粉碎,得到顆粒粒徑范圍為10~ 70 μ m粉末;
[0036] 4、萃?。簩⒉襟E3得到的粉粹后的黑果枸杞粉末加入到超臨界0)2反應(yīng)釜中,萃取 壓力40MPa,萃取溫度25°C、分離壓力40MPa、分離溫度40°C,OV流體流量25L/h,萃取時間 4h,得到色素粗提取部分I。
[0037] 5、離心和超濾:將色素粗提取部分I用離心機(jī)SOOOrpm對色素物質(zhì)進(jìn)行初步分離, 分離出濃稠狀色素膏和上清液,對上清液中進(jìn)行超濾處理并將截留的物質(zhì)與離心所得的膏 狀色素合并形成液態(tài)的濃稠狀黑果枸杞色素 II。
[0038] 6、純化:在黑果枸杞色素 II加入S-8大孔樹脂吸附色素,然后再通過10%乙醇洗 脫解吸附得到純凈的黑果枸杞色素 III。
[0039] 7、濃縮:將黑果枸杞色素 III放至微波真空干燥器中,微波功率密度和真空度的 取值范圍為8w/g和0. lOMpa,得到黑果枸杞色素。
【具體實施方式】
[0040] 以下通過實施例對本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)的說明,但本發(fā)明的保護(hù)范圍不受具體實 施例的任何限制,而是由權(quán)利要求加以限定。
[0041] 實施例1黑果枸杞色素的制備
[0042] 1、清理:將黑果枸杞IOkg篩除泥沙,用清水洗凈;
[0043] 2、干燥:將清洗干凈的黑果枸杞在18°C下低溫干燥18h ;
[0044] 3、破碎:對步驟2得到的黑果枸杞進(jìn)行超微粉碎,得到顆粒粒徑范圍為10~ 70 μ m粉末;
[0045] 4、萃?。簩⒉襟E3得到的粉粹后的黑果枸杞粉末加入到超臨界0)2反應(yīng)釜中,萃取 壓力20MPa,萃取溫度55°C、分離壓力35MPa、分離溫度50°C,C(V流體流量17L/h,萃取時間 6h,得到色素粗提取部分I。
[0046] 5、離心和超濾:將色素粗提取部分I用離心機(jī)5000rpm對色素物質(zhì)進(jìn)行初步分離, 分離出濃稠狀色素膏和上清液,對上清液中進(jìn)行超濾處理并將截留的物質(zhì)與離心所得的膏 狀色素合并形成液態(tài)的濃稠狀黑果枸杞色素 II。
[0047] 6、純化:在黑果枸杞色素 II加入S-8大孔樹脂吸附色素,然后再通過5%乙醇洗 脫解吸附得到純凈的黑果枸杞色素 III。
[0048] 7、濃縮:將黑果枸杞色素 III放至微波真空干燥器中,微波功率密度和真空度的 取值范圍為5w/g和0. 07Mpa,得到黑果枸杞色素。
[0049] 實施例1所提取的黑果枸杞色素的提取率為4. 00%遠(yuǎn)高于現(xiàn)有技術(shù)的1. 33%,因 此本發(fā)明對于黑果枸杞色素提取物的的提取有較好的有益效果。
[0050] 實施例2黑果枸杞色素的制備
[0051] 1、清理:將黑果枸杞8kg篩除泥沙,用清水洗凈;
[0052] 2、干燥:將清洗干凈的黑果枸杞在25°C下低溫干燥IOh ;
[0053] 3、破碎:將步驟2得到的黑果枸杞進(jìn)行超微粉碎,得到顆粒粒徑范圍為10~ 70 μ m粉末;
[0054] 4、萃?。簩⒉襟E3得到的粉粹后的黑果枸杞粉末加入到超臨界0)2反應(yīng)釜中,萃取 壓力50MPa,萃取溫度20°C、分離壓力30MPa、分離溫度10°C,C(V流體流量30L/h,萃取時間 2h,得到色素粗提取部分I。
[0055] 5、離心和超濾:將色素粗提取部分I用離心機(jī)1000 Orpm對色素物質(zhì)進(jìn)行初步分 離,分離出濃稠狀色素膏和上清液,對上清液中進(jìn)行超濾處理并將截留的物質(zhì)與離心所得 的膏狀色素合并形成液態(tài)的濃稠狀黑果枸杞色素 II。
[0056] 6、純化:在黑果枸杞色素 II加入S-8大孔樹脂吸附色素,然后再通過7%乙醇洗 脫解吸附得到純凈的黑果枸杞色素 III。
[0057] 7、濃縮:將黑果枸杞色素 III放至微波真空干燥器中,微波功率密度和真空度的 取值范圍為8w/g和0. 08Mpa,得到黑果枸杞色素。
