一種藥物組合物及制備方法和應用
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種藥物組合物，由包括如下組分的原料制備得到：仙鶴草、丹參、桃仁、降香、麥冬、黃連、玄參、丹皮、水蛭。其中，仙鶴草和丹參共為君藥，桃仁、降香、丹皮三者共為臣藥，麥冬、玄參、水蛭三者共為佐藥，君臣佐藥各司其職又相互配合，使得藥物組合物具有清營解毒、活血通絡，兼有扶正之功，特別是具有改善心功能和心肌病理形態(tài)，促進血管新生，抑制心肌細胞凋亡，抑制炎癥反應，保護內(nèi)皮細胞等作用，對治療或預防冠心病有很好的療效。
【專利說明】
-種藥物組合物及制備方法和應用
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明設及中藥技術(shù)領(lǐng)域，尤其設及一種藥物組合物及制備方法和應用。
【背景技術(shù)】
[0002] 當前，由于環(huán)境狀況改變、飲食變化和人口的老齡化，屯、血管疾病已成為人類主要 死亡原因，2012年發(fā)表于《柳葉刀》全球疾病負擔研究表明，在1990年~2010年間全球人群 的235種死亡原因中，缺血性屯、臟病排名第一，卒中位列第二。在臨床上處理冠屯、病的原則 一直是要盡早恢復血液再灌注，使缺血屯、肌重新得到氧的供應，提供代謝所必需的營養(yǎng)物 質(zhì)并清除代謝廢物。自20世紀80年代W來，隨著現(xiàn)代醫(yī)學的發(fā)展，可W靜脈溶栓、冠狀動脈 內(nèi)溶栓、經(jīng)皮冠狀動脈腔內(nèi)成形術(shù)、冠狀動脈內(nèi)支架置入W及冠狀動脈搭橋術(shù)等屯、臟再灌 注治療冠屯、病，使冠屯、病的病死率已經(jīng)明顯下降。西藥治療多聚焦在抗凝、抗血小板治療， 調(diào)脂治療等治療方法，但有許多不良反應，且有些治療方法還需進一步臨床驗證。中藥具有 效果明顯，副作用小和價廉的優(yōu)點，作為保護作用強、持續(xù)時間長、安全可靠和價廉的防治 缺血性屯、肌病的藥物，應用于臨床，將具有很大的價值和深遠的意義。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003] 本發(fā)明的目的是提供一種藥物組合物，該藥物組合物具有清營解毒、活血通絡之 功效，治療冠屯、病效果明顯，副作用小，安全可靠。
[0004] 為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明的技術(shù)方案之一是:一種藥物組合物，由包括如下組分的 原料制備得到:仙鶴草、丹參、桃仁、降香、麥冬、黃連、玄參、丹皮、水賠。
[0005] 優(yōu)選地，按重量份計，包括10-20份仙鶴草、5-15份丹參、5-10份桃仁、10-15份降 香、10-20份麥冬、3-6份黃連、5-15份玄參、5-15份丹皮、3-10份水賠。
[0006] 進一步優(yōu)選地，按重量份計，包括12-18份仙鶴草、8-12份丹參、8-10份桃仁、10-12 份降香、12-18份麥冬、5-6份黃連、8-12份玄參、8-12份丹皮、5-6份水賠。
[0007] 再進一步優(yōu)選地，包括10份仙鶴草、5份丹參、5份桃仁、10份降香、10份麥冬、3份黃 連、5份玄參、5份丹皮、3份水賠。
[000引或者，包括20份仙鶴草、15份丹參、10份桃仁、15份降香、20份麥冬、6份黃連、15份 玄參、15份丹皮、10份水賠。
[0009] 或者，包括15份仙鶴草、10份丹參、10份桃仁、10份降香、15份麥冬、6份黃連、10份 玄參、10份丹皮、5份水賠。
[0010] 最優(yōu)選地，按重量份計，包括15份仙鶴草、10份丹參、8份桃仁、12份降香、15份麥 冬、5份黃連、10份玄參、10份丹皮、6份水賠。
[ΟΟ?]所述重量份為本領(lǐng)域公知的4邑，111旨，旨，1^重量單位，或為其倍數(shù)，如1/100，1/10，10 倍，100倍等。
[0012]該藥物組合物中，仙鶴草別名脫力草、瓜香草、老牛筋、狼芽草，來源為菩薇科植物 龍芽草Agrimonia pilosa Ledeb.的地上部分。仙鶴草味苦、澀，性平，歸屯、、肝經(jīng)，有收斂止 血、補虛、止頻、殺蟲之功?，F(xiàn)代研究表明仙鶴草還有強屯、、抗屯、率失常、抗氧化、降壓、鎮(zhèn)痛 抗炎、抗腫瘤、降血糖等作用，用于治療冠屯、病、腸道疾病、美尼爾氏綜合癥、糖尿病、腫瘤 等。
