一種用于治療心血管疾病的水蛭小肽有效部位組合物的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明設(shè)及一種具有治療屯、血管疾病的水賠小膚有效部位組合物及其制備方法， 具體地說(shuō)從水賠、=屯、丹參、葛根中提取的中藥有效部位組合物及其制備方法，屬于中藥 領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002] 屯、血管疾病，又稱為循環(huán)系統(tǒng)疾病，是一系列設(shè)及循環(huán)系統(tǒng)的疾病，循環(huán)系統(tǒng)指人 體內(nèi)運(yùn)送血液的器官和組織，主要包括屯、臟、血管(動(dòng)脈、靜脈、微血管），可W細(xì)分為急性和 慢性，一般都是與動(dòng)脈硬化有關(guān)。運(yùn)些疾病都有著相似的病因、病發(fā)過(guò)程及治療方法。屯、血 管疾病目前最多的是冠屯、病、屯、絞痛，癥狀為胸悶、胸痛等。屯、腦血管病是全球范圍造成死 亡的最主要原因，與其它任何原因相比，屯、腦血管病每年造成的死亡最多。
[0003] 西醫(yī)對(duì)屯、血管疾病多采用強(qiáng)屯、、擴(kuò)張血管及利尿等藥物治療，如硝酸甘油、消屯、 痛、巧離子括抗劑類(lèi)抗屯、絞痛藥(硝苯地平）、選擇性冠脈擴(kuò)張劑和抗病毒藥(雙喀達(dá)莫）、0 受體阻滯劑(塞利洛爾）、屯、可定、屯、得安，運(yùn)些藥物均是急癥用藥，且運(yùn)些藥物還伴有如下 弊端:①毒副作用:除胃腸反應(yīng)、過(guò)敏反應(yīng)、中毒表現(xiàn)外，對(duì)中樞神經(jīng)、肝腎功能也有損害，月良 藥反應(yīng)癥狀多達(dá)惡屯、、嘔吐、腹瀉、胃腸道不適、食欲不振、面部潮紅、屯、惇、屯、動(dòng)過(guò)速、體位 低血壓、頭痛、眩暈、疲乏、失眠、皮膚過(guò)敏反應(yīng)、皮疹甚至剝脫性皮炎、肌疫李、肌無(wú)力、肌震 顫、四肢發(fā)冷、痊癢、淚液減少、情緒抑郁、皮膚發(fā)紅、皮疹、灼熱感、出汗甚至虛脫、長(zhǎng)期服用 會(huì)產(chǎn)生耐藥性等反應(yīng)。②不少人群不能服用：如有過(guò)敏史者、青光眼、冠狀動(dòng)脈閉塞及血栓 形成、腦出血、煩內(nèi)壓增高、屯、源性休克、n°或虹°房室傳導(dǎo)阻滯、嚴(yán)重屯、力衰竭、竇性屯、動(dòng) 過(guò)緩、支氣管哮喘患者、有過(guò)敏史、糖尿病、充血性屯、力衰竭、肺氣腫或非過(guò)敏性支氣管炎、 肝功能不全、甲狀腺功能低下、雷諾氏綜合征或其它周?chē)懿　⒛I功能減退、活動(dòng)性潰瘍 病或其他原因引起的消化道出血、血友病或血小板減少癥等患者及孕婦、授乳婦、兒童等均 禁服。然而，患屯、血管疾病的患者往往需要長(zhǎng)期用藥，且涵蓋了各類(lèi)不同的人群。可喜的是， 中藥治療屯、血管疾病已顯示出了其獨(dú)特的優(yōu)越性，中藥療效確切、持久，不良反應(yīng)少，尤其 W遠(yuǎn)期療效滿意而廣泛應(yīng)用于臨床。
[0004] 祖國(guó)醫(yī)學(xué)認(rèn)為，屯、血管疾病屬于中醫(yī)"屯、惇"、"郁病"的范疇，是由肝氣郁結(jié)、情志 所傷引起五臟氣機(jī)不和形成的，主要與肝、脾、屯、等臟器受累與氣血失調(diào)有關(guān)。其中冠屯、病 屬于中醫(yī)"屯、痛"、"屯、惇"、"胸搏"的范疇，其病理機(jī)制主要為"因虛至疲，氣虛血疲，脈絡(luò)疲 阻"。冠屯、病的臨床表現(xiàn)主要為:屯、律失常、屯、絞痛及屯、肌梗塞等。應(yīng)用中醫(yī)治療屯、肌缺血的 藥物可劃分為活血化疲類(lèi)、補(bǔ)氣安神類(lèi)及化疲理氣類(lèi)等。若按照藥物的有效成分化合物分 類(lèi)可分為黃酬類(lèi)、酪酸類(lèi)及皂巧類(lèi)等。
[0005] 大量的研究結(jié)果和臨床實(shí)踐證明，中藥W其耐受性較好、毒副作用小等特點(diǎn)顯示 出其獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)，中藥在運(yùn)個(gè)市場(chǎng)占據(jù)極其重要的位置，甚至可W說(shuō)是處于強(qiáng)勢(shì)地位，其中 最主要的一個(gè)原因即在于西藥在治療屯、血管疾病方面不像抗生素類(lèi)藥品那樣有絕對(duì)優(yōu)勢(shì)， 屬療效并不很顯著的品種。而中藥則因其具有療效顯著、穩(wěn)定可靠、無(wú)毒副作用等優(yōu)勢(shì)，越 來(lái)越受到醫(yī)學(xué)研究者和廣大患者的關(guān)注。
[0006] 而現(xiàn)階段的中藥復(fù)方，有效成分含量較低，服用量較大，藥效較差。而用有效成分 組方能源于中藥高于中藥，使用劑量小，有效成分可控，是一種非常理想的藥物。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0007] 本發(fā)明的一個(gè)目的在于提供一種用于治療屯、血管疾病的水賠小膚有效組物； 本發(fā)明的另一個(gè)目的在于提供上述中藥組合物的制備方法和用途。
[000引本發(fā)明的第一目的：W水賠小膚、=屯總皂巧、丹參總酪酸和葛根總黃酬為原料， 加入適當(dāng)藥用輔料，制成相關(guān)的劑型。
[0009] 本發(fā)明藥物的組合物的原料藥的組成及配比為：水賠小膚3~9重量份、=屯總皂 巧2~6重量份、丹參總酪酸2~4重量份和葛根總黃酬3~7重量份。
[0010] 本發(fā)明中藥藥物組合物優(yōu)選的組成及配比為：水賠小膚6重量份;=屯總皂巧4重 量份;丹參總酪酸3重量份;葛根總黃酬5重量份。
[0011] 上述水賠小膚有效部位中總小膚的含量不低于提取物的50%，總皂巧有效部位中 總皂巧不低于提取物的70%，總酪酸有效部位中總酪酸不低于提取物的50%，總黃酬有效部 位中總黃酬不低于提取物的80%。
[0012] 該藥物組合物可W加入相應(yīng)輔料，制成丸劑、片劑、顆粒劑、硬膠囊劑、軟膠囊劑中 的任一種。然后可W再加入其他具有預(yù)防或治療糖尿病及其并發(fā)癥的有效部位、有效成分、 化學(xué)合成品或者半合成品，然后再加入相應(yīng)輔料，制成丸劑、片劑、顆粒劑、硬膠囊劑、軟膠 囊劑中的任一種。
[0013] 本發(fā)明中藥組合物的制備方法包括W下步驟： ① 水賠小膚的制備:取水賠，適當(dāng)粉碎，加10倍量水勻漿15min，加熱煮沸15min，放冷至 室溫，采用鹽酸調(diào)抑至2.0 ± 0.1，然后加入底物量10%的胃蛋白酶，在37 °C條件下酶解化，然 后采用氨氧化鋼溶液調(diào)節(jié)抑至8,加入底物量10%的膜蛋白酶，在45°C條件下酶解地，時(shí)時(shí)攬 拌并調(diào)節(jié)抑在7~10范圍內(nèi)，酶解完畢后繼續(xù)升溫煮沸15min，放冷，離屯、，收集上清液，調(diào)節(jié) P冊(cè).5~7.0，加入1%的活性炭，攬拌均勻，濾過(guò)，濾液用截留相對(duì)分子質(zhì)量為3kD的中空纖維 膜進(jìn)行超濾，收集透過(guò)液，再W截留相對(duì)分子質(zhì)量為300D的陶瓷膜進(jìn)行納濾，收集未透過(guò) 液，減壓濃縮，干燥，得水賠小膚;其中小膚的含量不低于50%; ② =屯總皂巧的制備:取=屯粉碎成粗粉，用70%的乙醇提取，濾過(guò)，濾液減壓濃縮，濾 過(guò)，過(guò)苯乙締型非極性或弱極性共聚體大孔吸附樹(shù)脂柱，用水洗涂，水洗液棄去，W80%的乙 醇洗脫，洗脫液減壓濃縮，脫色，精制，減壓濃縮至浸膏，干燥，即得;其中=屯總皂巧含量不 低于70%; ③ 丹參總酪酸的制備:取丹參，切成小段，加水于70°C~90°C提取^3次，每次1~3小時(shí)， 合并提取液，濾過(guò)，濾液于50°C~70°C減壓濃縮至相對(duì)密度為1.18~1.22(50°C)的清膏，放 冷，加乙醇使含醇量為65%~80 %，靜置10~24小時(shí)，取上清液，減壓回收乙醇至無(wú)醇味，得丹 