專利名稱：：檢測間充質(zhì)干細(xì)胞的標(biāo)記和采用該標(biāo)記識別間充質(zhì)干細(xì)胞的方法檢測間充質(zhì)干細(xì)胞的標(biāo)記和采用該標(biāo)記識別間充質(zhì)干細(xì)胞的方法本申請是以下申請的分案申請?jiān)干暾執(zhí)?00480007550.0(國際申請?zhí)?PCT/JP2004/002457);原案申i奮日2004年02月27日；原案發(fā)明創(chuàng)造名稱檢測間充質(zhì)干細(xì)胞的標(biāo)記和采用該標(biāo)記識別間充質(zhì)干細(xì)胞的方法默領(lǐng)域本發(fā)明涉及^t測、分離i賜,^M干細(xì)胞、尤其是涉及在檢測、分離識另,充質(zhì)干細(xì)胞中《柳的用于檢測間充質(zhì)干細(xì)胞的基因標(biāo)己和多肽標(biāo)記，以及用戶脫^H己檢測、識別間充質(zhì)干細(xì)胞的方法。背景駄Mlf周知，間充質(zhì)干細(xì)胞是存在于哺乳類的"t^處，分化為脂肪細(xì)胞、軟骨細(xì)胞、骨細(xì)胞的多能性干細(xì)胞。由于其分化的多能性，間充質(zhì)干細(xì)胞作為以再生醫(yī)療為的目的多種組織的移植材料正穀l汄們關(guān)注(《基因醫(yī)學(xué)》第4巻第2期(2000)p58-61)。最近，發(fā)表了關(guān)于間充質(zhì)干細(xì)胞研究現(xiàn)狀與展望的綜述，作出了關(guān)于間充質(zhì)干細(xì)胞的收集與培養(yǎng)的報(bào)告(實(shí)驗(yàn)醫(yī)學(xué)、第19巻第3期(2月號)2001、p350-356)。此外，已有報(bào)道間充質(zhì)干細(xì)胞也存在于脂肪組織中(TissueEngineering,P.A.Zuketal.，Multilineagecellsfromhumanadiposetissue:implicationsforcell-basedtherapies.7:211-228,2001)。近年，一些專利申請公開了關(guān)于間充質(zhì)干細(xì)胞的培養(yǎng)、分化等內(nèi)容。例如，特表平11-506610號公報(bào)中公開了關(guān)于在無血清環(huán)境下維持人間充質(zhì)前體細(xì)胞生存的組和物及其方法，在特表平10-512756號公報(bào)中公開了關(guān)于為了誘導(dǎo)間充質(zhì)干細(xì)胞的分化將其與由前列腺素、抗壞血酸、膠原細(xì)胞外基質(zhì)等組成的骨誘導(dǎo)因子、分化付隨因子、軟骨誘導(dǎo)因子等生物活性因子相接觸的方法，在特開2000-217576號公報(bào)中公開了關(guān)于在催乳激素或其等效物共存下培養(yǎng)多能性間充質(zhì)細(xì)胞，使間充質(zhì)細(xì)胞分化成脂肪細(xì)胞的方法。首先，本發(fā)明人公開了一種通過在基底膜細(xì)胞外基質(zhì)存在條件下或是在含有成纖維細(xì)胞增殖因子(FGF)等物質(zhì)的培養(yǎng)基中培養(yǎng)間充質(zhì)干細(xì)胞，使得間充質(zhì)干細(xì)胞得以顯著的增殖，并且發(fā)現(xiàn)能夠維持其分化能力，與以前的培養(yǎng)方法相比獲得了效果顯著的間充質(zhì)干細(xì)胞的培養(yǎng)方法(特開2003-52360號公報(bào))。并且，公開了一種為了在采集間充質(zhì)干細(xì)胞時(shí)在釆集母體以安全并且容易方式進(jìn)行采集，從口腔組織中分離采集間充質(zhì)干細(xì)胞的方法(特開2003-52365號公報(bào))。近年，隨著再生醫(yī)療的進(jìn)展，由于其分化多能性，人們正關(guān)注于將間充質(zhì)干細(xì)胞作為骨、軟骨、肌肉、脂肪、齒周組織等多種組織的再生醫(yī)療性的移植材料。為了在組織的再生醫(yī)療中利用間充質(zhì)細(xì)胞，首先，從活體組織中采集所述干細(xì)胞，使其增殖，尤其是必需使其分化增殖，從而進(jìn)行組織的制備。間充質(zhì)干細(xì)胞存在于骨髓或骨膜中，為了能在組織再生醫(yī)療中實(shí)現(xiàn)實(shí)用化，首先，必須要開發(fā)出能夠安全地從所述組織中采集間充質(zhì)干細(xì)胞的方法。而且，為了間充質(zhì)干細(xì)胞在組織再生醫(yī)療中實(shí)現(xiàn)實(shí)用化，必須要開發(fā)出足以確保干細(xì)胞數(shù)量的技術(shù)。為了實(shí)現(xiàn)上述目的，重要的是開發(fā)出仍能維持所采集的間充質(zhì)干細(xì)胞的分化能力的培養(yǎng)增殖技術(shù)。通過上述內(nèi)容，本發(fā)明人開發(fā)出一種實(shí)現(xiàn)在采集間充質(zhì)干細(xì)胞時(shí)從采集母體中以安全且容易的方式采集的分離采集的方法。尤其是，本發(fā)明人開發(fā)了一種通過在基底膜細(xì)胞外基質(zhì)存在條件下或是在含有成纖維細(xì)胞增殖因子(FGF)等物質(zhì)的培養(yǎng)基中培養(yǎng)間充質(zhì)干細(xì)胞，以維持其的分化能力的形式大量增殖間充質(zhì)干細(xì)胞的方法(特開2003-52360號公報(bào))。但是，為了使增殖培養(yǎng)的間充質(zhì)干細(xì)胞在再生醫(yī)療中實(shí)用化，必須確認(rèn)所培養(yǎng)的細(xì)胞是間充質(zhì)干細(xì)胞，必須開發(fā)出檢測、識別該間充質(zhì)干細(xì)胞的方法。以前，在間充質(zhì)干細(xì)胞中，無法對該細(xì)胞的特征標(biāo)記基因進(jìn)行鑒定。因此、為了使間充質(zhì)干細(xì)胞在再生醫(yī)療中實(shí)現(xiàn)實(shí)用化解決的重要課題是必須要開發(fā)出鑒定間充質(zhì)干細(xì)胞的標(biāo)記基因，從而檢測分離識別間充質(zhì)干細(xì)胞的方法。本發(fā)明提供了用于檢測識別間充質(zhì)干細(xì)胞的間充質(zhì)干細(xì)胞檢測用基因標(biāo)記和間充質(zhì)干細(xì)胞檢測用多肽標(biāo)記，用于檢測該基因標(biāo)記的PCR擴(kuò)增用引物，以及采用該標(biāo)記和該引物檢測、識別間充質(zhì)干細(xì)胞的方法。本發(fā)明人為了發(fā)現(xiàn)檢測間充質(zhì)干細(xì)胞用的標(biāo)記基因，對間充質(zhì)干細(xì)胞中的各種基因的表達(dá)進(jìn)行了比較，對構(gòu)成標(biāo)記的基因進(jìn)行研究,結(jié)果發(fā)現(xiàn)，與序列表所示的13個(gè)基因相關(guān)的間充質(zhì)干細(xì)胞與成纖維細(xì)胞之間的表達(dá)量存在差異，間充質(zhì)干細(xì)胞中特異表達(dá)，發(fā)現(xiàn)這些基因是間充質(zhì)干細(xì)胞檢測用的標(biāo)記，從而完成本發(fā)明。本發(fā)明含有用于檢測該間充質(zhì)干細(xì)胞標(biāo)記基因的探針，和在檢測該間充質(zhì)干細(xì)胞標(biāo)記基因時(shí)用于擴(kuò)增被檢細(xì)胞的該基因子的PCR所用引物。此夕卜，本發(fā)明還含有本發(fā)明的間，干細(xì)胞iH己基因,的多肽構(gòu)成的用于檢測間，干細(xì)胞的多助^H己、用于檢測該多肽^i己的與該多助^i己特異結(jié)合的抗體。更，本發(fā)明含有一種采用用于檢測間充質(zhì)干細(xì)胞fei己基因的、與多月好斜己特異結(jié)合的抗體的間^M干細(xì)胞i賜'仿法和分離^法。TMX^^發(fā)明的aiii^fi兌明，在各種干細(xì)胞中，間^M干細(xì)胞在骨、軟骨、肌肉、月旨肪、#1#肌、心肌、血管、神經(jīng)等許多組織中保持了分化能力，因此間充質(zhì)干細(xì)胞作為再生用細(xì)胞有很大前景。但是，迄今為戰(zhàn)有^(寸間充質(zhì)干細(xì)胞特征標(biāo)己基因鑒定的描述。因此，本發(fā)明人為了確定間顏干細(xì)胞的特征^i己基因，進(jìn)行了積^itk研究。也就是，本發(fā)明人首次開發(fā)，M31在FGF雜在下i歸間^M干細(xì)胞，翻僻隹持其分化能力的^I增殖方法，增殖間頓干細(xì)胞，在FGF^^下培養(yǎng)由該力織得的間^M干細(xì)胞與A^纖維細(xì)胞，從培養(yǎng)細(xì)胞中抽提mRNA，以該mRNA為模板，以DNA芯片(^>廿^卜社insit公司)作為探針，通過DNA微陣列法對人源間充質(zhì)干細(xì)胞與成辦佳細(xì)胞中泰逸的基因進(jìn)行比較。9400個(gè)基因中有63個(gè)基因在間，干細(xì)胞中顯著高表達(dá)，141個(gè)基因顯謝氏表達(dá)。其中87個(gè)基因表達(dá)量差別達(dá)3倍以上(29個(gè)基因在間充質(zhì)干細(xì)胞中高表達(dá)、58個(gè)基因低表達(dá))。iA^源于三個(gè)個(gè)體的間^M干細(xì)胞以^S^源于三個(gè)個(gè)體的成纖維細(xì)胞中抽ii^RNA，以它們?yōu)樨S皿，M半定量的RT-PCR法對上述87個(gè)基因的表達(dá)量進(jìn)行調(diào)査。其結(jié)果是大多數(shù)基因的表達(dá)量未發(fā)現(xiàn)差異。此外，由于不同個(gè)體的間充質(zhì)干細(xì)胞，或成纖維細(xì)胞之間也存在表達(dá)量的差異，認(rèn)為由個(gè)體差異引起表達(dá)差異的情形也是很多的。根據(jù)RT-PCR，經(jīng)確認(rèn)間充質(zhì)干細(xì)胞中高表達(dá)的是3個(gè)基因(組織因子途徑抑制劑2(tissuefactorpathwayinhibitor2)，2類主要組織相容性復(fù)合體DR卩3(majorhistocompatibilitycomplexclass2DRbeta3),絲氨酸(或半胱氨酸)蛋白酶抑制劑)、經(jīng)確認(rèn)低表達(dá)的基因有10種(基質(zhì)金屬蛋白酶(matrixmetalloprotease)1,XV-a型膠原酶(collagenasetypeXValpha),CUG三聯(lián)體重疊RNA結(jié)合蛋白(CUGtripletrepeatRNAbindingprotein),皮膚橋蛋白，蛋白質(zhì)酪氨酸激酶7(蛋白tyrosine激酶7),異檸檬酸脫氫酶2,Sam68樣磷酸酪氨酸蛋白(Sam68樣phosphotyrosineprotein),C-型凝集素超家族成員2，腎上腺髓質(zhì)素，載脂蛋白D)。通過測定這13個(gè)基因的表達(dá)量，使得在短時(shí)間內(nèi)便宜地對難以識別的間充質(zhì)干細(xì)胞進(jìn)行鑒定成為可能。^t其是，本發(fā)明中，進(jìn)行基因檢索的結(jié)果是，確認(rèn)了在間充質(zhì)干細(xì)胞或成纖維細(xì)胞中表達(dá)量存在差異的許多基因。由于這些基因構(gòu)成了用于檢測間充質(zhì)干細(xì)胞的基因表記物，其通過構(gòu)建成檢測基因用探針，以微陣列或DNA芯片等形式能夠用于檢測間充質(zhì)干細(xì)胞。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明具體的是由下列物鵬成的用于檢測間^M干細(xì)胞的基因標(biāo)己，特征在于欺有序列表l、2、4、6、7、9、10、11、12、14、15、17、19或46所示的堿基序列的基因、和用于檢測間充質(zhì)干細(xì)胞的基因標(biāo)記，其特征在于其為整聯(lián)蛋白，ALPHA6(ITGA6)基因，MRNA(NM—000210);溶質(zhì)載體家族20(PHOSPHATETRANSPORTER)、成員1(NMJ)05415)基因；核糖核苷酸還原酶M2多肽(RRM2)，MRNA(NM—001034)基因；濾泡素抑制素(FOLLISTATIN)(FST),轉(zhuǎn)錄變異體FST317,MRNA基因(NMJ)06350);SPROUTY(DROSOPHILA)HOMOLOG2(SPRY2)，MRNA(NM—005842);RAB3B，成員RASONCOGENEFAMILY(RAB3B)，MRNA(NM—002867)基因；溶質(zhì)載體家族2(FACILITATEDGLUCOSETRANSPORTER)(NM—006516)基因；白介素13受體,ALPHA2(IL13RA2),MRNA(NM—000640)基因；絲氨酸/蘇氨酸激酶12(STK12)，MRNA(NMJ)04217)基因；MINICHROMOSOMEMAINTENANCEDEFICIENT(S.CEREVISIAE)5(CE)(NM—006739)基因；甲狀腺激素受體中間子INTERACTOR13(TRIP13)，MRNA(NMJ)04237)基因；類驅(qū)動蛋白6(有絲分裂著絲粒相關(guān)驅(qū)動蛋白)(K)(NM—006845)基因；細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶抑制因子3(CDK2-ASSOCIATEDDUAL(NM—005192)基因；染色體凝縮蛋白G(HCAP-G)，MRNA(NM—022346)基因；CDC28蛋白激酶l(CKS1),MRNA(NM—001826)基因；胞質(zhì)分裂蛋白質(zhì)調(diào)節(jié)子1(PRC1),MRNA(NM—003981)基因；細(xì)胞增殖周期2，Gl—S—G2—M(CDC2),MRNA(NM_001786)基因；CDC20(細(xì)胞增殖周期20，釀酒酵母，同源基因)(CD)(NM—001255)基因；LIKELYORTHOLOGOFMATERNALEMBRYONICLEUCINEZIPPERKINAS(NM—014791)基因；微染色體維持缺陷蛋白(釀酒酵母)7(M)(NM—005916)基因；細(xì)胞周期蛋白A2(CCNA2)，MRNA(NM一OO1237)基因；胸苷激酶1,SOLUBLE(TK1),MRNA(NMJ)03258)基因；和細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶抑制因子2A(黑色素瘤，p16，抑制CDK4)(CDKN2A)，mRNA基因(NMJ)00077)(權(quán)利要求2)、和用于檢測間充質(zhì)干細(xì)胞的基因標(biāo)記，其特征在于其為EGF-containingfibulin-like細(xì)胞外基質(zhì)蛋白1(NM一018894)基因；人胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白5(IGFBP5)mRNA(AU132011)基因；人克隆24775mRNA序列(AA402981)基因；蛋白聚糖1，分泌顆粒(AV734015)基因；人胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白5(AA374325)基因；溶質(zhì)載體家族21(有機(jī)陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白)，成員3(AF085224)基因；谷氨酰胺轉(zhuǎn)移酶2(C多肽，蛋白質(zhì)-谷氨酰胺-Y-谷?；D(zhuǎn)移酶)(AL552373)基因；抗血友病因子II(凝血酶)受體(M62424);纖維蛋白溶酶原活化因子，鳥激酶(NM一002658)基因；金屬蛋白酶3組織抑制劑(Sorsbyftindusdystrophy,pseudoinflammatory)(W96324)基因；基質(zhì)Gla蛋白(BF668572)基因；B-cellCLL/淋巴瘤1(Z23022)基因；CD74抗原(主要組織相容性復(fù)合體的不變多肽，H類相關(guān)抗原)(BG333618)基因；內(nèi)收蛋白(adducin)3(力(AU35243)基因；溶質(zhì)載體家族16(—元羧酸傳送子)，成員4(NMJ)04696)基因；S蛋白(a)(NM一000313)基因；磷脂酰肌醇(4,5)二磷酸5-磷酸酶同系物；磷脂酰肌醇多聚磷酸5-磷酸酶IV型(AF187891)基因；孕酮膜結(jié)合蛋白質(zhì)(BE858855)基因；腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(X60201)基因；或者載脂蛋白E(BF967316)基因(權(quán)利要求3)、和用于檢測間充質(zhì)干細(xì)胞的基因標(biāo)記，特征在于其是人WNT抑制因子-1(WIF-1),MRNA(NMJ)07191)基因；人假擬蛋白(HYPOTHETICALPROTEIN)FLJ11175(FLJ11175)，MRNA(NM—018349)基因；人RHOGDP解離抑止劑(GDI)p(ARHGDIB),MRNA(NM—001175)基因；人鉀中間體/少量龜導(dǎo)的銬活化(SMALLCONDUCTANCECALCIUM-ACTIVATE)(NMJ)21614)基因；人核因子(紅細(xì)胞衍生物2)-類似物3(NFE2L3),MRNA(NM—004289)基因；人GS3955蛋白(GS3955),MRNA(NM—021643)基因；人CDNA3'端與糖蛋白相類似的MUC18(AA302605)基因；人假擬蛋白(HYPOTHETICALPROTEIN)FLJ21841(FLJ21841),MRNA(NM一024609)基因；人鋅指蛋白185(LIM區(qū)域)(ZNF185),MRNA(NM—007150)基因；細(xì)胞周期控制中涉及的SCl-假定的轉(zhuǎn)移-活化因子[人,MRNA,24](S53374)基因；人NADH酶(輔酶Q)la子復(fù)合體，8(19K)(NM—014222)基因；酵母YEASTMCM10的人同系物；假擬蛋白(HYPOTHETICALPROTEIN)PR02249(PR02)(NM—018518)基因；人膠原，VII型，a1(大皰性表皮松解癥，DYSTRO(NM—0C)0094)基因；人自分泌運(yùn)動因子受體(AMFR)，MRNA(NM—00U44)基因；人克隆24421MRNA序列/CDS-未知/GB-AF070641/GI=3283914/UGKAF070641)基因；人MRNA基因；CDNADKFZP586E1621(源自DKFZP586E1621克隆)/CDS-未知/GB(AL080235)基因(權(quán)利要求4)、和用于檢測間充質(zhì)干細(xì)胞的基因標(biāo)記，特征在于其是人RESERVED(KCNK12)，MRNA(NM一022055)基因；人泛素結(jié)合酶E2C(UBE2C)，MRNA(NM—007019)基因；人CDNAFLJ10517FIS，克隆NT2RP2000812/CDS氣61，918)/GB-AK001379/G(AK001379)基因；人軟骨連接蛋白1(CRTL1)，MRNA(NM—001884)基因；人MRNA基因；CDNADKFZP434F2322(由克隆DKFZP434F2322獲得)/CDS-未知/GB(AL133105);人，克隆MGC:9549IMAGE:3857382,MRNA,完整CDS/CDS=(92,1285)/G(BC012453)基因；人假擬蛋白(HYPOTHETICALPROTEIN)DKFZP586J1119(DKFZP586J1119),MRNA(NM—032270)基因；人glia成熟因子，y(gmfg),mrna(nm—004877)基因人cdna:flj23095fis,克隆lng07413/cds-未知/gb-ak026748/g卜10(ak026748)基因；人假擬蛋白(hypotheticalprotein)dkfzp762e1312(dkfzp762e1312),mrna(nm一018410)基因；人iroquois類同源域蛋白(irx-2a),mrna(nm_005853)基因；或者人假擬蛋白(hypotheticalprotein)flj10540(flj10540)，mrna(nm—018131)基因(權(quán)利要求5)、和用于檢測間充質(zhì)干細(xì)胞的基因標(biāo)記，特征在于其是人mrna;cdnadkfzp434c1915(由克隆dkfzp434c1915獲得)基因；partialcds/c(al137698);人微染色體維持缺陷型(釀酒酵母(s.cerevisiae))7(M)(NM—005916)基因；人動力蛋白，細(xì)胞質(zhì)的，中間體多肽1(DNCIl)，m(nmj)04411)基因；蛋白質(zhì)基因產(chǎn)物的人mrna(pgp)9.5.(x04741)基因；人rad51-相互作用蛋白(pir51)，mrna(nm—006479)基因；人含有桿狀病毒iap重復(fù)序列的5(SURVIVIN)(BIRC5),MR(NMJ)01168)基因；人UDP-N-乙?