[0013] 丹參，為唇形科植物丹參Salvia miltiorrhiza Bge.的干燥根和根莖，丹參味苦， 性微寒，入屯、、肝經(jīng)，具有活血調(diào)經(jīng)、桂疲止痛、涼血消癡、清屯、除煩、養(yǎng)血安神的功效，主要 應用于屯、血管系統(tǒng)，如保護屯、肌、擴張血管、抗動脈粥樣硬化、抗血栓等;其還具有改善微循 環(huán)、促進血管新生、抗腫瘤、抗肝纖維化、調(diào)節(jié)免疫、抗菌消炎等作用。
[0014] 桃仁，為菩薇科植物桃Primus persica化.）Batsch或山桃Primus davidiana (Carr. )Franch.的干燥成熟種子。桃仁味苦、甘，性平，歸屯、、肝、大腸經(jīng)，有活血桂疲，潤腸 通便之功效，用于治療胸搏，瘤瘤瘡塊，經(jīng)閉，痛經(jīng)，跌撲損傷，腸燥便秘等。
[0015] 降香，辛、溫，入肝、脾經(jīng)，具有化疲止血，理氣止痛的功效。用于治療冠屯、病、腫瘤、 跌打損傷、金創(chuàng)出血、風濕搏痛等。
[0016] 丹皮，味辛苦，性涼，具有清熱涼血，活血化疲的功效。用于治療熱病吐血、贓血、血 熱斑疹，閉經(jīng)痛經(jīng)，跌打損傷，冠屯、病、急性闊尾炎、高血壓病、糖尿病、神經(jīng)性皮炎、過敏性 鼻炎等。
[0017]麥冬，味甘、微苦，性微寒，歸肺、屯、、胃經(jīng)。具有養(yǎng)陰生津、潤肺清屯、的功效。用于治 療冠屯、病、咳嗽、咽痛、糖尿病、腫瘤、屯、煩失眠和腸燥便秘等。黃連苦，寒，歸屯、經(jīng)、脾經(jīng)、胃 經(jīng)、肝經(jīng)、膽經(jīng)、大腸經(jīng)。具有瀉火、解毒、清熱、燥濕的功效。用于治療屯、肌缺血疾病、屯、律失 常、腦缺血性疾病、免疫系統(tǒng)疾病、高血壓、高血糖、高血脂、腫瘤等。
[0018] 玄參，性微寒，味甘、苦、咸，具有涼血滋陰、瀉火解毒的功效。用于治療冠屯、病、高 血壓、腫瘤、糖尿病、腦缺血、痛風等。
[0019] 水賠，咸苦，性平，入肝、膀脫經(jīng)。具有破血逐疲，通經(jīng)消癥瘤的功效。用于治療疲血 停滯引起的經(jīng)閉、腫瘤包塊W及跌打腫痛等病癥。
[0020] 上述處方中，仙鶴草和丹參共為君藥，桃仁、降香、丹皮Ξ者共為臣藥，麥冬、玄參、 水賠Ξ者共為佐藥，君臣佐藥各司其職又相互配合，使得藥物組合物具有清營解毒、活血通 絡，兼有扶正之功，特別是具有改善屯、功能和屯、肌病理形態(tài)，促進血管新生，抑制屯、肌細胞 調(diào)亡，抑制炎癥反應，保護內(nèi)皮細胞等作用，適用于治療屯、前區(qū)固定性刺痛反復難愈、胸悶、 易怒、屯、煩、口干、失眠多夢、小便黃赤、大便干結(jié)，舌暗紅、苔黃欠潤、舌底靜脈曲張、脈弦數(shù) 等癥狀的冠屯、病，效果顯著。
[0021] 優(yōu)選地，所述藥物組合物還包括藥學上可接受的輔料和/或載體，所述輔料或載體 為本領(lǐng)域技術(shù)人員所理解，可依據(jù)不同劑型進行選擇，具體為本領(lǐng)域技術(shù)人員所掌握，本發(fā) 明對此不作特殊限定。
[0022] 優(yōu)選地，所述藥物組合物的劑型為煎劑、片劑、水蜜丸劑、膠囊劑、顆粒劑中的一 種，進一步優(yōu)選為水蜜丸劑。
[0023] 本發(fā)明的技術(shù)方案之二是:上述任意一種藥物組合物的制備方法，包括如下步驟：
[0024] (1)按比例稱取各組分，用水提取，提取液濾過，合并，濃縮成浸膏，干燥、粉碎后備 用；
[0025] (2)取步驟(1)所得粉末，每100重量份粉末加20-60重量份煉蜜，加水泛丸，干燥即 得水蜜丸。
[0026] 其中，步驟(1)的提取方法為：用水提取1-3次，每次提取1-化，合并濾液，并將濾液 濃縮成密度1.2-1.4的浸膏，于40-50°(：干燥，粉碎過60-100目篩。
[0027] 優(yōu)選地，用水提取2次，每次提取化，合并濾液，并將濾液濃縮成密度1.3的浸膏，于 45°C干燥，粉碎過100目篩。
[00%]其中，提取時水的加入量W能夠沒過藥材為宜。
[0029] 本發(fā)明的技術(shù)方案之Ξ是:上述任意一種藥物組合物的制備方法，具體為:將各組 分粉碎成細粉，過100-300目篩，混均，每100重量份細粉加20-60重量份煉蜜，加水泛丸，干 燥即得水蜜丸。
[0030] 上述水蜜丸的重量為〇.5g/丸，用于冠屯、病的治療時，用量為一次4丸，一日Ξ次。
[0031] 將本發(fā)明的藥物組合物制備成水蜜丸劑，與煎劑、膠囊劑相比，具有攜帶方便，月良 用方便，安全性高的優(yōu)勢。
[0032] 本發(fā)明的技術(shù)方案之四是:上述任意一種藥物組合物在制備治療或預防冠屯、病藥 物中的應用。
