專利名稱：：可可香料的制備方法、采用該方法所得到的產(chǎn)品及其用途的制作方法可可香料的制備方法、采用該方法所得到的產(chǎn)品及其用途
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及香料及其制備方法，具體涉及可可香料的制備方法和釆用該方法所得到的可可香料，以及其在香煙中作為香料添加劑的用途。
背景技術(shù)：
：可可粉是一種在巻煙制品中常用的煙用香料，它具有濃烈芬芳的獨(dú)特可可香氣，具有可可固有的特征氣味，帶有似香莢蘭的豆香底韻，可以增強(qiáng)巻煙產(chǎn)品的特征性巻煙香氣。經(jīng)處理后的可可^分因其香氣風(fēng)味能與煙草諧合，因此常用于煙草制品，起到改善煙草吸味的作用。在混合型巻煙中，往往將可可粉直接添加到糖料液中。在煙用香料中，一般采用經(jīng)過(guò)乙醇萃取的粉酊或殼酊，一般含可可酯12%,其用量可根據(jù)巻煙的煙葉品質(zhì)而定。其中，混合型香煙中用量稍大，烤煙型香煙中用量較小。然而，可可粉中含有少量淀粉、蛋白質(zhì)以及果膠等大分子物質(zhì)，這些物質(zhì)燃燒后產(chǎn)生一種不愉快的氣味，因此對(duì)煙葉的吸味起到負(fù)面影響，并影響巻煙產(chǎn)品的香氣質(zhì)量。同時(shí)這些物質(zhì)的存在還會(huì)影響可可香料在乙醇、丙二醇以及甘油中的溶解性能。因此，如何高效降解可可粉中的淀粉是目前一直在不斷研究解決的問(wèn)題。例如中國(guó)專利申請(qǐng)CN99120366.6公開(kāi)了一種回收香味/食用香精的方法，包括冷卻包含水和有機(jī)酸的含香味氣體以冷凝部分水和基本上所有的有機(jī)酸，從氣體中除去冷凝水和有機(jī)酸以產(chǎn)生基本上不含有機(jī)酸的含香味氣體，和作為香味/食用香精回收含香味氣體。然而，該方法得到的產(chǎn)品只用作食品添加劑，沒(méi)有涉及其它應(yīng)用。中國(guó)專利申請(qǐng)CN200580008335.7公開(kāi)了一種得到可可多酚提濃物的方法，包括a)使未發(fā)酵可可豆經(jīng)過(guò)漂白，以產(chǎn)生多酚氧化酶活性降低的未發(fā)酵可可豆；b)干燥，以得到水分含量不大于15%的千燥的未發(fā)酵可可豆；C)使干燥的未發(fā)酵可可豆經(jīng)過(guò)粒徑減小步驟，以得到干燥的未發(fā)酵可可豆中間產(chǎn)物；e)從中間產(chǎn)物提取多酚得到可可多酚提取物和被提取過(guò)的固體；d)濃縮可可多酚提取物以產(chǎn)生可可多酚提濃物。但是，上述方法都沒(méi)有涉及降解可可粉中的淀粉的手段，因此所得到的產(chǎn)物不能用作煙草添加劑。
發(fā)明內(nèi)容[要解決的技術(shù)問(wèn)題]本發(fā)明的目的是提供一種可可香料的制備方法。本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供可可香料。本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供可可香料的用途[技術(shù)方案]采用本發(fā)明的方法能夠得到一種可可香料，由于該方法能夠除去可可粉中含有的淀粉、蛋白質(zhì)、果膠等大分子物質(zhì)，所以所述可可香料能夠添加到煙草中，改善煙草品質(zhì)。為了解決上述問(wèn)題，本發(fā)明提供一種可可香料的制備方法，該方法包括如下步驟(1)混合、分離將可可粉和70-85%酒精水溶液以質(zhì)量比1:2-1:3進(jìn)行混合，在溫度70-90°C、攪拌速度300-500轉(zhuǎn)/分下冷凝回流1-2小時(shí)，冷卻，過(guò)濾得到濾液和濾餅；(2)酶解向步驟(1)得到的濾餅中添加水得到混合物，添加的水與步驟(1)中可可粉的質(zhì)量比為5-7:1,然后在85-95。C下進(jìn)行攪拌、加熱，蒸發(fā)其中存在的部分酒精，直至混合物中的酒精含量低于10%,然后，再添加與所蒸發(fā)溶液相同體積的水，在75-80。C下添加液化酶進(jìn)行酶解1-3小時(shí)，酶解完成后，再在45-55。