秀珍菇液化專用菌種培養(yǎng)基及相應(yīng)的培養(yǎng)法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種秀珍菇液化專用菌種配方和培養(yǎng)法。
【背景技術(shù)】
[0002] 食用菌是中國最具現(xiàn)代農(nóng)業(yè)發(fā)展特征的優(yōu)勢(shì)產(chǎn)業(yè)之一。這不僅因?yàn)橹袊鞘澜缱?大的食用菌生產(chǎn)和消費(fèi)國，食用菌生產(chǎn)量大面廣，而且更重要的是食用菌產(chǎn)業(yè)在生物技術(shù) 產(chǎn)業(yè)化和農(nóng)業(yè)可持續(xù)發(fā)展中的良好載體和突出地位。目前我國的食用菌產(chǎn)業(yè)體系，有很多 不適應(yīng)全球市場(chǎng)經(jīng)濟(jì)的要素，其中最主要的是產(chǎn)業(yè)經(jīng)營的集約化、專業(yè)化程度低，生產(chǎn)要素 落后，生產(chǎn)工藝不盡完善，缺乏關(guān)鍵技術(shù)的支撐，其中最具代表性的是菌種的集約化高效繁 育技術(shù)，成了產(chǎn)業(yè)面臨的主要瓶頸。目前普遍采用的傳統(tǒng)三級(jí)固體菌種繁育工藝，生產(chǎn)效率 低，培養(yǎng)周期長(zhǎng)，菌種染菌率高，無法突破手工化、作坊式低效生產(chǎn)模式，使規(guī)模企業(yè)與散戶 制種處在同一競(jìng)爭(zhēng)平臺(tái)，這是造成目前食用菌生產(chǎn)安全、質(zhì)量事故頻發(fā)的主要根源，也是食 用菌企業(yè)效益欠佳的主要原因。國外如日本、韓國食用菌工廠化生產(chǎn)中目前已普遍采用液 體菌種技術(shù)，而我國在此領(lǐng)域缺乏規(guī)?；a(chǎn)成功的經(jīng)驗(yàn)與技術(shù)，所以加強(qiáng)菌種在規(guī)?；?生產(chǎn)中應(yīng)用的研發(fā)，利用現(xiàn)代生物科技和生物工程技術(shù)，實(shí)現(xiàn)菌種（菌袋）的高效繁育已迫 在眉睫。
[0003]傳統(tǒng)三級(jí)固體菌種繁育工藝有3步（試管母種-瓶裝原種-瓶裝栽培種）：第1級(jí) 為試管母種，配方為PDA為主（去皮鮮馬鈴薯200克、葡萄糖20克、瓊脂20、水1000ml)，培 養(yǎng)時(shí)間7-15天（根據(jù)菇種而異，秀珍菇一般為7-10)，1支母種轉(zhuǎn)接5瓶原種。第2級(jí)為瓶 裝原種（750ml)，配方以木肩、麩皮培養(yǎng)基為主（如香菇原種配方細(xì)木肩78%、麩皮20%、 白糖1 %、石膏1 %，含水量60 % )，培養(yǎng)時(shí)間45-60天（根據(jù)菇種而異），1瓶原種可轉(zhuǎn)接 50瓶栽培種。第3級(jí)為瓶裝栽培種（750ml)，配方以木肩、麩皮培養(yǎng)基為主（同原種配方， 培養(yǎng)時(shí)間35-45天（根據(jù)菇種而異），1瓶栽培種（濕重600克培養(yǎng)料）可轉(zhuǎn)接20個(gè)出菇 袋，每袋出菇袋需要固體菌種30克。上述3級(jí)種工藝全程培養(yǎng)周期87-120天。該方法所 得的菌種按照常規(guī)的接種出菇袋法培育鮮菇時(shí)染菌率一般為5-10%。備注說明：上述固體 菌種在原種（第2級(jí)）、栽培種（第3級(jí)）階段由于培養(yǎng)時(shí)間長(zhǎng)，培養(yǎng)環(huán)境差，加上封口不規(guī) 范，會(huì)在發(fā)滿菌絲的成品菌種表面隱形染菌，這種隱性感染的菌種被接種后，會(huì)變成顯性的 污染（此時(shí)雜菌比食用菌菌絲生長(zhǎng)快）。所以現(xiàn)有固體菌種風(fēng)險(xiǎn)很大，且很難避免。
[0004] 目前現(xiàn)有的食用菌液體發(fā)酵菌種（也稱深層發(fā)酵）工藝流程為3步（試管母 種-三角瓶搖床發(fā)酵液體原種-發(fā)酵罐深層發(fā)酵液體栽培種）：第1級(jí)為母種，（制作法同 前）培養(yǎng)時(shí)間7-15天（根據(jù)菇種而異，秀珍菇一般為7-10天），1支母種轉(zhuǎn)接2-3瓶三角 瓶搖床發(fā)酵液體原種（200ml)。第2級(jí)為三角瓶搖床發(fā)酵液體原種（500ml三角瓶中放入 200ml培養(yǎng)液），配方以去皮鮮馬鈴薯、葡萄糖、酵母膏、蛋白胨等為主，搖床培養(yǎng)時(shí)間7-10 天（根據(jù)菇種而異），1瓶液體原種可轉(zhuǎn)接2000ml的3級(jí)發(fā)酵罐培養(yǎng)液（10%接種量）。