專利名稱：一種3-正丁苯酞對(duì)映體的拆分方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及光學(xué)活性3-正丁苯酞的生產(chǎn)，具體地說(shuō)是一種3-正丁苯酞對(duì)映體的拆分方法。
背景技術(shù)：
3-正丁苯酞是我國(guó)自行研制的具有自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的國(guó)家一類新藥，藥效學(xué)研究表明有良好的抗腦缺血活性，能夠提高缺血腦內(nèi)ATP和PCr水平。最近研究表明，該藥的兩個(gè)異構(gòu)體對(duì)腦卒中的治療作用有顯著差異。由于還沒(méi)有找到合適的不對(duì)稱合成和手性拆分制備光學(xué)活性3-正丁苯酞的方法，目前該藥暫時(shí)以消旋體的方式上市。已有報(bào)道，Comparison of DifferentDi-tert-butyldimethyl-Silylated Cyclodextrins as Chiral Stationary Phases inCapillary Gas Chromatography(T.Beck，J-M.Liepe，J.Nandzik et al；J.HighResol.Chromatogr.；2000，23(10)，569575)以環(huán)糊精衍生物為手性固定相，用毛細(xì)管氣相色譜法直接拆分3-正丁苯酞對(duì)映體，方法適用范圍窄，分析測(cè)定過(guò)程需在150℃條件下進(jìn)行，容易使對(duì)映體構(gòu)型改變，且不適用于制備分離。楊靖華，張迎新，馮亦璞，制備光學(xué)活性3-正丁苯酞的方法(專利申請(qǐng)?zhí)?9109673.8)，以光學(xué)純手性胺作為拆分試劑，用化學(xué)拆分法間接拆分3-正丁苯酞對(duì)映體；具體過(guò)程為先將消旋正丁苯酞在堿性條件下開(kāi)環(huán)，然后酸化，分離后與光學(xué)活性胺形成非對(duì)映異構(gòu)體鹽混合物，然后將上述非對(duì)映異構(gòu)體鹽混合物采用結(jié)晶法分別制備單一對(duì)映體的光學(xué)活性胺鹽，再將上述胺鹽解離，重新環(huán)合便得到光學(xué)活性的正丁苯酞，收率為45.4％-53.3％，旋光純度≤95％；其不足之處在于拆分過(guò)程繁瑣費(fèi)時(shí)，產(chǎn)率不高，且得到的光學(xué)活性產(chǎn)物的光學(xué)純度也不能令人滿意。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一個(gè)快速、操作簡(jiǎn)便、適于規(guī)?；a(chǎn)的3-正丁苯酞對(duì)映體的拆分方法。
為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案為以多糖化合物的苯基氨基甲酸酯類衍生物或苯甲酸酯類衍生物為手性固定相，采用液相色譜方法直接拆分3-正丁苯酞對(duì)映體。
所述多糖化合物的苯甲酸酯類衍生物是通過(guò)多糖化合物與苯甲酰氯及苯環(huán)上有取代的苯甲酰氯反應(yīng)制得；多糖化合物的苯基氨基甲酸酯類衍生物是通過(guò)多糖化合物與苯基異氰酸酯及苯環(huán)上有取代的苯基異氰酸酯反應(yīng)制得；所述多糖化合物為纖維素，直鏈淀粉，支鏈淀粉，殼聚糖，木聚糖或葡聚糖，其分子量范圍為2000～100,000；所述苯環(huán)上有取代的苯甲酰氯為4-甲基苯甲酰氯，所述苯環(huán)上有取代的苯基異氰酸酯為3，5-二甲基苯異氰酸酯，3，5-二氯苯異氰酸酯，4-甲基苯異氰酸酯。