[0033] 優(yōu)選地，對屯、前區(qū)固定性刺痛反復難愈、胸悶、易怒、屯、煩、口干、失眠多夢、小便黃 赤、大便干結(jié)，舌暗紅、苔黃欠潤、舌底靜脈曲張、脈弦數(shù)等癥狀的冠屯、病有顯著療效。
[0034] 本發(fā)明設及到的藥材或輔料均可市購獲得。
[0035] 在符合本領(lǐng)域常識的基礎(chǔ)上，上述各優(yōu)選條件，可W相互組合，即得本發(fā)明各較佳 實施例。
【附圖說明】
[0036] 圖1為B組屯、肌細胞電鏡照片(6000X);
[0037] 圖2為C組屯、肌細胞電鏡照片(8000X);
[0038] 圖3為F組屯、肌細胞電鏡照片(5000X);
[0039] 圖4為空白組屯、肌IRI血疲證家兔屯、肌細胞調(diào)亡圖；
[0040] 圖5為B組血疲證組屯、肌IRI血疲證家兔屯、肌細胞調(diào)亡圖；
[0041 ] 圖6為C組缺血再灌注組IRI血疲證家兔屯、肌細胞調(diào)亡圖；
[0042] 圖7為D組預處理組IRI血疲證家兔屯、肌細胞調(diào)亡圖；
[0043] 圖8為E組丹參組IRI血疲證家兔屯、肌細胞調(diào)亡圖；
[0044] 圖9為F組本發(fā)明藥物組合物IRI血疲證家兔屯、肌細胞調(diào)亡圖。
【具體實施方式】
[0045] W下實施例用于說明本發(fā)明，但不用來限制本發(fā)明的范圍。實施例中設及到的物 質(zhì)均為普通市售產(chǎn)品，設及到的操作均為本領(lǐng)域常規(guī)操作。
[0046] 實施例1
[0047] -種藥物組合物，按重量份計，由如下原料制備得到：15份仙鶴草、10份丹參、8份 桃仁、12份降香、15份麥冬、5份黃連、10份玄參、10份丹皮、6份水賠。
[004引實施例2
[0049] -種藥物組合物，按重量份計，由如下原料制備得到：10份仙鶴草、5份丹參、5份桃 仁、10份降香、10份麥冬、3份黃連、5份玄參、5份丹皮、3份水賠。
[00加]實施例3
[0051 ] -種藥物組合物，按重量份計，由如下原料制備得到:20份仙鶴草、15份丹參、10份 桃仁、15份降香、20份麥冬、6份黃連、15份玄參、15份丹皮、10份水賠。
[0化2] 實施例4
[0053]該實施例提供實施例1所述藥物組合物的制備方法，該藥物組合物的劑型為水蜜 丸劑，具體為：按用量稱取各組分，加水至沒過藥材，用武火煎煮至沸騰后改用文火，煎煮 3h，過濾，濾渣中加入水，用武火煎煮至沸騰后改用文火，煎煮化，過濾，合并兩次濾液，并將 濾液濃縮成密度1.30的稠膏，于45°C恒溫干燥，然后粉碎，過100目篩，每100重量份粉末加 入40重量份煉蜜，加適量水泛丸，干燥即得水蜜丸，規(guī)格為每粒0.5克。
[0054] 實施例5
[0055]該實施例提供實施例2所述藥物組合物的制備方法，同實施例4。
[0056] 實施例6
[0057]該實施例提供實施例3所述藥物組合物的制備方法，同實施例4。
[005引 W下通過實驗進一步說明本發(fā)明的效果。
[0059] (一)動物實驗
[0060] 1材料與方法
[0061 ] 1.1材料
[0062] 1.1.1實驗動物
[0063] 家兔60只，體重1.5-2.5Kg雌雄兼用。購自湖南中醫(yī)藥大學實驗動物中屯、。許可證 號：SYXK(湘）2003-0001
[0064] 1.1.2試劑及藥品
[0065] 乳酸脫氨酶試劑(LDH)和肌酸激酶同工酶(CK-MB)，北京九強生物技術(shù)有限公司
[0066] 細胞調(diào)亡檢測試劑盒，購于武漢博±德公司（產(chǎn)品編號:MK1020)
[0067] 血清TNF-a和IL-2試劑，購于北京科美東雅生物技術(shù)有限公司；
[0068] 丹參注射液，正大青春寶藥業(yè)有限公司，生產(chǎn)批號：國藥準字Z33020177，10ml/支。
[0069] 本發(fā)明藥物:將仙鶴草15g、丹參lOg、桃仁8g、降香12g、麥冬15g、黃連5g、玄參lOg、 丹皮lOg、水賠6g，浸泡，去渣，濃縮至藥液濃度lg/ml(含生藥），保存?zhèn)溆?，由湖南中醫(yī)藥大 學第一附屬醫(yī)院制劑室提供。
[0070] 1.1.3主要儀器
[0071 ] 小動物呼吸機，DW-2000型，上海嘉鵬；
[0072] 多道生理信號采集處理系統(tǒng)，M-6280型，成都儀器廠制造；
[0073] 低速自動平衡離屯、機，TDZ4-1.8A型，長沙天創(chuàng)；
[0074] 雙目顯微鏡，LEICA DM LB2型，德國LEICA公司；
[0075] 醫(yī)學圖象分析系統(tǒng)，MIAS型，北航公司；