；?ALPHA-D-半乳糖胺:多肽N-乙酰基GAL(NM—004482)基因；人細(xì)胞周期蛋白Bl(CCNB1)，mrna(nmj)31966)基因；人flap結(jié)構(gòu)特異性內(nèi)切酶1(fen1)，mrna基因(nmj)04111);人絲氨酸/蘇氨酸激酶15(stk15),mrna基因(nm—003600);人mad2(有絲分裂抑止缺陷型，酵母，同系物)-類似物1(ma)基因(nm—002358);人核仁蛋白ankt(ankt),mrna基因(nm—018454);人與泛素結(jié)合酶類似的hspc150蛋白(h)基因(nmj)14176);人細(xì)胞色素p450類維生素a代謝蛋白(p450rai-2)基因，(nm—019885);人nma(從未有絲分裂基因a)相關(guān)激酶2(nek2),mr基因(nm—002497);人骨形態(tài)生成蛋白4(bmp4)，mrna基因(nm—001202);人cdnaflj10674fis,克隆nt2rp2006436/cds-未知/gb-ak001536/gi(ak001536)基因；或者人著絲粒蛋白a(17kd)(cenpa)，mrna(nmj)01809)基因(權(quán)利要求6)、和用于檢測間充質(zhì)干細(xì)胞的基因標(biāo)記基因，特征在于其是人mrna;cdnadkfzp564p116(from克隆dkfzp564p116)/cds-未知/gb:a(al049338);人ttk蛋白質(zhì)激酶(TTK),MRNA(NM—003318)基因；人KARYOPHERINa2(RAGCOHORT1,IMPORTINa1)基因(KPNA(NM—002266);人聚合酶(DNA導(dǎo)向的)，9(POLQ)，mrna(nm—006596)基因；人ets變異體基因5(ets相關(guān)分子)(etv5),mrna基因(nm—004454);人含轉(zhuǎn)化酸性巻曲螺旋蛋白(transformingacidiccoiled-coilcontaining蛋白)3(tac)(nm—006342)基因；人驅(qū)動蛋白類似物1(knsl1)，mrna基因(nm—004523);人著絲粒蛋白e(312kd)(cenpe),mrna基因(NM—001813);人CDNA，3'END/克隆-IMAGE:1651289/克隆—END=3'/GB二AI12(AI123815)基因；人DISTAL-LESSHOMEOBOX5(DLX5),MRNA基因(NM—005221);人V-MYB禽成髓細(xì)胞性白血病病毒癌基因同系物類似物2基因(NM—002466);或者人血清剝奪反應(yīng)(磷脂酰絲氨酸結(jié)合PRO(NMJXM657)基因(權(quán)利要求7)、和用于檢測間充質(zhì)干細(xì)胞的基因標(biāo)記，特征在于其是人假擬蛋白(HYPOTHETICALPROTEIN)FU10604(FLJ10604),MRNA基因(NMJ)18154);人核糖核酸酶HI基因，大亞基(RNASEHI),MRNA(NM_006397);人ANILLIN(果蠅SCRAPS同系物)，肌動蛋白結(jié)合蛋白基因(NMJ)18685);人H4組蛋白家族，成員G(H4FG)基因，MRNA(NM—003542);人G蛋白連結(jié)受體37(內(nèi)皮縮血管肽受體B型-,_005302)人泛素載體蛋白(E2-EPF)，MRNA基因(NMJ)14501);人，類似于腫瘤差別表達(dá)1,克隆MAGE:3639252,(BC007375)基因；人假擬蛋白(HYPOTHETICALPROTEIN)MGC2577(MGC2577)，MRNA(NM—031299)基因；人假擬蛋白(HYPOTHETICALPROTEIN)FLJ13912(FLJ13912)，MRNA基因(NM—022770);人ANNEXINA3(認(rèn)XA3),MRNA(NMJ)05139)基因；人STATHMIN1/ONCO蛋白18(STMN1),MRNA基因(NM一005563)人，與核糖體蛋白L39類似，克隆MGC:20168IMAGE:4555759,M(BC012328);人POLO(果蠅)類似物激酶(PLK),MRNA基因(NM_005030)(權(quán)利要求8)、和用于檢測間充質(zhì)干細(xì)胞的基因標(biāo)記，特征在于其是人蛋白酶復(fù)合體(PROSOME,MACROPAIN)26S亞基，ATP酶，5(PS)基因(NM—002805);人真核翻譯起始因子42(EIF4G)基因(NMJ)01418);人二氫嘧接酶-LIKE3(DPYSL3)基因，MRNA)(NM—001387);人ADAPTOR相關(guān)蛋白復(fù)合體1,SIGMA2亞基(AP1S2)基因(NMJ)03916);人網(wǎng)蛋白1,中間絲結(jié)合蛋白，500KD(P)基因(NM_000445);人異種核蛋白U(SCAFFOLDATTAC(NM—031844)基因；人假擬蛋白(HYPOTHETICALPROTEIN)MGC5306(MGC5306),MRNA基因(NM一024116);人MHCI類多肽相關(guān)序列A(MICA),MRNA基因(NM—000247);人PRK1相關(guān)蛋白(AWP1),MRNA基因(NMJ)19006);人孕酮受體膜成分2(PGRMC2),MRNA基因(NM—006320);人多聚谷氨酸結(jié)合蛋白1(PQBP1),MRNA基因(NM—005710);人S-腺苷甲硫氨酸脫羧酶1(AMDl)，MRNA基因(NM—001634);人干擾素誘導(dǎo)的C型肝炎相關(guān)MICROTUBULARAG(NMJ)06417)基因；人蛋白激酶,AMP-活化的，y1非催化性亞基(NON-CATALYTICSUBUN)基因(NM_002733);人前膠原-脯氨酸，2-OXOGLUTARATE4-DIOXYGENASE(脯氨酸(NMJ)04199);人血管內(nèi)皮分化，溶血磷脂酸G-PROTE基因(NMJ)12152);或人KIAA0127基因產(chǎn)物(KIAA0127),MRNA基因(NMJ)14755)(權(quán)利要求9)、和具有與權(quán)利要求1-9中任一記載的用于檢測間充質(zhì)干細(xì)胞的基因標(biāo)記在嚴(yán)謹(jǐn)條件下雜交的DNA序列的用于檢測間充質(zhì)干細(xì)胞基因標(biāo)記的探針(權(quán)利要求10)、和由上述任一記載的堿基序列的反義鏈的全部或者部分構(gòu)成的權(quán)利要求10記載的用于檢測間充質(zhì)干細(xì)胞基因標(biāo)記的探針(權(quán)利要求11)、和用于檢測間充質(zhì)干細(xì)胞基因標(biāo)記的微陣列或DNA芯片，特征在于其固定有至少一個(gè)及一個(gè)以上的權(quán)利要求10或11記載的DNA(權(quán)利要求12)、和上述的用于檢測間充質(zhì)干細(xì)胞標(biāo)記基因的微陣列或DNA芯片，特征在于其固定有具有序列表序列號1、2、4、6、7、9、10、11、12、14、15、17、19或46所示堿基序列基因組、和檢測出權(quán)利要求2-9中任一記載的基因組的2個(gè)以上基因的探針(權(quán)利要求13)、和用于檢測間充質(zhì)干細(xì)胞的多肽標(biāo)記，特征在于其是具有序列表的序列3、5、8、13、16或18所示的氨基酸序列的多肽(權(quán)利要求14)、和一種抗體，特征在于其受權(quán)利要求14記載的多肽誘導(dǎo)、與該多肽特異性結(jié)合(權(quán)利要求15)、和權(quán)利要求15記載的抗體，其特征在于抗體是單克隆抗體(權(quán)利要求16)和權(quán)利要求15記載的抗體，其特征在于抗體是多克隆抗體(權(quán)利要求17)。此外，本發(fā)明還由下列物質(zhì)組成識別間充質(zhì)干細(xì)胞的方法，特征在于從被檢細(xì)胞中檢測出權(quán)利要求1-9中任一項(xiàng)記載的間充質(zhì)干細(xì)胞標(biāo)記基因表達(dá)(權(quán)利要求18)、和權(quán)利要求18記載的間充質(zhì)千細(xì)胞的識別方法，其特征是采用RNA印跡法檢測間充質(zhì)干細(xì)胞標(biāo)記基因的表達(dá)(權(quán)利要求19)、和權(quán)利要求18記載的間充質(zhì)干細(xì)胞的識別方法，其特征是采用用于檢測權(quán)利要求10或11記載的間充質(zhì)干細(xì)胞標(biāo)記基因的探針對間充質(zhì)干細(xì)胞標(biāo)記基因的表達(dá)進(jìn)行檢測(權(quán)利要求20)、和權(quán)利要求18記載的間充質(zhì)干細(xì)胞的識別方法，其特征是采用用于檢測權(quán)利要求12或13記載的間充質(zhì)干細(xì)胞標(biāo)記基因的微陣列或DNA芯片對間充質(zhì)干細(xì)胞標(biāo)記基因的表達(dá)進(jìn)行檢測(權(quán)利要求21)、和識別間充質(zhì)干細(xì)胞的方法，其特征是權(quán)利要求18-21中任一記載的間充質(zhì)干細(xì)胞標(biāo)記基因表達(dá)的檢測包括定量或半定量的PCR的使用(權(quán)利要求22)、和權(quán)利要求22記載的間充質(zhì)干細(xì)胞的識別方法，其特征是其使用的定量的或半定量的PCR是RT-PCR法(權(quán)利要求23)。此外，本發(fā)明還由以下物質(zhì)組成由具有序列表的序列號20所示的堿基序列的正義引物以及具有序列表的序列號21所示的堿基序列的反義引物、具有序列表的序列號22所示的堿基序列的正義引物和具有序列表的序列號23所示的堿基序列的反義引物、具有序列表的序列號24所示的堿基序列的正義引物和具有序列表的序列號25所示的堿基序列的反義引物、具有序列表的序列號26所示的堿基序列的正義引物和具有序列表的序列號27所示的堿基序列的反義引物、具有序列表的序列號28所示的堿基序列的正義引物和具有序列表的序列號29所示的堿基序列的反義引物、具有序列表的序列號30所示的堿基序列的正義引物和具有序列表的序列號31所示的堿基序列的反義引物、具有序列表的序列號32所示的堿基序列的正義引物和具有序列表的序列號33所示的堿基序列的反義引物、具有序列表的序列號34所示的堿基序列的正義引物和具有序列表的序列號35所示的堿基序列的反義引物、具有序列表的序列號36所示的堿基序列的正義引物和具有序列表的序列號37所示的堿基序列的反義引物、具有序列表的序列號38所示的堿基序列的正義引物和具有序列表的序列號39所示的堿基序列的反義引物、具有序列表的序列號40所示的堿基序列的正義引物和具有序列表的序列號41所示的堿基序列的反義引物、具有序列表的序列號42所示的堿基序列的正義引物和具有序列表的序列號43所示的堿基序列的反義引物、或具有序列表的序列號44所示的堿基序列的正義引物和具有序列表的序列號45所示的堿基序列的反義引物構(gòu)成的用于擴(kuò)增間充質(zhì)干細(xì)胞的RT-PCR用引物(權(quán)利要求24)、和由具有序列表的序列號47所示的堿基序列的正義引物和具有序列表的序列號48所示的堿基序列的反義引物、具有序列表的序列號49所示的堿基序列的正義引物和具有序列表的序列號50所示的堿基序列的反義引物、具有序列表的序列號51所示的堿基序列的正義引物和具有序列表的序列號52所示的堿基序列的反義引物、具有序列表的序列號53所示的堿基序列的正義引物和具有序列表的序列號54所示的堿基序列的反義引物、具有序列表的序列號55所示的堿基序列的正義引物和具有序列表的序列號56所示的堿基序列的反義引物、具有序列表的序列號57所示的堿基序列的正義引物和具有序列表的序列號58所示的堿基序列的反義引物、具有序列表的序列號59所示的堿基序列的正義引物和具有序列表的序列號60所示的堿基序列的反義引物、具有序列表的序列號61所示的堿基序列的正義引物和具有序列表的序列號62所示的堿基序列的反義引物、具有序列表的序列號63所示的堿基序列的正義引物和具有序列表的序列號64所示的堿基序列的反義引物、具有序列表的序列號65所示的堿基序列的正義引物和具有序列表的序列號66所示的堿基序列的反義引物、具有序列表的序列號67所示的堿基序列的正義引物和具有序列表的序列號68所示的堿基序列的反義引物、或具有序列表的序列號69所示的堿基序列的正義引物和具有序列表的序列號70所示的堿基序列的反義引物構(gòu)成的擴(kuò)增間充質(zhì)干細(xì)胞標(biāo)記基因的實(shí)時(shí)PCR所使用的引物(權(quán)利要求25)、和具有序列表的序列號71所示的堿基序列的正冬引物和具有序列表的序列號72所示的堿基序列的反義引物、具有序列表的序列號73所示的堿基序列的正義引物和具有序列表的序列號74所示的堿基序列的反義引物、具有序列表的序列號75所示的堿基序列的正義引物和具有序列表的序列號76所示的堿基序列的反義引物、具有序列表的序列號77所示的堿基序列的正義引物和具有序列表的序列號78所示的堿基序列的反義引物、具有序列表的序列號79所示的堿基序列的正義引物和具有序列表的序列號80所示的堿基序列的反義引物、具有序列表的序列號81所示的堿基序列的正義引物和具有序列表的序列號82所示的堿基序列的反義引物、具有序列表的序列號83所示的堿基序列的正義引物和具有序列表的序列號84所示的堿基序列的反義引物、具有序列表的序列號85所示的堿基序列的正義引物和具有序列表的序列號86所示的堿基序列的反義引物、具有序列表的序列號87所示的堿基序列的正義引物和具有序列表的序列號88所示的堿基序列的反義引物、具有序列表的序列號89所示的堿基序列的正義引物和具有序列表的序列號90所示的堿基序列的反義引物、具有序列表的序列號91所示的堿基序列的正義引物和具有序列表的序列號92所示的堿基序列的反義引物、具有序列表的序列號93所示的堿基序列的正義引物和具有序列表的序列號94所示的堿基序列的反義引物、具有序列表的序列號95所示的堿基序列的正義引物和具有序列表的序列號96所示的堿基序列的反義引物、具有序列表的序列號97所示的堿基序列的正義引物和具有序列表的序列號98所示的堿基序列的反義引物、具有序列表的序列號99所示的堿基序列的正義引物和具有序列表的序列號IOO所示的堿基序列的反義引物、具有序列表的序列號101所示的堿基序列的正義引物和具有序列表的序列號102所示的堿基序列的反義引物、具有序列表的序列號103所示的堿基序列的正義引物和具有序列表的序列號104所示的堿基序列的反義引物、具有序列表的序列號105所示的堿基序列的正義引物和具有序列表的序列號106所示的堿基序列的反義引物、具有序列表的序列號107所示的堿基序列的正義引物和具有序列表的序列號108所示的堿基序列的反義引物、具有序列表的序列號109所示的堿基序列的正義引物和具有序列表的序列號IIO所示的堿基序列的反義引物、具有序列表的序列號111所示的堿基序列的正義引物和具有序列表的序列號112所示的堿基序列的反義引物、具有序列表的序列號113所示的堿基序列的正義引物和具有序列表的序列號114所示的堿基序列的反義引物、或具有序列表的序列號115所示的堿基序列的正義引物和具有序列表的序列號116所示的堿基序列的反義引物構(gòu)成的用于擴(kuò)增間充質(zhì)干細(xì)胞標(biāo)記基因的RT-PCR所使用的引物(權(quán)利要求26)。此外，本發(fā)明還由以下物質(zhì)組成權(quán)利要求l-8記載的間充質(zhì)干細(xì)胞的識別方法，其特征是采用權(quán)利要求10或11中記載的間充質(zhì)干細(xì)胞標(biāo)記基因檢測用探針對被檢細(xì)胞中的基因、用權(quán)利要求24-26其中之一記載的正義引物以及反義引物中至少一對以上的引物擴(kuò)增的基因進(jìn)行檢測(權(quán)利要求27)、和間充質(zhì)干細(xì)胞的識別方法，其特征是采用權(quán)利要求15-17其中之一記載的抗體對被檢細(xì)胞中的間充質(zhì)干細(xì)胞標(biāo)記多肽的表達(dá)進(jìn)行檢測(權(quán)利要求28)、和間充質(zhì)干細(xì)胞的識別方法，其特征是將被檢細(xì)胞中由序列表的序列號1、11和19構(gòu)成的間充質(zhì)干細(xì)胞標(biāo)記基因組成的組中一個(gè)以上基因的表達(dá)以及由序列表的序列號2、4、6、7、9、10、12、14、15和17構(gòu)成的間充質(zhì)干細(xì)胞標(biāo)記基因組成的組中一個(gè)以上基因的表達(dá)組合起來，進(jìn)行評價(jià)(權(quán)利要求29)、和間充質(zhì)干細(xì)胞的識別分離方法，其特征是采用權(quán)利要求10或權(quán)利要求11記載的間充質(zhì)干細(xì)胞標(biāo)記基因檢測用探針和/或權(quán)利要求15-17中任一記載的抗體對被檢細(xì)胞中間充質(zhì)干細(xì)胞檢測用標(biāo)記基因和/或間充質(zhì)干細(xì)胞檢測用標(biāo)記多肽的表達(dá)進(jìn)行檢測、對識別出的間充質(zhì)干細(xì)胞進(jìn)行分離(權(quán)利要求30)、和權(quán)利要求30記載的間充質(zhì)干細(xì)胞的識別分離方法，其特征是通過采用權(quán)利要求15-17中任一記載的抗體的熒光抗體法將被檢細(xì)胞中的間充質(zhì)干細(xì)胞進(jìn)行標(biāo)識、分離經(jīng)標(biāo)識的間充質(zhì)干細(xì)胞(權(quán)利要求31)、和用于識別間充質(zhì)千細(xì)胞的試劑盒，其中裝備有權(quán)利要求10或11記載的用于檢測間充質(zhì)干細(xì)胞標(biāo)記基因的探針、固定有該探針的權(quán)利要求12或13記載的用于檢測間充質(zhì)干細(xì)胞標(biāo)記基因的微陣列或DNA芯片、和權(quán)利要求15-17中任一記載的抗體中至少一個(gè)以上的抗體(權(quán)利要求32)。圖1.表示的是本發(fā)明的實(shí)施例中，由半定量RT-PCR法獲得的人間充質(zhì)干細(xì)胞或人成纖維細(xì)胞間由個(gè)體(的不同)產(chǎn)生差異很大的基因。圖2.表示的是本發(fā)明的實(shí)施例中，由半定量RT-PCR法獲得的MSC中高表達(dá)的基因。圖3.表示的是本發(fā)明的實(shí)施例中，由半定量RT-PCR法獲得的MSC中低表達(dá)的基因。圖4.表示的是對于確認(rèn)了間充質(zhì)干細(xì)胞中高/低表達(dá)的13個(gè)基因，從來源于7個(gè)個(gè)體的間充質(zhì)干細(xì)胞和來源于4個(gè)個(gè)體的成纖維細(xì)胞中抽提全部RNA，以其為模板通過RT-PCR法，對它們的表達(dá)量進(jìn)行確認(rèn)的結(jié)果。圖5.表示的是本發(fā)明的實(shí)施例中，間充質(zhì)干細(xì)胞和成纖維細(xì)胞中本發(fā)明的標(biāo)記基因表達(dá)狀況的試驗(yàn)結(jié)果。圖6.表示的是本發(fā)明的實(shí)施例中，間充質(zhì)干細(xì)胞和成骨細(xì)胞中各標(biāo)記基因的差別基因表達(dá)的狀況。圖7.表示的是本發(fā)明的實(shí)施例中，間充質(zhì)千細(xì)胞和成骨細(xì)胞中各標(biāo)記基因的差別基因表達(dá)的狀況。圖8.表示的是本發(fā)明的實(shí)施例中，間充質(zhì)干細(xì)胞和成骨細(xì)胞中各標(biāo)記基因的差別基因表達(dá)的狀況。圖9.表示的是本發(fā)明的實(shí)施例中，各個(gè)標(biāo)記基因在間充質(zhì)干細(xì)胞和人成纖維細(xì)胞中基因的表達(dá)狀況。圖10.表示的是本發(fā)明的實(shí)施例中，各個(gè)標(biāo)記基因在間充質(zhì)千細(xì)胞和人成纖維細(xì)胞中基因的表達(dá)狀況。圖11.表示的是本發(fā)明的實(shí)施例中，采用流式細(xì)胞儀對人細(xì)胞中間充質(zhì)干細(xì)胞DR的表達(dá)的測定結(jié)果。圖12.表示的是本發(fā)明的實(shí)施例中，對在間充質(zhì)干細(xì)胞向成骨細(xì)胞分化誘導(dǎo)中各個(gè)基因的表達(dá)狀況的測定結(jié)果。圖13.表示的是本發(fā)明的實(shí)施例中，各標(biāo)記基因在骨分化誘導(dǎo)的第4天-28天之間基因表達(dá)的變化。圖14表示的是本發(fā)明的實(shí)施例中，各標(biāo)記基因在骨分化誘導(dǎo)的第4天-28天之間基因表達(dá)的變化。圖15.表示的是本發(fā)明的實(shí)施例中，各標(biāo)記基因在骨分化誘導(dǎo)的第4天-28天之間基因表達(dá)的變化。圖16.表示的是本發(fā)明的實(shí)施例中，各標(biāo)記基因在骨分化誘導(dǎo)的第4天-28天之間基因表達(dá)的變化。具體實(shí)施方式本發(fā)明由對間充質(zhì)干細(xì)胞中的特異性表達(dá)的用于檢測間充質(zhì)干細(xì)胞的標(biāo)記基因或用于檢測間充質(zhì)干細(xì)胞的標(biāo)記多肽的表達(dá)進(jìn)行檢測，識別間充質(zhì)干細(xì)胞構(gòu)成。本發(fā)明中，用于檢測間充質(zhì)干細(xì)胞的基因標(biāo)記構(gòu)成的基因是具有序列表中序列號l、2、4、6、7、9、10、11、12、14、15、17或19所示的堿基序列的基因。此外，在本發(fā)明中用于檢測間充質(zhì)干細(xì)胞的多肽標(biāo)記構(gòu)成的多肽是具有序列表中序列號3、5、8、13、16或18所示氨基酸序列的多肽。