專利名稱：抑制mrp1的方法
除了外科手術(shù)和放射性治療外，對(duì)于許多癌癥，化學(xué)治療方法始終是有效的治療方法。事實(shí)上，目前某些種類的癌癥被認(rèn)為可通過(guò)化學(xué)治療治愈，包括霍奇金(Hodgkin)疾病、大細(xì)胞淋巴癌、急性淋巴細(xì)胞白血病、睪丸癌和早期乳腺癌。其它癌癥，例如卵巢癌、小細(xì)胞肺和晚期乳腺癌，盡管還不能治愈，但結(jié)合化學(xué)治療顯示積極的效果。
在癌癥治療中最重要的未解決問(wèn)題之一是抗藥性。在選擇對(duì)單個(gè)細(xì)胞毒性藥物的抗藥性后，細(xì)胞會(huì)變得對(duì)具有不同結(jié)構(gòu)和細(xì)胞目標(biāo)的藥物，例如烷基化劑、抗代謝藥物、激素、含鉑藥物和天然產(chǎn)物具有全面抗藥性，該現(xiàn)象稱為多藥物抗藥性(MDR)。在某些類型的細(xì)胞中，該抗藥性是固有的，而在其它種類中，例如小細(xì)胞肺癌，它通常是后天的。
該抗藥性已知是多因素的，由至少兩種蛋白質(zhì)帶來(lái)170kDaPglycopro tein(MDR1)和最近鑒定的190kDa多藥物抗藥性蛋白質(zhì)(MRP1)。雖然MDR1和MRP1都屬于運(yùn)輸?shù)鞍踪|(zhì)的ATP結(jié)合盒樣總科，但它們?cè)诮Y(jié)構(gòu)上是非常不同的，帶有低于15％的氨基酸同源性。盡管兩種蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)分歧，直至1994人們?nèi)圆恢涝贛DR1和MRP1細(xì)胞系的抗藥性類型中的一致差異。然而，MRP1的聯(lián)合或不足和對(duì)特定溶癌藥物的抗藥性是已知的，參見(jiàn)Cole等，“多藥物抗藥性MRP轉(zhuǎn)染的人體腫瘤細(xì)胞的藥理學(xué)表征”，Cancer Research，545902-5910。阿霉素、柔紅霉素、表柔比星、長(zhǎng)春新堿和依托伯苷是MRP1的酶作用物，即MRP1能夠結(jié)合這些溶癌藥物，將它們由作用位置，細(xì)胞的核和外部移走，重新分布。Id.和Marquardt,D.,和Center,M.S.,Cancer Research,523157,1992。
阿霉素、柔紅霉素和表柔比星是溶癌藥物的蒽環(huán)類抗生素，它們是鏈霉菌的不同菌株的分離物，通過(guò)抑制核酸合成起作用。這些藥物用于治療骨骼、卵巢、膀胱、甲狀腺和尤其是乳腺腫瘤。它們還用于治療急性成淋巴細(xì)胞和成髓細(xì)胞白血病、腎胚胎瘤、成神經(jīng)細(xì)胞瘤、軟組織肉瘤、霍奇金和非霍奇金淋巴瘤和支氣管癌。
長(zhǎng)春新堿，溶癌藥物的長(zhǎng)春花生物堿種類的成員，是常見(jiàn)開花的藥草，長(zhǎng)春花植物(Vinca rosea Linn)的提取物，長(zhǎng)春新堿作用的機(jī)理仍在研究中，蛤與在絲分裂紡錘體中抑制微管形成有關(guān)。長(zhǎng)春新堿用于治療急性白血病、霍奇金疾病、非霍奇金惡性淋巴瘤、橫紋肌肉瘤、成神經(jīng)細(xì)胞瘤和腎胚胎瘤。
依托伯苷，溶癌藥物的表鬼臼毒素種類的成員是鬼臼毒素的半合成衍生物。依托伯苷用作拓?fù)洚悩?gòu)酶抑制劑，和用于治療睪丸和肺的腫瘤。
人們目前仍不知道是什么決定了一個(gè)細(xì)胞系將以MDR1和MRP1機(jī)理獲得抗藥性。由于這些運(yùn)輸因子的組織特異性和/或在其中一個(gè)機(jī)理是占優(yōu)勢(shì)或排他的情況下，具有不同于其它的一種選擇性抑制劑是有用的。此外，當(dāng)給藥是蛋白質(zhì)的酶作用物的藥物時(shí)，有利的是共同給藥一種藥物，它是蛋白質(zhì)的選擇性抑制劑。因此，人們需要提供用作MDR1和MRP1的選擇性抑制劑。
本發(fā)明涉及式Ⅰ的化合物 其中R是H、COR1、SO2R2或下式的部分 R1是C1-C4烷基、芳基、取代芳基、呋喃基、吲哚基、噻吩甲基、5-甲基異噁唑基、NHR4或CHR5OR6；R2是3，5-二甲基異噁唑基或苯基，其中苯基選擇性地被硝基、C1-C4烷基、三氟甲基、C1-C4烷氧基、C2-C4鏈烷?；?、羰基(C1-C4烷氧基)或氨基(C1-C4烷基)取代一次；R3是苯基，其中苯基選擇性地被三氟甲基或N-乙?；被〈淮?；R4是H、C1-C6烷基或苯基，其中選擇性地被硝基、C1-C4烷基、三氟甲基、C1-C4烷氧基、C2-C4鏈烷?；Ⅳ驶?C1-C4烷氧基)或氨基(C1-C4烷基)取代一次；R5是H、C1-C4烷基或苯基；和R6是苯基或乙酰基；或其可藥用的鹽或溶劑化物。
本發(fā)明還涉及在哺乳動(dòng)物中抑制MRP1的方法，其包括向需要的哺乳動(dòng)物給藥有效量的式Ⅰ化合物或其可藥用鹽或溶劑化物。
在另一實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及在哺乳動(dòng)物中抑制抵抗的腫瘤或易受抵抗的腫瘤的方法，其包括向需要的哺乳動(dòng)物給藥有效量的式Ⅰ化合物或其可藥用鹽或溶劑化物，并結(jié)合有效量的溶癌藥物。
本發(fā)明還涉及藥物組合物，其含有式Ⅰ化合物或其可藥用鹽或溶劑化物，結(jié)合一種或多種溶癌藥物、可藥用載體、稀釋劑或賦形劑。
本發(fā)明基于發(fā)現(xiàn)一個(gè)選擇組的化合物，式Ⅰ的化合物是多藥物抗藥性蛋白質(zhì)(MRP1)的選擇性抑制劑，因此在抵抗的腫瘤或易受抵抗的腫瘤中用于治療MRP1帶有的多藥物抗藥性。
涉及MRP1的術(shù)語(yǔ)“抑制”和“抑制的MRP1”是指阻止、減輕、改善、停止、抑制、延緩或逆轉(zhuǎn)MRP1將溶癌藥物由作用的溶癌位置，最常見(jiàn)的是細(xì)胞的腫瘤核和外部重新分布的進(jìn)程和降低其能力。
用于本文的術(shù)語(yǔ)“有效量的式Ⅰ化合物”是指本發(fā)明的化合物能夠抑制MRP1的數(shù)量。術(shù)語(yǔ)“有效量的溶癌藥物”是指能夠抑制腫瘤、抵抗等的溶癌藥物的數(shù)量。
術(shù)語(yǔ)“抑制抵抗的腫瘤或易受抵抗的腫瘤”是指阻止、停止、抑制、延緩或逆轉(zhuǎn)抵抗的腫瘤和/或易受抵抗的腫瘤的進(jìn)程、降低其生長(zhǎng)或殺死。
術(shù)語(yǔ)“抵抗的腫瘤”是指腫瘤，它抵抗化學(xué)治療，其中抵抗部分地或全部地由MRP1帶有。該腫瘤包括，但不限于，膀胱、骨骼、乳腺、肺(小細(xì)胞)、睪丸和甲狀腺的腫瘤，還包括更具體類型的癌癥，例如，但不限于，急性成淋巴細(xì)胞和成髓細(xì)胞白血病、腎胚胎腫瘤、成神經(jīng)細(xì)胞瘤、軟組織肉瘤、霍奇金和非霍奇金腫瘤和支氣管癌。
“易受抵抗的”腫瘤是指腫瘤，其中抵抗性不是固有的或目前存在的，但可以在化學(xué)治療后由MRP1產(chǎn)生。因此，本發(fā)明的方法包括預(yù)防和治療給藥式Ⅰ的化合物。
術(shù)語(yǔ)“化學(xué)治療”是指使用一種或多種溶癌藥物，其中至少一種溶癌藥物是MRP1的酶作用物。“MRP1的酶作用物”是指溶癌藥物，它結(jié)合MRP1，被由溶癌藥物作用的位置，(腫瘤核)和細(xì)胞外部重新分布，因而使得治療失效。
術(shù)語(yǔ)“處理”具有它們通常的含義，其包括防止、阻止、減輕、改善、停止、抑制、延緩或逆轉(zhuǎn)在多藥物抗藥性腫瘤中由抗藥性產(chǎn)生的MRP1的進(jìn)行或降低其嚴(yán)重程度。
式Ⅰ化合物含有至少2個(gè)手性中心，它位于二氫化茚環(huán)系的1和2位。具有絕對(duì)R，R或S，S立體化學(xué)的對(duì)映體包含在本發(fā)明的范圍內(nèi)。即在二氫化茚環(huán)的1和2位的取代基具有彼此反式的相互關(guān)系的式Ⅰ化合物包含在本發(fā)明的范圍內(nèi)。
