一種蛇床子揮發(fā)油的制備方法及其抗腫瘤應(yīng)用
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種蛇床子揮發(fā)油的制備方法及其抗腫瘤應(yīng)用。該制備方法包括：將藥材蛇床子粉碎，過篩，采用生物酶進(jìn)行發(fā)酵3~5天；發(fā)酵后的原料加入到超聲波裝置中，提取2~3h，得到提取液；提取液再經(jīng)減壓濃縮、萃取、無水硫酸鈉干燥、濃縮等步驟，即可得到蛇床子揮發(fā)油。藥理實(shí)驗(yàn)表明，所得蛇床子揮發(fā)油對肺癌和結(jié)腸癌均有一定的抑制作用，具有顯著的抗癌作用，且其毒副作用小。將蛇床子揮發(fā)油與醫(yī)學(xué)上可接受的輔料一起制成抗腫瘤的藥物，藥物的劑型為注射劑、膠囊劑、片劑、顆粒劑、丸劑、合劑、口服液中的一種。
【專利說明】
一種蛇床子揮發(fā)油的制備方法及其抗腫瘤應(yīng)用
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明涉及一種蛇床子揮發(fā)油的制備方法及其抗腫瘤應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 蛇床子為傘形科植物蛇床子的干燥成熟果實(shí)，別名蛇米、野胡蘿卜子、野茴香。其傳 統(tǒng)功效為補(bǔ)腎壯陽、祛濕殺蟲。現(xiàn)在多作為外用藥使用，婦科廣泛外用于治療婦人陰癢、滴 蟲性陰道炎、老年性陰道炎、外陰部硬化性萎縮性苔蘚、子宮頸糜爛，尤其是外治外陰濕疹， 蛇床子還被用于治療不育、不孕癥、手足癬、濕疹、病毒性皮疹、皮炎等。蛇床子的化學(xué)成分 主要為香豆素和揮發(fā)油類。蛇床子的含油量較高，且揮發(fā)油為其整體藥效的主要成分。
[0003] 揮發(fā)油是中藥中的一類有效成分，在植物界分布廣泛，且具有多種藥理活性和廣 泛的用途。主要應(yīng)用在各類食品、日化用品中做香精使用，對揮發(fā)油的功能性研究尚未有系 統(tǒng)的展開?，F(xiàn)代藥理學(xué)研究表明，蛇床子的揮發(fā)油在臨床上具有止咳、平喘、祛痰、發(fā)汗、解 表、祛風(fēng)、鎮(zhèn)痛、解熱、利尿、健胃、抗菌、消毒、殺蟲燈功效，但對其抗腫瘤活性研究甚少。
[0004] 經(jīng)文獻(xiàn)檢索，未見與本發(fā)明相同的的公開文獻(xiàn)報(bào)道。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明的目的在于提供一種蛇床子揮發(fā)油的制備方法及其抗腫瘤應(yīng)用，該揮發(fā)油 品質(zhì)好、純度高，且抗腫瘤效果明顯。
[0006] 本發(fā)明是通過如下技術(shù)方案完成的： a. 將藥材蛇床子粉碎，過40目篩，加入原料質(zhì)量1~2%的生物酶，噴灑原料質(zhì)量0.5~1倍 的檸檬酸/檸檬酸鈉緩沖溶液，薄膜包裹，于40~50°C發(fā)酵4~6天； b. 將發(fā)酵后的原料加入到40KHz的超聲波裝置中，加入原料4~6倍的50~60%的乙醇溶 液，設(shè)置提取溫度為60~70°C，重復(fù)提取2次，每次2h; c. 所得提取液減壓濃縮至原體積的1/6~1/4,濃縮物再經(jīng)有機(jī)溶劑萃取2~3次、無水硫 酸鈉干燥、減壓濃縮等步驟，即可得到蛇床子揮發(fā)油。
[0007] 步驟a中所述的生物酶為質(zhì)量比為3:1的纖維素酶與半纖維素酶，其酶的活性為30 ~60U/mg〇
[0008] 步驟c中所述的有機(jī)溶劑為石油醚或乙醚中的任意一種。
[0009] 蛇床子揮發(fā)油可用于制備具有抗腫瘤作用的藥物中，在劑型方面可采用各種劑 型，如片劑、膠囊劑、顆粒劑、散劑、丸劑或緩釋劑。
[0010]蛇床子揮發(fā)油抗腫瘤活性實(shí)驗(yàn)： 1、 受試提取物:蛇床子揮發(fā)油 2、 細(xì)胞株:肺癌細(xì)胞株GLC4、結(jié)腸癌細(xì)胞株C0L0。
[0011] 3、給藥劑量和方法 蛇床子揮發(fā)油組：l〇mg/kg/天，灌胃給藥，隔一天一次，共五天。
[0012]陰性對照組：10mg/kg/天，生理鹽水肌注給藥，隔一天一次，共五天。
[0013]陽性對照組:30mg/kg/天，5-氟尿啼啶肌注給藥，隔一天一次，共五天。
[0014]灌胃后2h，用HPLC檢測血漿藥物濃度。