序列表中序列號1所示的基因是"絲氨酸(或半胱氨酸)蛋白酶抑制劑"基因，序列表中序列號2所示的基因是"腎上腺髓質(zhì)素"基因，序列表中序列號4所示的基因是"載脂蛋白D(apolopoproteinD)"基因，序列表中序列號6所示的基因是"XV-ccl型膠原酶(collagenasetypeXValphal)"基因，序列表中序列號7所示的基因是"CUG三聯(lián)體重復(fù)RNA結(jié)合蛋白2(CUGtripletrepeatRNAbindingprotein2)"基因，序列表中序列號9所示的基因是"皮膚橋蛋白"基因，序列表中序列號IO所示的基因是"異檸檬酸脫氫酶2"基因，序列表中序列號11所示的基因是"2類主要組織相容性復(fù)合體DR(33(majorhistocompatibilitycomplexclass2，DRbeta3)"基因，序列表中序列號12所示的基因是"蛋白質(zhì)酪氨酸激酶7(proteintyrosinekinase7)"基因，序列表中序列號14所示的基因是"Sam68樣磷酸酪氨酸蛋白(Sam68-likephosphotyrosineprotein)"基因，序列表中序列號15所示的基因是"C-型凝集素超家族(C-typelectinsuperfamily)成員2"基因，序列表中序列號17所示的基因是"基質(zhì)金屬酶1(matrixmetalloproteasel)"基因，和序列表中序列號19所示的基因是"組織因子途徑抑制劑2(tissuefactorpathwayinhibitor2)"基因，序列表中序列號46所示的基因是"主要組織相容性復(fù)合體DRa(majorhistocompatibilitycomplexDRalpha)，，基因?？梢酝ㄟ^NCBI的基因數(shù)據(jù)庫中、各個(gè)登陸號AI133613(序列號1)、NM—001124(序列號2)、NM—001647(序列號4)、L01697(序列號6)、U69546(序列號7)、AW016451(序列號9)、AL545953(序列號10)、BF732822(序列號11)、AL157486(序列號12)、AA112001(序列號14)、XM—006626(序列號15)、NM—002421(序列號17)、AL550357(序列號19)、和BF795929(序列號46)獲得本發(fā)明的用于檢測間充質(zhì)干細(xì)胞的標(biāo)記基因的DNA序列的信息。進(jìn)而，經(jīng)確認(rèn)本發(fā)明中，與成纖維細(xì)胞相比在間充質(zhì)干細(xì)胞中表達(dá)量更多的基因列舉為如下基因整聯(lián)蛋白,a6(ITGA6)，MRNA基因(NM—000210);溶質(zhì)載體家族20(PHOSPHATETRANSPORTERS成員l基因(NM_005415);核苷酸還原酶M2多肽(RRM2),MRNA基因(NM—001034);卵泡抑制素(FST)，轉(zhuǎn)錄變異型FST317，MRNA基因(NM一006350);SPROUTY(果蠅)同源基因2(SPRY2),MRNA基因(NM一005842);RAB3B,成員RAS癌基因家族成員(RAB3B),MRNA基因(NM—002867);溶質(zhì)載體家族2(FACILITATEDGLUCOSETRANSPORTER)基因(NM一006516);白介素13受體，ALPHA2(IL13RA2)，MRNA基因(NM—000640);絲氨酸(或蘇氨酸)蛋白酶抑制劑12(STK12),MRNA基因(NM_004217);微染色體維持缺陷蛋白(釀酒酵母)5(CE)基因(NM_006739);甲狀腺激素受體中間子13(TRIP13),MRNA基因(NMJ)04237);類驅(qū)動蛋白6(MITOTICCENTROMERE-ASSOCIATEDKINESIN)(K)基因(NM-006845);細(xì)胞周期蛋白依賴性抑止劑3(細(xì)胞周期蛋白依賴性抑止劑3(CYCLIN-DEPENDENTKINASEINHIBITOR3))(CDK2-ASSOCIATEDDUAL基因(NM—005192);染色體凝集蛋白G(HCAP-G),MRNA基因(NM—022346);CDC28蛋白激酶(CKS1),MRNA基因(NMJ)01826);胞質(zhì)分裂的蛋白質(zhì)調(diào)節(jié)子l(PRC1),MRNA基因(NM—003981);細(xì)胞分裂周期2，Gl—S—G2—M(CDC2),MRNA基因(NM—001786);CDC20(CDC20細(xì)胞分裂周期20，釀酒酵母同源基因)(CD)基因(雇_001255);LIKELYORTHOLOGOFMATERNALEMBRYONICLEUCINEZIPPERKINAS基因(NM一014791);微染色體維持缺陷蛋白(釀酒酵母)7(M)基因(NM—005916);細(xì)胞周期蛋白A2(CCNA2)，MRNA基因(NM—001237);胸苷激酶1,可溶性(TK1)，MRNA基因(NM_003258);或細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶抑止劑2A(cyclin-dependentkinaseinhibitor2A)(黑色素瘤，pi6,抑止CDK4)(CDKN2A)，mRNA基因(醒一000077)。含EGF的細(xì)胞微絲(fibulin)樣細(xì)胞外基質(zhì)蛋白1基因(NM—018894);人胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白5(IGFBP5)mRNA基因(AU132011);人克隆24775mRNA序列基因(AA402981);蛋白聚糖1，分泌顆粒(AV734015);胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白質(zhì)5(insulin-likegrowthfactorbindingprotein5)基因(AA374325);基因溶質(zhì)載體家族21(有機(jī)陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白)，成員3(AF085224);谷氨酰胺轉(zhuǎn)移酶2(C多肽，蛋白質(zhì)-谷氨酰胺-Y-谷?；D(zhuǎn)移酶)(AL552373)基因；血友病因子II(凝血酶)受體基因(M62424);纖維蛋白溶酶原活化因子，鳥激酶(NM—002658)基因；金屬蛋白酶組織抑制因子3(Sorsbyfondusdystrophy,pseudoinflammatory)(W96324)基因；基質(zhì)Gla蛋白(BF668572)基因；B-cellCLL/淋巴瘤1(Z23022)基因；CD74抗原(主要組織相容性復(fù)合體的不變多肽，II類相關(guān)抗原)(BG333618)基因；內(nèi)收蛋白3(力(AL135243)基因；溶質(zhì)載體家族16(—元羧酸傳送子)，成員4(NM—004696)基因；S蛋白(a)(NM—000313)基因；磷脂酰肌醇(4,5)二磷酸5-磷酸酶同系物；磷脂酰肌醇多聚磷酸5-磷酸酶IV型(AF187891)基因；孕酮膜結(jié)合蛋白質(zhì)(BE858855)基因；腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(X60201)基因；或者載脂蛋白E(BF967316)基因。人WNT抑止因子-1(WIF-1)，MRNA(NM_007191)基因；人假擬蛋白(HYPOTHETICALPROTEIN)FLJ11175(FLJ11175),MRNA基因(NM一018349);人RHOGDP解離抑止齊U(GDI)J3(ARHGDIB)，MRNA基因(NM—001175);人鉀中間體/少量電導(dǎo)的鈣活化(SMALLCONDUCTANCECALCIUM-ACTIVATE)基因(NM_021614);人核因子(紅細(xì)胞衍生物2)-類似物3(NFE2L3),MRNA基因(NM—004289);人GS3955蛋白(GS3955)，MRNA基因(NM—021643);人CDNA3'END與糖蛋白相類似的MUC18基因(AA302605);人假擬蛋白(HYPOTHETICALPROTEIN)FLJ21841(FLJ21841),MRNA基因(雨_024609);人ZINCFINGER蛋白185(LIM域)(ZNF185),MRNA基因(NM_007150);SO假定的轉(zhuǎn)移-活化因子，細(xì)胞周期控制中涉及的[人，MRNA，24](S53374)基因；人NADH脫氫酶(輔酶Q)1a子復(fù)合體，8(19K)基因(NM—014222);人酵母MCM10的同系物基因;假擬蛋白(HYPOTHETICALPROTEIN)PR02249(PR02)(NM—018518);人XV-al型膠原酶(COLLAGEN,TYPEVII,ALPHA1)(大皰性表皮松解癥，DYSTRO基因(NM—000094);人自分泌運(yùn)動因子受體(AMFR),MRNA基因(NM一001144);人克隆24421MRNA序列/CDS-未知/GB:AF070641/GI-3283914/UG=(AF070641)基因；人MRNA基因；CDNADKFZP586E1621(FROM克隆DKFZP58犯1621)/CDS-未知/GB(AL080235)基因。人保留(KCNK12)，MRNA(NM—022055)基因；人泛素結(jié)合酶E2C(UBE2C),MRNA基因(NM—007019);人CDNAFLJ10517FIS，克隆NT2RP2000812/CDS-(61,918)/GB-AK001379/G基因(AK001379);人骨連接蛋白1(CRTL1),MRNA基因(NM—001884);人MRNA;CDNADKFZP434F2322(FROM克隆DKFZP434F2322)/CDS=未知/GB(AL133105)基因；人，克隆MGC:9549IMAGE:3857382，MRNA，完整CDS/CDS=(92，1285)/G(BC012453)基因；人假擬蛋白(HYPOTHETICALPROTEIN)DKFZP586J1119(DKFZP586J1119)，MRNA(NM—032270)基因；人神經(jīng)膠質(zhì)成熟因子，y(GMFG),MRNA基因(NM—004877);人CDNA:FU23095FIS,克隆LNG07413/CDS-未知/GB=AK026748/GI=10(AK026748)基因；人假擬蛋白(HYPOTHETICALPROTEIN)DKFZP762E1312(DKFZP762E1312),MRNA基因(NMJ)18410);人IROQUOIS類同源域蛋白(IRX-2A)，MRNA基因(NM—005853);或人假擬蛋白(HYPOTHETICALPROTEIN)FLJ10540(FLJ10540),MRNA基因(NM—018131)。人MRNA基因；CDNADKFZP434C1915(FROM克隆DKFZP434C1915);PARTIALCDS/C(AL137698);人微染色體維持缺陷型(釀酒酵母(S.CEREVISIAE))7(M)(NM_005916)基因；人動力蛋白，細(xì)胞質(zhì)的，中間體多肽1(DNCIl)，M基因(NM—004411);蛋白質(zhì)基因產(chǎn)物的人MRNA(PGP)9,5.(X04741)基因；人RAD51-相互作用蛋白(PIR51)，MRNA基因(NM一006479);人含有桿狀病毒IAP重復(fù)序列的5(SURVIVIN)(BIRC5)，MR基因(NM_001168);人UDP-N-乙?；?ALPHA-D-半乳糖胺:多肽N-乙?；鵊AL基因(NM一004482);人細(xì)胞周期蛋白Bl(CCNB1),MRNA基因(NM一031966);人FLAP結(jié)構(gòu)特異性內(nèi)切酶1(FE^Il),MRNA基因(NM—004111);人絲氨酸/蘇氨酸激酶15(STK15)，MRNA基因(NMJ)03600);人MAD2(有絲分裂抑止缺陷型，酵母，同系物)-類似物l(MA)基因(NM一002358);人核仁蛋白ANKT(ANKT)，MRNA基因(NM一018454);人與泛素結(jié)合酶類似的HSPC150蛋白(H)基因(NM—014176);人細(xì)胞色素P450類維生素A代謝蛋白(P450RAI-2)，(NM—019885)基因；人NIMA(從未有絲分裂基因A)相關(guān)激酶2(NEK2),MR基因(NM—002497);人骨形態(tài)生成蛋白4(BMP4),MRNA基因(NM—001202);人CDNAFLJ10674FIS，克隆NT2RP2006436/CDS-未知/GB-AK001536/G基因I(AK001536);或人著絲粒蛋白A(17KD)(CENPA),MRNA基因(NM_001809)。人MRNA基因；CDNADKFZP564P116(來自克隆DKFZP564P116)/CDS-未知/GB=A(AL049338);人TTK蛋白質(zhì)激酶(TTK),MRNA基因(NM—003318);人KARYOPHERINa2(RAGCOHORT1,IMPORTINa1)(KPNA基因(NM_002266);人聚合酶(DNA導(dǎo)向的)，e(POLQ)，MRNA基因(NM—006596);人ETS變異體基因5(ETS相關(guān)分子)(ETV5)，MRNA基因(NM—004454);人含轉(zhuǎn)化酸性巻曲螺旋蛋白(TRANSFORMINGACIDICCOILED-COILCONTAINING蛋白)3(TAC)基因(NM—006342);人驅(qū)動蛋白類似物1(KNSL1),MRNA基因(NMJ)04523);人著絲粒蛋白E(312KD)(CENPE),MRNA基因(NM_001813);人CDNA,3'END/克隆-IMAGE:1651289/克隆—END=3，/GB=AI12(AI123815);基因人DISTAL-LESSHOMEOBOX5(DLX5)，MRNA基因(NM—005221);人V-MYB禽成髓細(xì)胞性白血病病毒癌基因同系物類似物2基因(NM一002466);或人血清剝奪反應(yīng)(磷脂酰絲氨酸結(jié)合PRO(NM—004657)基因。用于檢測間充質(zhì)干細(xì)胞的基因標(biāo)記，特征在于其是人假擬蛋白(HYPOTHETICALPROTEIN)FLJ10604(FLJ10604)，MRNA基因(NM—018154);人核糖核酸酶HI，大亞基(RNASEHI),MRNA(NM—006397)基因；人ANILLIN(果蠅SCRAPS同系物)，肌動蛋白結(jié)合蛋白基因(NM—018685);人H4組蛋白家族，成員G(H4FG)，MRNA基因(NM—003542);人G蛋白連結(jié)受體37(內(nèi)皮縮血管肽受體B型-(NM—005302)人泛素載體蛋白(E2-EPF)，MRNA(NM—014501)基因；人，類似于腫瘤差別表達(dá)1,克隆IMAGE:3639252,(BC007375)基因；人假擬蛋白(HYPOTHETICALPROTEIN)MGC2577(MGC2577),MRNA基因(NM_031299);人假擬蛋白(HYPOTHETICALPROTEIN)FLJ13912(FLJ13912),MRNA基因(NM_022770);人ANNEXINA3(ANXA3)，MRNA基因NM_005139);人STATHMINl/ONCO蛋白18(STMN1),MRNA基因(NM—005563)人，與核糖體蛋白L39類似，克隆MGC:20168IMAGE:4555759,M(BC012328);人POLO(果蠅)類似物激酶(PLK),MRNA基因(NM—005030)。同時(shí)，本發(fā)明中經(jīng)確認(rèn)的、與纖維母細(xì)胞相比較、在間充質(zhì)細(xì)胞中不表達(dá)或表達(dá)量的基因是，如下列舉的基因用于檢測間充質(zhì)干細(xì)胞的基因標(biāo)記，特征在于人蛋白酶體(PR0S0ME,MACROPAIN)26S亞基，ATP酶，5(PS)基因(NM—002805);人真核翻譯起始因子4Y，2(EIF4G)基因(醒_001418);人二氫嘧啶酶類似物3(DPYSL3)，MRNA)基因(NM—001387);人ADAPTOR相關(guān)蛋白復(fù)合體1,。2亞基(AP1S2)基因(NM_003916);人網(wǎng)蛋白1,中間絲結(jié)合蛋白，500KD(P)基因(NM—000445);人異種核蛋白U基因(SCAFFOLDATTAC(NM—031844);人假擬蛋白(HYPOTHETICALPROTEIN)MGC5306(MGC5306)，MRNA基因(麗—024116);人MHCI類多肽相關(guān)序列A(MICA),MRNA基因(既000247);人PRK1相關(guān)蛋白(AWP1),MRNA基因(NM—019006);人孕酮受體膜成分2(PGRMC2)，MRNA基因(NM—006320);人多聚谷氨酸結(jié)合蛋白1(PQBP1)，MRNA基因(隨_005710);人S-腺苷甲硫氨酸脫羧酶1(扁D1)，MRNA基因(NM—001634);人干擾素誘導(dǎo)的C型肝炎相關(guān)MICROTUBULARAG基因(NM—006417);人蛋白質(zhì)激酶，AMP-活化的，Y1非催化性亞基(NON-CATALYTICSUBUN)基因(NM—002733);人前膠原-脯氨酸，2-氧代戊二酸鹽4-加雙氧酶(脯氨酸(NM—004199)基因；人血管內(nèi)皮分化，溶血磷脂酸G-PROTE基因(NM_012152);或人KIAA0127基因產(chǎn)物(KIAA0127),MRNA基因(NM_014755)本發(fā)明中，對本發(fā)明的間充質(zhì)干細(xì)胞標(biāo)記基因表達(dá)進(jìn)行的檢測中可以采用公知的基因表達(dá)檢測方法。例如，為了檢測本發(fā)明的間充質(zhì)干細(xì)胞標(biāo)記基因的表達(dá)，可以采用RNA印跡法(northernblot)。此外，為了通過本發(fā)明的基因標(biāo)記，檢測識別間充質(zhì)干細(xì)胞，可以采用具有與本發(fā)明的間充質(zhì)干細(xì)胞基因標(biāo)記的DNA序列在嚴(yán)謹(jǐn)條件下雜交的DNA序列的探針。在采用該探針檢測間充質(zhì)干細(xì)胞中，可采用公知方法采取相應(yīng)措施。例如，由序列表所示基因標(biāo)記DNA序列制備出適應(yīng)長度的DNA探針，給探針加上合適的熒光標(biāo)記等標(biāo)記，通過將其與被檢體雜交，從而對間充質(zhì)干細(xì)胞進(jìn)行檢測。該DNA探針可以采用由序列表所示的本發(fā)明的基因標(biāo)記的堿基序列的反義鏈的全部或部分構(gòu)成的用于檢測間充質(zhì)干細(xì)胞標(biāo)記基因的探針?；蛘?，也可以采用固定有至少l個(gè)以上所述探針的用于檢測標(biāo)記基因的微陣列或DNA芯片。此外，在制備上述DNA探針時(shí)，本發(fā)明的堿基序列中，所謂"與用于檢測間充質(zhì)干細(xì)胞的標(biāo)記基因的DNA序列在嚴(yán)謹(jǐn)條件下雜交"是指，例如42'C下的雜交，以及在42。C下通過含有l(wèi)xSSC(0.15MNaCl、0.015M檸檬酸鈉)、0.1%SDS(十二烷基硫酸鈉)的緩沖液進(jìn)行沖洗，最為理想的是65'C下的雜交，以及在65'C下通過含有l(wèi)xSSC、0.1XSDS的緩沖液進(jìn)行沖洗。此外，影響雜交的嚴(yán)謹(jǐn)度的因素除上述溫度條件以外還存在各種因素，如果本領(lǐng)域技術(shù)人員對各種因素進(jìn)行組合，就可能實(shí)現(xiàn)與上述列舉的雜交的嚴(yán)謹(jǐn)性等同的嚴(yán)謹(jǐn)度。尤其是，本發(fā)明中檢測本發(fā)明的用于檢測間充質(zhì)千細(xì)胞的多肽標(biāo)記時(shí)，可以使用由該蛋白質(zhì)的多肽誘導(dǎo)，與該多肽特異性結(jié)合的抗體。該抗體可以是例如多克隆抗體和單克隆抗體。作為本發(fā)明的多肽標(biāo)記的抗體，該抗體可以通過常規(guī)方法制得。采用本發(fā)明的抗體，在對被檢細(xì)胞中用于檢測間充質(zhì)干細(xì)胞的標(biāo)記多肽的表達(dá)進(jìn)行檢測中，可以實(shí)施采用公知抗體的免疫學(xué)測定法。所述免疫學(xué)測定法可以是例如RIA法、ELISA法、熒光抗體發(fā)等公知的免疫學(xué)測定法。本發(fā)明可通過采用本發(fā)明的用于檢測間充質(zhì)干細(xì)胞的探針和/或本發(fā)明的用于檢測間充質(zhì)干細(xì)胞的抗體，對被檢細(xì)胞中用于檢測間充質(zhì)干細(xì)胞的標(biāo)記基因和域用于檢測間充質(zhì)干細(xì)胞的標(biāo)記多肽的表達(dá)進(jìn)行檢測，對識別出的間充質(zhì)干細(xì)胞進(jìn)行分離得以實(shí)現(xiàn)。在對被檢細(xì)胞中用于檢測間充質(zhì)干細(xì)胞的標(biāo)記基因檢測時(shí)，為了擴(kuò)增被檢細(xì)胞的基因，可采用定量或半定量的PCR。所述PCR可采用RT-PCR(逆轉(zhuǎn)錄PCR)。進(jìn)行所述PCR時(shí)，采用用于擴(kuò)增用于檢測間充質(zhì)千細(xì)胞的標(biāo)記基因的正義引物和反義引物組成的引物。