包含緩沖的氨基烷基氨基葡糖苷磷酸酯衍生物的組合物及其用于增強(qiáng)免疫應(yīng)答的用圖
【專利說明】包含緩沖的氨基烷基氨基葡糖音磯酸醋衍生物的組合物及 其用于增強(qiáng)免疫應(yīng)答的用途 發(fā)明領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明設(shè)及包含氨基烷基氨基葡糖巧憐酸醋化合物（AGP)的組合物，W及組合物 在疫苗佐劑中或作為疫苗佐劑或者在預(yù)防或治療性處理中的用途。還公開了使用組合物的 方法。
[0002] 關(guān)于聯(lián)邦贊助研究的聲明 本發(fā)明的方面依據(jù)NIH合約#HHSN272200900008C在美國政府支持下進(jìn)行，美國政府 在本發(fā)明中可W擁有一定權(quán)利。
[000引發(fā)明背景 氨基烷基氨基葡糖巧憐酸醋（AGP)是Toll樣受體4 (化R4)的合成配體。AGP及其經(jīng) 由IliM的免疫調(diào)節(jié)效應(yīng)公開于專利公開例如WO2006/016997、WO2001/090129和/或美 國專利號6, 113, 918中，并且已在文獻(xiàn)中得到報(bào)道。另外的AGP衍生物公開于美國專利號 7, 129, 219、美國專利號6, 525, 028和美國專利號6, 911，434中。某些AGP充當(dāng)化R4的激 動劑，而其他的識別為化R4括抗劑。AGP已知可用作疫苗佐劑和免疫調(diào)節(jié)劑，用于在免疫 接種的動物中刺激細(xì)胞因子產(chǎn)生、活化巨隧細(xì)胞、促進(jìn)先天性免疫應(yīng)答和增強(qiáng)抗體產(chǎn)生。先 前，作為佐劑和/或免疫調(diào)節(jié)劑的AGP原則上已W水包油乳劑的形式利用，通常使用滅菌的 水和甘油(大約2%)。存在鑒定緩沖液的進(jìn)行中的需要，所述緩沖液可W與運(yùn)些AGP-起用 于藥物和/或佐劑組合物中。
[0004] 發(fā)巧概沐 相應(yīng)地，本發(fā)明提供了包含一種或多種AGP和緩沖液的藥物組合物。在本文中公開的 本發(fā)明的藥物組合物可W導(dǎo)致下述利益中的一種或多種：相對于其他AGP水性制劑，在緩 沖溶液中AGP的最大或增加或改善的穩(wěn)定性和/或在緩沖溶液中AGP的最大或增加或改善 的效力。
[0005] 還提供的是在約抑7、或生理學(xué)正常的抑或藥學(xué)可接受的抑下，具有改善的穩(wěn)定 性和/或效力的緩沖AGP組合物。
[0006] 還提供的是用本發(fā)明的組合物治療受試者(或患者例如人或其他哺乳動物）的方 法。
[0007] 依照本發(fā)明，提供了包含（i)氨基烷基氨基葡糖巧憐酸醋或其藥學(xué)可接受的鹽，和 (ii)緩沖液的組合物。將緩沖溶液和AGP化合物組合，W形成具有作為免疫調(diào)節(jié)劑的實(shí)用 性的組合物。
[0008] 進(jìn)一步提供了用于調(diào)節(jié)受試者(優(yōu)選人）的免疫應(yīng)答的方法，其包括給所述受試者 施用有效量的藥物組合物。
[0009] 還提供的是用于改善或基本上預(yù)防受試者(優(yōu)選人）中的傳染病、自身免疫性疾 病、神經(jīng)系統(tǒng)疾病或者過敏性或炎性狀況的方法，其包括給所述受試者施用有效量的藥物 組合物。
[0010] 附圖簡述 圖I顯示了夾自連施例的CRX-601和CRX-601降解物的結(jié)構(gòu)。
