一種三七/殼聚糖復(fù)合止血海綿的制備方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種三七/殼聚糖復(fù)合止血海綿的制備方法，屬于醫(yī)用敷料制備技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明利用殼聚糖等制得N?丁二酰殼聚糖，增強(qiáng)滲液吸收性，提高抑菌活性，并經(jīng)低溫等離子體處理后，與泊洛沙姆接枝得親水性殼聚糖，并與透明質(zhì)酸鈉進(jìn)行氫鍵鍵合后，與三七總皂苷復(fù)合，冷凍干燥制得三七/殼聚糖復(fù)合止血海綿。本發(fā)明的有益效果是：本發(fā)明制備步驟簡單，以三七與殼聚糖復(fù)合制備，增強(qiáng)其滲液吸收性，提高其抑菌活性，針對性強(qiáng)；所得產(chǎn)品呈彈性多孔海綿狀，與創(chuàng)面貼合緊密，吸收滲液能力和止血效果好，抗菌凝血，抑菌活性高于傳統(tǒng)創(chuàng)面敷料30.2%以上。
【專利說明】
一種三七/殼聚糖復(fù)合止血海綿的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001]本發(fā)明涉及一種三七/殼聚糖復(fù)合止血海綿的制備方法，屬于醫(yī)用敷料制備技術(shù)領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002]醫(yī)用敷料，是包傷的用品，用以覆蓋瘡、傷口或其他損害的醫(yī)用材料。隨著對創(chuàng)面愈合過程的病理生理的深入研究，人們對創(chuàng)面愈合過程的理解也越來越深刻，從而導(dǎo)致了醫(yī)用創(chuàng)面敷料的不斷改進(jìn)與發(fā)展。今天，新型的創(chuàng)面護(hù)理用敷料相對于早期而言，已經(jīng)發(fā)生了革命性的變化，而且多種不同性能的醫(yī)用敷料可供臨床護(hù)理人員選用。止血是緊急醫(yī)療救治的一個(gè)重要步驟，患者手術(shù)治療、日常生活中出現(xiàn)突發(fā)性創(chuàng)傷時(shí)，均需進(jìn)行快速止血，在惡劣的戰(zhàn)爭環(huán)境和復(fù)雜突出事件中的戰(zhàn)傷急救治療時(shí)，實(shí)現(xiàn)快速有效的止血尤為重要。止血海綿就是醫(yī)用敷料的一類，已被廣泛應(yīng)用醫(yī)用緊急止血治療方面。醫(yī)用止血海綿的吸水倍數(shù)和保水率越大，吸收和保持體液的作用就越強(qiáng)，越有利于創(chuàng)面?zhèn)诘幕謴?fù)或手術(shù)過程中出血量的控制，合適的密度、透氣率和膨脹率可對損傷處進(jìn)行恰到好處的填塞，使止血效果更為顯著。但目前的止血海綿吸收率和抑菌活性低，吸收滲液能力差，與創(chuàng)面貼合不緊密，導(dǎo)致材料止血效果差。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題:針對目前的止血海綿吸收率和抑菌活性低，吸收滲液能力差，與創(chuàng)面貼合不緊密，導(dǎo)致材料止血效果差的弊端，提供了一種利用殼聚糖等制得N-丁二酰殼聚糖，增強(qiáng)滲液吸收性，提高抑菌活性，并經(jīng)低溫等離子體處理后，與泊洛沙姆接枝得親水性殼聚糖，并與透明質(zhì)酸鈉進(jìn)行氫鍵鍵合后，與三七總皂苷復(fù)合，冷凍干燥制得三七/殼聚糖復(fù)合止血海綿的方法。本發(fā)明制備步驟簡單，以三七與殼聚糖復(fù)合制備，增強(qiáng)其滲液吸收性，提高其抑菌活性，與創(chuàng)面貼合緊密，有效解決了材料吸收滲液能力和止血效果差問題。