在本發(fā)明的通式中，一般的化學(xué)術(shù)語(yǔ)具有其通常的含義。例如，術(shù)語(yǔ)“C1-C3烷基”是指甲基、乙基、丙基、異丙基和環(huán)丙基。術(shù)語(yǔ)“C1-C4烷基”包括C1-C3烷基，還涉及丁基、環(huán)丁基、異丁基和叔丁基。術(shù)語(yǔ)“C1-C6烷基”包括C1-C4烷基，還包括含有5或6個(gè)碳原子的單價(jià)直鏈、支鏈或環(huán)狀飽和烴鏈，包括，但不限于，環(huán)戊基、戊基、己基、環(huán)己基等。
術(shù)語(yǔ)“C2-C4鏈烷?；笔侵竿ㄟ^(guò)羰基連接的C1-C3烷基。
術(shù)語(yǔ)“C1-C4烷氧基”是指通過(guò)氧原子連接的C1-C4烷基。
術(shù)語(yǔ)“鹵素”或“鹵化物”是指氟、氯、溴或碘。
術(shù)語(yǔ)“芳基”是指苯基、芐基和萘基。
術(shù)語(yǔ)“取代的芳基”是指苯基、芐基和萘基，它們分別被C1-C4烷基、C1-C4烷氧基或鹵素對(duì)位取代或被C1-C4烷氧基分別取代3次。
用于本文的術(shù)語(yǔ)“氨基保護(hù)基團(tuán)”是指在化合物上的其它官能團(tuán)反應(yīng)時(shí)通常用于阻斷或保護(hù)氨基官能團(tuán)的氨基的取代基。該氨基保護(hù)基團(tuán)的實(shí)例包括甲?；⑷郊谆?、苯二酰亞氨基、乙?；?、三氯乙?；⒙纫阴；逡阴；偷庖阴；?，尿烷型阻斷基團(tuán)，芐氧羰基、9-芴基甲氧基羰基(“FMOC”)等和類似的氨基保護(hù)基團(tuán)。所用的氨基保護(hù)基團(tuán)的種類不是關(guān)鍵的，只要衍生的氨基對(duì)于在分子的其它的反應(yīng)條件下是穩(wěn)定的和能夠在合適的位置除去而不影響分子的其余部分。在頭胞菌素、青霉素和肽技術(shù)中使用的類似保護(hù)基團(tuán)也包括在上述術(shù)語(yǔ)中。上述術(shù)語(yǔ)所指的基團(tuán)的其它實(shí)例在T.W.Greene，有機(jī)合成中的保護(hù)基團(tuán)，John Wiley and Sons，New York,N.Y.,1991,第7章中描述，下文稱為“Greene”，優(yōu)選的氨基保護(hù)基團(tuán)是叔丁氧基羰基。
術(shù)語(yǔ)“羰基活化基團(tuán)”是指羰基的取代基，它使得羰基有親核加成的傾向。合適的活化基團(tuán)是在羰基上具有凈吸電子效果的基團(tuán)，該基團(tuán)包括，但不限于，烷氧基、芳氧基、含氮的芳香雜環(huán)或氨基，例如氧基苯并三唑、咪唑基、硝基苯氧基、五氯苯氧基、N-氧基琥珀酰亞胺、N，N’-二環(huán)己基異脲-O-基、N-羥基-N-甲氧基氨基等；乙酸根、甲酸根、磺酸根，例如甲磺酸根、乙磺酸根、苯磺酸根或?qū)妆交撬岣龋缓望u化物，例如是氯、溴或碘。
通常術(shù)語(yǔ)“可藥用的”在用作介詞時(shí)是指對(duì)有生命的生物基本上是無(wú)毒的。例如，用于本文的術(shù)語(yǔ)“可藥用鹽”是指式Ⅰ化合物的鹽，它對(duì)有生命的生物基本上是無(wú)毒的。參見(jiàn)例如Berge,S.M,Bighley,L.D.,和Monkhouse，D.C.,“可藥用鹽”，J.Pharm.Sci.,661,1977。典型的可藥用鹽包括通過(guò)將式Ⅰ化合物與無(wú)機(jī)或有機(jī)酸反應(yīng)制備的鹽。這種鹽作為酸加成鹽是已知的，這些可藥用鹽與衍生出鹽的化合物相比通常具有改善的溶解特性，因此，作為液體或乳劑通常是更可接受的。
可藥用酸加成鹽的實(shí)例是式Ⅰ化合物的硫酸鹽、焦硫酸鹽、硫酸氫鹽、亞硫酸鹽、亞硫酸氫鹽、磷酸鹽、磷酸氫鹽、磷酸二氫鹽、偏磷酸鹽、焦磷酸鹽、氯化物、溴化物、碘化物、乙酸鹽、丙酸鹽、癸酸鹽、辛酸鹽、丙烯酸鹽、甲酸鹽、異丁酸鹽、己酸鹽、庚酸鹽、丙炔酸鹽、草酸鹽、丙二酸鹽、琥珀酸鹽、辛二酸鹽、癸二酸鹽、富馬酸鹽、馬來(lái)酸鹽、丁炔-1，4-二酸鹽、己炔-1，6-二酸鹽、苯甲酸鹽、氯苯甲酸鹽、甲氧基苯甲酸鹽、鄰苯二甲酸鹽、磺酸鹽、二甲苯磺酸鹽、苯基乳酸鹽、苯基丙酸鹽、苯基丁酸鹽、檸檬酸鹽、乳酸鹽、γ-羥基丁酸鹽、乙醇酸鹽、酒石酸鹽、甲磺酸鹽、乙磺酸鹽、丙磺酸鹽、萘-1-磺酸鹽、萘-2-磺酸鹽、杏仁酸鹽等。
術(shù)語(yǔ)“溶劑化物”是指一種或多種溶質(zhì)分子的聚集物，例如式Ⅰ化合物與一種或多種溶劑分子。
術(shù)語(yǔ)“合適的溶劑”是指對(duì)進(jìn)行的反應(yīng)惰性，充分增溶反應(yīng)物以進(jìn)行所需反應(yīng)的溶劑。合適溶劑的實(shí)例包括，但不限于，二氯甲烷、氯仿、1，2-二氯乙烷、乙醚、乙腈、乙酸乙酯、1，3-二甲基-2-咪唑啉酮、四氫呋喃、二甲基甲酰胺、甲苯、氯苯、二甲基亞砜和它們的混合物等。
術(shù)語(yǔ)“羰基活化試劑”是指將羧酸基團(tuán)的羰基轉(zhuǎn)化為更有利于親核加成的基團(tuán)的試劑，包括，但不限于，例如在肽，Gross和Meienhofer,Eds.,Academic Press(1979),Ch.2和M.Bodanszky，肽合成的原理，2nd Ed.,Springer-Verlag BerlinHeidelberg,1993中列出的試劑，下文分別稱為肽和肽合成。更具體地說(shuō)，羰基活化試劑包括鹵素親核源，例如磺?；?、磺酰基氯、草?；鹊?；醇，例如硝基苯酚、五氯苯酚等；胺，例如N-羥基-N-甲氧基胺等；酰鹵，例如乙酰、甲酰、甲磺酰、乙磺酰、苯磺?；?qū)妆交酋｛u等和化合物，例如1，1’-羰基二咪唑、苯并三唑、咪唑、N-羥基琥珀酰亞胺、二環(huán)己基碳化二亞胺等。
術(shù)語(yǔ)“合適的熱力學(xué)堿”是指用作任何質(zhì)子的質(zhì)子捕集的堿，它可作為所需反應(yīng)的副產(chǎn)物產(chǎn)生，或是指提供酸作用物的可逆去質(zhì)子作用的并且對(duì)所需反應(yīng)是足夠有效的而不明顯影響任何不需要的反應(yīng)的堿。熱力學(xué)堿的實(shí)例包括，但不限于，碳酸鹽、碳酸氫鹽和氫氧化物(例如鋰、鈉或鉀的碳酸鹽、碳酸氫鹽和氫氧化物)，三-(C1-C4烷基)胺或芳香含氮雜環(huán)(例如吡啶)。
盡管本發(fā)明的化合物是有用的，但某些化合物是尤其感興趣的和優(yōu)選的。如下列出了若干組優(yōu)選化合物、制劑和方法。應(yīng)理解，列出的每個(gè)內(nèi)容可與其它列出的內(nèi)容結(jié)合以產(chǎn)生優(yōu)選的實(shí)施方案的附加組。
a)R是COR1；b)R是SO2R2；c)R1是苯基；d)R1是芐基；e)R1是3,4,5-三甲氧基苯基；
f)R1是3,4,5-三甲氧基苯基；g)R2是苯基；h)R2是4-甲氧基苯基；i)R2是3，5-二甲氧基異噁唑；j)化合物是可藥用的鹽；k)化合物是鹽酸鹽；l)實(shí)施例部分的化合物；m)其中哺乳動(dòng)物是人的方法；n)其中溶癌藥物選自阿霉素、柔紅霉素、表柔比星、長(zhǎng)春新堿和依托伯苷的方法；o)其中腫瘤是腎胚胎腫瘤、膀胱、骨骼、乳腺、肺(小細(xì)胞)、睪丸和甲狀腺的腫瘤或與急性成淋巴細(xì)胞和成髓細(xì)胞白血病、成神經(jīng)細(xì)胞瘤、軟組織肉瘤、霍奇金和非霍奇金腫瘤和支氣管癌有關(guān)的腫瘤的方法；p)其中溶癌藥物選自阿霉素、柔紅霉素、表柔比星、長(zhǎng)春新堿和依托伯苷的制劑；q)化合物是R異構(gòu)體；r)化合物是S異構(gòu)體；和s)化合物是異構(gòu)體的混合物。
本發(fā)明的化合物可通過(guò)各種方法制備，包括固體相或溶液相合成技術(shù)。固體相技術(shù)在如下方案1中說(shuō)明，產(chǎn)生式Ⅰ化合物的所需步驟的特定次序取決于合成的具體化合物、起始化合物和取代部分的相對(duì)不穩(wěn)定性。