用于擴(kuò)增本發(fā)明的用于檢測間充質(zhì)干細(xì)胞的標(biāo)記基因的引物舉例如下具有序列表的序列號20所示的堿基序列的正義引物以及具有序列表的序列號21所示的堿基序列的反義引物、具有序列表的序列號22所示的堿基序列的正義引物和具有序列表的序列號23所示的堿基序列的反義引物、具有序列表的序列號24所示的堿基序列的正義引物和具有序列表的序列號25所示的堿基序列的反義引物、具有序列表的序列號26所示的堿基序列的正義引物和具有序列表的序列號27所示的堿基序列的反義引物、具有序列表的序列號28所示的堿基序列的正義引物和具有序列表的序列號29所示的堿基序列的反義引物、具有序列表的序列號30所示的堿基序列的正義引物和具有序列表的序列號31所示的堿基序列的反義引物、具有序列表的序列號32所示的堿基序列的正義引物和具有序列表的序列號33所示的堿基序列的反義引物、具有序列表的序列號34所示的堿基序列的正義引物和具有序列表的序列號35所示的堿基序列的反義引物、具有序列表的序列號36所示的堿基序列的正義引物和具有序列表的序列號37所示的堿基序列的反義引物、具有序列表的序列號38所示的堿基序列的正義引物和具有序列表的序列號39所示的堿基序列的反義引物、具有序列表的序列號40所示的堿基序列的正義引物和具有序列表的序列號41所示的堿基序列的反義引物、具有序列表的序列號42所示的堿基序列的正義引物和具有序列表的序列號43所示的堿基序列的反義引物、或具有序列表的序列號44所示的堿基序列的正義引物和具有序列表的序列號45所示的堿基序列的反義引物。尤其是，用于擴(kuò)增本發(fā)明的用于檢測間充質(zhì)干細(xì)胞的標(biāo)記基因的引物舉例如下由具有序列表的序列號47所示的堿基序列的正義引物和具有序列表的序列號48所示的堿基序列的反義引物、具有序列表的序列號49所示的堿基序列的正義引物和具有序列表的序列號50所示的堿基序列的反義引物、具有序列表的序列號51所示的堿基序列的正義引物和具有序列表的序列號52所示的堿基序列的反義引物、具有序列表的序列號53所示的堿基序列的正義引物和具有序列表的序列號54所示的堿基序列的反義引物、具有序列表的序列號55所示的堿基序列的正義引物和具有序列表的序列號56所示的堿基序列的反義引物、具有序列表的序列號57所示的堿基序列的正義引物和具有序列表的序列號58所示的堿基序列的反義引物、具有序列表的序列號59所示的堿基序列的正義引物和具有序列表的序列號60所示的堿基序列的反義引物、具有序列表的序列號61所示的堿基序列的正義引物和具有序列表的序列號62所示的堿基序列的反義引物、具有序列表的序列號63所示的堿基序列的正義引物和具有序列表的序列號64所示的堿基序列的反義引物、具有序列表的序列號65所示的堿基序列的正義引物和具有序列表的序列號66所示的堿基序列的反義引物、具有序列表的序列號67所示的堿基序列的正義引物和具有序列表的序列號68所示的堿基序列的反義引物、或具有序列表的序列號69所示的堿基序列的正義引物和具有序列表的序列號70所示的堿基序列的反義引物構(gòu)成的擴(kuò)增間充質(zhì)干細(xì)胞標(biāo)記基因的實(shí)時(shí)PCR所使用的引物。進(jìn)而，用于擴(kuò)增本發(fā)明的用于檢測間充質(zhì)干細(xì)胞的標(biāo)記基因的引物列舉如下由具有序列表的序列號71所示的堿基序列的正義引物和具有序列表的序列號72所示的堿基序列的反義引物、具有序列表的序列號73所示的堿基序列的正義引物和具有序列表的序列號74所示的堿基序列的反義引物、具有序列表的序列號75所示的堿基序列的正義引物和具有序列表的序列號76所示的堿基序列的反義引物、具有序列表的序列號77所示的堿基序列的正義引物和具有序列表的序列號78所示的堿基序列的反義引物、具有序列表的序列號79所示的堿基序列的正義引物和具有序列表的序列號80所示的堿基序列的反義引物、具有序列表的序列號81所示的堿基序列的正義引物和具有序列表的序列號82所示的堿基序列的反義引物、具有序列表的序列號83所示的堿基序列的正義引物和具有序列表的序列號84所示的堿基序列的反義引物、具有序列表的序列號85所示的堿基序列的正義引物和具有序列表的序列號86所示的堿基序列的反義引物、具有序列表的序列號87所示的堿基序列的正義引物和具有序列表的序列號88所示的堿基序列的反義引物、具有序列表的序列號89所示的堿基序列的正義引物和具有序列表的序列號90所示的堿基序列的反義引物、具有序列表的序列號91所示的堿基序列的正義引物和具有序列表的序列號92所示的堿基序列的反義引物、具有序列表的序列號93所示的堿基序列的正義引物和具有序列表的序列號94所示的堿基序列的反義引物、具有序列表的序列號95所示的堿基序列的正義引物和具有序列表的序列號96所示的堿基序列的反義引物、具有序列表的序列號97所示的堿基序列的正義引物和具有序列表的序列號98所示的堿基序列的反義引物、具有序列表的序列號99所示的堿基序列的正義引物和具有序列表的序列號100所示的堿基序列的反義引物、具有序列表的序列號101所示的堿基序列的正義引物和具有序列表的序列號102所示的堿基序列的反義引物、具有序列表的序列號103所示的堿基序列的正義引物和具有序列表的序列號104所示的堿基序列的反義引物、具有序列表的序列號105所示的堿基序列的正義引物和具有序列表的序列號106所示的堿基序列的反義引物、具有序列表的序列號107所示的堿基序列的正義引物和具有序列表的序列號108所示的堿基序列的反義引物、具有序列表的序列號109所示的堿基序列的正義引物和具有序列表的序列號IIO所示的堿基序列的反義引物、具有序列表的序列號111所示的堿基序列的正義引物和具有序列表的序列號112所示的堿基序列的反義引物、具有序列表的序列號113所示的堿基序列的正義引物和具有序列表的序列號114所示的堿基序列的反義引物、或具有序列表的序列號115所示的堿基序列的正義引物和具有序列表的序列號116所示的堿基序列的反義引物構(gòu)成的用于擴(kuò)增間充質(zhì)干細(xì)胞標(biāo)記基因的RT-PCR所使用的引物。本發(fā)明中，對間充質(zhì)干細(xì)胞的識別是以下述方式進(jìn)行在被檢細(xì)胞中以上述正義引物和反義引物的至少一對以上的引物進(jìn)行擴(kuò)增，采用用于檢測本發(fā)明的間充質(zhì)干細(xì)胞的標(biāo)記基因的探針對擴(kuò)增出的基因進(jìn)行檢測。本發(fā)明的用于檢測間充質(zhì)干細(xì)胞的標(biāo)記基因是在間充質(zhì)干細(xì)胞中特異性高表達(dá)的基因和特異性低表達(dá)的基因，通過以組合方式檢測這些基因表達(dá)，能夠提高間充質(zhì)干細(xì)胞檢測的精確度。因此，作為在間充質(zhì)干細(xì)胞中特異性高表達(dá)的基因，可例舉為序列表的序列號l、11和19構(gòu)成的間充質(zhì)干細(xì)胞標(biāo)記基因，作為在間充質(zhì)干細(xì)胞中特異性低表達(dá)的基因，可例舉為序列號2、4、6、7、9、10、12、14、15、17和46構(gòu)成的間充質(zhì)干細(xì)胞標(biāo)記基因。進(jìn)而，可以列舉出本發(fā)明中經(jīng)證實(shí)的間充質(zhì)干細(xì)胞標(biāo)記基因。因此，通過對各個(gè)基因的組合中的一個(gè)以上基因的表達(dá)進(jìn)行組合，可以以更高的檢測精確度對間充質(zhì)干細(xì)胞進(jìn)行識別。在通過采用利用本發(fā)明的抗體的熒光抗體法，對被檢細(xì)胞中的間充質(zhì)干細(xì)胞標(biāo)記多肽的表達(dá)進(jìn)行檢測，從而識別分離間充質(zhì)干細(xì)胞的過程中可通過公知的方法對間充質(zhì)干細(xì)胞進(jìn)行標(biāo)記、分離。所述標(biāo)記方法，可舉例為如熒光抗體法。在通過熒光抗體法對未分化的造血細(xì)胞進(jìn)行標(biāo)記中，對與本發(fā)明的用于檢測間充質(zhì)干細(xì)胞的多肽標(biāo)記特異性結(jié)合的抗體進(jìn)行熒光標(biāo)記，通過與表達(dá)所述抗原的間充質(zhì)干細(xì)胞結(jié)合，標(biāo)記間充質(zhì)干細(xì)胞(直接熒光抗體法)，或在表達(dá)抗原的間充質(zhì)干細(xì)胞與未標(biāo)記的本發(fā)明的特異抗體結(jié)合后，對與標(biāo)記的二次抗體結(jié)合的間充質(zhì)干細(xì)胞標(biāo)記(間接熒光抗體法)、對所述經(jīng)標(biāo)記的間充質(zhì)干細(xì)胞分離，收集。本發(fā)明的間充質(zhì)干細(xì)胞的檢測識別中所使用的用于檢測間充質(zhì)干細(xì)胞標(biāo)記基因的探針，固定有該探針的用于檢測間充質(zhì)干細(xì)胞標(biāo)記基因的微陣列或DNA芯片以及本發(fā)明的用于檢測間充質(zhì)干細(xì)胞的抗體可以以裝備有上述物質(zhì)的用于識別間充質(zhì)干細(xì)胞的試劑盒制品化形式存放。下面，通過實(shí)施例更為具體地對本發(fā)明進(jìn)行說明，本發(fā)明的技術(shù)范圍不受其實(shí)施例所舉例的內(nèi)容限制。實(shí)施例材料和方法(細(xì)胞)在Dalbecco'smodifiedEagle'smedium(低葡萄糖)(Sigma公司制造)中添加了10%胎牛血清、lng/mlbFGF的培養(yǎng)基中在37。C對人間充質(zhì)干細(xì)胞(humanmesenchymalstemcell)和人成纖維細(xì)胞(humanfibroblast)進(jìn)行培養(yǎng)。(DNA微陣列)用TRIZOL試劑(Invitrogen公司制造)從一個(gè)10cm皿的各個(gè)細(xì)胞中抽提全部RNA，用micropoly(A)purist(Ambion公司制造)提取mRNA，進(jìn)行DNA微陣列(IncyteGenomics公司KuraboLifeArrayanalysissends;Lot.No.KL01081)。并且，DNA微陣列分析委托Kurabo公司進(jìn)行。(半定量RT-PCR)用TRIZOL試齊U(Invitrogen公司制造)從各個(gè)細(xì)胞中抽提全部RNA后，以各個(gè)lmg全部RNA為模板，采用用于RT-PCR的Superscriptfirst-strand合成系統(tǒng)(Invitrogen公司)，42"C下進(jìn)行50分鐘逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)從而合成cDNA。以合成的cDNA為模板采用Advantage2PCRenzymesystem(Clontech公司制造)對各個(gè)基因進(jìn)《亍擴(kuò)增。94。C下變性30秒，68'C下1分鐘內(nèi)退火30個(gè)循環(huán)。用于擴(kuò)增各個(gè)基因的引物序列匯集在表l中。通過采用1%瓊脂糖凝膠的電泳分離擴(kuò)增出的基因，通過溴乙錠染色進(jìn)行檢測。<table>tableseeoriginaldocumentpage26</column></row><table>實(shí)施例檢測結(jié)果(DNA微陣列)DNA微陣列的結(jié)果表明，9400個(gè)基因中，與在成纖維細(xì)胞中相比63個(gè)基因在間充質(zhì)干細(xì)胞中的顯著表達(dá)更高，141個(gè)基因表達(dá)較低。此外，還看出了除這些基因之外的其它基因的顯著差異。其中，發(fā)現(xiàn)存在3倍以上差異的87個(gè)基因中，在間充質(zhì)干細(xì)胞中高表達(dá)的基因?yàn)?9個(gè)基因，低表達(dá)的基因?yàn)?8個(gè)基因。(半定量RT-PCR)從源于3個(gè)個(gè)體的間充質(zhì)干細(xì)胞和源于3個(gè)個(gè)體的成纖維細(xì)胞中抽提全長RNA，以其為模板，通過半定量RT-PCR法就上述87個(gè)基因的表達(dá)量進(jìn)行調(diào)査。其結(jié)果是表達(dá)量未發(fā)現(xiàn)差異的基因最多。此外，不同個(gè)體的間充質(zhì)干細(xì)胞或成纖維細(xì)胞間表達(dá)量存在差異，認(rèn)為由個(gè)體不同產(chǎn)生的表達(dá)差異也很大(圖1)。經(jīng)RT-PCR證實(shí)在間充質(zhì)干細(xì)胞中高表達(dá)的基因是絲氨酸(或半胱氨酸)蛋白酶抑止劑(序列表的序列號1)、2類主要組織相容性復(fù)合體DRP3(序列號11)、和組織因子途徑抑制物2(序列號19)這三個(gè)基因(圖2)。此外，經(jīng)證實(shí)低表達(dá)的基因是(序列號2)、載脂蛋白D(序列號4)、XV-a型膠原酶(collagenasetypeXValpha1)(序列號6)、CUG三聯(lián)體重疊RNA結(jié)合蛋白(CUGtripletrepeatRNAbindingprotein)(序列號7)、皮膚橋蛋白(序列號9)、異檸檬酸脫氫酶2(序列號10)、酪氨酸激酶7(序列號12)、Sam68樣磷酸酪氨酸蛋白(序列號14)、C-型凝集素超家族成員2(序列號15)、和基質(zhì)金屬酶l(matrixmetalloprotease1)(序列號17)這IO個(gè)基因(圖3)。并且，通過半定量RT-PCR法對這13個(gè)基因的表達(dá)量進(jìn)行證實(shí)，所述半定量RT-PCR法是以從源于7個(gè)個(gè)體的間充質(zhì)干細(xì)胞和4個(gè)個(gè)體成纖維細(xì)胞中抽提的全長RNA作為模板的(圖4)。實(shí)施例間充質(zhì)干細(xì)胞中各個(gè)基因的表達(dá)量的測定I以與實(shí)施例1相同方法，對本發(fā)明的基因標(biāo)記在人間充質(zhì)干細(xì)胞和人成纖維細(xì)胞中的表達(dá)進(jìn)行測定。所使用的RT-PCR和實(shí)時(shí)PCR的引物和實(shí)時(shí)PCR所用探針示于表2中。<table>tableseeoriginaldocumentpage28</column></row><table>間充質(zhì)干細(xì)胞和成纖維細(xì)胞中的mRNA水平的表達(dá)狀況示于圖5。此外，間充質(zhì)干細(xì)胞和成纖維細(xì)胞中相對的mRNA水平的表達(dá)狀況示于圖6、7、8。實(shí)施例間充質(zhì)干細(xì)胞中各個(gè)基因的表達(dá)量的測定n以與實(shí)施例1相同方法，對本發(fā)明的各個(gè)基因標(biāo)記在人間充質(zhì)干細(xì)胞和人成纖維細(xì)胞中的表達(dá)進(jìn)行測定。所使用的RT-PCR的正義及反義引物如序列表的序列號71-116的序列所示。間充質(zhì)干細(xì)胞和成纖維細(xì)胞中的mRNA的表達(dá)狀況示于圖9和圖10。此外，間充質(zhì)干細(xì)胞/成纖維細(xì)胞的表達(dá)之比示于表3。表3<table>tableseeoriginaldocumentpage29</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage30</column></row><table>實(shí)施例間充質(zhì)干細(xì)胞中各個(gè)基因的表達(dá)量的測定m以與實(shí)施例i相同方法，對本發(fā)明的各個(gè)基因標(biāo)記在人源間充質(zhì)干細(xì)胞和人成纖維細(xì)胞中的表達(dá)進(jìn)行測定。間充質(zhì)干細(xì)胞/成纖維細(xì)胞的表達(dá)之比示于表4。律4)(間充質(zhì)干細(xì)胞/成纖維細(xì)胞)(基因名稱)8.9含EGF的fibulin樣細(xì)胞外基質(zhì)蛋白18.4人胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白質(zhì)5(IGFBP5)mRNA7.7人克隆24775mRNA序列7"蛋白聚糖1,分泌顆粒"6.8人胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白質(zhì)56.7"溶質(zhì)載體家族21(有機(jī)陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白)，成員3"6.5"轉(zhuǎn)谷氨酰胺酶2(c多肽，蛋白質(zhì)氨酰胺酶-y-氨酰胺酶轉(zhuǎn)移酶)"5.8凝集因子II(凝血酶)受體5.6"纖溶酶原激活物,uro激酶"5.5"金屬蛋白酶3組織抑止劑(SorsbyfUndusdystrophy,pseudoinflammatory)"5.1基質(zhì)Gla蛋白4.6B-cellCLL/淋巴瘤14.6"CD74抗原(主要組織相容性復(fù)合體的不變多肽，II類抗原相關(guān))"4.2內(nèi)收蛋白3(y)4.2"溶質(zhì)載體家族16(—元羧酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白)，成員4"3.4蛋白S(a)3.3"磷脂酰肌醇(4，5)二磷酸5-磷酸酶同系物；磷脂酰肌醇多聚磷酸5-磷酸酶IV型"3.2孕酮膜結(jié)合蛋白質(zhì)3.2腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子3載脂蛋白E38.5"GI|6005949|REF|NM_00719U|人WNT抑止因子-1(WIF-1),MRNA"12.7"GI|8922916|REF|NM—018349.1|人假擬蛋白(HYPOTHETICALPROTEIN)FLJ11175(FLJ11175)，MRNA"11.2"GI|10835001|REF|NM—001175.1|人RHOGDP解離抑止劑(GDI)p(ARHGDIB),MRNA"10.3"GI|11055973|REF|NM_021614.1|人鉀中間體/少量電導(dǎo)的鈣活化(SMALLCONDUCTANCECALCIUM-ACTIVATE)"8.7"GI|5731346|REF|NM—004289.3|人核因子(紅細(xì)胞衍生物2)-類似物3(NFE2L3)，MRNA"7.6"GI|11056053|REF|NM—021643.11人GS3955蛋白(GS3955),MRNA"7.5"EST10324脂肪組織，白色I(xiàn)人CDNA3'端與糖蛋白相類似的MUC18,"6.6"GI|13375818|REF|NM—024609.11人假擬蛋白(HYPOTHETICALPROTEIN)FLJ21841(FLJ21841)，MRNA"6.5"GI|6005971|REF|NM—007150.11人ZINCFINGER蛋白185(LIM域)(ZNF185),MRNA"6.5"細(xì)胞周期控制中涉及的GNL|UG|HS#S2334464SO假定的轉(zhuǎn)移-活化因子[人，MRNA，24"6.4"GI|7657368|REF1NM_014222.11人NADH脫氫酶(輔酶Q)1a子復(fù)合體，8(19K"6.3"GI|8924142|REF(NM—018518.11F酵母MCM10的人同系物；假擬蛋白(HYPOTHETICALPROTEIN)PR02249(PR02"6.2"GI|4502960|REF|NM—000094.11人VII-al型膠原蛋白1(大皰性表皮松解癥,DYSTRO"6.2"GI|4502074|REF|NM—001144.11人自分泌運(yùn)動因子受體(AMFR),MRNA"6.2GNL|UG|HS#S1090551人克隆24421MRNA序列/CDS:未知/GB=AF070641/GI=3283914/UG=6.2GNL|UG|HS#S1570341人MRNA;CDNADKFZP586E1621(源自克隆DKFZP586E1621)/CDS-未知/GB6.1"GI|11545760|REF|NM_022055.1|人保性(KCNK12),MRNA"6.0"GI|5902145|REF|NM—007019.11人泛素結(jié)合酶E2C(UBE2C),MRNA"5.9"GNL|UG|HS#S1970614人CDNAFLJ10517FIS,克隆NT2RP2000812/CDS=(61,918)/GB-AK001379/G"5.8"GI|4503052|REF|NM—001884.11人軟骨連接蛋白1(CRTLl),MRNA"5.8GNL|UG|HS#S1972520人MRNA;CDNADKFZP434F2322(FROM克隆DKFZP434F2322)/CDS-未知/GB5.7"GNL|UG|HS#S3837475人，克隆MGC:9549IMAGE:3857382,MRNA,完整CDS/CDS=(92，1285)/G"5.4"GI|M150008|REF|NM—032270.11人假擬蛋白(HYPOTHETICALPROTEIN)DKFZP586J1119(DKFZP586J1119),MRNA"5.4"GI|4758439|REF|NM—004877.11人神經(jīng)膠質(zhì)成熟因子，y(GMFG),MRNA"5.4"GNL|UG|HS#S2654530人CDNA:FLJ23095FIS，克隆LNG07413/CDS-未知/GB:AK026748/GI=10"5.3"GI|8922180|REF|NM_018410.1|人假擬蛋白(HYPOTHETICALPROTEIN)DKFZP762E1312(DKFZP762E1312),MRNA"5.3"GI|5031806|REF|NM—005853.11人IROQUOIS類同源域蛋白(IRX-2A),MRNA"5.2"GI|8922501|REF|NM—01813U|人假擬蛋白(HYPOTHETICALPROTEIN)FLJ10540(FLJ10540),MRNA"5.1"GNL|UG|HS#S1972896人MRNA;CDNADKFZP434C1915(FROM克隆DKFZP434C1915);PARTIALCDS/C"5."GI|I4149622|REF|NM_005916.I|人微染色體維持缺陷型(釀酒酵母(S.CEREVISIAE))7(M"5.0"GI|4758177|REF|NM_004411.1|人動力蛋白，細(xì)胞質(zhì)的，中間體多肽l(DNCIl)，M"5.0蛋白質(zhì)基因產(chǎn)物的人MRNA(PGP)9.5.5.0"GI|5453903|REF|NM—006479.11人RAD51-相互作用蛋白(PIR51),MRNA"4.9"GI|4502144|REF|NM—001168.11人含有桿狀病毒IAP重復(fù)序列的5(SURVIVIN)(BIRC5)，MR"4.9"GI|9945386|REF|NM—004482.2|人UDP-N-乙?