一種組合物及其在制備改善腸道功能的產(chǎn)品中的應(yīng)用
【專利摘要】本發(fā)明涉及保健品技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種組合物及其在制備改善腸道功能的產(chǎn)品中的應(yīng)用。本發(fā)明提供了一種組合物及其在制備改善腸道功能的產(chǎn)品中的應(yīng)用，本發(fā)明將益生菌、益生元、山楂和山藥進(jìn)行合理復(fù)配，各組分協(xié)同作用，從而使得所得組合物具有良好的防治腹瀉、調(diào)節(jié)腸道菌群的作用。其效果顯著優(yōu)于(p<0.05)對比例。
【專利說明】
一種組合物及其在制備改善腸道功能的產(chǎn)品中的應(yīng)用
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明涉及保健品技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種組合物及其在制備改善腸道功能的產(chǎn) 品中的應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 腹瀉是長期以來一直困擾人類身體健康的一種常見病?，F(xiàn)代隨著人類生活方式的 跨越式變化，人類腸道菌群在一定程度上已難以適應(yīng)現(xiàn)代的生活方式，各種應(yīng)激、膳食結(jié)構(gòu) 和進(jìn)食習(xí)慣的改變都對脾胃和腸道微生態(tài)產(chǎn)生了不良作用，進(jìn)而影響腸道正常功能。
[0003] 中醫(yī)認(rèn)為脾胃為氣血化生之源，后天之本。功能上脾主運(yùn)化，胃主沉降，與消化、吸 收、排泄和代謝過程有關(guān)。脾失健運(yùn)時，則會出現(xiàn)泄瀉，故中醫(yī)學(xué)認(rèn)為，"泄瀉之本，無不由于 脾胃"?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究發(fā)現(xiàn)脾虛泄瀉往往伴隨著腸道菌群的紊亂。脾虛時消化吸收障礙、出 現(xiàn)納差、便溏、消瘦等，使機(jī)體各臟器間的平衡遭到破壞，這勢必會導(dǎo)致腸道菌群的失調(diào)，而 菌群失調(diào)反過來又可加重脾虛，兩者互為因果。一方面脾虛腹瀉時，腸道功能紊亂，腸蠕動 加快，大便次數(shù)增多，有益的厭氧菌被排出，使得腸道菌群失調(diào)；另一方面，脾虛時機(jī)體抵抗 力下降，外部有害菌極易侵入和繁殖，加重菌群失調(diào)，由此形成惡性循環(huán)，加重腹瀉、腹脹。
[0004] 抗生素相關(guān)性腹瀉(antibiotic-associated diarrhea，AAD)是指臨床使用抗生 素治療感染性疾病后導(dǎo)致腸道菌群失調(diào)而引起的最常見的醫(yī)源性腹瀉?？股刈?0世紀(jì)40 年代問世以來，顯著減少了細(xì)菌性感染的病死率和并發(fā)癥，對人類的健康和發(fā)展發(fā)揮了巨 大的作用。但是現(xiàn)如今，抗生素的普及和濫用帶來了很多副作用?？股仡愃幬镌跉⑺荔w內(nèi) 有害菌的同時，也會殺死體內(nèi)的有益菌，腸道的微生態(tài)平衡被打破，導(dǎo)致菌群失調(diào)，引起腹 瀉。
[0005] 目前治療腹瀉的藥物多為西藥，副作用明顯且效果有限，往往治標(biāo)卻不能治本。故 而，進(jìn)一步研發(fā)能夠改善和/或預(yù)防腹瀉、且能夠調(diào)節(jié)腸道菌群的產(chǎn)品具有非常重要的意 義。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 有鑒于此，本發(fā)明要解決的技術(shù)問題在于提供一種組合物及其在制備改善腸道功 能的產(chǎn)品中的應(yīng)用;本發(fā)明提供的組合物能夠有效預(yù)防和/或改善腹瀉，且具有良好的調(diào)節(jié) 腸道菌群的作用。
[0007] 本發(fā)明提供的組合物包括:益生菌、益生元、山楂和山藥。
[0008] 益生菌是一類對宿主有益的活性微生物，是定植于人體腸道、生殖系統(tǒng)內(nèi)，能產(chǎn)生 確切健康功效從而改善宿主微生態(tài)平衡、發(fā)揮有益作用的活性有益微生物的總稱。本發(fā)明 中，益生菌選自乳酸桿菌和雙歧桿菌。
[0009] 其中，乳酸桿菌是一群桿狀或球狀的革蘭氏陽性菌，能發(fā)酵糖產(chǎn)生大量乳酸的細(xì) 菌。乳酸桿菌存在于人體腸道之中能夠作用于腸道的菌群，且可以減少腸道中有毒物質(zhì)的 產(chǎn)生，使腸道保持一個更加穩(wěn)定的環(huán)境，同時還具有調(diào)節(jié)免疫的作用。
[0010] 雙歧桿菌是革蘭氏陽性、無芽孢、厭氧、多形的桿菌，為結(jié)腸微生物叢的主要微生 物駐留細(xì)菌。雙歧桿菌長期以來被認(rèn)為是安全且對人體有益的微生物，其代謝產(chǎn)物乙酸和 乳酸，有調(diào)節(jié)腸道功能的作用。不僅如此，雙歧桿菌還能夠刺激特異性免疫能力，提高機(jī)體 的免疫力，還可以改善腹瀉癥狀。
[0011] 本發(fā)明中，乳酸桿菌與雙歧桿菌的質(zhì)量比為(1.0~20.0):(1.0~20.0)。
[0012] 其中，乳酸桿菌的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為1.0%~20.0%;雙歧桿菌的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為1.0%~ 20.0%〇