方案1的反應(yīng)均在固體相中進(jìn)行。即在不同轉(zhuǎn)化過(guò)程中操作的分子結(jié)合于不溶解的聚苯乙烯樹脂，用于改性或加入結(jié)合分子的試驗(yàn)是溶解的。適用于該情況的這種合成的普通策略采用相對(duì)于結(jié)合的試劑大摩爾過(guò)量的未結(jié)合的試劑，以確保結(jié)合分子的完全轉(zhuǎn)化。當(dāng)轉(zhuǎn)化基本上完成后，溶解的試劑可簡(jiǎn)單地過(guò)濾出，將含有剛完成的反應(yīng)的殘余物的不純樹脂可簡(jiǎn)單地通過(guò)用例如用于反應(yīng)的相同溶劑漂洗簡(jiǎn)單地清潔。例如，如果反應(yīng)在四氫呋喃中進(jìn)行，你可以用純四氫呋喃漂洗樹脂，這些原理適用于在方案1中討論的所有反應(yīng)。
式Ⅰ化合物可如以下方案1中所述制備，其中PS是聚苯乙烯樹脂，R5是羰基活化基團(tuán)，和R、R1、R2和R3是如上所述的。
方案1 式Ⅱ的酸可通過(guò)化學(xué)領(lǐng)域中已知的方法活化以形成式Ⅲ的活化羧酸。參見(jiàn)例如肽或肽合成中溶液相活化的一般討論和如下用于固體相活化的制備部分。更具體地說(shuō)，式Ⅲ的化合物通常通過(guò)將羧基化的聚苯乙烯樹脂在合適溶劑中暴露于摩爾過(guò)量的活化試劑制備。方便和優(yōu)選的溶劑是二氯甲烷和二甲基甲酰胺的混合物。草酰氯是通常優(yōu)選和方便的活化試劑，通常采用3摩爾過(guò)量的該活化試劑。通常反應(yīng)在混合物的回流溫度下進(jìn)行約24小時(shí)。
式Ⅴ的樹脂鍵合的酯可通過(guò)化學(xué)領(lǐng)域中已知的方法由式Ⅳ化合物和式Ⅲ的樹脂鍵合活化的酸制備。對(duì)于活化羧酸向酯的溶液相轉(zhuǎn)化的一般討論，參見(jiàn)例如Larock，“綜合有機(jī)轉(zhuǎn)化過(guò)程”，978-979頁(yè)，VCH Publishers New York，N.Y.,1989，下文稱為“Larock”。更具體地說(shuō)，式Ⅲ的酯在熱力學(xué)堿的存在下，選擇性地在熱力學(xué)堿的存在下和選擇性地在二甲基氨基吡啶(DMAP)存在下，暴露于式Ⅳ的化合物。四氫呋喃通常是方便和優(yōu)選的溶劑，DMAP優(yōu)選以催化方式使用，通常相對(duì)于鍵合的物質(zhì)為約50摩爾％。然而，式Ⅳ化合物以過(guò)量，通常為約1.4-約2.5摩爾過(guò)量使用，優(yōu)選的堿是吡啶，通常以大摩爾過(guò)量使用，通常為約20摩爾過(guò)量。一旦所有試劑混合，反應(yīng)通常在混合物的回流溫度下進(jìn)行8-12天。
現(xiàn)在可除去在式Ⅴ化合物中包含的氨基保護(hù)基團(tuán)以形成式Ⅵ化合物。保護(hù)基團(tuán)和試劑的選擇和用于加上或除去它們的方法可在上述Greene的參考文獻(xiàn)中找到。優(yōu)選的保護(hù)基團(tuán)和它們的除去方法在如下制備例部分公開。
在合適溶劑的存在下，和選擇性地在熱力學(xué)堿存在下和選擇性地在二甲基氨基吡啶(DMAP)存在下式Ⅵ的樹脂鍵合的游離愛(ài)可用式Ⅶ的化合物處理以制備其中R是COR1的式Ⅹ的化合物。通常優(yōu)選和方便的溶劑是二氯甲烷，當(dāng)采用堿時(shí)，吡啶通常是優(yōu)選的堿。此外，當(dāng)使用堿時(shí)，相對(duì)于樹脂鍵合的物質(zhì)，堿和式Ⅶ化合物通常以大化學(xué)計(jì)量過(guò)量使用。例如堿通常以15-20摩爾過(guò)量使用，而式Ⅳ化合物通過(guò)以5-8摩爾過(guò)量使用。當(dāng)不使用堿時(shí)，式Ⅶ化合物通常以較大化學(xué)計(jì)量過(guò)量使用。反應(yīng)通常在0℃-約溶劑的回流溫度下進(jìn)行10分鐘-18小時(shí)。反應(yīng)優(yōu)選在約15℃-約40℃下進(jìn)行12-24小時(shí)，最優(yōu)選在室溫下進(jìn)行18小時(shí)。
在如上段相同的條件下，式Ⅵ化合物另外可用式Ⅷ或Ⅸ化合物處理以分別得到其中R是SO2R2的式Ⅹ化合物或下式的部分(原文第14頁(yè)結(jié)構(gòu)式，空2行)在方案1的下一反應(yīng)中，二氫化茚環(huán)的2位上的硝基被還原為氨基形成式Ⅺ化合物。將硝基還原為胺的方法是已知的，參見(jiàn)Larock412-415頁(yè)或如下的制備例和實(shí)施例部分。通常轉(zhuǎn)化過(guò)程通過(guò)將式Ⅹ的樹脂鍵合的化合物在合適溶劑中暴露于大摩爾過(guò)量的還原劑完成。二甲基甲酰胺通常是用于該過(guò)程的方便和優(yōu)選的溶劑。氯化錫(Ⅱ)二水合物通常是優(yōu)選的還原劑。反應(yīng)通常在0℃-約溶劑的回流溫度下進(jìn)行12小時(shí)-72小時(shí)。反應(yīng)優(yōu)選在約15℃-約40℃下進(jìn)行30-60小時(shí)，最優(yōu)選在室溫下進(jìn)行48小時(shí)。
方案2的下一反應(yīng)是在上述反應(yīng)中形成的氨基部分的?；孕纬墒舰蠡衔?。該?；^(guò)程具有如式Ⅵ化合物轉(zhuǎn)化為式Ⅹ化合物的相同反應(yīng)和試劑情況，只是在該情況下使用的僅有?；噭┦鞘舰衔铮?-(2-氯-6-氟代苯基)-5-甲基異噁-4-唑基活化酸。
最后，式ⅩⅢ的化合物可環(huán)化和除去樹脂以形成式ⅩⅣ化合物。該轉(zhuǎn)化過(guò)程可通過(guò)將式ⅩⅢ的樹脂鍵合的化合物在合適溶劑中暴露于合適熱力學(xué)堿中完成。通常優(yōu)選和方便的溶劑是四氫呋喃，通常方便和優(yōu)選的熱力學(xué)堿是氫氧化鈉，作為在甲醇中的2N溶液加入。反應(yīng)通常在約15℃-約混合物的回流溫度下進(jìn)行30分鐘-約18小時(shí)，優(yōu)選反應(yīng)在室溫下進(jìn)行約18小時(shí)。堿通常以大摩爾過(guò)量進(jìn)行，相對(duì)于式ⅩⅣ化合物通常為約10-約15摩爾過(guò)量，優(yōu)選使用約11-約13摩爾過(guò)量。
在式Ⅰ的環(huán)化化合物中存在的任何氨基保護(hù)基團(tuán)可選擇性地如Greene中所教導(dǎo)除去以得到游離胺。保護(hù)基團(tuán)和它們的除去方法的優(yōu)選選擇在如下制備例和實(shí)施例部分公開。
本發(fā)明的可藥用的鹽通常通過(guò)將式Ⅰ化合物與等摩爾或過(guò)量酸反應(yīng)制備。反應(yīng)物通常在共有溶劑，例如乙醚、四氫呋喃、甲醇、乙醇、異丙醇、苯等。鹽通常在約1小時(shí)-約10天內(nèi)由溶液中沉淀出來(lái)，可通過(guò)過(guò)濾或其它常規(guī)方法分離。
通常用于形成可藥用酸加成鹽的酸是無(wú)機(jī)酸，例如鹽酸、氫溴酸、氫碘酸、硫酸、磷酸等，和有機(jī)酸，例如對(duì)甲苯磺酸、甲磺酸、乙磺酸、草酸、對(duì)溴苯基磺酸、碳酸、琥珀酸、檸檬酸、酒石酸、苯甲酸、乙酸等。優(yōu)選的可藥用酸加成鹽是用無(wú)機(jī)酸，例如鹽酸、氫溴酸和硫酸形成的鹽，和用有機(jī)酸，例如馬來(lái)酸、酒石酸和甲磺酸形成的鹽。
應(yīng)認(rèn)識(shí)到形成本發(fā)明的任何鹽部分的特定抗衡離子不是關(guān)鍵的性質(zhì)，只要鹽作為整體是藥用的和抗衡離子不對(duì)鹽的整體帶來(lái)不需要的質(zhì)量。
式Ⅱ、Ⅳ、Ⅶ、ⅤⅢⅠ、Ⅸ和Ⅻ化合物是現(xiàn)有技術(shù)中已知的，對(duì)于商業(yè)上無(wú)法獲得的物質(zhì)可通過(guò)現(xiàn)有技術(shù)中采用的標(biāo)準(zhǔn)方法容易地合成。例如式Ⅰ化合物可如如下制備例部分所述制備。