；?ALPHA-D-半乳糖胺:多肽N-乙?；鵊AL"4.9"GI|14327895|REF|NM_031966.1|人細(xì)胞周期蛋白Bl(CC應(yīng)),MRNA"4.8"GI|6325465|REF|NMJ)04111.3|人FLAP結(jié)構(gòu)特異性內(nèi)切酶1(FENl),MRNA"4.8"GI|4507274|REF|NM—003600.1|人絲氨酸/蘇氨酸激酶15(STK15),MRNA"4.8"GI|6466452|REF|NM_002358.2|人MAD2(有絲分裂抑止缺陷型，酵母，同系物)-類似物1(MA"4.7"GI|15421859|REF|NM—018454.2|人核仁蛋白ANKT(ANKT),MRNA"4.7"GI|7661807|REF|NM—014176.11人與泛素結(jié)合酶類似的HSPC150蛋白(H"4.7"GI|9845284|REF|NM_019885.11人細(xì)胞色素P450類維生素A代謝蛋白(P450RAI-2)，"4.7"GI|4505372|REF|NM—002497.11人NIMA(從未有絲分裂基因A)相關(guān)激酶2(NEK2),MR"4.7"GI|4502422|REF|NM—001202.11人骨形態(tài)生成蛋白4(BMP4)，MRNA"4.7"GNL|UG|HS#S1970775人CDNAFLJ10674FIS,克隆NT2RP2006436/CDS-未知/GB-AK001536/GI"4.7"GI|4585861|REF|NM—001809.2|人著絲粒蛋白A(17KD)(CENPA),MRNA"4.6GNL|UG|HS#S1368141人MRNA;CDNADKFZP564P116(FROM克隆DKFZP564P116)/CDS-未知/GB-A4.6"GI|4507718|REF|NM—003318.11人TTK蛋白質(zhì)激酶(TTK),MRNA"4.6"GI|4504896|REF|NM—002266.11人KARYOPHE腿ALPHA2(RAGCOHORTI，IMPORTINALPHA1)(KPNA"4.6"GI|5729983|REF|NM_006596.1|人聚合酶(DNA導(dǎo)向的),THETA(POLQ),MRNA"4.5"GI|4758315|REF|NM—004454.11人ETS變異體基因5(ETS相關(guān)分子)(ETV5),MRNA"4.5"人含轉(zhuǎn)化酸性巻曲螺旋蛋白(TRANSFORMING,ACIDICCOILED-COILCONTAININGPROTEIN)3(TAC"4.5"人驅(qū)動蛋白類似物1(KNSLl)，MRNA"4.5"人著絲粒蛋白E(312KD)(CENPE),MRNA"4.5"人CDNA，3'END/克隆-IMAGE:1651289/克隆—END-3'/GB=AI12"4.4"人DISTAL-LESSHOMEOBOX5(DLX5)，MRNA"4.4"人V-MYB禽成髓細(xì)胞性白血病病毒癌基因同系物類似物2"4.4"人血清剝奪反應(yīng)(磷脂酰絲氨酸結(jié)合PRO"4.4"人假擬蛋白(HYPOTHETICALPROTEIN)FLJ10604(FLJ10604)，MRNA"4.4"人核糖核酸酶HI,大亞基(RNASEHI)，MRNA4.4"人ANILLIN(果蠅SCRAPS同系物)，肌動蛋白結(jié)合蛋白"4.4"人H4組蛋白家族，成員G(H4FG),MRNA"4.3"人G蛋白連結(jié)受體37(內(nèi)皮縮血管肽受體B型-"4.3"人泛素載體蛋白(E2-EPF)，MRNA"4.3"人，類似于腫瘤差別表達(dá)1,克隆IMAGE:3639252,"4.2"人假擬蛋白(HYPOTHETICALPROTEIN)MGC2577(MGC2577)，MRNA"4.2"人假擬蛋白(HYPOTHETICALPROTEIN)FLJ13912(FLJ13912),MRNA"4.2"人ANNEXINA3(ANXA3),MRNA"4.2"人STATHMIN1/ONCO蛋白18(ST畫l),MRNA"4.2"GNL|UG|HS#S3837587人，與核糖體蛋白L39.類似，克隆MGC:20168MAGE:4555759,M"4.2"人POLO(果蠅)類似物激酶(PLK),MRNA"實(shí)施例間充質(zhì)干細(xì)胞中各個(gè)基因的表達(dá)量的測定IV以與實(shí)施例l相同方法，對本發(fā)明的各個(gè)基因標(biāo)記在人源間充質(zhì)干細(xì)胞和人成纖維細(xì)胞中的表達(dá)進(jìn)行測定。間充質(zhì)干細(xì)胞/成纖維細(xì)胞的表達(dá)之比示于表5。表中的-表示的是在間充質(zhì)干細(xì)胞中基因不表達(dá)或極少量表達(dá)。表5(間充質(zhì)干細(xì)胞/成纖維細(xì)胞)(基因名稱)-53.576"人蛋白酶復(fù)合體(PROSOME,MACROPAIN)26S亞基，ATP酶，5(PS"-45.692"人真核翻譯起始因子4y，2(EIF4G"-27.6354"人二氫嘧啶酶類似物3(DPYSL3),MRNA"-20.5446"人ADAPTOR相關(guān)蛋白復(fù)合體1，SIGMA2亞基(AP1S2)"-19.5809"人網(wǎng)蛋白1,中間絲結(jié)合蛋白，500KDP"-16.9025"人異種核蛋白U(SCAFFOLDATTAC"-14.97"人假擬蛋白(HYPOTHETICALPROTEIN)MGC5306(MGC5306),MRNA"-14.6106"人MHCI類多肽相關(guān)序列A(MICA),MRNA"-13.8886"人PRK1相關(guān)蛋白(AWPl),MRNA"-13.6578"人孕酮受體膜成分2(PGRMC2),MRNA"-11.4783"人多聚谷氨酸結(jié)合蛋白1(PQBP1),MRNA"-10.2392"人S-腺苷甲硫氨酸脫羧酶1(AMD1),MRNA"-9.9506"人干擾素誘導(dǎo)的C型肝炎相關(guān)MICROTUBULARAG"-9.2594"人蛋白激酶，AMP-活化的，Y1非催化性亞基(NON-CATALYTICSUBUN)"-7.518"人前膠原-脯氨酸，2-OXOGLUTARATE4-DIOXYGENASE(脯氨酸"-6.0365"人血管內(nèi)皮分化，溶血磷脂酸G-PROTE"-5.4442"人KIAA0127基因產(chǎn)物(KIAA0127),MRNA'"'"實(shí)施例人細(xì)胞中間充質(zhì)干細(xì)胞DR的表達(dá)的測定采用流式細(xì)胞儀測定人細(xì)胞中間充質(zhì)干細(xì)胞DR的表達(dá)。結(jié)果示于圖11中。實(shí)施例8在間充質(zhì)干細(xì)胞的分化誘導(dǎo)中個(gè)基因的表達(dá)的變化以與實(shí)施例1相同方式進(jìn)行RT-PCR，測定間充質(zhì)干細(xì)胞的分化誘導(dǎo)中各基因表達(dá)的表化。成骨細(xì)胞的分化誘導(dǎo)中各基因的表達(dá)示于圖12-16中。產(chǎn)業(yè)上利用的可能性近年來，隨著再生醫(yī)療的發(fā)展，間充質(zhì)千細(xì)胞作為可用于多種組織的再生醫(yī)療的移植材料受到人們關(guān)注。為了將間充質(zhì)干細(xì)胞利用于組織的再生醫(yī)療中，必須要開發(fā)出確保間充質(zhì)干細(xì)胞有足夠數(shù)量的技術(shù)，同時(shí)還必須證實(shí)所培養(yǎng)的細(xì)胞是間充質(zhì)干細(xì)胞，重要的是檢測、分離該間充質(zhì)干細(xì)胞的方法。此外，釆用抗體等從多種類型的細(xì)胞集團(tuán)中分離間充質(zhì)干細(xì)胞也是有用的。根據(jù)本發(fā)明，通過對間充質(zhì)細(xì)胞的特征標(biāo)記基因進(jìn)行指示，就可能容易且確實(shí)地檢測識別間充質(zhì)干細(xì)胞，故而可期待為將間充質(zhì)干細(xì)胞在再生醫(yī)療中實(shí)用化作出重大貢獻(xiàn)。序列表〈110〉獨(dú)立行政法人科學(xué)技術(shù)振興機(jī)構(gòu)(JapanScienceandTechnologyAgency)加藤幸夫(YukiuKATO)智再如股份公司(TwoCellsCo.,Ltd.)<120〉檢測間充質(zhì)干細(xì)胞的標(biāo)記和采用該標(biāo)記識別間充質(zhì)干細(xì)胞的方法〈130〉V320P006US(PCT)〈150〉JP2003-63077〈151〉2000-03-10〈160〉116<170〉Patentlnversion3.1〈210〉1〈211〉652〈212〉DNA〈213〉人〈400〉1gaattgccaattccttgtttgtgcaaaatggatttcatgtcaatgaggagtttttgcaaa60tgatgaaaaaatattttaatgcagcagtaaatcatgtggacttcagtcaaaatgtagccg120tggccaact6Lcatcaat￡iagtgggtggagaataacacaaac犯tctggtgaaagatttgg180tatccccaagggattttgatgctgccacttatctggccctcattaatgctgtctatttca240aggggaactggaagtcgcagtttaggcctgaaaatactagaaccttttctttcactaaag300atgatgaaagtgaagtccaaattccaatgatgtatcagcaaggagaattttattatgggg360aatttagtgatggctccaatgaagctggtggtatctaccaagtcctagaaataccatatg420aaggagatgaaataagcatgatgctggtgctgtccagacaggaagttcctcttgctactc480tggagccattagtcaaagcacagctggttgaagaatgggcaaactctgtgaagaagcaaa540aagtagaagtatacctgcccaggttcacagtggaacaggaaattgatttaaaagatgttt600tgaaggctcttggaataactgaaaattttcatcaaagatgcaaattttgaca652〈210〉2〈211〉1450〈212〉DNA〈213〉人〈400〉2ctggatagaacagctcaagccttgccacttcgggcttctcactgcagctgggcttgga^ct60tcggagttttgccattgccagtgggacgtctgagactttctccttcaagtacttggcaga120tcactctcttagcagggtctgcgcttcgcagccgggatgaagctggtttccgtcgccctg180atgtacctgggttcgctcgccttcctaggcgctgacaccgctcggttggatgtcgcgtcg240gagtttcgaaag已a(bǔ)gtggaataagtgggctctgagtcgtgggaagagggaactgcggatg300tccagcagctaccccaccgggctcgctgacgtgaaggccgggcctgcccagacccttatt360cggccccaggacatgaagggtgcctctcgaagccccgaagacagcagtccggatgccgcc420cgcatccgagtcaagcgctaccgccagagcatgaacaacttccagggcctccggagcttt480ggctgccgcttcgggacgtgcacggtgcagaagctggcacaccagatctaccagttcaca540gataaggacaaggacaacgtcgcccccaggagcaagatcagcccccagggctacggccgc600cggcgccggcgctccctgcccgaggccggcccgggtcggactctggtgtcttctaagcca660caagcacacggggctccagcccccccgagtggaagtgctccccactttctttaggattta720ggcgcccatggtacaaggaatagtcgcgcaagcatcccgctggtgcctcccgggacgaag780gacttcccgagcggtgtggggaccgggctctgacagccctgcggagaccctgagtccggg840aggcaccgtccggcggcgagctctggctttgcaagggcccctccttctgggggcttcgct900tccttagccttgctcaggtgcaagtgccccagggggcggggtgcagaagaatccgagtgt960ttgccaggcttaaggagaggagaaactgagaaatgaatgctgagacccccggagcagggg1020tctgagccacagccgtgctcgcccacaaactgatttctcacggcgtgtcaccccaccagg1080gcgcaagcctcactattacttgaactttccaaaacctaaagaggaaaagtgcaatgcgtg1140ttgtacatacagaggtaactatcaatatttaagtttgttgctgtcaagattttttttgta1200-acttcaaatatagagatatttttgtacgttatataiitgtattaagggcattttaaaagca1260attatattgtcctccccctattttaagacgtgaatgtctcagcgaggtgtaaagttgttc1320gccgcgtggaatgtgagtgtgtttgtgtgcatgaaagagaaagactgattacctcctgtg1380tggaagaaggaaacaccgagtctctgtataatctatttacataaaatgggtgatatgcga1440acagcaaacc1450<210〉3<211>185<212〉PRT〈213〉人〈400〉3MetLysLeuValSerValAlaLeuMetTyrLeuGlySerLeuAlaPhe151015LeuGlyAlaAspThr葉gI.puAspValAlaSerG1'!PheArg!.ys202530LysTrpAsnLysTrpAlaLeuSerArgGlyLysArgGluLeuArgMet354045SerSerSerTyrProThrGlyLeuAlaAspValLysAlaGlyProAla505560GinThrLeulieArgProGinAspMetLysGlyAlaSerArgSerPro65707580GluAsp.SerSerProAspAlaAlaArglie-ArgValLysArgTyrArg85-9095GinSerMetAsnAsnPheGinGlyLeuArgSerPheGlyCysArgPhe100105110GlyThrCysThrValGinLysLeuAlaHisGinlieTyrGinPheThr115120125AspLysAspLysAspAsnValAlaProArgSerLyslieSerProGin130135140GlyTyrGlyArgArgArgArgArgSerLeuProGluAlaGlyProGly145150155160ArgThrLeuValSerSerLysProGinAlaHisGlyAlaProAlaPro165170175ProSerGlySerAlaProHisPheLeu180185<210>4〈211〉809<212〉DNA〈213〉人<400>4atgcctgtcttcatcttgaaagaaaagctccaggtcccttctccagccacccagccccaa60gatggtgatgctgctgctgctgctttccgcactggctggcctcttcggtgcggcagaggg120aca^gcatttcatcttgggaagtgccccaatcctccggtgcaggagaattttgacgtgaa180taagtatctcggaagatggtacgaaattgagaagatcccaacaacctttgagaatggacg240ctgcatccaggccaactactcactaatggaaaacggaaagatcaaagtgttaaaccagga300gttgagagctgatggaactgtgaatcaaatcgaaggtgaagccaccccagttaacctcac360agagcctgccaagctggaagttaagttttcctggtttatgccatcggcaccgtactggat420cctggccaccgactatgagaactatgccctcgtgtattcctgtacctgcatcatccaact480ttttcacgtggattttgcttggatcttggcaagaaaccctaatctccctccagaaacagt540ggactctctaaaaaatatcctgacttctaataacattgatgtcaagaaaatgacggtcac600agaccaggtgaactgccccaagctctcgtaaccaggttctacagggaggctgcacccact660ccatgttacttctgcttcgctttcccctaccccacccccccccataaagacaaaccaatc720aaccacgacaaaggaagttg;cctaaacatgt.aaccatgccctaccctgttacc十十gcta780gctgcaaaataaacttgttgctgacctgc809〈210〉5<211〉189<212〉PRT<213〉-人<400〉5MetValMetLeuLeuLeuLeu15AlaAlaGluGlyGinAlaPhe20ValGinGluAsnPheAspVal35lieGluLyslieProThrThr5055AsnTyrSerLeuMetGluAsn6570LeuArgAlaAspGlyThrVal85ValAsnUuThrGluProAlaLeuSerAlaLeuAlaGlyLeuPheGly1015HisLeuGlyLysCysProAsnProPro2530AsnLysTyrLeuGlyArgTrpTyrGlu4045PheGluAsnGlyArgCyslieGinAla60GlyLyslieLysValLeuAsnGinGlu7580AsnGinlieGluGlyGluAlaThrPro9095LysLeuGluValLysPheSerTrpPhe100105110MetProSerAlaProTyrTrplieLeuAlaThrAspTyrGluAsnTyr115120125AlaLeuValTyrSerCysThrCyslielieGinLeuPheHisValAsp130135140PheAlaTrplieLeuAlaArgAsnProAsnLeuProProGluThrVal145150155160AspSerLeuLysAsnlieLeuThrSerAsnAsnlieAspValLysLys165170175MetThrValThrAspGinValAsnCysProLysLeuSer180185<210〉6〈211〉2127<212>DNA<213>人<400>6gaaagatggatcactccagctcaaagagaacatgtgggaatgaaaggacaggctgggccc60aaaggagaaaagggtgatgctggggaggagcttcctggccctcctgaaccttctgggcct120gttggacccacggcaggagcag犯gc柳gggctctggcctaggctggggctcggacgtc180ggctctggctctggtgacctggtgggcagtgagcagctgctgagaggtcctccaggaccc240ccagggccacctggcttacctgggattccaggaaaaccaggaactgatgttttcatggga，ccccctggatctcctggagaggatggacctgctggtgaacctgggcccccgggccctgag360ggacagcctggagttgatggagccaccggccttcccgggatgaaaggggagaagggagca420agagggcctaatggctcagttggtgaaaagggtgaccctggcaacagaggcttacctgga480cccccggggaaaaagggacaagctggccctcctggggtcatgggacccccagggcctcct540ggaccccctgggcccccaggccctggatgcacaatgggacttggattcgaggataccg犯600ggctctggaagcacccagctattgaatgaacccaaactctccagaccaacggctgcaatt660ggtctcaaaggagagaaagg柳ccggggaccc犯gggaga犯gggggatggatggsgcc720agtattgtgggaccccctgggccgagagggccacctgggcacatcaaggtcttgtctaat780tccttgatcaatatcacccatggattcatgaatttctcggacattcctgagctggtgggg840cctccggggccggacgggttgcctgggctgccaggatttccaggtcctagaggaccaaaa900ggtgacactggtttacctggctttccaggactaaaaggagaacagggcgag犯gggagag960ccgggtgccatcctgacagaggacattcctctggaaaggctgatggggaaaaagggtgaa1020cctggaatgcatggagccccaggaccaatggggcccaaaggaccaccaggacataaagga1080<image>imageseeoriginaldocumentpage48</image>gagUUtcattcgtgttagagatggctggaaaaaeLttacagctgggagaactgatcccc1920attcctgccgacagccctccaccccctgcgctttccagcaacccacatcagcttctgcct1980ccaccaaaccctatttcaagtgccaattatgagaagcctgctctgcatttggctgctctg2040aacatgccattttctggggacattcgagctgattttcagtgcttcaagcaggccagagct2100gcaggactgttgtccacctaccgagca2127〈210〉7〈211〉2384〈212〉DNA〈213〉人〈400〉7cctgctcgttcctgacagaattaacggcacagccaacaagatgaacggagctttggatca60ctcagaccaaccagacccagatgccattaagatgtttgtcggacagatcccccggtcatg120gtcggaaaaggagctgaaagaactttttgagccttacggagccgtctaccagatcaacgt180cctccgggaccggagtcagaaccctccgcagagtaaaggttgttgtttcgtaacatttta240tacaagaaaagctgcacttgaggcccagaatgcactgcacaatattaaaactttacctgg300gatgcatcatcccattcagatgaaacctgcagatagtgaaaagtccaacgctgtggaaga360cagaaaattgttcataggaatggtttcgaeLgaaatgtaatgagaacgacatcagggtgat420gttctctccatttggccagatagaagaatgccggatcctccggggacctgatgggctgag480tcgaggctgtgcgtttgtcacattttctacaagggcaatggcacagaatgcaatcaaagc540catgcatcagtctcagaccatggagggctgctcttcacctatcgtggtgaagtttgctga600cactcagaaggacaaagagcaaaggcgcctccagcagcagctcgctcagcagatgcagca660gctcaacactgccacctgggggaacctgacagggctgggcggactgaccccacagtatct720ggcgctcctgcagcaggccacctcctccagcaacctgggtgcgttcagcggcattcaaca780aatggcaggcatgaatgctttacagttgcagaacctggcgacgctggctgctgctgcagc840tgcggcccagacctcagccaccagcaccaatgcaaaccctctxtctaccacgagcagcgc900cctgggagccctcacgagtcccgtggctgcttcaacccccaactccactgctggtgcagc兆Ocatgaactccttgacctctctcgggactctgcaaggactggctggagccactgttggact1020gaataatattaatgcactagcagttgctcaaatgctctcaggtatggcggctctgaatgg1080aggacttggcgccacaggcttgacgaatggcacggctggcaccatggacgccctcaccca1140ggcctactcaggaattcaacagtacgcagccgccgcgctgcccactctgtacagccagag1200r「tgrtgcagcagcagagcgctgcaggcag。igaaggaaggtccagagggggcaaacct1260ctttatttaccaccttccacaggaatttggagaccagcacattctgcagatgttcatgcc1320ttttggaaatgttatctctgctaaagtcttcattgacaaacagaccaatctgagcaagtg1380ctttggttttgttagctacgacaatccagtctctgcacaagctgctatccaagctatgaa1440tggctttcagatcggcatgaaacgcttgaaggtgcagctgaagcgttccaaaaacgacag1500caaaccttactgatcctaaccccagaggctccctgctctcattttagctttcttaggaca1560tcttcatgcccgttagttcatcgtttgcctagcatgtccctgtggcgtctcaaa犯aaag1620tttcatcgtcccgtcattgtttctgatgtctttctgacctcacatcatatttggttctcc1680tactgacctttgatctagtttgacctttgaaatttgcatgtgacctcatctagctatgaa1740ttctggg己agtcaatgtgaaaaacattgctgcattcatgcaagactgaaatttattatta1800gacaaattcattatagaaaaaacctgtggcaaaaacgtttctttcttattttttttcttt1860tcctaaaacagacttgaaagtattatacagggattggcattxttcccggtcactggtaac1920aatagcaatatgtgtccagggacacagaatgttggtttctascagactacttccaaa犯c1980agtttgagaaaaaaactgtctgattttaagtctctagaggtctgtaatagtttttacatt2040tttcaggcagtgtaaagttttttgataaggccattttaggtggctcactttctcattaag2100atatatatatagaaccactttttgtagattagtataagaaaaatatttaccctgttttgg2160ggcaaatgctacctatttgtgtcaccttttgctgaactcacagttagacaatccatggtt2220taatgcacatgaaattacctatattttatactgtttcastgtacaggagaaaggttactg2280taaactgtgttatgttggtgcttctgtgaattaagttgtggtttcatcatgagtcttaat2340gttctttgttgataagacaagtttagaattggtttacttaatac2384<210>8〈211〉490〈212〉PRT〈213〉人〈400〉8MetAsnGlyAlaLeuAspHisSerAspGinProAspProAspAlalie151015LysMetPheValGlyGinlieProArgSerTrpSerGluLysGluLeu202530LysGluLeuPheGluProTyrGlyAlaValTyrGinlieAsnValLeu354045ArgAspArgSerGinAsnProProGinSerLysGlyCysCysPheVal505560ThrPheTyrThrArgLysAlaAlaLeuGluAlaGinAsnAlaLeuHis65707580AsnlieLysThrLeuProGlyMetHisHisProlieGinMetLysPro859095AlaAspSerGluLysSerAsnAlaValGluAspArgLysLeuPhelie100105110GlyMetValSerLysLysCysAsnGluAsnAsplieArgValMetPhe115120125SerProPheGlyGinlieGluGluCysArglieLeuArgGlyProAsp130135140GlyLeuSerArgGlyCysAlaPheValThrPheSerThrArgAlaMet145150155160AlaGinAsnAlalieLysAlaMetHisGinSerGinThrMetGluGly165170175CysSerSerProlieValValLysPheAlaAspThrGinLysAspLys180185190GluGinArgArgLeuGinGinGnLeuAlaGinGinMetGinGinLeu195200205AsnThrAlaThrTrpGlyAsnLeuThrGlyLeuGlyGlyLeuThrPro210215220GinTyrLeuAlaLeuLeuGinGinAlaThrSerSerSerAsnLeuGly225230235240AlaPheSerGlylieGinGinMetAlaGlyMetAsnAlaLeuGinLeu245250255GinAsnLeuAlaThrLeuAlaAlaAlaAlaAlaAlaAlaGinThrSer260265270AlaThrSerThrAsnAlaA:;r,PrxLeuSerThrThrSerSerAla275280285GlyAlaLeuThrSerProValAlaAlaSerThrProAsnSerThrAla290295300GlyAlaAlaMetAsnSerUuThrSerLeuGlyThrUuGinGlyLeu305310315320AlaGlyAlaThrValGlyUuAsnAsnlieAsnAlaLeuAlaValAla325330335GinMetLeuSerGlyMetAlaAla340GlyLeuThrAsnGlyThrAlaGly355360TyrSerGlylieGinGinTyrAla370375LeuAsnGlyGlyLeuGlyAlaThr345350ThrMetAspAlaLeuThrGinAla365AlaAlaAlaLeuProThrLeuTyr380SerGinSerLeuLeuGinGinGinSerAlaAlaGlySerGinLysGlu385390395400GlyProGluGlyAlaAsnLeuPhelieTyrHisLeuProGinGluPhe405410415GlyAspGinHislieLeuGinMetPheMetProPheGlyAsnVallie420425430SerAlaLysValPhelieAspLysGinThrAsnLeuSerLysCysPhe435440445GlyPheValSerTyrAspAsnProValSerAlaGinAlaAlalieGin450455460AlaMetAsnGlyPheGinlieGlyMetLysArgLeuLysValGinLeu465470475柳LysArgSerLysAsnAspSerLysProTyr485<210>9〈211>419<212>DNA<213>人〈400〉9tttttttttttttttttcagcatagtgaacgttaatatt,tttatttcttttgtaatgaag60agtacaaatggttgggagcaggacatcacaggaggaggaaagatagcgccatctctgcag120aagaaictcctggLgccacaxacagaaggasagttgatccccagggcagcctttcccaccaa180aaaaatcaggcccaatccaggagagtttgccagtagctccccagggttccagggtgtctg240ccagccttcctaggaatcgtgggcaggcttctaggtgccagtgactcaaactcctttttc300cacttcccagttcaacctggtcactctcatccccacaagttcccaatctgaatcccattc360tctgaccattctctgcttccttgtttttaatct.catttgagagtgatcctcacgggttc419〈210〉10<211>762〈212>DNA<213〉人<400〉10gccgggaggagcggcgcgcgctcggacctctcccgccctgctcgttcgctctccagcttg60ggatggccggctacctgcgggtcgtgcgctcgctctgcagagcctcaggctcgcggccgg120cctgggcgccggcggccctgacagcccccacctcgcaagagcagccgcggcgccactatg180ccgacaa犯ggatcaaggtggcgaagccgtggtggagatggatggtgatgEigatgacccg240tattatctggcagttcstcaaggagaagctcatcctgccccacgtggacatccagctaaa300gtattttgacctcgggctcccaaaccgtgaccagactgatgaccaggtcaccattgactc360tgcactggccacccagaagtacagtgtggctgtcaagtgtgccaccatcacccctgatga420ggcccgtgtggaagagttcaagctgaagaagatgtggaaaagtcccaatggaactatccg480gaacatcctgggggggactgtcttccgggagcccatcatctgcaaaaacatcccacgcct540agtccctggctggaccaagcccatcaccattggcaggcacgcccatggcgaccagtaxaa600ggccacagactttgtggcagaccgggccggcactttcaaaatggtcttcaccccaaaaga660ggcagtggtgtcaaggagtgggaagtgtacaacUccccgcaggcgcgcgtgggcatgg720gcatgtacmacaccgacgagtccatctcaggttttgcgcaca762<210〉11〈211〉689〈212〉DNA〈213〉人〈400〉11aactccatctttgsiaELaacatttaatasitgtaatgtgtttgtggtscagggtgagtacag60atgcacaggaggccatagggtttaggca犯ggggagcacaaaagttgaagatgaggcgct120gccatcaatgctgggacttcaggccaagggcaggaactgaggaagccacaagggaggaca180ttttctgcagttgctgaaccagtagcaactaggtcctgagaaagccctctctcgtggaag240aataacagccaggcgggaaagcttttcatcctgcaaagctggggaagaagattcttcctt300aaattgtcatctgcacttcagctcaggaatcctgttggctgaagtccagagtgtcctttc360tgattcctgaagtagatgaacagcccggccccaaggaagagcaggcccagcacaaagccc420ccgactccactcagcatcttgctctgtgcagattcagaccgtgcactccattccactgtg480agagggctcgttacgcttgggtgctccacttggcaggtgtaaacctctccactccgagga540actgtttctagcatcaccagggtctggaatgtccagtctccattctggatcaggcgcgtg600gacaccaccccagccttctcttcctgcccgttccggaaccagctgacttcaatgctgcct660ggatag犯accactcacagagcagaccag689<210>12〈211〉1959<212>DNA〈213〉人〈400>12gggetgcacgcgggagtccggctgcccacccatggcagggtctaccagaagggccacgagc60tggtgttggccaatattgctgaaagtgatgctggtgtctacacctgccacgcggccaacc120tggctggtcagcggagacaggatgtca已catcactgtggccactgtgccctcctggctga180agaagccccaagacagccagctggaggagggcaaacccggctacttggattgcctgaccc240aggccacaccaaaacctacagttgtctggtacagaaaccagatgctcatctcagaggact300cacggttcgaggtgttcctggcaaaggctcagggcttggaggagggagtggcagagaccc360tggtacttgtgaagagcctgcagagcaaggatgagcagcagcagctggacttccggaggg420agttggagatgtttgggaagctgaaccacgccaacgtggtgcggctcctggggctgtgcc■gggaggctgagccccactacatggtgctggaatatgtggatctgggagacctcaagcagt540tcctgaggatttccaagagcaaggatgaaaaattgaagtcacagcccctcagcaccaagc600agaaggtggccctatgcacccaggtagccctgggcatggagcacctgtccaacaaccgct660ttgtgcataaggacttggctgcgcgtaactgcctggtcagtgcccagagacaagtgaagg720tgtctgccctgggcctcagcaaggatgtgtacaacagtgagtactaccacttccgccagg780ccngggtgccgctgcgctggatgtcccccgaggccatcctggagggtgacttctctacca840agtctgatgtctgggccttcggtgtgctgatgtgggaagtgtttacacatggagagatgc900cccatggtgggcaggcagatgatgaagtactggcagatttgcaggctgggaaggctagac960ttcctcagcccgagggctgcccttccaaactctatcggctgatgcagcgctgctgggccc1020tcagccccaaggaccggccctccttcagtgagattgccagcgccctgggagacagcaccg1080tggacagcaagccgtgaggagggagcccgctcaggatggcctgggcaggggaggacatct1140ctagagggaagctcacagcatgatgggcaagatccctgtcctcctgggccctgaggcccc1200tgccctagtgcaacaggcattgctgaggtctgagcagggcctggcctttcctcctcttcc1260tcciccctcatcctttgggaggctgacttgg"^caaadgggcgactagggctttgagct1320gggcagttttccctgccacctcttcctctatcagggacagtgtgggtgccacaggtaacc1380ccaatttctggccttcaacttctccccttgaccgggtccaactctgccactcsitctgcca1440actttgcctggggagggctaggcttgggatgagctgggUtgtggggagttccttaatat1500-tctcaagttctgggcacacagggttaatgagtctcttggcccactggtcccacttggggg1560tctagaccaggattatagaggacacagcaagtgagtcctccccactctgggcttgtgcac1620actgacccagacccacgtcttccccacccttctctcctttcctcatcctaagtgcctggc1680agatgaaggagttttcaggagcttttgacactatataaaccgccctttttgtatgcacca1740cgggcggcttttatatgtaattgcagcgtggggtgggtgggcatgggaggtaggggtggg1800ccctggagatgaggagggtgggccatccttaccccacacttttattgttgtcgttttttg1860tttgttttgtttttttgtttttgtttttgtttttacactcgctgctctcaataaataagc1920ctttttt3C3a^3a^犯3^a^犯犯3a犯a犯aaaa1959<210>13<211>364<212>PRT〈213〉人<400〉13GluHisAlaGlyValArgLeuProThrHisGlyArgValTyrGinLys151