[0010] 結(jié)果：a-(8-喹啉氧基）單取代酞菁鋅可濃度依賴性抑制HaCaT細(xì)胞的增殖，在 所采取的照光條件下其IC50值為0. 197±0. 022μg/mL。
[0011] 2、a-(8-喹啉氧基）單取代酞菁鋅對己烯雌酚誘導(dǎo)小鼠陰道上皮細(xì)胞增殖的影 響。
[0012] 雌激素（如己烯雌酚）可誘導(dǎo)小鼠陰道上皮增殖活躍，上皮細(xì)胞轉(zhuǎn)換加快，秋水 仙素可使細(xì)胞周期停滯于有絲分裂中期，進(jìn)而觀察受試物對有絲分裂及細(xì)胞過度增生的抑 制作用。該模型可模擬銀屑病患者表皮細(xì)胞增生過快的特點(diǎn)，簡單易得，是藥物治療銀屑病 藥效評價(jià)中最常用的動(dòng)物模型之一。
[0013] 取ICR小鼠60只，按體重隨機(jī)分為6組，即空白對照組，模型對照組，照光不給藥 組，及roT1、2、3組。除空白對照組外，其余各組均腹腔注射己烯雌酚0.2mg/只，每日給 藥1次，連續(xù)給藥3d。第4d時(shí)，TOT1、2、3腹腔注射α-(8-喹啉氧基）單取代酞菁鋅溶 液1.2、0.6、0. 3mg/kg，其余3組不給藥。PDT1、2、3組和照光不給藥組避光6h后采用半 導(dǎo)體光動(dòng)力治療儀進(jìn)行激光照射，照光條件分別為l〇〇mWX540s、300mWX60s、lOOmWX60s、 300mWX540s，光斑直徑3cm，照射小鼠腹部?？瞻讓φ战M和模型對照組不照光。照光結(jié)束1 周后，各組小鼠腹腔注射秋水仙堿2mg/kg，使細(xì)胞有絲分裂停滯于有絲分裂中期。注射秋水 仙堿4h后麻醉處死動(dòng)物。取小鼠陰道，置于10%甲醛溶液中固定，常規(guī)脫水，石蠟包埋，切 片，HE染色，顯微鏡下計(jì)數(shù)300個(gè)基底細(xì)胞，計(jì)算其中有絲分裂細(xì)胞數(shù)并計(jì)算有絲分裂指數(shù) (每100個(gè)基底細(xì)胞中有絲分裂細(xì)胞數(shù)）。
[0014] 結(jié)果：己烯雌酚可誘導(dǎo)ICR小鼠陰道上皮細(xì)胞過度增殖，與空白對照組相比，模型 對照組有絲分裂指數(shù)明顯增高；ct-(8-喹啉氧基）單取代酞菁鋅-PDT可抑制小鼠陰道上 皮細(xì)胞過度增殖，與模型對照組相比，PDT1、2、3組有絲分裂指數(shù)顯著降低，具體見表1，附 圖 1、2。
[0015] 表1α- (8-喹啉氧基）單取代酞菁鋅-PDT對小鼠陰道上皮細(xì)胞過度增殖的影響 (X± 'V，η= 10)。
注：與空白對照組相比卞< 0. 05,，< 0. 01 ;與模型對照組相比，< 0. 01 ;與照光 不給藥組相比~Ρ< 0.05。
[0016] 3、a-(8-喹啉氧基）單取代酞菁鋅對普萘洛爾誘導(dǎo)豚鼠銀屑病樣病變的治療作 用。
[0017] 普萘洛爾為β-腎上腺素能受體阻滯劑，涂于豚鼠皮膚可阻斷角朊細(xì)胞的β-腎 上腺能受體而降低細(xì)胞內(nèi)cAMP水平，導(dǎo)致動(dòng)物表皮角化過度、角化不全和棘層肥厚等類似 銀屑病的組織病理改變，在分子水平上與人類銀屑病皮損亦一致。將普萘洛爾涂于豚鼠耳 部皮膚復(fù)制銀屑病樣皮膚模型常用于觀察藥物對銀屑病的治療作用。
[0018] 配制5 %普萘洛爾：普萘洛爾粉末5g，聚氧乙烯吡咯烷酮305g，加50 %乙醇溶解， 加氮酮-丙二醇（1 :l)5mL，最后加50%乙醇至lOOmL，現(xiàn)用現(xiàn)配。42只豚鼠按體重隨機(jī) 分為空白對照組和造模組，空白對照組6只，造模組36只。造模組豚鼠雙耳背部均勻涂抹 5 %普萘洛爾約0.lmL/耳，每日上下午各涂藥1次，連續(xù)涂藥4周。造模結(jié)束后將造模組豚 鼠按體重再次隨機(jī)分為6組，每組6只，即模型對照組，照光不給藥組，給藥不照光組，注射 給藥組，局部給藥1、2組。給藥不照光組和注射給藥組靜脈注射a-(8-喹啉氧基）單取 代酞菁鋅溶液〇. 45mg/kg，局部給藥1、2組分別涂抹5%和1%a-(8-喹啉氧基）單取代 酞菁鋅搽劑O.lmL/耳。其余3組不給藥。照光不給藥組、注射給藥組，局部給藥1、2組避 光24h后采用半導(dǎo)體光動(dòng)力治療儀進(jìn)行激光照射，照光條件為輸出功率1000mW，光斑直徑 6cm，照射時(shí)間399s，光劑量為14J/cm2。照光后避光48h，之后恢復(fù)3d。按以上步驟重復(fù)進(jìn) 行1次光動(dòng)力治療（給藥、照光、避光、恢復(fù)）。治療結(jié)束后，麻醉處死各組動(dòng)物，取雙側(cè)耳皮 膚固定于10%甲醛溶液中，常規(guī)脫水，石蠟包埋，切片，HE染色，顯微鏡下觀察。
