專利名稱：一種制備河豚毒素水提液的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及由動物材料提取物質(zhì)，特別涉及由河豚魚內(nèi)臟制備河豚毒素水提液的方法。
背景技術(shù)：
河豚毒素是從有毒河豚內(nèi)臟中提取的高毒性生物堿，能專一性阻斷神經(jīng)細胞膜Na+通道，對鎮(zhèn)痛、戒毒具有高效，河豚毒素在河豚內(nèi)臟中含量低微，國內(nèi)外文獻報道，每100公斤河豚內(nèi)臟僅能提取河豚毒素精品1克左右，河豚毒素的產(chǎn)量微少，嚴重制約了其新藥的臨床應用。河豚毒素水提液的制備是生產(chǎn)河豚毒素的重要環(huán)節(jié)，公知的河豚毒素水提液生產(chǎn)，采用將河豚魚卵巢或/和肝臟粉碎，低溫連續(xù)攪拌，造成了河豚毒素在生產(chǎn)過程中的流失，影響了河豚毒素的析出率，且工藝復雜，造成了大量人力、財力的浪費。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明提供一種制備河豚毒素水提液的方法，每100公斤河豚魚卵巢或/和肝臟，可提取河豚毒素粗品5～6克，精品3～4克，極大地提高了河豚毒素的析出率，其得率達國內(nèi)外文獻中介紹的河豚毒素得率的3-4倍，且工藝簡單，節(jié)約了生產(chǎn)成本。
本發(fā)明是通過如下技術(shù)方案來實現(xiàn)的，一種制備河豚毒素水提液的方法，包括下列步驟
a、速冷凍河豚魚卵巢或/和肝臟，在不解凍的條件下切削成片狀小塊；b、加數(shù)倍純水或去離子水浸泡，在25～32℃的條件下靜置發(fā)酵，每間隔數(shù)小時輕輕攪拌一次，靜置發(fā)酵30～40小時；c、清除塊料和卵巢包皮，對浸泡發(fā)酵液猛火加熱，保持沸騰至蛋白凝固后速冷，10分鐘內(nèi)冷卻至40～50℃；d、對料漿進行粗濾、精濾，得河豚毒素水提液；e、再對上述處理過的河豚魚卵巢或/和肝臟渣依照上述步驟進行二次提取河豚毒素水提液。
所述的純水或去離子水的重量以4倍于河豚魚卵巢或/和肝臟的重量為宜。
所述的靜置發(fā)酵時間以36小時為宜，且每間隔6小時輕輕攪拌一次，攪拌持續(xù)3分鐘為宜。
本發(fā)明對河豚魚卵巢或/和肝臟不進行粉碎，而是切塊浸泡，可避免將河豚魚內(nèi)肝碎成粉末，減少河豚毒素的流失；對料液不進行低溫控制，給予一定的時間和溫度讓其發(fā)酵，使河豚魚卵細胞膜內(nèi)的河豚毒素全部析出；在加熱過程中實行猛火加熱，快速冷卻，可避免河豚毒素在長時間的高溫下造成流失，同時有利于蛋白的凝固。以此方法來制備河豚毒素水提液，來提高河豚毒素的得率，降低生產(chǎn)成本。
具體實施例方式
下面以100公斤河豚卵制備河豚毒素水提液為例，本發(fā)明一種制備河豚毒素水提液的方法，主要包括下列步驟1、首先將河豚魚卵速冷，在不解凍的條件下切削成片狀小塊；2、加400KG的去離子水浸泡，在28℃的條件下靜置發(fā)酵，每隔6小時輕輕攪拌一次，攪拌時間持續(xù)3分鐘，靜置發(fā)酵36小時，此時，水質(zhì)發(fā)白，片狀卵塊浮出水面。
3、清除卵塊和卵巢包皮，料液中留少量卵籽，對料液猛火加熱，持續(xù)沸騰3分鐘，10分鐘內(nèi)快速冷卻至40～50℃；4、沸騰冷卻后的料液呈蛋花狀，對料液進行粗濾、精濾，得到河豚毒素水提液，冷芷備用，可進入河豚毒素生產(chǎn)下道工序；5、二次提取，上述處理過程中得到的河豚卵渣仍含有河豚毒素，將渣物放入料桶，按1∶3的比例加入去離子水，依照上述步驟再進行操作，經(jīng)二次提取后的渣物基本沒有提取的價值，可漚制成肥料。
權(quán)利要求
1.一種制備河豚毒素水提液的方法，其特征在于包括下列步驟a、速冷凍河豚魚卵巢或/和肝臟，在不解凍的條件下切削成片狀小塊；b、加數(shù)倍純水或去離子水浸泡，在25～32℃的條件下靜置發(fā)酵，每間隔數(shù)小時輕輕攪拌一次，靜置發(fā)酵30～40小時；c、清除塊料和卵巢包皮，對浸泡發(fā)酵液猛火加熱，保持沸騰至蛋白凝固后速冷，10分鐘內(nèi)冷卻至40～50℃；d、對料漿進行粗濾、精濾，得河豚毒素水提液；e、再對上述處理過的河豚魚卵巢或/和肝臟渣依照上述步驟進行二次提取河豚毒素水提液。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種制備河豚毒素水提液的方法，其特征在于所述的純水或去離子水的重量以4倍于河豚魚卵巢或/和肝臟的重量為宜。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的一種制備河豚毒素水提液的方法，其特征在于所述的靜置發(fā)酵時間以36小時為宜，且每間隔6小時輕輕攪拌一次，攪拌持續(xù)3分鐘為宜。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種制備河豚毒素水提液的方法，涉及由動物材料提取河豚毒素的生產(chǎn)方法，提高河豚毒素提取得率的技術(shù)問題，相應采用的技術(shù)方案是將河豚魚內(nèi)臟速冷、切削成片狀小塊，加去離子水浸泡，靜置發(fā)酵，猛火加熱，快速冷卻，再進行粗濾、精濾，得河豚毒素水提液。本發(fā)明能夠提高河豚毒素生產(chǎn)的得率，降低生產(chǎn)成本。
文檔編號C07D491/22GK1651435SQ20041006538
公開日2005年8月10日 申請日期2004年11月27日 優(yōu)先權(quán)日2004年11月27日
發(fā)明者趙繼紅 申請人:趙繼紅