所述多糖化合物與異氰酸酯(或酰氯)的反應(yīng)條件如下多糖化合物與異氰酸酯(或酰氯)的摩爾比＜1，所用反應(yīng)溶劑為吡啶、甲苯、四氫呋喃或氯仿等，反應(yīng)溫度70～140℃，回流8～48h；冷卻，慢慢加入甲醇，固體析出后過(guò)濾，甲醇或乙醇洗滌，真空干燥，得白色固體產(chǎn)物。
所述固定相是以球形硅膠為基質(zhì)，多糖衍生物涂敷或鍵合于球形硅膠的表面；所用的手性填料擔(dān)體，即球形硅膠粒度3～50μm，孔徑50～500nm，按常規(guī)方法制備氨丙基硅膠或烯丙基硅膠；本發(fā)明所述的手性柱為涂敷型和鍵合型。
涂敷型手性柱的制備過(guò)程如下先使纖維素或淀粉與苯甲酰氯及苯環(huán)上有取代的苯甲酰氯反應(yīng)制得纖維素或淀粉的苯甲酸酯類衍生物，纖維素或淀粉與苯基異氰酸酯及苯環(huán)上有取代的苯基異氰酸酯反應(yīng)制得纖維素或淀粉的苯基氨基甲酸酯類衍生物[衍生物具體為纖維素-三(4-甲基苯基甲酸酯)，纖維素-三(苯基甲酸酯)，纖維素-三(3，5-二甲基苯基氨基甲酸酯)，纖維素-三(4-甲基苯基氨基甲酸酯)，纖維素-三(苯基氨基甲酸酯)，纖維素-三(3，5-二氯苯基氨基甲酸酯)，淀粉-三(苯基甲酸酯)，淀粉-三(3，5-二甲基苯基氨基甲酸酯)，淀粉-三(苯基氨基甲酸酯)和淀粉-三(3，5-二氯苯基氨基甲酸酯)等]；然后將上述纖維素和淀粉的衍生物溶于四氫呋喃中，再慢慢加入氨丙基硅膠中，攪拌蒸發(fā)至四氫呋喃揮發(fā)至干，涂敷量是20％(質(zhì)量比)，制得的固定相真空干燥；濕法裝柱。
鍵合型固定相的制備通過(guò)以下兩種方案實(shí)現(xiàn)，第一種方案是以二異氰酸酯(如4，4′-二苯基二異氰酸酯，1，6-己二異氰酸酯等)作交聯(lián)劑將氨丙基硅膠上的氨基與纖維素或淀粉上的羥基連接起來(lái)，再將其余羥基衍生為苯甲酸酯類衍生物或苯基氨基甲酸酯類衍生物；第二種方案為將纖維素或淀粉上的一少部分羥基衍生為含烯基的酯，其余的衍生為苯基氨基甲酸酯類衍生物或苯甲酸酯類衍生物，然后在偶氮異丁腈引發(fā)劑作用下與烯丙基硅膠共聚，便制得鍵合型固定相；濕法裝柱，采用乙醇作勻漿液和頂替液。
本發(fā)明所述的液相色譜分離在普通的高效液相色譜儀上進(jìn)行，拆分過(guò)程以C1～C6的低碳醇和正己烷的混合溶液為洗脫液，體積比為1∶99～30∶70；流速為0.1～20mL/min(最好為0.1～2mL/min)。
本發(fā)明具有如下優(yōu)點(diǎn)1.快速，操作簡(jiǎn)便。本發(fā)明20分鐘內(nèi)可完成3-正丁苯酞對(duì)映體拆分。
2.拆分效果好，得到的光學(xué)活性產(chǎn)物的產(chǎn)率高，光學(xué)純度高；最高分離因子可達(dá)α＝2.21。
3.固定相柱容量高。4mg樣品一次通過(guò)一支150×4.6mmi.d淀粉衍生物分析柱就得到了100％光學(xué)純的單一對(duì)映體各2mg。
4.固定相性能穩(wěn)定，使用壽命長(zhǎng)，重復(fù)性好，使用3個(gè)多月固定相的拆分能力未發(fā)生明顯改變。