[0013]本發(fā)明的實(shí)施例中，乳酸桿菌與雙歧桿菌的質(zhì)量比為(2.0~20.0):(2.0~20.0)。 [0014]其中，乳酸桿菌的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為2.0%~20.0%;雙歧桿菌的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為2.0%~ 20.0%〇
[0015] 一些實(shí)施例中，乳酸桿菌與雙歧桿菌的質(zhì)量比為20.0:3.0。
[0016]在此實(shí)施例中，乳酸桿菌的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為20.0%;雙歧桿菌的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為3.0%。
[0017] -些實(shí)施例中，乳酸桿菌與雙歧桿菌的質(zhì)量比為10.0:5.0。
[0018] 在此實(shí)施例中，乳酸桿菌的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為10.0%;雙歧桿菌的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為5.0%。
[0019] 一些實(shí)施例中，乳酸桿菌與雙歧桿菌的質(zhì)量比為7.0:12.0。
[0020] 在此實(shí)施例中，乳酸桿菌的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為7.0%;雙歧桿菌的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為12.0%。
[0021 ] -些實(shí)施例中，乳酸桿菌與雙歧桿菌的質(zhì)量比為2.0:20.0。
[0022]在此實(shí)施例中，乳酸桿菌的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為2.0%;雙歧桿菌的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為20.0%。
[0023] -些實(shí)施例中，乳酸桿菌與雙歧桿菌的質(zhì)量比為2.0:2.0。
[0024] 在此實(shí)施例中，乳酸桿菌的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為2.0%;雙歧桿菌的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為2.0%。
[0025]本發(fā)明提供的組合物中所述益生菌的添加量為IO6CFlVg~1012CFU/g。
[0026] 本發(fā)明采用的乳酸桿菌中菌的密度為不少于100億CFU/g。
[0027] 本發(fā)明采用的雙歧桿菌中菌的密度為不少于100億CFU/g。
[0028] 益生元指的是不能被宿主消化吸收，但是能夠選擇性地促進(jìn)宿主腸道內(nèi)原有的一 種或幾種有益細(xì)菌(益生菌）的生長繁殖，抑制有害細(xì)菌生長，從而達(dá)到調(diào)整腸道菌群，促進(jìn) 機(jī)體健康作用的食品組分。
[0029] 本發(fā)明中，益生元的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為30.0%~96.0%。
[0030] 本發(fā)明的實(shí)施例中，益生元的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為47.0%~90.0%。
[0031] 一些實(shí)施例中，益生元的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為47.0%。
[0032] 一些實(shí)施例中，益生元的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為65.0%。
[0033] 一些實(shí)施例中，益生元的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為48.0%。
[0034] 一些實(shí)施例中，益生元的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為50.0%。
[0035] 一些實(shí)施例中，益生元的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為90.0%。
[0036] 本發(fā)明中，益生菌與益生元的質(zhì)量比為(2.0~40.0):(30.0~96.0)。
[0037] 本發(fā)明的實(shí)施例中，益生菌與益生元的質(zhì)量比為(4.0~25.0):(47.0~90.0)。 [0038] 一些實(shí)施例中，益生菌與益生元的質(zhì)量比為23.0:47.0。
[0039]在此實(shí)施例中，益生菌的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為23.0% ;益生元的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為47.0%。
[0040] -些實(shí)施例中，益生菌與益生元的質(zhì)量比為15.0:65.0。
[0041 ]在此實(shí)施例中，益生菌的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為15.0% ;益生元的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為65.0%。