用于進(jìn)行方案1反應(yīng)的最佳時(shí)間可通過(guò)用常規(guī)色譜法技術(shù)監(jiān)測(cè)反應(yīng)過(guò)程確定。此外，優(yōu)選在惰性氣氛下進(jìn)行本發(fā)明的反應(yīng)，例如氫氣，或尤其是氮?dú)?。溶劑的選擇通常不是關(guān)鍵的，只要所用的溶劑對(duì)于進(jìn)行的反應(yīng)是惰性的和充分增溶反應(yīng)物以進(jìn)行所需的反應(yīng)即可。本發(fā)明的中間體化合物優(yōu)選在用于隨后反應(yīng)之前分離和純化，中間體的純化通常包括如上所述的洗滌樹脂。式Ⅰ化合物可在其形成過(guò)程中由反應(yīng)溶液中結(jié)晶，隨后通過(guò)過(guò)濾收集這些化合物，此外可通過(guò)提取、蒸發(fā)或傾析除去反應(yīng)溶劑。如果需要，式Ⅰ的這些最終產(chǎn)物可通過(guò)常規(guī)技術(shù)，例如重結(jié)晶或在固體載體，例如硅膠或氧化鋁上的色譜法進(jìn)一步純化。
提供如下制備例和實(shí)施例以更好地說(shuō)明本發(fā)明的實(shí)踐，不應(yīng)解釋為以任何方式限制本發(fā)明的范圍。本領(lǐng)域的技術(shù)人員將認(rèn)識(shí)到可進(jìn)行各種改性而不違背本發(fā)明的精神和范圍。在說(shuō)明書中提到的所有出版物是對(duì)本發(fā)明的領(lǐng)域中技術(shù)人員的指示。用于制備例和實(shí)施例的術(shù)語(yǔ)和縮寫具有其通常的含義，除非另有說(shuō)明。例如℃、N、mmol、g、ml、M、HPLC、MS(IS)、MS(FAB)和H NMR分別是指攝氏度、當(dāng)量或當(dāng)量濃度、毫摩爾或毫摩爾數(shù)、克或克數(shù)、毫升或毫升數(shù)、摩爾或摩爾濃度、高性能液相色譜、離子噴灑質(zhì)譜、快速原子轟擊質(zhì)譜和質(zhì)子核磁共振。此外，在IR光譜中列出的吸收最大值只是感興趣的數(shù)值，不是所有觀察到的最大值。
制備例制備例16-硝基-1-二氫化茚酮在0℃下向1-二氫化茚酮(25.0g，189mmol)在濃硫酸(84ml)中的溶液中以足以保持低于15℃的內(nèi)部溫度下加入硝酸鉀(8.33g，82.4mmol)在硫酸(40ml)中的溶液。在加完后，使反應(yīng)混合物在0℃下攪拌1小時(shí)，將反應(yīng)混合物傾入碎冰中，劇烈攪拌30分鐘，隨后過(guò)濾懸浮液，空氣干燥和通過(guò)液相色譜法(5％乙酸乙酯/甲苯)純化得到18.90g標(biāo)題化合物(56％)。
制備例26-硝基-1-二氫化茚醇將6-硝基-1-二氫化茚酮(18.9g，107mmol)在甲醇(300ml)中的溶液冷卻到0℃，以若干小批量加入硼氫化鈉(4.04g，107mmol)，反應(yīng)混合物隨后在25℃下攪拌過(guò)夜。溶液在0℃下用甲醇鹽酸(200ml)驟冷，用水洗滌，有機(jī)層再次濃縮得到粗醇，為棕色固體，它無(wú)需進(jìn)一步純化用于制備例3。
制備例36-硝基-1-茚向6-硝基-1-二氫化茚醇在甲苯(300ml)中的溶液中加入催化量的對(duì)-甲苯磺酸，將反應(yīng)混合物用Dean Stark分水器回流1小時(shí)以除去水。有機(jī)層用飽和碳酸氫鈉水溶液(3×200ml)洗滌、用硫酸鎂干燥、過(guò)濾和減壓除去濾液溶劑。粗殘余物由甲醇中結(jié)晶得到13.41g標(biāo)題化合物(兩步78％)。
制備例46-硝基-1，2-環(huán)氧二氫化茚在0℃向6-硝基-1-茚(10.5g，65.3mmol)在二氯甲烷(350ml)中的溶液中以小數(shù)量在1小時(shí)內(nèi)加入間氯過(guò)苯甲酸(29.0g，92.4mmol)。在25℃下攪拌過(guò)夜后，混合物用飽和亞硫酸鈉水溶液(2×200ml)和飽和碳酸氫鈉水溶液(2×200ml)洗滌，用棉花柱過(guò)濾和真空濃縮得到標(biāo)題化合物，它無(wú)需進(jìn)一步純化用于制備例5中。
制備例5反-6-硝基-1-氨基-2-羥基二氫化茚將6-硝基-1，2-環(huán)氧二氫化茚在濃氫氧化銨(250ml)中的懸浮液在45℃的油浴中加熱過(guò)夜。第二天加入水，堿性水層用氯化鈉飽和，混濁的反應(yīng)混合物用四氫呋喃提取直至由TLC不能在水層中更多的產(chǎn)物?；旌嫌袡C(jī)層，用硫酸鎂干燥，過(guò)濾、濃縮和由乙酸乙酯中重結(jié)晶得到11.54g標(biāo)題化合物(兩步91％)。
制備例6
反-N-叔丁氧基羰基-6-硝基-1-氨基-2-羥基二氫化茚向反-6-硝基-1-氨基-2-羥基二氫化茚(8.34g，42.9mmol)在四氫呋喃(200ml)中的溶液中加入二叔丁基焦碳酸酯(11.3g，51.5mmol)在四氫呋喃(50ml)中的溶液，在25℃下攪拌1小時(shí)后，減壓除去溶劑，得到的固體由乙酸乙酯中重結(jié)晶得到11.37g標(biāo)題化合物(90％)。
制備例7反-0-樹脂鍵合的1-氨基-2-羥基-6-硝基二氫化茚的固相合成步驟1樹脂的活化/鍵合到樹脂-反-0-樹脂鍵合的N-叔丁氧基羰基-1-氨基-2-羥基-6-硝基二氫化茚在氮?dú)鈿夥障拢趲в兴敂嚢杵骱吞砑勇┒返?L三頸圓底燒瓶中加入羧基化聚苯乙烯樹脂(70g，2.8mmol，CO2H/g樹脂)、無(wú)水二氯甲烷(1L)和無(wú)水二甲基甲酰胺(10ml)。隨后由添加漏斗經(jīng)緩慢滴加加入草酰氯(50.8ml，582mmol)，在氮?dú)庵谢亓鬟^(guò)夜后，用氣體分散管真空除去溶劑。樹脂隨后用無(wú)水二氯甲烷(3×500ml)洗滌，一旦最后的洗滌完成后，真空干燥樹脂2-3小時(shí)。同時(shí)，將聚合物重新懸浮在無(wú)水四氫呋喃(1L)，隨后加入無(wú)水吡啶(314ml，3.88mol)、DMAP(12g，97mmol)和反-O-樹脂鍵合的1-氨基-2-羥基-6-硝基二氫化茚(85.6g，291mmol)?；旌衔镌诙栊詺夥罩谢亓?0天，真空過(guò)濾除去溶劑，樹脂用四氫呋喃(3×300ml)、二氯甲烷(3×300ml)洗滌，在真空烘箱中干燥過(guò)夜得到122.18g標(biāo)題化合物，為黃褐色樹脂。
步驟2去保護(hù)-反-0-樹脂鍵合的1-氨基-2-羥基-6-硝基二氫化茚在裝有攪拌棒的圓底燒瓶中放入反-0-樹脂鍵合的N-叔丁氧基羰基-1-氨基-2-羥基-6-硝基二氫化茚(28mg，0.028mmol)、500μl二氯甲烷和三氟乙酸(109μl，0.141mmol)，將反應(yīng)混合物在25℃下攪拌過(guò)夜。通過(guò)過(guò)濾收集樹脂，重新懸浮在10％三乙胺/二氯甲烷中，攪拌15分鐘，重新過(guò)濾，最后用二氯甲烷洗滌得到標(biāo)題化合物。
制備例8-36的一般方法反-0-樹脂鍵合的N-“R”-(異噁唑并[3,4-c]-1,2-二氫-3-甲基-6-氯喹啉-2-酮基)-1-氨基-2-羥基二氫化茚 步驟安裝“R”部分-反-O-樹脂鍵合的N-“R”-1-氨基-2-羥基-6-硝基二氫化茚 在10ml圓底燒瓶中加入反-0-樹脂鍵合的1-氨基-2-羥基-6-硝基二氫化茚(0.0283mmol)，隨后加入500μl吡啶(36.6μl，0.452mmol)和DMAP(0.518mg，0.00424mmol)在二氯甲烷中的溶液。隨后加入商業(yè)上可獲得的式Ⅵ、Ⅶ或Ⅷ化合物在二氯甲烷中的1M溶液(184μl，0.184mmol)，將得到的混合物在25℃下攪拌過(guò)夜，此時(shí)，通過(guò)真空過(guò)濾除去溶劑，樹脂分別用50ml的二氯甲烷、二甲基甲酰胺、甲醇、二甲基甲酰胺、甲醇和二氯甲烷洗滌得到標(biāo)題化合物(式Ⅹ化合物)。
步驟2還原-反-0-樹脂鍵合的6-氨基-1-(N-“R”)-氨基-2-羥基二氫化茚 向反-0-樹脂鍵合的N-“R”-1-氨基-2-羥基-6-硝基二氫化茚(0.0283mmol)在二甲基甲酰胺(0.625ml)的溶液中加入氯化錫(Ⅱ)二水合物(102mg,0.452mmol)，在25℃下攪拌48小時(shí)，通過(guò)過(guò)濾分離樹脂，分別用50ml二氯甲烷、二甲基甲酰胺、甲醇、二甲基甲酰胺、甲醇和二氯甲烷洗滌得到標(biāo)題化合物(式Ⅺ化合物)。