[0076] 石蠟切片機，Shandon325型，英國化andon公司；
[0077] 顯微攝像系統(tǒng)，Motic B5型，麥克奧迪實業(yè)集團公司；
[007引全自動生化分析儀，化-7200型，日本島津；
[00巧]透射電鏡，H-600(7500)，日本日立公司；
[0080] 超薄切片機，L邸III型，瑞典L邸公司；
[0081 ] 血液流變儀，LBY-N6型，北京普利生公司生產(chǎn)；
[0082] 1.2 方法
[0083] 1.2.1動物分組
[0084] 家兔60只，隨機分為A、B、C、D、E、F 6組，每組10只?？瞻捉M(A):與造模組同期注射 等量生理鹽水，同期開胸，冠脈穿線不結(jié)扎;血疲證組(B):血疲證造模結(jié)束后第2d，開胸穿 線不結(jié)扎；IRI組(C):血疲證造模結(jié)束后第2d，開胸結(jié)扎冠脈30min，恢復冠脈血流90min;預 處理組(D):開胸結(jié)扎冠脈5min，再灌注5min，共反復3次，余同C組;丹參組化）：處理同C組。 本發(fā)明藥物組(F):處理同C組。其中D、E和F組均于血疲證造模結(jié)束后第2d行上述處理。
[00化]1.2.2造模方法
[0086] 建立血疲證動物模型于兔耳緣靜脈緩慢注射去甲腎上腺素0.1 mg. kg-1. d-1連續(xù) 20d，于造模第1 d同時靜注牛血清白蛋白250mg. kg-1，間隔1 Od，再注射1次，共2次。
[0087] 建立屯、肌缺血再灌注模型血疲證家兔用25%烏拉坦(4ml.Kg-1)麻醉后固定，記 錄標準II導聯(lián)屯、電圖。氣管切開，連接動物呼吸機。開胸暴露屯、臟，于左屯、耳下左冠狀動脈 前降支上處穿線，在線兩段各穿1結(jié)扎環(huán)W阻斷冠脈血流。W屯、電圖ST段出現(xiàn)弓背抬高 為結(jié)扎成功，^51'段下降1/^2為血流再灌注成功。
[0088] 1.2.3給藥劑量及方法
[0089] 給藥劑量根據(jù)成人(60Kg)臨床劑量，按動物體表面積換算，E組，于兔耳緣靜脈給 藥，在開胸前3d開始靜注丹參注射液0.6ml. Kg-1. cfi，F(xiàn)組，灌胃給藥，在開胸前3d開始灌胃 本發(fā)明藥物1〇1111.蛇-1.(1-1[相當于生藥含量5.16邑.蛇-1.(1-1]，4、8、(：、0組在開胸前3(1靜注等 量的生理鹽水。
[0090] 1.2.4實驗指標測定
[0091] 1.2.4.1屯、肌細胞超微結(jié)構(gòu)觀察
[0092] 取缺血屯、肌組織，固定，后固定，梯度脫水，浸泡，包埋，修塊、定位，超薄切片，電子 染色，透射電鏡觀察、照片。
[0093] 1.2.4.2屯、肌酶檢測
[0094] 實驗結(jié)束后，由頸動脈抽血，測定乳酸脫氨酶化DH)和肌酸激酶同工酶(CK-MB)。由 湖南中醫(yī)藥大學附屬一院檢驗科測定。
[0095] 1.2.4.3血流變學檢測
[0096] 實驗結(jié)束后，由頸動脈取血，肝素鋼抗凝，血液流變學檢測全血黏度低、中、高切變 率;血漿黏度，紅細胞壓積，由由湖南中醫(yī)藥大學附屬一院血流變室測定。
[0097] 1.2.4.4屯、肌細胞調(diào)亡檢測
[0098] 取空白組和血疲證組左屯、室處屯、肌組織，其余各組取左屯、室缺血處屯、肌組織約3 X3X3mm3大小，4%多聚甲醒固定，梯度酒精脫水，二甲苯透明，石蠟包埋;病理切片(4皿厚 切片）。屯、肌細胞調(diào)亡檢測:采用TU肥L法檢測，按博±德生物工程有限公司提供的細胞調(diào)亡 試劑盒說明書操作。
[0099] 1.2.4.5血漿61'-1測定
[0100] 實驗結(jié)束后，由頸動脈抽血，采用放射免疫法測定，具體操作按試劑盒操作說明進 行。
[0101] 1.2.4.6血清了肥-日和比-2測定
[0102] 各組在實驗結(jié)束時頸動脈取血，血清TNF-a和IL-2測定采用放射免疫法測定，具體 操作按試劑盒操作說明進行。
[0103] 1.2.5統(tǒng)計學方法
[0104] 計量資料數(shù)據(jù)用均數(shù)±標準差^表示，用SPSS統(tǒng)計軟件在計算機上進行統(tǒng) 計，多組間兩兩比較用單因素方差分析，方差齊時，兩兩比較用q檢驗，方差不齊時用非參數(shù) 檢驗。
[0105] 2 結(jié)果
[0106] 2.1對屯、肌IRI血疲證家兔屯、肌細胞超微結(jié)構(gòu)的影響
[0107] 屯、肌細胞電鏡結(jié)果：