[0042] 一些實(shí)施例中，益生菌與益生元的質(zhì)量比為19.0:48.0。
[0043]在此實(shí)施例中，益生菌的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為19.0% ;益生元的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為48.0%。
[0044] -些實(shí)施例中，益生菌與益生元的質(zhì)量比為22.0:50。
[0045] 在此實(shí)施例中，益生菌的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為22.0% ;益生元的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為50.0%。
[0046] 一些實(shí)施例中，益生菌與益生元的質(zhì)量比為4.0:90.0。
[0047]在此實(shí)施例中，益生菌的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為4.0% ;益生元的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為90.0%。
[0048]本發(fā)明中，益生元為菊粉。
[0049] 菊粉，源自于菊苣根的天然成分，是一種天然低聚糖果糖，以能量的形式存在于植 物中。菊粉幾乎不被胃酸所水解和消化，完整的菊粉到達(dá)結(jié)腸前全部未破壞，而在結(jié)腸中被 有益菌發(fā)酵，卻不能被大多數(shù)腐敗細(xì)菌利用，從而使腸道中的益生菌增殖處于優(yōu)勢條件，保 持腸道的健康，預(yù)防腹瀉等作用。
[0050] 山藥和山楂具有健運(yùn)脾胃的功效。山藥，甘、平。補(bǔ)脾養(yǎng)胃，生津益肺，可用于脾虛 食少，泄瀉便溏；山楂，酸、甘，微溫。有消食健胃，行氣散瘀，瀉痢腹痛之功，可用于肉食積 滯，瀉痢不爽。所述山楂粉為山楂鮮果經(jīng)干燥、粉碎后制得，粒徑40目；所述山藥粉為山藥根 莖干燥粉碎后制得，粒徑為40目。
[0051 ] 本發(fā)明中，山楂與山藥的質(zhì)量比為（1.0~30.0):(1.0~30.0)。
[0052] 山楂的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為1.0%~30.0% ;山藥的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為1.0%~30.0%。
[0053] 本發(fā)明的實(shí)施例中，山楂與山藥的質(zhì)量比為(3.0~25.0):(3.0~25.0)。
[0054] 山楂的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為3.0%~25.0% ;山藥的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為3.0%~25.0%。
[0055] 一些實(shí)施例中，山楂與山藥的質(zhì)量比為25:5.0。
[0056]在此實(shí)施例中，山楂的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為25% ;山藥的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為5.0%。
[0057] 一些實(shí)施例中，山楂與山藥的質(zhì)量比為5.0:15。
[0058]在此實(shí)施例中，山楂的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為5.0%;山藥的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為15%。
[0059] 一些實(shí)施例中，山楂與山藥的質(zhì)量比為8.0:25。
[0060]在此實(shí)施例中，山楂的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為8.0% ;山藥的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為25%。
[0061 ] 一些實(shí)施例中，山楂與山藥的質(zhì)量比為3:25.0。
[0062]在此實(shí)施例中，山楂的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為3% ;山藥的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為25.0%。
[0063] 一些實(shí)施例中，山楂與山藥的質(zhì)量比為3.0:3.0。
[0064]在此實(shí)施例中，山楂的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為3.0% ;山藥的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為3.0%。
[0065] 本發(fā)明將益生菌、益生元、山楂和山藥進(jìn)行合理復(fù)配，各組分協(xié)同作用，從而使得 所得組合物具有良好的防治腹瀉、調(diào)節(jié)腸道菌群的作用。其效果顯著優(yōu)于(P〈〇.05)對比例 (對比例1:僅給予山楂和山藥，對比例2:僅給予益生元和益生菌）。
[0066] 本發(fā)明中，益生菌、益生元、山楂和山藥的質(zhì)量比為（2.0~40.0):(30.0~96.0): (1.0~30.0):(1.0~30.0)。