[0011] Ml顯示了在中性或接近生理學(xué)的抑下，用CRX-601配制的緩沖液的加速降解速 率。
[001引 Ml顯示了對于每種緩沖液，在接近最佳抑下，用CRX-601配制的S種緩沖液的 加速降解速率。
[0013] 圖4思示了夾自連施例的CRX-527和CRX-527降解物的結(jié)構(gòu)。
[0014] 圖5顯示了分別值用在CRX-527和CRX-601中的憐酸鹽和肥陽S緩沖液的加速降 解速率。
[0015] 圖6顯示了在S種緩沖液中配制的CRX-601的長期穩(wěn)定性。
[0016]圖7到9顯示了對于每種緩沖液，在接近最佳地下，用CRX-601配制的S種緩沖 液（肥陽S、乙酸鹽、巧樣酸鹽）中的相對效力。
[0017] 發(fā)明詳述 氨基院基氨基葡糖巧磯酸酷化合物。AGP是To"樣受體4 (IlJM)調(diào)節(jié)劑。To"樣 受體4識別細(xì)菌LPS(脂多糖)，并且當(dāng)活化時，起始先天性免疫應(yīng)答。AGP是細(xì)菌LPS的脂 質(zhì)A蛋白的單糖模擬物，并且已用在化合物的"酷基鏈"上的酸和醋鍵進(jìn)行開發(fā)。用于制 備運(yùn)些化合物的過程是已知的，且例如公開于WO2006/016997、美國專利號7, 288, 640和 6, 113, 918和WO01/90129中，所述專利在此整體引入作為參考。其他AGP和相關(guān)過程公 開于美國專利號7, 129, 219、美國專利號6, 525, 028和美國專利號6, 911，434中。在本發(fā) 明的組合物中采用的在酷基鏈上具有酸鍵的AGP是已知的，且公開于在此整體引入作為參 考的WO2006/016997中。特別有利的是在WO2006/016997中的段落[0019]直到[0021] 處，根據(jù)式（III)闡述且描述的氨基烷基氨基葡糖巧憐酸醋化合物。
[0018] 本發(fā)明中采用的氨基烷基氨基葡糖巧憐酸醋化合物具有如下在式1中所示的結(jié) 構(gòu)：
其中 m是0至6n是0至4 ; X是0或S，優(yōu)選0; Y是O或NH; Z是O或H; 每個Ri、Rz、Rs獨(dú)立地選自C1 2?？峄虲1-2。烷基； Ra是H或Me; Rs獨(dú)立地選自-H、-〇H、-(C1-C4)烷氧基、-P〇3RsR9、-〇P〇3R8R9、-S〇3R8、-〇S〇3Rs、-NRsR9、-S咕、-CN、-N02、-C冊、-(??和-CONR斯，其中Rs和R9各自獨(dú)立地選自H和（C1-C4)烷基；和 每個Re和R7獨(dú)立地是H或PO化。
[0019] 在式1中，正脂肪酷殘基（即，仲酷氧基或烷氧基殘基，例如Ri〇、R2〇和R3O)與之附 著的3'立體中屯、的構(gòu)型是R或S，優(yōu)選R巧日通過C址n-Ingold-Prelog順序規(guī)則指定的）。 Ra和之附著的糖巧配基立體中屯、的構(gòu)型可W是R或S。所有立體異構(gòu)體，對映體和非 對映體兩者，及其混合物視為落入本發(fā)明的范圍內(nèi)。
[0020] 雜原子X和糖巧配基氮原子之間的碳原子數(shù)目由變量"n"確定，其可W是0至4 的整數(shù)，優(yōu)選0至2的整數(shù)。
[0021] 正脂肪酸Ri、R2和Rs的鏈長可W為約6至約16個碳，優(yōu)選約9至約14個碳。鏈長 可W相同或不同。一些優(yōu)選實(shí)施方案包括其中RUR2和R3是6或10或12或14的鏈長。