[0108] B組:肌纖維輕度溶解、排列大致整齊、規(guī)則，屯、肌細胞不同程度水腫，線粒體不同 程度腫脹，肌漿網(wǎng)擴張，核膜結(jié)構(gòu)模糊，細胞核內(nèi)物質(zhì)分布不均勻，少數(shù)屯、肌細胞核溶解。 (見圖1)
[0109] C組:屯、肌纖維斷裂，壞死，溶解，屯、肌細胞水腫明顯，線粒體明顯腫脹，基質(zhì)透亮明 顯加重，崎明顯減少，變短，甚至消失，伴空泡樣形成，肌漿網(wǎng)明顯擴張，呈空泡變，細胞核染 色體固縮、邊聚，核形不規(guī)則，核碎裂。（見圖2)
[0110] F組：屯、肌纖維排列基本整齊、規(guī)則，肌絲清晰，屯、肌細胞內(nèi)輕度水腫，線粒體基本 完整、崎清晰、無空泡形成，少數(shù)線粒體輕度腫脹，肌漿網(wǎng)未見擴張，核膜基本完整，細胞核 內(nèi)物質(zhì)分布均勻，無核裂解及固縮現(xiàn)象物。（見圖3)
[0111] 2.2對屯、肌IRI血疲證家兔屯、肌酶的影響
[0112] 結(jié)果表明，C組LDH和CK-MB均高于A組和B組，差別顯著（P<0.01) ;E和F組LDH和CK- MB均較C組明顯降低，其中LDH水平降低(P<0.05或P<0.01)，CK-MB水平均降低(P<0.01)。表 明屯、肌IRI后血疲證家兔屯、肌酶水平明顯升高，而本發(fā)明藥物可明顯降低LDH和CK-MB的水 平。結(jié)果見表1。
[011引表1對屯、肌IRI血疲證家兔屯、肌酶的影響)
[0114]
[0115] 與A組比較：ΔΡ<〇.〇5, Δ ΔΡ<〇.〇1;與B組比較：*9<0.05，**9<0.01;與(：組比較：^ ρ<0.05，▲▲?<0.01;與D組比較:郵<0.05，#郵<0.01。
[0116] 2.3對屯、肌IRI血疲證家兔血流變學的影響
[0117] 全血粘度觀察顯示，與空白A組比較，血疲證Β組全血粘度（低，中，高切）升高（Ρ< 0.05)，說明血疲證造模成功，屯、肌缺血再灌注C組全血粘度明顯升高(Ρ<0.01)，D，Ε，F(xiàn)組有 不同程度的升高(P<〇.05或P<0.01);與血疲證B組比較，屯、肌缺血再灌注C組全血粘度(低， 中，高切）升高（P<〇.〇5或P<0.01)，在低切觀察值中，D，E組升高沒有差別，F(xiàn)組有差別（p< 0.05);在中切觀察值中，D，F(xiàn)組升高有差別（P<0.05)，E組升高沒有差別；在高切觀察值中， D，E，F(xiàn)組有不同程度的升高，但沒有顯著差別；與屯、肌缺血再灌注C組比較，D，E，F(xiàn)組有不同 程度的降低(P<〇.〇5或P<0.01);與預處理D組比較，E，F(xiàn)組沒有差別(p>0.05)。血漿粘度觀 察顯示，與空白A組比較，B，C，D，E和F組血粘度不同程度的升高差別有統(tǒng)計學意義(P<0.05 或P<0.01);與血疲證B組比較，屯、肌缺血再灌注C組血漿粘度明顯升高(p<0.01)，預處理D組 血漿粘度有降低，但差別沒意義，E，F(xiàn)組有不同程度的升高(P<0.05或P<0.01);與屯、肌缺血 再灌注C組比較，D，E，F(xiàn)組血漿粘度有不同程度的降低(P<0.05或P<0.01);與預處理D組比 較，E，F(xiàn)組有不同程度的升高(P<0.05或P<0.01)。
[011引紅細胞壓積觀察顯示，與空白A組比較，B，C和F紅細胞壓積不同程度升高，差別顯 著（P<0.05或P<0.01)，D，E組沒有差別；與血疲證B組比較，屯、肌缺血再灌注C組有差別（p< 0.05)，D，E和F組沒有差別；與屯、肌缺血再灌注C組比較，D，E，F(xiàn)組有不同程度的降低(P<0.05 或P<0.01);與預處理D組比較，E，F(xiàn)組沒有差別(P>0.05)。
[0119] 說明屯、肌IRI后血疲證家兔血流變學水平明顯升高，而本發(fā)明藥物可明顯降低全 血粘度，血漿粘度和紅細胞壓積。結(jié)果見表2。
[0120] 表2對屯、肌IRI血疲證家兔血流變學的影響（Λ + s )
[0121]
[0123] 與A組比較：ΔΡ<〇.〇5, Δ ΔΡ<〇.〇1;與B組比較：*9<0.05，**9<0.01;與(：組比較：^ p<0.05，▲▲?<0.01;與D組比較：郵>0.05，#郵<0.05，##郵<0.01
[0124] 2.4對屯、肌IRI血疲證家兔屯、肌細胞調(diào)亡的影響
[0125] 屯、肌細胞調(diào)亡的細胞核中有棟黃色顆粒。與空白組A比較，B、C、D、E和F組屯、肌細胞 調(diào)亡均增高差異顯著(P<0.01，p<0.05);與血疲證B組比較，C組屯、肌細胞調(diào)亡明顯增高(p< 0.05)，D、E和F組屯、肌細胞調(diào)亡不同程度降低(p<0.01，p<0.05);與缺血再灌注C組比較，D、E 和F組屯、肌細胞調(diào)亡均降低(P<0.01);與D組比較，E組屯、肌細胞調(diào)亡有差異(P<0.05)，F(xiàn)組屯、 肌細胞調(diào)亡沒差異。實驗說明本發(fā)明藥物可明顯對抗屯、肌細調(diào)亡，與預處理保護作用沒有 差別。結(jié)果見表3,附圖4-9。