[0067] 本發(fā)明的實(shí)施例中，益生菌、益生元、山楂和山藥的質(zhì)量比為(4.0~25.0):(47.0 ~90.0):(3.0~25.0):(3.0~25.0)。
[0068] 一些實(shí)施例中，益生菌、益生元、山楂和山藥的質(zhì)量比為23.0:47.0:25.0:5.0。 [0069]在此實(shí)施例中，益生菌的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為23.0%;益生元的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為47.0%;山楂的 質(zhì)量分?jǐn)?shù)為25.0% ;山藥的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為5.0%。
[0070] -些實(shí)施例中，益生菌、益生元、山楂和山藥的質(zhì)量比為15.0:65.0:5.0:15.0。
[0071] 在此實(shí)施例中，益生菌的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為15.0%;益生元的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為65.0%;山楂的 質(zhì)量分?jǐn)?shù)為5.0% ;山藥的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為15.0%。
[0072] 一些實(shí)施例中，益生菌、益生元、山楂和山藥的質(zhì)量比為19.0:48.0:8.0:25.0。 [0073]在此實(shí)施例中，益生菌的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為19.0%;益生元的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為48.0%;山楂的 質(zhì)量分?jǐn)?shù)為8.0% ;山藥的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為25.0%。
[0074] 一些實(shí)施例中，益生菌、益生元、山楂和山藥的質(zhì)量比為22.0:50.0:3.0:25.0。 [0075]在此實(shí)施例中，益生菌的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為22.0%;益生元的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為50.0%;山楂的 質(zhì)量分?jǐn)?shù)為3.0% ;山藥的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為25.0%。
[0076] 一些實(shí)施例中，益生菌、益生元、山楂和山藥的質(zhì)量比為4.0:90.0:3.0:3.0。
[0077]在此實(shí)施例中，益生菌的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為4.0% ;益生元的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為90.0% ;山楂的 質(zhì)量分?jǐn)?shù)為3.0%;山藥的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為3.0%。
[0078] 中醫(yī)認(rèn)為脾主運(yùn)化，胃主沉降，脾胃與消化、吸收、排泄和代謝過程有關(guān)。脾失健運(yùn) 時，則會出現(xiàn)泄瀉，故中醫(yī)學(xué)認(rèn)為，"泄瀉之本，無不由于脾胃"?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究發(fā)現(xiàn)脾虛泄瀉 往往伴隨著腸道菌群的紊亂。抗生素的普及和濫用帶來了很多副作用?？股仡愃幬镌跉?死體內(nèi)有害菌的同時，也會殺死體內(nèi)的有益菌，腸道的微生態(tài)平衡被打破，導(dǎo)致菌群失調(diào)， 引起腹瀉。本發(fā)明提供的組合物中不僅添加了具有健運(yùn)脾胃的中草藥山楂和山藥，同時添 加了具有調(diào)節(jié)腸道菌群的益生菌和益生元，通過中藥、益生菌和益生元三者的合理搭配、協(xié) 同作用達(dá)到改善和預(yù)防腹瀉、調(diào)節(jié)腸道菌群的效果。
[0079] 本發(fā)明提供的組合物在制備防治腹瀉的產(chǎn)品中的應(yīng)用。
[0080] 本發(fā)明組合物防治的腹瀉為抗生素相關(guān)性腹瀉和/或脾虛腹瀉。
[0081 ]實(shí)驗表明，以SD大鼠為實(shí)驗對象，以大黃造脾虛腹瀉模型，造模過程中出現(xiàn)倦怠扎 堆、懶動、毛色晦暗、糞便稀溏等表現(xiàn)，造模結(jié)束后10天，模型對照組上述癥狀有所減輕，大 鼠糞便性狀趨于正常，而實(shí)施例1~7的動物活動正常，大便性狀正常，飲食體重與正常比較 無明顯變化。
[0082]以BALB/c小鼠為實(shí)驗對象，以氨芐青霉素造抗生素相關(guān)性腹瀉模型，腹瀉模型對 照組的稀便級、腹瀉指數(shù)與正常對照組比較差異性著(P<〇.05)。與模型對照組相比，對比 例1~2和實(shí)施例1、實(shí)施例4、實(shí)施例5給藥后的稀便級、腹瀉指數(shù)均有不同程度的下降，并且 具有顯著差異。結(jié)果表明，本發(fā)明提供的組合物具有協(xié)同增效作用，可改善抗生素誘導(dǎo)腹瀉 的癥狀。
