一種側(cè)柏葉總黃酮微膠囊的制備方法及其應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于微膠囊制備技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種側(cè)柏葉總黃酮微膠囊的制備方法 及其應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 黃酮類化合物是廣泛存在于植物體內(nèi)的次生代謝物質(zhì)，是藥用植物中主要活性成 分之一，其結(jié)構(gòu)類型的多樣性和生物活性的廣譜性，近年來(lái)一直是國(guó)內(nèi)外研宄開(kāi)發(fā)的熱點(diǎn)。 已有的研宄表明其具有顯著的抗氧化、清除人體自由基、抗衰老、抗突變、降血脂、降血壓等 藥用保健功能，且由于高效、安全，還可用作食品、化妝品的天然添加劑，具有廣闊的開(kāi)發(fā)前 景。
[0003]目前，對(duì)側(cè)柏葉總黃酮的藥理研宄主要集中在抗氧化作用、消炎作用、抗癌和抗基 因誘變作用，以及止血、鎮(zhèn)咳、平喘祛痰、鎮(zhèn)靜作用，對(duì)其降血壓、降血脂功能鮮少提及。由于 黃酮含有酚羥基，化學(xué)反應(yīng)性較強(qiáng)，其穩(wěn)定性容易受到多種理化因素的影響，光和熱可促使 其氧化分解，從而失去抗氧化活性及其他生物學(xué)功能，使之在貯存和應(yīng)用中受到很大的限 制，而微膠囊技術(shù)則是解決這一問(wèn)題的有效途徑。
[0004] 現(xiàn)有的微膠囊常用方法已多達(dá)200多種，然而這些方法各有優(yōu)缺點(diǎn)，考慮到側(cè)柏 葉總黃酮的特性，很少有能達(dá)到其要求的合適的制備技術(shù)。其中乳化噴霧干燥的應(yīng)用最為 廣泛，占目前市場(chǎng)的90%，但是此法制備的微膠囊包埋率不高且回收率低，高溫干燥使得側(cè) 柏葉總黃酮的某些有效成分被破壞，從而造成產(chǎn)品的生物活性變低。復(fù)凝聚法則是近年來(lái) 研宄較熱的一種技術(shù)，是一種非常有前景的特殊的微膠囊化技術(shù)，該技術(shù)工藝簡(jiǎn)單，操作安 全易控制，形成的壁膜致密，釋放性能優(yōu)良。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明的目的在于提供一種側(cè)柏葉總黃酮微膠囊的制備方法及其應(yīng)用，該微膠囊 具有非常顯著的降血壓、降血脂的作用。
[0006] 為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用如下技術(shù)方案，具體內(nèi)容包括：側(cè)柏葉總黃酮微膠囊 的制備以及其降血壓、降血脂作用的研宄。
[0007] 1.-種側(cè)柏葉總黃酮的制備方法，包括以下步驟： (1) 用水配制質(zhì)量百分比濃度為10~20%的麥芽糊精和大豆分離蛋白的混合水溶液A， 備用； (2) 用水配制質(zhì)量百分比濃度為5~10%的阿拉伯膠水溶液B，備用； (3) 在混合水溶液A中，按質(zhì)量百分比，加入麥芽糊精與大豆分離蛋白量的10~20%的 用乙醇溶解的側(cè)柏葉總黃酮和2~3%的乳化劑蔗糖酯，均質(zhì)后得乳狀液C; (4) 在乳狀液C中加入B，攪拌，用醋酸調(diào)節(jié)pH至4. 0,反應(yīng)得濕膠囊； (5) 將得到的濕膠囊置于0~5°C冷卻24h后，置于真空冷凍干燥機(jī)中干燥后即得到粉末 狀的側(cè)柏葉總黃酮微膠囊。
[0008] 步驟（1)中所述的麥芽糊精和大豆分離蛋白的質(zhì)量比1:1~2。
[0009] 步驟（3)中所述的高壓均質(zhì)的條件為轉(zhuǎn)速6000~10000r/min，均質(zhì)時(shí)間5min，溫度 為 50~60°C。
