山藥地上部分提取物及其制備方法和應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明設(shè)及一種山藥地上部分的提取物，W及該提取物的制備方法，還設(shè)及該提 取物在制備a-葡萄糖巧酶抑制劑類藥物或保健品方面的應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 山藥(Disocorea opposi1:a Thunb.)為馨葫科馨葫的干燥根莖，具有補(bǔ)脾養(yǎng)肺，固 腎益精之功效，臨床上廣泛用于治療消渴癥，慢性腹瀉，虛勞咳嗽等癥，是我國(guó)傳統(tǒng)的藥食 同源中藥之一，自古W河南焦作（古懷慶府)所產(chǎn)最為道地，故稱"懷山藥"，為著名的"四大 懷藥"之一。2006年河南省武跋縣獲批山藥GAP種植基地，解決了野生山藥資源短缺，資源可 持續(xù)利用發(fā)展等問(wèn)題。山藥W地下根莖入藥，地上部分常作為廢棄物被遺棄，導(dǎo)致了資源的 極大浪費(fèi)。目前對(duì)于山藥的研究主要集中于地下根莖(入藥部位）的研究，藥理研究顯示其 具有降血糖、降血脂、抗氧化、抗腫瘤等活性。然而對(duì)于山藥地上部分的研究非常少，未見(jiàn)其 在降血糖方面的研究報(bào)道。
[0003] 由于人民生活水平的提高、飲食結(jié)構(gòu)的改變W及少動(dòng)多坐的生活方式等諸多因 素，全球糖尿病發(fā)病率增長(zhǎng)迅速，糖尿病已經(jīng)成為繼腫瘤、屯、血管病變之后第=大嚴(yán)重威脅 人類健康的慢性疾病。糖尿病的發(fā)病過(guò)程中最先出現(xiàn)的癥狀往往是餐后高血糖，即糖尿病 的早期征兆，特別是n型糖尿病病人，餐后高血糖不僅極易誘發(fā)各種并發(fā)癥，還會(huì)極大地提 高糖尿病的死亡率。所W，降低餐后血糖是預(yù)防糖尿病、減少并發(fā)癥和降低死亡率的重要措 施之一。O-葡萄糖巧酶是碳水化合物消化過(guò)程的一種關(guān)鍵酶，它可將多糖或二糖水解成為 能夠供人體吸收的單糖，因此抑制O-葡萄糖巧酶的活性就能延緩食物中碳水化合物的分 解，從而減少葡萄糖的攝入，達(dá)到抑制餐后血糖升高的目的。目前臨床上的此類藥物有阿卡 波糖、伏格列波糖和米格列醇。現(xiàn)有的O-葡萄糖巧酶抑制劑種類較少，并伴有腸道副作用， 因此人們?nèi)圆粩嘀铝τ陂_(kāi)發(fā)新型O-葡萄糖巧酶抑制劑。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 為了解決現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明研究山藥地上部分的降血糖功能，所得提取物 可用于O-葡萄糖巧酶抑制劑藥物或保健品的開(kāi)發(fā)。
[0005] 本發(fā)明的技術(shù)方案是：山藥地上部分提取物的制備方法，由W下步驟提取獲得，步 驟一，將山藥地上部分干燥粉碎后，用乙醇滲漉提取，提取液減壓回收溶劑得乙醇浸膏，將 乙醇浸膏分散于水中，然后先用等體積的石油酸萃取，萃取至少1次，合并萃取液減壓濃縮 得石油酸提取物。
[0006] 本發(fā)明的進(jìn)一步改進(jìn)包括：
[0007] 水層接著依次用乙酸乙醋和正下醇萃取，萃取方法同石油酸萃取，分別濃縮得到 乙酸乙醋和正下醇提取物。