步驟3?；?反-0-樹脂鍵合的N-“R”-(異噁唑并[3,4-c]-1,2-二氫-3-甲基-6-氯喹啉-2-酮基)-1-氨基-2-羥基二氫化茚 在10ml圓底燒瓶中加入反-0-樹脂鍵合的6-氨基-1-((N-“R”)-氨基)-2-羥基-二氫化茚(0.0283mmol)，隨后加入500μl吡啶(36.6μl,0.452mmol)和DMAP(0.518mg,0.00424mmol)在二氯甲烷中的溶液。隨后加入3-(2-氯-6-氟苯基)5-甲基異噁-4-唑基氯化物在二氯甲烷中的1M溶液(184μl,0.184mmol)，將得到的混合物在25℃下攪拌過(guò)夜，此時(shí)，通過(guò)真空過(guò)濾除去溶劑，樹脂分別用50ml的二氯甲烷、二甲基甲酰胺、甲醇、二甲基甲酰胺、甲醇和二氯甲烷洗滌得到二酰基化產(chǎn)物(式ⅩⅢ化合物)。
制備例8-36相應(yīng)于用于如下實(shí)施例1-29的前體。
制備例37反-6-氨基-1-((N-叔丁氧基羰基)-氨基)-2-羥基二氫化茚鈀/碳(10％,500mg)用甲醇潤(rùn)濕，加入溶解于100ml甲醇中的反-N-叔丁氧基羰基-6-硝基-1-氨基-2-羥基二氫化茚(2.63g,8.94mmol)。在50psi下產(chǎn)生氫氣氣氛，保持在Parr搖動(dòng)器中18小時(shí)。通過(guò)滑石過(guò)濾出催化劑，用甲醇洗滌。真空除去甲醇得到2.23g標(biāo)題化合物(94％)。MS(FD)m/z 264(M+)。IR(CHCl3)3444，3009,2983,1692,1625cm-1。
制備例38
1-(反-1-((N-叔丁氧基羰基)-氨基)-2-羥基二氫化茚-6-基)異噁唑并[3,4-c]-1,2-二氫-3-甲基-6-氯喹啉-2-酮將反-1-((N-叔丁氧基羰基)-氨基)-6-氨基-2-羥基二氫化茚(4g,7.97mmol)溶解在l0ml2N氫氧化鈉甲醇溶液，在氮?dú)庀略谑覝財(cái)嚢?8小時(shí)。用乙酸乙酯稀釋反應(yīng)混合物，用1N含水鹽酸和鹽水洗滌，用硫酸鈉干燥，過(guò)濾和濃縮。殘余物由二氯甲烷中重結(jié)晶得到4.07g標(biāo)題化合物(100％)。C25H24ClN3O5EA計(jì)算值C,62.31；H,5.02；N,8.72。實(shí)驗(yàn)值C,62.11；H,5.08,N,8.65。MS(FD)m/z 481(M-H)。
制備例391-(反-1-氨基-2-羥基二氫化茚-6-基)異噁唑并[3,4-c]-1,2-二氫-3-甲基-6-氯喹啉-2-酮三氟乙酸鹽將1-(反-1-((N-叔丁氧基羰基)-氨基)-2-羥基二氫化茚-6-基)異噁唑并[3,4-c]-1,2-二氫-3-甲基-6-氯喹啉-2-酮(759mg,1.57mmol)溶解在25ml無(wú)水二氯甲烷中，在氮?dú)庀略谑覝財(cái)嚢?。加入三氟乙?10ml)，反應(yīng)混合物攪拌1小時(shí)。隨后真空除去溶劑，殘余物用二氯甲烷/己烷處理沉淀出850mg標(biāo)題化合物(100％)。MS(FD)m/z 38l(M+)。IR(KBr)3058,2998,1792,1657,1629,1598cm-1。
實(shí)施例實(shí)施例1-29的一般方法向加入了反-O-樹脂鍵合的N-“R”-6-(異噁唑并[3,4-c]-1,2-二氫-3-甲基-6-氯喹啉-2-酮基)-1-氨基-2-羥基二氫化茚(0.0283mmol)的燒瓶中加入氫氧化鈉在甲醇中的1M溶液(375μl,0.375mmol)和四氫呋喃(400μl)。在25℃攪拌后，反應(yīng)混合物用4M鹽酸的甲醇溶液(100μl,0.400mmol)中和。過(guò)濾樹脂，減壓濃縮濾液得到實(shí)施例1-29的化合物，它們滿足1H NMR和MS(IS)分析。
實(shí)施例11-(反-1-((N-乙?；?-氨基)-2-羥基二氫化茚-6-基)異噁唑并[3,4-c]-1,2-二氫-3-甲基-6-氯喹啉-2-酮實(shí)施例21-(反-1-((N-苯甲?；?-氨基)-2-羥基二氫化茚-6-基)異噁唑并[3,4-c]-1,2-二氫-3-甲基-6-氯喹啉-2-酮實(shí)施例31-(反-1-((N-[4-甲基苯甲?；鵠)-氨基)-2-羥基二氫化茚-6-基)異噁唑并[3,4-c]-1,2-二氫-3-甲基-6-氯喹啉-2-酮實(shí)施例41-(反-1-((N-[4-甲氧基苯甲酰基])-氨基)-2-羥基二氫化茚-6-基)異噁唑并[3,4-c]-1,2-二氫-3-甲基-6-氯喹啉-2-酮實(shí)施例51-(反-1-((N-[4-氟苯甲?；鵠)-氨基)-2-羥基二氫化茚-6-基)異噁唑并[3,4-c]-1,2-二氫-3-甲基-6-氯喹啉-2-酮實(shí)施例61-(反-1-((N-[4-氯苯甲酰基])-氨基)-2-羥基二氫化茚-6-基)異噁唑并[3,4-c]-1,2-二氫-3-甲基-6-氯喹啉-2-酮實(shí)施例71-(反-1-((N-[α-苯基乙?；鵠)-氨基)-2-羥基二氫化茚-6-基)異噁唑并[3,4-c]-1,2-二氫-3-甲基-6-氯喹啉-2-酮實(shí)施例81-(反-1-((N-[α-(4-氯苯基)乙酰基])-氨基)-2-羥基二氫化茚-6-基)異噁唑并[3,4-c]-1,2-二氫-3-甲基-6-氯喹啉-2-酮實(shí)施例91-(反-1-((N-[α-苯氧基乙?；鵠)-氨基)-2-羥基二氫化茚-6-基)異噁唑并[3,4-c]-1,2-二氫-3-甲基-6-氯喹啉-2-酮實(shí)施例101-(反-1-((N-[α-苯氧基丁?；鵠)-氨基)-2-羥基二氫化茚-6-基)異噁唑并[3,4-c]-1,2-二氫-3-甲基-6-氯喹啉-2-酮實(shí)施例111-(反-1-((N-[α-苯基-α-乙酰氧基丁酰基])-氨基)-2-羥基二氫化茚-6-基)異噁唑并[3,4-c]-1,2-二氫-3-甲基-6-氯喹啉-2-酮實(shí)施例121-(反-1-((N-萘?；?-氨基)-2-羥基二氫化茚-6-基)異噁唑并[3,4-c]-1,2-二氫-3-甲基-6-氯喹啉-2-酮實(shí)施例13N-正丁基-N’-(反-2-羥基-6-(異噁唑并[3,4-c]-1,2-二氫-3-甲基-6-氯喹啉-2-酮基)二氫化茚基脲實(shí)施例14N-環(huán)己基-N’-(反-2-羥基-6-(異噁唑并[3,4-c]-1,2-二氫-3-甲基-6-氯喹啉-2-酮基)二氫化茚基脲實(shí)施例15N-苯基-N’-(反-2-羥基-6-(異噁唑并[3,4-c]-1,2-二氫-3-甲基-6-氯喹啉-2-酮基)二氫化茚基脲實(shí)施例16N-(4-異丙基苯基)-N’-(反-2-羥基-6-(異噁唑并[3,4-c]-1,2-二氫-3-甲基-6-氯喹啉-2-酮基)二氫化茚基脲實(shí)施例17N-(3-三氟甲基苯基)-N’-(反-2-羥基-6-(異噁唑并[3,4-c]-1,2-二氫-3-甲基-6-氯喹啉-2-酮基)二氫化茚基脲實(shí)施例18N-(4-甲氧基苯基)-N’-(反-2-羥基-6-(異噁唑并[3,4-c]-1,2-二氫-3-甲基-6-氯喹啉-2-酮基)二氫化茚基脲實(shí)施例19N-(3-乙?；交?-N’-(反-2-羥基-6-(異噁唑并[3,4-c]-1,2-二氫-3-甲基-6-氯喹啉-2-酮基)二氫化茚基脲實(shí)施例20N-(3-(氨基甲基)苯基)-N’-(反-2-羥基-6-(異噁唑并[3,4-c]-1,2-二氫-3-甲基-6-氯喹啉-2-酮基)二氫化茚基脲實(shí)施例21N-(3-羰基乙氧基苯基)-N’-(反-2-羥基-6-(異噁唑并[3,4-c]-1,2-二氫-3-甲基-6-氯喹啉-2-酮基)二氫化茚基脲實(shí)施例221-(反-1-((N-[3-硝基苯基磺酰基])-氨基)-2-羥基二氫化茚-6-基)異噁唑并[3,4-c]-1,2-二氫-3-甲基-6-氯喹啉-2-酮實(shí)施例231-(反-1-((N-[(5-甲基異噁唑-4-基)磺?；鵠)-氨基)-2-羥基二氫化茚-6-基)異噁唑并[3,4-c]-1,2-二氫-3-甲基-6-氯喹啉-2-酮實(shí)施例24