[0058] 實施例2所提取的黑果枸杞色素的提取率為3. 89%遠(yuǎn)高于現(xiàn)有技術(shù)的1. 33%,因 此本發(fā)明對于黑果枸杞色素提取物的的提取有較好的有益效果。
[0059] 實施例3黑果枸杞色素的制備
[0060] 1、清理:將黑果枸杞篩除泥沙,用清水洗凈;
[0061] 2、干燥:將清洗干凈的黑果枸杞在25°C下低溫干燥IOh ;
[0062] 3、破碎:將步驟2得到的黑果枸杞進(jìn)行超微粉碎,得到顆粒粒徑范圍為10~ 70 μ m粉末;
[0063] 4、萃取:將步驟3粉粹后的黑果枸杞粉末加入到超臨界0)2反應(yīng)釜中,萃取壓力 50MPa,萃取溫度20°C、分離壓力30MPa、分離溫度10°C,OV流體流量30L/h,萃取時間2h, 得到色素粗提取部分I。
[0064] 5、離心和超濾:將色素粗提取部分I用離心機(jī)1000 Orpm對色素物質(zhì)進(jìn)行初步分 離,分離出濃稠狀色素膏和上清液,對上清液中進(jìn)行超濾處理并將截留的物質(zhì)與離心所得 的膏狀色素合并形成液態(tài)的濃稠狀黑果枸杞色素 II。
[0065] 6、純化:在黑果枸杞色素 II加入S-8大孔樹脂吸附色素,然后再通過10%乙醇洗 脫解吸附得到純凈的黑果枸杞色素 III。
[0066] 7、濃縮:將黑果枸杞色素 III放至微波真空干燥器中,微波功率密度和真空度的 取值范圍為8w/g和0. 08Mpa,得到黑果枸杞色素。
[0067] 實施例3所提取的黑果枸杞色素的提取率為3. 77%遠(yuǎn)高于現(xiàn)有技術(shù)的1. 33%,因 此本發(fā)明對于黑果枸杞色素提取物的的提取有較好的有益效果。
[0068] 實施例4
[0069] 比色法測定不同提取方法下提取到的黑果枸杞色素含量
[0070] 1.試驗方法
[0071] 將不同方法提取的相同體積的色素液置于分光光度計上,在黑果枸杞色素的乙醇 溶液最大吸收波長545_處測定吸光度三次,取平均值,根據(jù)比爾定律可知吸光度與色素 濃度成正比,所以,可用吸光度直接表示色素濃度或含量大小。
[0072] 2結(jié)果和分析除提取方法外均采用實施例1方法制備
[0073] 從表1中結(jié)果可以看出,本發(fā)明可以大大提高黑果枸杞色素的提取質(zhì)量,幾乎是 其他提取方法的兩倍以上,提高了色素的提取率。
[0074] 表1不同提取方法得到的總色素含量的對比
[0076] 實施例5黑果枸杞色素的藥理活性研究
[0077] (1)黑果枸杞色素降血脂研究
[0078] 1.實驗方案
[0079] ICR種雄性小鼠120只,喂養(yǎng)1周適應(yīng)環(huán)境。小鼠禁食IOh后,尾尖取血測定總膽固 醇含量,根據(jù)膽固醇水平分為6組,每組20只。分別為普通飼料組(NG)、高脂飼料組(HF)、 高脂飼料~辛伐他汀組(HF Simvastatin)、高脂飼料~黑果枸杞色素低劑量組(HF+PLR 20mg/kg)、高脂飼料~黑果枸杞色素中劑量組(HFPLR 150mg/kg)、高脂飼料~黑果枸杞色 素高劑量組(HF+PLR 300mg/kg)。
[0080] 上述黑果枸杞色素提取物,均是采用實施例1方法所制備獲得。
[0081] 普通飼料組(NG)和高脂飼料組(HF)每天灌以蒸餾水(lOml/kg),高脂飼料~辛伐 他汀組(HF+Simvastatin),每天灌胃給予辛伐他?。ㄓ扇梭w用量換算成小鼠用量5mg/kg), 高脂飼料~黑果枸杞色素低劑量組、高脂飼料~黑果枸杞色素中劑量組、高脂飼料~黑果 枸杞色素高劑量組分別按照20、150、300mg/kg · d的黑果枸杞色素劑量灌胃。
[0082] 實驗期間自由飲水和進(jìn)食,連續(xù)給藥5周。每周末對動物禁食10h,尾尖取血, 4000r/min條件下,離心15min,分離血清,測定血液指標(biāo)TC。末次給藥后,所有動物禁食 l〇h,取肝臟測定 GSH-PX、T-AOC、SOD 和 LPL、HL。
[0083] 取一定量的肝臟,用冷生理鹽水沖洗,濾紙吸濕后,按I :9的比例加冰冷的ρΗ7· 4 等滲PBS(5mmol/L PBS,ρΗ7. 4,含0. 15mol/L NaCl),用勻漿器在