5.適用范圍廣泛。本發(fā)明首次以纖維素或淀粉的苯甲酸酯類衍生物、苯基氨基甲酸酯類衍生物為手性固定相，在常溫下采用液相色譜方法直接拆分3-正丁苯酞對(duì)映體，不會(huì)使對(duì)映體構(gòu)型改變或破壞生物活性，測(cè)定結(jié)果可靠，不僅適用于臨床研究和藥物生產(chǎn)中對(duì)映體的分析測(cè)定，也可用于光學(xué)純對(duì)映體的制備分離；所篩選出的手性填料和建立的分離條件還可應(yīng)用于噸級(jí)手性藥物的制備工藝-模擬移動(dòng)床色譜法拆分制備3-正丁苯酞對(duì)映體。


圖1為3-正丁苯酞對(duì)映體在淀粉的苯基氨基甲酸酯衍生物手性固定相上的拆分圖。色譜柱150×4.6mmI.D，正己烷/乙醇作流動(dòng)相，流速為0.5mL/min。
圖2為4mg 3-正丁苯酞對(duì)映體在淀粉的苯基氨基甲酸酯衍生物手性固定相上的拆分圖。色譜柱150×4.6mmI.D，正己烷/乙醇作流動(dòng)相，流速為0.5mL/min。
具體實(shí)施例方式
實(shí)施例11)手性固定相的制備①按常規(guī)方法制備γ-氨丙基硅膠；②合成纖維素-三(3，5-二甲基苯基氨基甲酸酯)衍生物取干燥纖維素1.0g于三頸瓶中，加入50mL干燥吡啶，加熱回流24h，然后加入5mL 3，5-二甲基異氰酸苯酯，電磁攪拌回流24；冷卻，慢慢加入大量甲醇，便有固體析出，過(guò)濾，固體產(chǎn)物用甲醇洗滌，真空干燥，最后的產(chǎn)物為白色固體；產(chǎn)率85％；③取0.5g纖維素-三(3，5-二甲基苯基氨基甲酸酯)衍生物溶于25ml四氫呋喃中，將上述溶液加入2.0g氨丙基硅膠中，攪拌蒸發(fā)至四氫呋喃揮發(fā)至干，最終得到涂敷量為20％(質(zhì)量分?jǐn)?shù))的纖維素-三(3，5-二甲基苯基氨基甲酸酯)手性固定相；2)手性柱的裝填取2.0g纖維素-三(3，5-二甲基苯基氨基甲酸酯)手性固定相，懸浮于80∶20正己烷-異丙醇(體積比)中勻漿，90∶10正己烷-異丙醇作頂替液，濕法裝柱(150×4.6mmi.d.)；3)消旋3-正丁苯酞對(duì)映體的拆分以98∶2正己烷/異丙醇作流動(dòng)相，流速為0.5mL/min，檢測(cè)波長(zhǎng)254nm；色譜分離在室溫下進(jìn)行，13分鐘內(nèi)完成3-正丁苯酞對(duì)映體的拆分；分離結(jié)果如下先洗脫對(duì)映體的保留時(shí)間t1＝11.07，后洗脫對(duì)映體的保留時(shí)間t2＝12.27，分離因子α＝1.15，分離度RS＝1.30。
實(shí)施例21)手性固定相的制備①按常規(guī)方法制備γ-氨丙基硅膠；②合成淀粉(直鏈淀粉或支鏈淀粉)苯基氨基甲酸酯衍生物取干燥淀粉1.0g于三頸瓶中，加入50mL干燥吡啶，加熱回流24h，然后加入5mL苯基異氰酸酯，電磁攪拌回流24；冷卻，慢慢加入大量甲醇，便有固體析出，過(guò)濾，固體產(chǎn)物用甲醇洗滌，真空干燥，最后的產(chǎn)物為白色固體；產(chǎn)率85％。
③取0.5g淀粉苯基氨基甲酸酯衍生物溶于25ml氯仿中，將上述溶液加入2.0g氨丙基硅膠中，攪拌蒸發(fā)至四氫呋喃揮發(fā)至干，最終得到涂敷量為20％(質(zhì)量分?jǐn)?shù))的淀粉苯基氨基甲酸酯手性固定相；2)手性柱的裝填取2.0g淀粉苯基氨基甲酸酯手性固定相，懸浮于50∶50正己烷-二氧六環(huán)(體積比)中勻漿，70∶30正己烷-異丙醇作頂替液，濕法裝柱(150×4.6mmi.d.)；3)消旋3-正丁苯酞對(duì)映體的拆分以98∶2正己烷/乙醇作流動(dòng)相，流速為0.5mL/min，檢測(cè)波長(zhǎng)254nm；色譜分離在室溫下進(jìn)行，20分鐘內(nèi)完成3-正丁苯酞對(duì)映體的拆分；分離結(jié)果如下先洗脫對(duì)映體的保留時(shí)間t1＝10.26，后洗脫對(duì)映體的保留時(shí)間t2＝18.83，分離因子α＝2.21，分離度RS＝5.80；4mg3-正丁苯酞消旋體一次通過(guò)該分析色譜柱就得到了100％光學(xué)純的單一對(duì)映體各2mg。