參提取液，將丹參提取液加入預(yù)先處理好的HPDlOO大孔樹(shù)脂中(HPD100大孔樹(shù)脂量:生藥量 =1:1~1:5，g/g，上樣流速10~60ml/min)流出液棄去，先用4~6BV蒸饋水洗脫，棄去洗脫液，再 W6~IOBV 15%~25%乙醇洗脫，收集洗脫液，并濃縮至稠膏，干燥，即得;其中丹總酪酸的含量 不低于50%; ④葛根總黃酬的制備：取葛根藥材，粉碎后，加15倍量70%乙醇回流提取3次，每次I小 時(shí)，過(guò)濾，濾液回收乙醇至無(wú)醇味，得葛根提取液，將葛根提取液加入預(yù)先處理好的AB-8大 孔吸附樹(shù)脂中（AB-8大孔吸附樹(shù)脂量:生藥量=1:3，g/g，上樣時(shí)柱流速4ml/min)流出液棄 去，先用蒸饋水洗脫至流出液無(wú)色，流出液均棄去，再W70%乙醇洗脫，收集洗脫液至薄層層 析檢查無(wú)巧光斑點(diǎn)（展開(kāi)劑:氯仿-甲醇(8:2)，在365nm巧光燈下檢視，不得有巧光斑點(diǎn)），減 壓回收乙醇，干燥，得葛根總黃酬粗品；其中葛根總黃酬的含量不低于80%; 按照各有效部位的重量配比取上述四份有效部位，不加輔料或加入藥劑學(xué)常規(guī)輔料， 制成藥學(xué)上可W接受的劑型。
[0014]增加：各樹(shù)脂的型號(hào)可W是DlOl大孔樹(shù)脂、D201大孔樹(shù)脂、AB-8大孔樹(shù)脂，OOl X 2.5、001X7、001X15型陽(yáng)離子交換樹(shù)脂。
[001引總小膚、總皂巧、總酪酸、總黃酬的含量現(xiàn)憶方法為： 總小膚的含量測(cè)定方法為:取牛血清白蛋白對(duì)照品適量，精密稱定，加水制成每毫升含 0.25mg的溶液，即得。精密量取對(duì)照品溶液0，0.2,0.4,0.6,0.8,1.0ml，分別置具塞試管中， 各精密加水至1.0ml，再分別精密加堿性銅試液1.0ml，搖勻，各精密加入福林酪試液[取福 林試液儲(chǔ)備液（1 一 16) ]4. Oml，搖勻，于55 °C水浴中保溫5min，取出，置冷水浴中冷卻1 Omin， 迅速測(cè)定，WO管為空白，照紫外一可見(jiàn)分光光度法，在65化m波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度。W吸光度 為縱坐標(biāo)，牛血清白蛋白質(zhì)量為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，并計(jì)算回歸方程。精密量取提取液 1ml，別置100mL量瓶中，加水至刻度，搖勻，作為供試品溶液;照標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備項(xiàng)下自分別 精密加堿性銅試液1.0ml起，依法測(cè)定吸光度，從回歸方程中計(jì)算多膚的含量。
[0016] 總皂巧含量測(cè)定方法：精密稱取S屯皂巧Rl對(duì)照品適量，加甲醇制成每1ml含 0.0 lmg的溶液，既得。分別精密吸取0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3 . Oml分別置磨口具塞試管中， 熱水浴揮干溶劑，加現(xiàn)配置的5%香草醒-冰醋酸溶液0.2ml，高氯酸0.8ml，于60°C恒溫水浴 15min，立即置冰水浴內(nèi)冷卻，精密移取冰醋酸5mL，搖勻，W相應(yīng)試劑為空白，分別在560nm 波長(zhǎng)處測(cè)定A值，得回歸方程。取供試品適量，按標(biāo)準(zhǔn)曲線制作方法測(cè)定，相應(yīng)試劑隨行空白 對(duì)照，在波長(zhǎng)560nm處測(cè)定吸收度A，從回歸方程中計(jì)算總皂巧含量。
[0017] 總酪酸含量測(cè)定方法:精密稱取干燥的丹酪酸B適量，加O.lmol/L鹽酸溶液成每 Iml含 12.96mg的溶液，既得。精密量取對(duì)照品溶液0.5ml、1.0ml、2. Oml、3. Oml、40ml、5. Oml， 分別置IOml棟色量瓶中，加0.1mol/L鹽酸溶液稀釋至刻度，搖勻。WO. Imol/L鹽酸溶液作空 白，照分