[0083]本發(fā)明中，本發(fā)明提供的組合物用于防治腹瀉的劑量為0.33g/kg/d。
[0084] 即劑量為每日每千克動物體重給予0.33g本發(fā)明提供的組合物，所述動物為小鼠 或大鼠。
[0085] 本發(fā)明還提供了一種防治腹瀉的產(chǎn)品，其中包括本發(fā)明提供的組合物。
[0086] 所述防治腹瀉的產(chǎn)品為保健品，食品或藥物。
[0087] 所述保健品中還包括保健品中可接受的輔料。
[0088] 所述藥物中還包括藥學(xué)上可接受的輔料。
[0089] 所述食品中還包括食品中可接受的配料。
[0090] 所述保健品或藥品的劑型為口服制劑，優(yōu)選為片劑、膠囊劑、丸劑、顆粒劑、湯劑、 膏劑、露劑、口服液劑、滴丸劑或糖漿劑。
[0091] 本發(fā)明提供的組合物在制備調(diào)節(jié)腸道菌群的產(chǎn)品中的應(yīng)用。
[0092] 本發(fā)明提供的組合物能夠調(diào)節(jié)腸道菌群為調(diào)節(jié)服用抗生素導(dǎo)致的腸道菌群失衡 和/或調(diào)節(jié)脾虛導(dǎo)致的腸道菌群失衡。
[0093]本發(fā)明中，本發(fā)明提供的組合物用于調(diào)節(jié)腸道菌群的劑量為0.33g/kg/d。
[0094] 即劑量為每日每千克動物體重給予0.33g本發(fā)明提供的組合物。
[0095] 以SD大鼠為實(shí)驗對象，以大黃造脾虛腹瀉模型，止瀉實(shí)驗后大鼠糞便細(xì)菌培養(yǎng)結(jié) 果顯示:與正常對照組比較，脾虛模型大鼠糞便中乳酸桿菌和雙歧桿菌均明顯減少，產(chǎn)氣莢 膜梭菌數(shù)量明顯增高;僅給予山楂粉和山藥粉的對照組可顯著提高模型大鼠糞便中乳酸桿 菌數(shù)量，但對其他菌無明顯影響；僅給予益生菌和益生元的對比例2可顯著提高模型大鼠糞 便中乳酸桿菌和雙歧桿菌數(shù)量，但對其他菌無明顯影響；組合樣品組可顯著增高模型大鼠 糞便中乳酸桿菌和雙歧桿菌數(shù)量，且其效果顯著優(yōu)于對比例2。結(jié)果表明，本發(fā)明提供的益 生菌組合物具有協(xié)同增效作用，可改善脾虛泄瀉的癥狀，有效調(diào)節(jié)腸道菌群平衡。
[0096]以BALB/c小鼠為實(shí)驗對象，以氨芐青霉素造抗生素相關(guān)性腹瀉模型，止瀉試驗后， 小鼠糞便細(xì)菌培養(yǎng)結(jié)果顯示：與正常對照組比較，抗生素模型小鼠糞便中乳酸桿菌和雙歧 桿菌均明顯減少，腸桿菌、腸球菌、產(chǎn)氣莢膜梭菌數(shù)量明顯增高;對比例1可顯著提高模型小 鼠糞便中乳酸桿菌和雙歧桿菌數(shù)量，顯著降低腸球菌和產(chǎn)氣莢膜梭菌的數(shù)量，對其腸桿菌 無明顯影響;對比例2可顯著提高模型小鼠糞便中乳酸桿菌和雙歧桿菌數(shù)量，顯著降低腸桿 菌、腸球菌和產(chǎn)氣莢膜梭菌的數(shù)量;實(shí)施例1、實(shí)施例4、實(shí)施例5可顯著增高模型小鼠糞便中 乳酸桿菌和雙歧桿菌數(shù)量，顯著降低腸桿菌、腸球菌和產(chǎn)氣莢膜梭菌的數(shù)量。結(jié)果表明，本 發(fā)明提供的益生菌組合物具有協(xié)同增效作用，可改善抗生素誘導(dǎo)的腹瀉癥狀，有效調(diào)節(jié)腸 道菌群平衡。
[0097] 本發(fā)明還提供了一種調(diào)節(jié)腸道菌群的產(chǎn)品，其中包括本發(fā)明提供的組合物。
[0098] 所述調(diào)節(jié)腸道菌群的產(chǎn)品為保健品，食品或藥物。
[0099] 所述保健品中還包括保健品中可接受的輔料。
[0100] 所述藥物中還包括藥學(xué)上可接受的輔料。
[0101] 所述食品中還包括食品中可接受的配料。
[0102] 所述保健品或藥品的劑型為口服制劑，優(yōu)選為片劑、膠囊劑、丸劑、顆粒劑、湯劑、 膏劑、露劑、口服液劑、滴丸劑或糖漿劑。
[0103] 本發(fā)明提供了一種組合物及其在制備改善腸道功能的產(chǎn)品中的應(yīng)用，本發(fā)明將益 生菌、益生元、山楂和山藥進(jìn)行合理復(fù)配，各組分協(xié)同作用，從而使得所得組合物具有良好 的防治腹瀉、調(diào)節(jié)腸道菌群的作用。其效果顯著優(yōu)于(P〈〇.05)對比例。
【具體實(shí)施方式】
[0104] 本發(fā)明提供了一種組合物及其在制備改善腸道功能的產(chǎn)品中的應(yīng)用，本領(lǐng)域技術(shù) 人員可以借鑒本文內(nèi)容，適當(dāng)改進(jìn)工藝參數(shù)實(shí)現(xiàn)。特別需要指出的是，所有類似的替換和改 動對本領(lǐng)域技術(shù)人員來說是顯而易見的，它們都被視為包括在本發(fā)明。本發(fā)明的方法及應(yīng) 用已經(jīng)通過較佳實(shí)施例進(jìn)行了描述，相關(guān)人員明顯能在不脫離本
【發(fā)明內(nèi)容】
、精神和范圍內(nèi) 對本文的方法和應(yīng)用進(jìn)行改動或適當(dāng)變更與組合，來實(shí)現(xiàn)和應(yīng)用本發(fā)明技術(shù)。
[0105] 本發(fā)明采用的材料、儀器皆為普通市售品，皆可于市場購得。
[0106] 所述山楂粉為山楂鮮果經(jīng)干燥、粉碎后制得，粒徑為40目；所述山藥粉為山藥根莖 干燥粉碎后制得，粒徑為40目。
[0107] 本發(fā)明采用的乳酸桿菌中菌的密度為不少于100億CFU/g。
[0108] 本發(fā)明采用的雙歧桿菌中菌的密度為不少于100億CFU/g。
[0109] 下面結(jié)合實(shí)施例，進(jìn)一步闡述本發(fā)明：
[0110] 實(shí)施例1