權(quán)利要求
1.一種3-正丁苯酞對(duì)映體的拆分方法，其特征在于以多糖化合物的苯基氨基甲酸酯類衍生物或苯甲酸酯類衍生物為手性固定相，采用液相色譜方法直接拆分3-正丁苯酞對(duì)映體。
2.按照權(quán)利要求1所述的拆分方法，其特征在于所述多糖化合物的苯甲酸酯類衍生物是通過(guò)多糖化合物與苯甲酰氯及苯環(huán)上有取代的苯甲酰氯反應(yīng)制得；多糖化合物的苯基氨基甲酸酯類衍生物是通過(guò)多糖化合物與苯基異氰酸酯及苯環(huán)上有取代的苯基異氰酸酯反應(yīng)制得。
3.按照權(quán)利要求2所述的拆分方法，其特征在于所述多糖化合物為纖維素，直鏈淀粉，支鏈淀粉，殼聚糖，木聚糖或葡聚糖，其分子量范圍為2000～100,000。
4.按照權(quán)利要求2所述的拆分方法，其特征在于所述苯環(huán)上有取代的苯甲酰氯為4-甲基苯甲酰氯，所述苯環(huán)上有取代的苯基異氰酸酯為3，5-二甲基苯異氰酸酯，3，5-二氯苯異氰酸酯，4-甲基苯異氰酸酯。
5.按照權(quán)利要求2所述的拆分方法，其特征在于所述多糖化合物與異氰酸酯或酰氯的反應(yīng)條件如下多糖化合物與異氰酸酯或酰氯的摩爾比＜1，所用反應(yīng)溶劑為吡啶、甲苯、四氫呋喃或氯仿，反應(yīng)溫度70～140℃，回流8～48h；冷卻，慢慢加入甲醇，固體析出后過(guò)濾，用甲醇或乙醇洗滌，真空干燥，得白色固體產(chǎn)物。
6.按照權(quán)利要求1所述的拆分方法，其特征在于所述固定相是以球形硅膠為基質(zhì)，多糖衍生物涂敷或鍵合于球形硅膠的表面。
7.按照權(quán)利要求1所述的拆分方法，其特征在于所述球形硅膠粒度3～50μm，孔徑50～500nm。
8.按照權(quán)利要求1所述的拆分方法，其特征在于拆分過(guò)程以C1～C6的低碳醇和正己烷的混合溶液為流動(dòng)相，流速為0.1～20mL/min。
9.按照權(quán)利要求8所述的拆分方法，其特征在于所述C1～C6的低碳醇和正己烷的體積比為1∶99～30∶70。
全文摘要
本發(fā)明涉及3－正丁苯酞的生產(chǎn)，具體地說(shuō)是一種3－正丁苯酞對(duì)映體的拆分方法，以多糖化合物的苯基氨基甲酸酯類衍生物或苯甲酸酯類衍生物為手性固定相，采用液相色譜方法直接拆分3－正丁苯酞對(duì)映體。拆分過(guò)程快速，操作簡(jiǎn)便，拆分效果好，固定相柱容量高、性能穩(wěn)定、使用壽命長(zhǎng)，不僅適用于臨床研究和藥物生產(chǎn)中對(duì)映體的分析測(cè)定，也可用于光學(xué)純對(duì)映體的制備。采用本發(fā)明得到的光學(xué)活性產(chǎn)物的產(chǎn)率高，光學(xué)純度高。
文檔編號(hào)C07D307/88GK1539835SQ0311154
公開(kāi)日2004年10月27日 申請(qǐng)日期2003年4月25日 優(yōu)先權(quán)日2003年4月25日
發(fā)明者鄒漢法, 劉月啟, 陳小明, 孔亮 申請(qǐng)人:中國(guó)科學(xué)院大連化學(xué)物理研究所