎn)到補充有選擇劑的培養(yǎng)基上來啟動植物再生并在25-27t:光照下培養(yǎng)二至三周。然后將再生的枝條轉(zhuǎn)到具有含選擇劑的培養(yǎng)基的生根盒上。將具有根的小植物轉(zhuǎn)到溫室中小盆中的盆栽混合物中，適應新環(huán)境之后將其移種到更大的盆中，并在溫室中保持，直到成熟。使用檢驗，例如實施例2和3中所述的檢驗，對這些植物中的每株都獨特標簽、取樣并針對轉(zhuǎn)基因拷貝數(shù)加以分析。標記出轉(zhuǎn)基因陽性和陰性植物，將相同大小的配對，用于一起移種到大盆中。這為轉(zhuǎn)基因陽性和陰性植物提供了統(tǒng)一的并有競爭性的環(huán)境。對大盆澆水，達到一定的土壤田間持水量百分比，這取決于需要的水脅迫的嚴重性。通過隔天澆水來保持土壤水水平。在生長期間測量植物生長和生理性狀，例如高度、莖直徑、葉巻曲、植物萎蔫、葉延伸速率、葉水狀態(tài)、葉綠素含量和光合速率。生長期之后，收獲植物的地上部分，對每株植物稱鮮重和干重。然后對轉(zhuǎn)基因陽性和陰性植物之間的干旱耐受性表型加以比較。使用檢驗，例如，實施例2和3所述的檢驗，對盆加蓋，所述蓋允許幼苗長起來但使得水的損失最小化。定期對每只盆加以稱重，加水以保持最初的水含量。在實驗末尾，測量每株植物的鮮重和干重，計算每株植物消耗的水，計算每株植物的WUE。在實驗期間測量植物生長和生理性狀，例如，WUE、高度、莖直徑、葉巻曲、植物萎蔫、葉延伸速率、葉水狀態(tài)、葉綠素含量和光合速率。然后對轉(zhuǎn)基因陽性和陰性植物之間的WUE表型加以比較。使用檢驗，例如，實施例2和3所述的檢驗，將這些盆保持于溫室中有統(tǒng)一環(huán)境條件的區(qū)域，并最優(yōu)培養(yǎng)。對這些植物中的每株都獨特標簽、取樣并針對轉(zhuǎn)基因拷貝數(shù)加以分析。令植物在這些條件下生長，直到它們達到預定的生長階段。然后停止給水。隨著脅迫強度的增加，測量植物生長和生理性狀，例如，高度、莖直徑、葉巻曲、植物萎蔫、葉延伸速率、葉水狀態(tài)、葉綠素含量和光合速率。然后對轉(zhuǎn)基因陽性和陰性植物之間的干燥耐受性表型加以比較。在小盆中種植針對轉(zhuǎn)化事件而言分離的轉(zhuǎn)基因玉米種子，以在循環(huán)性干旱檢驗中進行測試。將這些盆保持于溫室中有統(tǒng)一環(huán)境條件的區(qū)域，并最優(yōu)培養(yǎng)。對這些植物中的每株都獨特標簽、取樣并針對轉(zhuǎn)基因拷貝數(shù)加以分析。令植物在這些條件下生長，直到它們達到預定的生長階段。然后以固定的時間間隔，對植物重復澆水至飽和。在實驗期間重復該水/干旱循環(huán)。在生長階段期間測量植物生長和生理性狀，例如，高度、莖直徑、葉巻曲、葉延伸速率、葉水狀態(tài)、葉綠素含量和光合速率。在實驗末尾，收獲植物，稱地上部分的鮮重和干重。然后對轉(zhuǎn)基因陽性和陰性植物之間的循環(huán)性干旱耐受性表型加以比較。為測試分離的轉(zhuǎn)基因玉米在無雨條件下的干旱耐受性，使用單個位置或多個位置處的受管理干旱脅迫。通過滴水帶(diptape)和頂部灌溉來控制作物水可利用性，這在下述位置進行，該位置在平均5個月的季節(jié)內(nèi)具有小于10cm的降水以及超過5t:的最低溫度，或者是這樣的位置，其具有期待的被自動"防雨篷(rain-outshelter)"阻截的應季降雨，防雨篷在不需要的時候撤回以提供開放的田間條件。遵循區(qū)域中的標準農(nóng)業(yè)實踐，進行土壤準備、種植、施肥和害蟲控制。在每小塊上播種針對單個轉(zhuǎn)基因插入事件的存在而分離的種子。在葉樣品上使用T叫man轉(zhuǎn)基因拷貝數(shù)檢驗，以將轉(zhuǎn)基因與失效分離子對照植物區(qū)分開。還針對與干旱耐受性、生長和產(chǎn)量相關(guān)的一系列表型，對以這種方式基因分型的植物加以計分。