N-(3-三氟苯基)-N’-(反-2-羥基-6-(異噁唑并[3,4-c]-1,2-二氫-3-甲基-6-氯喹啉-2-酮基)二氫化茚基異硫脲實(shí)施例25N-(N-乙?；?3-氨基苯基)-N’-(反-2-羥基-6-(異噁唑并[3,4-c]-1,2-二氫-3-甲基-6-氯喹啉-2-酮基)二氫化茚基異硫脲實(shí)施例261-(反-1-((N-[呋喃-2-基])-氨基)-2-羥基二氫化茚-6-基)異噁唑并[3,4-c]-1,2-二氫-3-甲基-6-氯喹啉-2-酮實(shí)施例271-(反-1-((N-[1H-吲哚-3-基])-氨基)-2-羥基二氫化茚-6-基)異噁唑并[3,4-c]-1,2-二氫-3-甲基-6-氯喹啉-2-酮實(shí)施例281-(反-1-((N-[α-(噻吩-2-基)乙?；鵠)-氨基)-2-羥基二氫化茚-6-基)異噁唑并[3,4-c]-1,2-二氫-3-甲基-6-氯喹啉-2-酮實(shí)施例291-(反-1-((N-[5-甲基異噁唑-3-基])-氨基)-2-羥基二氫化茚-6-基)異噁唑并[3,4-c]-1,2-二氫-3-甲基-6-氯喹啉-2-酮(原文第28頁(yè)方框，空7行)實(shí)施例301-(反-1-((N-[3,4,5-三甲氧基苯甲?；鵠)-氨基)-2-羥基二氫化茚-6-基)異噁唑并[3,4-c]-1,2-二氫-3-甲基-6-氯喹啉-2-酮將1-(反-1-氨基)-2-羥基二氫化茚-6-基)異噁唑并[3,4-c]-1,2-二氫-3-甲基-6-氯喹啉-2-酮三氟乙酸鹽(305mg,0.615mmol)溶解在10ml無(wú)水二甲基甲酰胺中，在室溫和氮?dú)庵袛嚢?。加?,4,5-三甲氧基苯甲?；?142mg,0.615mmol)，隨后加入三乙胺(187mg,1.85mmol)。反應(yīng)混合物攪拌約18小時(shí)，加工如下用乙酸乙酯和1N含水鹽酸稀釋，用1N含水鹽水洗滌有機(jī)層，用碳酸氫鈉和鹽水洗滌有機(jī)層3次，用硫酸鈉干燥有機(jī)層。除去乙酸乙酯，白色固體用二氯甲烷/己烷研制得到275mg標(biāo)題化合物(78％)。MS(IS)576(M+)。C30H26ClN3O7EA計(jì)算值C,62.56；H,4.55；N,7.30。實(shí)驗(yàn)值C,62.41；H,4.40；N,7.19。
本發(fā)明的化合物是MRP1的抑制劑，因此，本發(fā)明的化合物可用于抑制任何具有內(nèi)在的和/或部分或全部由MRP1帶來(lái)的抗藥性的任何腫瘤。換句話說(shuō)，用有效量的本發(fā)明的化合物治療該腫瘤將導(dǎo)致腫瘤對(duì)由于MRP1而使得不太有效的化學(xué)治療更敏感。
長(zhǎng)春新堿、表柔比星、柔紅霉素、阿霉素和依托伯苷是溶癌藥物，它們是MRP1的酶作用物，參見(jiàn)Cole等，多藥物抗藥性MRP轉(zhuǎn)染的人體腫瘤細(xì)胞的藥理學(xué)表征，Cancer Research,545902-5910。由于MRP1在哺乳動(dòng)物中，尤其在人體中是普遍存在的，Nooter,K，等，在人體癌癥中與多藥物抗藥性有關(guān)的蛋白質(zhì)(MRP)基因的表達(dá)，Clin.Can.Res.,11301-1310,(1995)，其目的是采用任何試劑抑制腫瘤的化學(xué)治療會(huì)由于MRP1而變得不太有效。因此，膀胱、骨骼、乳腺、肺(小細(xì)胞)、睪丸和甲狀腺的腫瘤，和更具體類型的癌癥，例如急性成淋巴細(xì)胞和成髓細(xì)胞白血病、腎胚胎腫瘤、成神經(jīng)細(xì)胞瘤、軟組織肉瘤、霍奇金和非霍奇金腫瘤和支氣管癌可用一種或多種上述溶癌藥物和本發(fā)明的化合物的結(jié)合抑制。
本發(fā)明的化合物的生物學(xué)活性用初期的篩選試驗(yàn)評(píng)價(jià)，它迅速和準(zhǔn)確地測(cè)定所測(cè)試的化合物抑制MRP1或MDR1活性。用于評(píng)價(jià)該逆轉(zhuǎn)能力的試驗(yàn)是現(xiàn)有技術(shù)中已知的。參見(jiàn)例如McGrath等，BiochemicalPharmacology,383611,1989；D.Marquardt和M.S.Center,Cancer Research,523157,1992；D.Marquardt等CancerResearch,501426,1990；和Cole等，Cancer Research,545902-5910,1994。
用于MRP1傳遞的阿諾素抗藥性和MDR1傳遞的長(zhǎng)春新堿抗藥性逆轉(zhuǎn)的試驗(yàn)HL60/ADR和HL60/VCR是連續(xù)細(xì)胞系，分別用于阿諾素和長(zhǎng)春新堿抗藥性，在增加濃度的阿諾素或長(zhǎng)春新堿中培養(yǎng)HL60，人體急性原始粒細(xì)胞性白血病細(xì)胞系直至獲得高抗藥性變體。
HL/60ADR和HL60/VCR細(xì)胞在含有10％牛犢胎血清(FBS)和250μM/ml GENTAMICINTM(Sigma)的RPMI 1640(Gibco)中生長(zhǎng)，收獲細(xì)胞，用試驗(yàn)介質(zhì)(與培養(yǎng)介質(zhì)相同)洗滌兩次，計(jì)數(shù)，在試驗(yàn)介質(zhì)中稀釋至2x105細(xì)胞/ml。將15微升細(xì)胞等分至加入96孔組織培養(yǎng)板的孔中，每個(gè)96孔板的一欄用作負(fù)對(duì)照，加入不含有細(xì)胞的試驗(yàn)介質(zhì)。
將試驗(yàn)化合物和參考化合物以5mM的濃度溶解在二甲基亞砜(DMSO)，樣品在試驗(yàn)介質(zhì)中稀釋至20μM，在6個(gè)孔中加入25μl每種化合物。試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)一式四份，將25μl 0.4％DMSO加入4個(gè)孔中作為溶劑對(duì)照，將試驗(yàn)介質(zhì)加入所有孔中以獲得每個(gè)孔100μl的最終體積。
將板在具有5％二氧化碳?xì)夥盏某睗衽囵B(yǎng)器中在37℃培養(yǎng)72小時(shí)，采用標(biāo)準(zhǔn)條件通過(guò)四唑翁鹽的氧化測(cè)定細(xì)胞生活力和活力，板在37℃下培養(yǎng)3小時(shí)，用微量滴定板計(jì)數(shù)儀在490nm測(cè)定吸光率。
試驗(yàn)化合物逆轉(zhuǎn)HL60/ADR和HLL60/VCR細(xì)胞對(duì)阿諾素的抗藥性的能力通過(guò)比較含有除溶癌藥物(阿諾素)之外的試驗(yàn)化合物的孔的吸光率和含有溶癌藥物而不含試驗(yàn)化合物的孔的吸光率測(cè)定。對(duì)照組用于確定基礎(chǔ)以確保結(jié)果是非人工的。試驗(yàn)結(jié)果用細(xì)胞生長(zhǎng)的百分抑制率表示。在試驗(yàn)濃度下單獨(dú)的溶癌藥物通常不能抑制HL60/ADR和HL60/VCR細(xì)胞的生長(zhǎng)。
式Ⅰ的代表性化合物說(shuō)明在逆轉(zhuǎn)MRP1多藥物抗藥性方面的明顯效果，與單獨(dú)的溶癌藥物相反，與溶癌藥物結(jié)合許多化合物顯示非常明顯的活性提高。此外，所試驗(yàn)的大部分化合物顯示對(duì)HL60/ADR細(xì)胞系比對(duì)HL60/VCR細(xì)胞系的明顯程度的選擇性抑制。
在本發(fā)明的方法中當(dāng)給藥溶癌藥物時(shí)，所使用的溶癌藥物的數(shù)量是可變的。應(yīng)理解實(shí)際給藥的溶癌藥物的量將由醫(yī)師根據(jù)有關(guān)事項(xiàng)，包括所治療的癥狀、所選擇的給藥途徑、給藥的實(shí)際溶癌藥物、每個(gè)患者(哺乳動(dòng)物)的年齡、體重和響應(yīng)和患者癥狀的嚴(yán)重程度確定。當(dāng)然，給藥的溶癌藥物的數(shù)量將由患者的醫(yī)師決定和密切監(jiān)督。在決定所使用的溶癌藥物之后，The Physician’s Desk Reference,MedicalEconomics Company,Montvale,NJ 07645-1742出版，對(duì)于醫(yī)師在決定給藥的溶癌藥物的數(shù)量方面是有用的資源，是每年更新的。