[000引山藥地上部分提取物的制備方法，由W下步驟提取獲得，步驟一，將山藥地上部分 干燥粉碎后，用乙醇滲漉提取，減壓回收溶劑得濃縮物;步驟二，將濃縮物分散于水中，依次 用石油酸、乙酸乙醋和正下醇各萃取3-4次，減壓回收溶劑得相應(yīng)的石油酸提取物、乙酸乙 醋提取物和正下醇提取物。
[0009] 所述的乙醇濃度為90-95%。
[0010] 本發(fā)明的另一目的在于提供了按照上述的方法制得的山藥地上部分提取物。
[0011] 本發(fā)明還提供了山藥地上部分在制備降血糖藥物或保健品方面的應(yīng)用。
[0012] 本發(fā)明進(jìn)一步提供了山藥地上部分提取物在制備降血糖藥物或保健品方面的應(yīng) 用。
[0013] 本發(fā)明進(jìn)一步提供了山藥地上部分提取物在制備a-葡萄糖巧酶抑制劑類藥物或 保健品的應(yīng)用。本發(fā)明所述的山藥地上部分提取物在制備a-葡萄糖巧酶抑制劑藥物或保健 品方面的應(yīng)用，研究發(fā)現(xiàn)山藥地上部分石油酸提取物、乙酸乙醋提取物和正下醇提取物對(duì) 曰-葡萄糖巧酶均有顯著的抑制作用。
[0014] 山藥地上部分提取物所述包括石油酸提取物、乙酸乙醋提取物和或正下醇提取 物。
[0015] 本發(fā)明通過(guò)體外a-葡萄糖巧酶抑制活性研究發(fā)現(xiàn)山藥地上部分石油酸提取物、乙 酸乙醋提取物和正下醇提取物對(duì)Q-葡萄糖巧酶均有顯著的抑制作用，其ICso分別為1.54± 0.09mg/血、0.065 ± 0.002mg/血和1.32 ± 0.24mg/血，明顯強(qiáng)于陽(yáng)性對(duì)照藥阿卡波糖的活性 (IC日日為40.55 ±0.78mg/mL)，且對(duì)a-葡萄糖巧酶的抑制率均呈劑量依賴性。
【附圖說(shuō)明】
[0016] 圖1為山藥地上部分石油酸提取物對(duì)a-葡萄糖巧酶抑制率隨藥物濃度的變化圖。
[0017] 圖2為山藥地上部分乙酸乙醋提取物對(duì)a-葡萄糖巧酶抑制率隨藥物濃度的變化 圖。
[0018] 圖3為山藥地上部分正下醇提取物對(duì)a-葡萄糖巧酶抑制率隨藥物濃度的變化圖。
【具體實(shí)施方式】
[0019] W下實(shí)施例用于說(shuō)明本發(fā)明，但本發(fā)明的實(shí)施方式不限于此。
[0020] 本發(fā)明所述試劑和儀器在無(wú)特殊說(shuō)明的情況下，均為商業(yè)途徑獲得。
[0021] 實(shí)施例1
[0022] 本實(shí)施例為山藥地上部分提取物的制備方法。
[0023] 取山藥地上部分陰干，粉碎，用95%乙醇潤(rùn)濕后裝滲漉筒，然后用95%乙醇滲漉提 取，提取液減壓回收溶劑得乙醇浸膏，將乙醇浸膏分散于水中，然后先用等體積的石油酸萃 取，萃取4次，合并萃取液減壓濃縮得石油酸提取物。
[0024] 實(shí)施例2
[0025] 本實(shí)施例為山藥地上部分提取物的制備方法。
[00%]取山藥地上部分陰干，粉碎，用90%乙醇潤(rùn)濕后裝滲漉筒，然后用90%乙醇滲漉提 取，提取液減壓回收溶劑得乙醇浸膏，將乙醇浸膏分散于水中，然后先用等體積的石油酸萃 取，萃取4次，合并萃取液減壓濃縮得石油酸提取物。
[0027] 實(shí)施例3
[0028] 本實(shí)施例為山藥地上部分提取物的制備方法。
[0029] 取山藥地上部分陰干，粉碎，用93%乙醇潤(rùn)濕后裝滲漉筒，然后用95%乙醇滲漉提 取，提取液減壓回收溶劑得乙醇浸膏，將乙醇浸膏分散于水中，然后先用等體積的石油酸萃 取，萃取4次，合并萃取液減壓濃縮得石油酸提取物。
[0030] 實(shí)施例4