C下加入糖化酶和果膠酶進(jìn)行酶解3-5小時(shí)，酶解完成后，在90-100。C下加熱5-20分鐘滅酶，然后冷卻離心，分離得到上清液和固體；(3)濃縮5將步驟(2)中得到的固體置于反應(yīng)器中，加入濃鹽酸和水，得到鹽酸濃度為3-6mol/L的混合物，可可粉干質(zhì)量與該鹽酸溶液的質(zhì)量比為1:4-7,在100-ll(TC下加熱攪拌，冷凝回流5-8小時(shí)，然后冷卻過(guò)濾，得到濾液和濾渣，濾液進(jìn)行濃縮，得到流狀物固體；流狀物固體與步驟(2)得到的上清液合并后再進(jìn)行濃縮，得到棕褐色流狀物固體；(4)制得產(chǎn)物將步驟(1)得到的濾液與步驟(3)得到的棕褐色流狀物固體混合均勻得到所述的可可香料。才艮據(jù)本發(fā)明一種優(yōu)選的具體實(shí)施方式，該方法還包括將在步驟(4)得到的可可香料進(jìn)行再濃縮，直至所得產(chǎn)物含水量低于5%。根據(jù)本發(fā)明一種具體實(shí)施方式，其中步驟(2)中濾餅和水的混合物的pH值為5-7，攪拌速率為150-300轉(zhuǎn)/分。根據(jù)本發(fā)明，優(yōu)選地所述可可粉選自天然低脂可可粉或可可脂含量低于10%的天然可可粉。這些可可粉可在市場(chǎng)上購(gòu)買(mǎi)獲得。根據(jù)本發(fā)明一種優(yōu)選的具體實(shí)施方式，濃縮是在真空濃縮儀中在溫度4565。C與真空度為-0.09-0.lMPa下進(jìn)行的。在本發(fā)明中，所述液化酶可以選用中溫淀4分酶，例如由無(wú)錫杰能科酶制劑公司提供的3000U/ml的液體中溫淀粉酶。在本發(fā)明中，所述糖化酶可選用大麥|3-淀粉酶，例如由無(wú)錫杰能科酶制劑公司提供的20000U/ml的液體大麥(3-淀粉酶。在本發(fā)明中，所述果膠酶例如選用由山東隆大生物工程有限公司提供的30000U/ml的液體果膠酶。本發(fā)明還提供根據(jù)上述制備方法得到的可可香料。本發(fā)明還涉及根據(jù)上述制備方法得到的可可香料作為香煙添加劑的用途。下面將詳細(xì)地進(jìn)^f亍描述本發(fā)明。本發(fā)明涉及以天然低脂可可粉，特別是以可可脂含量低于10%的天然可可粉為原料提取可可香料的方法?？煽墒强煽蓸?shù)的產(chǎn)物?？煽珊杏退帷営退?、硬脂酸、軟脂酸、蛋白質(zhì)、維生素A、維生素B!、B3、B5、B6、維生素D、E、礦物質(zhì)4丐、鎂、銅、鉀、鈉、鐵、鋅、纖維素、多酚，包括低聚體類(lèi)黃酮物質(zhì)，其中主要有黃烷醇低聚體-原花青素和單體兒茶素，以及多聚體單寧，含苯乙胺、可可堿等。此外，可可含有500多種芳香物質(zhì)，可可熔點(diǎn)為35-37°C,具有令人回p木無(wú)窮p未道。取可可粉碎成200-400目，或購(gòu)買(mǎi)市場(chǎng)上銷(xiāo)售的可可粉，進(jìn)行步驟(1),可可粉與70-85%酒精水溶液以質(zhì)量比1:2-1:3進(jìn)行混合，在溫度70-卯。C、攪拌速度300-500轉(zhuǎn)/分下冷凝回流1-2小時(shí)，冷卻，過(guò)濾得到濾液和濾餅。然后進(jìn)行步驟(2),向上述步驟中的得到濾餅中添加水得到混合物，添加水的量是步驟(1)中可可粉質(zhì)量的5-7倍，然后在85-95。C下攪拌，混合物開(kāi)始沸騰，蒸發(fā)其中存在的部分酒精，直到混合物的酒精含量足夠低得不會(huì)明顯影響酶活時(shí)，一般來(lái)說(shuō)，酒精濃度低于10%。然后，再添加與所述蒸發(fā)的溶液相同體積的水，在75-80。C下添加液化酶進(jìn)行酶解1-3小時(shí)，酶解完成后，再在45-55。C下加入糖化酶和果膠酶進(jìn)行酶解3-5小時(shí)，酶解完成后，在90-100。C下加熱5-20分鐘滅酶，然后冷卻離心，分離得到上清液和固體，上清液待濃縮。再進(jìn)行步驟(3)，將步驟(2)中得到的固體置于反應(yīng)器中，加入濃鹽酸和水，得到鹽酸濃度為3-6mol/L的混合物，該鹽酸溶液與可可粉的質(zhì)量比為1:4-7,在100-110。C下加熱攪拌，冷凝回流5-8小時(shí)，然后冷卻過(guò)濾，得到濾液和濾渣，濾液進(jìn)行濃縮，得到流狀物固體；流狀物固體與步驟(2)中的上清液合并然后再進(jìn)行濃縮，得到棕褐色流狀物固體；然后，將步驟(1)得到的濾液和步驟(3)得到的棕褐色流狀物固體混合攪拌均勻得到所述的可可香料。在本發(fā)明中，攪拌所使用的設(shè)備是本