015GlyHisGluLeuValLeuAlaAsnlieAlaGluSerAspAlaGlyVal202530TyrThrCysHisAlaAlaAsnLeuAlaGlyGinArgArgGinAspVal354045AsnlieThrVa〗AlaThrValProSerTrpLeuLysLysProGinAsp505560SerGinLeuGluGluGlyLysProGlyTyrLeuAspCysLeuThrGin65707580AlaThrProLysProThrValValTrpTyrArgAsnGinMetLeulie859095SerGluAspSerArgPheGluValPheLeuAlaLysAlaGinGlyLeu100105110GluGluGlyValAlaGluThrLeuValUuValLysSerLeuGinSer115120125LysAspGluGinGinGinLeuAspPheArgArgGluLeuGluMetPhe130135140GlyLysLeuAsnHisAlaAsnValValArgLeuLeuGlyLeuCysArg145150155160GluAlaGluProHisTyrMetValLeuGluTyrValAspUuGlyAsp165170175LeuLysGinPheLeuArglieSerLysSerLysAspGluLysLeuLys180185190SerGinProLeuSerThrLysGinLysValAlaLeuCysThrGinVal195200205AlaLeuGlyMetGluHisLeuSerAsnAsnArgPheValHisLysAsp210215220LeuAlaAlaArgAsnCysLeuValSerAlaGinArgGinValLysVal225230235240SerAlaLeuGlyLeuSerLysAspValTyrAsnSerGluTyrTyrHis245250255PheArgGinAlaTrpValProLeuArgTrpMetSerProGluAlalie260265270LeuGluGlyAspPheSerThrLysSerAspValTrpAlaPheGlyVal275280285LeuMetTrpGluValPheThrHisGlyGluMetProHisGlyGlyGin290295300AlaAspAspGluValLeuAlaAspLeuGinAlaGlyLysAlaArgLeu305310315320ProGinProGluGlyCysProSerLysLeuTyrArgLeuMetGinArg325330335CysTrpAlaLeuSerProLysAspArgProSerPheSerGlulieAla340345350SerAlaLeuGlyAspSerThrValAspSerILysPro355360<210>14<211〉430<212〉DNA<213>人<400〉14ggttgatgtttcaacaaagtagttttaagttccatccattcagattttaagcattttgat60ttatttaaaaagggattgttcatagaaaaaaattaxtttgaacagtatacaggactggtg120gagattggctatttcacaacatcagacagtacaatcagtatxtgccatatggctggtctc180tgtagacgccctttgctgtcctcgctgaaggtgccttgtgtcttgagttagtccactctt240cttgcccgtaggaatcataagtctcctcactgagtccatgtccgtaatcatagtaatcag300caccactttgggctggggtgctatagctgttatcataggaatcataactctgttcatcat360aagcagtgccatatccatcatcatagtca.tattctccata.agtctcttggtgtcgggggt420ggcggtggaa430〈210〉15<211>616〈212>DNA〈213>人<400〉15ggtatgatgaccaaacataaaaagtgttttataattgttggtgttttaataacaactaat60attattactctgatagttaaactaactcgagattctcagagtttatgcccctatgattgg120attggtttccaaaacaaatgctattatttctctaaagaagaaggagattggaattcaagt180aaatacaactgttccactcaacatgccgacctaactataattgacaacatagaagaaatg240aattttcttaggcggtataaatgcagttctgatcactggattggactgaagatggcaaaa300aatcgaacaggacaatgggtagatggagctacatttaccaaatcgtttggcatgagaggg360agtgaaggatgtgcctacctcagcgatgatggtgcagcaacagctagatgttacaccgaa420agaaaatggatttgcaggaaaagaatacactaagttaatgtctaagataatggggaaaat480agaaaataacattattaagtgtaaaaccagcaaagtacttttttaattaaacaaagttcg540agttttgtacctgtctggttaattctgcttacgtgtcaggctacacataaaagccacttc600a犯gattggca犯aaa616〈400>16MetMetThrLysHisLysLysCysPhelielieValGlyValLeulie151015ThrThrAsnlielieThrLeulieValLysLeuThrArgAspSerGin202530SerLeuCysProTyrAspTrplieGlyPheGinAsnLysCysTyrTyr<formula>formulaseeoriginaldocumentpage66</formula>ctcacagcttcccagcgactctagaaacacaagagcaagatgtggacttagtccagaaat180acctggaaaaatactacaacctgaagaatgatgggaggcaagttgaaaagcggagaaata240gtggcccagtggttgaaaaattgaagcaaatgcaggaattctttgggctgaaagtgaxtg300ggaaaccagatgctgaaaccctgaaggtgatgaagcagcccagatgtggagtgcctgatg360tggctcagtttgtcctcactgaggggaaccctcgctgggagcaaacacatctgacctaca420ggattgaaaattacacgccagatttgccaagagcagatgtggaccatgccattgagaaag480ccttccaactctggagtaatgtcac—acctctgacattcaccaaggtctctgagggtcaag540cagacatcatgatatcttttgtcaggggagatcatcgggacaactctccttttgatggac600ctggaggaaatcttgctcatgcttttcaaccaggcccaggtattggaggggatgctcattGGOttgatgaagatgaaaggtggaccaacaatttcagagagtacaacttacatcgtgttgcgg720ctcatgaactcggccattctcttggactctcccattctactgatatcggggctttgatgt780accctagctacaccttcagtggtgatgttcagctagctcaggatgacattgatggcatcc840aagccatatatggacgttcccaaaatcctgtccagcccatcggcccacaaaccccaaaag900cgtgtgac兆taagctaacctttgatgctataactacgattcggggagaagtgatgttct960ttaasgacagattct3catgcgcacaaatcccttctacccggaagttgagctcastttca1020tttctgttttctggccacaactgc廠aaatgggcttgaagctgcttacgaatt—tgccgaca1080gagatgaagtccggtttttcaaaggga已taagtactgggctgttcagggacagaatgtgc1140tacacggataccccaaggaxatctacsgctcctttggcttccctaga3ctgtgaagcata1200tcgatgctgctctttctgaggaaaacactggaaaaacctacttctttgttgctaacaaat1260actggaggtatgatgaatataaacgatctatggatccaggttatcccaaaatgatagcac1320atgactttcctggaattggccacaaagttgatgcagttttcatgaaagatggatttttct1380atttctttcatggaacaagacaatac犯atttgatcctaaaacgaagagaattttgactc1440tccagaaagctaatagctggttcaactgcagg3eiaaattgaacattactaatttgaatgg1500aaaacacatggtgtgagtccaaagaaggtgttttcctgaagaactgtctattttctcagt1560catttttaacctctagagtcactgatacacagaatataatcttatttatacctcagtttg1620catatttttttactatttagaatgtagccctttttgtactgatataatttagttccacaa1680atggtgggtacaaaaagtcaagtttgtggcttatggattcatataggccagagttgcaaa1740gatcttttccagagtatgcaactctgacgttgatcccagagagcagcttcagtgacaaac1800atatcctttcaagacagaaagagacaggagacatgagtctttgccggaggaaaagcagct1860caagaacacatgtgcagtcactggtgtcaccctggataggcaagggataactcttctaac1920acaaaataagtgttttatgtttggaataaagtcaaccttgtttctactgtttt1973〈210〉18〈211〉469<212〉PRT<213〉人〈400>18MetHisSerPheProProLeuLeuLeuLeuLeuPheTrpGlyValVal151015SerHisSerPheProAlaThrLeuGluThrGinGluGinAspValAsp202530LeuValGinLysTyrLeuGluLysTyrTyrAsnLeuLysAsnAspGly354045ArgGinValGluLysArgArgAsnSerGlyProValValGluLysLeu505560LysGinMetGinGluPhePheGlyLeuLysValThrGlyLysProAsp657075別AlaGluThrLeuLysValMetLysGinProArgCysGlyValProAsp85卯95ValAlaGinPheValLeuThrGluGlyAsnProArgTrpGluGinThr100105110HisLeuThrTyrArglieGluAsnTyrThrProAspLeuProArgAla115120125AspValAspHisAlalieGluLysAlaPheGinLeuTrpSerAsnVal130135140ThrProLeuThrPheThrLysValSerGluGlyGinAlaAsplieMet145150155160lieSerPheValArgGlyAspHisArgAspAsnSerProPheAspGly165170175ProGlyGlyAsnLeuAlaHisAlaPheGinProGlyProGlylieGly180185190GlyAspAlaHisPheAspGluAspGluArgTrpThrAsnAsnPheArg195200205GluTyrAsnLeuHisArgValAlaAlaHisGluLeuGlyHisSerLeu210215220GlyLeuSerHisSerThrAsplieGlyAlaLeuMetTyrProSerTyr225230235240ThrPheSerGlyAspValGinLeuAlaGinAspAsplieAspGlylie245250255GinAlalieTyrGlyArgSerGinAsnProValGinProlieGlyPro260265270GluThrProLy。AidCysAspSerLysLeuThiPheAspAlalieThr275280285ThrlieArgGlyGluValMetPhePheLysAspArgPheTyrMetArg290295300ThrAsnProPheTyrProGluValGluUuAsnPhelieSerValPhe305310315320TrpProGinLeuProAsnGlyLeuGluAlaAlaTyrGluPheAlaAsp325330335ArgAspGluValArgPhePheLysGlyAsnLysTyrTrpAlaValGin340345350GlyGinAsnValLeuHisGlyTyrProLysAsplieTyrSerSerPhe355360365GlyPheProArgThrValLysHislieAspAlaAlaUuSerGluGlu370375380AsnThrGlyLysThrTyrPhePheValAlaAsnLysTyrTrpArgTyr385390395400AspGluTyrLysArgSerMetAspProGlyTyrProLysMetlieAla405410415HisAspPheProGlylieGlyHisLysValAspAlaValPheMetLys420425430AspGlyPhePheTyrPhePheHisGlyThrArgGinTyrLysPheAsp435440445ProLysThrLysArglieLeuThrLeuGinLysAlaAsnSerTrpPhe450455460AsnCysArgLysAsn465<210>19〈211〉1141<212>DNA〈213〉人〈400〉19ccgccaggcgctttxtcggacgccttgcccagcgggccgcccgaccccctgcaccatgga60ccccgctcgccccctggggctgtcgattctgctgcttttcctgacggaggctgcactggg120cgatgctgctcaggagccaacaggaaataaGgcggagatctgtctcctgcccctagacta180cggaccctgccgggccctacttctccgttactactacgacaggtacacgcagagctgccg240ccagttcctgtacgggggctgcgagggcaacgccaacaatttctacacctgggaggcttg300cgacgatgcttgctggaggatagaaaaagttcccaaagtttgccggctgcaagtgagtgt360ggacgaccagtgtgaggggtccacagaaaagtatttctttaatctaagttccatgacatg420tgaaaaattcttttccggtgggtgtcaccggaaccggattgagaacaggtttccagatga480agctacttgtatgggcttctgcgcaccaaagaaaattccatcattttgctacagtccaaa540agatgagggactgtgctxtgccaatgtgactcgctattattttaatcc犯gstacagaac600<formula>formulaseeoriginaldocumentpage75</formula>〈223〉序列絲氨酸(或半胱氨酸)蛋白酶抑制因子正義引物<400>20ccaaactttgaaagccaaggtg<210〉21〈211〉21<212〉副A〈213〉人工系列〈220〉〈223〉絲氨酸(或半胱氨酸)蛋白酶抑制因子反義引物〈400〉21tgcacttcaaagaccagcagg21〈210〉22〈211〉21<212>DNA<213〉人工序列<220〉〈223>腎上腺髓質(zhì)素正義引物〈400〉22aggaatagtcgcgcaagcatc21<210〉23<211〉22〈212>DNA<213>人工系列<220〉〈223〉腎上腺髓質(zhì)素反義引物<400〉23cacgcattgcacttttcctctt22<210〉24<211〉21<212>DNA〈213〉人工系列<220〉〈223〉載脂蛋白D正義引物〈400〉24tgaagccaccccagttaacct21<210>25<211〉23<212〉腿<2丄3>人工系列〈220〉<223〉載脂蛋白D反義引物<400〉25ggtcaacttcctttgtgcgtggt23<210〉26<211>22<212〉DNA〈213>人工系列〈220〉<223〉a-1XV型膠原蛋白正義引物<400〉26accaaaccctatttcaagtgcc22<210〉27<211〉21<212〉腿<212>腿〈213〉人工系列〈220>〈223>a-lXV型膠原蛋白反義引物〈400〉27tagttatccacaaggcggacg21<210〉28<211>21<212>DNA<213>人工系列<220〉〈223〉CUG三聯(lián)體重復(fù)RNA結(jié)合蛋白2正義引物<400〉28atgtttgtcggacagatcccc21〈210〉29〈211〉21〈212〉DNA<213〉人工系列〈220〉〈223〉CUG三聯(lián)體重復(fù)RNA結(jié)合蛋白2反義引物<400〉29atgtgacaaacgcacagcctc21<210〉30<211>20<212〉腿<213>人工系列〈220>〈223〉皮膚橋蛋白正義引物〈400>30atttgaaccggcaaggcttc20〈210〉31〈211〉21〈212〉DNA<213〉人工系列<220〉〈223〉皮膚橋蛋白反義引物〈400〉31aagtggttgttgctcctcgga<210〉<211〉〈212〉<213〉3220畫人工系列<220〉<223〉異檸檬酸脫氫酶正義引物<400〉32tgc:catccagaagaaatggc〈210>33〈211>19<212>腿〈213〉人工系列〈220〉<223〉異檸檬酸脫氫酶反義引物〈400〉33Eiggcaa3gatgctggcgat<210>34〈211〉22<212〉腿<213>人工系列〈220〉〈223〉MHCII類DRe3正義引物<400〉34tagctgtggacaaagccaacct22<210〉35<211〉22〈212〉DNA<213〉人工系列<220〉〈223〉MHCII類DRe3反義引物〈400〉35ggcacacaccacgttctctgta22<210〉36<211〉22<212>DNA<213>人工系列〈220〉<223>蛋白質(zhì)酪氨酸激酶7正義引物〈400〉36tggaaccagagcgtacgactgt22<210〉37〈211〉19〈212〉DNA<213〉人工系列<220〉<223〉蛋白質(zhì)酪氨酸激酶7反義引物<400>37tggctttgcagcgcttctt19<210>38<211〉22〈212〉DNA<213〉人工系列〈220〉<223>類Sam68磷酸化酪氨酸蛋白質(zhì)，T-STAR正義引物<400>38aggagaaggcaaggatgaagaa22〈210〉39〈211〉22<212>DNA〈213〉人工系列〈220〉<223〉類Sa川68磷酸化酪氨酸蛋白質(zhì)，T-STAR反義引物〈400〉39tgttaactcctggagctgtgct22<210〉40〈211〉22<212〉DNA<213〉人工系列<220〉<223〉C-型凝集素超家族成員2正義引物〈400>40gcccctatgattggattggttt22〈210〉41〈211〉22<212>DNA〈213〉人工系列〈220〉〈223〉C-型凝集素超家族成員2反義引物<400〉41catccttcactccctctcatgc22<210〉42〈211〉25<212〉DNA〈213〉人工系列<220〉〈223〉MMP(基質(zhì)金屬蛋白酶)1正義引物<400〉42cgactctagaaacacaagagcaaga25<210>43〈211〉25<212〉DNA<213〉人工系列〈220><223>MMP(基質(zhì)金屬蛋白酶)1反義引物<400〉43aaggttagcttactgtcacacgctt25〈210>44<211〉17〈212〉DNA〈213〉人工系列<220>〈223〉TFPI(組織因子途徑抑制物)2正義引物〈400〉44gtcgattctgcttttcc17〈210〉45<211〉20<212>腿〈213〉人工系列<220〉<223〉TFPI(組織因子途徑抑制物)2反義引物〈400〉45atggaattttctttggtgcg20〈210〉46〈211〉1045〈212〉腿<2]3>人<4。