[0022] 式1涵蓋L/D-絲氨酷、-蘇氨酷、-半脫氨酷酸和醋脂質(zhì)AGP，激動劑和括抗劑兩 者及其同系物（n=l-4)，W及各種簇酸生物電子等排體(即，Rs是能夠形成鹽的酸性基團(tuán)；憐 酸醋可W在氨基葡萄糖單位的4或6位上，但優(yōu)選在4位中）。
[002引在采用式1的AGP化合物的本發(fā)明的一個優(yōu)選實(shí)施方案中，n是0,Rs是CO2扎Re是PO3H2，并且R,是H。運(yùn)種優(yōu)選AGP化合物如下作為式Ia中的結(jié)構(gòu)闡述：
其中X是0或S;Y是0或NH;Z是0或H;每個Ri、Rz、Rs獨(dú)立地選自C1 2。酷基和C1-2。 烷基；并且Ra是H或甲基。
[0024] 在式Ia中，正脂肪酷殘基（即，仲酷氧基或烷氧基殘基，例如Ri〇、R2〇和R3O)與之附 著的3'立體中屯、的構(gòu)型是R或S，優(yōu)選R巧日通過C址n-Ingold-Prelog順序規(guī)則指定的）。 Ra和CO2H與之附著的糖巧配基立體中屯、的構(gòu)型可W是R或S。所有立體異構(gòu)體，對映體和 非對映體兩者，及其混合物視為落入本發(fā)明的范圍內(nèi)。
[0025] 式Ia涵蓋L/D-絲氨酷、-蘇氨酷、-半脫氨酷酸或醋脂質(zhì)AGP，激動劑和括抗劑兩 者。
[0026] 在式I和式la兩者中，Z是通過雙鍵附著的0,或各自通過單鍵附著的兩個氨原 子。目P，當(dāng)Z=Y=O時，化合物是醋連接的；當(dāng)Z=0和Y=NH時，化合物是酷胺連接的；并且當(dāng) Z=H/H和Y=O時，化合物是酸連接的。
[0027] 尤其優(yōu)選的式1的化合物被稱為CRX-601和CRX-527。它們的結(jié)構(gòu)如下闡述：
另外，另一個優(yōu)選實(shí)施方案采用具有所示結(jié)構(gòu)的CRX547。
[0028] 另外其他的實(shí)施方案包括AGP例如CRX602或CRX526,對具有更短的仲酷基或燒 基鏈的AGP提供增加的穩(wěn)定性。
[0029]緩沖液。在本發(fā)明的一個實(shí)施方案中，包含AGP的組合物使用兩性離子緩沖液進(jìn) 行緩沖。適當(dāng)?shù)兀瑑尚噪x子緩沖液是氨基鏈燒橫酸或合適的鹽。氨基鏈燒橫酸緩沖液的例 子包括但不限于肥陽S、肥PPS/EPPS、M0PS、M0BS和PI陽S。優(yōu)選地，緩沖液是藥學(xué)可接受的 緩沖液，適合于在人中使用，例如用于商業(yè)注射產(chǎn)品中。最優(yōu)選地，緩沖液是肥PES。
[0030] 在本發(fā)明的合適實(shí)施方案中，AGP使用選自下述的緩沖液進(jìn)行緩沖： i) 具有約7的抑的肥陽S， ii)具有約5的抑的巧樣酸鹽(例如巧樣酸鋼)，和 iii)具有約5的抑的乙酸鹽(例如乙酸錠)。
[0031] 在本發(fā)明的一個優(yōu)選實(shí)施方案中，AGPCRX-601、CRX-527和CRX-547使用具有約 7的pH的肥PES進(jìn)行緩沖。緩沖液可W與適當(dāng)量的鹽水或其他賦形劑一起使用，W實(shí)現(xiàn)所 需等滲性。在一個優(yōu)選實(shí)施方案中，使用0. 9%鹽水。
[0032]肥陽S:CAS登記號：7365-45-9 (：化抓〇48 1-贓嗦乙橫酸，4- (2-徑乙基）- 肥陽S是設(shè)計(jì)為在約6至約8(例如6. 15 -8. 35)的生理學(xué)抑范圍內(nèi)緩沖的兩性離子緩 沖液，并且更具體而言更有用的約6. 8至約8. 2的范圍，并且如在本發(fā)明中，約7至約8或7 至8,且優(yōu)選約7至小于8。肥陽S通常為白色結(jié)晶粉末且具