[0111] 乳酸桿菌20.0 g、雙歧桿菌3. Og、山楂粉25. Og、山藥粉5. Og、菊粉47. Og。
[0112] 將上述組分粉碎后，混勻，制得組合物。
[0113] 實(shí)施例2
[0114]乳酸桿菌10.Og、雙歧桿菌5.Og、山楂粉5.Og、山藥15.Og、菊粉65.Og。
[0115] 將上述組分粉碎后，混勻，制得組合物。
[0116] 實(shí)施例3
[0117] 乳酸桿菌7 · Og、雙歧桿菌12 · Og、山楂粉8 · Og、山藥粉25 · Og、菊粉48 · Og。
[0118] 將上述組分粉碎后，混勻，制得組合物。
[0119] 實(shí)施例4
[0120]乳酸桿菌2. Og、雙歧桿菌20.0 g、山楂粉3. Og、山藥粉25g、菊粉50.0 g。
[0121 ] 將上述組分粉碎后，混勻，制得組合物。
[0122] 實(shí)施例5
[0123] 乳酸桿菌2.0g、雙歧桿菌2.0g、山楂粉3.0g、山藥粉3.0g、菊粉90.0g。
[0124] 將上述組分粉碎后，混勻，制得組合物。
[0125] 對比例1
[0126] 山楂粉50g、山藥粉50g。粉碎后，混勻，制得組合物。
[0127] 對比例2
[0128] 乳酸桿菌2. Og、雙歧桿菌2. Og、菊粉96g。粉碎后，混勻，制得組合物。
[0129] 實(shí)施例8
[0130] 研究本發(fā)明組合物制得的組合物具有改善和預(yù)防腹瀉的作用。
[0131] 1、實(shí)驗材料
[0132] 1.1實(shí)驗樣品與制劑
[0133] 以實(shí)施例1、實(shí)施例4、實(shí)施例5和對比例1~2制得的組合物為實(shí)驗樣品，對比例和 實(shí)施例是在相同的給藥劑量下進(jìn)行對比實(shí)驗。實(shí)驗以未經(jīng)處理的正常鼠為正常對照，以造 模后不給于實(shí)驗樣品的鼠為模型對照，具體如表1:
[0134] 表1預(yù)防和改善脾虛泄瀉給藥劑量

[0136] l. 2實(shí)驗試劑
[0137] 大黃，3 %過氧化氫，注射用氨芐青霉素，EMB培養(yǎng)基、BDS培養(yǎng)基、TPY瓊脂培養(yǎng)基、 TSC培養(yǎng)基、LBS瓊脂和腸球菌瓊脂。
[0138] 1.3實(shí)驗動物
[0139] SPF級SD大鼠，體重180-220g，雌雄各半；
[0140] SPF級BALB/c小鼠，三周齡，雄性，18g~22g。
[0141] 1.4實(shí)驗結(jié)果統(tǒng)計學(xué)處理
[0142] 實(shí)驗數(shù)據(jù)用均數(shù)土標(biāo)準(zhǔn)差(X土s)表示，采用SPSS 16.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析，不同 實(shí)驗組之間的差異分析采用t檢驗，P〈0.05為差異有顯著性統(tǒng)計學(xué)意義，P〈0.01為差異有極 顯著性統(tǒng)計學(xué)意義。
[0143] 2、實(shí)驗方法
[0144] 2.1選取健康SD大鼠，隨機(jī)分組，即正常對照組、模型對照組、對比例1、對比例2、實(shí) 施例1、實(shí)施例4、實(shí)施例5組，共計7組，每組10只。
[0145] 除正常對照組外，其他大鼠進(jìn)行脾虛模型制備:大黃水洗除浮塵，加水煮2次(每次 煮沸后15min)，過濾，合并兩次濾液，水浴濃縮至生藥濃度為lg/ml，4°C冰箱儲存?zhèn)溆?。動?正常喂養(yǎng)3d，灌胃給予大黃水煎液(lg/ml )，給藥體積Iml/100g體重，每天兩次，連續(xù)10天。
[0146] 脾虛造模結(jié)束后，按表1給藥，灌胃體積lml/lOOg體重，1次/天，連續(xù)IOd;正常對照 組和模型對照組給予等量蒸餾水。大黃脾虛大鼠造模過程中出現(xiàn)倦怠扎堆、懶動、毛色晦 暗、糞便稀溏等表現(xiàn)，造模結(jié)束后10天，上述癥狀有所減輕，大鼠糞便性狀趨于正常，實(shí)施例 1、實(shí)施例4、實(shí)施例5動物活動正常，大便性狀正常，飲食體重與正常比較無明顯變化。
[0147] 2.2BALB/C小鼠適應(yīng)性飼養(yǎng)1周后，隨機(jī)分組，即正常對照組、模型對照組、對比例 1、對比例2、實(shí)施例1、實(shí)施例4、實(shí)施例5組，共計7組，每組15只。
[0148] 小鼠進(jìn)行抗生素相關(guān)性腹瀉模型的制備:小鼠每天以22.4g/kg(小鼠重量)劑量的 氨芐青霉素連續(xù)灌胃小鼠5天，每天兩次，每次劑量為11.2g/kg;正常對照組5只小鼠每天同 時間灌胃同體積的生理鹽水作為參照。造摸成功的判斷標(biāo)準(zhǔn)為:毛發(fā)欠光澤，采食量減少， 小鼠蜷縮，活動較少，反應(yīng)較遲鈍，動作比較遲緩，屁股有明顯的污跡。
[0149] 第6d觀察各組小鼠并稱量各只小鼠的造模后體重，剔除造模不理想的小鼠，剔除 后各組的小鼠均為10只。第6d各組小鼠進(jìn)行給藥前稀便點(diǎn)數(shù)實(shí)驗:禁食12h，每組每只小鼠 分別灌胃氨芐青霉素(〇.3g生藥/mL)25mL/kg體重，空白對照組灌胃等量的生理鹽水。此后 放入觀察籠中單只單籠觀察(籠底鋪有專用的濾紙），記錄灌胃氨芐青霉素藥液后每只小鼠 5h內(nèi)（籠底濾紙根據(jù)情況及時更換）的稀便數(shù)、干便數(shù)、糞便總數(shù)并測量各稀便的稀便級和 各小鼠的腹瀉指數(shù)。干(成形)便與稀(濕)便的判斷以濾紙有無污跡為標(biāo)準(zhǔn)。
[0150] 表2稀便級別判斷標(biāo)準(zhǔn)

[0152] 稀便率計算公式:稀便率=一定時間內(nèi)所排稀便數(shù)/總排便數(shù)。