[0004]為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明采用如下所述的技術(shù)方案是:
(1)稱取2?3g三七根，用去離子水洗凈并自然風(fēng)干，然后加入粉碎機(jī)中粉碎，過60目篩，將過篩后的三七粉加入20?30mL質(zhì)量濃度為75%乙醇中，回流提取3次，合并提取液，在75?80°C下減壓蒸發(fā)濃縮，回收乙醇，將濃縮液經(jīng)大孔吸附樹脂柱吸附靜置I?3h，用去離子水對大孔吸附樹脂洗脫至洗滌液不出現(xiàn)紫環(huán)，再用質(zhì)量濃度為90%乙醇溶液繼續(xù)洗脫，得三七總皂苷提取液，在75?80 °C下減壓干燥，得三七總皂苷，備用；
(2)稱取3?4g殼聚糖加入50?60mL無水乙醇中，以400?500r/min磁力攪拌，邊攪拌緩慢加入1.2?1.5g丁二酸酐，混合后在40?45 °C恒溫水浴下，反應(yīng)I?2h，過濾，將濾渣在質(zhì)量濃度為75%乙醇溶液中浸泡5?6h，過濾，并用質(zhì)量濃度為75%乙醇溶液洗滌濾渣3?5次，將洗滌后濾渣置于70?72°C干燥箱中干燥2?3h，得N-丁二酰殼聚糖；
(3)稱取2?3g上述N-丁二酰殼聚糖加入12?15mL質(zhì)量濃度為1%醋酸溶液中，溶解靜置至無氣泡產(chǎn)生后，經(jīng)流延真空干燥得殼聚糖膜，將殼聚糖膜置于低溫等離子體箱中，在氬氣氛圍下，控制功率為50?60W，放電功率為10?12kHz，處理10?12min后，轉(zhuǎn)入100?120mL質(zhì)量濃度為3%泊洛沙姆水溶液中，在4?5°C氮?dú)夥諊拢M(jìn)行接枝反應(yīng)，過濾，干燥得殼聚糖一泊洛沙姆膜；
(4)分別稱取2?3g上述殼聚糖一泊洛沙姆膜，I?2g透明質(zhì)酸鈉，0.2?0.5g步驟(I)備用的三七總皂苷，50?60mL去離子水混合均勻，用300W超聲波超聲分散30?40min，并用質(zhì)量濃度為10%氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH至5.0?5.5，再加入0.4?0.5g吐溫60，于4?5°C下靜置20?24h，再置于-70 °C低溫下凍結(jié)20?24h，凍結(jié)后于真空冷凍干燥機(jī)中冷凍干燥45?48h，得多孔隙海綿狀固體，即三七/殼聚糖復(fù)合止血海綿。
[0005]本發(fā)明的應(yīng)用方法:本發(fā)明制得的三七/殼聚糖復(fù)合止血海綿可應(yīng)用于各種外科手術(shù)、整形手術(shù)的術(shù)后切口或創(chuàng)面，使用前先用無菌紗布將創(chuàng)面周圍皮膚擦干，再選用比創(chuàng)面大5?7cm的復(fù)合止血海綿覆蓋創(chuàng)面，再以無菌紗布包扎，使復(fù)合止血海綿與創(chuàng)面緊貼，每隔2?3天更換即可。該復(fù)合止血海綿能抗菌凝血，抑菌活性高，吸收滲液能力和止血效果好，可有效防止灰塵和微生物的侵入，預(yù)防交叉感染，修復(fù)損傷組織，促進(jìn)創(chuàng)面愈合。
