一種芍倍注射液的制備方法
【技術領域】
[0001]本發(fā)明屬于藥物加工技術領域，具體涉及一種芍倍注射液的制備方法。
【背景技術】
[0002]芍倍注射液原名“2.5%AN注射液”、“安氏化痔液”、“安痔注射液”，具有收斂固澀，涼血止血，活血化瘀的功效，治療各期內痔及靜脈曲張型混合痔治療中的止血、使痔核萎縮。本藥處方選烏梅、五倍子、赤芍組成全方，三藥配伍，烏梅為君，五倍子為臣，兩藥協(xié)同起收斂作用，赤芍化瘀起反佐作用，三藥相輔相成共奏收斂化瘀去痔作用。
[0003]本著源于中醫(yī)藥，發(fā)展中醫(yī)藥的精神，提取三味中草藥的有效成分檸檬酸、沒食子酸和芍藥苷直接入藥，配制成注射劑，不僅保持原中藥的藥性作用和配伍關系，與傳統(tǒng)中藥制劑比較，有效成分高、可控性好、雜質少、刺激性小、穩(wěn)定。生產芍倍注射液處方中的檸檬酸、沒食子酸都可以購買到生產所需，而芍藥苷購買不到符合生產要求的純度。
[0004]目前關于芍藥苷的提取主要有水提法、稀醇滲漉法、乙醇回流提取法、微波提取法、超聲波提取法、CO2超臨界萃取法等，而純化手段則采用柱層析或大孔吸附樹脂分離。這些提取方法和純化手段總體缺陷為芍藥苷的雜質多，溶劑消耗量大、殘留大、流程長，后期純化困難，少部分的芍藥苷在大孔吸附樹脂純化時流失，使產品的收率下降，后期的純化方法難以達到含量98%以上的純品。

【發(fā)明內容】

[0005]基于現有技術的不足，本發(fā)明的目的在于提供一種芍倍注射液的制備方法，簡單、高效、低能耗地制備出純度及精度高的芍倍注射液。
[0006]為了實現上述目的，本發(fā)明采用的技術方案為:
一種芍倍注射液的制備方法，包括以下步驟:
(1)稱取赤芍藥材，經一次粉碎得到顆粒度為50?300目的粗顆粒，再經二次粉碎、過篩后得到顆粒度為1250?2500目的超微粉;將超微粉置于pH=2的酸性水溶液中，超微粉與酸性水溶液的固液比為1:6kg/L，浸泡30?45分鐘后采用微波超聲波法進行一次提取，壓濾后得到一次提取液和濾渣，向濾渣中加入pH=2的酸性水溶液進行二次提取，壓濾后得二次提取液，將一次提取液和二次提取液混合均勻得到混合提取液；
(2)將步驟(I)所得的混合提取液加入濃縮罐中，在溫度為55?60°C、真空度<-0.08MPa條件下濃縮得到一次濃縮液，一次濃縮液的體積為混合提取液體積的15?17%;將一次濃縮液裝入醇沉罐中并冷卻，向醇沉罐中加入90?97%乙醇，直至乙醇占醇沉罐內溶液中質量分數為80%，5?10°C靜置45?50小時，取上清液再倒入濃縮罐中，在溫度為40°C、真空度<-
0.08Mpa條件下濃縮得到二次濃縮液，二次濃縮液的體積為混合提取液體積的5.5-6.5%;
(3 )向步驟(2)所得的二次濃縮液中加入純化水，二次濃縮液與純化水的體積比為1:4，調節(jié)pH至5?6，然后加入至大孔吸附樹脂柱，吸附6?8小時后，用純化水沖洗4小時，再依次用5%乙醇溶液及10%乙醇溶液分別沖洗I小時后，用95%乙醇溶液洗脫，點板、收集洗脫液;然后將洗脫液減壓濃縮、干燥制成干粉，得到赤芍總苷粗品；
(4)將步驟(3)所得的赤芍總苷粗品加入純化水中，赤芍總苷粗品與水的固液比為1:10?15kg/L，采用C18反相色譜柱，乙醇和水作為流動相，梯度洗脫;再用葡聚糖凝膠色譜純化，以甲醇洗脫，減壓濃縮得到芍藥苷單體；
其中，梯度洗脫的條件為:0~40min,乙醇30%;40?90min，乙醇60%，90?120min，乙醇100%，流速 10mL/min，柱溫為20~30°C ；
(5)在溫度為18?26°C、相對濕度45?65%的潔凈室內，稱取芍藥苷單體100g、沒食子酸37.5g、檸檬酸2500g，加入配液裝置中；調整配液裝置內的溫度為40?50 °C，加注射水至配液裝置內藥液的總重量為100kg，保持配液裝置內氣壓、溫度穩(wěn)定，攪拌3~10分鐘，調整配液裝置內的溫度為15-25 0C，過濾；
(6)將步驟(5)所得產物無菌灌裝成1ml/支的芍倍注射液，100度檢漏、負壓60KPa濕熱滅菌20分鐘，檢驗、包裝、入陰涼庫，即得。