[0153] 腹瀉指數(shù)計算公式:腹瀉指數(shù)=稀便率X稀便級。
[0154] 第7d開始，進(jìn)行對給予對比例和實(shí)施例的小鼠進(jìn)行治療研究。每天灌胃1次，給藥 劑量為0.33mg/kg，連續(xù)灌胃治療14天。腹瀉模型對照組和正常對照組皆灌胃等量的生理鹽 水。灌胃治療14天后，第15天進(jìn)行稀便點(diǎn)數(shù)實(shí)驗，對稀便級、稀便率和腹瀉指數(shù)進(jìn)行計算。結(jié) 果如表3:
[0155] 表3腹瀉小鼠稀便級、腹瀉指數(shù)
LUID/J 汪：與模型對照組K牧，樸·<υ·〇?3，*樸*<U.Ui，林樸*<〇.UUi
[0158] 由表3知，腹瀉模型對照組的稀便級、腹瀉指數(shù)與正常對照組比較差異性著（Ρ< 0.05)。與模型對照組相比，對比例和實(shí)施例的組合物均能夠使稀便級、腹瀉指數(shù)有不同程 度的下降，并且具有顯著差異。且，實(shí)施例1、實(shí)施例4、實(shí)施例5的效果顯著優(yōu)于對比例1~2 (ρ〈0.01)。結(jié)果表明，本發(fā)明提供的組合物具有協(xié)同增效作用，可改善抗生素誘導(dǎo)腹瀉的癥 狀。
[0159] 實(shí)施例8
[0160] 研究本發(fā)明組合物制得的組合物具有改善和預(yù)防腹瀉的作用。
[0161] 1、實(shí)驗材料
[0162] 1.1實(shí)驗樣品與制劑
[0163] 以實(shí)施例1、實(shí)施例4、實(shí)施例5和對比例1~2制得的組合物為實(shí)驗樣品，對比例和 實(shí)施例是在相同的給藥劑量下進(jìn)行對比實(shí)驗。實(shí)驗以未經(jīng)處理的正常鼠為正常對照，以造 模后不給于實(shí)驗樣品的鼠為模型對照，具體如表4:
[0164] 表4預(yù)防和改善脾虛泄瀉給藥劑量
[0167] h 2實(shí)驗試劑
[0168] 大黃，3 %過氧化氫，注射用氨芐青霉素，EMB培養(yǎng)基、BDS培養(yǎng)基、TPY瓊脂培養(yǎng)基、 TSC培養(yǎng)基、LBS瓊脂和腸球菌瓊脂。
[0169] 1.3實(shí)驗動物
[0170] SPF級SD大鼠，體重180-220g，雌雄各半；
[0171 ] SPF級BALB/c小鼠，三周齡，雄性，18g~22g。
[0172] 1.4實(shí)驗結(jié)果統(tǒng)計學(xué)處理
[0173]實(shí)驗數(shù)據(jù)用均數(shù)土標(biāo)準(zhǔn)差(X土s)表示，采用SPSS 16.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析，不同 實(shí)驗組之間的差異分析采用t檢驗，P〈0.05為差異有顯著性統(tǒng)計學(xué)意義，P〈0.01為差異有極 顯著性統(tǒng)計學(xué)意義。
[0174] 2、實(shí)驗方法
[0175] 2.1選取健康SD大鼠，隨機(jī)分組，即正常對照組、模型對照組、對比例1、對比例2、實(shí) 施例1、實(shí)施例4、實(shí)施例5組，共計7組，每組10只。
[0176] 除正常對照組外，其他大鼠進(jìn)行脾虛模型制備:大黃水洗除浮塵，加水煮2次(每次 煮沸后15min)，過濾，合并兩次濾液，水浴濃縮至生藥濃度為lg/ml，4°C冰箱儲存?zhèn)溆谩游?正常喂養(yǎng)3d，灌胃給予大黃水煎液(lg/ml )，給藥體積Iml/100g體重，每天兩次，連續(xù)10天。
[0177] 脾虛造模結(jié)束后，按表1給藥，灌胃體積lml/lOOg體重，1次/天，連續(xù)IOd;正常對照 組和模型對照組給予等量蒸餾水。給藥結(jié)束后收集各組大鼠新鮮糞便，將所有樣品連續(xù)10 倍稀釋，每個稀釋度取樣〇.2mL涂布于1^5、1?￥』1?、腸球菌瓊脂平板35(：，37°(：，厭氧培4811 后分別對乳酸桿菌、雙歧桿菌、腸桿菌、腸球菌、產(chǎn)氣莢膜梭菌進(jìn)行平板計數(shù)。
[0178] 結(jié)果如表5:
[0179]表5組合物對脾虛大鼠糞便細(xì)菌培養(yǎng)的影響(單位:lgCFU/g)

[0181] 正常對照組比較，*p<0 · 05，**p<0 · 01;
[0182] 與模型對照組比較，#p < 0 · 0 5，##p < 0 · 01
[0183] 大鼠糞便細(xì)菌培養(yǎng)結(jié)果顯示(表5):與正常對照組比較，脾虛模型大鼠糞便中乳酸 桿菌和雙歧桿菌均明顯減少，產(chǎn)氣莢膜梭菌數(shù)量明顯增高;對比例1可顯著提高模型大鼠糞 便中乳酸桿菌數(shù)量，但對其他菌無明顯影響;對比例2可顯著提高模型大鼠糞便中乳酸桿菌 和雙歧桿菌數(shù)量，但對其他菌無明顯影響;實(shí)施例1、實(shí)施例4、實(shí)施例5可顯著增高模型大鼠 糞便中乳酸桿菌和雙歧桿菌數(shù)量，但對其他菌無明顯影響，且其效果顯著優(yōu)于對比例1~2 (p〈0.01)。結(jié)果表明，本發(fā)明提供的益生菌組合物具有協(xié)同增效作用，可改善脾虛泄瀉的癥 狀，有效調(diào)節(jié)腸道菌群平衡。
[0184] 2.2BALB/C小鼠適應(yīng)性飼養(yǎng)1周后，隨機(jī)分組，即正常對照組、模型對照組、對比例 1、對比例2、實(shí)施例1、實(shí)施例4、實(shí)施例5組，共計7組，每組15只。
[0185] 小鼠進(jìn)行抗生素相關(guān)性腹瀉模型的制備:小鼠每天以22.4g/kg(小鼠重量)劑量的 氨芐青霉素連續(xù)灌胃小鼠5天，每天兩次，每次劑量為11.2g/kg;正常對照組5只小鼠每天同 時間灌胃同體積的生理鹽水作為參照。造摸成功的判斷標(biāo)準(zhǔn)為:毛發(fā)欠光澤，采食量減少， 小鼠蜷縮，活動較少，反應(yīng)較遲鈍，動作比較遲緩，屁股有明顯的污跡。