優(yōu)選的制劑和使用這些制劑的本發(fā)明的方法是不包含溶癌藥物的方法，因此，優(yōu)選本發(fā)明的化合物與溶癌藥物分開給藥。在說(shuō)明書中提到的上述溶癌藥物是商業(yè)可獲得的，可以適用于本發(fā)明方法的預(yù)配制形式給藥。
單獨(dú)的式Ⅰ化合物，或選擇性地與溶癌藥物的結(jié)合通常以藥物制劑的形式給藥，這些制劑可通過(guò)各種途徑給藥，包括口服、直腸、眼內(nèi)、皮下、靜脈內(nèi)、肌內(nèi)和鼻內(nèi)。該制劑以藥物領(lǐng)域中已知的方法制備，其包括至少一種式Ⅰ的活性化合物。
本發(fā)明還包括使用藥物制劑的方法，所述制劑含有作為活性組分的式Ⅰ化合物，和選擇性地一種溶癌藥物和可藥用載體。在制備本發(fā)明的制劑過(guò)程中，活性組分通常與賦形劑混合，用賦形劑稀釋或封閉在該載體中，它們可以是膠囊、藥囊、紙或其它容器形式。當(dāng)賦形劑用作稀釋劑時(shí)，它可以是固體、半固體或液體物質(zhì)，它們用作活性組分的賦形劑、載體或介質(zhì)。因此制劑可以是片劑、丸劑、粉末、錠劑、藥囊、扁囊劑、酏劑、懸浮劑、乳劑、溶液、糖漿、氣溶膠(作為固體或在液體介質(zhì)中)、含有例如按重量計(jì)至多10％活性化合物的軟膏、軟和硬明膠膠囊、栓劑、無(wú)菌注射溶液和無(wú)菌包裝粉末。
在制備制劑過(guò)程中，在與其它組分混合之前將需要粉碎活性化合物以得到合適的顆粒尺寸。如果活性化合物是基本上不溶解的，它通常粉碎至小于200目的顆粒尺寸。如果活性化合物是基本上溶解于水的，顆粒尺寸通常通過(guò)粉碎調(diào)節(jié)到提供在制劑中基本上均勻的分布，例如約40目。
合適賦形劑的某些實(shí)例包括乳糖、葡萄糖、蔗糖、山梨糖醇、甘露糖醇、淀粉、阿拉伯膠、磷酸鈣、藻酸鹽、黃芪膠、明膠、硅酸鈣、微晶纖維素、聚乙烯吡咯烷酮、纖維素、水、糖漿劑和甲基纖維素。制劑還可附加地包括潤(rùn)滑劑，例如滑石、硬脂酸鎂和礦物油；潤(rùn)濕劑；乳化和懸浮劑；防腐劑，例如甲基和丙基羥基苯甲酸酯；增甜劑；和香料劑。本發(fā)明的制劑可配制以便在給藥后通過(guò)采用本領(lǐng)域中已知的方法向患者提供快速、持續(xù)或延遲釋放的活性組分。
制劑優(yōu)選配制成單位劑量形式，每個(gè)劑量含有約5-約100mg，更常見(jiàn)的約10-約30mg的活性組分。術(shù)語(yǔ)“單位劑量形式”是指適用于人體受體和其它哺乳動(dòng)物的單元?jiǎng)┝康奈锢矸稚⒌膯挝?，每個(gè)單位含有得到所需治療效果的預(yù)定數(shù)量的活性物質(zhì)和合適的藥物賦形劑。
式Ⅰ化合物在各種劑量范圍內(nèi)是有效的，例如日劑量通常為約0.5-約30mg/kg體重。在治療成年人時(shí)，以單個(gè)或分開的劑量，約1-約15mg/kg/天的范圍是尤其優(yōu)選的。然而，應(yīng)理解化合物實(shí)際給藥的數(shù)量將由醫(yī)師根據(jù)有關(guān)事項(xiàng)，包括所治療的癥狀、所選擇的給藥途徑、給藥的實(shí)際化合物、每個(gè)患者(哺乳動(dòng)物)的年齡、體重和響應(yīng)和患者癥狀的嚴(yán)重程度確定，因此，上述劑量范圍不是以任何方式限制本發(fā)明的范圍。在某些情況下，劑量水平低于上述范圍的下限將是非常足夠的，而在其它情況下，會(huì)采用更大的劑量而不產(chǎn)生任何有害的副作用，只要在一整天內(nèi)該較大劑量首先分成若干較小劑量給藥即可。
為制備固體制劑，例如片劑，主要的活性組分與藥物賦形劑混合以形成含有本發(fā)明的化合物的均勻混合物的預(yù)配制組合物。當(dāng)稱這些預(yù)配制的組合物為均勻物時(shí)，它是指活性組分平均分散在整個(gè)制劑，使得制劑可容易地分成相等有效的單位劑量形式，例如片劑、丸劑和膠囊，該固體預(yù)配制物隨后分成含有0.1-約500mg本發(fā)明的活性組分的上述類型的單位劑量形式。
本發(fā)明的片劑或丸劑可涂覆或另外化合以得到提供延長(zhǎng)作用優(yōu)點(diǎn)的劑量形式。例如片劑或丸劑可含有內(nèi)劑量和外劑量組分，后者是前體之上的膜形式。兩種組分可由腸溶衣隔開，腸溶衣用于防止在胃中破碎，允許內(nèi)組分完整地進(jìn)入十二指腸或延緩釋放。各種物質(zhì)可用于該腸溶衣或涂層，例如包括各種聚合物酸和聚合物酸與諸如蟲膠、十六醇和纖維素乙酸酯的物質(zhì)的混合物的物質(zhì)。
液體形式的新制劑可以用于口服或通過(guò)注射給藥，包括水溶液、有合適香味的糖漿、含水或油懸浮液和含有可食用油，例如棉籽油、芝麻油、椰子油或花生油的加香味的乳液，以及酏劑和類似藥物賦形劑。
用于吸入或吹入的制劑包括在藥物、水或有機(jī)溶劑或它們的混合物中的溶液和懸浮液和粉末。液體或固體制劑可含有上述合適的藥物賦形劑。制劑優(yōu)選通過(guò)用于表面或系統(tǒng)效果的口腔或鼻腔呼吸途徑給藥。在優(yōu)選藥物溶劑中的組合物可通過(guò)使用惰性氣體噴霧，可噴霧的溶液可直接由噴霧裝置呼吸或噴霧裝置可連接于面罩、帷或間歇正壓呼吸機(jī)呼吸。溶液、懸浮液或粉末制劑可優(yōu)選由以合適方式提供制劑的裝置優(yōu)選由口腔或鼻腔給藥。
如下制劑實(shí)施例僅用于舉例說(shuō)明，而不是以任何方式限制本發(fā)明的范圍?！盎钚越M分”是指式Ⅰ的化合物或其可藥用鹽或溶劑化物，并選擇性地含有一種或多種溶癌藥物。
制劑實(shí)施例1制備含有如下組分的更明膠膠囊數(shù)量組分(mg/膠囊)
活性組分 30.0淀粉 305.0硬脂酸鎂 5.0混合上述組分，以340mg的數(shù)量填充入硬明膠膠囊中。
制劑實(shí)施例2使用如下組分制備片劑制劑數(shù)量組分 (mg/片)活性組分 25.0微晶纖維素200.0膠體二氧化硅 10.0硬脂酸 5.0混合組分，壓制成每個(gè)重240mg的片。
制劑實(shí)施例3制備含有如下組分的干粉吸入制劑組分 重量％活性組分 5乳糖 95將活性組分與乳糖混合，將混合物加入干粉吸入器具中。
制劑實(shí)施例4制備如下含有30mg活性組分的片劑組分 數(shù)量(mg/片)活性組分 30.0mg淀粉 45.0mg微晶纖維素 35.0mg聚乙烯基吡咯烷酮(水中的10％溶 4.0mg液)羧甲基淀粉鈉 4.5mg硬脂酸鎂 0.5mg滑石 1.0mg總共 120mg活性組分、淀粉和纖維素通過(guò)20號(hào)目US篩，充分混合。聚乙烯基吡咯烷酮的溶液與得到的粉末混合，隨后它們通過(guò)16目US篩。所產(chǎn)生的顆粒在50-60℃下干燥，通過(guò)16目US篩。將預(yù)先通過(guò)30號(hào)目US篩的羧甲基淀粉鈉、硬脂酸鎂和滑石加入顆粒中，在混合后在壓片機(jī)上壓制產(chǎn)生每個(gè)重120mg的片。
制劑實(shí)施例5制備如下含有40mg藥物的膠囊數(shù)量組分(mg/膠囊)活性組分 40.0mg淀粉109.0mg硬脂酸鎂 1.0mg總共150.0mg將活性組分、纖維素、淀粉和硬脂酸鎂混合，通過(guò)20號(hào)目US篩，填充入每個(gè)150mg的硬明膠膠囊。
制劑實(shí)施例6制備如下每個(gè)含有25mg活性組分的栓劑組分 數(shù)量活性組分 25mg飽和脂肪酸甘油酯至2000mg將活性組分通常60號(hào)目US篩，懸浮在用最少所需加熱預(yù)先熔融的飽和脂肪酸甘油酯中，隨后將混合物傾入正常2.0g容量的栓劑模型中，使其冷卻。
制劑實(shí)施例7制備如下每5.0ml劑量含有50mg藥物的懸浮液組分?jǐn)?shù)量活性組分 50.0mg黃原膠 4.0mg羧甲基纖維素鈉(11％) 50.0mg微晶纖維素(89％)蔗糖 1.75mg苯甲酸鈉 10.0mg香料和色素 q.v.