技術(shù)領(lǐng)域：
中進(jìn)行攪拌時(shí)通常使用的設(shè)備，它應(yīng)該滿足如下條件額定電壓為220V，攪拌速率0-500rpm的攪拌器。因此，例如是上海申生科技有限公司銷(xiāo)售的S-312數(shù)顯恒溫?cái)嚢杵?、上海申順生物科技有限公司銷(xiāo)售的R-S型調(diào)速器銷(xiāo)售或上海千一化工有限公司銷(xiāo)售的HS-50A數(shù)顯攪拌器。在本發(fā)明中，加熱所使用的設(shè)備是本
技術(shù)領(lǐng)域：
中進(jìn)行加熱時(shí)通常使用的設(shè)備，它應(yīng)該滿足如下條件水浴可控溫度為010(TC,油浴或加熱套可控溫度為0200°C，規(guī)格為2000ml。因此，例如是上海精宏實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司銷(xiāo)售的DKB-501A型超級(jí)恒溫水槽、鄭州長(zhǎng)城工貿(mào)有限公司銷(xiāo)售的DRT-TW型解熱套或海寧市新華醫(yī)療廠銷(xiāo)售的TC-15套式恒溫器。在本發(fā)明的實(shí)施過(guò)程中使用的酶解反應(yīng)器，應(yīng)該滿足如下條件可控溫度0-100。C，可調(diào)速率0-500rpm，可測(cè)PH值0-14。因此，例如是上海申順生物科技有限公司銷(xiāo)售的R-S型調(diào)速器、上海精宏實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司銷(xiāo)售的DKB-501A型超級(jí)恒溫水槽或上海欣蕊自動(dòng)化設(shè)備有限公司銷(xiāo)售的HKG-II回轉(zhuǎn)式恒溫調(diào)速器。在本發(fā)明的實(shí)施過(guò)程中使用的離心設(shè)備應(yīng)該滿足如下條件有恒溫冷凍功能，離心速率不低于3000rpm且容量大。因此，例如是上海安亭科學(xué)儀器廠有限公司銷(xiāo)售的LXJ-IIB低速大容量多管離心機(jī)或上海盧湘儀離心機(jī)儀器有限公司銷(xiāo)售的TD5M低速大容量離心機(jī)。在本發(fā)明的實(shí)施過(guò)程中，進(jìn)行濃縮的設(shè)備應(yīng)該滿足如下條件真空度-0.09~-0.lMPa,溫度控制為室溫-90。C,旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀旋轉(zhuǎn)速率20~200轉(zhuǎn)/分。因此，例如是上海雅榮生化儀器設(shè)備有限公司銷(xiāo)售的RE-52AA型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀、上海予華儀器有限公司銷(xiāo)售的SHZ-D(III)型防腐臺(tái)式循環(huán)水真空泵或上海碩光電子科技有限公司銷(xiāo)售的RE-3000旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀。在本發(fā)明中，所用的水可以是蒸餾水、去離子水或純凈水。在本發(fā)明的酶解反應(yīng)中，所述的液化酶可選用LTTA新型液體中溫淀粉酶，該酶是由枯草芽孢桿菌經(jīng)發(fā)酵、提煉精致而成，是一種隨機(jī)水解a-D-l，4糖苷鍵的內(nèi)切酶，可產(chǎn)生可溶性糊精和低聚糖。本發(fā)明使用的液化酶例如是無(wú)錫杰能科酶制劑公司銷(xiāo)售的3000U/ml的液體中溫淀粉酶、無(wú)錫酶制劑有限公司銷(xiāo)售的4000U/ml的固體精制a-淀粉酶。所述的糖化酶可選用大麥P-淀粉酶，該酶是一種內(nèi)切酶，主要是把淀粉，可溶性糊精和低聚糖分解成麥芽糖和少量的葡萄糖等，該酶麥芽糖轉(zhuǎn)化率達(dá)50%以上。