專利名稱：：一種海藻倍半萜類化合物及其制備方法和應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及拒食殺蟲劑領(lǐng)域，具體地說是一種海藻倍半萜類化合物及其制備方法和應(yīng)用。
背景技術(shù)：
：拒食殺蟲劑是一種間接殺蟲劑，是指能使昆蟲接觸后喪失伺食能力，直至餓死，而非直接將其毒殺的化合物。近年來，由于人們對環(huán)境質(zhì)量的要求越來越高，而且一些常用殺蟲劑因殘留問題而出現(xiàn)副作用，以及不斷產(chǎn)生的昆蟲抗藥性等等，環(huán)境友好的殺蟲劑越來越受到人們的重視，其中，植物源昆蟲拒食殺蟲劑具有高效、低毒和易降解等優(yōu)點，其研究與開發(fā)尤其引人注目，顯示出良好的生態(tài)效益、經(jīng)濟效益和社會效益，展現(xiàn)出廣闊的發(fā)展前景。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的是提供一種天然的海藻倍半萜類化合物及其制備方法和應(yīng)用。為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明釆用的技術(shù)方案為-.海藻倍半萜類化合物結(jié)構(gòu)式如(I)所示，分子式為C15H21Br2C10(I)海藻倍半薛類化合物的制備方法包括如下步驟1)將海洋紅藻岡村凹頂藻aaure/7ciaoiraMirai)沖洗、陰干、粉碎60-80目，然后用有機溶液提取2-5次，合并提取液進行濃縮，得到粗提物；2)取步驟1)中的粗提物進行硅膠柱層析，用有機溶劑進行梯度洗脫,收集洗脫液，洗脫液經(jīng)薄層層析檢測；所述機溶劑為100:0-0:100梯度的石油醚-丙酮或石油醚-乙酸乙酯；3)將步驟2)中20-30:1梯度下的洗脫組分進行硅膠柱層析和薄層層析分離純化得目標化合物I。3.按權(quán)利要求2所述的海藻倍半萜類化合物的制備方法，其特征在于:所述步驟3)中硅膠柱層析時用梯度在100:0到50:1的石油醚-乙酸乙酯或石油醚-丙酮進行洗脫，收集梯度為50:l的組分，再經(jīng)薄層層析收集Rf值為0.6-0.7的化合物即為純化后的目標化合物I。步驟l)中的有機溶液提取液可為氯仿、丙酮、乙酸乙酯或甲醇中一種或幾種。所述步驟2)經(jīng)薄層層析檢測時展開劑為體積比15-30:1的石油醚-乙酸乙酯或石油醚-丙酮；步驟3)薄層層析分離純化時展開劑為20-30:1的石油醚-乙酸乙酯或石油醚-丙酮。海藻倍半萜類化合物的應(yīng)用所述化合物可作為植物拒食殺蟲劑。本發(fā)明具有以下優(yōu)點本發(fā)明涉及的化合物屬于小分子天然有機化合物，容易制備獲得；具有顯著的拒食殺蟲活性，可作為一種新型植物拒食殺蟲劑。本發(fā)明涉及的海洋紅藻岡村凹頂藻aaure刀ciaoh咖raiYamada)屬于紅藻門、松節(jié)藻科、凹頂藻屬海藻，主要分布于中國、日本和朝鮮半島等太平洋西部沿海地區(qū)，一般生長在潮間帶的巖石上。本發(fā)明通過海洋紅藻岡村凹頂藻經(jīng)提取、分離獲得的倍半萜類天然化合物，經(jīng)實驗表明，此化合物具有顯著的拒食殺蟲活性，可作為一種新型植物拒食殺蟲劑。其操作簡便、重現(xiàn)性好等特點。具體實施例方式下面結(jié)合實施實例對本發(fā)明做進一步闡述。實施例1倍半萜類化合物的制備方法釆集新鮮的岡村凹頂藻經(jīng)海水清洗，除去表面附著的沙礫及雜藻，陰涼處涼干備用。取涼干后的樣品60克，粉碎60目后用300亳升氯仿洄流提取三次，每次三小時，合并氯仿提取液，在溫度40。C左右減壓濃縮、回收氯仿，獲得氯仿粗提物。將粗提物(0.8克)進行硅膠柱(200-300目)層析，用石油醚-丙酮以100:0、50:1、20:1、10:1,5:1至ij0:100的梯度進行洗脫，分別收集洗脫液，再用薄層層析(TLC)檢測，根據(jù)Rf值來判斷、合并相同或類似部分，獲得八個組分(i-vni)，其中薄層層析(TLC)檢測時用茴香醛-硫酸作為顯色劑，展開劑為體積比為20:1的石油醚-乙酸乙酯。將組分1(0.2克)Rf=0.5-0.9，即以石油醚-丙酮20:1梯度洗脫下的組分再進行硅膠柱和薄層層析分離，硅膠柱層析時用梯度在100:0到50:1的石油醚-乙酸乙酯進行洗脫，收集50:1的石油醚-乙酸乙酯洗脫下的組分，薄層層析用30:1的石油醚-乙酸乙酯為展開劑，Rf=0.6-0.7即為純化后的化合物I(12.8亳克)，經(jīng)TLC檢測，呈單個、均勻粉紅色斑點，確定為純化合物。經(jīng)波譜分析，其結(jié)構(gòu)鑒定為2，10-二溴-3-氯-7oc,8-環(huán)氧-9-恰米烯，英文名2，10-dibromo-3-chloro-7ct，8a-epoxy-9-chamigrene,英文俗名deoxyprepacifenol,結(jié)構(gòu)式如(I)所示。