[0031] 本實(shí)施例為山藥地上部分提取物的制備方法。
[0032] 取山藥地上部分陰干，粉碎，用95%乙醇潤(rùn)濕后裝滲漉筒，然后用95%乙醇滲漉提 取，提取液減壓回收溶劑得乙醇浸膏，將乙醇浸膏分散于水中，然后先用等體積的石油酸萃 取，萃取4次，合并萃取液減壓濃縮得石油酸提取物，水層接著依次用乙酸乙醋和正下醇萃 取，萃取方法同石油酸萃取，分別濃縮得到乙酸乙醋和正下醇提取物。
[0033] 實(shí)施例5
[0034] 本實(shí)施例為山藥地上部分提取物的制備方法。
[0035] 取山藥地上部分陰干，粉碎，用90%乙醇潤(rùn)濕后裝滲漉筒，然后用90%乙醇滲漉提 取，提取液減壓回收溶劑得乙醇浸膏，將乙醇浸膏分散于水中，然后先用等體積的石油酸萃 取，萃取4次，合并萃取液減壓濃縮得石油酸提取物，水層接著依次用乙酸乙醋和正下醇萃 取，萃取方法同石油酸萃取，分別濃縮得到乙酸乙醋和正下醇提取物。
[0036] 實(shí)施例6
[0037] 本實(shí)施例為實(shí)施例4山藥地上部分提取物對(duì)a-葡萄糖巧酶的抑制活性測(cè)試。
[0038] 方法:微孔板法。
[0039] 儀器:酶標(biāo)儀，恒溫培養(yǎng)箱，分析天平，各種型號(hào)移液槍。
[0040] 試劑:Q-葡萄糖巧酶，4-硝基苯-a-D-化喃葡萄糖巧，阿卡波糖，憐酸鹽緩沖液，二 甲基亞諷。
[0041 ] 測(cè)試方法:取96孔板，每孔加入2. Ommol/L的PNPG溶液(PBS溶解)8化L，再分別加入 10化不同濃度樣品溶液(DMSO溶解），WDMSO為空白對(duì)照組，每組設(shè)3個(gè)平行孔，在酶標(biāo)儀 400nm下測(cè)定背景組吸光度(A值）。然后再加入10化1.62U/mLa-葡萄糖巧酶溶液(PBS溶 解），置于恒溫培養(yǎng)箱中，在37°C下恒溫解育30min，測(cè)定試驗(yàn)組吸光度(A值）。抑制率（％)用 W下公式計(jì)算：
[0042] 抑制率（％ ) = ( A A絕-A Ai^aVA A絕X 100%
[0043] A Asaa為空白組酶與底物反應(yīng)后A值-背景A值
[0044] A A|^。。為樣品組酶與底物反應(yīng)后A值-背景A值
[0045] 山藥地上部分石油酸提取物、乙酸乙醋提取物和正下醇提取物對(duì)a-葡萄糖巧酶的 抑制活性結(jié)果如下(表1):
[0046] 表1.山藥地上部分提取物對(duì)a-葡萄糖巧酶的抑制活性
[004引從表1可W看出，山藥地上部分石油酸提取物、乙酸乙醋提取物和正下醇對(duì)a-葡萄 糖巧酶的抑制活性均強(qiáng)于陽(yáng)性對(duì)照藥阿卡波糖的活性，其中乙酸乙醋提取物的活性最強(qiáng)， 遠(yuǎn)優(yōu)于陽(yáng)性對(duì)照藥阿卡波糖的活性。
[0049] W上顯示和描述了本發(fā)明的基本原理和主要特征和本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)。本行業(yè)的技術(shù) 人員應(yīng)該了解，本發(fā)明不受上述實(shí)施例的限制，上述實(shí)施例和說(shuō)明書(shū)中描述的只是說(shuō)明本 發(fā)明的原理，在不脫離本發(fā)明精神和范圍的前提下，本發(fā)明還會(huì)有各種變化和改進(jìn)，運(yùn)些變 化和改進(jìn)都落入要求保護(hù)的本發(fā)明范圍內(nèi)。