所述的糖化酶例如是無(wú)錫杰能科酶制劑公司銷(xiāo)售的20000U/ml的液體大麥|3-淀粉酶、諾維信公司銷(xiāo)售的真菌淀粉酶。所述的果膠酶一^:采用黑曲霉經(jīng)發(fā)酵、提取精制而成，是分解果膠質(zhì)的多種酶的總稱。主要含有聚曱基半乳糖醛酸分解酶，聚半乳糖醛酸，聚半乳糖醛酸裂解酶和果膠酯酶，能將大分子粘多糖(果膠)分解成可溶性小分子物質(zhì)。所述的果膠酶例如采用山東隆大生物工程有限公司銷(xiāo)售的30000U/ml的液體果膠酶、無(wú)錫市酶制劑廠銷(xiāo)售的雪梅牌20000U/ml果膠酶或上海邁坤化工有限公司銷(xiāo)售的20000U/ml果膠酶。利用本發(fā)明的制備方法可以一方面充分降解可可粉里的淀粉和果膠，使其水解生成單糖和小分子的低聚糖；另一方面對(duì)可可粉中的蛋白質(zhì)進(jìn)行水解，生成不同類(lèi)型的氨基酸和可溶性多肽。在有效除去大分子物質(zhì)的同時(shí)能夠保留香精的氣味。本發(fā)明還涉及用上述制備方法得到的可可香精，該可可香精產(chǎn)品采用液相，液-質(zhì)聯(lián)用色譜儀等儀器進(jìn)行了化學(xué)組成、性質(zhì)與物理性能的測(cè)定。測(cè)定結(jié)果為單糖及低聚糖含量為15-25重量％;氨基酸及小分子多肽含量為12-25重量％;可可堿、咖啡堿、多元酚及香味物質(zhì)含量為8-15重量％;酒精水溶液含40-60%。性能產(chǎn)品室溫下穩(wěn)定，外觀為褐色、略帶紅色的流狀半固體；具有濃郁的可可香氣息。本發(fā)明還涉及采用前面所述可可香精在巻煙中的用途，在使用所述可可香精時(shí)，在生產(chǎn)巻煙過(guò)程中按照煙葉重量的0.05~0.30重量％，特別地0.150.30重量％加入本發(fā)明的可可香精。除了一^:的煙葉外，所述的煙葉還可以是再造煙葉，又稱煙草薄片、重組煙葉、均質(zhì)煙葉，是指在煙草物質(zhì)(如煙末、碎片、煙?；虻痛螣熑~)中加入膠粘劑和其它添加劑等加工再制而成的產(chǎn)品。針對(duì)再造煙葉煙味淡薄，雜氣，煙氣粗糙，刺激性大，余味不舒適的缺點(diǎn)，添加可可香料可以保留可可香氣，改善再造煙葉燃燒氣味，掩蓋再造煙葉雜異味，降低刺激，提高柔和度。使用本發(fā)明所述可可香精的效果評(píng)價(jià)方法是調(diào)香師評(píng)吸，其評(píng)吸標(biāo)準(zhǔn)為<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>評(píng)吸工作必須在通風(fēng)、無(wú)異味、安靜、不受干擾的環(huán)境下進(jìn)行。由于天然低脂可可粉中含有由多種成分組成的芳香物質(zhì)，它們屬于醇類(lèi)、酚類(lèi)、醚類(lèi)、醛類(lèi)、酮類(lèi)、酯類(lèi)或內(nèi)酯類(lèi)，以及含氮和含碌u物質(zhì)，在燃吸中能豐富煙香。這些物質(zhì)的含量雖小，但對(duì)香煙而言不可或缺，這些物質(zhì)主要利用酒精水溶液浸提得到。天然可可粉中含有一定量的淀粉以及少量的果膠等大分子物質(zhì)，其中淀粉、精類(lèi)物質(zhì)是由多個(gè)D-葡萄糖通過(guò)oc-1，4-糖苷鍵聚合而成的多糖物質(zhì)；果膠是由P-半乳糖醛酸聚合而成的大分子物質(zhì)，其側(cè)鏈上也含有許多小分子糖，如葡萄糖、阿拉伯糖、麥芽糖等，在液化酶和果膠酶的作用下酶解成單糖和低聚糖，這些小分子糖類(lèi)物質(zhì)在煙草燃吸過(guò)程中可作為糖源參與美拉德反應(yīng)，因此豐富煙香?？煽煞壑械牡鞍踪|(zhì)是由氨基酸通過(guò)C，N鍵結(jié)合而成的大分子物質(zhì)，通過(guò)酸水解，能夠生成少量多肽和大量氨基酸，蛋白質(zhì)對(duì)燃吸有不利影響，而小分子多肽和氨基酸卻能和糖源起美拉德反應(yīng)，豐富煙香，提高燃吸柔和度。通過(guò)本發(fā)明的制備方法能夠降解可可中的大分子物質(zhì)如淀粉、蛋白質(zhì)和果膠等，提高可可香料的質(zhì)量同時(shí)保留可可香氣。