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage4</formula>(I)該化合物具有以下理化和波譜特性無色晶體，核磁共振氫譜NMR,CDC13，500MHz)51.17(3H，s,H-13),1.19(3H，s，H-12)，1.62(3H，s，H-14),1.68(3H，s,H-15)，1.33(1H，m，H-5),1.75(1H，m，H-5)，2.14(1H,m，H-l),2.42(1H，m，H-1)，2.21(1H，m，H-4)，2.28(1H,m,H-4)，2.93(1H,d，J=2.9，H-8)，4.67(1H，dd,/=13.0，4.5,H—2),6,23(1H,d,J=2.9,H-9);核磁共振碳譜("C麗R，CDCh，125MHz)539.0(t，C-1)，63.1(d，C-2)，71.1(s，C-3),39.5(t,C-4),25.8(t,C-5)，49.1(s，C-6)，58.2(s,C-7)，56.2(d,C-8)，124.1(d，C-9),143.6(s，C-10),45.8(s，C-ll),24.3(q,C-12)，24.7(q，C-13),23.5(q，C-14),23.8(q，C-15)。實施例2與實施例l不同之處釆集新鮮的岡村凹頂藻經(jīng)海水清洗，除去表面附著的沙礫及雜藻，陰涼處涼干備用。取涼干后的樣品，粉碎80目后用丙酮洄流提取二次，每次三小時，合并丙酮提取液，在溫度40°C左右減壓濃縮、回收丙酮，獲得丙酮粗提物。將粗提物進行硅膠柱(200-300目)層析，用石油醚-乙酸乙酯以100:0、50:1、20:1、10:1，5:1到0:100的梯度進行洗脫，分別收集洗脫液，再用薄層層析(TLC)檢測(薄層層析(TLC)檢測時用茴香醛-硫酸作為顯色劑)，根據(jù)Rf值來判斷、合并相同或類似部分，獲得八個組分(I-VIII)。將組分I(Rf=0.5-0.9，石油醚-丙酮15:1展開)，即以石油醚-乙酸乙酯30:1梯度洗脫下的組分再進行硅膠柱和薄層層析分離，硅膠柱層析時用梯度在100:0到50:1的石油醚-丙酮進行洗脫，收集50:1的石油醚-丙酮洗脫下的組分，薄層層析用20:1的石油醚-丙酮為展開劑，得化合物I,經(jīng)TLC檢測為單個、均勻的粉紅色斑點，確定為純化合物，結(jié)構(gòu)式如(I)所示。實施例3與實施例l不同之處在于粉碎后的新鮮的岡村凹頂藻釆用體積比為3-5:1乙酸乙酯和甲醇的混合液進行提取。實施例4與實施例l不同之處在于粉碎后的新鮮的岡村凹頂藻釆用體積比為1:1:l或2:1:2丙酮、氯仿和乙酸乙酯的混合液進行提取。實施例5拒食殺蟲活性實驗Spodopkra""orah's(灰翅夜蛾)是一種破壞力極大的植物害蟲，對44科112種植物具有嚴重侵害作用，而且具有繁殖力強、生長周期短等特點。釆用控制條件下實驗室培育的該昆蟲，借其來評價化合物拒食殺蟲活性的強弱.具體為取Spoc叩"rah'"ora2i's—日齡幼蟲10只，以含有一定濃度(O.5%-2的拒食殺蟲劑(本發(fā)明倍半路類化合物2,10-二溴-3-氯-7oc，8『環(huán)氧-9-恰米烯)的傅料進行喂食，6天后計數(shù)存活的幼蟲的數(shù)量和重量，并計算存活率和生長率，以不含拒食殺蟲劑的餌料作為空白對照，以此來評價該測試化合物的拒食殺蟲活性。實驗結(jié)果.i見l1,數(shù)據(jù)表明上述獲得的倍半萜類化合物具有顯著的抑制Sixxfopterah'tZ:oraiis幼蟲的生長和殺蟲活性。表1<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>權(quán)利要求1.一種海藻倍半萜類化合物，其特征在于結(jié)構(gòu)式如(I)所示全文摘要本發(fā)明涉及拒食殺蟲劑領(lǐng)域，具體地說是一種海藻倍半萜類化合物及其制備方法和應(yīng)用。具體結(jié)構(gòu)式如(I)所示，其制備方法為將海洋紅藻岡村凹頂藻沖洗、陰干、粉碎，然后用有機溶液提取2-5次，合并提取液進行濃縮，得到粗提物；粗提物進行硅膠柱層析，用有機溶劑進行梯度洗脫，收集洗脫液，洗脫液經(jīng)薄層層析檢測；將以洗脫液體積比20-30∶1梯度，洗脫下的組分進行硅膠柱層析和薄層層析分離純化得目標化合物I。本發(fā)明所得倍半萜類化合物具有顯著的拒食、殺蟲活性，可進一步利用岡村凹頂藻作為無公害海洋生物源農(nóng)藥，其操作簡便、重現(xiàn)性好等特點。文檔編號C07D303/08GK101225078SQ20081001402公開日2008年7月23日申請日期2008年1月18日優(yōu)先權(quán)日2008年1月18日發(fā)明者季乃云,李曉明,王斌貴申請人:中國科學(xué)院海洋研究所