[0006]本發(fā)明與其他方法相比，有益技術(shù)效果是:
(1)本發(fā)明制備步驟簡單，以三七與殼聚糖復(fù)合制備，增強(qiáng)其滲液吸收性，提高其抑菌活性，針對性強(qiáng)；
(2)所得產(chǎn)品呈彈性多孔海綿狀，與創(chuàng)面貼合緊密，吸收滲液能力和止血效果好，抗菌凝血，抑菌活性高于傳統(tǒng)創(chuàng)面敷料30.2%以上。
【具體實(shí)施方式】
[0007]首先稱取2?3g三七根，用去離子水洗凈并自然風(fēng)干，然后加入粉碎機(jī)中粉碎，過60目篩，將過篩后的三七粉加入20?30mL質(zhì)量濃度為75%乙醇中，回流提取3次，合并提取液，在75?80°C下減壓蒸發(fā)濃縮，回收乙醇，將濃縮液經(jīng)大孔吸附樹脂柱吸附靜置I?3h，用去離子水對大孔吸附樹脂洗脫至洗滌液不出現(xiàn)紫環(huán)，再用質(zhì)量濃度為90%乙醇溶液繼續(xù)洗脫，得三七總皂苷提取液，在75?80 °C下減壓干燥，得三七總皂苷，備用；再稱取3?4g殼聚糖加入50?60mL無水乙醇中，以400?500r/min磁力攪拌，邊攪拌緩慢加入1.2?1.5g 丁二酸酐，混合后在40?45°C恒溫水浴下，反應(yīng)I?2h，過濾，將濾渣在質(zhì)量濃度為75%乙醇溶液中浸泡5?6h，過濾，并用質(zhì)量濃度為75%乙醇溶液洗滌濾渣3?5次，將洗滌后濾渣置于70?72°C干燥箱中干燥2?3h，得N-丁二酰殼聚糖;然后稱取2?3g上述N-丁二酰殼聚糖加入12?15mL質(zhì)量濃度為1%醋酸溶液中，溶解靜置至無氣泡產(chǎn)生后，經(jīng)流延真空干燥得殼聚糖膜，將殼聚糖膜置于低溫等離子體箱中，在氬氣氛圍下，控制功率為50?60W，放電功率為10?12kHz，處理1?12min后，轉(zhuǎn)入100?120mL質(zhì)量濃度為3%泊洛沙姆水溶液中，在4?5 °C氮?dú)夥諊拢M(jìn)行接枝反應(yīng)，過濾，干燥得殼聚糖一泊洛沙姆膜;最后分別稱取2?3g上述殼聚糖一泊洛沙姆膜，I?2g透明質(zhì)酸鈉，0.2?0.5g備用的三七總阜苷，50?60mL去離子水混合均勻，用300W超聲波超聲分散30?40min，并用質(zhì)量濃度為10%氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH至5.0?5.5，再加入0.4?0.58吐溫60，于4?5°(:下靜置20?2411，再置于-70°(:低溫下凍結(jié)20?2411，凍結(jié)后于真空冷凍干燥機(jī)中冷凍干燥45?48h，得多孔隙海綿狀固體，即三七/殼聚糖復(fù)合止血海綿。
[0008]實(shí)例I
首先稱取2g三七根，用去離子水洗凈并自然風(fēng)干，然后加入粉碎機(jī)中粉碎，過60目篩，將過篩后的三七粉加入20mL質(zhì)量濃度為75%乙醇中，回流提取3次，合并提取液，在75°C下減壓蒸發(fā)濃縮，回收乙醇，將濃縮液經(jīng)大孔吸附樹脂柱吸附靜置lh，用去離子水對大孔吸附樹脂洗脫至洗滌液不出現(xiàn)紫環(huán)，再用質(zhì)量濃度為90%乙醇溶液繼續(xù)洗脫，得三七總皂苷提取液，在75 °C下減壓干燥，得三七總皂苷，備用；再稱取3g殼聚糖加入50mL無水乙醇中，以400r/min磁力攪拌，邊攪拌緩慢加入1.2g丁二酸酐，混合后在40 °C恒溫水浴下，反應(yīng)Ih，過濾，將濾渣在質(zhì)量濃度為75%乙醇溶液中浸泡5h，過濾，并用質(zhì)量濃度為75%乙醇溶液洗滌濾渣3次，將洗滌后濾渣置于70°C干燥箱中干燥2h，得N-丁二酰殼聚糖;然后稱取2g上述N-丁二酰殼聚糖加入12mL質(zhì)量濃度為1%醋酸溶液中，溶解靜置至無氣泡產(chǎn)生后，經(jīng)流延真空干燥得殼聚糖膜，將殼聚糖膜置于低溫等離子體箱中，在氬氣氛圍下，控制功率為50W，放電功率為1kHz，處理1min后，轉(zhuǎn)入10mL質(zhì)量濃度為3%泊洛沙姆水溶液中，在4°C氮?dú)夥諊?，進(jìn)行接枝反應(yīng)，過濾，干燥得殼聚糖一泊洛沙姆膜;最后分別稱取2g上述殼聚糖一泊洛沙姆膜，Ig透明質(zhì)酸鈉，0.2g備用的三七總皂苷，50mL去離子水混合均勻，用300W超聲波超聲分散30min，并用質(zhì)量濃度為10%氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH至5.0，再加入0.4g吐溫60，于4°C下靜置20h，再置于-70°C低溫下凍結(jié)20h，凍結(jié)后于真空冷凍干燥機(jī)中冷凍干燥45h，得多孔隙海綿狀固體，即三七/殼聚糖復(fù)合止血海綿。
[0009]本發(fā)明制得的三七/殼聚糖復(fù)合止血海綿可應(yīng)用于各種外科手術(shù)、整形手術(shù)的術(shù)后切口或創(chuàng)面，使用前先用無菌紗布將創(chuàng)面周圍皮膚擦干，再選用比創(chuàng)面大5cm的復(fù)合止血海綿覆蓋創(chuàng)面，再以無菌紗布包扎，使復(fù)合止血海綿與創(chuàng)面緊貼，每隔2天更換即可。該復(fù)合止血海綿能抗菌凝血，抑菌活性高，吸收滲液能力和止血效果好，可有效防止灰塵和微生物的侵入，預(yù)防交叉感染，修復(fù)損傷組織，促進(jìn)創(chuàng)面愈合。
[0010]實(shí)例2
首先稱取3g三七根，用去離子水洗凈并自然風(fēng)干，然后加入粉碎機(jī)中粉碎，過60目篩，將過篩后的三七粉加入25mL質(zhì)量濃度為75%乙醇中，回流提取3次，合并提取液，在78°C下減壓蒸發(fā)濃縮，回收乙醇，將濃縮液經(jīng)大孔吸附樹脂柱吸附靜置2h，用去離子水對大孔吸附樹脂洗脫至洗滌液不出現(xiàn)紫環(huán)，再用質(zhì)量濃度為90%乙醇溶液繼續(xù)洗脫，得三七總皂苷提取液，在78 °C下減壓干燥，得三七總皂苷，備用；再稱取4g殼聚糖加入55mL無水乙醇中，以450r/min磁力攪拌，邊攪拌緩慢加入1.3g丁二酸酐，混合后在43 °C恒溫水浴下，反應(yīng)2h，過濾，將濾渣在質(zhì)量濃度為75%乙醇溶液中浸泡6h，過濾，并用質(zhì)量濃度為75%乙醇溶液洗滌濾渣4次，將洗滌后濾渣置于71°C干燥箱中干燥3h，得N-丁二酰殼聚糖;然后稱取3g上述N-丁二酰殼聚糖加入14mL質(zhì)量濃度為1%醋酸溶液中，溶解靜置至無氣泡產(chǎn)生后，經(jīng)流延真空干燥得殼聚糖膜，將殼聚糖膜置于低溫等離子體箱中，在氬氣氛圍下，控制功率為55W，放電功率為I IkHz，處理I Imin后，轉(zhuǎn)入I 1mL質(zhì)量濃度為3%泊洛沙姆水溶液中，在5 °C氮?dú)夥諊?