中國(guó)是世界巻煙第一消費(fèi)國(guó)，美國(guó)煙草原料的利用率已達(dá)99%,中國(guó)還不到50%,可見(jiàn)市場(chǎng)前景之廣闊。同時(shí)，添加一定量的再造煙葉可降低煙葉的使用量，降低巻煙的焦油量。具體實(shí)施方式通過(guò)下面給出的本發(fā)明具體實(shí)施例可以進(jìn)一步清楚地理解本發(fā)明，但這些實(shí)施例不是對(duì)本發(fā)明保護(hù)范圍的限制。實(shí)施例1(1)稱取250g從無(wú)錫福華香精香料有限公司購(gòu)買(mǎi)的天然低脂可可粉置于反應(yīng)器中，加入總體積為550mL85。/。的酒精溶液(V水V謝產(chǎn)15:85)形成混合物，開(kāi)啟攪拌器，以400轉(zhuǎn)/分的速度進(jìn)行攪拌，以8。C/分鐘速率加熱。待溫度上升至78。C,混合物始沸騰，然后冷凝回流1.5h,并不斷攪拌，回流結(jié)束后冷卻降溫，待溫度降至常溫，然后過(guò)濾、分離得到固體和濾液。(2)將步驟(1)中得到的固體加入蒸餾水一起置入生物反應(yīng)器中，固體和蒸餾水以質(zhì)量比計(jì)(MM蒸爐水)1:6，開(kāi)啟攪拌器，以250轉(zhuǎn)/分的速度進(jìn)行攪拌，以10。C/分鐘速率加熱，待溫度升至93。C，開(kāi)始沸騰，蒸鎦出酒精溶液215mL,再補(bǔ)加215mL蒸鎦水，冷卻降溫至80。C,力口0.5g無(wú)錫杰能科酶制劑公司銷(xiāo)售的液體中溫淀粉酶，酶解時(shí)間為2h。酶解結(jié)束后冷卻降溫至55。C并保持恒溫，力口0.5g無(wú)錫杰能科酶制劑公司銷(xiāo)售的20000U/ml大麥(3-淀粉酶和0.25g無(wú)錫市酶制劑廠銷(xiāo)售的雪梅牌20000U/ml液體果膠酶，攪拌速率為250轉(zhuǎn)/分，酶解時(shí)間4h。酶解完成后，對(duì)酶解體系進(jìn)行加熱滅酶，滅酶的溫度為95°C,時(shí)間為15分鐘，攪拌速率仍然控制在250轉(zhuǎn)/分。滅酶結(jié)束后，用水冷卻至常溫，將反應(yīng)器中的產(chǎn)品進(jìn)行離心，離心速率為4000轉(zhuǎn)/分，離心時(shí)間為15分鐘，離心結(jié)束后分離，分別得到上清液和固體，其中上清液呈微棕紅色，固體呈棕紅色。(3)將步驟(2)中的離心后固體置于反應(yīng)器中，加入濃鹽酸、蒸餾水至總體積為1500mL，混合物中鹽酸摩爾濃度為6mol/L。開(kāi)啟攪拌器，以300轉(zhuǎn)/分進(jìn)行攪拌，以10。C/分鐘速率加熱，待溫度上升至106。C,混合物開(kāi)始沸騰，保持恒溫并不斷攪拌，加熱冷凝回流8h。反應(yīng)結(jié)束后，冷卻至常溫，過(guò)濾得濾液和濾渣，將濾液轉(zhuǎn)移到真空濃縮儀中，進(jìn)行濃縮處理，濃縮的溫度控制在55°C,真空度控制在-0.096MPa，真空濃縮^f義的冷卻介質(zhì)是普通自來(lái)水，當(dāng)濾液濃縮至流狀物固體時(shí)，再濃縮15分鐘，盡量使鹽酸殘留降至最低，停止?jié)饪s。(4)將步驟(2)中的上清液合并步驟(3)中的流狀物固體攪拌均勻后再進(jìn)行濃縮，濃縮的溫度控制在55°C，真空度控制在-0.097MPa，冷卻介質(zhì)是普通自來(lái)水，待濃縮液含水量低于5%時(shí)，停止?jié)饪s，合并(l)中的酒精萃取液并攪拌均勻即得到可可香料。該產(chǎn)品室溫下穩(wěn)定，外觀為褐色、略帶紅色的流狀半固體；具有濃郁的可可香氣息。該可可香料產(chǎn)品用液相、液-質(zhì)聯(lián)用儀分析，其化學(xué)組成為單糖及低聚糖含16.4%;氨基酸及小分子多肽含15.0%;可可堿、咖啡堿、多元酚及香味物質(zhì)含12.9%;酒精水溶液含55.5%。通過(guò)八位調(diào)香師進(jìn)行評(píng)吸，其評(píng)吸結(jié)果為具有可可特征香，尚諧調(diào)，略有雜氣，刺激性明顯下降，更柔和，余味尚舒適。