[0015] 4、種植瘤模型的建立與給藥 (1) 皮下種植:分別將上述細(xì)胞培養(yǎng)至90%融合，收集細(xì)胞，取2 X 10 6細(xì)胞懸液，注射至 小鼠肋下皮下組織，于術(shù)后15天取材，稱量瘤重。另取同樣模型，觀察30天，計(jì)算藥物對模型 動物存活率的影響； (2) 肺內(nèi)種植瘤肺轉(zhuǎn)移模型：取2X10 6細(xì)胞懸液注射至小鼠肺包膜內(nèi)，于術(shù)后15天取 肺，測量瘤重和肺轉(zhuǎn)移數(shù)； (3) 給藥方式:種植瘤細(xì)胞同時給藥。
[0016] 5、結(jié)果 結(jié)果如表1、表2和表3顯示，蛇床子揮發(fā)油組用藥均有不同程度的抑制腫瘤生長和轉(zhuǎn)移 的作用，可延長實(shí)驗(yàn)小鼠的生存期。
[0017] 表1蛇床子揮發(fā)油對種植瘤的抑制作用(n=20，jc:土 S)
表2蛇床子揮發(fā)油對腫瘤轉(zhuǎn)移發(fā)生率的影響(n=20，％)
表3蛇床子揮發(fā)油對實(shí)驗(yàn)小鼠生存率的影響(n=20，％)
由表1、表2和表3可以看出，蛇床子揮發(fā)油組用藥抑制腫瘤生長、轉(zhuǎn)移的效果強(qiáng)于陽性 對照組，可有效延緩實(shí)驗(yàn)小鼠的生存壽命，其效果明顯優(yōu)于陰性對照組。
[0018] 本發(fā)明用于制備抗腫瘤藥物時，在其口服配方中添加腸吸收促進(jìn)劑，包含中鏈脂 肪酸鹽、膽酸鹽、鵝去氧膽酸鹽、殼聚糖及其衍生物中的一種或幾種。
[0019] 下面將結(jié)合【具體實(shí)施方式】進(jìn)一步說明本發(fā)明，但本發(fā)明要求保護(hù)的范圍并不局限 于下列實(shí)施方式。
[0020]
【具體實(shí)施方式】： 實(shí)施例1 蛇床子揮發(fā)油的制備 將藥材蛇床子粉碎，過40目篩，加入原料質(zhì)量2%的生物酶(纖維素酶與半纖維素酶的質(zhì) 量比為3:1，活性為60u/mg)，噴灑原料質(zhì)量1倍的檸檬酸/檸檬酸鈉緩沖溶液，薄膜包裹，于 50°C發(fā)酵4天;將發(fā)酵后的原料加入到40KHz的超聲波裝置中，加入原料6倍的60%的乙醇溶 液，設(shè)置提取溫度為65°C，重復(fù)提取2次，每次2h;所得提取液減壓濃縮至原體積的1/6，濃 縮物再經(jīng)乙醚萃取2次、無水硫酸鈉干燥、減壓濃縮等步驟，即可得到蛇床子揮發(fā)油。
[0021] 實(shí)施例2 片劑:蛇床子揮發(fā)油40g，淀粉140g，鵝去氧膽酸鹽20g，制粒，壓片制成1000片。服用方 法:成人一次1片，一日2次。
[0022] 實(shí)施例3 膠囊:蛇床子揮發(fā)油40g，淀粉140g，殼聚糖20g，混勻，制成1000粒。服用方法:成人一次 1粒，一日2次。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種蛇床子揮發(fā)油的制備方法，其特征在于，包括如下步驟： a. 將藥材蛇床子粉碎，過40目篩，加入原料質(zhì)量1~2%的生物酶，噴灑原料質(zhì)量0.5~1倍 的檸檬酸/檸檬酸鈉緩沖溶液，薄膜包裹，于40~50°C發(fā)酵4~6天； b. 將發(fā)酵后的原料加入到40KHz的超聲波裝置中，加入原料4~6倍的50~60%的乙醇溶 液，設(shè)置提取溫度為60~70°C，重復(fù)提取2次，每次2h; c. 所得提取液減壓濃縮至原體積的1/6~1/4,濃縮物再經(jīng)有機(jī)溶劑萃取2~3次、無水硫 酸鈉干燥、減壓濃縮等步驟，即可得到蛇床子揮發(fā)油。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種蛇床子揮發(fā)油的制備方法，其特征在于，步驟a中所述的 生物酶為質(zhì)量比為3:1的纖維素酶與半纖維素酶，其酶的活性為30~60U/mg。3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種蛇床子揮發(fā)油的制備方法，其特征在于，步驟c中所述的 有機(jī)溶劑為石油醚或乙醚中的任意一種。4. 根據(jù)權(quán)利要求1~3所述方法制備的蛇床子揮發(fā)油在制備抗腫瘤作用的藥物中的應(yīng) 用。
【文檔編號】A61P35/00GK106038634SQ201610303029
【公開日】2016年10月26日
【申請日】2016年5月10日
【發(fā)明人】楊成東
【申請人】南京澤朗醫(yī)藥科技有限公司