專利名稱：一種茶多酚中兒茶素類化合物的分離方法
技術領域：
本發(fā)明中茶多酚中兒茶素類化合物的分離方法涉及的單離物是指從茶多酚中分離出兒茶素酯類的單組份化合物，如表沒食子兒茶素沒食子酸酯(EGCG)，表兒茶素沒食子酸酯(ECG)等。
茶葉提取物茶多酚具有廣泛的藥用及日用等眾多功能，有人預言茶多酚將是21世紀對人類健康產生巨大效果的化合物。而茶多酚單離物更具有潛在的廣闊應用前景和重大經濟價值。
人們對茶葉分離提取茶多酚的研究較多，而更進一步分離茶多酚中兒茶素類化合物的研究正處于起步階段。目前對茶多酚中兒茶素類化合物的分離采用的方法有超臨界萃取法(中國茶葉1997,6,18-19)，該法純度較高，但工藝復雜，分離組份單一，操作不便，成本高。而高效液相制備色譜法和高效逆流色譜法(茶業(yè)通報1997,19(4):34-36)制備的茶多酚單離物純度高，回收效果較好，但存在投資成本高，難擴大規(guī)模等缺點。柱層析分離法(茶葉通報1997,19(4),34-36)是一種能大規(guī)模分離的方法，因此得到普遍重視，目前多以乙醇或丙酮的水溶液做為洗脫劑，其缺點為濃縮干燥較困難。
本發(fā)明的目的在于針對現(xiàn)有技術難點和不足，研究并公開一種有效分離方法，進行較大規(guī)模的茶多酚中兒茶素類化合物的分離方法，即采用柱層析分離法分離茶多酚中兒茶素類化合物。
本發(fā)明所采用的技術方案如下所用的茶多酚是按專利公開號CN1194966A高純茶多酚提取新工藝的方法制備。
柱管采用內徑為Φ20毫米的玻璃管，柱管長1500毫米，分離后的單離物離開柱固定相填料后的柱管滯留空間盡可能少。流動相流動過程采用高位槽自動壓差進行。
用葡聚糖Sephadex LH凝膠系列或聚酰胺作柱填充固定相。其中以葡聚糖Sephadex LH-20為最好。
洗脫液用純乙醇，純丙酮或丙酮和乙醇組成的二元混合液。以丙酮和乙醇的二元混合液為最好。丙酮在混合液中濃度在10～30％之間，以20％為最好。
洗脫液流速控制在每小時5～30毫升，尤以每小時10毫升為最好。分離后各組份根據紫外檢測儀(UV-280mm)波長檢測后圖譜按峰分部收集，經高效液相色譜分析，其中表沒食子兒茶素沒食子酸酯(EGCG)，表兒茶素沒食子酸酯(ECG)，純度均在90％以上，最高可達95％。該法與現(xiàn)有技術相比，具有效率高，成本低，工藝簡單等優(yōu)點。
實例1稱取茶多酚1.5克溶于4毫升含20％丙酮的丙酮——乙醇混合液中，上葡聚糖Sephadex LH-20柱，用含20％丙酮的丙酮——乙醇二元混合液作洗脫液，流速為每小時30毫升。分離物經檢測后收集各組份，得純度為93.81％的表沒食子兒茶素沒食子酸酯432毫克；純度為90.85％的表兒茶素沒食子酸酯170毫克。
實例2稱取茶多酚1.5克溶于4毫升含20％丙酮的丙酮——乙醇二元混合液中，上葡聚糖Sephadex LH-20柱，用含20％丙酮的丙酮——乙醇二元混合液作洗脫液，流速為每小時10毫升。分離物經檢測后收集各組份，得純度為95.58％的表沒食子兒茶素沒食子酸酯480毫克；純度為91.4％的表兒茶素沒食子酸酯171毫克。
實例3稱取茶多酚1.5克溶于4毫升含10％丙酮的丙酮——乙醇二元混合液中，上葡聚糖Sephadex LH-20柱，用含10％丙酮的丙酮——乙醇二元混合液作洗脫液，流速為每小時26毫升。分離物經檢測后收集各組份，得純度為90.01％的表沒食子兒茶素沒食子酸酯385毫克；純度為93.78％的表兒茶素沒食子酸酯102毫克。
權利要求
1．一種茶多酚中兒茶素類化合物的分離方法，其特征在于，將茶多酚溶解于少量溶劑，通過葡聚糖Sephadex凝膠系列或聚酰胺填充柱，以丙酮含量為10～30％的丙酮——乙醇二元混合溶劑或丙酮，乙醇單溶劑作洗脫劑，其流速為每小時5～30毫升，經常壓分離得到茶多酚單離物表沒食子兒茶素沒食子酸酯(EGCG)，表兒茶素沒食子酸酯(ECG)。
2．如權利要求1所述茶多酚中兒茶素類化合物的分離方法，其特征在于，填充柱中填料固定相是葡聚糖Sephadex凝膠LH-20。
3．如權利要求1所述茶多酚中兒茶素類化合物的分離方法，其特征在于，洗脫劑是丙酮——乙醇組成的二元混合溶劑。
4．如權利要求1或3所述茶多酚中兒茶素類化合物的分離方法，其特征在于，丙酮——乙醇二元混合洗脫劑中，丙酮含量為20％。
5．如權利要求1所述茶多酚中兒茶素類化合物的分離方法，其特征在于，洗脫劑流速為每小時10毫升。
全文摘要
一種茶多酚中兒茶素類化合物的分離方法,使茶多酚通過1.5米高度的葡聚糖Sephadex LH－20填充柱,用丙酮含量在10～30%之間的丙酮——乙醇二元混合溶劑洗脫,流速每小時5～30毫升,分離出表沒食子兒茶素沒食子酸酯(EGCG),表兒茶素沒食子酸酯(ECG)兒茶素單體,純度90%以上,最高可達95%,取得較好效果。
文檔編號C07D311/62GK1319597SQ0012856
公開日2001年10月31日 申請日期2000年11月15日 優(yōu)先權日2000年11月15日
發(fā)明者李兆基, 吳棱, 康遙, 覃業(yè)燕, 唐艷紅, 姚元根 申請人:中國科學院福建物質結構研究所