實(shí)施例二(1)稱取250g從無(wú)錫福華香精香料有限公司公司購(gòu)買(mǎi)的天然低脂可可粉置于反應(yīng)器中，加入總體積為500mL80%(V水V酒精=20:80)的酒精水溶液得到混合物，然后用攪拌器以400轉(zhuǎn)/分的速度進(jìn)行攪拌，以10°C/分鐘速率加熱，待溫度上升至78。C,混合物開(kāi)始沸騰。冷凝回流2h,并持續(xù)攪拌，回流結(jié)束后冷卻降溫，待溫度降至常溫過(guò)濾，分離得到固體和濾液。(2)在生物反應(yīng)器中，以質(zhì)量比為M可可粉.M蒸餾水一丄5混合步驟(1)中得到的固體和蒸餾水，開(kāi)啟攪拌器，以220轉(zhuǎn)/分的速度進(jìn)行攪拌，以8°C/分鐘速率加熱，待溫度升至94。C,開(kāi)始沸騰，蒸餾出酒精溶液220mL,再加入220mL蒸餾水后冷卻降溫至75°C，加l.Og液體中溫液化酶，酶解時(shí)間1.5h，酶解結(jié)束后冷卻降溫至50。C并保持恒溫，加0.4g液體大麥P-淀粉酶和0.2g山東隆大生物工程有限公司銷(xiāo)售的30000U/ml液體果膠酶，攪拌速率為250轉(zhuǎn)/分，酶解時(shí)間4h,酶解完成后，對(duì)酶解體系進(jìn)行加熱滅酶，滅酶的溫度為95。C，時(shí)間為20分鐘，攪拌速率仍然控制在250轉(zhuǎn)/分。滅酶結(jié)束后，用水冷卻至常溫，反應(yīng)器中的產(chǎn)品進(jìn)行離心，離心速率為4000轉(zhuǎn)/分，離心時(shí)間為15分鐘，離心結(jié)束后分離，分別得到上清液和固體。(3)將步驟(2)中的離心后固體置于反應(yīng)器中，加入濃鹽酸及蒸餾水至總體積為1250mL,混合物中鹽S吏摩爾濃度為5mol/L，開(kāi)啟攪拌器，以250轉(zhuǎn)/分的速度進(jìn)行攪拌，以8。C/分鐘速率加熱，待溫度上升至103。C,開(kāi)始沸騰，保持恒溫并不斷攪拌，加熱冷凝回流8h,反應(yīng)結(jié)束后，冷卻至常溫，過(guò)濾得濾液和濾渣，將濾液轉(zhuǎn)移到真空濃縮儀中，進(jìn)行濃縮處理，濃縮的溫度控制在57°C，真空度控制在-0.095MPa，真空濃縮儀的冷卻介質(zhì)是普通自來(lái)水，當(dāng)濾液濃縮至流狀物固體，再濃縮20min,盡量使鹽酸殘留降至最低，停止?jié)饪s。(4)將步驟(2)中的上清液合并步驟(3)中的流狀物固體攪拌均勻后再進(jìn)行濃縮，濃縮溫度為57。C,真空度為-0.096MPa,冷卻介質(zhì)是普通自來(lái)水，待濃縮液含水量低于3%時(shí)，停止?jié)饪s，合并步驟(1)中的酒精萃取液并攪拌均勻即得到產(chǎn)品。該產(chǎn)品外觀為褐色、略帶紅色的流狀半固體；具有濃郁的可可香氣息。該可可香料產(chǎn)品用液相、液-質(zhì)聯(lián)用儀分析，其化學(xué)組成為單糖及低聚糖含15.1%;氨基酸及小分子多肽含14.2%;可可堿、咖啡堿、多元酚及香味物質(zhì)含12.0%;酒精水溶液含58.3°/0。通過(guò)七位調(diào)香師進(jìn)行評(píng)吸，其評(píng)吸結(jié)果為具有可可特征香，微有雜氣，刺激性下降，柔和度明顯提高，余味尚干凈。實(shí)施例三(1)稱取250g天然低脂可可粉(可可脂含量為8%)置于反應(yīng)器中，加入總體積600mL70%(V水V酒精=30:70)的酒精水溶液，以350轉(zhuǎn)/分的速度進(jìn)行攪拌，以10。C/分鐘速率加熱，待溫度上升至78°C，混合物開(kāi)始沸騰，冷凝回流lh,并不斷攪拌，回流結(jié)束后冷卻降溫，待溫度降至常溫進(jìn)行過(guò)濾，分離得到固體和濾液。(2)將步驟(1)中得到的固體、蒸餾水以M可可粉]VU館水二h7置入上海欣蕊自動(dòng)化設(shè)備有限公司生產(chǎn)、銷(xiāo)售的HKG-II回轉(zhuǎn)式型生物反應(yīng)器中，以250轉(zhuǎn)/分進(jìn)行攪拌，以8。C/分鐘速率加熱，待溫度升至94。C,開(kāi)始沸騰，蒸餾出酒精溶液200mL,再加入200mL蒸餾水后冷卻降溫至70°C，加0.75g液體中性液化酶，酶解時(shí)間2h,酶解結(jié)束后冷卻降溫至50。