[0019] 結(jié)果：5%普萘洛爾涂抹豚鼠耳背部皮膚4周可造成明顯的銀屑病樣病變，肉眼可 見耳部皮膚明顯增厚，血管增粗，鱗屑樣病變，顯微鏡下可見棘層增厚，角化過度、角化不全 等，見附圖3。照光不給藥組和給藥不照光組對該種病變有一定得改善作用，但不明顯。注 射給藥組，局部給藥1、2組均可明顯改善普萘洛爾所致豚鼠耳銀屑病樣病變，經(jīng)2次光動(dòng)力 治療后，棘層明顯變薄，角化過度和角化不全減輕，部分豚鼠耳基本恢復(fù)正常，與空白對照 組相比無明顯差異，見附圖4。
[0020] 以上所述僅為本發(fā)明的較佳實(shí)施例，凡依本發(fā)明申請專利范圍所做的均等變化與 修飾，皆應(yīng)屬本發(fā)明的涵蓋范圍。
【附圖說明】
[0021] 附圖1 :小鼠陰道上皮基底細(xì)胞及有絲分裂細(xì)胞
[0022] 附圖2 :a-(8-喹啉氧基）單取代酞菁鋅對己烯雌酚誘導(dǎo)小鼠陰道上皮細(xì)胞增殖 的影響，HE染色，A空白對照組（200X)，B模型對照組（200X)，C照光不給藥組（200X)， DPDT1 組（200X)，EPDT2 組（200X)，Η)Τ3 組（200X)。
[0023] 附圖3 :普萘洛爾誘導(dǎo)豚鼠耳銀屑病樣病變，A正常豚鼠耳，B模型豚鼠耳，可見鱗 屑、血管增粗、皮膚變厚等改變，C棘層增厚（HE染色，40X)，D角化過度伴角化不全（HE染 色，200X) 〇
[0024] 附圖4 :a-(8-喹啉氧基）單取代酞菁鋅對普萘洛爾誘導(dǎo)豚鼠銀屑病樣病變的治 療作用，HE染色，40X。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種a-(8-哇晰氧基）單取代獻(xiàn)菁鋒治療銀屑病的用途，其特征在于所述光敏劑具 有W下結(jié)構(gòu)式。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述a-(8-哇晰氧基）單取代獻(xiàn)菁鋒治療銀屑病的用途，其特征在 于所述銀屑病包括尋常型、賊瘡型、紅皮病型和關(guān)節(jié)病型等類型，按中醫(yī)分類包括血熱型、 血燥型、血癒型等類型，所述銀屑病的發(fā)生部位可為身體任意部位。3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述a-(8-哇晰氧基）單取代獻(xiàn)菁鋒治療銀屑病的用途，其特征在 于采用的是光動(dòng)力治療方法，所用光源為半導(dǎo)體激光，波長為670nm，亦可采用其他波長半 導(dǎo)體激光或其他光源。4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述a-(8-哇晰氧基）單取代獻(xiàn)菁鋒治療銀屑病的用途，其特征在 于所用制劑包括溶液、乳膏、納米膠束、微球、貼劑等，給藥方式可為系統(tǒng)給藥或局部給藥。
【專利摘要】本發(fā)明涉及α-(8-喹啉氧基)單取代酞菁鋅治療銀屑病的用途。適用于各種類型銀屑病，采用的是光動(dòng)力治療方法。該光敏劑用于銀屑病治療所使用激光波長為670nm，具有感光度高，光漂白快，所需避光時(shí)間短，避免了光化學(xué)療法使用紫外線照射所可能造成的毒副作用。α-(8-喹啉氧基)單取代酞菁鋅治療銀屑病的用途，所用制劑包括溶液、乳膏、納米膠束，微球等，給藥方式可為系統(tǒng)給藥或局部給藥，在細(xì)胞和動(dòng)物模型上驗(yàn)證了其光動(dòng)力治療銀屑病的可行性，取得了理想效果。
【IPC分類】A61P17/06, A61K41/00
【公開號】CN105363031
【申請?zhí)枴緾N201410438091
【發(fā)明人】劉漢清, 王愛平, 魏金峰, 靳洪濤, 張倩倩, 林妮, 姜智換, 閻曉丹, 李燁, 馮婧怡, 王英明
【申請人】北京貴千金醫(yī)藥科技有限公司
【公開日】2016年3月2日
【申請日】2014年9月1日
【公告號】WO2016033705A1