這些表型包括植物高度、每植物的谷粒重量、每植物的谷粒數(shù)、每植物的穗數(shù)、地上干重、葉對水蒸汽的傳導率、葉C02攝取、葉的葉綠素含量、光合作用相關(guān)的葉綠素熒光參數(shù)、水分利用效率、葉的水勢、葉相對水含量、莖液流速率、莖導水率、葉溫度、葉反射率、葉的光吸光度、葉面積、到開花所需天數(shù)、開花-抽絲間隔、籽粒灌漿持續(xù)時間、滲透勢、滲透調(diào)節(jié)、根尺寸、葉延伸速率、葉角度、葉巻曲和存活。所有測量都是使用廠商提供的標準方案，用用于田間生理學的商業(yè)可獲得的設(shè)備來進行的。各植物被用作為每種事件的重復單位。為測試無雨條件下非分離轉(zhuǎn)基因玉米的干旱耐受性，使用單個位置或多個位置處的受管理干旱脅迫。通過滴水帶和頂部灌溉來控制作物水可利用率，這在下述位置進行，該位置在平均5個月的季節(jié)內(nèi)具有小于10cm的降水量以及超過5t:的最低溫度，或者是這樣的位置，其具有期待的被自動"防雨篷"阻截應季降水量，防雨篷在不需要的時候撤回以提供開放的田間條件。遵循區(qū)域中的標準農(nóng)業(yè)實踐，進行土壤準備、種植、施肥和害蟲控制。設(shè)計試驗方案，使得含有非分離轉(zhuǎn)基因事件的小塊土地與失效分離子對照的鄰接小塊土地成對。失效分離子是由于孟德爾分離不含轉(zhuǎn)基因的轉(zhuǎn)基因植物的后代(或者源于后代的品系)。在試驗周圍分布有針對特定事件的額外重復成對的小塊土地。在成對的小塊土地中對與干旱耐受性、生長和產(chǎn)量相關(guān)的一系列表型加以計分，并在小塊土地的水平上對其加以評估。當測量技術(shù)僅能應用于個體植物時，在小塊土地內(nèi)每次隨機選擇植物。這些表型包括植物高度、每植物的谷粒重量、每植物的谷粒數(shù)、每植物的穗數(shù)、地上干重、葉對水蒸汽的傳導率、葉C02攝取、葉的葉綠素含量、光合作用相關(guān)的葉綠素熒光參數(shù)、水分利用效率、葉的水勢、葉相對水含量、莖液流速率、莖導水率、葉溫度、葉反射率、葉的光吸光度、葉面積、到開花所需天數(shù)、開花-抽絲間隔、籽粒灌漿持續(xù)時間、滲透勢、滲透調(diào)節(jié)、根尺寸、葉延伸速率、葉角度、葉巻曲和存活。所有測量都是使用廠商提供的標準方案，用用于田間生理學的商業(yè)可獲得的設(shè)備來進行的。各小塊土地被用作為每種事件的重復單位。為針對干旱耐受性和產(chǎn)量對轉(zhuǎn)基因玉米進行多位置測試，選擇5至20個包括主要玉米種植區(qū)的位置。將其廣泛分布，以提供一系列預計的作物水可利用率(基于平均溫度、濕度、降水量和土壤類型)。不對作物水可利用率加以標準農(nóng)業(yè)實踐外的改變。設(shè)計試驗方案，使得含有非分離轉(zhuǎn)基因事件的小塊土地與失效分離子對照的鄰接小塊土地成對。在成對的小塊土地中對與干旱耐受性、生長和產(chǎn)量相關(guān)的一系列表型加以計分，并在小塊土地的水平上對其加以評估。當測量技術(shù)僅能應用于個體植物時，在小塊土地內(nèi)每次隨機選擇植物。這些表型包括植物高度、每植物的谷粒重量、每植物的谷粒數(shù)、每植物的穗數(shù)、地上干重、葉對水蒸汽的傳導率、葉C02攝取、葉的葉綠素含量、光合作用相關(guān)的葉綠素熒光參數(shù)、水分利用效率、葉的水勢、葉相對水含量、莖液流速率、莖導水率、葉溫度、葉反射率、葉的光吸光度、葉面積、到開花所需天數(shù)、開花-抽絲間隔、籽粒灌漿持續(xù)時間、滲透勢、滲透調(diào)節(jié)、根尺寸、葉延伸速率、葉角度、葉巻曲和存活。所有測量都是使用廠商提供的標準方案，用用于田間生理學的商業(yè)可獲得的設(shè)備來進行的。各小塊土地被用作為每種事件的重復單位。