C并保持恒溫，力口0.25g液體大麥P-淀粉酶和O.lg液體果膠酶，攪拌速率為200轉(zhuǎn)/分，酶解時(shí)間3h。酶解完成后，對(duì)酶解體系進(jìn)^f亍加熱滅酶，滅酶的溫度為95"C,時(shí)間為15分鐘，攪拌速率仍然控制在250轉(zhuǎn)/分。滅酶結(jié)束后，用水冷卻至常溫，反應(yīng)器中的產(chǎn)品進(jìn)行離心，離心速率為4000轉(zhuǎn)/分，離心時(shí)間為15分鐘，離心結(jié)束后分離，分別得到上清液和固體。(3)將步驟(2)得到的離心后固體置于反應(yīng)器中，加入濃鹽酸，蒸餾水至總質(zhì)量為1500mL，溶液摩爾濃度為4mol/L,以250轉(zhuǎn)/分的速度進(jìn)行攪拌，以8。C/分鐘速率加熱，待溫度上升至103°C,開(kāi)始沸騰，保持恒溫并不斷攪拌，加熱冷凝回流8h,反應(yīng)結(jié)束后，冷卻至常溫，過(guò)濾得濾液和濾渣。將濾液轉(zhuǎn)移到真空濃縮儀中，進(jìn)行濃縮處理，濃縮的溫度為60°C，真空度為-0.094MPa,真空濃縮儀的冷卻介質(zhì)是普通自來(lái)水，當(dāng)濾液濃縮至流狀物固體，再濃縮15分鐘，停止?jié)饪s。(4)將步驟(2)中的上清液和步驟(3)中的流狀物固體混合、攪拌均勻后再進(jìn)行濃縮，濃縮的溫度為55""C,真空度為-0.094MPa,冷卻介質(zhì)是普通自來(lái)水，待濃縮液含水量低于5%時(shí)，停止?jié)饪s，合并步驟(l)得到的酒精萃取液并攪拌均勻即得到產(chǎn)品。該產(chǎn)品外觀為褐色、略帶紅色的流狀半固體；具有濃郁的可可香氣息。該可可香料產(chǎn)品用液相、液-質(zhì)聯(lián)用儀分析，其化學(xué)組成為單糖及低聚糖含17.2%;氨基酸及小分子多肽含16.0%;可可堿、咖啡堿、多元酚及香味物質(zhì)含13.5%;酒精水溶液含53.3%。通過(guò)八位調(diào)香師進(jìn)行評(píng)吸，評(píng)吸得分為香氣充足，稍粗糙，較諧調(diào)，微有刺激，余味較干凈，柔和度增強(qiáng)。本發(fā)明的制備方法能夠很好的保留可可粉中的許多致香成分，從產(chǎn)品分析可以得知這些致香成分都沒(méi)有發(fā)生大的變化。在保留這些物質(zhì)的基礎(chǔ)上，本發(fā)明通過(guò)酶解產(chǎn)生許多可可粉中不存在的物質(zhì)，包括主要來(lái)源于淀粉酶解生成的單糖和低聚糖、果膠酶解生成的(3-半乳糖醛酸、蛋白質(zhì)酸水解生成的氨基酸和多肽。這些物質(zhì)本身沒(méi)有香味，但是它們?cè)跓煵萑嘉鼤r(shí)能明顯改善吸味，增加柔和度，提高巻煙品質(zhì)。經(jīng)過(guò)穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，本產(chǎn)品的保質(zhì)期比較長(zhǎng)，同時(shí)其水溶性也比較好。本發(fā)明得到的可可香料產(chǎn)品的外觀為褐色、略帶紅色的流狀半固體；具有濃郁的可可香氣息；天然低脂可可粉總糖含量約占總重23%，利用液化酶和糖化酶酶解處理后，生成單糖和寡糖，產(chǎn)品經(jīng)過(guò)液質(zhì)聯(lián)用色譜儀檢測(cè)到的糖類(lèi)成分及相對(duì)含量如表1:表1編號(hào)名稱相對(duì)百分比(％)1單糖10.042雙糖53.003三糖19.104四糖17.315五糖0.56天然低脂可可粉蛋白質(zhì)含量約占總重的21%,經(jīng)過(guò)酸水解，蛋白質(zhì)完全水解，生成可溶性的氨基酸和少量的多肽，氨基酸通過(guò)高效液相色語(yǔ)氨基酸柱分析成分及相對(duì)含量如表2:表2編號(hào)名稱相對(duì)百分比(0/0)1絲氨酸8.512組氨酸1.183甘氨酸7.774蘇氨酸7.175精氨酸4.606丙氨酸9.317酪氨酸2.458纈氨酸5.849蛋氨酸0.8710異亮氨酸5.2311亮氨酸7.1412賴氨酸3.0013脯氨酸6.1414半胱氨酸3.7615天冬氨酸11.6116_谷氨酸_15.40從上表中可以看出，氨基酸種類(lèi)比較豐富，至少16種以上，還可能包括一些未能檢測(cè)到的氨基酸和比較復(fù)雜的氨基酸，這對(duì)巻煙的滋味起到很好的作用。