本發(fā)明涉及一種抗腫瘤藥物的制備工藝。尤其涉及一種由銀納米粒子-銀納米簇所構(gòu)成的單金屬納米雜合體抗腫瘤藥物的制備工藝。所述的納米雜合體能同時(shí)實(shí)現(xiàn)細(xì)胞成像及癌癥細(xì)胞的靶向診療。
背景技術(shù):
銀納米材料已廣泛應(yīng)用于生物醫(yī)學(xué)工程。其中,銀納米粒子能誘導(dǎo)癌癥細(xì)胞凋亡,但該材料本身不發(fā)熒光,所以需要在其表面修飾熒光探針才能實(shí)現(xiàn)細(xì)胞成像。銀納米簇作為一種熒光探針可用于殺菌及腫瘤細(xì)胞成像,但由于其熒光特性易受周圍環(huán)境的影響,銀米納簇難以同時(shí)實(shí)現(xiàn)癌癥細(xì)胞的成像和診療。
目前,貴金屬納米雜合體多為多金屬納米雜合體,通常尺寸較大,抗腫瘤活性較低。單金屬納米雜合體作為抗腫瘤藥物來實(shí)現(xiàn)癌癥細(xì)胞成像和診療的報(bào)道相對(duì)較少。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素:
1、本發(fā)明公開了一種單金屬納米雜合體抗腫瘤藥物的制備工藝,其特征在于,包括以下步驟:硫醇修飾的DNA(包含合成銀納米簇的模板序列及特定的適配體序列)與銀納米粒子在4~37℃下共孵育2~12h,隨即加入硝酸銀并繼續(xù)孵育0.2~1h。最后,加入新配制的硼氫化鈉溶液,震蕩2~4h后即可得到適配體修飾的納米雜合體。癌癥細(xì)胞與含有適配體修飾的納米雜化體的培養(yǎng)基共培養(yǎng)0.5~24h,觀察細(xì)胞成像及細(xì)胞凋亡情況。
進(jìn)一步,所制備的單金屬納米雜合體抗腫瘤藥物,其特征在于,該抗腫瘤藥物是一種由銀納米粒子-銀納米簇所構(gòu)成的單金屬納米雜合體。
進(jìn)一步,所制備的單金屬納米雜合體抗腫瘤藥物,其特征在于,該抗腫瘤藥物可同時(shí)用于細(xì)胞成像及癌癥細(xì)胞的靶向診療。
具體實(shí)施方式
為了方便本領(lǐng)域的生產(chǎn)人員便于理解,本發(fā)明提供了一種單金屬納米雜合體抗腫瘤藥物的制備工藝及其在生物醫(yī)學(xué)方面應(yīng)用的具體實(shí)施方式。
實(shí)施例1、
500μM檸檬酸穩(wěn)定的銀納米粒子與硫醇修飾的DNA(100μM,序列為5′-5-TAC TGA ATC AGC TGC TGC ATCC GG CCC CCC CCC CCC-(CH2)6-SH-3′)室溫共孵育12h,加入600μM AgNO3溶液,快速混合后避光震蕩30min。隨后快速加入600μM NaBH4的冰水混合物,共孵育2h后,即可得到適配體修飾的單金屬納米雜合體抗腫瘤藥物。HeLa細(xì)胞與含有40μM適配體修飾的抗腫瘤藥物的培養(yǎng)基培養(yǎng)1h后,在熒光倒置顯微鏡下進(jìn)行細(xì)胞成像實(shí)驗(yàn)。通過MTT實(shí)驗(yàn)估算細(xì)胞的存活率。