1.一種土田七的組織培養(yǎng)快速繁殖方法,其特征在于包括以下步驟:
(a)外植體的選擇:取生長旺盛的土田七幼嫩新芽的根莖為外植體;
(b)外植體的消毒:將外植體用自來水洗凈,剪刀剪掉葉片,留根莖和距離根莖高5~7厘米的莖,進(jìn)行外植體的消毒;切掉距離根莖高1~2厘米的莖留根莖,并接種根莖到誘導(dǎo)培養(yǎng)基中培養(yǎng);
(c)叢生芽的誘導(dǎo):在誘導(dǎo)培養(yǎng)基上培養(yǎng)直至外植體形成不定芽;所述的誘導(dǎo)培養(yǎng)基成分為MS、6‐芐氨基腺嘌呤1.0~3.0mg/L、萘乙酸0.01~0.10mg/L、椰汁10.0~15.0%、蔗糖20~30g/L、卡拉膠9.5~10g/L;
(d)增殖繼代:將誘導(dǎo)出的不定芽切掉部分葉片后再切割,繼代培養(yǎng)于增殖培養(yǎng)基中進(jìn)行不定芽的增殖;所述的增殖繼代培養(yǎng)基成分為MS、6‐芐氨基腺嘌呤3.0~8.0mg/L、萘乙酸0.1~0.20mg/L、椰汁10.0~15.0%、蔗糖20~30g/L、卡拉膠9.5~10g/L;
(e)生根培養(yǎng):當(dāng)繼代苗高3~5厘米時,切下接種到生根培養(yǎng)基中,所述的生根培養(yǎng)基成分為MS、萘乙酸0.1~1.0mg/L、椰汁10.0~15.0%、蔗糖20~30g/L、卡拉膠9.5~10g/L;
(f)煉苗移栽:當(dāng)生根培養(yǎng)基上的苗高5~8厘米時,在溫室自然光照下煉苗10~15天,取出試管苗,洗凈根部培養(yǎng)基,用0.1%~0.3%的百菌清溶液浸泡30~40分鐘,移栽到由黃泥、珍珠巖和泥炭土混合的基質(zhì)中,保持通風(fēng)透氣,濕度在70‐85%,溫度在20‐32℃,自然光照條件培養(yǎng)后得到移栽苗。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的土田七的組織培養(yǎng)快速繁殖方法,其特征在于:步驟(a)所述的外植體為土田七(Stahlianthus involucratus)的5~20厘米高的幼嫩新芽的根莖。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的土田七的組織培養(yǎng)快速繁殖方法,其特征在于:以質(zhì)量百分比濃度計,所述外植體的消毒是先用0.1%‐0.2%高錳酸鉀溶液浸泡根莖30~40分鐘,再用0.1%~0.3%的百菌清和甲基硫菌靈混合溶液,浸泡根莖40~50分鐘,接著在自來水下反復(fù)沖洗根莖30~40分鐘;晾干表面水分后,在超凈工作臺上,切掉高4~6厘米的莖,留1~2厘米高的帶根莖的莖,用棉球蘸取70%酒精擦拭根莖及1~2厘米高的莖表面,最后用0.1%升汞溶液消毒15~20分鐘,滅菌水沖洗4~5次。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的土田七的組織培養(yǎng)快速繁殖方法,其特征在于:所述百菌清和甲基硫菌靈的體積比為1:1。
5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的土田七的組織培養(yǎng)快速繁殖方法,其特征在于:所述黃泥、珍珠巖和泥炭土的體積比為1:1:1。
6.根據(jù)權(quán)利要求2所述的土田七的組織培養(yǎng)快速繁殖方法,其特征在于:步驟(5)中如果溫度高于32℃,用風(fēng)機(jī)和水簾降溫。
7.根據(jù)權(quán)利要求2所述的土田七的組織培養(yǎng)快速繁殖方法,其特征在于:所述誘導(dǎo)培養(yǎng)基、增殖繼代培養(yǎng)基和生根培養(yǎng)基的pH都為5.6~5.8;培養(yǎng)基滅菌條件為125℃,30分鐘。
8.根據(jù)權(quán)利要求2所述的土田七的組織培養(yǎng)快速繁殖方法,其特征在于:步驟(b)、步驟(c)、步驟(d)和步驟(e)所述培養(yǎng)的溫度為25~30℃,光照強(qiáng)度為2000~2300lx,光照時間控制為12小時/天。