天然低脂可可粉通過(guò)酒精水溶液萃取，復(fù)合生物酶酶解，酸水解等一系列步驟，最后轉(zhuǎn)化率可以達(dá)70%以上。權(quán)利要求1、一種可可香料的制備方法，其特征在于該方法包括如下步驟(1)混合、分離將可可粉和70-85％酒精水溶液以質(zhì)量比1∶2-1∶3混合，在溫度70-90℃、攪拌速度300-500轉(zhuǎn)/分下冷凝回流1-2小時(shí)，冷卻，過(guò)濾得到濾液和濾餅；(2)酶解向步驟(1)得到的濾餅中添加水得到混合物，添加的水與步驟(1)中可可粉的質(zhì)量比為5-7∶1，所得混合物在85-95℃下進(jìn)行攪拌、加熱，蒸發(fā)其中存在的部分酒精，直至混合物中的酒精含量低于10％，然后，再添加與所蒸發(fā)溶液相同體積的水，在75-80℃下添加液化酶進(jìn)行酶解1-3小時(shí)，酶解完成后，再在45-55℃下加入糖化酶和果膠酶進(jìn)行酶解3-5小時(shí)，酶解完成后，在90-100℃下加熱5-20分鐘滅酶，然后冷卻離心，分離得到上清液和固體；(3)濃縮將步驟(2)中得到的固體置于反應(yīng)器中，加入濃鹽酸和水，得到鹽酸濃度為3-6mol/L的混合物，可可粉和鹽酸溶液的質(zhì)量比為1∶4-7，在100-110℃下加熱攪拌，冷凝回流5-8小時(shí)，然后冷卻過(guò)濾，得到濾液和濾渣，濾液進(jìn)行濃縮得到流狀物固體；所得流狀物固體與步驟(2)得到的上清液合并后進(jìn)行濃縮，得到棕褐色流狀物固體；(4)制得產(chǎn)物將步驟(1)得到的濾液與步驟(3)得到的棕褐色流狀物固體混合均勻得到所述的可可香料。2、根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于該方法還包括步驟(4)得到的可可香料進(jìn)行再濃縮，直至所得可可香料含水量低于5%。3、根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于步驟(2)中濾餅和水的混合物的pH值為5-7,攪拌速率為150-300轉(zhuǎn)/分。4、根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于所述可可粉選自天然低脂可可粉。5、根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的制備方法，其特征在于所述的濃縮是在真空濃縮儀中在溫度4565°C、真空度-0.09-0.1MPa的條件下進(jìn)行的。6、根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于步驟(l)中所述液化酶是中溫淀粉酶。7、根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于步驟(l)中所述糖化酶是大麥P-淀粉酶。8、根據(jù)權(quán)利要求1-7中任一權(quán)利要求所述的制備方法得到的可可香料。9、根據(jù)權(quán)利要求8所述的可可香料作為煙草添加劑的用途。全文摘要本發(fā)明涉及香料制備領(lǐng)域。具體涉及一種可可香料的制備方法，包括以可可粉為原料，進(jìn)行混合分離、酶解、濃縮等步驟。本發(fā)明還涉及通過(guò)所述方式制備得到的可可香精，以及所述香精作為煙用添加劑的用途。通過(guò)本發(fā)明的制備方法能夠降解可可中的大分子物質(zhì)如淀粉、蛋白質(zhì)和果膠等，提高可可香料的質(zhì)量同時(shí)保留可可香氣。文檔編號(hào)C11B9/00GK101445766SQ20081020473公開(kāi)日2009年6月3日申請(qǐng)日期2008年12月17日優(yōu)先權(quán)日2008年12月17日發(fā)明者呂斌峰,谷向春,陳玉銘申請(qǐng)人:華寶食用香精香料(上海)有限公司;無(wú)錫華馨香精香料有限公司