0〉46ctcccgagctctactgactcccaacagagcgcccaagcaagaaaatggccataagtggag60tccctgtgctaggatttttcatcatagctgtgctgatgagcgctcaggaatcatgggcta120tcaaagaagaacatgtgatcatccaggccgagttctatctgaatcctgaccaatcaggcg180agtttatgtttgactttgatggtgatgagattttccatgtggatatggcaaagaaggaga240cggtctggcggcttgaagaatttggacgatttgccagctttgaggctcaaggtgcattgg300ccaacatagctgtggacaaagccaacctggaaatcatgacaaagcgctccaactatactc360<image>imageseeoriginaldocumentpage88</image><211〉18〈212〉DNA〈213〉人工系列〈220〉<223>用于RT-PCR的腎上腺髓質(zhì)素引物〈400〉47ggtttccgtcgccctgat18〈210>48<211〉24〈212〉DNA<213〉人工系列<220〉<223〉用于RT-PCR的腎上腺髓質(zhì)素引物<400〉48gagcccacttattccacttctttc24<210〉49<211〉22<212〉DNA〈213〉人工系列<220>〈223〉用于RT-PCR的基質(zhì)金屬蛋白酶1引物〈400〉49gatggacctggaggaaatcttg22<210>50<211>24<212>腿<213〉人工系列<220〉〈223〉用于RT-PCR的基質(zhì)金屬蛋白酶1引物〈400〉50ccgcaacacgatgtaagttgtact24〈210〉51<211>21<212〉DNA〈213〉人工系列〈220〉〈223〉用于RT-PCR的組織因子途徑抑制物2引物<400〉51ggcaacgccaacaatttctac21〈210〉52<211〉26〈212〉腿〈213〉人工系列<220〉<223>用于RT-PCR的組織因子途徑抑制物2引物<400>52c犯3ctttgggaactttttctatcct26<210〉53〈211〉23〈212〉DNA<213>人工系列<220><223>用于RT-PCR的絲氨酸(或半胱氨酸)蛋白酶抑止因子引物〈400〉53tgggtggagaataacacaaacaa23<210〉54<211〉22<212>廳<213〉人工系列〈220〉<223〉用于RT-PCR的絲氨酸(或半胱氨酸)蛋白酶抑止因子引物<400〉54ccagataagtggcagC3tcs犯22<210〉55<211>28<212〉廳〈213〉人工系列〈220〉〈223〉用于RT-PCR的蛋白質(zhì)酪氨酸激酶7引物〈400〉55gggagttccttaatattctcaagttctg28<210〉56<211>27<212>腿<213>人工系列〈220〉<223>蛋白質(zhì)酪氨酸激酶7<400〉56gctgtgtcctctataatcctggtctag27<210〉57〈211〉20<212>DNA<213>人工系列<220〉〈223〉用于RT-PCR的膠原蛋白，XV型，a1引物<400〉57ccagcaacccacatcagctt20<210〉58<211〉23〈212〉腿<213〉人工系列〈220〉〈223〉用于RT-PCR的膠原蛋白，XV型，a1引物〈400〉58atgcagagcaggcttctcataat23<210>59<211>29<212>■<213〉人工系列〈220〉<223〉用于RT-PCR的類Sam68磷酸化酪氨酸蛋白質(zhì)引物〈400>59tcacaacatcagacagtacaatcagtatc29<210>60〈211〉22〈212〉DNA<213〉人工系列<220〉〈223〉用于RT-PCR的類Sam68磷酸化酪氨酸蛋白質(zhì)引物〈400〉60acgggcaagaagagtggactaa22〈210〉61<211〉23<212>DNA<213〉人工系列〈220〉〈223〉用于RT-PCR的載脂蛋白D引物<400>61tgagaagatcccaacaacctttg23〈210〉62<211〉24〈212〉腿〈213〉人工系列〈220〉〈223>用于RT-PCR的載脂蛋白D引物<400〉62tgatctttccgttttccattagtg24<210〉63〈211〉22<212〉DNA〈213>人工系列〈220〉<223〉主要組織相容性復(fù)合體DRe<400>63ggctgaagtccagagtgtcctt22〈210〉64<211〉18〈212〉腿〈213〉人工系列<220〉〈223〉用于RT-PCR的主要組織相容性復(fù)合體DRP引物<400〉64gctgggcctgctcttcct18〈210〉65〈211〉19<212>腿<213〉人工系列〈220>〈223〉用于RT-PCR的主要組織相容性復(fù)合體DRa引物〈400〉65gcccagggaagaccacctt19〈210〉66<211〉23<212>腿<213>人工系列<220><223>用于RT-PCR的主要組織相容性復(fù)合體DRa引物<400>66cagtcgtaaacgtcctcagttga23<210>67<211>27<212〉腿〈213〉人工系列〈220〉〈223〉用于RT-PCR的C型凝集素引物<400〉67atccattttctttcggtgtaacatcta27<210>68<2il〉23〈212〉副A<213〉人工系列〈220><223>用于RT-PCR的C型凝集素引物<400>68catggggagtg33gg3tgtg23<210〉69〈211〉24<212>DNA<213>人工系列〈220〉<223〉用于RT-PCR的CUG三聯(lián)體重復(fù)RNA結(jié)合蛋白2引物〈400〉69catgaatgctttacagttgcagaa24<210〉70〈211〉19〈212>DNA<213>人工系列〈220〉〈223〉用于RT-PCR的CUG三聯(lián)體重復(fù)RNA結(jié)合蛋白2引物<400〉70gcgctgctcgtggtagaga19<210>71〈211〉22〈212〉DNA〈213〉人工系列〈220〉〈223〉整聯(lián)蛋白，a6(ITGA6)，MRNA<400>71gatgacagtgttccccgatacc22〈210〉72〈211〉20〈212〉DNA〈213〉人工系列<220〉<223>整聯(lián)蛋白，a6(ITGA6)，MRNA<400〉72tgtaagtcagccacgcca朋20〈210〉73〈211〉21<212>DNA<213〉人工系列<220><223>溶質(zhì)運(yùn)載蛋白家族20(磷酸鹽轉(zhuǎn)運(yùn))成員l〈400〉73aatgg3gaagctgacatggcc21<210〉74<211〉21<212〉DNA〈213〉人工系列<220〉<223〉溶質(zhì)運(yùn)載蛋白家族20(磷酸鹽轉(zhuǎn)運(yùn))成員l〈400〉74ccaaacccEicagsccaacacel21<210>—75<211>21〈212〉DNA〈213〉人工系列<220〉〈223〉核苷酸還原酶M2多肽(RRM2)MRNA〈400〉75tccaaggacattcagcactgg21<210>76<211〉19〈212〉DNA<213〉人工系列〈220〉〈223〉核苷酸還原酶M2多肽(R謂2)MRNA<400>76atcgacgcaaaagaaccggig<210〉77<211>22〈212〉DNA<213〉人工系列<220〉〈223〉卵泡抑制素轉(zhuǎn)錄變異型FST317,MRNA<400>77ggaagtccagtaccaaggcaga22<210〉78<211>19〈212〉DNA<213〉人工系列<220〉<223>卵泡抑制素轉(zhuǎn)錄變異型FST317,MRNA<400〉78tggcattgtcactggcaca<210〉79<211〉20<212>DNA〈213〉人工系列〈220〉〈223〉SPROUTY(果蠅)同源基因2<400>79gccatccgaaacaccaatga<210〉80<211〉22〈212〉DNA〈213〉人工系列〈220〉<223>SPROUTY(果蠅)同源基因2<400〉80tgccacagtcctcacacctgta(SPRY2)，MRNA20(SPRY2)，MRNA〈210〉81〈211〉21<212>腿<213〉人工系列〈220〉〈223〉RAB3B，癌基因家族成員RAS，MRNA<400〉81atgctgatgacacgttcaccc21<210〉82<211>22<212〉DNA<213〉人工系列<220>〈223〉RAB3B,癌基因家族成員RAS，MRNA<400〉82ggcctgccttacactgatgttc22〈210〉83<211〉21<212>DNA<213〉人工系列<220〉〈223〉溶質(zhì)運(yùn)載蛋白家族2(利于葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn))<400〉83gccttttcgttaaccgctttg2<210〉84〈211〉19<212〉DNA<213〉人工系列<220〉〈223〉溶質(zhì)運(yùn)載蛋白家族2(利于葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn))<400>84tcctcgttgcggttgatga丄9<210>85<211>21<212>DNA<213>人工系列〈220〉<223>白介素13受體，a2(IL13RA2)，MRNA<■〉85tg犯ggctatttg犯gtcgcc21<210〉86〈211〉19<212〉腿〈213〉人工系列〈220〉<223>白介素13受體，a2(IL13RA2),MRNA〈400〉86cttcgcttcaatgcccttg19〈210〉87<211>21<212〉DNA〈213>人工系列〈220〉〈223>絲氨酸/蘇氨酸激酶12(STK12)，MRNA<400〉87tggag3CgtgtEicttggctcg21<210〉88<211〉21〈212〉DNA〈213〉人工系列〈220〉<223〉絲氨酸/蘇氨酸激酶12(STK12),MRNA<400〉88accagccgaagtcagcaatct21<210>89<211>22〈212〉DNA<213〉人工系列<220〉〈223〉微染色體維持缺陷蛋白(啤酒酵母)5<400〉89aagtttggcctgactaccagca22〈210〉90<211>22〈213〉人工系列〈220〉〈223>微染色體維持缺陷蛋白(啤酒酵母)5〈400〉90ccagacgtgtataccccaatgg22〈210〉91<211>22<212>DNA〈213〉人工系列<220〉<223>甲狀腺激素受體中間子13(TRIP13),MRNA<400>91cctgtgtaaagcgttagcccag22〈210〉92<211〉22<212>DNA〈213〉人工系列〈220〉〈223>甲狀腺激素受體中間子13(TRIP13)，MRNA〈400〉92gtggcccaatgtactgcttgat22〈210〉93<211〉22〈212〉DNA〈213>人工系列<220〉〈223〉類驅(qū)動蛋白6(KINESIN-LIKE6)〈400>93ccagctttaacgaagccatgac22<210>94<2丄1〉22<212〉DNA<213>人工系列<220>〈223〉類驅(qū)動蛋白6(KINESIN-LIKE6)"U0>94gcatttaccagaacctgtccca22<210〉95<211〉22〈212〉腿〈213〉人工系列<220〉<223>細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶抑制物3〈400〉95tcggtttatgtgctcttccagg22〈210〉96<211>22<212>DNA<213>人工系列<220〉<223>細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶抑制物3<400>96atcctcttaggtctcgcaggct"川>〈211〉22〈212〉DNA<213〉人工系列<220>〈223〉染色體凝集蛋白G(HCAP-G)〈400〉97gctcgccagaaattcgagtcta<210〉98<211〉22〈212〉DNA〈213〉人工系列<220><223>染色體凝集蛋白G(HCAP-G),<400>98catgatcactttcagagtcggcMRNA22MRNA〈210>99〈211〉21<212〉廳d3〉人工系列<220〉<223>CDC28蛋白激酶1(CKS1)，MRNA〈400〉99gcccactacccaagaaaccaa21〈210〉100〈211〉22〈212〉DNA<213>人工系列〈220〉<223>CDC28蛋白激酶l(CKS1),MRNA<400〉100cataaatccgcaagtcaccaca22〈21U〉101〈211〉20〈212〉DNA<213>人工系列<220〉"23,胞質(zhì)分裂的蛋白須調(diào)節(jié)f_!WRCi〗，MRNA<400〉101cccaagtggaattgatgcga20<210>102〈211〉22<212〉畫<213〉人工系列〈220〉<223〉胞質(zhì)分裂的蛋白質(zhì)調(diào)節(jié)子l(PRC1)，MRNA<400>102cccctcacacactgcttcattt22〈210〉103<211〉21〈212〉DNA<213〉人工系列<220><223〉細(xì)胞分裂循環(huán)2,Gl—S—G2—M(CDC2),MRNA<400〉103c[gattttggccttgccagag21〈210〉104<211〉22<212>腿<213〉人工系列〈220〉<223>細(xì)胞分裂循環(huán)2,Gl—S—G2—M(CDC2)，M脂A<400〉104ggatgattcagtgccattttgc22〈210〉105<211〉21〈212〉DNA<213>人工系列<220><223>CDC20細(xì)胞分裂周期20，釀酒酵母，同源基因<400〉105acagttcgcgttcgagagtga21<210>106<211>21〈212〉腿〈213>人工系列〈220〉<223〉CDC20細(xì)胞分裂周期20，釀酒酵母，同源基因<400>106ttccactgagccgaaggatct21〈210〉107〈211〉22〈212〉■<213>人工系列<220><223>LIKELYORTHOLOGOFMATERNALEMBRYONICLEUCINEZIPPERKINAS<400〉107tggctctctcccagtagcattc22〈210〉108〈211〉21〈212〉DNA<213>人工系列<220〉<223〉LIKELY0RTH0LDGOFMATERNALEMBRYONICLEUCINEZIPPERKINAS<400〉108tcacttgcggtcacatcttcc21<210>109〈211〉22〈212〉畫〈213〉人工系列<220〉<223〉微染色體維持缺陷蛋白(啤酒酵母)7<400>109agag犯c3c3aggattgcccag22〈210〉110〈211〉22<212>腿<213〉人工系列<220>〈223〉微染色體維持缺陷蛋ftr啤,酵母、7<400>110atgacaggagctgagacttggc22〈210〉111<211〉22<212〉飄<213>人工系列<220>〈223〉細(xì)胞周期蛋白A2(CCNA2),MRNA<400〉111ggcactgctgctatgctgttag22〈210〉112〈211〉21<212〉DNA<213>人工系列〈220〉<223〉細(xì)胞周期蛋白A2(CCNA2)，MRNA〈400〉112tgaaggtccatgagacaaggc<210〉113〈211〉19〈212〉DNA〈213〉人工系列<220〉〈223〉胸苷激酶1，可溶性(TK1)，MRNA〈400>113ggcgcaatg3gctgcatta〈210〉114<211>22<212〉DNA〈213〉人工系列<220〉<223>胸苷激酶1,可溶性(TK1),MRNA<400〉114a犯tggcttcctctggaaggtc22<210>115<211〉21〈212〉DNA<213〉人工系列<220〉.〈223〉細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶抑制物2A(黑素瘤，p16,inhibitsCDK4)(CD認(rèn)2A),m腿〈400〉115tccccgattgaaagaaccaga21<210>116<211〉22<212〉DNA<213>人工系列<220>〈223〉細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶抑止劑2A(cyclin-dependentkinaseinhibitor2A)(黑色素瘤p16,抑止CDK4)(CDKN2A)，m脂A<400〉116aagagaagccagtaetcccccct2權(quán)利要求1.體外系統(tǒng)識別間充質(zhì)干細(xì)胞的方法，其特征在于對被檢細(xì)胞中編碼蛋白質(zhì)的間充質(zhì)干細(xì)胞標(biāo)記基因的表達(dá)進(jìn)行檢測，該間充質(zhì)干細(xì)胞標(biāo)記基因包括有以下基因中的一個(gè)或多個(gè)人骨形態(tài)生成蛋白4(BMP4)，MRNA基因(NM_001202)；人克隆24775mRNA序列基因/鉀通道結(jié)構(gòu)域12(KCTDAA402981)；基質(zhì)Gla蛋白(MGPBF668572)基因；蛋白聚糖1，分泌顆?；?PRG1AV734015)；種族同系物2(TRIB2NM_021643)基因；人動力蛋白，細(xì)胞質(zhì)的，中間體多肽1(DYNC1I1)，M(NM_004411)基因；腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(BDNFX60201)基因。2.根據(jù)權(quán)利要求1記載的間充質(zhì)干細(xì)胞的識別方法，其特征是，采用探針對間充質(zhì)干細(xì)胞標(biāo)記基因的表達(dá)進(jìn)行檢測，該探針具有的DNA序列能與基因數(shù)據(jù)庫登錄號為NM—001202，AA402981，BF668572,AV734015,NM—021643，NM—004411或X60201所示的堿基序列的間充質(zhì)干細(xì)胞基因雜交。3.根據(jù)權(quán)利要求1記載的間充質(zhì)干細(xì)胞的識別方法，其特征是采用具有基因數(shù)據(jù)庫登錄號為NM—001202，AA402981，BF668572,AV734015，NM—021643,NM—004411或X60201所示堿基序列的基因的微陣列或DNA芯片對間充質(zhì)干細(xì)胞標(biāo)記基因的表達(dá)進(jìn)行檢測。4.根據(jù)權(quán)利要求1記載的識別間充質(zhì)干細(xì)胞的方法，其特征是，對間充質(zhì)干細(xì)胞標(biāo)記基因表達(dá)的檢測包括定量或半定量PCR的使用。5.根據(jù)權(quán)利要求4記載的識別間充質(zhì)干細(xì)胞的方法，其特征是其使用的定量的或半定量的PCR是RT-PCR法或?qū)崟r(shí)PCR法。6.—種體外系統(tǒng)識別分離間充質(zhì)千細(xì)胞的方法，特征在于，通過使用檢測間充質(zhì)干細(xì)胞基因標(biāo)記的探針對用于檢測間充質(zhì)干細(xì)胞的標(biāo)記基因和/或標(biāo)記多肽的表達(dá)進(jìn)行檢測、對識別出的間充質(zhì)干細(xì)胞進(jìn)行分離；該探針具有的DNA系列能與基因數(shù)據(jù)庫登錄號為NM—001202，AA402981,BF668572,AV734015,NM_021643，NM—004411或者X60201所示堿基序列的間充質(zhì)干細(xì)胞標(biāo)記基因雜交。全文摘要本發(fā)明提供一種用于檢測、分離識別間充質(zhì)干細(xì)胞的標(biāo)記以及采用該標(biāo)記檢測、分離識別間充質(zhì)干細(xì)胞的方法。序列表所示基因在間充質(zhì)干細(xì)胞中特異表達(dá)。該基因構(gòu)成作為檢測間充質(zhì)干細(xì)胞的標(biāo)記。尤其是，本發(fā)明含有用于檢測該間充質(zhì)干細(xì)胞標(biāo)記基因的探針，以及在檢測該間充質(zhì)干細(xì)胞基因標(biāo)記時(shí)擴(kuò)增被檢細(xì)胞所述基因的PCR所使用的引物，還含有本發(fā)明的間充質(zhì)干細(xì)胞標(biāo)記基因表達(dá)的多肽構(gòu)成的用于檢測間充質(zhì)干細(xì)胞的多肽標(biāo)記、用于檢測該多肽標(biāo)記的與該多肽標(biāo)記特異結(jié)合的抗體，尤其是含有一種采用用于檢測間充質(zhì)干細(xì)胞標(biāo)記基因的探針、與多肽標(biāo)記特異結(jié)合的抗體對間充質(zhì)干細(xì)胞進(jìn)行識別、分離的方法。文檔編號C07K14/47GK101265503SQ20081008130公開日2008年9月17日申請日期2004年2月27日優(yōu)先權(quán)日2003年3月10日發(fā)明者加藤幸夫,小池千加,辻纮一郎申請人:獨(dú)立行政法人科學(xué)技術(shù)振興機(jī)構(gòu);加藤幸夫;智再如股份有限公司