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【發(fā)明內(nèi)容】

[0030] 本發(fā)明的目的在于確定丹參酮II A在治療肌腱粘連中的作用，進(jìn)而提供丹參酮 II A在制備治療肌腱粘連的藥物中的應(yīng)用。
[0031] 本發(fā)明的目的通過(guò)下述技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)：
[0032] 本發(fā)明制作跟腱粘連大鼠模型后，對(duì)其進(jìn)行跟腱局部注射丹參酮II A磺酸鈉（丹 參組），通過(guò)與空白組對(duì)照比較跟腱粘連情況，行組織學(xué)觀察及統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。結(jié)果表明，大體 觀察中丹參組比空白組跟腱粘連少，P〈〇. 05,有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；組織學(xué)觀察中丹參組的膠原纖 維及成纖維細(xì)胞數(shù)量較正常跟腱組織增加，排列相對(duì)規(guī)則，空白組的膠原纖維及成纖維細(xì) 胞數(shù)量明顯增加，排列不規(guī)則。這些結(jié)果表明丹參酮II A具有抑制肌腱粘連的發(fā)生及其進(jìn) 展的作用。進(jìn)一步通過(guò)Real-time PCR發(fā)現(xiàn)丹參組相對(duì)于空白組TGF-M的表達(dá)情況顯著 降低，表明丹參酮II A減少細(xì)胞膠原mRNA表達(dá)的作用是通過(guò)抑制TGF- β 1表達(dá)實(shí)現(xiàn)的，丹 參酮II A減少肌腱粘連的細(xì)胞因子機(jī)制是抑制TGF-β 1的表達(dá)。
[0033] 基于丹參酮II A抑制肌腱粘連的發(fā)生及其進(jìn)展的作用，丹參酮II A或丹參酮II A 磺酸鈉可用于制備治療肌腱粘連的藥物。
[0034] 一種治療肌腱粘連的藥物，包含丹參酮II A或丹參酮II A磺酸鈉。
[0035] 本發(fā)明發(fā)現(xiàn)了丹參酮II A對(duì)跟腱粘連模型大鼠具有減少粘連發(fā)生的作用，其可用 于制備治療肌腱粘連的藥物，從而給臨床防治肌腱粘連帶來(lái)新的思路。
【附圖說(shuō)明】
[0036] 圖1是丹參組SD大鼠跟腱HE染色圖（100X)，膠原纖維及成纖維細(xì)胞數(shù)量增多， 可見(jiàn)粗大膠原，排列相對(duì)規(guī)則，與縱軸平行，中間可見(jiàn)少量疤痕組織。
[0037] 圖2是丹參組SD大鼠跟腱Masson三色染色圖（400X)，可見(jiàn)膠原結(jié)構(gòu)相對(duì)規(guī)則， 粗細(xì)均一，與縱軸平行排列。
[0038] 圖3是空白組SD大鼠跟腱HE染色圖（100X)，可見(jiàn)中央大量粗大纖維疤痕結(jié)構(gòu)， 周?chē)z原纖維排列紊亂。
[0039] 圖4是空白組SD大鼠跟腱Masson三色染色圖（400X)，可見(jiàn)膠原結(jié)構(gòu)紊亂，粗細(xì) 不均，無(wú)規(guī)則排列。
[0040] 圖5是Real-time PCR檢測(cè)丹參酮II A對(duì)TGF- β 1表達(dá)的影響結(jié)果圖。
【具體實(shí)施方式】
[0041] 以下實(shí)施例用于進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明，但不應(yīng)理解為對(duì)本發(fā)明的限制。若未特別指 明，實(shí)施例中所用的技術(shù)手段為本領(lǐng)域技術(shù)人員所熟知的常規(guī)手段。
[0042] 實(shí)施例1跟腱粘連大鼠模型的制作
[0043] 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：SD大鼠，雄性，350g左右，SPF級(jí)，由浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提 供。
[0044] 跟腱粘連大鼠模型的制作：腹腔注射苯巴比妥（4%苯巴比妥，40mg/kg)麻醉大 鼠，右后腿跟骨上〇· 15cm切口，長(zhǎng)約2cm，用改良的Rothkopf和Perterson實(shí)驗(yàn)性損傷法： 取長(zhǎng)約0. 5cm長(zhǎng)的跟腱，剝離腱鞘，用Kocher鉗由遠(yuǎn)端向近端鉗夾10次，每次將鉗扣到底， 持續(xù)1秒后松開(kāi)，然后用尖刀縱向貫穿肌腱切割三刀，造成擠壓挫裂切割傷，局部加壓止血 后縫合傷口，無(wú)菌包扎，右下肢用直徑〇. 8mm克氏針固定膝關(guān)節(jié)屈曲度踝關(guān)節(jié)跖屈度足趾 自然位，回籠飼養(yǎng)。術(shù)后連續(xù)肌注青霉素（8萬(wàn)U/kg，q/d)3d，預(yù)防感染。