[0010] 2.偵啪葉總黃酮微膠囊降血壓、降血脂作用的研宄。
[0011] 2. 1對(duì)大鼠降血壓作用的研宄 將10~13周齡自發(fā)性高血壓大鼠（SHR)按血壓分成4組，每組10只，具體給藥劑量見(jiàn) 表1，經(jīng)口給藥7天后尾動(dòng)脈測(cè)壓。
[0012] 統(tǒng)計(jì)分析：計(jì)量資料用平均值土標(biāo)準(zhǔn)差（X土s)表示，兩組間數(shù)據(jù)比較采用組間t 檢驗(yàn)。以P<0.05為顯著性標(biāo)準(zhǔn)。結(jié)果如表1: 表1側(cè)柏葉總黃酮微膠囊連續(xù)給藥對(duì)SHR大鼠血壓的影響
與模型對(duì)照組比較aP< 0. 05。
[0013] 結(jié)果顯示，側(cè)柏葉總黃酮微膠囊低、中、高劑量組均可有效地降低SHR大鼠血壓， 且呈一定的劑量依賴性。
[0014] 2. 2對(duì)大鼠降血脂作用的研宄 2. 2. 1實(shí)驗(yàn)材料 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：Wistar大鼠，體重170~190g，50只，雄性； 藥物：本發(fā)明藥物膠囊 試劑儀器：全自動(dòng)生化分析儀，總膽固醇（TC)、甘油三酯（TG)和高密度脂蛋白膽固醇 (HDL-C)試劑盒由中生北控制生物科技股份有限公司生產(chǎn)，F(xiàn)A1604分析天平。
[0015] 高脂飼料：79%普通基礎(chǔ)飼料，10%蛋黃粉，10%豬油，1%膽固醇。
[0016] 2.2.2實(shí)驗(yàn)方法 以基礎(chǔ)飼料喂養(yǎng)大鼠，觀察5d，內(nèi)疵靜脈叢取血，酶法測(cè)定TC、TG、HDL-C。根據(jù)TC水平 將動(dòng)物隨機(jī)分為5組，普通對(duì)照組、高脂模型組和側(cè)柏葉總黃酮高（500mg/kg)、中（300mg/ kg)、低劑量組（100mg/kg)。每組10只，除普通對(duì)照組給予普通基礎(chǔ)飼料外，其余各組均給 予高脂飼料。各組均自由飲食連續(xù)喂養(yǎng)30d。
[0017] 喂養(yǎng)環(huán)境：室溫18~21°C，相對(duì)濕度48%~64%，墊料經(jīng)高壓滅菌，每周換窩兩次，自 由飲用飲用水，籠具、水瓶每周高壓滅菌一次。
[0018] 隔日記錄進(jìn)食量，每周稱量體重，5組大鼠飼養(yǎng)30d，最后一次灌胃后，禁食6h，內(nèi) 疵靜脈叢取血，酶法測(cè)定TC、TG、HDL-C。
[0019] 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)用SPSS統(tǒng)計(jì)軟件方差分析進(jìn)行處理。
[0020] 2.2.3實(shí)驗(yàn)結(jié)果 實(shí)驗(yàn)前后各組大鼠平均攝食量及體重變化，如表2 ;側(cè)柏葉總黃酮微膠囊對(duì)大鼠血清TC、TG、HDL-C的影響如表3 : 表2各組大鼠平均攝食量及體重變化（X土s，n=10)
注：與高脂模型組比較，P< 0. 05。
[0021] 結(jié)果表明，普通對(duì)照組和側(cè)柏葉總黃酮微膠囊低、中、高劑量組與高脂模型組比 較，各組在第四周時(shí)大鼠體重明顯低于高脂模型組，差異顯著（P< 0. 05)。各組攝食量差異 無(wú)顯著性（P> 0. 05)，說(shuō)明本發(fā)明藥物膠囊不影響小鼠的食欲及生長(zhǎng)。
結(jié)果表明，高脂模型組大鼠血清TC和TG二項(xiàng)指標(biāo)較普通對(duì)照組顯著升高（P< 0. 01)， 說(shuō)明大鼠高脂模型的建立比較成功。側(cè)柏葉總黃酮微膠囊高劑量組的血清TC、TG比高脂模 型組明顯降低，比普通對(duì)照組高，但無(wú)明顯差異。HDL-C值顯著高于高脂模型組（P< 0.05)。 這些結(jié)果說(shuō)明側(cè)柏葉總黃酮微膠囊能夠降低大鼠血清中的TC、TG水平，同時(shí)升高HDL-C水 平，具有一定劑量的依賴性，說(shuō)明側(cè)柏葉總黃酮微膠囊具有很好的降脂效果。
[0023] 本發(fā)明的有益效果在于：將側(cè)柏葉總黃酮包埋在高分子囊材中，該產(chǎn)品性能穩(wěn)定， 易保存，易攜帶；工藝簡(jiǎn)單、成本低，符合環(huán)保和使用要求；保質(zhì)期長(zhǎng)，可廣泛用于降血壓、 降血脂等病癥的治療和預(yù)防。
[0024] 下面將結(jié)合【具體實(shí)施方式】進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明，但本發(fā)明要求保護(hù)的范圍并不局限 于下列實(shí)施方式。
[0025]
【具體實(shí)施方式】： 實(shí)施例1 : 用水配制質(zhì)量百分比濃度為10%的麥芽糊精和大豆分離蛋白（質(zhì)量比1:1)的混合水溶 液A，備用；用水配制質(zhì)量百分比濃度為10%的阿拉伯膠水溶液B，備用；在混合水溶液A中， 按質(zhì)量百分比，加入麥芽糊精與大豆分離蛋白量的10%的用乙醇溶解的側(cè)柏葉總黃酮和2% 的乳化劑鹿糖醋，于轉(zhuǎn)速6000r/min、均質(zhì)時(shí)間5min、溫度為50°C的條件下均質(zhì)后得乳狀液 C;在乳狀液C中加入B，攪拌，用醋酸調(diào)節(jié)pH至4. 0,反應(yīng)得濕膠囊；將得到的濕膠囊置于 5°C冷卻24h后，置于真空冷凍干燥機(jī)中干燥后即得到粉末狀的側(cè)柏葉總黃酮微膠囊，包埋 率為94. 8%。
[0026] 包埋率是指微膠囊產(chǎn)品中被包埋的側(cè)柏葉總黃酮含量與包埋時(shí)側(cè)柏葉總黃酮的 總量之比。包埋率越高則芯材被包埋的量越大，效果越好，產(chǎn)品的穩(wěn)定性就越好。
[0027] 包埋率=(1 一產(chǎn)品表面總黃酮的含量/總黃酮的總量）X100% 產(chǎn)品表面?zhèn)劝厝~總黃酮的含量測(cè)定：準(zhǔn)確稱取Ig微膠囊產(chǎn)品，加入無(wú)水乙醇，充分振 蕩、洗滌后，定容至50mL，過(guò)濾，取濾液按2010版藥典中總黃酮含量測(cè)定方法進(jìn)行測(cè)定。
[0028] 微膠囊產(chǎn)品總黃酮含量的測(cè)定：準(zhǔn)確稱取Ig產(chǎn)品，加適量蒸餾水完全溶解后，加 入無(wú)水乙醇，充分振蕩?kù)o置，過(guò)濾，取濾液測(cè)定總黃酮含量。
[0029] 實(shí)施例2 : 用水配制質(zhì)量百分比濃度為20%的麥芽糊精和大豆分離蛋白（質(zhì)量比1:2)的混合水溶 液A，備用；用水配制質(zhì)量百分比濃度為10%的阿拉伯膠水溶液B，備用；在混合水溶液A中， 按質(zhì)量百分比，加入麥芽糊精與大豆分離蛋白量的15%的用乙醇溶解的側(cè)柏葉總黃酮和3% 的乳化劑鹿糖醋，于轉(zhuǎn)速l〇〇〇〇r/min、均質(zhì)時(shí)間5min、溫度為55°C的條件下均質(zhì)后得乳狀 液C;在乳狀液C中加入B，攪拌，用醋酸調(diào)節(jié)pH至4. 0,反應(yīng)得濕膠囊；將得到的濕膠囊置 于0°C冷卻24h后，置于真空冷凍干燥機(jī)中干燥后即得到粉末狀的側(cè)柏葉總黃酮微膠囊，包 埋率為97. 1%。