本發(fā)明要求保護(hù)范圍由所附的權(quán)利要求書(shū)及其 等效物界定。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 山藥地上部分提取物的制備方法，其特征在于：由以下步驟提取獲得，步驟一，將山 藥地上部分干燥粉碎后，用乙醇滲漉提取，提取液減壓回收溶劑得乙醇浸膏，將乙醇浸膏分 散于水中，然后先用等體積的石油醚萃取，萃取至少1次，合并萃取液減壓濃縮得石油醚提 取物。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的山藥地上部分提取物的制備方法，其特征在于:水層接著依次 用乙酸乙酯和正丁醇萃取，萃取方法同石油醚萃取，分別濃縮得到乙酸乙酯和正丁醇提取 物。3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的山藥地上部分提取物的制備方法，其特征在于：山藥地上部分 提取物的制備方法，其特征在于：由以下步驟提取獲得，步驟一，將山藥地上部分干燥粉碎 后，用乙醇滲漉提取，減壓回收溶劑得濃縮物；步驟二，將濃縮物分散于水中，依次用石油 醚、乙酸乙酯和正丁醇各萃取3-4次，減壓回收溶劑得相應(yīng)的石油醚提取物、乙酸乙酯提取 物和正丁醇提取物。4. 根據(jù)權(quán)利要求1-3任一項(xiàng)所述的山藥地上部分提取物的制備方法，其特征在于:所述 的乙醇濃度為90-95 %。5. 山藥地上部分提取物，其特征在于:按照權(quán)利要求1-3任一項(xiàng)所述的方法制得。6. 山藥地上部分在制備降血糖藥物或保健品方面的應(yīng)用。7. 山藥地上部分提取物在制備降血糖藥物或保健品方面的應(yīng)用。8. 山藥地上部分提取物在制備α-葡萄糖苷酶抑制劑類藥物或保健品的應(yīng)用。9. 根據(jù)權(quán)利要求8所述的應(yīng)用，其特征在于：山藥地上部分提取物所述包括石油醚提取 物、乙酸乙酯提取物和或正丁醇提取物。
【專利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了山藥地上部分提取物及其制備方法和應(yīng)用，該提取物包括山藥地上部分的石油醚提取物、乙酸乙酯提取物和正丁醇提取物，其制備方法為：將干燥后的山藥地上部分粉碎，用乙醇滲漉提取，減壓濃縮后，分別用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取而得。本發(fā)明的山藥地上部分石油醚提取物、乙酸乙酯提取物和正丁醇提取物對(duì)α-葡萄糖苷酶均有顯著的抑制活性，在相同條件下均強(qiáng)于降血糖藥阿卡波糖的活性，其中乙酸乙酯提取物的抑制活性最強(qiáng)。本發(fā)明的山藥地上部分提取物可用于降血糖藥物或降血糖保健品的開(kāi)發(fā)。
【IPC分類】A23L19/10, A23L33/105, A23L33/10, A61P3/10, A61K36/8945
【公開(kāi)號(hào)】CN105497413
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510959358
【發(fā)明人】張來(lái)賓, 呂潔麗, 劉軍偉
【申請(qǐng)人】新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院
【公開(kāi)日】2016年4月20日
【申請(qǐng)日】2015年12月21日