[0045] 實(shí)施例2丹參酮IIA防治大鼠跟腱粘連作用的觀察
[0046] 取實(shí)施例1造模后的SD大鼠64只，分為丹參組和空白組，丹參組處理為造模后 即刻跟腱局部注射丹參酮IIA磺酸鈉注射液（商品名：諾新康2mL/支，上海第一生化藥 廠）0. 5mL，注射一次；空白組處理為注射0. 5mL生理鹽水，操作步驟同上。6周后處死，期間 對(duì)大鼠進(jìn)行一般觀察，處死后進(jìn)行大體觀察和組織學(xué)觀察。
[0047] (1) -般觀察：對(duì)大鼠的精神狀態(tài)、活動(dòng)度、皮毛、體重、跟腱創(chuàng)面愈合情況等進(jìn)行 動(dòng)態(tài)觀測(cè)。丹參組和空白組大鼠均存活，創(chuàng)口一期愈合，無(wú)感染及后肢廢用等情況發(fā)生。
[0048] (2)大體觀察：SD大鼠處死后切開(kāi)術(shù)區(qū)皮膚及皮下組織，分別暴露肌腱縫合處組 織、腱鞘及肌腱，觀察肌腱斷端的炎性反應(yīng)，肉芽增生及肌腱愈合及粘連情況。評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)為： I級(jí)，肌腱周?chē)鸁o(wú)粘連；II級(jí)，肌腱縫合處有少量局限性，薄膜樣粘連，肌腱滑動(dòng)稍受限；III 級(jí)，小塊帶狀疏松粘連，和肌腱表面易分離，肌腱滑動(dòng)部分受限；IV級(jí)，較大面積的中等致密 粘連，有一定移動(dòng)性，肌腱滑動(dòng)明顯受限；V級(jí)，大面積的致密粘連，肌腱與鞘管、皮下廣泛 粘連，滑動(dòng)性極差。
[0049] 大體觀察肌腱愈合情況以I級(jí)、II級(jí)為優(yōu)，III級(jí)為良，IV級(jí)、V級(jí)為差。結(jié)果見(jiàn)下表 1，兩組采用SPSSlI. 0作兩個(gè)獨(dú)立樣本Mann-Whitney秩和檢驗(yàn)，結(jié)果見(jiàn)下表，P〈0. 05,有統(tǒng) 計(jì)學(xué)差異。
[0050]表 1
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 丹參酮IIA磺酸鈉在制備治療肌腱粘連的藥物中的應(yīng)用。
2. 丹參酮IIA在制備治療肌腱粘連的藥物中的應(yīng)用。
3. -種治療肌腱粘連的藥物，其特征在于：包含丹參酮IIA磺酸鈉。
4. 一種治療肌腱粘連的藥物，其特征在于：包含丹參酮IIA。
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了一種丹參酮ⅡA在制備治療肌腱粘連的藥物中的應(yīng)用，屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域。通過(guò)制作跟腱粘連大鼠模型后，對(duì)其進(jìn)行跟腱局部注射丹參酮ⅡA磺酸鈉，通過(guò)與空白組對(duì)照比較跟腱粘連情況，行組織學(xué)觀察及統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。結(jié)果表明，大體觀察中丹參組比空白組跟腱粘連少，P<0.05，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；組織學(xué)觀察中丹參組的膠原纖維及成纖維細(xì)胞數(shù)量較正常跟腱組織增加，排列相對(duì)規(guī)則，空白組的膠原纖維及成纖維細(xì)胞數(shù)量明顯增加，排列不規(guī)則；通過(guò)Real-time PCR發(fā)現(xiàn)丹參組相對(duì)于空白組TGF-β1的表達(dá)情況顯著降低。這些結(jié)果表明丹參酮ⅡA具有抑制肌腱粘連的發(fā)生及其進(jìn)展的作用，其可用于制備治療肌腱粘連的藥物。
【IPC分類(lèi)】A61K31-58, A61P41-00
【公開(kāi)號(hào)】CN104840473
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510238176
【發(fā)明人】盧薈, 沈向前, 楊虎, 沈輝, 陳強(qiáng), 吳守成
【申請(qǐng)人】浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬第一醫(yī)院
【公開(kāi)日】2015年8月19日
【申請(qǐng)日】2015年5月11日