[0030] 實(shí)施例3 : 用水配制質(zhì)量百分比濃度為15%的麥芽糊精和大豆分離蛋白（質(zhì)量比1:1.5)的混合 水溶液A，備用；用水配制質(zhì)量百分比濃度為8%的阿拉伯膠水溶液B，備用；在混合水溶液 A中，按質(zhì)量百分比，加入麥芽糊精與大豆分離蛋白量的20%的用乙醇溶解的側(cè)柏葉總黃酮 和2. 5%的乳化劑鹿糖醋，于轉(zhuǎn)速8000r/min、均質(zhì)時(shí)間5min、溫度為60°C的條件下均質(zhì)后得 乳狀液C;在乳狀液C中加入B，攪拌，用醋酸調(diào)節(jié)pH至4. 0,反應(yīng)得濕膠囊；將得到的濕膠 囊置于3°C冷卻24h后，置于真空冷凍干燥機(jī)中干燥后即得到粉末狀的側(cè)柏葉總黃酮微膠 囊，包埋率為90. 5%。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種側(cè)柏葉總黃酮微膠囊的制備方法，其特征在于，包括以下步驟： (1) 用水配制質(zhì)量百分比濃度為10~20%的麥芽糊精和大豆分離蛋白的混合水溶液A， 備用； (2) 用水配制質(zhì)量百分比濃度為5~10%的阿拉伯膠水溶液B，備用； (3) 在混合水溶液A中，按質(zhì)量百分比，加入麥芽糊精與大豆分離蛋白量的10~20%的 用乙醇溶解的側(cè)柏葉總黃酮和2~3%的乳化劑蔗糖酯，均質(zhì)后得乳狀液C; (4) 在乳狀液C中加入B，攪拌，用醋酸調(diào)節(jié)pH至4. 0,反應(yīng)得濕膠囊； (5) 將得到的濕膠囊置于0~5°C冷卻24h后，置于真空冷凍干燥機(jī)中干燥后即得到粉末 狀的側(cè)柏葉總黃酮微膠囊。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種側(cè)柏葉總黃酮微膠囊的制備方法，其特征在于，步驟（1) 中所述的麥芽糊精和大豆分離蛋白的質(zhì)量比1:1~2。3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種側(cè)柏葉總黃酮微膠囊的制備方法，其特征在于，步驟（3) 中所述的高壓均質(zhì)的條件為轉(zhuǎn)速6000~10000r/min，均質(zhì)時(shí)間5min，溫度為50~60°C。4. 根據(jù)權(quán)利要求1~3所述的制備方法制得的側(cè)柏葉總黃酮微膠囊在制備降血壓、降血 脂藥物中的應(yīng)用。
【專利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了一種側(cè)柏葉總黃酮微膠囊的制備方法及其應(yīng)用。所述微膠囊的制備方法包括如下步驟：用水配制麥芽糊精和大豆分離蛋白的混合水溶液A，備用；用水配制阿拉伯膠水溶液B，備用；在混合水溶液A中加入用乙醇溶解的側(cè)柏葉總黃酮和乳化劑蔗糖酯，均質(zhì)得乳狀液C；在乳狀液C中加入阿拉伯膠水溶液，攪拌，調(diào)pH至4.0，反應(yīng)得濕膠囊；冷凍干燥得側(cè)柏葉總黃酮微膠囊。本發(fā)明所得的微膠囊，具有生物活性穩(wěn)定、溶解性好、使用方便等優(yōu)點(diǎn)，經(jīng)過(guò)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)其具有良好的降血壓、降血脂的作用，可廣泛用于制備降血壓、降血脂的藥品中。
【IPC分類】A61K36/14, A61P3/06, A61K9/50, A61K47/42, A61P9/12, A61K47/36
【公開(kāi)號(hào)】CN104906151
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510270080
【發(fā)明人】劉東鋒, 楊成東
【申請(qǐng)人】南京澤朗醫(yī)藥科技有限公司
【公開(kāi)日】2015年9月16日
【申請(qǐng)日】2015年5月26日