附錄來自擬南芥屬的At2g20725的cDNA序列(SEQIDNO:1):GTACAATGCATTGACACTTCTCTTCTCTTAG將At2g20725cDNA翻譯為下述氨基酸序列(SEQIDNO:2)來自擬南芥屬的At3g26085的cDNA序列(SEQIDNO:3)TAA將At3g26085cDNA翻譯為下述氨基酸序列(SEQIDNO:4)ASIVGIVYGYAAVLSSSLIVPMASHALNNLVGGLLWRYSSKIKSLE來自擬南芥屬的AtFACE-2的cDNA序列(SEQIDNO:5):<formula>formulaseeoriginaldocumentpage44</formula>AAAAAAA將ZM57353913cDNA翻譯為下述氨基酸序列(SEQIDNO:8):PIIAHVFC匪GLPVFSSPRTKGAALVAFLAGSIAFFWLLFPATSPELYNSSFDRCSCWHGFC麗K來自玉米的ZM59252659的cDNA序列(SEQIDNO:9):GGTAGCGTTTCTGGCTGGTTCAATAGCCTTCTTTTGGCTGCTTTTCCCTGCAACAAGTCGTCAATCCCTTCTCAAAGTGGAATTTGACTTTGTTGTAAAAAAAAAAA將ZM59252659cDNA翻譯為下述氨基酸序列(SEQIDNO:10)FGWYATFLLIRTGNLLCPITAHVFC匪GLPVFSSPRTKGAALVAFLAGSIAFFWLLFPATSPELYNSSFDRCSCWHGFC麗K來自胡椒的CASAR82A的cDNA序列(SEQIDNO:11):CGGTCGCTGCGATTACTGTTGCGCC將CASAR82AcDNA翻譯為下述氨基酸序列(SEQIDNO:12):AGKVIYCKTCKTCHGRCDYCCA來自大腸桿菌的b3358的cDNA序列(SEQIDNO:13):CTTCTCCCTCGTTCCTGCCTGTTGCAATATTGCGGGCCTTGATAAAGTTGCGGGATTCGAAGGCGTAA將b3358cDNA翻譯為下述氨基酸序列(SEQIDNO:14):麗FFGGTVWLWPQWQSGLLRKNAHDALEAYQEAIRLILSEDPQPTPLAWQRMRVNQAHNTLYAIQRCQQRLEYDEPGSSGDANMDAPEMQPHEGAAGTLEQHLQRVIGHLNTMHTISSMAWRQRP朋GIWLSRKLRDSKA來自苔蘚(moss)的EST564的cDNA序列(SEQIDNO:15):GCCAGGTTCCGGAACATGAACTTAGCTTTTAACAAATAA將EST564cDNA翻譯為下述氨基酸序列(SEQIDNO:16):GGSISNHISSKCPIDMPKGDNPPSLVSSNMNLAFNK來自卡諾拉油菜的BN49502266的cDNA序列(SEQIDNO:17)AAAAAAAAA將BN49502266cDNA翻譯為下述氨基酸序列(SEQIDNO:18)SLRSDEAEQRRLLNVLY來自大豆的GM49788080的cDNA序列(SEQIDNO:19)AATTTAACAGAGATTGAAAAAATGTTCGTTCAGAA將GM49788080cDNA翻譯為下述氨基酸序列(SEQIDNO:20)DSNLVSRASSVRGPPLSVRGGGVPLPSRTLAPCAAPMET來自大豆的GM53049821的cDNA序列(SEQIDNO:21)GGGGCGTTAGGGTTAGGGTTAGGGTTTCCAAGAGATGTGGCACATATGGCTTCTGGTACCGACATCATTCTTGAATTCAAAGTTATTTTACAACAAATTATATGGAAAAAAAAAAAAAAA將GM53049821cDNA翻譯為下述氨基酸序列(SEQIDNO:22):MLQALMNLFSLCWKPFGRDAADRIDSIGVTGREGKDGLLWFRDGGKYGSGDFSMAVVQAFNREPLNAKFRLPEPMNMPILSANPTILSHALQPNDSFLIFASDGLWEHLSNEKAVDIVNSNTLSIRSALDH來自玉米的ZM58462719的cDNA序列(SEQIDNO:23):AAAAAA將ZM58462719cDNA翻譯為下述氨基酸序列(SEQIDNO:24):MLVKLMNLLRACWRPSSNRHARTGSDVTGRQDGLLWYKDAGQHVNGEFSMAVVQANNLT"^""nT。