[0126] 表3對屯、肌IRI血疲證家兔屯、肌細胞調(diào)亡)
[0127]
[0129] 與A組比較：ΔΡ<〇.〇5, Δ ΔΡ<〇.〇1;與B組比較：*9<0.05，**9<0.01;與(：組比較：^ ρ<0.05，▲▲?<0.01;與D組比較:郵<0.05，#郵<0.01
[0130] 2.5對屯、肌IRI血疲證家兔血漿ΕΤ-1的影響
[0131] 結(jié)果表明，Β組和A組比較ΕΤ-1水平升高但沒有顯著差別，C組ΕΤ-1水平均高于A組 和B組，差別顯著(P<0.01)，D，E和F組ET-1水平較C組明顯降低(P<0.01)。0組和F組比較沒有 顯著差別，表明屯、肌IRI后血疲證家兔ET-1水平明顯升高，而本發(fā)明藥物組合物可明顯降低 ET-1水平。見表4。
[0132] 表4對屯、肌IRI血疲證家兔血漿ET-1的影響（三生S >
[0133]
[0134] 與A組比較：ΔΡ<〇.〇5, Δ ΔΡ<〇.〇1;與B組比較：*9<0.05，**9<0.01;與(：組比較：^ ρ<0.05，▲▲?<0.01;與D組比較:郵<0.05，#郵<0.01
[01巧]2.6對屯、肌IRI血疲證家兔炎癥因子的影響
[0136] 結(jié)果表明，與A組和B組比較，C組TNF-a和IL-2水平均明顯升高，差別顯著（P< 0.01)，0、6和。組可明顯降低了肥-曰和化-2水平，與(：組比較差異有顯著性。<0.01或口< 0.05)。0組和F組比較沒有差異顯著性，表明屯、肌IRI后血疲證家兔炎癥因子水平明顯升高， 而本發(fā)明藥物組合物可明顯降低炎癥因子水平，與預處理作用無顯著差異。見表5
[0137] 表5對屯、肌IRI血疲證家兔炎癥因子的影響（X +5 )
[013 引
[0139] 與A組比較：ΔΡ<〇.〇5, Δ ΔΡ<〇.〇1;與B組比較：*9<0.05，**9<0.01;與(：組比較：^ ρ<0.05，▲▲?<0.01;與D組比較:郵<0.05，#郵<0.01。
[0140] 從上述實驗結(jié)果可W看出：
[0141] 1、本發(fā)明的藥物組合為可W明顯降低屯、肌酶水平，改善屯、肌血液循環(huán)，保護缺血 屯、肌超微的結(jié)構(gòu)，抑制屯、肌細胞調(diào)亡等多環(huán)節(jié)來保護家兔屯、肌。
[0142] 2、本發(fā)明的藥物組合物對屯、肌缺血再灌注損傷血疲證家兔內(nèi)皮細胞保護作用與 調(diào)節(jié)血管內(nèi)皮結(jié)構(gòu)和功能有關(guān)。
[0143] 3、本發(fā)明的藥物組合物對屯、肌IRI血疲證兔屯、肌炎性因子水平有抑制作用。
[0144] (二)臨床試驗
[0145] 2.1分組及給藥方法
[0146] 采取隨機、對照的方法，運用SPSS11.5統(tǒng)計軟件，將全部病例按照就診的先后順序 編號，采用隨機數(shù)字表法，病人按編號隨機分為治療組與對照組。兩組各50例，共100例。
[0147] 對照組:西醫(yī)常規(guī)治療，硝酸脂類制劑、郎且滯劑，血壓高者選擇:腎素-血管緊張素 轉(zhuǎn)換酶抑制劑或腎素-血管緊張素受體抑制劑;抗血小板制劑:屯、功能不全的患者加用利尿 劑〔速尿20-40mg/次，1次/日）等，口服丹參滴丸(天津天±力聯(lián)合制藥有限公司生產(chǎn)），本方 由丹參、Ξ屯、冰片組成，一次10丸，3次/日。
[0148] 治療組:在西醫(yī)常規(guī)治療基礎(chǔ)上加本發(fā)明藥物組合物(仙鶴草15g、丹參lOg、桃仁 8g、降香12g、麥冬15g、黃連5g、玄參lOg、丹皮lOg、水賠6g)，水煎服日1劑，分兩次服。W上兩 組均W4周為一療程，觀察一療程。
[0149] 2.2觀察內(nèi)容及方法
[0150] 2.2.1療效觀察
[0151] (1)屯、絞痛療效觀察記錄治療前后屯、絞痛發(fā)作的次數(shù)、疼痛程度、持續(xù)時間、硝酸 甘油制劑的服用量等。
[0152] (2)治療前后中醫(yī)臨床癥狀及舌、脈變化；
[0153] (3)屯、電圖化CG):治療前后各描記靜息屯、電圖一次，比較兩組治療前后變化。
[0154] 3療效觀察結(jié)果
[0155] 3.1屯、絞痛療效結(jié)果