純水至 5.0ml將活性組分、蔗糖和黃原膠混合，通過(guò)10號(hào)目US篩，隨后與預(yù)先制備的微晶纖維素和羧甲基纖維素的水溶液混合。苯甲酸鈉、香料和色素用一些水稀釋，在攪拌下加入。隨后加入足夠的水以產(chǎn)生所需的體積。
制劑實(shí)施例8制備如下每個(gè)含有15mg藥物的膠囊數(shù)量組分 (mg/膠囊)活性組分 15.0mg淀粉 407.0mg硬脂酸鎂3.0mg總共 425.0mg將活性組分、纖維素、淀粉和硬脂酸鎂混合，通過(guò)20號(hào)目US篩，以425mg的數(shù)量填充入硬明膠膠囊中。
制劑實(shí)施例9制備如下靜脈內(nèi)制劑組分?jǐn)?shù)量活性組分 250.0mg等滲鹽水 1000ml制劑實(shí)施例10制備如下表面制劑組分?jǐn)?shù)量活性組分 1-10g乳化蠟 30g液體石蠟 20g白色軟石蠟至100g將白色軟石蠟加熱直至熔融，加入液體石蠟和乳化蠟，攪拌直至溶解。加入活性組分，持續(xù)攪拌直至分散，隨后將混合物冷卻直至固化。
制劑實(shí)施例11制備如下每個(gè)含有10mg活性組分的舌下或口腔片
組分 數(shù)量/片活性組分 10.mg甘油 210.5mg水 143.0mg檸檬酸鈉 4.5mg聚乙烯醇26.5mg聚乙烯吡咯烷酮 15.5mg總共 410.0mg將甘油、水、檸檬酸鈉、聚乙烯醇和聚乙烯吡咯烷酮通過(guò)連續(xù)攪拌和保持約90℃的溫度混合在一起。當(dāng)聚合物溶解在溶液中時(shí)，將溶液冷卻至約50-55℃，緩慢加入活性組分。將均勻混合物倒入由惰性物質(zhì)制造的模型中以產(chǎn)生含有厚度為約2-4mm的擴(kuò)散基質(zhì)的藥物。該擴(kuò)散基質(zhì)隨后切割以形成單個(gè)的具有合適尺寸的片劑。
另一用于本發(fā)明方法的優(yōu)選制劑采用經(jīng)皮提供裝置(“補(bǔ)片”)。該經(jīng)皮的補(bǔ)片可用于以控制的數(shù)量提供連續(xù)或不連續(xù)的本發(fā)明化合物的擴(kuò)散，用于提供藥物的經(jīng)皮補(bǔ)片的結(jié)構(gòu)和用途在現(xiàn)有技術(shù)中是已知的，參見(jiàn)例如1991年6月11日頒布的US5023252，列為本文參考文獻(xiàn)。該補(bǔ)片可構(gòu)成用于藥物的連續(xù)、搏動(dòng)或所需提供。
通常人們想要或需要將藥物制劑直接或間接輸入大腦。直接技術(shù)通常包括將藥物輸送導(dǎo)管放置在患者心室系統(tǒng)以旁路心腦障壁。一種用于將生物學(xué)因子輸送至身體的特定解剖學(xué)區(qū)域的植入提供系統(tǒng)在1991年4月30日頒布的US5011472中描述，列為本文參考文獻(xiàn)。
通常是優(yōu)選的間接技術(shù)通常包括配制組合物以通過(guò)將親水藥物轉(zhuǎn)化為脂溶藥物或前藥提供藥物潛伏化作用。潛伏化作用通常通過(guò)阻斷在藥物中存在的羥基、羰基、硫酸根和伯胺基團(tuán)使得藥物更加脂溶和會(huì)被接納以輸送通過(guò)心腦障壁。此外，親水藥物的提供可通過(guò)高滲溶液的動(dòng)脈內(nèi)擴(kuò)散提高，它可方便地打開心腦障壁。
權(quán)利要求
1．式Ⅰ的化合物 其中R是H、COR1、SO2R2或下式的部分 R1是C1-C4烷基、芳基、取代芳基、呋喃基、吲哚基、噻吩甲基、5-甲基異噁唑基、NHR4或CHR5OR6；R2是3，5-二甲基異噁唑基或苯基，其中苯基任選地被硝基、C1-C4烷基、三氟甲基、C1-C4烷氧基、C2-C4鏈烷?；?、羰基(C1-C4烷氧基)或氨基(C1-C4烷基)取代一次；R3是苯基，其中苯基任選地被三氟甲基或N-乙?；被〈淮?；R4是H、C1-C6烷基或苯基，其中苯基任選地被硝基、C1-C4烷基、三氟甲基、C1-C4烷氧基、C2-C4鏈烷?；?、羰基(C1-C4烷氧基)或氨基(C1-C4烷基)取代一次；R5是H、C1-C4烷基或苯基；和R6是苯基或乙?；换蚱淇伤幱玫柠}或溶劑化物。
2．權(quán)利要求1的化合物，其中R是COR1’R1是3,4,5-三甲氧基苯基。
3．抑制哺乳動(dòng)物MRP1的方法，其包括向需要的哺乳動(dòng)物給藥有效量的式Ⅰ化合物 其中R是H、COR1、SO2R2或下式的部分 R1是C1-C4烷基、芳基、取代芳基、呋喃基、吲哚基、噻吩甲基、5-甲基異噁唑基、NHR4或CHR5OR6；R2是3，5-二甲基異噁唑基或苯基，其中苯基任選地被硝基、C1-C4烷基、三氟甲基、C1-C4烷氧基、C2-C4鏈烷酰基、羰基(C1-C4烷氧基)或氨基(C1-C4烷基)取代一次；R3是苯基，其中苯基任選地被三氟甲基或N-乙?；被〈淮危籖4是H、C1-C6烷基或苯基，其中苯基任選地被硝基、C1-C4烷基、三氟甲基、C1-C4烷氧基、C2-C4鏈烷?；?、羰基(C1-C4烷氧基)或氨基(C1-C4烷基)取代一次；R5是H、C1-C4烷基或苯基；和R6是苯基或乙酰基；或其可藥用的鹽或溶劑化物。
4．權(quán)利要求2的方法，其中哺乳動(dòng)物是人體。
5．權(quán)利要求4的方法，其中式Ⅰ化合物是其中R是COR1R1是3,4,5-三甲氧基苯基的化合物。
6．抑制哺乳動(dòng)物抗藥性腫瘤或易受抗藥性的腫瘤的方法，其包括向需要的哺乳動(dòng)物給藥有效量的式Ⅰ化合物 其中R是H、COR1、SO2R2或下式的部分 R1是C1-C4烷基、芳基、取代芳基、呋喃基、吲哚基、噻吩甲基、5-甲基異噁唑基、NHR4或CHR5OR6；R2是3，5-二甲基異噁唑基或苯基，其中苯基任選地被硝基、C1-C4烷基、三氟甲基、C1-C4烷氧基、C2-C4鏈烷?；?、羰基(C1-C4烷氧基)或氨基(C1-C4烷基)取代一次；R3是苯基，其中苯基任選地被三氟甲基或N-乙?；被〈淮?；R4是H、C1-C6烷基或苯基，其中苯基任選地被硝基、C1-C4烷基、三氟甲基、C1-C4烷氧基、C2-C4鏈烷?；?、羰基(C1-C4烷氧基)或氨基(C1-C4烷基)取代一次；R5是H、C1-C4烷基或苯基；和R6是苯基或乙?；?；或其可藥用的鹽或溶劑化物，并結(jié)合有效量的一種或多種溶癌藥物。
7．權(quán)利要求6的方法，其中哺乳動(dòng)物是人體。
8．權(quán)利要求7的方法，其中溶癌藥物選自阿霉素、柔紅霉素、表柔比星、長(zhǎng)春新堿和依托伯苷。
9．權(quán)利要求7的方法，其中腫瘤是腎胚胎腫瘤、膀胱、骨骼、乳腺、肺(小細(xì)胞)、睪丸和甲狀腺的腫瘤或與急性成淋巴細(xì)胞和成髓細(xì)胞白血病、成神經(jīng)細(xì)胞瘤、軟組織肉瘤、霍奇金和非霍奇金腫瘤和支氣管癌有關(guān)的腫瘤。
10．權(quán)利要求7-9的任何之一的方法，其中式Ⅰ化合物是其中R是COR1和R1是3，4，5-三甲氧基苯基的化合物。
11．藥物制劑，其含有式Ⅰ化合物 其中R是H、COR1、SO2R2或下式的部分 R1是C1-C4烷基、芳基、取代芳基、呋喃基、吲哚基、噻吩甲基、5-甲基異噁唑基、NHR4或CHR5OR6；R2是3，5-二甲基異噁唑基或苯基，其中苯基任選地被硝基、C1-C4烷基、三氟甲基、C1-C4烷氧基、C2-C4鏈烷?；Ⅳ驶?C1-C4烷氧基)或氨基(C1-C4烷基)取代一次；R3是苯基，其中苯基任選地被三氟甲基或N-乙?；被〈淮?；R4是H、C1-C6烷基或苯基，其中苯基任選地被硝基、C1-C4烷基、三氟甲基、C1-C4烷氧基、C2-C4鏈烷?；?、羰基(C1-C4烷氧基)或氨基(C1-C4烷基)取代一次；R5是H、C1-C4烷基或苯基；和R6是苯基或乙?；换蚱淇伤幱玫柠}或溶劑化物；結(jié)合一種或多種可藥用載體、稀釋劑或賦形劑。
12．權(quán)利要求11的制劑，其中式Ⅰ化合物是其中R是COR1和R1是3,4,5-三甲氧基苯基的化合物。
13．藥物制劑，其含有(a)式Ⅰ化合物 其中R是H、COR1、SO2R2或下式的部分 R1是C1-C4烷基、芳基、取代芳基、呋喃基、吲哚基、噻吩甲基、5-甲基異噁唑基、NHR4或CHR5OR6；R2是3，5-二甲基異噁唑基或苯基，其中苯基任選地被硝基、C1-C4烷基、三氟甲基、C1-C4烷氧基、C2-C4鏈烷?；?、羰基(C1-C4烷氧基)或氨基(C1-C4烷基)取代一次；R3是苯基，其中苯基任選地被三氟甲基或N-乙?；被〈淮?；R4是H、C1-C6烷基或苯基，其中苯基任選地被硝基、C1-C4烷基、三氟甲基、C1-C4烷氧基、C2-C4鏈烷酰基、羰基(C1-C4烷氧基)或氨基(C1-C4烷基)取代一次；R5是H、C1-C4烷基或苯基；和R6是苯基或乙?；?；或其可藥用的鹽或溶劑化物；(b)一種或多種溶癌藥物；和(c)一種或多種可藥用載體、稀釋劑或賦形劑。
14．權(quán)利要求13的制劑，其中溶癌藥物選自阿霉素、柔紅霉素、表柔比星、長(zhǎng)春新堿和依托伯苷。
15．權(quán)利要求13的制劑，其中式Ⅰ化合物是其中R是COR1和R1是3,4,5-三甲氧基苯基的化合物。
全文摘要
本發(fā)明涉及式(Ⅰ)化合物,它用于抑制抗藥性腫瘤,其中抗藥性部分或全部由MRP1帶來(lái)。
文檔編號(hào)A61P43/00GK1296410SQ99804797
公開日2001年5月23日 申請(qǐng)日期1999年4月7日 優(yōu)先權(quán)日1998年4月8日
發(fā)明者J·M·格魯博, S·P·霍林舍德, B·H·諾爾曼, J·W·威爾遜 申請(qǐng)人:伊萊利利公司