T7TT^TW，T7""、WT卿T7…WTTTT7冊TT,冊AWM…ASTHRGPTLSLRGGGGSAGLRSNTLAPT來自玉米的ZM61092633的cDNA序列(SEQIDNO:25):<formula>formulaseeoriginaldocumentpage52</formula>MTTAAWSRPSVSLRGGGFPIHSNTLAPFSVPTELNNSY來自玉米的ZM62016485的cDNA序列(SEQIDNO:27):AAAAAAAAAAA將ZM62016485cDNA翻譯為下述氨基酸序列(SEQIDNO:28):MLAAVMDYFSTCWGPRSRAGHRGKGSDAAGRQDGLLWYKDAGQLVTGGFSMAVVQAN"TT^"W。T。TWW，T7""、W評T^C^WTTTT7A鼎rm…T7TTT,,53LVQSSPRNGIARRLVKAAMQEAAKKREMRYSDLKKIDRGVRRHFHDDITVVVVFLDSDAMSKASWSKSPSFSLRGGGVTLPAKSLAPFSAPAQLNGTH來自玉米的ZM62051019的cDNA序列(SEQIDNO:29):AAAAAGGGGAGGAAGGAAGAGGCTGAAAGGGCGGTGAAAAAAAAAA將ZM62051019cDNA翻譯為下述氨基酸序列(SEQIDNO:30):MLAAVMDYFSSCWGPRSGAGHRGKGSDAAGRQDGLLWYKDAGQLVTGEFSMAVVQANMSKASWSKSPSVSLRGGGVALPAKSLAPFSAPARLNSTY來自玉米的ZM65086957的cDNA序列(SEQIDNO:31)CCAGCTTCTTAGCCTGACTGACTCTCTTTGATCCCGGCCGCTATTTTTCTTGTTAAAAAAAAAA將ZM65086957cDNA翻譯為下述氨基酸序列(SEQIDNO:32):MLAAVMDYFSTCWGPRSRAGHRGKGSDAAGRQDGLLWYKDAGQLVTGGFSMAVVQANLVQSSPRNGIARRLVKAAMQEAAKKREMRYSDLKKIDRGVRRHFHDDITVVVVFLDSDAMSKASWSKSPSVSLRGGGVTLPAKSLAPFSAPAQLNGTH來自玉米的ZM68587657的cDNA序列(SEQIDNO:33):TATCAATGATCATCTTTTCCAGAATCTGAAAAGTAAAGAAGATGGATTCTTCTCCATTGTTACCAAAGTATTGCGTCCGTGAGAAAAGAACTGCAGTCAATGGAACCATCAATCAGTGTGCAACCACTACAACCAAAAGTGCCTGGTGGAGTGGAGGCTACTGACTGAAGGTGGTTTTCTTTCCTTGTGTCGACATCTACTGTTGTTAATTGAAAAAAAAAAAAAAA將ZM68587657cDNA翻譯為下述氨基酸序列(SEQIDNO:34)VSQASTHRGPTLSLRGGGGSAGLRSNTLAPT來自苔蘚的EST390的cDNA序列(SEQIDNO:35):CAATTCGTGTTTTGGGTCTCATATGAGCAGCTCCGCCGCATCAGCGGTCTTTTGTTCCTTCTCTTTTCTGCCTCAATTGGATGTCATAGCTGCACTTGCGTTAACCG將EST390cDNA翻譯為下述氨基酸序列(SEQIDNO:36