[0156] 結(jié)果表明：兩組治療后屯、絞痛療效比較，治療組組顯效、有效、無效例數(shù)分別為15、 29、6，總有效率為88% ;對照組依次為10、24、16，總有效率為68%。治療組療效明顯高于對 照組，兩組間比較差異有顯著性意義(P<〇. 05)。見表6。
[0157] 表6屯、絞痛療效比較例（％ )
[015 引
[0159] 注:與對照組比較※P<0.05
[0160] 3.2屯、絞痛發(fā)作次數(shù)比較
[0161] 結(jié)果表明：治療組與對照組均能明顯減少屯、絞痛發(fā)作次數(shù)，治療后兩組間比較屯、 絞痛發(fā)作次數(shù)差異有顯著性(P<〇.01)。見表7。
[0162] 表7屯、絞痛發(fā)作次數(shù)比較(:云±心)
[0163]
[0164] 注:與對照組比較※P>0.05，※※口餅.01
[0165] 3.3治療前后硝酸甘油用量變化情況
[0166] 結(jié)果表明：治療組與對照組均能減少屯、絞痛患者硝酸甘油用量。而治療組組在減 少硝酸甘油用量方面明顯優(yōu)于對照組組(P<〇.05)。見表8。
[0167] 表8治療前后硝酸甘油用量變化情況比較(x±s，片/周）
[016 引
[0169] 注:與對照組比較※P<0.05。
[0170] 3.4屯、電圖療效結(jié)果
[0171] 治療后兩組患者屯、電圖有改善，兩組間比較差異具有顯著性(P<0.05)。見表9。
[0172] 表9屯、電圖療效比較例（％ )
[0173]
[0174」注：與對臘組比較※P<0.05
[0175] 3.5中醫(yī)證侯療效結(jié)果
[0176] 治療后兩組患者中醫(yī)證候有明顯改善，兩組間比較差異有顯著性(P<0.05)，治療 組優(yōu)于對照組。見表10。
[0177] 表10中醫(yī)證侯療效比較例（％ )
[01781
[01巧]注:與對照組比較※P<0.05
[0180] (Ξ)典型病例
[0181] 1、2015年12月6日，患者，女，59歲。
[0182] 初診：患者因反復發(fā)作胸悶、胸痛10年，加重3天來診。本次發(fā)病無明顯誘因，癥見 胸痛、胸悶陣作，活動后加重，伴口干口苦、屯、煩、失眠多夢，納少，小便黃赤，大便干結(jié)。舌暗 紅，苔黃欠潤，脈弦數(shù)。舌底靜脈曲張。既往高血壓病、高血脂癥病10年。血壓：152/96mmHg。 屯、電圖示：I、II、aVF ST段下移0.1~0.2mV。
[0183] 診斷：不穩(wěn)定型屯、絞痛；中醫(yī)診斷：胸搏;證型：熱毒疲阻證。治法:清熱解毒、活血 通絡。方藥:仙鶴草15g、丹參lOg、桃仁lOg、降香15g、麥冬15g、黃連6g、玄參lOg、丹皮lOg、水 賠5g，生龍骨20g(先煎）、山植lOg、夜交藤lOg、生牡頗20g(先煎）、炙甘草6g。常法服7劑。
[0184] 二診：患者訴服藥后胸痛、胸悶、失眠減輕，稍自覺屯、慌，無屯、煩、口苦，食欲稍增 加，大便調(diào)。故前方去生龍骨、生牡頗、夜交藤，加酸要仁15g，續(xù)服6劑。
[0185] Ξ診：胸悶、胸痛消失，復查屯、電圖上述導聯(lián)ST段基本正常，前方加西洋參15g、麥 冬1 Og、五味子1 Og，續(xù)服10劑，鞏固治療。
[0186] 按語:此例患者有冠屯、病、高血壓病、高血脂癥病史10年，具有熱毒、疲毒發(fā)生發(fā)展 的內(nèi)在因素，又見胸痛伴屯、煩、口苦、大便干結(jié)、舌暗紅、舌底靜脈曲張等臨床表現(xiàn)，辨證此 為胸痛日久，久痛入絡，火熱、疲血之邪蘊結(jié)成毒損傷屯、絡之證。一診用本發(fā)明藥物組合物 清熱解毒、活血通絡，因患者失眠、納少，故加夜交藤、生龍骨、生牡頗重鎮(zhèn)安神，山植消食活 血。二診，癥狀明顯減輕，去重鎮(zhèn)安神藥，因患者自覺屯、慌，故加酸要仁養(yǎng)屯、安神。Ξ診，胸 悶、胸痛消失，但考慮熱毒最易耗氣傷陰，《內(nèi)經(jīng)》亦謂"壯火食氣"、"火與元氣不兩立"，因 此，在治療后期用清熱解毒、活血通絡的同時給予益氣養(yǎng)陰藥，起到"邪退正安"的作用。
[0187] 2、2015年6月20日，肖某某，女，76歲。
[018引初診:主訴胸痛、胸悶反復5年余，加重5天?；颊?年前，因受寒后誘發(fā)胸痛如壓，持 續(xù)l-3min，含服硝酸甘油后可迅速緩解，至當?shù)蒯t(yī)院查屯、電圖示：屯、肌缺血，診斷為：冠屯、 病。后時有反復，7天前勞累后再發(fā)，患者既往有高血壓病史6年，高脂血癥病史7年余，十二 指腸潰瘍病史10余年。現(xiàn)癥:胸痛隱隱，胸悶，氣短乏力，易怒、屯、煩、納食少，艱寐夢擾，惡夢 紛運，舌暗紅、苔黃欠潤、舌底靜脈曲張、脈弦數(shù)。證屬氣陰兩虛、熱毒疲阻證。治法:清熱解 毒、活血通絡。處方:仙鶴草15g、丹參lOg、桃仁lOg、降香15g、麥冬15g、黃連6g、玄參lOg、丹 皮lOg、水賠5g、生龍骨20g(先煎）、山植lOg、夜交藤lOg、生牡頗20g(先煎）、炙甘草6g。五味 子6g，酸要仁lOg。上方服7劑，