，進(jìn)行接枝反應(yīng)，過濾，干燥得殼聚糖一泊洛沙姆膜;最后分別稱取3g上述殼聚糖一泊洛沙姆膜，2g透明質(zhì)酸鈉，0.4g備用的三七總皂苷，55mL去離子水混合均勻，用300W超聲波超聲分散35min，并用質(zhì)量濃度為10%氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH至5.3，再加入0.5g吐溫60，于5°C下靜置22h，再置于-70°C低溫下凍結(jié)22h，凍結(jié)后于真空冷凍干燥機(jī)中冷凍干燥47h，得多孔隙海綿狀固體，即三七/殼聚糖復(fù)合止血海綿。
[0011]本發(fā)明制得的三七/殼聚糖復(fù)合止血海綿可應(yīng)用于各種外科手術(shù)、整形手術(shù)的術(shù)后切口或創(chuàng)面，使用前先用無菌紗布將創(chuàng)面周圍皮膚擦干，再選用比創(chuàng)面大6cm的復(fù)合止血海綿覆蓋創(chuàng)面，再以無菌紗布包扎，使復(fù)合止血海綿與創(chuàng)面緊貼，每隔3天更換即可。該復(fù)合止血海綿能抗菌凝血，抑菌活性高，吸收滲液能力和止血效果好，可有效防止灰塵和微生物的侵入，預(yù)防交叉感染，修復(fù)損傷組織，促進(jìn)創(chuàng)面愈合。
[0012]實(shí)例3
首先稱取3g三七根，用去離子水洗凈并自然風(fēng)干，然后加入粉碎機(jī)中粉碎，過60目篩，將過篩后的三七粉加入30mL質(zhì)量濃度為75%乙醇中，回流提取3次，合并提取液，在80°C下減壓蒸發(fā)濃縮，回收乙醇，將濃縮液經(jīng)大孔吸附樹脂柱吸附靜置3h，用去離子水對大孔吸附樹脂洗脫至洗滌液不出現(xiàn)紫環(huán)，再用質(zhì)量濃度為90%乙醇溶液繼續(xù)洗脫，得三七總皂苷提取液，在80 0C下減壓干燥，得三七總皂苷，備用；再稱取4g殼聚糖加入60mL無水乙醇中，以500r/min磁力攪拌，邊攪拌緩慢加入1.5g丁二酸酐，混合后在45 °C恒溫水浴下，反應(yīng)2h，過濾，將濾渣在質(zhì)量濃度為75%乙醇溶液中浸泡6h，過濾，并用質(zhì)量濃度為75%乙醇溶液洗滌濾渣5次，將洗滌后濾渣置于72°C干燥箱中干燥3h，得N-丁二酰殼聚糖;然后稱取3g上述N-丁二酰殼聚糖加入15mL質(zhì)量濃度為1%醋酸溶液中，溶解靜置至無氣泡產(chǎn)生后，經(jīng)流延真空干燥得殼聚糖膜，將殼聚糖膜置于低溫等離子體箱中，在氬氣氛圍下，控制功率為60W，放電功率為12kHz，處理12min后，轉(zhuǎn)入120mL質(zhì)量濃度為3%泊洛沙姆水溶液中，在5°C氮?dú)夥諊?，進(jìn)行接枝反應(yīng)，過濾，干燥得殼聚糖一泊洛沙姆膜;最后分別稱取3g上述殼聚糖一泊洛沙姆膜，2g透明質(zhì)酸鈉，0.5g備用的三七總皂苷，60mL去離子水混合均勻，用300W超聲波超聲分散40min，并用質(zhì)量濃度為10%氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH至5.5，再加入0.5g吐溫60，于5°C下靜置24h，再置于-70°C低溫下凍結(jié)24h，凍結(jié)后于真空冷凍干燥機(jī)中冷凍干燥48h，得多孔隙海綿狀固體，即三七/殼聚糖復(fù)合止血海綿。