第 3級(jí)為發(fā)酵罐深層發(fā)酵液體栽培種，配方同三角瓶搖床液體原種培養(yǎng)基，發(fā)酵需專用深層發(fā) 酵罐或發(fā)酵系統(tǒng)，培養(yǎng)時(shí)間3-5天（根據(jù)菇種而異），1升液體菌種可轉(zhuǎn)接100個(gè)出菇袋。上 述液體菌種繁育工藝全程培養(yǎng)周期17-25天。該方法所得的菌種按照常規(guī)的接種出菇袋法 培育鮮菇時(shí)染菌率一般為2-5%。備注說明：液體發(fā)酵菌種工藝?yán)碚撋暇N純度高，大規(guī)模 發(fā)酵生產(chǎn)的染菌率在1% -5%之間（3級(jí)發(fā)酵罐中），加上染菌（細(xì)菌性為主）往往在發(fā)酵 后期，常規(guī)在線檢驗(yàn)很難發(fā)現(xiàn)，導(dǎo)致用液體發(fā)酵菌種接種產(chǎn)生大批量出菇袋污染的生產(chǎn)事 故，教訓(xùn)慘痛。另外，液體菌種由于培養(yǎng)需用高濃度的有機(jī)氮和糖源等營養(yǎng)成分，這些成分 殘留在菌液中被接入出菇袋，由于操作時(shí)不可避免有雜菌帶入，所以殘留的營養(yǎng)就成為了 雜菌的溫床，增加了出菇袋接種后的污染風(fēng)險(xiǎn)。這是液體發(fā)酵菌種不能大規(guī)模應(yīng)用于食用 菌生產(chǎn)的主要問題。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是提供一種培養(yǎng)周期短、菌種質(zhì)量高的秀珍菇液化專用 菌種培養(yǎng)基及相應(yīng)的培養(yǎng)法。
[0006] 為了解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明提供一種秀珍菇液化專用菌種培養(yǎng)基，其由以下 重量份的成分組成：
[0007]
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 秀珍菇液化專用菌種培養(yǎng)基，其特征是由以下重量份的成分組成：
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的秀珍菇液化專用菌種培養(yǎng)基，其特征是由以下重量份的成分 組成：
3.權(quán)利要求1或2所述的培養(yǎng)基的制備法，其特征是包括如下步驟： 將玉米淀粉、細(xì)麩皮、小麥纖維素混合均勻，得配料I; 將葡萄糖、酵母浸膏、牛肉蛋白胨、磷酸二氫鉀、硫酸鎂加入水中，充分?jǐn)嚢?，得配料II; 將配料I和配料II充分混合后，得秀珍菇液化專用菌種培養(yǎng)基。
4.利用權(quán)利要求1或2所述的培養(yǎng)基進(jìn)行的秀珍菇液化菌種培養(yǎng)法，其特征是：將秀 珍菇母種依次進(jìn)行以下步驟： 1)、菌種制作： 將秀珍菇液化專用菌種培養(yǎng)基裝入培養(yǎng)瓶中，蓋好微孔膜透氣蓋，高溫高壓滅菌，得滅 菌后培養(yǎng)基； 按照每200g的秀珍菇液化專用菌種培養(yǎng)基對(duì)應(yīng)4. 8?5. 2g秀珍菇母種的接種量，于 無菌條件下在滅菌后培養(yǎng)基中接入秀珍菇母種，23?25°C黑暗培養(yǎng)19?21天，得液化專 用固體菌種； 2)、液化菌種制備： 將液化專用固體菌種在無菌條件下先經(jīng)高速均質(zhì)，然后按照1:100的稀釋度稀釋，稀 釋后的所得物在稀釋罐內(nèi)于溫度為20-23°C、通氣比為1 :0.4(v/v/min)的條件下液化4? 6分鐘；得秀珍菇液化菌種。
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種秀珍菇液化專用菌種培養(yǎng)基，其由以下重量份的成分組成：玉米淀粉45-50份、葡萄糖1-2份、小麥纖維素15-20份、細(xì)麩皮20-25份、酵母浸膏1-1.5份、牛肉蛋白胨1-1.5份、磷酸二氫鉀2-3份、硫酸鎂1-1.5份、水100份。本發(fā)明還同時(shí)公布了利用上述培養(yǎng)基進(jìn)行的秀珍菇液化菌種培養(yǎng)法，將秀珍菇母種依次進(jìn)行以下步驟：將秀珍菇液化專用菌種培養(yǎng)基高溫高壓滅菌，于無菌條件下在滅菌后培養(yǎng)基中接入秀珍菇母種，23～25℃黑暗培養(yǎng)19～21天；將所得的液化專用固體菌種進(jìn)行稀釋處理，得秀珍菇液化菌種。
【IPC分類】C05G3-00, A01G1-04
【公開號(hào)】CN104557315
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510028321
【發(fā)明人】陳再鳴, 何伯偉, 陳青, 余維良, 鄭明海
【申請(qǐng)人】浙江大學(xué)
【公開日】2015年4月29日
【申請(qǐng)日】2015年1月20日