[0007]優(yōu)選地，步驟(5)中所述配液裝置包括密閉的罐體，所述罐體呈類圓柱形且罐體的軸向中心線沿豎直方向，所述類圓柱形是圓柱形相對的兩端面均為向外凸出的球冠所圍成的圖形;罐體上表面的中心處安裝有旋轉清洗球，旋轉清洗球的一側設置有人孔，從人孔處沿逆時針方向均勻間隔設置有壓縮空氣入口、呼吸口、一體視燈鏡、進料口、備用口、純蒸汽入口、抽真空口、爆破片口及壓力表;罐體圓周側面的上部設置有第一循環(huán)口，罐體的底部設置有第二循環(huán)口，罐體圓周側面及底部圓周側面及底部的內壁與外壁之間中空，并設有夾套和流道，所述夾套通過流道與第一循環(huán)口及第二循環(huán)口相連通，且夾套內流通有傳熱介質;罐體圓周側面的下部設置有取樣閥口、PH計及溫度計，罐體底部的中心處設置有出料口，出料口的一側安裝有攪拌器;罐體的下方設置有支腳，支腳的底部安裝有稱重模塊。
[0008]優(yōu)選地，步驟(I)所述的二次粉碎是將粗顆粒與溫度為O?8°C、含水量為0.5?1%的冷凍干燥空氣共同注入氣流式超微粉碎機進行粉碎。
[0009]優(yōu)選地，步驟(I)中一次提取及二次提取采用微波超聲波中藥提取機，超聲波功率為I?2KW，微波功率為600?1000W，一次提取及二次提取時間均為20?35分鐘，二次提取時加入的酸性水溶液的體積是一次提取時酸性水溶液體積的1/2?2/3。
[0010]優(yōu)選地，步驟(I)所述的酸性水溶液為稀鹽酸溶液。
[0011 ]優(yōu)選地，步驟(4)所述C18反相色譜柱以C18鍵合娃膠為填料，填料的粒徑為5μηι。
[0012]進一步，所述傳熱介質為蒸汽和/或冷卻水。
[0013]本發(fā)明采用兩次粉碎，再用酸性水溶液浸泡，可以提高芍藥苷的提取率，縮短赤芍總苷粗品的制備時間，具有快速、徹底、效率高的優(yōu)點;采用C18反相色譜柱及葡聚糖凝膠色譜純化，減少了分離過程中的損失，提高了芍藥苷產品的純度，所得芍藥苷的純度2 98%;利用底部設置有稱重模塊的配液裝置，通過控制氣壓和溫度，使配液更快速、均勻、精確;本發(fā)明易于操作和工業(yè)化生產，提高了經濟效益和產品保障。
【附圖說明】
[0014]圖1為所述配液裝置的結構示意圖；
圖2為圖1的俯視圖。
【具體實施方式】
[0015]以下通過優(yōu)選實施例對本發(fā)明進一步詳細說明，但本發(fā)明的保護范圍并不局限于此。
[0016]一種芍倍注射液的制備方法，包括以下步驟:
(1)稱取1kg赤芍藥材，經一次粉碎得到顆粒度為50~300目的粗顆粒，再將粗顆粒與溫度為4°C、含水量為0.8%的冷凍干燥空氣共同注入氣流式超微粉碎機進行二次粉碎，過篩后得到顆粒度為1250?2500目的超微粉;將超微粉置于60L稀鹽酸溶液中，稀鹽酸溶液的pH=2，浸泡40分鐘后，將稀鹽酸溶液與超微粉一起加入微波超聲波中藥提取機中，調節(jié)超聲波功率為1KW，微波功率為600W，進行一次提取，一次提取30分鐘，壓濾后得到一次提取液和濾渣，向濾渣中加入40L稀鹽酸溶液中，稀鹽酸溶液的pH=2，進行二次提取，二次提取30分鐘，壓濾后得二次提取液，將一次提取液和二次提取液混合均勻得到混合提取液；
(2)將步驟(I)所得的混合提取液加入濃縮罐中，在溫度為55?60°C、真空度<-0.08MPa條件下濃縮至16L，得到一次濃縮液;將一次濃縮液裝入醇沉罐中并冷卻，向醇沉罐中加入95%乙醇，直至乙醇占醇沉罐內溶液的質量分數為80%，5~ 1 °C靜置2天，取上清液再倒入濃縮罐中，在溫度為40°C、真空度<-0.0SMpa條件下濃縮至6L，得到二次濃縮液，二次濃縮液無乙醇味；
(3)向步驟(2)所得的二次濃縮液中加純化水稀釋至30L，調節(jié)pH至5?6，然后加入至大孔吸附樹脂柱，吸附6小時后，用純化水沖洗4小時，再先后分別用5%乙醇溶液及10%乙醇溶液各沖洗I小時，然后用95%乙醇溶液洗脫，點板(即采用薄層層析法與芍藥苷標準品的點板結果比照)、收集洗脫液;然后將洗脫液減壓濃縮、干燥制成干粉，得到赤芍總苷粗品；赤芍總苷粗品經研磨后裝入棕色玻璃瓶中，以待取樣檢測；
(4)將步驟(3)所得的赤芍總苷粗品加入純化水中，赤芍總苷粗品與水的固液比為1:10kg/L，采用C18反相色譜柱，乙醇和水作為流動相，梯度洗脫；再全部用葡聚糖凝膠Sephadex LH-20色譜純化，以甲醇洗脫，減壓濃縮得到芍藥苷單體；
其中，梯度洗脫的條件為:0~40min,乙醇30%;40?90min，乙醇60%，90?120min，乙醇100%，流速10mL/min，柱溫為20~30°C;C18反相色譜柱以C18鍵合