[0189] 二診:胸痛已無，偶感胸悶，口干氣短，夜寐欠安。上方加太子參15g、巧等15g繼服7 劑W善后。
[0190] 按語:此例患者有冠屯、病、高血壓病、高血脂癥病史多年，見胸痛氣短乏力，易怒、 屯、煩、納食少，艱寐夢擾，惡夢紛運，舌暗紅、苔黃欠潤、舌底靜脈曲張、脈弦數(shù)等臨床表現(xiàn)， 辨證此為胸痛日久，久痛入絡，火熱、疲血之邪蘊結(jié)成毒損傷屯、絡之證。一診用本發(fā)明藥物 組合物
[0191] 清熱解毒、活血通絡，因患者失眠、納少，故加夜交藤、生龍骨、生牡頗重鎮(zhèn)安神，山 植降血脂。二診，癥狀明顯減輕，考慮到患者長期十二指腸潰瘍，故加太子參、巧等益氣健脾 W鞏固。
[0192] 雖然，上文中已經(jīng)用一般性說明、【具體實施方式】及試驗，對本發(fā)明作了詳盡的描 述，但在本發(fā)明基礎(chǔ)上，可W對之作一些修改或改進，運對本領(lǐng)域技術(shù)人員而言是顯而易見 的。因此，在不偏離本發(fā)明精神的基礎(chǔ)上所做的運些修改或改進，均屬于本發(fā)明要求保護的 范圍。
【主權(quán)項】
1. 一種藥物組合物，其特征在于：由包括如下組分的原料制備得到：仙鶴草、丹參、桃 仁、降香、麥冬、黃連、玄參、丹皮、水蛭。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其特征在于:按重量份計，包括10-20份仙鶴草、 5-15份丹參、5-10份桃仁、10-15份降香、10-20份麥冬、3-6份黃連、5-15份玄參、5-15份丹 皮、3-10份水蛭。3. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的藥物組合物，其特征在于：按重量份計，包括12-18份仙鶴 草、8-12份丹參、8-10份桃仁、10-12份降香、12-18份麥冬、5-6份黃連、8-12份玄參、8-12份 丹皮、5-6份水蛭。4. 根據(jù)權(quán)利要求1-3任一項所述的藥物組合物，其特征在于：包括10份仙鶴草、5份丹 參、5份桃仁、10份降香、10份麥冬、3份黃連、5份玄參、5份丹皮、3份水蛭； 或者，包括20份仙鶴草、15份丹參、10份桃仁、15份降香、20份麥冬、6份黃連、15份玄參、 15份丹皮、10份水蛭； 或者，包括15份仙鶴草、10份丹參、8份桃仁、12份降香、15份麥冬、5份黃連、10份玄參、 10份丹皮、6份水蛭； 或者，包括15份仙鶴草、10份丹參、10份桃仁、10份降香、15份麥冬、6份黃連、10份玄參、 10份丹皮、5份水蛭。5. 根據(jù)權(quán)利要求1-4任一項所述的藥物組合物，其特征在于:還包括藥學上可接受的輔 料和/或載體。6. 根據(jù)權(quán)利要求1-5任一項所述的藥物組合物，其特征在于:所述藥物組合物的劑型為 煎劑、片劑、水蜜丸劑、膠囊劑、顆粒劑中的一種，優(yōu)選為水蜜丸劑。7. 制備權(quán)利要求1-6任一項所述藥物組合物的方法，其特征在于，包括如下步驟： (1) 按比例稱取各組分，用水提取，提取液濾過，合并，濃縮成浸膏，干燥、粉碎后備用； (2) 取步驟（1)所得粉末，每100重量份粉末加20-60重量份煉蜜，加水泛丸，干燥即得水 蜜丸。8. 根據(jù)權(quán)利要求7所述的方法，其特征在于:步驟(1)的提取方法為：用水提取1-3次，每 次提取l_3h，合并濾液，并將濾液濃縮成密度1.2-1.4的浸膏，于40-50°C干燥，粉碎過60-100目篩。9. 制備權(quán)利要求1-6任一項所述藥物組合物的方法，其特征在于：將各組分粉碎成細 粉，過100-300目篩，混均，每100重量份細粉加20-60重量份煉蜜，加水泛丸，干燥即得水蜜 丸。10. 權(quán)利要求1-6任一項所述的藥物組合物或權(quán)利要求7-9任一方法制備得到的水蜜丸 在制備治療或預防冠心病藥物中的應用。
【文檔編號】A61P9/10GK105998611SQ201610367005
【公開日】2016年10月12日
【申請日】2016年5月27日
【發(fā)明人】李鑫輝, 黃淼鑫, 杜建芳, 李雅婧, 肖青, 郭晨鶴
【申請人】湖南中醫(yī)藥大學