[0186] 第6d觀察各組小鼠并稱量各只小鼠的造模后體重，剔除造模不理想的小鼠，剔除 后各組的小鼠均為10只。第6d各組小鼠進(jìn)行給藥前稀便點(diǎn)數(shù)實(shí)驗:禁食12h，每組每只小鼠 分別灌胃番瀉葉藥液(0.3g生藥/mL) 25mL/kg體重，空白對照組灌胃等量的生理鹽水。
[0187] 第7d開始，進(jìn)行對給予對比例和實(shí)施例的小鼠進(jìn)行治療研究。每天灌胃1次，給藥 劑量為0.33mg/kg，連續(xù)灌胃治療14天。腹瀉模型對照組和正常對照組皆灌胃等量的生理鹽 水。灌胃治療14天后，第15天無菌采取灌胃治療前后糞便樣品，將所有樣品連續(xù)10倍稀釋， 每個稀釋度取樣〇. 2mL涂布于LBS、TPY、EMB、腸球菌瓊脂平板、TSC，37 °C，厭氧培養(yǎng)48h后分 別對乳桿菌、雙歧桿菌、腸桿菌、腸球菌、產(chǎn)氣莢膜梭菌進(jìn)行平板計數(shù)。
[0188] 結(jié)果如表6:
[0189] 表6組合物對抗生素誘導(dǎo)腹瀉大鼠糞便細(xì)菌培養(yǎng)的影響(單位:lgCFU/g)
[0191] 與正常對照組比較，*p <0 · 05，#p <0 · 01;
[0192] 給藥前后自身比較，#ρ<〇·〇5，##ρ<〇·〇1，###ρ<〇·〇〇1
[0193] 小鼠糞便細(xì)菌培養(yǎng)結(jié)果顯示(表6):與正常對照組比較，抗生素模型小鼠糞便中乳 酸桿菌和雙歧桿菌均明顯減少，腸桿菌、腸球菌、產(chǎn)氣莢膜梭菌數(shù)量明顯增高;對比例1可顯 著提高模型小鼠糞便中乳酸桿菌和雙歧桿菌數(shù)量，顯著降低腸球菌和產(chǎn)氣莢膜梭菌的數(shù) 量，對其腸桿菌無明顯影響；對比例2可顯著提高模型小鼠糞便中乳酸桿菌和雙歧桿菌數(shù) 量，顯著降低腸桿菌、腸球菌和產(chǎn)氣莢膜梭菌的數(shù)量;實(shí)施例1、實(shí)施例4、實(shí)施例5可顯著增 高模型小鼠糞便中乳酸桿菌和雙歧桿菌數(shù)量，顯著降低腸桿菌、腸球菌和產(chǎn)氣莢膜梭菌的 數(shù)量，且其效果顯著優(yōu)于對比例1~2(ρ〈0.01)。結(jié)果表明，本發(fā)明提供的益生菌組合物具有 協(xié)同增效作用，可改善抗生素誘導(dǎo)的腹瀉癥狀，有效調(diào)節(jié)腸道菌群平衡。
[0194] 以上僅是本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方式，應(yīng)當(dāng)指出，對于本技術(shù)領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來 說，在不脫離本發(fā)明原理的前提下，還可以做出若干改進(jìn)和潤飾，這些改進(jìn)和潤飾也應(yīng)視為 本發(fā)明的保護(hù)范圍。
【主權(quán)項】
1. 一種組合物，其特征在于，包括:益生菌、益生元、山楂和山藥。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的組合物，其特征在于，所述益生菌、益生元、山楂和山藥的質(zhì)量 比為（2.0~40.0) :(30.0~96.0) :(1.0~30.0) :(1.0~30.0)。3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的組合物，其特征在于，所述益生菌選自乳酸桿菌和雙歧桿菌； 所述益生元為菊粉。4. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的組合物，其特征在于，所述乳酸桿菌與雙歧桿菌的質(zhì)量比為 (2.0~20.0):(2.0~20.0)。5. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的組合物，其特征在于，其中所述益生菌的添加量為106CFU/g~ 1012CFU/g。6. 權(quán)利要求1~5任一項所述的組合物在制備防治腹瀉的產(chǎn)品中的應(yīng)用。7. 根據(jù)權(quán)利要求6所述的應(yīng)用，其特征在于，所述腹瀉為抗生素相關(guān)性腹瀉和/或脾虛 腹瀉。8. -種防治腹瀉的產(chǎn)品，其特征在于，包括權(quán)利要求1~5任一項所述的組合物。9. 權(quán)利要求1~5任一項所述的組合物在制備調(diào)節(jié)腸道菌群的產(chǎn)品中的應(yīng)用。10. 根據(jù)權(quán)利要求9所述的應(yīng)用，其特征在于，所述調(diào)節(jié)腸道菌群為調(diào)節(jié)服用抗生素導(dǎo) 致的腸道菌群失衡和/或調(diào)節(jié)脾虛導(dǎo)致的腸道菌群失衡。11. 一種調(diào)節(jié)腸道菌群的產(chǎn)品，其特征在于，包括權(quán)利要求1~5任一項所述的組合物。
【文檔編號】A61K35/745GK106074975SQ201610580563
【公開日】2016年11月9日
【申請日】2016年7月21日 公開號201610580563.1, CN 106074975 A, CN 106074975A, CN 201610580563, CN-A-106074975, CN106074975 A, CN106074975A, CN201610580563, CN201610580563.1
【發(fā)明人】金鑫, 葛亞中, 馬忠華, 秦垂新
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