[0013]本發(fā)明制得的三七/殼聚糖復(fù)合止血海綿可應(yīng)用于各種外科手術(shù)、整形手術(shù)的術(shù)后切口或創(chuàng)面，使用前先用無菌紗布將創(chuàng)面周圍皮膚擦干，再選用比創(chuàng)面大7cm的復(fù)合止血海綿覆蓋創(chuàng)面，再以無菌紗布包扎，使復(fù)合止血海綿與創(chuàng)面緊貼，每隔3天更換即可。該復(fù)合止血海綿能抗菌凝血，抑菌活性高，吸收滲液能力和止血效果好，可有效防止灰塵和微生物的侵入，預(yù)防交叉感染，修復(fù)損傷組織，促進(jìn)創(chuàng)面愈合。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種三七/殼聚糖復(fù)合止血海綿的制備方法，其特征在于具體制備步驟為: (1)稱取2?3g三七根，用去離子水洗凈并自然風(fēng)干，然后加入粉碎機(jī)中粉碎，過60目篩，將過篩后的三七粉加入20?30mL質(zhì)量濃度為75%乙醇中，回流提取3次，合并提取液，在75?80°C下減壓蒸發(fā)濃縮，回收乙醇，將濃縮液經(jīng)大孔吸附樹脂柱吸附靜置I?3h，用去離子水對大孔吸附樹脂洗脫至洗滌液不出現(xiàn)紫環(huán)，再用質(zhì)量濃度為90%乙醇溶液繼續(xù)洗脫，得三七總皂苷提取液，在75?80 °C下減壓干燥，得三七總皂苷，備用； (2)稱取3?4g殼聚糖加入50?60mL無水乙醇中，以400?500r/min磁力攪拌，邊攪拌緩慢加入1.2?1.5g丁二酸酐，混合后在40?45 °C恒溫水浴下，反應(yīng)I?2h，過濾，將濾渣在質(zhì)量濃度為75%乙醇溶液中浸泡5?6h，過濾，并用質(zhì)量濃度為75%乙醇溶液洗滌濾渣3?5次，將洗滌后濾渣置于70?72°C干燥箱中干燥2?3h，得N-丁二酰殼聚糖； (3)稱取2?3g上述N-丁二酰殼聚糖加入12?15mL質(zhì)量濃度為1%醋酸溶液中，溶解靜置至無氣泡產(chǎn)生后，經(jīng)流延真空干燥得殼聚糖膜，將殼聚糖膜置于低溫等離子體箱中，在氬氣氛圍下，控制功率為50?60W，放電功率為10?12kHz，處理10?12min后，轉(zhuǎn)入100?120mL質(zhì)量濃度為3%泊洛沙姆水溶液中，在4?5°C氮?dú)夥諊?，進(jìn)行接枝反應(yīng)，過濾，干燥得殼聚糖一泊洛沙姆膜； (4)分別稱取2?3g上述殼聚糖一泊洛沙姆膜，I?2g透明質(zhì)酸鈉，0.2?0.5g步驟(I)備用的三七總皂苷，50?60mL去離子水混合均勻，用300W超聲波超聲分散30?40min，并用質(zhì)量濃度為10%氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH至5.0?5.5，再加入0.4?0.5g吐溫60，于4?5°C下靜置20?24h，再置于-70 °C低溫下凍結(jié)20?24h，凍結(jié)后于真空冷凍干燥機(jī)中冷凍干燥45?48h，得多孔隙海綿狀固體，即三七/殼聚糖復(fù)合止血海綿。
【文檔編號】A61L24/00GK105963768SQ201610469758
【公開日】2016年9月28日
【申請日】2016年6月26日
【發(fā)明人】仇穎瑩, 盛海豐
【申請人】仇穎瑩