):FLVNMGELACYDQSKQWIIGRGIAADNIGAHTLASVMSGLSATILSCPADVVKT匪NQGA來自卡諾拉油菜的BN51363030的cDNA序列(SEQIDNO:37):CCACAATTCTCCCCCAGCTTTTCTGGAGACGACTCTTTTCG將BN51363030cDNA翻譯為下述氨基酸序列(SEQIDNO:38)DVIKTRVMNMKVDARGGEAQYKGAWDCAVKTVRAEGPMALYKGFVPTVCRQGPFTVVLFVTLEQVKKLLRDF來自卡諾拉油菜的BN42986056的cDNA序列(SEQIDNO:39):GACGATCAACAGAGCGATGCTCGTGACGTAAATTTTGTTTTTTTTTATTGTATTTTCTTT將BN42986056cDNA翻譯為下述氨基酸序列(SEQIDNO:40)ILEKGLMRDGLGTHVTSSFAAGFVASVASNPVDVIKTRVMNMKVEAGKTAPYKGAVDCALKTVRAEGIMALYKGFLPTVSRQAPFTVMFVTLEQVKKVFKDFDF來自卡諾拉油菜的BN49389066的cDNA序列(SEQIDNO:41):AAGCCTTTCGTCAATGGCGGTGCCTCTGGTATGCT59AAGCAAACCTTATGAAGTGCGCGGTGAAAATATGATGAGAAGAATTCATTTGCTTTTTAATCATATACATGATTAG將BN49389066cDNA翻譯為下述氨基酸序列(SEQIDNO:42)GKYPYTGSQDCAMQNRRTFEILHRLSGILRQDRPSRHGDMDLPEPDYKVPKEHWD-VIFKQTL來自卡諾拉油菜的BN51339479的cDNA序列(SEQIDNO:43):TTATCCAGCCGATCGACATGATCAAGGTGAGGATTCAGCCGCTACCTCTGTACCAGAAGGCTCTATGTGGTCGTCCTACTGTGGTCAGAGCTATGGCTTTGAACATGGGAAGTATCCATACACGGGTTCGCTTGACTGTGCCATTGAAAACGAAAACGCAATTGGAATTGTGTTAGATCTTTA將BN51339479cDNA翻譯為下述氨基酸序列(SEQIDNO:44):MAEEKKVAPIGVWNTVKPFVNGGASGMLATCVIQPIDMIKVRIQLGQGSAVSVTKNMLKNDKYPYTGSLDCAMQTLKSGGPLKFYTGFPVYCVRIAPHV匪TWIFLNQITKFQKTIGL來自玉米的ZM57651070的cDNA序列(SEQIDNO:45):ATCTGAACTTGGGAGGGAACCCCGATGCAGCCGCGGCTGTAGTGTAAAAACATTATTTTGGGTGACCATATGGGTAACCTGCTGTA-CAAAAAAAAAA將ZM57651070cDNA翻譯為下述氨基酸序列(SEQIDNO:46)來自玉米的ZM62073276的cDNA序列(SEQIDNO:47)CCCTTTGACTATGTGAAGACACAGATTCAGAAGAGAAGAAGATCGGCATATAGGATTCCCATCGGACGGTTGGGAGGGTGGCATGCTTTTGTTGGCTGCCATATTTTATACAGATTTTTACCTTCAAAAAAAAAAAAAA將ZM62073276cDNA翻譯為下述氨基酸序列(SEQIDNO:48):MADAKQQQQQQQQPQQAAAAATGVWKTVKPFVNGEASGMLATCVIQPIDMVKVRIQLGEGSAGQVTRNMLANEGVRSFYKGLSAGLLRQATYTTARLGSFRVLTNKAVEKNEGKPLPLFKGAGPTVVRAMALNMGMLASYDQSVELFRDKFGAGEISTVVGASAVSGFFASACSLPFDYVKTQIQKMQPDANGKYPYTGSLDCAVKTFKSGGPFKFYTGFPVYCVRIAPHV匪TWIFLNQIQKFEKKIGI來自苔蘚的EST257的cDNA序列(SEQIDNO:49):[1048]CCGTTAAC將EST257cDNA翻譯為下述氨基酸序列(SEQIDNO:50):HKGVYKGQDVAVKLLEWGEENTMKKTEVQYYRNQFRQEVAVWHKLDHPNVTKFIGASMVSRGLAYLHSQKIAHRDVKTENMLLDKQMRVKIADFGVARVEASNPKDMTGDTGTPGYMGLAD頂RQCWDANPEKRPAMADVVQMLEALDTSKGGGMIPTDAQPHGCLCFGRFKGP來自亞麻的LU61665952的cDNA序列(SEQIDNO:51):1065]1066][1072][1073][1074][1075][1076][1077][1078]AAAAAAAAAAAA將LU61665952cDNA翻譯為下述氨基酸序列(SEQIDNO:52):[1081][1082][1083]YKVVIQLALDLSRGLSYLHSKKIVHRDVKSENMLLDNHRNLRIADFGVARVEAQNPSDMTG[1085][1086]TRGP來自小麥的TA56863186的cDNA序列(SEQIDNO:53):[1089][1090][1091][1092][1093][1094][1095][1096][1097][1098][1099][1100][1101][1102][1103][1104][1105][1106][1107][1108][1109][川O]:川2]:川3]:川4]:川5]:川6]:川7]:川8]:川9]:"2o]:1121]:"22]:"23]:"24]:"25]:"26]:"27]:"28]:"29]:"3o]:1131]:"32]:"33]:"34]:"35]:"36]:"37]:"38]:"39]:1140]:1141]:1142]:1143]:1144]:1145]:1146]:1147]:1148]:1149]AAAAAAAAAAA將TA56863186cDNA翻譯為下述氨基酸序列(SEQIDNO:54)EQQFVQEV匪LSTLRHPNIVRFIGACRKSIVWCIITEYAKGGSVRQFLAKRQNKSVPLRLA碰PEMIQHRPYDHKVDVYSFGIVLWELITGMLPFTNMTAVQAAFAVVNKGARPAIPHDCLPSLTH頂TRCWDANPEVRPPFTEIVCMLENAEMEVVSHVRKARFRCCVAEPMTTD來自玉米的ZM62026837的cDNA序列(SEQIDNO:55):AAAAAAA將ZM62026837cDNA翻譯為下述氨基酸序列(SEQIDNO:56)KLAYKVVVQIALDLARGLNYLHSRKIVHRDVKTENMLLDTQRNLKIADFGVARVEAQNPKDLRPDIPRCCPSPMAN頂RKCWDANPDKRPDMDDVVRFLEALDTSKGGGMIPEGQAGGCLCFFRARGP來自玉米的ZM65457595的cDNA序列(SEQIDNO:57):1150]1151]1152]1153]1154]1155]1156]1157]1158]1159]1160]1161]1162]1163]1164]1165]1166]1167]1168]1169]1170]1172]1173]1174]1175]1176]1177]1178]1179]1180]1181]1182]1183]1184]1185]1186]1187]1188]將ZM65457595cDNA翻譯為下述氨基酸序列(SEQIDNO:58):66MKEEGGGGDAGFVRADQIDLKSLDEQLERHLTRAWTMEKRKEEASAGAGAGARQHQQSSFLIKNRRKKLAFKVVVQIALDLARGLSYLHSKKIVHRDVKTENMLLDKTRTVKIADFGVARLSAVVRQNLRPEIPRCCPSSLSNVMKRCWDANPDKRPEMAEAVSMLEAIDTSKGGGMIPVDQRPGCLACFRQYRGP來自玉米的ZM67230154的cDNA序列(SEQIDNO:59):CGCTCACCTCCCCGGCGCTCCCGGCTACAACCACTGCGCTTCGAGTTATAATGCTTGCTGTAAGTTAAGGTGTGGAAAAAAAAAAAAAA將ZM67230154cDNA翻譯為下述氨基酸序列(SEQIDNO:60):[1228]GALKNFLIKNRRRKLAFKVVVQIALDLARGLCYLHSKKIVHRDVKTENMLLDKTRTVKIADFG[1230][1231]MIPKDQTQGCLSCFRQYRGP來自苔蘚的EST465的cDNA序列(SEQIDNO:61)[1234][1235][1236][1237][1238][1239][1240][1241][1242][1243][1244][1245][1246][1247][1248][1249][1250][1251][1252][1253][1254][1255][1256][1257][1258][1259][1260][1261][1262][1263][1264][1265][1266][1267][1268][1269][1270][1271][1272][1273][1274][1275][1276][1277][1278][1279][1280][1281][1282][1283][1284][1285][1286][1287][1288][1289][1290][1291][1292][1293][1294][1295][1296][1297][1298][1299][1300][1301][1302][1303][1304][1305]TCCACTAGCGTTTTATGGCTATTTTTCATTAAGTCCTCGTGCCGTTA將EST465cDNA翻譯為下述氨基酸序列(SEQIDNO:62)RGTA預ETGDFDEARADFKQMITVDKAVTVDATAALQKLKQKEREAELKAKKQFKGLFDLKGGEHLIRTVTFGKCTIL來自酵母的YBL109w的cDNA序列(SEQIDNO:63):TCTGCTACTCACCATACTGTTGTTCTACCCTCCATATTAA將YBL109wcDNA翻譯為下述氨基酸序列(SEQIDNO:64)STYYHQSTVHHNRYPPISHIQLHYHLPCHYSTIHHLLLTILLFYPPY來自酵母的YBLlOOc的cDNA序列(SEQIDNO:65):GCGATAGTTATGAGAGCTAA將YBLlOOccDNA翻譯為下述氨基酸序列(SEQIDNO:66)AALVELIRVLDRERIAAVRANIIICACFFYLFCYCSCDSYES來自酵母的YKL184w的cDNA序列(SEQIDNO:67):[1306:[1307:[1308:[1309:[1346][1347][1348][1349][1350][1351][1352][1353][1354][1355][1356][1357][1358][1359][1360][1361][1362][1363][1364][1365][1366][1367][1368][1369][1370][1371][1372][1373][1374][1375][1376][1377][1378][1379][1380][1381][1382][1383]TTCATCCGACTAGCGCAGAAGAATTGGTTACTATGAGATAA將YPL091wcDNA翻譯為下述氨基酸序列(SEQIDNO:70):CVNVGCVPKKV麗YASDLATRVSHANEYGLYQNLPLDKEHLTF麗PEFKQKRDAYVHRLPNEKVVGLHIVGDSSAEILQGFGVAIKMGATKADFDNCVAIHPTSAEELVTMR來自小麥的TA54587433的cDNA序列(SEQIDNO:71):將TA54587433cDNA翻譯為下述氨基酸序列(SEQIDNO:72)DKTHRKDDLL來自玉米的ZM68532504的cDNA序列(SEQIDNO:73):[1384:[1385:[1386:[1387:[1388:[1389:[1390:[1424][1425][1426][1427][1428][1429][1430][1431][1432][1433][1434][1435][1436][1437][1438][1439][1440][1441][1442][1443][1444][1445][1446][1447][1448][1449][1450][1451][1452][1453][1454][1455][1456][1457][1458][1459][1460][1461]ATCTTGCTTATGAATAATCATTCTAGTGTCTCTTCAAAAAAAAAAAAAAA將BN42856089cDNA翻譯為下述氨基酸序列(SEQIDNO:76)GFNWCQDKNVVTVFSAPNYCYRCGNMAAILEIGENMDQNFLQFDPAPRQVEPDTTRKT-PDYFL來自卡諾拉油菜的BN43206527的cDNA序列(SEQIDNO:77):TTTCATTTATAAAATATGAGTTTGATACCGAAAAAAAAAAAAAAA將BN43206527cDNA翻譯為下述氨基酸序列(SEQIDNO:78):73[1462][1463][1464][1465][1466][1467][1468][1469][1470][1471][1472][1473][1474][1475][1476][1477][1478][1479][1480][1481][1482][1483][1484][1485][1486][1487][1488][1489][1490][1491][1492][1493][1494][1495][1496][1497][1498][1499][1500]GF麗CQDKNVVTVFSAPNYCYRCG薩AILEISENMEQNFLQFDPAPRQVEPDTTRKT-PDYFL來自向日葵的HA66872964的cDNA序列(SEQIDNO:79):將HA66872964cDNA翻譯為下述氨基酸序列(SEQIDNO:80):GYNWSQENNVVTIFSAPNYCYRCGNMAAILEVGENMDQNFLQFDPAPRQVEPDVARRT-PDYFL來自亞麻的LU61662612的cDNA序列(SEQIDNO:81):TATTCACTGTGGTCTTGTACCAAAAAAAAAAAAAAA將LU61662612cDNA翻譯為下述氨基酸序列(SEQIDNO:82)QEVPHEGPMCDLLWSDPDDRCGWGISPRGAGYTFGQDISQQFNHTNGLSLISRAHQLVMEGYNWAQDKNVVTVFSAPNYCYRCG薩AILEIGENMEQNFLQFDPAPRQIEPETTRRTPDYFL來自稻的0S32806943的cDNA序列(SEQIDNO:83):GAGGAAATCATGAGAGCAGACAAATCACTCAAGTGTACGGCTTCTACGATGAATGCTT[1540][1541][1542][1543][1544][1545][1546][1547][1548][1549][1550][1551][1552][1553][1554][1555][1556][1557][1558][1559][1560][1561][1562][1563][1564][1565][1566][1567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